快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒的製作方法

2023-07-16 06:10:51

專利名稱：快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種檢測幹細胞的試劑盒，尤其涉及一種快速檢測誘導性多潛能幹 細胞的試劑盒。
背景技術：
幹細胞(stem cells)是人體及其各種組織細胞的初始來源,其最顯著的生物學特 徵是既有自我更新和不斷增殖的能力，又有多向分化的潛能。胚胎幹細胞(ES)來源於受精 卵發育分化的胚胎內細胞團或原始生殖脊一種多能細胞系，它具有與早期胚胎細胞相似的 形態特徵和很強的分化能力，可以無限增殖並分化成為全身200多種細胞類型，從而可以 進一步形成機體的任何組織或器官。
有關ES細胞和治療性克隆的研究一直存在激烈的倫理學爭論，近年來國外學 者通過體細胞體外基因轉染技術建立誘導性多潛能幹細胞(induced pluripotent stem cells，iPS細胞)系。日本京都大學物質-細胞統合系統據點iPS細胞研究中心長山中伸 彌與英國發育生物學家約翰· ·戈登因在細胞核重新編程研究領域的傑出貢獻，因此獲得 2012年諾貝爾生理學或醫學獎。山中伸彌是誘導多功能幹細胞(iPS cell)創始人之一。 2007年，他的研究團隊通過對小鼠的實驗，發現誘導人體表皮細胞使之具有胚胎幹細胞活 動特徵的方法。此方法誘導出的幹細胞可轉變為心臟和神經細胞，為研究治療目前多種心 血管絕症提供了巨大助力。這一研究成果在全世界被廣泛應用，因為其免除了使用人體胚 胎提取幹細胞的倫理道德制約。誘導多能幹細胞(iPS細胞)的研究成果在幹細胞研究領 域中無疑是具有裡程碑意義的突破，多種體細胞經過體外的培養和誘導均可轉變成為具有 多向分化潛能的幹細胞，並且證明了幾種已知的轉錄因子可以使已分化的體細胞逆轉為未 分化的狀態，從而闡明了細胞的巨大可塑性。由於iPS細胞研究不再使用人類早期胚胎，故 卵母細胞來源的難題得到了合理的解決，倫理學的爭論將隨之平息，自體iPS細胞來源的 細胞移植給患者自身也將使免疫排斥反應的難題迎刃而解。
研究證實採用體外導入0ct4、Sox2、c_Myc和Klf4等4個轉錄因子可將小鼠體細 胞直接重構成為ES細胞樣的多潛能細胞，因此，這類細胞被命名為誘導性多潛能幹細胞 (iPS細胞)。同樣，轉染上述因子或0ct4、Sox2、Nanog、LIN28等4個因子也能夠使人類體 細胞重構為iPS細胞，後者與人類ES細胞的基本特徵相似。
幹細胞的鑑定尤其是成體幹細胞鑑定是幹細胞研究領域的一個難題，目前，對很 多種成體幹細胞並沒有一個一致的鑑定標準。但在誘導性多潛能幹細胞(iPS細胞)的鑑 定方面，採用標誌物0ct4、Sox2、Nanog和LIN28來鑑定人誘導性多潛能幹細胞，用標誌物 0ct4、Sox2、c-Myc和Klf4來鑑定小鼠誘導性多潛能幹細基本上在本領域得到了公認。然 而，目前對這些生物標誌物的檢測是分開進行的，這不僅耗費時間，而且各標誌物之間的定 量關係不能準確地得到反映。發明內容
本發明所要解決的技術問題是，提供一種可在一次試驗中同時檢測全部多潛能幹 細標誌物，從而實現快速鑑定多潛能幹細胞(iPS細胞)的試劑盒。
為了解決上述技術問題，本發明採用的技術方案是一種快速檢測誘導性多潛能 幹細胞的試劑盒，包括用於快速檢測誘導性人或鼠多潛能幹細胞的檢測板、示蹤液、陽性 對照、陰性對照、樣品稀釋液、洗滌液和顯色液。
一種快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，包括用於快速檢測誘導性人或鼠 多潛能幹細胞的檢測板、生物標誌物標準液、反應液、親和素探測液、樣品稀釋液、洗滌液和 顯色液。
所述的檢測板是固定了 0ct4、Sox2、Nanog、LIN28中任何兩種及以上的人生物標 志物抗原的固相；所述的固相為酶標盤的反應槽、生物晶片的基片、免疫印跡膜、磁珠；所 述抗原為所述生物標誌物的整個蛋白或僅含相關蛋白的部分胺基酸序列多肽。
所述含有0ct4、Sox2、Nanog、LIN28中任何兩種及以上的人生物標誌物的抗原組 合被包被在酶標盤的同一個反應槽內。
