一種複方抗病毒噴霧劑及其製備方法
2023-08-04 21:42:31
專利名稱：一種複方抗病毒噴霧劑及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種複方抗病毒噴霧劑及其製備方法。用於預防和治療禽類病毒感染。
背景技術：
禽流感是由禽流感病毒引起的一種急性傳染病，也能感染人類，感染後的症狀主要表現為高熱、咳嗽、流涕、肌痛等，多數伴有嚴重的肺炎，嚴重者心、腎等多種臟器衰竭導致死亡，病死率很高。此病可通過消化道、呼吸道等多種途徑傳播，人員和車輛往來是傳播本病的重要因素。
一些國家高致病性禽流感疫情呈明顯擴大態勢，形勢十分複雜。世界衛生組織(WHO)等國際組織日前發出警告，禽流感疫情有大規模暴發的危險，呼籲各國提高警惕，做好應對準備。在候鳥遷徙季節，全球有三條候鳥遷徙路線經過中國，帶毒遷徙候鳥與家禽接觸，容易引發新的疫情。我國部分地區家禽飼養方式相對落後，活禽流通和跨區域調運頻繁，防控工作還存在一些薄弱環節。中國高致病性禽流感防控任務相當艱巨。
1997年香港的禽流感引發了一次規模不小的流感，在這次流感流行過程中有6人死亡。香港政府當機立斷銷毀了包括雞在內的全部家禽。這次香港流感與1918年發生的流感大流行相隔近80年，經科學家研究，儘管兩次流感流行間隔久遠，但卻有相似之處流感病毒發生的基因變異重組出一種人體免疫系統沒有接觸過的流感病毒新變種，然後流感從動物身上轉移到人身上。
對禽流感的治療，目前尚缺乏理想的特效藥物。中國衛生部印發的人禽流感診療方案中，主要採用奧司他韋(Oseltamivir，達菲)、金剛烷胺(Amantadine)和金剛乙胺(Rimantadine)等抗病毒藥物，輔以解熱祛痰止咳等對症治療及中醫藥辨證治療。
我們採用純中藥提取物莪朮油與貫葉連翹的提取物組成複方製劑，可以為禽流感的預防和治療提供較好的方法。莪朮油中含有莪朮醇，對呼吸道合胞病毒(RSV)有直接抑制作用，對流感病毒A1型和A3型有直接滅活作用。貫葉連翹為雙子葉植物藥藤黃科植物貫葉連翹的全草或帶根全草，其中含有的金絲桃素(Hypericin)和偽金絲桃素(pesudohypericin)具有很強的抗病毒作用，在體外試驗中，能強烈地抑制各種逆轉錄病毒(retrolirus)。這兩種藥物合用能提高療效，同時安全性也較好。
發明內容
本發明旨在提供一種抗病毒噴霧劑及其製備方法。該噴霧劑既可抑制或殺滅體表、物品及空氣中的病毒、細菌等病原微生物，又可經禽類嘴部噴入以預防和治療病毒性感染疾病。
具體技術方案如下由莪朮油和貫葉連翹提取物組成的複方噴霧劑，該組方具有顯著的抗病毒抗菌作用，其具體特徵如下
將姜科植物莪朮提取出的揮髮油精製成有效部位一莪朮油，藤黃科植物貫葉連翹HypericumPerforatum的帶花全草提取物按一定的比例配製成固體或液體或無菌藥物製劑。
1、該複方抗病毒噴霧劑，其特徵在於，配方(重量份)為莪朮油0.1～10％貫葉連翹提前物0.1～10％助溶劑A 1～5％助溶劑B 1～5％抑菌劑0.01～0.5％蒸餾水加至100％2、如權利要求書1所說的噴霧劑，其特徵在於所述的助溶劑A和B選自脂肪酸山梨坦(SPan)類物質、聚山梨酯(Tween)類物質、聚氧乙烯脂肪酸酯類物質、聚氧乙烯脂肪醇醚(Brij)類物質、聚氧乙烯一聚氧丙烯共聚物、十二烷基硫酸鈉、或溴化十六烷基三甲基溴化胺、或其混合物。
3、如權利要求書1所說的噴霧劑，其特徵在於所述的抑菌劑選自尼泊金酯類(甲酯、丙酯)、新潔而滅、氯苄乙胺、苯甲醇、三氯叔丁醇、硫柳汞等。
4、一種複方抗病毒噴霧劑的製備方法，其特徵在於，按以下步驟進行製備(1)稱取權利要求1所述量的莪朮油，加助溶劑A混合均勻，為溶液1；(2)稱取權利要求1所述量的貫葉連翹提前物，加助溶劑B混合均勻，為溶液2；(3)將溶液2在攪拌下加到溶液1中，並混合均勻；(4)將少量蒸餾水溶解後的抑菌劑加入到上述混合液中，攪拌均勻；(5)加蒸餾水至約全量，進行中間體檢測，並調節pH值和含量至產品合格；(6)在1萬級淨化條件下藥液先過濾機粗濾，再用超濾器精濾，然後分裝在帶有噴霧器的容器內；(7)檢驗將分裝後的成品進行產品檢驗，然後入庫。
