任選地與至少一種多酚化合物相聯合的葡糖胺通過口服和/或腸胃外途徑的美容用途以...的製作方法

2023-08-10 10:09:41 1

專利名稱：：任選地與至少一種多酚化合物相聯合的葡糖胺通過口服和/或腸胃外途徑的美容用途以...的製作方法4i^與至少一種多酚^^7相聯合的葡糖臉逸過口月^/輛胃夕卜途徑的美容用途以W目應的組^本發明涉及用於皮膚護理的食品補充劑或功能l"生食品領域。人的皿由三個區室組成，即表層區室(表皮)、真皮和深層區室(皮下組織)。絲那一區室J^上由專門積^^儲存脂肪的細M型(脂肪細胞)構成。皮下組織K物體的能量儲庫。天然的A^主要由三種類型的細J^i且成，它們為角質形成細胞(佔絕大多數)、黑色素細胞和朗格漢斯細胞。這些細胞類型中的"f""種類型通過^ft有的功能而對於^斤起的1^作用作出貢獻。真皮為^C提供了穩固的支持。它也;U^的滋^"素。它主要由成纖維細胞和細l^卜基質構成，細^卜基質本身主要由膠原、彈性蛋白和稱為M(substancefondamentale)的物質組成，這些組分由成纖維細l^^成。在其中i^4在有白細胞、肥大細胞或組織巨噬細胞。真皮還^Uk管和神經纖維穿過。^Ut常^:(即，既非病理的也非瘢痕的M)中，成纖維細l^t於^ih狀態，即非增殖的。正皿原纖維保證了真皮的堅實度。膠原纖維由to匕封固的原纖維構成，從而形￡過十種類型的不同結構。真皮的堅實度很大"-^分是由於在M方向Jito匕橋緊的膠原纖維交織在一^。膠原纖維參與了皮膚和/或黏膜的萍〖生和張力。膠原纖維在不斷地更新，^Sii種更新^r年齡增加而斷氐，這導致真皮變薄。這種真皮變薄還由於病S^因，例如腎Ji^総激素分泌過多、某些病理學狀態或者維生素缺乏(在壞i病中維生素C的情況)。還承認，外來因素對於艦和艦的^^水平狄影響，例如紫外線、菸草或某些治療(例如，糖皮質激素、維生素D及衍生物)。有各種因素導iy^^降解，從而對於皮膚和/或黏膜的結構和/或緊實度出i^斤能預計到的所有後果。雖然抗,^f艮強，但A^原纖維對於稱為膠原酶的某些酶是敏感的。膠原纖維的降財致+M^fe鈹故的她外觀，而更喜i^f和繃緊的組外觀的人類一直以ift就力圖與+M^M^鈹紋的皮j^外^j^f亍+爭。^f、酶屬於稱為金屬蛋白酶(MMP)的酶家族，金屬蛋白酶本身是蛋白7jc解酶(內切蛋白酶或內JIW)絲的成員，所述蛋白水解酶在其活性位點中具有與三個半ft!L^J^一個甲石錄酸相酉維的鋅原子，並iUfc中性pH下降解細船卜絲和W^的大襯^L^^分(^^、彈性蛋白，等)。在生物刷一常廣i^^散布的是，這些酶在正常生理學情形(例如，器官的生^組織的更新)下是存在的，但是弱狄。它們扭中的錄^>乂及它們的激活與許多過禾1^目關，有時A3^理學過程，其牽涉基質的破壞和重新塑造。這或者導致細胞外基質的不受控制的吸除("sorption)，或者相^i^導致出現纖維化狀態。金屬蛋白酶家族由多個經明確定義的組構成，這些《ibl^於它們在結構和底物特異法方面的相々對i^Mi行定義的。在這些組中，可M用於降解纖維膠原的膠原酶(MMP-1或間質膠原酶，MMP-8或嗜中性粒細M原酶，MMP-13iy^原酶3),降解IV型M^或^i可形式的變性皎原的明自(MMP-2或明自A(72kDa)，MMP-9或明旨B(92kDa))。關於溶M蛋白酶(,-3)而言，其呈現出4樹細^卜M蛋白例^^t蛋白(纖連蛋白、層粘連蛋白)、蛋白m^，或者針對^r屬蛋白酶的廣i普活性。後面這些都沒有上述金屬蛋白酶的^^i!lt用。另外，某些蛋白聚糖，例如屬於小的富含亮氨酸的蛋白聚糖(SmallLeucine-RichProteoglycan,SLRP)家族的那些，是^i4尋關注的乾標以用於防止衰老的負面影響和^J^MW性的惡化。議因為，這些SLRP直接^原纖維生成和原纖維周圍間隙的水化。SLRP尤其有助於提高某些生長因子例如TGF-p的生物利用度在SLRP中，可4C^飾膠蛋白絲、光亮蛋白緣、,蛋白^!^^l^蛋白聚糖。jM^卜，某些免疫組織化學觀測結果顯示，在衰老的皮膚中^l^蛋白^t的積聚減少。同樣地，光亮蛋白^t^WI蛋白絲的顯著減少引^^的原纖維生成的M以;S^纖,造的BL。因此，SLRP的蛋白聚糖在M結構的構造組織化中^i^出作用，並因而在調節皿緊實度中^fe^出作用。最後，SLRP不僅對於MMP的作用敏感，而且對於聚集蛋白聚糖酶(agr6canase)或ADAMTS(具有I型血小;^^I蛋白重^f列的解聯蛋白和金屬蛋白酶(ADisentegrinAndMetalloproteasewithThrombospondintypeIr印eat))的蛋白水辦用^t感。已錄艦7jc平上鑑定出了該新型金屬蛋白酶家族的某些成員，特別是ADAMTSl和4，並且已知ADAMTS4切割飾膠蛋白聚糖。長^^露於紫外輻射，特別是A和/或B型紫外輻射，具有這樣的效應，即刺激了膠原酶的表達，特別是MMP-1的表達。il^t誘導的^:衰老的構成部分之一。jtk^卜，在絕經期，關於真皮的主要變化^f水平和真^^度的減少。這在己經絕經的女性中導ft^J^和/或黏膜變薄。因而，所述女性感到"姿狄的皮膚"錄緊的艦的感覺，並且覺察到表面的細線和細小鈹糹i^重。在觸摸時，^C^現出她的夕卜表。^，i^^現出斷氐的柔韋刃性。