一種治療虛證的藥物及其製備方法和用途的製作方法

2023-05-10 22:53:16

專利名稱：一種治療虛證的藥物及其製備方法和用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物及其製備方法和用途，具體來說涉及一種以中藥材為主要原料製備的用於治療虛症的中成藥。
背景技術：
中醫理論認為，氣血是構成人體的基本物質，是臟腑等組織器官進行生理活動的物質基礎，肝、腎兩髒與氣血的關係尤為密切。人體氣中之元氣為生命的源動力，其組成是以腎所藏精氣為主；血主要由營氣和津液組成，血藏於肝，其充盛又有賴腎的精氣充盈，即所謂「精血同源」。可見氣血與肝、腎兩髒是密切聯繫、相互影響的。中醫理論還認為，氣血是互相影響、相互化生的。氣屬陽，陽生則陰長，故氣能生血，氣虛則血無以生遂致血虛；血為氣母，氣賴血以附載而行，血虛而氣無以附遂致氣虛。血行脈中還賴氣的推動，氣虛而氣運乏力則可致血流停滯、脈絡不通而成瘀血證。
氣血兩虛、肝腎不足及瘀血證均為臨床常見病證，可見於多種疾病過程中。其病因或由先天稟賦不足，或由後天失養，或由久病耗傷，或由勞倦過度等。腎虛可致免疫功能低下而體虛；腫瘤患者放療、化療耗傷正氣必致正氣虛弱，血無以生而氣血兩虛，表現為白細胞或粒細胞減少；腎精虧虛、陽虛血熱、灼津耗液可致消渴病，兼脈絡不通、瘀血為患可並發周圍神經炎的諸多臨床表現；氣血不足又可致臟腑功能失調、脾運受損，精化為濁而成疾濁瘀脂，滯留體內則見高血脂症。故氣血兩虛、肝腎不足、脈絡不通等證常見於老年體虛、免疫功能低下、腫瘤患者放療或化療後白細胞或粒細胞減少、糖尿病並發周圍神經炎、高脂血症等多種疾病的過程中。
目前國內治療虛證及虛證所致的各種病症的藥品不多，而療效確切、針對性較強的製劑更為罕見。如中國專利94119239.3介紹了一種治療氣虛的中藥，由黃芪、黨參、大棗、甘草加水煎制而成，用於治療氣虛、血虛或氣血兩虛的症狀，但沒有活血化瘀的功能和治療高血脂症、糖尿病並發周圍神經炎等作用；衛生部藥品標準中藥成方製劑第10冊7頁收載的大補元煎丸由當歸、黨參、杜仲、甘草、枸杞子、山藥、山茱萸、熟地黃等藥味製成，具有益氣養血、滋補肝腎的功能，用於肝腎不足、氣血兩虧、精神疲憊、心悸健忘、頭暈目眩、四肢酸軟等症，但無活血化瘀的功能和治療高血脂症、糖尿病並發周圍神經炎、老年體虛等病症的作用；衛生部藥品標準中藥成方製劑第14冊76頁收載的靈芝益壽膠囊由丹參、黃芪、靈芝、人參、三七、桑寄生、五味子、淫羊霍、制何首烏等藥味製成，具有補氣固本、滋補肝腎、活血化瘀的功能，用於神疲倦怠、自汗氣短、失眠多夢、胸痛胸悶、頭暈目眩、腰膝酸軟、脈細無力和結代等症的輔助治療，但益氣養血功能不足，對高脂血症、放化療後白細胞或粒細胞減少等病症的療效不佳，且方中含有人參、靈芝等較貴重的藥材，成本較高。

發明內容
本發明的目的即是針對氣血兩虛、肝腎不足及瘀證的病因和病機特點確立的益氣養血、滋肝補腎、活血化瘀的治療法則製成的一種治療虛證的藥物。本發明的藥物中含有制何首烏、丹參、川芎、枸杞子、海龍、蘄蛇等中藥原料，其中制何首烏補肝腎、益精血、烏鬚髮、強筋骨，丹參祛瘀活血、益氣養血，川芎活血行氣，可助丹參補血調血之功，枸杞子滋肝補腎益精，可助何首烏補肝腎、益精氣之力，海龍、蘄蛇均為血肉有情之品，既可養血填精，又具通絡之力，能使藥達病所。所以這些藥物進行組合可以使得各自的功效產生協同作用，從而產生出乎意料的治療虛證的效果。
本發明藥物中還可以含有黨參、黃芪、杜仲、蛤蚧、當歸中的一種或一種以上的中藥原料。這是因為黨參益氣健脾養血，黃芪益氣生血，可助黨參補氣養血之功，杜仲補肝腎、強筋骨，蛤蚧補肺益腎、助陽益精，可助何首烏補肝腎、益精氣之力，當歸補氣活血，可助丹參補血調血之功，從而使本發明的藥物產生更為良好的療效。
本發明藥物組分的中藥原料用量也是經過發明人的大量摸索總結、反覆研究驗證而得出的，各組分的用量在下述重量份比例的範圍內都具有較好的療效制何首烏50～250份，丹參120～600份，川芎30～150份，枸杞子50～250份，海龍12～60份，蘄蛇60～300份。