所述含有0ct4、Sox2、Nanog、LIN28中任何兩種及以上人生物標誌物的抗原被分 別包被在同一個酶標盤或分開的酶標盤的不同的反應槽內。
所述檢測板是固定了任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、Nanog、LIN28人生物標 志物的特異抗體的固相；所述固相為酶標盤的反應槽、蛋白晶片用玻片或塑膠片、免疫印跡 膜、磁珠；所述的特異抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。
所述含有任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、Nanog、LIN28人生物標誌物的特異 抗體的組合被包被在酶標盤的同一個反應槽內，所述包被酶標盤包括使用直接或間接的方 法將所述的特異抗體包被在酶標盤的反應槽內。
所述含有任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、Nanog、LIN28人生物標誌物的特異 抗體被分別包被在同一個酶標盤或分開酶標盤的不同的反應槽內；所述包被酶標盤包括使 用直接或間接的方法將所述的特異抗體包被在酶標盤的反應槽內。
所述檢測板固定了 0ct4、Sox2、c-Myc、Klf4中任何兩種及以上的小鼠生物標誌物 抗原的固相；所述的固相為酶標盤的反應槽、生物晶片的基片、免疫印跡膜、磁珠；所述抗 原是所述生物標誌物的整個蛋白或僅含相關蛋白的部分胺基酸序列多肽。
含有0ct4、Sox2、c-Myc、Klf4中任何兩種及以上的小鼠生物標誌物抗原的組合被 包被在酶標盤的同一個反應槽內。
含有0ct4、Sox2、c-Myc、Klf4中任何兩種及以上的小鼠生物標誌物抗原被分別包 被在同一個酶標盤或分開的酶標盤的不同的反應槽內。
所述檢測板是固定了含有任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、c_Myc、Klf4小鼠 生物標誌物的特異抗體的固相；所述的固相為酶標盤的反應槽、蛋白晶片的基片、免疫印跡 膜、磁珠；所述的特異抗體是單克隆抗體或多克隆抗體。
含有任何兩種及以上識別0ct4、Sox2.c-Myc.Klf4小鼠生物標誌物的特異抗體的 組合被包被在酶標盤的同一個反應槽內；所述預包被酶標盤包括使用直接或間接的方法將 所述的特異抗體包被在酶標盤的反應槽內。
含有任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、c-Myc, Klf4小鼠生物標誌物的特異抗體 被分別包被在同一個酶標盤或分開酶標盤的不同的反應槽內；所述的預包被酶標盤包括使用直接或間接的方法將所述的特異抗體包被在酶標盤的反應槽內。
本發明的有益效果是可在一次試驗中同時檢測多個或誘導性多潛能幹細胞標誌 物，從而實現快速鑑定多潛能幹細胞(iPS細胞)。本發明由於能在同試驗中同時檢測多個 誘導性多潛能幹細胞標誌物，使得所測得的各標誌物的表達量及其比例關係更具可比性， 因此能更準確地用於鑑別或鑑定多潛能幹細胞。
具體實施方式
下面結合具體實施方式
對本發明作進一步詳細說明
本發明的快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，包括用於快速檢測誘導性人 或鼠多潛能幹細胞的檢測板、示蹤液、陽性對照、陰性對照、樣品稀釋液、洗滌液和顯色液。
本發明的快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，包括用於快速檢測誘導性人 或鼠多潛能幹細胞的檢測板、生物標誌物標準液、反應液、親和素探測液、樣品稀釋液、洗滌 液和顯色液。
所述的檢測板是固定了 0ct4、Sox2、Nanog、LIN28中任何兩種及以上的人生物標 志物抗原的固相；所述的固相為酶標盤的反應槽、生物晶片的基片、免疫印跡膜、磁珠；所 述抗原為所述生物標誌物的整個蛋白或僅含相關蛋白的部分胺基酸序列多肽。
