一種肌氨肽苷注射液及注射用肌氨肽苷的製備方法

2023-05-03 09:07:56 2

專利名稱：一種肌氨肽苷注射液及注射用肌氨肽苷的製備方法
技術領域：
本發明屬於醫藥技術領域
背景技術：
肌氨肽苷注射液及注射用肌氨肽苷由健康家兔肌肉和心肌提取的含多肽、 胺基酸、核苷、及核苷酸等混合物的滅菌水溶液及適量輔料凍幹製成的凍幹劑。 用於腦卒中，腦供血不足所致腦功能減退和周圍神經疾病的輔助治療。
該品種為我國首例，其工藝過程文獻有多處報導，但通過我們的實際操作， 均無法製成合格產品，其主要問題是1、多肽與次黃嘌呤的比例不能符合標準 的要求；2、製劑的可見異物達不到標準要求。3、工藝中均無徹底的病毒滅活 步驟。從而使製劑的安全很難保障。
本發明詳細描述了一種製造方法，簡單、適用、安全，完全可以達到國家藥品 標準的具體要求。 ——

發明內容
本發明的過程是
a、 化凍、清洗切塊取符合質量標準的兔心肌和肌肉，於投料前數小時從 冷庫中取出，用冷水浸泡化透後，洗淨血水，稱重。兔心和兔肌肉以適當比例 混合，或分別處理，切成適宜的小塊，以純化水衝洗三次。
b、 勻槳將上述兔心和兔肌肉按組織重量加入1 1.5倍純化水或注射用 水，再用純化水或注射用水衝洗膠體磨後絞碎，製成勻漿。
c、 深凍上述勻漿液於-KTC -3CTC深凍24小時以上，取出，室溫化凍。
d、 加熱煮沸分離上清將兔心肌和兔肌肉組織液加熱煮沸，持續加熱10-30
分鐘，分離上清，將組織擠壓淨提取液。
e、 酸鹼沉澱上清液用NaOH調pH至9. 0-11. 0，加熱至沸持續10-30分鐘， 冷卻，分離上清。上清液再用鹽酸調pH2.0-4.0，加熱至沸，持續10-30分鐘， 分離上清。亦可先酸沉後鹼沉。上清液調pH至7. 0-7. 5即可。
f、 鹼沉上述溶液再調pH9.0-11.0,加熱至沸，10-30分鐘，冷卻，分離上清。
g、 超濾上清液調pH7.0-7.5，分級超濾，先過分子量一萬道爾頓的中空 纖維超濾器然後再過分子量3000道爾頓超濾柱一次。h、 熱壓、深凍、超濾上述超濾液於121。C熱壓15-25分鐘，放至室溫， 於-l(TC -3(TC深凍過夜，取出自然化凍，過一萬分子量超濾器一次。
i、 檢測、調節多肽與次黃嘌呤的比例檢測上述提取液多肽和次黃嘌呤濃 度，若二者比例為1.75: 0.25，上下浮動在標準允許範圍內即可。若次黃嘌呤 比例較低，則用分子量300-1000的納濾器納濾至透過液為原溶液的1/2-2/3。 分別測定透過液和截留液的多肽與次黃嘌呤的濃度，確定二者混合的比例，使 混合後多肽與次黃嘌呤的比例為1.75: 0.25， (二者上下浮動範圍在標準允許範 圍內)，且多肽濃度大於1.75mg/ml，若小於1.75mg/ml，可加熱至沸濃縮至多 肽濃度大於1.75mg/ml。
j、超濾上述溶液調pH7.0-7.5，過一萬分子量超濾器，即得肌氨肽苷溶 液。於-10。C -3(TC深凍。
k、製劑將肌氨肽苷溶液於投料前取出，化透，調pH7.2土0.2，加水稀釋 至所需濃度，過0.22微孔濾膜，灌封，于于100°C30-40分鐘、115°C30-40分 鍾或121°C 12-30分鐘熱壓滅菌，即得肌氨肽苷注射液。將肌氨肽苷溶液化透後， 加入適量甘露醇做為輔料(一般為溶液量的10%-15%)，過0.22um微孔濾膜， 灌裝，冷凍乾燥，即得注射用肌氨肽苷。 其特徵是
a、 製造過程簡便，適用性強，無有機溶劑加入。
b、 反覆的酸鹼熱沉，保證了製劑可見異物合格。
c、 採用了納濾技術，調節多肽與次黃嘌呤的比例，避免外加次黃嘌呤。
d、 本工藝採用121°C12-30分鐘熱壓，保證了病毒滅活條件，也對製劑的 可見異物合格有利。
e、 注射劑採用121'C12-30分鐘滅菌，保證了 F。值大於8,無菌保障水平高。 具體實施實例