^，在超重的M中，特別是在體重增加期間，脂肪細胞傾向於i^增大^f^Mp、(!ae^漸增量的脂質)。因而，脂小葉魏膨脹，從而導致形^|#小梁(trav^econjonctive)，它們5^目平行並且垂直於^J3^面。由脂肪細#真^Ji所;^^的強;Ui力i3L^導mU^面變形。在^J!^"面，這種稱為蜂窩織炎的現^J^L為加了軟墊的(capitonn6)夕卜觀，其在多艦現出'膽皮"的徵象。iJ^，在臨床方面，蜂窩織炎4見為皮下和表面組織的構造的變化，^￡#別在於-整水而言M的M,-更堅》更的皿，-更敏感的皿，M至才Mt蜂窩織炎的;^階段而能夠在觸摸時感到疼痛，和/或-由於M深層的粘著力和內聚力的喪失而導致的運動性降低的皮^l且織。如此，這種現l^女性中更為明顯，因為她們有著更細賦的M，其具有呈現出垂直結構的連結小梁，在男性中則相反，他們的連結小梁具有斜的JM目互交叉的結構。蜂窩織炎(常常由於超重和月e^W而加重)尤^:於，和下肢的範圍內("馬褲(culottedechevalT或"佐阿A^長褲(pantalondezouave)"蜂窩織炎)。這些變^^可能導I^L終的瘢痕性變形。^M"皮水平上，伴,脂肪i^只的肥大而出現纖維網，i^h於繃緊狀態，這導致駐留細胞的功能改變。u因為，這種高壓通ita迫毛細血管而阻礙了細胞的交換、靜樂:N^淋e^環，以致該現象得到自動##。最終，纖維變性，並JL^喪失其^5出結構。在生物學方面，當成纖維細胞受到正常的組織應力時，其活i^k^員原、舉性蛋白、糖胺m^、有助於加強^支#^且織的勤出^"。類A:^,負栽了過多脂質的脂肪細to^真^Ji產生應力，這導致過量產生M^、直至纖維化。it^臨^ji4^見為更堅硬和繃緊的M。相M，在體重減輕時，尤其是^f亍柳&t大食制度期間，脂肪細胞的迅速清庫("stockage)導致皮下組織對於支#^且織所翻口的應力顯著減少。因此，真皮不再處於繃緊狀態，結締組織鄉喪失其內聚力成纖維細m於膠原的附著喪失，新膠原(n6ocollag&e)的量減少，舉性蛋白的纖維伸張，蛋白^t解聚，等等。因此，與細^卜M的纖維的相互作用斷氐的成纖維細胞不再從它們的環境中接收活動^i'務覆信號，所述信號控制真皮的J^大分子的合成。jW^卜，不再從其原纖維環境中接收信號的成纖維細^^泌M金屬蛋白酶(MMP)，這是導致纖維結構降解的酶。因而，成纖維細l^f戈謝的這種明顯減慢，以及mmp對纖維的降解，表現為M的粘舉f生氛生物力學特性的改變(緊實度、張力、彈性等的喪失)。通過閱讀上述內容，人們從而會理解，膠原,胺^t^l且織結構，特別;UC^L和/或黏膜的^i口、結構中的重要l"生，以及與其降解特以便由》時抗時間生物學的或光誘導的衰老及其後果的重要性，尤其是對於真皮的變薄和/皿原纖維的降解，後者那種後果導mc^緊實度的喪失，特別是爭嫌的ic^外觀，iij^i;^發明的i^n;斤要與^L鬥爭的。更*^，本發明感絲的是通過口月詠/輛胃夕卜途徑來預防和/或治療衰老的皮膚徵候(signe)，非常特別地是與M的粘萍f生或生物力學棒性的改變相關的皮膚徵候，尤其A^緊實度的喪失；以及預防和/或治療蜂窩織炎。應當注意，在文獻中，被描i^J於對抗峰窩織炎的方法之一在於刺'劇旨解，例M過抑制磷酸二酯酶或通ii^L活P-腎iJ^素受體。在關節病的治療中，主要已知的是口月Mfe用葡糖胺，尤其是以食品補充劑的形式。文獻"Theeffectofanoralsupplementcontainingglucosamine,aminoacids,minerals,andantioxydantsoncutaneousaging:apreliminarystudy",H.MURAD和MichaelTABIBIAN，/0"/77a/o/Tfer/K^o/c^/ca/7restoe/^(2001)12，47-51，才^i了對於一組志願者的研究，所逸志願者通過口月^it徑用含有多種成分的產品進行治療，所iiA分即為乙醯化的D"葡糖胺、確酸葡糖胺、L-脯氨酸、L-賴氨酸、錳、銅、鋅、槲皮素和葡萄籽提取物。結果似乎顯示了對於在治療後所XC^到的鈹紋的數目減少的效應。jH^卜，Mit^部途^f吏用乙醯葡糖胺稱為力映的調理。乙醯葡糖胺也是某些用於文善M外觀的霜劑，特別是潤膚霜中的成分。文獻EP1075836描述了一種^:護3^且合物，其包含N-乙醯葡糖^ft文獻JP2004-083432描述了用於改善鈹紋和她衰老的彈1"生蛋白S^中製劑，其包含葡^t胺、其衍生物或其鹽。最後，文獻JP2004-083434描述了促m^合成的試劑，其包含葡糖胺、^f汴生物或其鹽。本發明的目標在於葡糖^1過口月詠/胃夕卜途徑的美容用途，所述葡糖胺作為用於預防和/或治療由蜂窩織炎引起的光映病症和/或用於維#/或恢JJC^緊實度的活性物質。本發明的目標還在於葡糖胺用於製備藥物組*的用途，所述藥物組^用於口月詠/或腸胃夕卜施用以預防和/或治療衰老的^^徵候，尤其是與^:萎已知使得能夠對M老的皮膚徵候的局部治療。然而，所竭力推薦的局部用活性物質總是不^J^揮作用，狄因為在真皮水平上其的^^滲透^fWi。此外，局部用產品明確g部作用於幹治療的區域，^il些區^U它們可能不均勻地分布，並且需^f子細而v0^^i^^口。在某些情況下，它們可育^m副反應，甚至不適的原因。