本發明藥物組分的中藥原料的用量還可以是制何首烏50～250份，丹參120～600份，川芎30～150份，枸杞子50～250份，海龍12～60份，蘄蛇60～300份，再另外加上黨參30～150份、黃芪25～120份、杜仲12～60份、蛤蚧5～25份，當歸60～300份中的一種中藥原料或一種以上的中藥原料組合。
本發明藥物特別可以採用的各組分中藥原料的重量比例為制何首烏120～130份，丹參300～320份，川芎75～80份，枸杞子120～130份，海龍35～40份，蘄蛇160～170份，還可以再另外加上黨參70～80份、黃芪60～65份、杜仲30～35份、蛤蚧12～14份，當歸150～160份中的一種中藥原料或一種以上的中藥原料組合。
本發明藥物可以加入製備不同劑型時所需的各種常規輔料，如崩解劑、潤滑劑、粘合劑、助溶劑等，並以常規傳統的中藥製劑方法製備成任何一種常用劑型。例如可以將各組分中藥原料直接粉碎後製成散劑；也可以將這些原料藥用水或用乙醇提取，再合併提取液，經過濾、濃縮，另外加入不同固體製劑所需的不同輔料，並進行相應的處理後，即可製成顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑、散劑、滴丸等不同形式的固體製劑也可以將所有這些原料藥用水或用乙醇提取，經過濾、濃縮，再加入製備不同液體製劑所需的不同輔料，並進行相應的處理後，即可製成合劑、糖漿劑、注射劑、乳劑等不同形式的液體製劑；也可以將這些原料藥用不同濃度的蒸餾酒進行提取製成酒劑。
為了保證採用不同的製備手段製得的本發明藥物能有更好的質量，本發明在製備過程中採用了與現有技術不同的多種方法對製劑進行檢驗控制，並經過反覆摸索和篩選，確定了鑑別檢查的提取方法、提取溶劑、薄層板、展開劑、顯色劑和含量測定的色譜柱填充劑、流動相、檢測波長、供試品溶液的製備方法、含量限度等各項檢測條件和參數。這些方法包括1.對本發明藥物中所含的制何首烏、枸杞子、黨參、黃芪進行鑑別檢查(1)制何首烏的鑑別取該藥物的製劑適量(約相當於含制何首烏0.5～3g，其中固體製劑需研細)，加1～5mol/L硫酸或鹽酸溶液20～100ml，加入氯仿20～100ml，加熱回流0.5～2小時，放冷，分取氯仿層，蒸乾，殘渣加氯仿1～4ml使溶解，作為供試品溶液；取何首烏對照藥材0.2～1.5g，加入上述酸液和氯仿，同法製成對照藥材溶液；另取大黃素對照品，加氯仿製成每1ml含0.5～2mg的對照品溶液；照中國藥典的方法檢測，採用以羧甲酸纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15∶2∶1)或石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，顯色劑為氨蒸汽，日光下檢視。
(2)枸杞子的鑑別取該藥物的製劑適量(約相當於含枸杞子0.5～4g，其中固體製劑需研細後加水20～100ml)，用醋酸乙酯提取1～3次，每次10～60ml，提取液合併，水浴上濃縮至1～3ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.3～1.5g，加水20～100ml，煮沸後保持微沸10～60分鐘，濾過，濾液同法製成對照藥材溶液；照中國藥典的方法檢測，採用矽膠G薄層板，以醋酸乙酯-氯仿-甲酸(3∶2∶1)或氯仿-醋酸乙酯-苯-甲酸(5∶6∶3∶1)為展開劑，紫外燈(365nm)下顯色。