一、取符合質量標準的兔心肌和肌肉，化透，洗淨稱量，兔心和兔肌肉以 60公斤40公斤混合，切成適宜小塊，用純化水衝洗三次，每次用水量大於投 料量二倍。將上述兔心和兔肌肉按組織重量加入1 1.5倍純化水，再用純化水 衝洗膠體磨，以細度3檔絞碎，製成勻漿。上述勻漿液於-l(TC -2(TC深凍24-48 小時以上，取出，室溫化凍。加熱煮沸分離上清，將兔心肌和兔肌肉組織液混 合加熱至沸，持續20分鐘，分離上清，將組織擠壓淨提取液。上清液用NaOH 調pH至9. 0-10.0，加熱至沸持續20-30分鐘，冷卻，分離上清。上清液再用鹽 酸調pH3. 0-4.0，加熱至沸，持續20-30分鐘，分離上清。亦可先酸沉後鹼沉。上清液調pH至7.0-7.5即可。上述溶液再調PH9-10，加熱至沸，20-30分鐘， 冷卻，分離上清。上清液調pH值7.0-7.5，分級超濾，先過分子量一萬道爾頓 的中空纖維超濾器然後再過分子量3000道爾頓超濾柱一次。上述超濾液於121 。C熱壓15-25分鐘，放至室溫，於-10°C _2(TC深凍過夜，取出自然化凍，過 一萬分子量超濾器一次。得肌氨肽苷溶液64000ml，檢測，多肽濃度為1. 78mg/ml， 次黃嘌呤0.24mg/ml。將其均分成兩份， 一份過一萬分子量超濾器，調pH7. 2， 過0.22um微孔濾膜，灌封2.15ml/支，於121'C熱壓12分鐘，即得肌氨肽苷 注射液。約得13000支。另一份過一萬分子量超濾器後，加入除熱源的甘露醇 3200g，加注射用水至48000ml，灌裝3.2ml/支，冷凍乾燥，即得注射用肌氨肽 苷規格為3.5mg (多肽)0.25mg(次黃嘌呤)/支
二、取符合質量標準的兔心肌和肌肉，化透，洗淨稱量，兔心和兔肉以50 公斤50公斤混合，切成適量小塊，將上述兔心和兔肌肉按組織重量加入1 1.5倍純化水，再用純化水衝洗膠體磨，以細度3檔絞碎，製成勻漿。上述勻漿 液於-10。C -20。C深凍24-48小時以上，取出，室溫化凍。加熱煮沸分離上清， 將兔心肌和兔肌肉組織液混合加熱煮沸，持續20分鐘，分離上清，將組織擠壓 淨提取液。上清液用NaOH調pH至9. 0-10.0，加熱至沸持續20-30分鐘，冷卻， 分離上清。上清液再用鹽酸調pH3. 0-4.0，加熱至沸，持續20-30分鐘，分離上 清。上清液調pH至7.0-7.5即可。上述溶液再調pH9-10，加熱至沸，20-30分 鍾，冷卻，分離上清。上清液調pH值7.0-7.5，分級超濾，先過分子量一萬道 爾頓的中空纖維超濾器然後再過分子量3000道爾頓超濾柱一次。上述超濾液於 12rC熱壓15-25分鐘，放至室溫，於-10'C -2(TC深凍過夜，取出自然化凍， 過一萬分子量超濾器一次。得肌氨肽苷液60000ml，經檢測多肽與次黃嘌呤比例 為2. 15: 0. 248，將此液用分子量300-1000的納濾器納濾，至透過液約30000m〗， 經檢測，確定透過液與截留液以10: 8比例混合，截留液的2/10即6000ml棄 掉。混合後的肌氨肽苷液過一萬分子量超濾器一次，得肌氨肽苷溶液54000ml， 經檢測多肽與次黃嘌呤比例為1.90: 0.248。將此液均分成兩部分，第一部分稀 釋至多肽與次黃嘌呤合格的濃度，調pH7. 2，過0. 22 u m微孔濾膜，灌封，2. 15m1/ 支，於12rC熱壓12分鐘，即得肌氨肽苷注射液，約得12000支規格為2ml， 3.5mg (多肽)0.25mg (次黃嘌呤)。另一份約27000ml，加入除熱源的甘露醇 3000g，加注射用水至40500ml，灌裝，3.2ml/支，冷凍乾燥，即得注射用肌氨肽 苷。約得12500支規格為3.5mg (多肽)0. 25mg(次黃嘌呤)/支。