相狄，口月詠/細胃夕卜途徑具有這樣的優勢，即雖然是^ii些;絲(真皮、皮下iELi口、)中，但卻以總體的方式作用於i^:脅。狄因為，葡糖脅/或^a謝物f^通itii^循環而散布在真^i^中。在本發明的範圍內，腸胃夕卜途徑是指肌內注射、靜脈內注射或者通it^l於全身目的的貼劑的施用。換言之，這個定義旨在涵蓋除了口服(或消化)途徑"卜的所有^f^用方式，只要活性物質通it)6L液循環。作為腸胃夕卜施用，通過用於全身目的的貼劑的施用是優選的。本發明排除了專一地局部用的貼劑。因而，口月^t^iL者通iti佔劑的施用"^"有快iUbNl對無限制的施用方式的優點。相M，由於4^f氐的iU^滲透性，局部途徑並不總是使得能夠在真皮水平J^^揮活性物質的所有特性。Jtb^卜，局部用產品明確:^部作用於幹治療的區域，在這些區域上它們可能不均勻地分布，並且需要仔細而^gj^kii行施加。在某些情況下，它們可能;I^CJ鐵副反應，甚至不適的原因。更特別地，本發明Aii^現，通過口月^it^^用葡糖胺與至少一種多酚化#(特別是源自松##皮的多酚^^)的聯合具有對於艦的有益活性。更特別地，本發明Aii^^到，當通過口mit^^用這種聯合時，其是有利的，尤其是對於維淋/或'Itt^的生物力學特性。口特別地，它使得能夠稀和/或'ltt^膚的伸展性、張力、緊實度、柔韋浙封口/或萍性的棒性，和/或預防和/或治療由蜂窩織炎引起的皿病症。多酚^^物尤其已知具有強大的抗氧化能力，並JIj逸常用於美容品中。還描述了其通過口月&封^4預防心血管疾病中的作用。在文獻F.Sch6nlau，cw邊ecew〃ca//jcn柳/7c，，，Journalofappliedcosmetology,vol.20，n4，2002,第241-246頁中描述了海松樹皮"^,的美^:用途，尤其是以名稱Pycnog6nof進行銷售的提i^。因此，^^發明範圍內，葡糖胺可以與至少一種多酚^tt^^相^:合。因此，本發明還涉及葡糖齡至少一種多酚^^的聯^it過口月git徑的美容用途，所ii^^t為用於維脈/或'l^^的生物力學特性，和/或用於預防和/或治療由蜂窩織炎引起的^^症的活性物質^^。本發明還涉及葡糖胺和至少一種多酚^^的聯^it過口月M^/或腸胃外途徑的美容用途，所ii^合作為用於^iM:痕形成的活性物質〉V給物。本發明還涉及葡糖胺和至少一種多iH^物的聯合在製備組合物中的用途，所i^且^用於口月^/或腸胃夕卜施用以預防和/或治療衰老的^C^徵候，所述衰老的皮膚徵候與皮膚的伸展性、張力、緊實度、柔初性、密度和/或彈f生的喪失相關。本發明還涉賴於口月Mfe用的組^^,其包含葡糖#至少一種源自松樹樹皮的多酚^^4勿的^:合。Jtb^卜，本發明還涉及食品補充劑或功能性食品，其包含有在第一組楊中的葡糖^P在第二組M中的至少一種源自松樹樹皮的多酚^^，以作為用於同時、^f或在時間上4W使用的試劑盒或聯合產品。在本發明的範圍內，"艦的粘彈I"械生物力學棒性"是指組的伸展性、張力、緊實度、柔初性、密度和/或彈性的棒性。"衰老的iu^徵候"是指由於衰老(不論其是時間生物學的和/或外因性的，和細小鈹紋、乾癟的M、爭嫌的力汰、變薄的M、暗;iUL光的力映、M缺4J^沐/或緊^1;並JL^指M的所有內部變化，所述內部變化並不系統^itkJJ見為經改變的夕Np面貌，例如M的^^可內部降解，特別A^I纖維的降解，其由於暴露於紫外絲而引起。該術語淨皮i人為等同於術語"由時序性衰老(chronovieillissement)和/或外因'l^^射口/或激素性衰老51起的皿病症"。"由瘦身和/或;^at欠食制度引起的皿病症"是指這樣的^J!^夕h^面貌的所有變化，例如鬆弛的皮膚外觀，其在體重減輕後可育談多或少變得明顯。^M^發明範圍內，"由蜂窩織炎引起的艦病症"不^A指這樣的她夕NP面貌的所有變化，例如皮下脂肪組織lt^物(capiton)或"^皮"，其可育誠多或少Ate於重量負荷過重的區域例如^M、手臂或腹部中，而ibl指在觸摸時的輛；而"與蜂窩織炎相關的視覺夕卜觀"條蓋了這樣的^:夕MP面貌的所有變化，例如皮下脂肪糹JL^只lt^物或"^皮"。^M^發明的意義上，"貼劑"或"it^c^置"或"a遞送系統"是指4封可這樣的系統，其使得能夠通itit^途徑主動或被動^^文活性物質，即，使得活性物質能夠穿it^膚而轉移至條環。應當理解，在;^發明的範圍內，"通過口月詠/或腸胃夕卜途徑的美容用途"涵蓋了通過口月^AW胃夕卜途^^用的產品的用途，這些產品例如為下面對於口mit徑的'iw所公開的食品補充劑或功能性成分的形式，從而在美學和*方面在^JMc平上產生效應，或者用於美麗目的，例如為了保護M、維持皮m於a^狀態、^^m的外，見、和尤其是美4匕m。葡糖胺葡糖胺是由葡萄糖J^出和胺官能團^a^的^Jj瞎，其尤其來源於海洋。這是一種簡單的糖，^*有低襯量，並且以白色晶體的形^4在，在水中可溶，具有式(1)或(2)。formulaseeoriginaldocumentpage13葡糖胺可以M丁質開始獲得，幾丁質是一種複雜的、生物可降解的並且如同纖維素一樣存在於自然界中的天然糖。幾丁質是甲殼類動物例如蟹、壞或螯壞的甲殼(外骨骼)的主要^a^A分。因此，幾丁質為由葡糖胺單^i且成的海洋聚合物。在幾丁質中，超過60%的總葡糖胺是以乙sbi匕的形^C4在。