(3)黨參的鑑別取該藥物的製劑適量(約相當於含黨參0.5～3g，其中固體製劑需研細，液體製劑需水浴至幹)，加無水乙醇20～100ml超聲提取10～60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水10～80ml使溶解，濾過，濾液用乙酸乙酯20～100ml提取，取水層加鹽酸1～4ml，加熱回流10～60分鐘，放冷，用氯仿振搖提取1～3次，每次15～60ml，合併氯仿液，蒸乾，殘渣加甲醇0.5～3ml使溶解，作為供試品溶液；另取黨參對照藥材0.5～3g，加水20～100ml煮沸並保持微沸10～60分鐘，濾過，濾液加鹽酸1～4ml，同法製成對照藥材溶液；照中國藥典的方法檢測，採用矽膠G薄層板，以苯-醋酸乙酯-甲酸(12∶4∶0.6)或甲苯-醋酸乙酯-甲酸(15∶5∶2)為展開劑，以10％硫酸乙醇溶液為顯色劑，105℃烘至斑點顯色清晰。
(4)黃芪的鑑別取該藥物的製劑適量(約相當於含黃芪0.3～2g，其中固體製劑需研細後加20～100ml甲醇超聲提取10～60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水20～100ml使溶解)，通過已處理好的D101型大孔樹脂柱，先後用0.2％～1.0％的氫氧化鈉溶液20～100ml、足量的水、 10％～30％乙醇20～80ml洗脫並棄去洗脫液，最後用50％～85％的乙醇20～100ml洗脫，洗脫液蒸乾，殘渣加乙醇0.5～3ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含0.5～3mg的對照溶液；照中國藥典的方法檢測，採用矽膠G薄層板，以氯仿-甲醇(4∶1)或氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，顯色劑為10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。
2.對本發明藥物中的丹參素或丹參素鈉含量進行測定照中國藥典的高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-0.5％醋酸(5∶95)或乙腈-水-醋酸(5∶160∶1)為流動相；檢測波長為270～290nm；理論板數按丹參素或丹參素鈉峰計算應不低於3000；對照品溶液的製備精密稱取丹參素或丹參素鈉對照品10mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含丹參素或丹參素鈉0.1mg)；供試品溶液的製備取該藥物的製劑適量(約相當於含丹參0.1～0.6g，其中固體製劑研細，置具塞錐形瓶中；液體製劑置具塞錐形瓶中水浴揮發至幹)，精密加入甲醇10～50ml，稱定重量，超聲處理10～60分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，濾過，濾液離心，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；測得製劑中所含丹參素鈉的含量不得少於所含丹參量的0.60％。
在現有技術中，很多含丹參的製劑在測定含量時都是採用測定原兒茶醛的方法。但原兒茶醛並不是丹參的專屬性成分，因而本發明藥物在製備過程中採用測定丹參中所含有的丹參素或丹參素鈉的方法，這樣可以更好地控制製劑的質量，從而使本發明藥物能有更好的療效。
本發明藥物具有益氣養血、滋補肝腎、活血化瘀和增強免疫功能、增強體力、升白、抗炎、降脂、提高網狀內皮系統吞噬作用等功能，能改善氣血兩虛、肝腎不足、血瘀所致中醫虛證的各種症狀，對免疫功能低下、糖尿病並發周圍神經炎、高脂血症、老年及老年前期體虛、病後體虛、放化療後白細胞或粒細胞減少以及慢性疲勞症候群、腫瘤、冠心病、橋本氏甲狀腺炎、骨折並發骨不連、黃褐斑等都有較好的治療和輔助治療作用。
具體實施例方式
下面通過具體實施方式
來進一步闡述本發明藥物的有益效果，這些具體實施方式
包含了本發明藥物的毒性試驗、藥效學試驗和臨床研究的結果。
毒性試驗將本發明藥物作為實驗樣品，分別給小鼠和大鼠進行灌服，測得小鼠的LD50＞50g生藥/kg，是臨床一日用量的212倍以上，對大鼠的LD50＞60g生藥/kg，是臨床一日用量的254倍以上，說明其毒性小，臨床服用極其安全。長期毒性試驗表明，大鼠每日灌服川黃口服液0.9、2.8、20g生藥/kg(相當於臨床一日用量的3.8、11.9、84.7倍)，9周後檢查其外觀、體重、血常規、血液生化、屍檢和臟器計數、組織病理等均無異常，與對照組比較無顯著性差異(P＜0.01或P＜0.05)，說明本發明藥物長期服用也是安全的。