本發明的積極效果該藥物製劑灌裝在微型噴霧器中以噴霧的形式使用。(1)用於環境空氣消毒滅菌，可以短時間內有效殺滅各種病毒、病菌，對人體無毒、無害、無色染、無腐蝕，噴霧後不需漂洗，也不會產生耐藥性，使用方法獨特，攜帶使用非常簡單，可為人們隨時隨地提供潔淨的生活和工作環境，遠離病毒和病菌的侵害；(2)又可經禽類嘴部噴入以預防和治療病毒性感染疾病。
實施例1處方莪朮油0.3％貫葉連翹提前物0.25％
吐溫802.5％乙醇 2.5％尼泊金丙酯0.02％蒸餾水加至100％配製方法(1)稱取處方量莪朮油，加吐溫80混合均勻，為溶液1；(2)稱取處量的貫葉連翹提前物，加處方量乙醇溶解，為溶液2；(3)將溶液2在攪拌下加到溶液1中，並混合均勻；(4)將少量蒸餾水溶解後的尼泊金丙酯加入到上述混合液中，攪拌均勻；(5)加蒸餾水至約全量的95％，進行中間體檢測，並調節pH值和含量至產品合格；(6)在1萬級淨化條件下藥液先過濾機粗濾，再用超濾器精濾，然後分裝在帶有噴霧器的容器內；(7)檢驗將分裝後的成品進行產品檢驗，然後入庫。
實施例2處方莪朮油1％貫葉連翹提前物0.5％乙醇 5％硫柳汞0.01％蒸餾水加至100％配製方法(1)稱取處量的貫葉連翹提前物，加處方量一半的乙醇溶解，為溶液1；(2)稱取處方量莪朮油，加處方量一半的乙醇攪拌均勻，為溶液2；(3)將溶液2在攪拌下加到溶液1中，並混合均勻；(4)將少量蒸餾水溶解後的硫柳汞加入到上述混合液中，攪拌均勻；(5)加蒸餾水至約全量的95％，進行中間體檢測，並調節pH值和含量至產品合格；(6)在1萬級淨化條件下藥液先過濾機粗濾，再用超濾器精濾，然後分裝在帶有噴霧器的容器內；(7)檢驗將分裝後的成品進行產品檢驗，然後入庫。
抗雞源H5-AIV病毒實驗1材料與方法
1.1 材料1.1.1 試驗用病毒 AIV病毒株A/Chicken/Guangdong/1/2004(簡稱雞源H5-AIV)由華南農業大學獸醫學院禽病教研室分離、純化保存。
1.1.2 試驗用藥物及來源 貫葉連翹提取物溶液的濃度為20μg/mL、200μg/mL、500μg/mL；莪朮油溶液的濃度為20μg/mL、200μg/mL、500μg/mL；樣品①為按照實施例1處方和工藝製備；樣品②為按照實施例2處方和工藝製備。
1.1.3 試驗用雞胚 為10天齡低免疫雞胚，由佛山市墟崗黃畜牧有限公司提供；1.1.4 HA試驗用紅細胞 為0.5％的雞紅細胞，自行配製；1.1.5 試驗用酸鹼 0.1N NaOH，0.1N HCl。
1.2 方法1.2.1 0.5％的雞紅細胞的製備由成年公雞的翅靜脈或心臟採血，放入滅菌試管(按每毫升血加入3.8％滅菌檸檬酸鈉0.2mL做抗凝劑)內，迅速混勻。然後將血液注入離心管中，經3000轉/分鐘，離心10～15min，用吸管吸去上清液和紅細胞上層的白細胞薄膜，將沉澱的紅細胞加稀釋液(生理鹽水)洗滌，再用離心機3000轉/min離心10～15min棄去上清液，再加稀釋液洗滌，如此反覆洗滌三次，將最後一次離心後的的紅細胞泥，按0.5％的稀釋度加入稀釋液(0.5mL紅細胞加99.5mL生理鹽水)。
1.2.2 禽流感病毒雞胚半數感染量(EID50)的測定將病毒原液用滅菌生理鹽水按10-3～10-10稀釋，接種10天齡雞胚，每個稀釋度接種8枚胚(雞源H5-AIV採用了每個稀釋度7枚胚的方法)，0.2mL/胚，37℃孵育，24小時內死亡的雞胚棄去。測定24小時後死亡胚的HA效價，大於4孔為陽性。按Reed-Muench兩氏法計算EID50。
1.2.3 藥物pH值的調整用0.1N NaOH，0.1N HCl將抗禽流感病毒中藥的pH值調為6～8之間。