所述含有0ct4、Sox2、Nanog、LIN28中任何兩種及以上的人生物標誌物的抗原組 合被包被在酶標盤的同一個反應槽內。
所述含有0ct4、Sox2、Nanog、LIN28中任何兩種及以上人生物標誌物的抗原被分 別包被在同一個酶標盤或分開的酶標盤的不同的反應槽內。
所述檢測板是固定了任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、Nanog、LIN28人生物標 志物的特異抗體的固相；所述固相為酶標盤的反應槽、蛋白晶片的基片、免疫印跡膜、磁珠; 所述的特異抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。
所述含有任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、Nanog、LIN28人生物標誌物的特異 抗體的組合被包被在酶標盤的同一個反應槽內，所述包被酶標盤包括使用直接或間接的方 法將所述的特異抗體包被在酶標盤的反應槽內。
所述含有任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、Nanog、LIN28人生物標誌物的特異 抗體被分別包被在同一個酶標盤或分開酶標盤的不同的反應槽內；所述包被酶標盤包括使 用直接或間接的方法將所述的特異抗體包被在酶標盤的反應槽內。
所述檢測板固定了 0ct4、Sox2、c-Myc、Klf4中任何兩種及以上的小鼠生物標誌物 抗原的固相；所述的固相為酶標盤的反應槽、生物晶片的基片、免疫印跡膜、磁珠；所述抗 原是所述生物標誌物的整個蛋白或僅含相關蛋白的部分胺基酸序列多肽。
含有0ct4、Sox2、c-Myc、Klf4中任何兩種及以上的小鼠生物標誌物抗原的組合被 包被在酶標盤的同一個反應槽內。
含有0ct4、Sox2、c-Myc, Klf4中任何兩種及以上的小鼠生物標誌物抗原被分別包 被在同一個酶標盤或分開的酶標盤的不同的反應槽內。
所述檢測板是固定了含有任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、c_Myc、Klf4小鼠 生物標誌物的特異抗體的固相；所述的固相為酶標盤的反應槽、蛋白晶片的基片、免疫印跡 膜、磁珠；所述的特異抗體是單克隆抗體或多克隆抗體。
含有任何兩種及以上識別0ct4、Sox2.c-Myc.Klf4小鼠生物標誌物的特異抗體的組合被包被在酶標盤的同一個反應槽內；所述預包被酶標盤包括使用直接或間接的方法將所述的特異抗體包被在酶標盤的反應槽內。
含有任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、c-Myc, Klf4小鼠生物標誌物的特異抗體被分別包被在同一個酶標盤或分開酶標盤的不同的反應槽內；所述的預包被酶標盤包括使用直接或間接的方法將所述的特異抗體包被在酶標盤的反應槽內。
所述生物晶片的基片為玻片、塑膠片、矽片和膜等，免疫印跡膜為硝酸纖維素膜或PVC膜。
為了避免歧義，本發明就涉及的誘導性多潛能幹細胞(iPS細胞)標誌物0ct4、 Sox2、Nanog、LIN28、c-Myc, Klf4 作如下定義
本發明所述的誘導性多潛能人幹細胞(iPS細胞)標誌物人0ct4基因代碼為 ΝΜ_002701· 4，全名Octamer-binding transcription factor 4,別稱 P0U5F1, 0CT3, 0TF3.
本發明所述的誘導性多潛能人幹細胞(iPS細胞)標誌物人Sox2基因代碼為 NM_003106. 3,全名Homo sapiens SRY(sex determining region Y) _box2 (S0X2)，別稱 AN0P3，MC0PS3。
本發明所述的誘導性多潛能人幹細胞(iPS細胞)標誌物人Nanog基因代碼為 NM_024865. 2,全名Nanog homeobox,別稱NAN0G, nanOg。
本發明所述的誘導性多潛能幹細胞(iPS細胞)標誌物人LIN28基因代碼為 NM_024674. 4,含有業內公知別稱CSDDl, LIN-28, ZCCHCl, Lin_28A.
