一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法
2023-05-02 16:19:36 1
一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法
【專利摘要】本發明公開了一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法，解決了傳統臘梅精油加工中臘梅花提取精油後當做廢棄物處理造成資源浪費的問題。其具體步驟為：（1）將提取完精油的臘梅花放入粉碎機中研磨至800-1200目；（2）添加一定量的緩衝溶液，並控制溶液溫度和溶解時間，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中；（3）離心分離溶液，取上清溶液；（4）在上清溶液中滴加酸，調節pH值至適宜值；（5）離心加酸後析出的蛋白質，過濾，乾燥。本發明充分利用了臘梅花精油加工的廢棄物，操作簡單，運行費用低，提取的蛋白符合食品及藥品標準，具有較高的經濟價值。
【專利說明】—種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法，具體涉及一種利用鹼溶酸析法，從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法。
【背景技術】
[0002]臘梅是臘梅科臘梅屬落葉叢生灌木，為我國傳統的庭院名花和園林綠化植物，具有色、香、形、姿、韻俱佳的觀賞價值。臘梅花除散發清馨的香氣外，還具有較高的藥用保健價值。
[0003]但是目前臘梅花的開發局限於臘梅花直接製品。對於臘梅花深加工，如中國專利(申請號:201210447070.2)提取了臘梅精油、臘梅花蠟和多糖。遺憾的是，目前暫無臘梅花蛋白提取技術的專利報導。而公開的資料表明，臘梅花中蛋白質含量高達23%~24%，從蛋白質植物資源利用的角度來看，臘梅花蛋白質具有較高的食用和藥用價值。因此，我們有必要開發臘梅花蛋白的提取技術。
【發明內容】
[0004]為了充分利用臘梅花精油加工的廢棄物，本發明提供了一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法，具有操作簡單的優點，並且提取過程無有毒化合物殘留。
[0005]本發明的技術方 案是:
一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法，其步驟如下:
(1)將提取完精油的臘梅花放入粉碎機中研磨至800-1200目，得到臘梅漿液；
(2)在臘梅漿液中添加一定量的緩衝溶液，並控制溶液溫度和溶解時間，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中，得到臘梅蛋白溶液；
緩衝溶液的用量為臘梅漿液體積的1-5倍；
所述緩衝溶液為磷酸緩衝溶液的復配溶液，具體為=NaH2PO4或者Na2HPO4為0.02mol/L,乙二胺四乙酸二鈉為 0-2mol/L, CaCl2 為 0-0.3mol/L, NaCl 為 Ο-lmol/L ；
(3)離心分離臘梅蛋白溶液，取上清溶液，得到臘梅蛋白懸浮液；
(4)在臘梅蛋白懸浮液中滴加酸，調節pH值為4-6；
(5)把加酸後析出的蛋白質靜置一定時間，使蛋白質完全沉澱；然後，離心分離，過濾，乾燥。
[0006]其中，所述步驟(2)中，溶解溫度為25_60°C，溶解時間為1_3小時。
[0007]其中，所述步驟(3)中，離心分離的轉速為3000-5000r/min，時間為5-10min。
[0008]其中，所述步驟(5)中，靜置時間為15-30min ;離心分離的轉速為4000_6000r/min,分離時間為20min。
[0009]本發明的有益效果是:(1)豐富了臘梅花深加工技術，深化了臘梅花開發的價值；
(2)產品原料來自臘梅花精油加工的廢棄物，有利於環境保護與資源利用；
(3)具有操作簡單，原料廉價，附加值高，並且提取過程無有毒化合物殘留，符合食品及藥品的要求。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0010]圖1為提取臘梅花蛋白的具體工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0011]如圖1所示，本發明一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法，具體步驟為:
(1)將提取完精油的臘梅花放入粉碎機中研磨至800-1200目，得到臘梅花漿液；