主要藥效學試驗藥效學實驗證明，小鼠灌服本發明藥物後可明顯改善環磷醯胺造成的白細胞數降低的情況(P＜0.01)；能明顯提高小鼠的廓清指數(K)(P＜0.01)、吞噬指數(α)(P＜0.01或P＜0.05)和溶血值(P＜0.01)；對二甲苯所致小鼠耳腫脹有明顯的抑制作用(P＜0.01或P＜0.05)，能使Fround’s完全佐劑所引起的大鼠後足墊腫脹明顯消退，並有明顯的量效關係(P＜0.01)；對失血小鼠的血紅蛋白和紅細胞有明顯的增加作用(P＜0.01)；能有效防止小鼠皮下注射氫化可的松所致的體重下降及胸腺、腎上腺和脾臟的萎縮(P＜0.01)，明顯增加動物的遊泳時間並有量效關係(P＜0.01)；能使大鼠餵食高脂飼料及小鼠靜注四氧嘧啶所致的膽固醇、甘油三酯升高明顯下降(P＜0.01或P＜0.05)。這說明本發明藥物對化療等所造成的白細胞減少有拮抗作用，具有提高網狀內皮系統(RES)吞噬功能的作用，具有抗炎、降脂、增強體力以及增強免疫功能等作用。
臨床研究結果臨床研究結果證明，本發明藥物對老年及老年前期體虛、病後體虛的有效率為93.33％，各項中醫症狀明顯好轉(P＜0.01)，CD3+、CD4+、CD8+、補體C3等免疫指標明顯改善(P＜0.01或P＜0.05)；對放、化療後白細胞或粒細胞減少的有效率為93.33％(P＜0.01或P＜0.05)，中醫證候療效的有效率為90.00％(P＜0.01)；對高血脂症治療的有效率為92.00％，患者膽固醇、甘油三酯明顯降低，高密度脂蛋白明顯升高(均為P＜0.01)，中醫症狀明顯好轉(P＜0.01或P＜0.05)；對糖尿病並發周圍神經炎的總有效率為90.20％(P＜0.01)，各項中醫症狀明顯好轉(P＜0.01或P＜0.05)，西醫體徵及主要症狀也明顯改善(P＜0.01或P＜0.05)，空腹血糖明顯下降(P＜0.01)；對惡性腫瘤治療後各項症狀明顯改善甚至消失，總有效率為94.44％，白細胞計數明顯上升。本發明藥物對慢性疲勞症候群、冠心病、橋本氏甲狀腺炎、骨折並發骨不連、黃褐斑等與氣血兩虛、肝腎不足、血瘀有關的病症也有較好的治療作用。
以下通過實施例來進一步闡述本發明藥物及其製備方法。
實施例1本發明藥物的片劑製備取以下重量的中藥原料制何首烏85g，丹參210g，川芎50g，枸杞子85g，海龍24g，蘄蛇110g，其中制何首烏、丹參、川芎、枸杞子分別加10、8、6倍量水煎煮3次，各為1.5、1、0.5小時，合併煎液，濾過，濃縮至相對密度為1.20的清膏，加乙醇使含醇量達65％，靜置24小時，濾過，濾液備用；海龍、蘄蛇用60％的乙醇浸泡15天，濾過，濾液與上述濾液合併，減壓回收乙醇後離心，濃縮，加入輔料一步制粒或噴霧乾燥後加入輔料制粒，壓成1000片，每片0.5g，包衣，如下經過鑑別檢查、含量測定合格，即得(1)制何首烏的鑑別取該片劑10片，研細後加2.5mol/L硫酸溶液50ml，再加入氯仿40ml，加熱回流1小時，放冷，分取氯仿層，蒸乾，殘渣加氯仿2ml使溶解，作為供試品溶液；取何首烏對照藥材1g，加入上述相同的酸液和氯仿，同法製成對照藥材溶液；另取大黃素對照品，加氯仿製成每1ml含1mg的對照品溶液；照中國藥典的方法檢測，採用以羧甲酸纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15∶2∶1)為展開劑，顯色劑為氨蒸汽，日光下檢視。
(2)枸杞子的鑑別取該片劑12片，研細後加水40ml，用醋酸乙酯提取2次，每次40ml，提取液合併，水浴上濃縮至3ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材1g，加水60ml，煮沸後保持微沸20分鐘，濾過，濾液同法製成對照藥材溶液；照中國藥典的方法檢測，採用矽膠G薄層板，以醋酸乙酯-氯仿-甲酸(3∶2∶1)為展開劑，紫外燈(365nm)下顯色。