權利要求
1、一種肌氨肽苷注射液及注射用肌氨肽苷的製備方法，其過程是a、化凍、清洗切塊取符合質量標準的兔心肌和肌肉，於投料前數小時從冷庫中取出，用冷水浸泡化透後，洗淨血水，稱重。兔心和兔肌肉以適當比例混合，或分別處理，切成適宜的小塊，以純化水衝洗三次。b、勻漿將上述兔心和兔肌肉按組織重量加入1～1.5倍純化水或注射用水，再用純化水或注射用水衝洗膠體磨後絞碎，製成勻漿。c、深凍上述勻漿液於-10℃～-30℃深凍24小時以上，取出，室溫化凍。d、加熱煮沸分離上清將兔心肌和兔肌肉組織液加熱煮沸，持續加熱10-30分鐘，分離上清，將組織擠壓淨提取液。e、酸鹼沉澱上清液用NaOH調pH至9.0-11.0，加熱至沸持續10-30分鐘，冷卻，分離上清。上清液再用鹽酸調pH2.0-4.0，加熱至沸，持續10-30分鐘，分離上清。亦可先酸沉後鹼沉。上清液調pH至7.0-7.5即可。f、鹼沉上述溶液再調pH9.0-11.0，加熱至沸，10-30分鐘，冷卻，分離上清。g、超濾上清液調pH7.0-7.5，分級超濾，先過分子量一萬道爾頓的中空纖維超濾器然後再過分子量3000道爾頓超濾柱一次。h、熱壓、深凍、超濾上述超濾液於121℃熱壓15-25分鐘，放至室溫，於-10℃～-20℃深凍過夜，取出自然化凍，過一萬分子量超濾器一次。i、檢測、調節多肽與次黃嘌呤的比例檢測上述提取液多肽和次黃嘌呤濃度，若二者比例為1.75∶0.25，上下浮動在標準允許範圍內即可。若次黃嘌呤比例較低，則用分子量300-1000的納濾器納濾至透過液為原溶液的1/2-2/3。分別測定透過液和截留液的多肽與次黃嘌呤的濃度，確定二者混合的比例，使混合後多肽與次黃嘌呤的比例為1.75∶0.25，(二者上下浮動範圍在標準允許範圍內)，且多肽濃度大於1.75mg/ml，若小於1.75mg/ml，可加熱至沸濃縮至多肽濃度大於1.75mg/ml。j、超濾上述溶液調pH7.0-7.5，過一萬分子量超濾器，即得肌氨肽苷溶液。於-10℃～-30℃深凍。k、製劑將肌氨肽苷溶液於投料前取出，化透，調pH7.2±0.2，加水稀釋至所需濃度，過0.22微孔濾膜，灌封，於100℃30-40分鐘、115℃30-40分鐘或121℃12-30分鐘熱壓滅菌，即得肌氨肽苷注射液。將肌氨肽苷溶液化透後，加入適量甘露醇做為輔料(一般為溶液量的10％-15％)，過0.22μm微孔濾膜，灌裝，冷凍乾燥，即得注射用肌氨肽苷。其特徵是a、製造過程簡便，適用性強，無有機溶劑加入。b、反覆的酸鹼熱沉，保證了製劑可見異物合格。c、採用了納濾技術，調節多肽與次黃嘌呤的比例，避免外加次黃嘌呤。d、本工藝採用121℃12-30分鐘熱壓，保證了病毒滅活條件，也對製劑的可見異物合格有利。e、注射劑採用121℃12-30分鐘滅菌，保證了F0值大於8，無菌保障水平高。
全文摘要
肌氨肽苷注射液及注射用肌氨肽苷由健康家兔肌肉和心肌提取的含多肽、胺基酸、核苷、及核苷酸等混合物的滅菌水溶液及適量輔料凍幹製成的凍幹劑。用於腦卒中，腦供血不足所致腦功能減退和周圍神經疾病的輔助治療。本發明屬於醫藥技術領域。介紹了一種製造方法，其過程為清洗、切塊、勻漿、深凍、加熱煮沸、分離上清、酸鹼沉澱、鹼沉、熱壓、深凍、超濾、檢測、調節多肽與次黃嘌呤的比例、超濾。除菌過濾、灌裝，滅菌製得肌氨肽苷注射液，加適量的輔料除菌過濾、灌裝、冷凍乾燥，製得注射用肌氨肽苷。整個過程簡便完整，保證產品符合國家標準，並且保證了病毒滅活，同時注射液滅菌F0大於8，無菌保證水平高。
文檔編號A61P25/00GK101584713SQ20091006722
公開日2009年11月25日 申請日期2009年7月3日 優先權日2009年7月3日
發明者劉忠有, 海 石 申請人:石 海;劉忠有