(2)添加一定量的緩衝溶液，並控制溶液溫度和溶解時間，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中，得到臘梅蛋白溶液；緩衝溶液的用量為臘梅漿液體積的1-5倍；所述緩衝溶液為磷酸緩衝溶液的復配溶液，具體為=NaH2PO4或者Na2HPO4S 0.02mol/L,乙二胺四乙酸二鈉(EDTA 二鈉)為 0-2mol/L, CaCl2 為 0-0.3mol/L, NaCl 為 Ο-lmol/L ；
(3)離心分離溶液，取上清溶液，得到臘梅蛋白懸浮液；
(4)在臘梅蛋白懸浮液中滴加酸調節pH值至4-6；
(5)把加酸後析出的蛋白質靜置一定時間，使蛋白質完全沉澱；然後，離心分離，過濾，乾燥。
[0012]其中，所述步驟(2)中，溶解溫度為25_60°C，溶解時間為1_3小時。
[0013]其中，所述步驟(3)中，離心分離的轉速為3000-5000r/min，時間為5_10min。
[0014]其中，所述步驟(5)中，靜置時間為15-30min ;離心分離的轉速為4000_6000r/min,分離時間為20min。
[0015]下面,列舉一些實施例,進一步表達本發明。
[0016]實施例1
將提取完精油的臘梅花10g放入粉碎機中研磨至800目；添加500ml的緩衝溶液(體積比約為1:5)，具體配置為NaH2PO4或Na2HPO4含量為0.02mol/L,乙二胺四乙酸二鈉(EDTA二鈉)為lmol/L，並控制溶液溫度25°C為和溶解時間3小時，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中，得；(3)離心分離溶液，離心分離轉速為4000r/min，時間為6min，然後取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸調節PH值至4 ;(5)加酸後析出的蛋白質，靜置18min，離心分離的轉速為5000r/min,時間為20min,過濾,乾燥,最終得臘梅蛋白質18.182g。
[0017]實施例2
將提取完精油的臘梅花10g放入粉碎機中研磨至1000目；添加10ml的緩衝溶液(體積比約為1:1)，具體配置為NaH2PO4或Na2HPO4含量為0.02mol/L,乙二胺四乙酸二鈉(EDTA二鈉)為lmol/L，CaCl2S 0.2mol/L，並控制溶液溫度60°C為和溶解時間I小時，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中；(3)離心分離溶液，離心分離轉速為5000r/min，時間為lOmin，然後取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸調節pH值至5 ; (5)加酸後析出的蛋白質，靜置20min，離心分離的轉速為4000r/min,時間為20min,過濾,乾燥,最終得臘梅蛋白質19.215g。
[0018]實施例3
將提取完精油的臘梅花10g放入粉碎機中研磨至900目；添加200ml的緩衝溶液(體積比約為1:2)，具體配置為NaH2P04/Na2HP04含量為0.02mol/L,乙二胺四乙酸二鈉(EDTA 二鈉)為lmol/L，CaCl2為0.lmol/L, NaCl為lmol/L，並控制溶液溫度60°C為和溶解時間I小時，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中；(3)離心分離溶液，離心分離轉速為5000r/min，時間為lOmin，然後取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸調節pH值至5 ;(4)加酸後析出的蛋白質，靜置20min,離心分離的轉速為4000r/min,時間為20min,過濾,乾燥,最終得臘梅蛋白質 19.471g。
[0019]實施例4
將提取完精油的臘梅花10g放入粉碎機中研磨至900目；添加500ml的緩衝溶液(體積比約為1:5)，具體配置為NaH2P04/Na2HP04含量為0.02mol/L,乙二胺四乙酸二鈉(EDTA 二鈉)為lmol/L，CaCl2為0.lmol/L, NaCl為lmol/L，並控制溶液溫度50°C為和溶解時間2小時，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中；(3)離心分離溶液，離心分離轉速為4000r/min，時間為1min,然後取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸調節pH值至4 ; (4)加酸後析出的蛋白質，靜置20min,離心分離的轉速為6000r/min,時間為30min,過濾,乾燥,最終得臘梅蛋白質 20.471g。