(3)含量測定
照中國藥典的高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-0.5％醋酸(5∶95)為流動相；檢測波長為280nm；理論板數按丹參素或丹參素鈉峰計算應不低於3000；對照品溶液的製備精密稱取丹參素或丹參素鈉對照品10mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含丹參素或丹參素鈉0.1mg)；供試品溶液的製備取該藥物的製劑研細，取0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，濾過，濾液離心，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；測得製劑中所含丹參素鈉的含量不得少於所含丹參量的0.60％。
實施例2本發明藥物的顆粒劑製備取以下重量的中藥原料制何首烏130g，丹參320g，川芎80g，枸杞子125g，海龍38g，蘄蛇170g，黨參75g，黃芪65g，杜仲32g，蛤蚧13g，當歸160g，其中制何首烏、丹參、川芎、枸杞子、杜仲、黨參、黃芪、當歸分別加10、8倍量水煎煮2次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液備用；海龍、蘄蛇、蛤蚧用70％的乙醇浸泡10天，濾過，減壓回收乙醇，與上述濾液合併，濃縮至相對密度1.16，加入輔料一步制粒，整粒，分裝成250袋，每袋4g，如下經過鑑別檢查、含量測定合格，即得(1)制何首烏的鑑別取該顆粒劑8g，研細後加3mol/L鹽酸溶液40ml，再加入氯仿40ml，加熱回流1小時，放冷，分取氯仿層，蒸乾，殘渣加氯仿2ml使溶解，作為供試品溶液；取何首烏對照藥材1g，加入上述相同的酸液和氯仿，同法製成對照藥材溶液；另取大黃素對照品，加氯仿製成每1ml含1mg的對照品溶液；照中國藥典的方法檢測，採用以羧甲酸纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，顯色劑為氨蒸汽，日光下檢視。
(2)枸杞子的鑑別取該顆粒劑10g，研細後加水40ml，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，提取液合併，水浴上濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.5g，加水50ml，煮沸後保持微沸30分鐘，濾過，濾液同法製成對照藥材溶液；照中國藥典的方法檢測，採用矽膠G薄層板，以氯仿-醋酸乙酯-苯-甲酸(5∶6∶3∶1)為展開劑，紫外燈(365nm)下顯色。
(3)黨參的鑑別取該顆粒劑12g，研細後加無水乙醇40ml超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水50ml使溶解，濾過，濾液用乙酸乙酯40ml提取，取水層加鹽酸2ml，加熱回流40分鐘，放冷，用氯仿振搖提取2次，每次20ml，合併氯仿液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取黨參對照藥材1g，加水40ml煮沸並保持微沸40分鐘，濾過，濾液加鹽酸2ml，同法製成對照藥材溶液；照中國藥典的方法檢測，採用矽膠G薄層板，以苯-醋酸乙酯-甲酸(12∶4∶0.6)為展開劑，以10％硫酸乙醇溶液為顯色劑，105℃烘至斑點顯色清晰。