幾丁質的化學式如下formulaseeoriginaldocumentpage13還存在另一個可以用於獲得鹽酸葡糖胺的幾丁質來源。其涉AAitit^菌黑麴黴(A/^er)的發酵而產生的生物量中獲得的幾丁質，所述黑麴黴屬於麴黴屬(A/ei^7/iAy)和黑色種在商業上，葡糖胺可以以^t不同的鹽形式(石皿葡糖胺，石皿葡糖胺氯化鉀IJL(2KC1)、石爐葡糖胺氯^f^4內U(2NaCl)、鹽酸葡糖胺(HC1))、乙醯化形式(N-乙醯基-葡糖胺)或聚^式ijt^供。鹽的性質常常取決於所採用的獲得方法。然而，最廣泛4M和研究的形式，即石爐葡糖齡鹽酸葡糖胺，相應於最易i^的鹽。因此，在本發明範圍內，應當S^，術語"葡糖胺"包括其所有的成鹽、乙醯4沐/或聚合物的形式。在葡糖胺的成鹽形式中，可"IC^硫酸葡糖胺、減酸葡糖胺氯化鉀JJt、石爐葡糖胺氯^4內JjL和鹽酸葡糖胺。下面作為^^，H兌明，"^ii了獲得方法的實例。石M鹽形式的葡糖^^如可以^殼(富含幾丁質)開始來製備。在該獲得方法中，第一步包括在鹽酸存在下的敏醉，所述^^在真空下於95'Ci^f亍。7jC解的^Ht^:於原^t料。依然在該獲得方法中，隨後用活性炭對^介質進行脫色，^過的過程中所g性炭截留可吸附的有機雜質。在真空下逐步絲後，該在水解後獲得的鹽酸葡糖胺在冷的糾下經數小時^t^結晶。i^慮後，用酒^^ft洗塗。最後，該獲得方法的最後一步包括在7j^目中用減酸鉀中和鹽酸葡糖胺。然後，蒸發^^稱，並將獲得的固M真空下於60'C乾燥數小時。當4^J源自前述真菌的幾丁質代替源自壞殼的幾丁質時，還需要進4t7jc解以產生葡糖胺。^Li^地，才M^^發明的組合物以50mg-3g/天，^i4^200-2000mg/天，更M地250-1500mg/天的日劑量提供葡糖^f^物。M地，在本發明的組合物中，葡糖胺的含量，相對於所述組合物的總重量而言，為O.0001-80重*%，50重*%，更^Li^10-20重il如下面的實施例1所種，H兌明的，4^發明人已經證明，葡^t^^'激了^f、的合成以;SJt:明質酸受體CD44的^Jt。特別地，在it^r面，下列內容#成了本發明的^^分葡糖^it過口服和/或腸胃外途徑的美容用途，所述葡糖胺作為成纖維細^^謝的激活劑或^f、^^成的'激活劑，以及作為重建表皮內環*^急定的鍋進劑。jtt^卜，實施例2舉例說明了硫酸葡糖胺絲^fia^分降解的活性，因為它斷氐了MMP3的扇Ji7jc平。因此，特別地,本發明還旨在葡糖艦過口月^/胃夕卜途徑的美容用途，所述葡糖,為MMP3的表達的抑制劑。itb^卜，實施例3證明了葡糖胺對於成纖維細胞的細胞骨架的刺^^，因為它使得能夠改善成纖維細胞的收縮特性，這是影響M緊實度的一個因素。本發明還旨輛過口月詠/胃夕卜途徑的美容用途，其中作為有助於成纖維細胞的收縮性的試劑。最後，實施例4顯示了碗酸葡糖胺對於與凼決緊實度相關的真^^標誌物的表達的影響。本發明還旨扭過口月詠/胃夕卜途徑的美容用途，其中作為刺^J^標誌物的表達的試劑，所ii^:標誌物尤其選自波形蛋白、飾膠蛋白絲、,蛋白絲、^41^蛋白^l^透明質^^il(hyaluronsynthase)。特別地，所有這些^i兌明了，葡糖^^吏得能夠對於皿的細I^Ril^生物力學特性，非常特別是對於她緊實JL/生作用。因此，本發明還旨在美容方法，其用於m4^內環彪t、定的重建，和/或用於限制真J^tia^A分的降解，和/或用於斷氐MMP3的表ii7jc平，和/或用於刺M^纖維細胞的細胞骨架，和/或用於改善成纖維細胞的收縮棒性，和/或用於增加^^標誌物，尤其是選自波形蛋白、飾膠蛋白絲、Wl蛋白緣、^!^蛋白^l^透明質^l^的^:標誌物的^ii，並由此減少蜂窩織炎以W目關的視覺夕卜觀，和/或維#^/或'1^^緊實度，所^法^it過口月詠/ilM胃夕Nt^^)^fi^^多a^^4^^葡糖^i組^^。才w—個脅的實施方案，本發明更特別地涉及葡糖艦過口月詠/胃夕卜途徑的美容用途，所述葡糖麟為活性物質，所g性物質用於通過合錄/或保護葡糖胺m^蛋白絲，更特別是小的富含亮氨酸的蛋白緣(SLRP)的作用，來預防和/或治療由蜂窩織炎引起的^^病#/或用於^#^口/或'1^皮膚緊實度，本發明還涉及葡糖艦過口月詠/胃夕卜途徑的美容用途，所述葡糖辦為活性物質，所鋭性物質用於w^/或恢^^的生物力學特性，尤其是維脈/或'tt^的伸展性、張力、緊實度、柔韋刃性、密度和/或舉f生的棒l"生。這些與皮膚的伸展性、張力、緊實度、柔韋刃'I"沐/或舉性的特性的喪失相關的病症，尤其可以由時序性衰老、外因〗錄老(特別A^老)或激素'I"錄老(尤其是絕經前或絕^女性的成熟艦的激素性衰老)引起。因此，葡糖艦過口月^/或腸胃夕卜途徑的應用還可以有利iikit合"f^防和/或治療艦病症，尤其是由絕經引起的艦緊實度的喪失。葡糖皿過口月詠/或腸胃外途徑的應用還特別適合於預防和/或治療前述的由^f亍柳e^/或瘦身飲食制度期間所^!^到的體重減輕51起的皿病症，即與皮膚的生物力學棒性喪失(尤其狄膚緊實度的喪失)相關的病症，例如支#^且織鬆懈，A^張力和萍l"生喪失。因此，本發明還涉及葡糖胺用，防和/或對抗M病症的美容用途，所述M病症尤其是由體重減輕引起的M緊實度的喪失。如前所述，可以在^f亍翻e^:食制度期間觀蕃到這種體重減輕。