本發明所述的誘導性多潛能鼠幹細胞(iPS細胞)標誌物鼠0ct4基因代碼為 NM_001252452 全名Mus musculus POU domain, class 5，transcription factor I, Mus octamer-binding transcription factor 4,別稱P0U5F1, OCT3, 0TF3.
本發明所述的誘導性多潛能鼠幹細胞(iPS細胞)標誌物鼠Sox2基因代碼為 ΝΜ_011443· 3，Mus musculus SRY-box containing gene 2,含有業內公知別稱 lcc,Sox-2, ysb0
本發明所述的誘導性多潛能鼠幹細胞(iPS細胞)標誌物鼠c-Myc，基因代碼為NM_001177352.1,全名Mus musculus myelocytomatosis oncogene,別稱AU016757; bHLHe39;Myc2;Niard;Nird.
本發明所述的誘導性多潛能鼠幹細胞(iPS細胞)標誌物鼠Klf4，基因代碼為ΝΜ_010637· 3，全名Mus musculus Kruppel-1ike factor 4 含有業內公知別稱:EZF;Gklf;Zie.
本發明所述的誘導性多潛能幹細胞(iPS細胞)的快速檢測試劑盒，可以通過下述措施例來實現，所述的措施例只是為更好理解，而不是限制本發明的精神實質和內涵。
所述的生物標誌物相關蛋白的抗 原製備
本發明的誘導性多潛能幹細胞(iPS細胞)的快速檢測試劑盒，所述的各生物標誌物的抗原可以按公知的基因重組方法或天然組織提取方法來獲得。所述的各生物標誌物相關蛋白抗原在用作免疫前得先純化，然後與弗氏完全佐劑(第一次免疫)或與弗氏不完全佐劑(後續免疫)一起乳化後用於免疫接種。
本發明所述生物標誌物相關抗原也可以是按所述生物標誌物的胺基酸序列人工 合成的多肽(petites)片段。
本發明所述生物標誌物相關抗原可以是含有所述生物標誌物的胺基酸序列的整 個蛋白或僅含有所述相關蛋白的部分胺基酸序列多肽。
本發明所述生物標誌物相關抗原也可以是含有所述生物標誌物的胺基酸序列中 引入個別胺基酸變異或缺失的序列。
上述生物標誌物相關抗原也可以進一步與載體蛋白(比如BSA，KLH)相偶聯，以提 高免疫原性。
本發明所述生物標誌物相關抗原還可以是基於DNA的疫苗，它可以在免疫動物體 內按基因表達程序產生含有所述生物標誌物相關胺基酸序列的部分或完整的蛋白。
1.本發明的生物標誌物相關抗體的製備
本發明所述的各生物標誌物相關的抗體可以按公知的多克隆抗體製備方法或單 克隆抗體製備方法來獲得。
2.誘導性多潛能人幹細胞(iPS細胞)快速檢測試劑盒的製備例
I)所述的檢測試劑盒含有，但不局限於檢測板、示蹤液、陽性對照、陰性對照、樣 品稀釋液、洗滌液、顯色液。
2)檢測板製備
用PBS緩衝液將兔抗鼠的抗體稀釋至濃度O. lug/ml-30ug/ml,再添加IOOul該抗 體稀釋液到96-孔酶標板的孔內，在室溫下孵育1-4小時或低溫(4-8° C)下孵育10-24小 時；用PBS+0. 1%吐溫20的洗液衝洗酶標板孔3-5次；然後，在酶標板的孔內添加200ul 的2% BSA-PBS封閉液，室溫下孵育1-4小時，再用PBS+0. 1%吐溫20的洗液衝洗酶標板 孔3-5次；
用PBS緩衝液配製濃度為O. lug/ml-10ug/ml的下述4個人生物標誌物特異的鼠 抗體溶液，按酶標板布局表(表I)所示，在酶標板上1-12列的孔內分別添加100微升下 述生物標誌物特異的抗體溶液0ct4(列1，5，9)、Sox2(列2，6，10)、Nanog (列3，7, 11), LIN28(列 4，8，12);
在室溫下孵育O. 5-4小時(或低溫(4-8。C)孵育10-24小時)，用PBS+0. 1%吐 溫20洗液衝洗酶標板孔3-5次；然後，45° C下乾燥，將該盤抽真空密封於鋁袋內，儲存 在低溫乾燥冰箱備用。
3)陽性對照液製備
陽性對照是用純化的並經準確定量的各生物標誌物按實驗要求的檢出濃度製備 (各生物標誌物陽性對照濃度不盡相同)，將陽性對照用各生物標誌物溶解於含1% BSA的 PBS溶液裡配成適當的濃度，低溫儲存備用。