(4)黃芪的鑑別取該顆粒劑12g，研細後加50ml甲醇超聲提取40分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水60ml使溶解，通過已處理好的D101型大孔樹脂柱，先後用0.5％的氫氧化鈉溶液60ml、足量的水、20％乙醇50ml洗脫並棄去洗脫液，最後用70％的乙醇50ml洗脫，洗脫液蒸乾，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的對照溶液；照中國藥典的方法檢測，採用矽膠G薄層板，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，顯色劑為10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。
(5)含量測定照中國藥典的高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；乙腈-水-醋酸(5∶160∶1)為流動相；檢測波長為285nm；理論板數按丹參素或丹參素鈉峰計算應不低於3000；對照品溶液的製備精密稱取丹參素或丹參素鈉對照品10mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含丹參素或丹參素鈉0.1mg)；供試品溶液的製備取該藥物的製劑研細，取0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，濾過，濾液離心，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；測得製劑中所含丹參素鈉的含量不得少於所含丹參量的0.60％。
實施例3本發明藥物的注射劑製備取以下重量的中藥原料制何首烏240g，丹參550g，川芎75g，枸杞子120g，海龍36g，蘄蛇100g，杜仲15g，當歸100g，其中制何首烏、丹參、川芎、枸杞子、杜仲、當歸分別加8、6倍量的注射用水各煎煮1.5、1小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.20，加乙醇使含醇量達60％，靜置24小時，濾過，濾液備用；海龍、蘄蛇用60％的乙醇浸泡15天，濾過，與上述濾液合併，減壓回收乙醇，再濃縮至相對密度1.15，加乙醇使含醇量達80％，靜置48小時，濾過，回收乙醇後離心，取上清液，加入注射劑所需要的輔料，混勻，調節pH值至5.0～7.0，加注射用水至1000ml，濾過，灌裝，滅菌，如下經過鑑別檢查、含量測定合格，即得(1)制何首烏的鑑別取該製劑5ml，加5mol/L硫酸溶液30ml，加入氯仿40ml，加熱回流1.5小時，放冷，分取氯仿層，蒸乾，殘渣加氯仿1.5ml使溶解，作為供試品溶液；取何首烏對照藥材1g，加入3mol/L鹽酸溶液40ml，同法製成對照藥材溶液；另取大黃素對照品，加氯仿製成每1ml含1mg的對照品溶液；照中國藥典的方法檢測，採用以羧甲酸纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，顯色劑為氨蒸汽，日光下檢視。
(2)枸杞子的鑑別取該製劑10ml，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，提取液合併，水浴上濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.5g，加水40ml，煮沸後保持微沸30分鐘，濾過，濾液同法製成對照藥材溶液；照中國藥典的方法檢測，採用矽膠G薄層板，以氯仿-醋酸乙酯-苯-甲酸(5∶6∶3∶1)為展開劑，紫外燈(365nm)下顯色。
(3)含量測定照中國藥典的高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；乙腈-水-醋酸(5∶160∶1)為流動相；檢測波長為275nm；理論板數按丹參素或丹參素鈉峰計算應不低於3000；對照品溶液的製備精密稱取丹參素或丹參素鈉對照品10mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含丹參素或丹參素鈉0.1mg)；供試品溶液的製備取該藥物的製劑0.5ml，置具塞錐形瓶中，水浴揮發至幹，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，濾過，濾液離心，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；測得製劑中所含丹參素鈉的含量不得少於所含丹參量的0.60％。