[0020]實施例5
將提取完精油的臘梅花500g放入粉碎機中研磨至900目；添加100ml的緩衝溶液(體積比約為1:2)，具體配置為NaH2P04/Na2HP04含量為0.02mol/L,乙二胺四乙酸二鈉(EDTA 二鈉)為2mol/L，CaCl2為0.3mol/L,NaCl為0.7mol/L，並控制溶液溫度60°C為和溶解時間3小時，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中；(3)離心分離溶液，離心分離轉速為5000r/min，時間為lOmin，然後取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸調節pH值至6 ; (5)加酸後析出的蛋白質，靜置20min,離心分離的轉速為6000r/min,時間為30min,過濾,乾燥,最終得臘梅蛋白質 100.128g。 [0021]實施例6
將提取完精油的臘梅花500g放入粉碎機中研磨至1200目；添加1500ml的緩衝溶液(體積比約為1:3)，具體配置為NaH2P04/Na2HP04含量為0.02mol/L,乙二胺四乙酸二鈉(EDTA 二鈉)為2mol/L，並控制溶液溫度25°C為和溶解時間3小時，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中；(3)離心分離溶液，離心分離轉速為5000r/min，時間為lOmin，然後取上清溶液；
(4)在上清溶液中滴加酸調節pH值至6 ; (5)加酸後析出的蛋白質，靜置25min，離心分離的轉速為4000r/min,時間為30min,過濾,乾燥,最終得臘梅蛋白質102.315g。
[0022]實施例7
將提取完精油的臘梅花1500g放入粉碎機中研磨至1000目；添加2500ml的緩衝溶液(體積比約為1:1.7)，具體配置為NaH2P04/Na2HP04含量為0.02mol/L,並控制溶液溫度50°C為和溶解時間3小時，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中；(3)離心分離溶液，離心分離轉速為5000r/min，時間為lOmin，然後取上清溶液；(4)在上清溶液中滴加酸調節pH值至6 ; (5)加酸後析出的蛋白質，靜置25min,離心分離的轉速為4000r/min,時間為30min,過濾,乾燥，最終得臘梅蛋白質301.825g。
[0023]本發明中，滴加酸調節pH值是常規手段，酸通常選用鹽酸或乙酸，也可以是其它類型的酸，只要能調整pH值(降低pH值)就可以。
【權利要求】
1.一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法，具體步驟如下: (1)將提取完精油的臘梅花放入粉碎機中研磨至800-1200目，得到臘梅漿液； (2)在臘梅漿液中添加一定量的緩衝溶液，並控制溶液溫度和溶解時間，使臘梅蛋白溶解在緩衝溶液中，得到臘梅蛋白溶液； 緩衝溶液的用量為臘梅漿液體積的1-5倍； 所述緩衝溶液為磷酸緩衝溶液的復配溶液，具體為=NaH2PO4或者Na2HPO4為0.02mol/L,乙二胺四乙酸二鈉為 0-2mol/L, CaCl2 為 0-0.3mol/L, NaCl 為 Ο-lmol/L ； (3)離心分離臘梅蛋白溶液，取上清溶液，得到臘梅蛋白懸浮液； (4)在臘梅蛋白懸浮液中滴加酸，調節pH值為4-6； (5)把加酸後析出的蛋白質靜置一定時間，使蛋白質完全沉澱；然後，離心分離，過濾，乾燥。
2.根據權利I所述的一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法，其特徵在於:所述步驟(2)中，溶解溫度為25-60°C，溶解時間為1-3小時。
3.根據權利I所述的一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法，其特徵在於:其特徵在於所述步驟(3)中，離心分離的轉速為3000-5000r/min，時間為5_10min。
4.根據權利I所述的一種從臘梅精油加工廢棄物中提取蛋白的方法，其特徵在於所述步驟( 5)中，靜置時間為15-30min ;離心分離的轉速為4000_6000r/min，時間為20min。
【文檔編號】C07K1/30GK104031116SQ201410293824
【公開日】2014年9月10日 申請日期:2014年6月27日 優先權日:2014年6月27日
【發明者】樓漢華, 田耀慶 申請人:湖北五柳源生物科技有限責任公司