4)陰性對照液
定量用陰性對照液是含I % BSA的PBS溶液；低溫儲存備用。
定性用將陰性細胞溶解液稀釋於含I % BSA的PBS溶液裡配成等同於定性檢測 時細胞溶解液的稀釋度，比如1/10，低溫儲存備用。
5)樣品稀釋液
樣品稀釋液是含I % BSA的PBS溶液；製備將I克BSA蛋白溶解於100毫升PBS緩衝液，低溫儲存備用。
6)示蹤劑
示蹤劑是標記分子與純化的生物標誌物共價偶聯物。所述的標記分子可以是常用 的過氧化氫酶(HRP)、鹼性磷酸酶(AP)、螢光分子、量子點等。如HRP-0ct4示蹤劑可以按 公知的方法製備。比如通過EDC介導羧基與胺基反應來獲得。例將EDC、HRP、0ct4蛋白按 摩爾數20 4 :1溶解於PBS緩衝液，並在室溫反應2小時，然後通過透析去除游離的EDC ;也 可進一步通過HPLC純化獲得高純度HRP-0ct4偶聯物。將示蹤劑溶解於含I % BSA的PBS 溶液裡配成O. 001-0. 1%濃度備用。
7)洗滌液
含O. 1% 吐溫 20 (Tween20)的 PBS 溶液·
8)顯色液
過氧化氫酶用顯色底物溶液將TMB (3，3 』，5，5 』 -四甲基聯苯胺)以O. 2mg/ml的 濃度溶於10mM(pH4)檸檬酸緩衝液，再加O. 03%過氧化氫(H202)，避光低溫儲存備用。適 於測定波長370nm或450nm(用等量IM硫酸終止後)。
鹼性磷酸酶用顯色底物溶液將pNPP (對硝基苯磷酸鹽)以IOmmol / L的濃度 溶於含lmmol / L MgCl2的O.1mol / L 二乙醇胺緩衝液(pH 9. 8)，避光低溫儲存備用。 適於測定波長405nm。
3.誘導性多潛能人幹細胞(iPS細胞)相關的多生物標誌物篩查用檢測試劑盒的 檢測方法例
I)待測樣品製備使用MERCK公司的ProteoExtract全蛋白質組抽提試劑盒(產 品目錄號539779)提取待測動物細胞的總蛋白。基本步驟如下將待測細胞洗滌後放 入-20° C以下冰箱冷凍10分鐘以上，然後取出並加入冰鎮的細胞懸浮液，置於冰上解凍， 用移液槍頭反覆吸噴15分鐘使細胞溶解，將其移到室溫，加入提取劑及晃動提取5分鐘，加 入核酸內切酶BenzonaseR再用移液槍頭反覆吸噴20次，室溫搖動提取30分鐘，高速離心 30分鐘，取上清便得待測細胞總蛋白提取液一待測樣品。
2)按表I上方所示，在檢測板(預包被的酶標板)的列1-12的孔內分別添加 50ul 下述示蹤劑HRP-0ct4(列 I, 5，9)，HRP_Sox2 (列 2，6，10)，HRP-Nanog (列 3，7，11)， HRP-LIN28(列 4，8，12);
3)按表I所示，再分別在A和B行的孔內添加50ul陽性對照液，陰性對照液； 在C，D，E，F，G和H行的孔內添加50ul待測試樣1-18;在室溫下孵育O. 5-4小時或4-8。C 孵育10-24小時;
酶標板布局表1:
權利要求
1.一種快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，其特徵在於，包括用於快速檢測誘導性人或鼠多潛能幹細胞的檢測板、示蹤液、陽性對照、陰性對照、樣品稀釋液、洗滌液和顯色液。
2.一種快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，其特徵在於，包括用於快速檢測誘導性人或鼠多潛能幹細胞的檢測板、生物標誌物標準液、反應液、探測液、樣品稀釋液、洗滌液和顯色液。
3.根據權利要求1或2所述的快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，其特徵在於， 所述的檢測板是固定了 0ct4、Sox2、Nanog、LIN28中任何兩種及以上的人生物標誌物抗原的固相；所述的固相為酶標盤的反應槽、生物晶片的基片、免疫印跡膜、磁珠；所述抗原為所述生物標誌物的整個蛋白或僅含相關蛋白的部分胺基酸序列的多肽。