權利要求
1.一種治療虛證的藥物，其特徵在於它含有下列重量份的原料藥制何首烏50～250份、丹參120～600份、川芎30～150份、枸杞子50～250份、海龍12～60份、蘄蛇60～300份。
2.根據權利要求1所述的藥物，其特徵在於它的原料中還含有黨參30～150份、黃芪25～120份、杜仲12～60份、蛤蚧5～25份、當歸60～300份之中的一種原料藥或一種以上的組合原料藥。
3.根據權利要求1所述的藥物，其特徵在於各原料藥的重量份為制何首烏120～130份、丹參300～320份、川芎75～80份、枸杞子120～130份、海龍35～40份、蘄蛇160～170份。
4.根據權利要求3所述的藥物，其特徵在於它還含有黨參70～80份、黃芪60～65份、杜仲30～35份、蛤蚧12～14份、當歸150～160份之中的一種原料藥或一種以上的組合原料藥。
5.製備如權利要求1、2、3或4所述的治療虛證藥物的方法，其特徵在於對制出的藥物中的制何首烏用薄層色譜法按如下條件進行鑑別檢查(1)供試品溶液的製備取該藥物的製劑適量(約相當於含制何首烏0.5～3g，其中固體製劑需研細)，加1～5mol/L硫酸或鹽酸溶液20～100ml，加入氯仿20～100ml，加熱回流0.5～2小時，放冷，分取氯仿層，蒸乾，殘渣加氯仿1～4ml使溶解，作為供試品溶液；(2)對照藥材溶液的製備取何首烏對照藥材0.2～1.5g，加入1～5mol/L硫酸或鹽酸溶液20～100ml，氯仿20～100ml，加熱回流0.5～2小時，放冷，分取氯仿層，蒸乾，殘渣加氯仿1～4ml使溶解，製成對照藥材溶液；(3)對照品大黃素對照品；(4)薄層板以羧甲酸纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板；(5)展開劑甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15∶2∶1)或石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液；(6)顯色劑氨蒸汽，日光下檢視。
6.製備如權利要求1、2、3或4所述的治療虛證藥物的方法，其特徵在於對制出的藥物中的枸杞子用薄層色譜法按如下條件進行鑑別檢查(1)供試品溶液的製備取該藥物的製劑適量(約相當於含枸杞子0.5～4g，其中固體製劑需研細後加水20～100ml)，用醋酸乙酯提取1～3次，每次10～60ml，提取液合併，水浴上濃縮至1～3ml，作為供試品溶液；(2)對照藥材溶液的製備取枸杞子對照藥材0.3～1.5g，加水20～100ml，煮沸後保持微沸10～60分鐘，濾過，濾液用醋酸乙酯提取1～3次，每次10～60ml，提取液合併，水浴上濃縮至1～3ml，作為對照品溶液；(3)薄層板矽膠G薄層板；(4)展開劑醋酸乙酯-氯仿-甲酸(3∶2∶1)或氯仿-醋酸乙酯-苯-甲酸(5∶6∶3∶1)；(5)顯色劑紫外燈(365nm)。
7.製備如權利要求2或4所述的治療虛證藥物的方法，其特徵在於對制出的藥物中的黨參用薄層色譜法按如下條件進行鑑別檢查(1)供試品溶液的製備取該藥物的製劑適量(約相當於含黨參0.5～3g，其中固體製劑需研細，液體製劑需水浴至幹)，加無水乙醇20～100ml超聲提取10～60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水10～80ml使溶解，濾過，濾液用乙酸乙酯20～100ml提取，取水層加鹽酸1～4ml，加熱回流10～60分鐘，放冷，用氯仿振搖提取1～3次，每次15～60ml，合併氯仿液，蒸乾，殘渣加甲醇0.5～3ml使溶解，作為供試品溶液；(2)對照藥材溶液的製備取黨參對照藥材0.5～3g，加水20～100ml煮沸並保持微沸10～60分鐘，濾過，濾液加鹽酸1～4ml，加熱回流10～60分鐘，放冷，用氯仿振搖提取1～3次，每次15～60ml，合併氯仿液，蒸乾，殘渣加甲醇0.5～3ml使溶解，作為對照藥材溶液；(3)薄層板矽膠G薄層板；(4)展開劑苯-醋酸乙酯-甲酸(12∶4∶0.6)或甲苯-醋酸乙酯-甲酸(15∶5∶2)(5)顯色劑10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。