因此，通過口^^/或腸胃外途徑攝取葡糖胺還使得能夠獲得艦的張力和艦的鬆弛外觀的改善，尤其是^it循/劃e^食制度的重量負荷過重的女性中。因此，葡糖m過口月詠/輛胃夕卜途徑的應用可以在瘦身或;期&t欠食制度的該情況下幫助減^i且織充血。最後，葡糖胺通過口月M^/或腸胃外途徑的應用適合於預防和/或對抗由蜂窩織炎引起的M病症，尤其是預防和/或治療與蜂窩織炎相關的視覺夕卜觀，例如皮下脂肪組織lt^物和"^皮"，如上所描述的。i^i因為，通過口月詠/或腸胃夕卜途徑攝取葡糖^f吏得能夠在具有蜂窩織炎(處於不太5t^非常晚的階段)的女性中改善在蜂窩織i^Ui所M^到的橙皮外觀(皮下脂肪Mi。、^^物)，尤其^^在;Uil7K平上，並JU!i可以減少，甚Ji^免通常^^到的鬆弛的皮膚外觀，尤其是在手臂和腹部水平上。口服攝取葡糖^i使得能夠減輕蜂窩織狄膚的在觸4莫時的。因此，本發明延伸至葡糖^t過口月詠/或腸胃外途徑的美容用途，所述葡糖麟為用預防和/或對抗由蜂窩織炎引起的^^痛或夾絲(pincement)的活性物質。因此，本發明ii^伸至葡糖胺用預防和/或治療與蜂窩織炎相關的視覺外觀(例如，皮下脂肪組織(t^物和"^皮")的美容用途。jH^卜，本發明ii^伸至葡糖m過口月^/i^胃夕卜途徑的美容用途，所述葡糖贈為用於^fe/W成的活性物質。^，本發明涉及葡糖胺用於製備組^吻的用途，所i^且^的用於口月詠/或腸胃夕卜施用以預防和/或治療衰老的^CI^徵候，尤其A^)於W^/或'1^Ij^膚的生物力學特性，更特別，於預防和/或治療與M萎縮相關和/或與變壞的M^、合^目關和/或與MMP3it^j^目關的M病症。才Mt本發明的一個實施方案，葡糖胺可以與至少一種多酚^^/相聯合。多酚^^聚集了一大家族的^^，所述^^非常廣泛存在於植物界中。因此，尤其^^直物中發現它們，WM'J果實。在多酚的類別中，尤其可以4€^類黃酮、原花色素類、木脂體類、M素類、萊類、香豆素類。因此，在本發明的範圍內所使用的多酚^^可以以分離的形式/i^Ml者以所有下i^斤述的形M在。在本發明的範圍內，多酚^^物尤其可以來源於選自下列的植物提取的綠茶提,；葡萄例如歐洲葡萄(F/〃sr/"/屍era)的提,；松樹，尤其是松樹樹皮的提,；蘋果提，；歐洲^fl提,；啤酒;t^,;番石榴提城；T^T提城；M(bois)例如慄樹、、七葉樹、##的提城。因此，在本發明的範圍內，術語"多酚^^"ii^伸至富^ii些多酚化a的植物提W本身。類黃酮^^了主要的一組多酚。JL^素多酚就其本身來i^類黃酮的一個亞組，所述類黃S同還包^"烷酮類、黃酮類和花色素苷類以及黃酮醇類。在作為本發明第一個目標的組合物中和在作為本發明第二個目標的食品補充劑中所存在的多酚^^源自松#^皮。這樣的源自松Wt皮的多酚^^所具有的酚三聚體^*，相對於多酚化合物的總重量而言，有利地可以為5-25重Jt。，^i^t10-20重"￡%。同樣地，所述源自松樹樹皮的多酚^^所具有的多酚二聚體M，相對於多酚^^#的總重量而言，有利地可以為5-25重堂/。，M地10-20重*%。所述源自松^t皮的多酚^^還有利地包含，相對於多酚4^物的總重量而言，2-15重*%，例如5-10重4%的阿魏酸、對-香豆酸、鈉，酸和原兒茶酸類型的,。因此，對於實祐本發明來說特別有利的多酚^^可以具有下列特徵:tableseeoriginaldocumentpage18J^卜，才娥在其第一^第二目標方面的本發明實施方案的一個變化形式，所述源自松樹樹皮的多酚4^物來自海松提取物。這樣的海水^^取物尤期笛述於下述文章中"AreviewoftheFrenchMaritimePineBarkExtract(PYCNOGENOL),aherbalmedicationwithadiverseclinicalpharmacology",P.ROHDEWAU)，InternationlJournalofClinicalPharmacologyandTherapeutics,Vol.40-No4/2002(158—168)。才娥本發明的一個M實施方案，特別是在實施本發明第三個目標的範圍內，多酚^^是如下iL^義的JL^素多酚，並且##十^#別^1的實施方案，其為源自松Wt皮的多酚4^物。JL^素多酚的亞組包括4^這樣的^^，所述^^常MiiL分離自植物例如TT、茶、葡萄及^^f生物、松樹(海松(/V/2"s鵬r/〃鵬))、乂L^f、某些水果，並JX現出可變的聚合度。!^元，樣為JL^素或A^，是3，5，7，3'，4'-五羥基-2，3-二氬-2-苯基-色烯，其可以為順式狄式形式；^JL^素是絲構體，並且也可以以順式il^式的形iC^在。JL^素多輕包括絲單元(牟本)的樹異構體，以及j^^物(或原花青素類)或多聚物(鞣質類x更特別地，才W本發明有用的^L^素多齡自JL^素、&1^素、沒襯JL^素、4^殳食子^l^"素，以及它們的鹽、它們的酉旨和/或它們的衍生物(以單M^^物的形式)。當^^H^^物時，其有利地包含2-14個J^l元，尤其是2-10個。%，它們的聚合度小於或等於5。特別地，^^I-^:稱為原花青素類(proanthocyanidoles)或原乂L^(t類(procyanidols)，也稱為花色素苷類前城原乂1^##^^物(OPC)的化合物。