1.2.4 藥物對雞胚的半數中毒劑量的測定倍比稀釋藥物，設5個度，5胚/組，0.2mL/胚，96小時，另設空白對照組。對胚不致死、不影響胚體正常發育者判為安全。按Reed-Muench兩氏法計算半數中毒劑量，如用藥物原液組胚體均正常發育，可視原液濃度為半數中毒劑量。
1.2.5 藥物對禽流感病毒的抑制作用接種50個EID50(0.2mL)的病毒+最大安全劑量的藥物(0.2mL)，5枚/組；37℃，72小時，24小時內死亡的胚棄去。72h凍胚(24h後死亡的胚則立即凍胚)，測HA效價，大於4孔為陽性。另設病毒陽性對照組。
2結果與分析2.1 禽流感病毒雞胚半數感染量(EID50)的測定 結果如表3.1表3.1 禽流感病毒雞胚半數感染量(EID50)
*為HA陽性胚數/接種胚數2.2 藥物對雞胚的半數中毒劑量的測定 結果如表3.2表3.2 半數中毒劑量的測定
*為正常發育胚數/接胚總數2.3 藥物對禽流感病毒的抑制作用結果2.3.1 藥物對雞源H5-AIV的抑制作用結果 結果如表3.3表3.3 藥物對雞源H5-AIV的抑制作用結果
2.3.5 所有試驗中藥及複方對雞源H5-AIV毒株的抑制作用的結果 根據表3-3的結果，用「+」表示10枚胚中的尿囊液均HA效價均為0，用「-」表示表示10枚胚中的尿囊液均HA效價均大於4孔，用「±」表示10枚胚中部分胚的尿囊液HA效價為0，「/」表示沒用做相應的試驗。表3.4為所有試驗中草藥對雞源H5-AIV毒株的抑制作用的結果。
表3.4 所有試驗中藥及複方對雞源H5-AIV毒株的抑制作用的結果
權利要求
1.一種複方抗病毒噴霧劑，其特徵在於，配方(重量份)為莪朮油 0.1～10％貫葉連翹提前物 0.1～10％助溶劑A 1～5％助溶劑B 1～5％抑菌劑 0.01～0.5％蒸餾水 加至100％
2.如權利要求書1所說的噴霧劑，其特徵在於所述的助溶劑A和B選自脂肪酸山梨坦(SPan)類物質、聚山梨酯(Tween)類物質、聚氧乙烯脂肪酸酯類物質、聚氧乙烯脂肪醇醚(Brij)類物質、聚氧乙烯一聚氧丙烯共聚物、十二烷基硫酸鈉、或溴化十六烷基三甲基溴化胺、或其混合物。
3.如權利要求書1所說的噴霧劑，其特徵在於所述的抑菌劑選自尼泊金酯類(甲酯、丙酯)、新潔而滅、氯苄乙胺、苯甲醇、三氯叔丁醇、硫柳汞等。
4.一種複方抗病毒噴霧劑的製備方法，其特徵在於，按以下步驟進行製備(1)稱取權利要求1所述量的莪朮油，加助溶劑A混合均勻，為溶液1；(2)稱取權利要求1所述量的貫葉連翹提前物，加助溶劑B混合均勻，為溶液2；(3)將溶液2在攪拌下加到溶液1中，並混合均勻；(4)將少量蒸餾水溶解後的抑菌劑加入到上述混合液中，攪拌均勻；(5)加蒸餾水至約全量的90％，進行中間體檢測，並調節pH值和含量至產品合格；(6)在1萬級淨化條件下藥液先過濾機粗濾，再用超濾器精濾，然後分裝在帶有噴霧器的容器內；(7)檢驗將分裝後的成品進行產品檢驗，然後入庫。
全文摘要
一種中藥抗病毒噴霧劑，本發明是由莪朮油和貫葉連翹提取物組成的複方噴霧劑，該組方具有顯著的抗病毒抗菌作用，其特徵是將姜科植物莪朮提取出的揮髮油精製成有效部位——莪朮油，藤黃科植物貫葉連翹Hypericum Peroratum的帶花全草提取物按一定的比例配製成固體或液體或無菌藥物製劑，使用時將該藥物製劑灌裝在微型噴霧器中以噴霧的形式使用。用於環境空氣消毒滅菌，可以短時間內有效殺滅各種病毒、病菌，對人體無毒、無害、無色染、無腐蝕，噴霧後不需漂洗，也不會產生耐藥性，使用方法獨特，攜帶使用非常簡單，可為人們隨時隨地提供潔淨的生活和工作環境，遠離病毒和病菌的侵害。又可經禽類嘴部噴入以預防和治療病毒性感染疾病。
文檔編號A61P31/12GK1961679SQ20051010093
公開日2007年5月16日 申請日期2005年11月8日 優先權日2005年11月8日
發明者黃亞東, 姚崇舜, 李校堃, 項琪, 趙文 申請人:廣州暨南大學醫藥生物技術研究開發中心