8.製備如權利要求2或4所述的治療虛證藥物的方法，其特徵在於對制出的藥物中的黃芪用薄層色譜法按如下條件進行鑑別檢查(1)供試品溶液的製備取該藥物的製劑適量(約相當於含黃芪0.3～2g，其中固體製劑需研細後加20～100ml甲醇超聲提取10～60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水20～100ml使溶解)，通過已處理好的D101型大孔樹脂柱，先後用0.2％～1.0％的氫氧化鈉溶液20～100ml、足量的水、10％～30％乙醇20～80ml洗脫並棄去洗脫液，最後用50％～85％的乙醇20～100ml洗脫，洗脫液蒸乾，殘渣加乙醇0.5～3ml使溶解，作為供試品溶液；(2)對照品黃芪甲苷對照品；(3)薄層板矽膠G薄層板；(4)展開劑氯仿-甲醇(4∶1)或氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置的下層溶液；(5)顯色劑10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。
9.製備如權利要求1、2、3或4所述的治療虛證藥物的方法，其特徵在於對制出的藥物中的丹參素或丹參素鈉用高效液相色譜法按如下條件進行含量測定(1)填充劑十八基矽烷鍵合矽膠；流動相甲醇-0.5％醋酸(5∶95)或乙腈-水-醋酸(5∶160∶1)；檢測波長270～290nm；(2)對照品丹參素或丹參素鈉；(3)供試品溶液的製備取該藥物的製劑適量(約相當於含丹參0.1～0.6g，其中固體製劑需研細，置具塞錐形瓶中；液體製劑需置具塞錐形瓶中水浴揮發至幹)，精密加入甲醇10～50ml，稱定重量，超聲處理10～60分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，濾過，濾液離心，即得；(4)測得製劑中所含丹參素鈉的含量不得少於所含丹參重量的0.60％。
10.一種如權利要求書1、2、3或4所述的藥物在臨床上的用途，其特徵在於它具有益氣養血、滋補肝腎、活血化瘀和增強免疫功能、增強體力、升白、抗炎、降脂、提高網狀內皮系統吞噬作用等功能，可改善氣血兩虛、肝腎不足、血瘀所致中醫虛證的各種症狀，用於治療免疫功能低下、糖尿病並發周圍神經炎、高脂血症、老年及老年前期體虛、病後體虛、放化療後白細胞或粒細胞減少以及慢性疲勞症候群、腫瘤、冠心病、橋本氏甲狀腺炎、骨折並發骨不連、黃褐斑療等相關病症。
全文摘要
本發明涉及一種治療虛證的藥物及其製備方法和用途，該藥物含有制何首烏、丹參、川芎、枸杞子、海龍、蘄蛇等中藥原料，採用常規的方法製成不同的製劑，並用薄層色譜法和高效液相色譜法對多種原料成分進行鑑別檢查和含量測定。本發明藥物具有益氣養血、滋補肝腎、活血化瘀和增強免疫功能、增強體力、升白、抗炎、降脂、提高網狀內皮系統吞噬作用等功能，能改善氣血兩虛、肝腎不足、血瘀所致中醫虛證的各種症狀，對老年及老年前期體虛、病後體虛、免疫功能低下、放化療後白細胞或粒細胞減少、糖尿病並發周圍神經炎、高脂血症以及慢性疲勞症候群、腫瘤、冠心病、橋本氏甲狀腺炎、骨折並發骨不連、黃褐斑等都有較好的治療或輔助治療作用。
文檔編號G01N30/90GK1634253SQ20041004086
公開日2005年7月6日 申請日期2004年10月20日 優先權日2004年10月20日
發明者張沛, 馮華祥, 芮旭東, 周道銓 申請人:成都中匯製藥有限公司