輛過口月^^剡^]後，這些寸^^物柳分降解，從而#^文出*。這些多酚可以與糖例如葡萄糖、半孝源、鼠棘、半享源醛酸相綴合。在本文中，才鵬本發明有用的>>1^素多酚尤其是指#^和不同的具有2-14個單元的低聚物(如前i^斤定義的)的任，何比例的濕^。在原JL^類或原JL^類^^物家族的非常廣泛存在的並且其^U在本發明的範圍內特別有利的二聚體中，可以4C^f花"f^Bl、原花青素B2、原花MB3或者原花青素B6或B7。原花青素B1、B2、B3尤其存在於可可、蘋果、歐洲越橘、七葉樹、哞酒花、番石榴和##的植物提取物中。因此，除了松,皮提,^卜，還優先考慮在尤其是實祐本發明第三個目標的範圍內^^I這些植物提,，所ii^發明第三個目標即為葡糖#至少一種多敏^^的聯合的美容用途，所ii^合作為用於維淋/或'ltt^的生物力學棒性的活性物質^^。to^，才鵬本發明的組合物以1-1000mg/天，^f^地10-150mg/天，更^i^30-100mg/天的日劑量提供多酚^^。^，#^本發明的組#包創目對於所述組^^的總重量而言含量為0.0001-50重*%，M地0.05-10重:f4/。，更^it^0,5-2重*%的多酚化*。作為本發明的目標，葡糖胺和至少一種多酚^^的聯*為活性物質混M通過口^^/或腸胃外途徑的美容用途，使得能夠維#^/或'^1^的生物力學特性。特別地，將葡糖#至少一種多酚^^物的聯合用於維#/或'1^的伸展性、張力、緊實度、柔韋刃性、密度和/或斷生的特性。才娘本發明的聯合所能夠預防和/或對抗的M病症可以由時序性衰老和外因性衰老(特別A^J:老)引起。本發明還涉及葡糖胺和至少一種多酚^^/通過口月M^/或腸胃外途徑的美容用途，所述葡糖絲至少一種多酚^^作為用預防和/iW抗由體重減輕引起的組病症的活性物質';t^^。如前所述，可以^y亍^M大食制度期間，膽到這種體重減輕。葡糖胺和至少一種多酚^^的聯^￡使得，尤其是在患有蜂窩織炎的女性中，除了獲得^張力的改>#^卜，還能夠使皮下脂肪^^只lt^物變平滑。因此，減少甚jj^了在M(尤其是;yiy^)上所M^到的橙皮夕卜觀，如同在^m^e^大食制度的個體中通常xt^到的(尤其是在手臂和腹部水平上)緣的艦外觀一樣。因此，葡糖胺和至少一種多酚^^的的這種聯合可以在瘦身或;^&t欠食制度的該情況下幫助減^^且織^L。JJt^卜，這種聯^j吏得能夠對辨窩織炎的視覺夕卜觀，例如皮下脂肪組織隆起物和'膽皮"。因此，本發明ii^伸至葡糖旨至少一種多酚^^的聯^it過口月1^/胃夕卜途徑的美容用途，所賴途為用預防和/或治療與蜂窩織炎相關的視覺夕卜觀，例如皮下脂l^r糹且織f^^物和it皮"。最後，本發明涉及葡糖旨至少一種多酚^^通過口月^/胃外途徑的美容用途，所述葡糖齡至少一種多酚^^作為用於^iML痕形成的活性J^卜，本發明的目標還在於葡糖胺和至少一種多酚^^的聯合在製備用於口月Mfe用的組#中的用途，所^^且*用於預防和/或治療與M的伸展性、張力、緊實度、柔韌l封口/或萍性的喪失相關的衰老的皮膚徵候。本發明的目#^於葡糖#至少一種多酚^^的聯合在製備用於口服和/胃夕卜施用的組#中的用途，所1^且#用於減少由蜂窩織炎引起的在觸摸時的。如下文的實施例6和7所舉例說明的，本發明人已經證明，包含葡糖#源自松##皮的多酚^^物的組合物，一方面可以通過增加的對於細^/R謝的賞另一方面可以對於與M的生物力學棒性(特別^c^緊實度)相關的真^Jc^^標誌物的表ii^^t用。因此，包含葡糖胺和源自松##皮的多酚^^物的組#特別適合，防和/或治療與皮膚的伸展性、張力、緊實度、柔,別沐/或萍l"生特性的喪失相關的病症，特別是由時序性衰老所引起的(尤其是絕經前或絕經後女性的成熟皮膚的時序4錄老)，以Aii有由^老所引起的。因此，該組^Mfeit合，防和/或治療由絕經引起的皿病症。因此，本發明還涉及##本發明的包含葡糖胺和源自松##皮的多酚^^物的組合物的美容用途，所i^且合物用於預防和/或治療由絕經引起的M病#。、；,、，—、、'、、或治療前述的由^f亍減月e^/或瘦身飲食制度期間所，Ji^到的體重減輕引起的M病症，即與^j坎的生物力學棒性喪失相關的病症，例如支#^且織鬆懈，M張力和舉l"生喪失，以及皮下脂肪組織^^物的可見性增加。jtb^卜，包含葡糖胺和源自松樹樹皮的多酚4t^的組^i^it合i^防和/或治療與蜂窩織炎相關的視覺夕卜觀，例如皮下脂肪la^只^^物和"^皮"，如上所述。最後，所iii且楊適合於^^痕形成。這種特性尤其是依據本發明人的這樣的，膝結果而得出的，即在實施例i中食品補充劑對于波形蛋白的^增加具有有利作用。才Nt本發明的組^^可以是美容組^、M病學組^^或藥物組^^。在本發明的意^Ji,美容組^^是指這樣的組^^,其能夠在美學和a方面在M水平上產生效應，或者用於美麗目的，例如為了保護皿、維持皮Wt於良^f狀態、^^Mcj^的夕卜觀、和尤其是美4匕M。《且^可以以營^A品的形式^4在。才娥本發明通過口月詠/胃外途^^用的本發明組*，可以以^f可依照所涉及的施用方式而通常^jf)的蓋侖氏形iC4在。在口月git徑的情況下，才鵬本發明的組#可以在食品補充劑或功能性食品類型或者藥物組合物類型的製劑中使用。