4.根據權利要求3所述的快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，其特徵在於，所述含有0ct4、Sox2、Nanog、LIN28中任何兩種及以上的人生物標誌物的抗原被合併地包被在酶標盤的同一個反應槽內，或被分別地包被在同一個酶標盤或分開的酶標盤的不同的反應槽內。
5.根據權利要求1或2所述的快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，其特徵在於， 所述檢測板是固定了任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、Nanog、LIN28人生物標誌物的特異抗體的固相；所述固相為酶標盤的反應槽、蛋白晶片的基片、免疫印跡膜、磁珠；所述的特異抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。
6.根據權利要求5所述的快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，其特徵在於，所述含有任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、Nanog、LIN28人生物標誌物的特異抗體被合併地包被在酶標盤的同一個反應槽內，或被分別地包被在同一個酶標盤或分開的酶標盤的不同的反應槽內，所述包被酶標盤包括使用直接或間接的方法將所述的特異抗體包被在酶標盤的反應槽內。
7.根據權利要求1或2所述的快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，其特徵在於， 所述檢測板固定了 0ct4、Sox2、c-Myc、Klf4中任何兩種及以上的小鼠生物標誌物抗原的固相；所述的固相為酶標盤的反應槽、生物晶片的基片、免疫印跡膜、磁珠；所述抗原是所述生物標誌物的整個蛋白或僅含相關蛋白的部分胺基酸序列多肽。
8.根據權利要求7所述的快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，其特徵在於，含有 0ct4、Sox2、c-Myc、Klf4中任何兩種及以上的小鼠生物標誌物抗原被合併地包被在酶標盤的同一個反應槽內，或被分別地包被在同一個酶標盤或分開的酶標盤的不同的反應槽內。
9.根據權利要求1或2所述的快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，其特徵在於， 所述檢測板是固定了含有任何兩種及以上能識別0ct4、Sox2、c-Myc、Klf4小鼠生物標誌物的特異抗體的固相；所述的固相為酶標盤的反應槽、蛋白晶片的基片、免疫印跡膜、磁珠; 所述的特異抗體是單克隆抗體或多克隆抗體。
10.根據權利要求9所述的快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，其特徵在於，含有任何兩種及以上識別0ct4、Sox2、c-Myc, Klf4小鼠生物標誌物的特異抗體被合併地包被在酶標盤的同一個反應槽內，或被分別地包被在同一個酶標盤或分開的酶標盤的不同的反應槽內；所述預包被酶標盤包括使用直接或間接的方法將所述的特異抗體包被在酶標盤的反應槽內。
全文摘要
本發明公開了一種快速檢測誘導性多潛能幹細胞的試劑盒，包括用於快速檢測誘導性人或鼠多潛能幹細胞的檢測板、示蹤液、陽性對照、陰性對照、樣品稀釋液、洗滌液和顯色液，或生物標誌物標準液、反應液、探測液。可在一次試驗中同時檢測Oct4、Sox2、Nanog和LIN28，或Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4多潛能幹細標誌物,從而實現快速鑑定多潛能幹細胞(iPS細胞)。本發明由於能在同試驗中同時檢測多個誘導性多潛能幹細胞標誌物，使得所測得的各標誌物的表達量及其比例關係更具可比性,因此能更準確地用於鑑別或鑑定多潛能幹細胞。
文檔編號G01N33/543GK102998441SQ201210471939
公開日2013年3月27日 申請日期2012年11月20日 優先權日2012年11月20日
發明者鄒潮 申請人:哈德遜(天津)生物技術有限責任公司