特別地，這樣的組^可以以下列形式存在M嚢或明皿嚢(g61ule)、粘絲"-^的明皿囊(g"ulebanderone)、繊刑、幹或液^L劑、片劑、用於稀釋的粉末或口服^^劑，或者^4貞域技^A員已知的^H可^形式。所述組^Hii4^可以包含合適的製劑賦形劑，例如著色劑、甜味劑、填充劑、#^'J、防腐劑等。才娥一個微的實施方案，可以將活性成分摻Af'J食品M中以生產功能十生食品例如壓J^食品(barrealimentaire)，強4匕食品例力口油，人i^奶油，壓縮的粉狀物，纖^者以在飲料中的孝誠液形式。ilt^卜，所i^且，還可以包含有在歐洲在食品補充劑方面得到批准的^^物，例如^lL化劑、維生素、礦物質，如在ECDirective2002/46中所描述的。M過腸胃外途徑進行施用的情況下，才娥本發明的組合物可以以可注射溶液或貼劑或iM:遞送系統的形式存在。才MI本發明的一個有利的實施方案，^^]單獨的或者^^與至少一種多酚^^相聯合的葡糖胺的所i^且合物，還包含至少一種M老營養活性物質、光保護營養活性物質、絕經期營養活性物質、和/或'劃巴營養活性物質。在M老營養活性物質中，尤其可以拔^JI"^^IU匕劑、具有抗自由差^特性的營養物和內源性^IUtil的輔因子維生素A，C，E，類胡蘿蔔素例如番茄紅素，葉黃素類，異黃酮類，某些礦物質例如鋅，銅，鎂，硒，硫辛酸，輔酶QIO，超氧^^歧^SI(S0D)或牛嫩。在這些絲老活性物質中，尤其可以^Ma物來源的脂質中提取的不鬼^il分，真蘆薈(Aloevera),天然或7jc解的海產^f、，富含co-3月旨肪酸、co-6月旨肪酸(其中包括Y-亞艦)的植物油或海產油，等等。在光保護營養活性物質中，尤其可以^:^^化劑和抗自由基劑維生素A，C，E、類胡蘿蔔素，葉黃素類，某些礦物質例如鋅，銅、鎂，硒，輔酶Q10,^^ft^歧4tSl(S0D)，益生菌。還可以^^具有水^^者免疫調節棒性的營養成分益生菌，白絨多狄(Polypodiumleucotomos)的提糊，富含co-3月旨肪酸、co-6脂肪酸(其中包括Y-亞員)的植物油或海產油。在本發明的範圍內，當將葡糖胺與至少一種源自松#^皮的多酚《^^相不同的B多SM^^作為^卜充。在對於絕經的臨席4i候(例如潮熱等)具有活性的營養活性物質中，尤其可以^^異黃酮類、木脂體類、dhea、，提:^、a^^!CW、啤酒;W*、鈣、鎂、蛋白質7jc,、富含co-3脂肪酸的植物油或海產油。在用於減月&4頁域的營養成分中，尤其可以M:綠茶(尤其以提取物的形式)、白茶、錄、灰色茶、5!4^保斯茶(rooil)os)(插為紅色灌木茶)、巴拉圭茶、七葉樹的果實、可樂果、剩咽、可可鹼、對羥福林、菠蘿蛋白酶、;^黃、酸橙(Citrusaurantium)、4丐、火;^(Hoodia)、^>黃(Garcinia)、殼緣、植物纖維(仙人掌、蘋果、鳳梨，等等)、茴香、黑茶薦子、魏菊、黑蘿蔔(radisnoir)。^:^aw^l特別4^v感興趣的，因為其天然咱"有類黃酮，特別^L^素類和4^殳食子Jt^素沒針酸酯(EGCG)，其尤其賦予抗氧形射生。才Nt—個M的實施方案，本發明涉及用於口月Mfe用的組合物，其包含葡糖胺、至少一種源自松樹樹皮的多酚m^和綠茶提取物的聯合。才—個更加具體的實施方案，同樣的這種組^/還包^丐，例如以碳酸鈞、海洋來源的鈣、乳酸鉀^y^^^的形式。根據另一個實施方案，本發明還涉及葡糖胺、至少一種多酚^/^物以及任^k^丐的聯^t過口月詠/輛胃夕卜途徑的美容用途，所ii^^ft為用於維淋/或'1^I^J統的生物力學棒性，和/或用ffl防和/或治療由蜂窩織炎引起的M病症的活性物質;^^。根據這兩個實施方案，在所^^且合物中所存在的綠茶的^J:可以為50mg-3g，尤其是300-800mg，該組^H^k^天"^'進^^用。依然還是才娥這兩個實施方案，在所iila合物中所存在的鈣的^i:可以為300mg-2g，^i^300mg-1g，^^#天一劑。##本發明，涉及這樣的食品補充劑，其包含有在第一組合物中的葡糖胺和在第二組^的中的至少一種源自松##皮的多酚^^,以作為用於同時、分開或在時間上4^H吏用的試劑:tr或^L"^產品；可以il才羊配製所ii才娥;^發明的食品補充劑，即使得所述兩種組合物以相同的形式或者以不同的形式^4在，例如逸自上i^斤述那些形式的形式。這樣的試劑盒尤其可以存在於同一個包裝中，或者存在於兩個不同的&^(每種組"^一個^)中。下列實;^例#^外說明了>^發明。實施例1:葡糖胺對於l^f、合^CD44M的影響一一^^外植體體外模型該研究的目的是證明葡糖胺(以減酸鹽的形式)對於^JC標誌物(CD44)和l^f、合成的影響，所述CD44可能參與了皮膚萎縮的發病機理，所i4^:萎縮A^衰老的主要^J見。為此，採用這樣的培養方法，其使得A^能夠在接近體內的代謝耕下##存活(*為50-60歲的受M)。以血漿M(5jliM)向培養基中添加葡糖胺水溶液，從而使得能夠才勤^1過口月詠/胃外途徑的施用。在上皮細^7jC平上，檢查了透明質酸的M受體(抗"CD44抗體)。在真皮水平上，評階了由成纖維細l^斤進行的膠原的新合成(生物化學測定法)。在絕經的女性(來自橫為50-60歲的女性受絲的8名不同的提供者)中，在整形外^"f術(乳房isl^部整形術)^獲得^^碎片。將碎片方在插入物中，而插入物本身懸浮^ti在培^L^上。在孔底部中添加培養基，藉助於多孑U^(12jum)在所述兩個區室之間通ii^慢擴散而;^4^多。從第0U第10天，每天向^J^碎片的培養基中添加葡糖胺。為了分析CD44，在第4天獲取一系列的M。為了對^^合^ii行^f:測定，在第10天!^取第二系列的^L'分析在上皮7jc平上的透明質酸受體(CD44)的免疫組織化學證明可以證實80-95kD的跨膜糖蛋白，即CD44(H-CAM，Novocastra，稀釋至1/300)，其是在上皮水平上的透明質酸受體。該免疫^!則藉助於CSA試劑盒(DAK0)來進行，並且通過AEC(3-^ij^-9-乙基-卡坐)以紅色來揭示。半定量^^f吏得能夠明確表明免疫^i己的強度(得分0至4，從陰'fifij強烈)。i^^助於下列4^來確定形貌學(topographie):,粉0:沒有銜己"粉1:稱己了J^，*粉2:械了^^和上皮的三分之一，#^3:才科己了l^g:和^^(corpsmuqueux)的三分C，絲4:才靴了整個上皮。jj^)生物4匕學方式的l^t的^i:測定在^#存活10^,於+4。C在含有胃蛋白酶的0.5M乙^^液中將A^L碎片SKC消化過夜。該方法使得能夠回收新合成的粉承。在用Potter進行研磨後，於540nm處通it^鐠色度測定法來^h膠原的量(|ig/ml):在與天狼星紅染料(SircolCollagenAssay,Interchim)特異性結合後^j^則酸可溶〖:i^^。為了比較不同的結果，將膠原的量與樣品的總蛋白1^目關聯。於562nm處採用分it^A法來測定蛋白質的泉復(BCA測定法，Pierce)。最後的結^示為"Mg^^/mg蛋白質"。結果在上皮水平上的透明質酸受體(CD44)的免疫組織化學證明結絲示錄l中。當存在葡糖胺時，注意到了CD44的才射己強>1^增加，4粉為3.4,而對照她的4粉為2.7(p=0.02)。tableseeoriginaldocumentpage25*:相對於對照M而言的統計學M差異(財Student檢驗，p<0.05)採用生物化學方式的膠原的^i:測定在葡^t^4在的情況下，M^的^^W^增力口282yg/ml(p-0.031)，與其中7jc平為177.5ug/ml的對照皮膚相tb^而言。結論在測試條件下，以5)iM進^^用的葡糖胺^^刺激了l)由真皮成纖維細l^斤進行的^^合成；以及2)透明質酸受體CD44的表達。因此，葡糖胺看^^是成纖維細I^C謝的激活劑以及重建表史內環傲惑定的^ii劑，上iiit些是通常,*而改變的員。實施例2:葡糖胺的抗降解活性的*這些微的目的是"if^疏酸葡糖胺對於抗真皮大襯降解的活性(抗"MMP活性)和對於它們的收縮特性(對於細胞骨架的作用)的影響。通過測量三維^f、皿的回縮iM^Mf^對於成纖維細胞的枳掩險性的影響。成纖維細胞的培M將通it^正常年輕供體的皮膚外植體開始進行生長而^的人成纖維細胞，按照常M^含有10%胎牛血清(FCS)、抗壞xjk酸(50jug/ml)、青黴素省黴素(100U/ml)的DMEM(其在該報告的其餘部分中稱為DM服-FCS)中進4辨養。通iW亞匯合培絲進行胰蛋白酶消化並從1佛(boite)分成3棉，來將它們進^^廣增培養。^]這些培，，M第14次傳代。定期iW它們進行測試以確保不存在支原體。溶液的製備和滅菌以(CA4N05)2S04,2KC1的形iC^供石滅葡糖胺(葡糖胺.S04的滴度74%)，商標為Bioiberica，jJ^馬F0379，批次4/0001。通#Acrodisc上it^Muti!j!^13.6mg/ml蒸餾水的^"^ii行滅菌，^H絲於-20。C。2.1.細l^性在DMEM-FCS中，在24孔多孑L平板中，以25或50x1(f個細胞/孑U^t成纖維細胞。在附著6小時後，向培養物中添加20n1的徐測試活性物質的逐，鄉。在接觸24小時後，更換培養#活性物質。在培養48小時後，除去培養基，用生理鹽水洗滌細胞層兩次。在螢光計"Gemini"中，藉助於X5^yE胺(bis-benzimide)試劑，通iM焚光測定41^測量DM來確定細胞的數目。以一式三斜'J備培;^，並J^f於每個培^進行兩次測量。對照培##僅接受溶劑。石誠葡糖胺在0.5、1、5、10、20和40x血漿i^t，即3.4、6.8、34、68、136、272jig/ml培養狄，測^滅葡糖胺的毒性。tableseeoriginaldocumentpage27對於石滅葡糖胺沒有M^到^f可細l^lt^應，即佳在代表了40x血漿濃度的MJ處。在34iag/ml的、;MUtM^^到細皿目的增加(p=0.04，Student檢驗)，ii4明了對於成纖維細l^曾li4^的輕微的刺^應。2.2.石M葡糖胺對於MMP活性的影響(mRNA-在塑料上的單層A^J^纖維細麟型)1.培養物的製備和總RNA的純化以2x105個細胞/6cm皿(disque)，將成纖維細^^種在DMEM-FCS中。在附著18小時後，用包含下ii^分的DMEM-FCS來更換培養基a)單獨的石誠葡糖胺-[血漿細2x(n=2)5x(n=2)10x(n=2)-對照(n=3)2.通過RT-PCR來測量參考RNA(28S和GAPDH)和特定的4言4吏RNA通過測量28S核糖體RNA來測定在將用於測量特定mRNA的M中存在的RNA的總量。將該RNA溶液等分，並冷凍於-80°C，直到通過RT-PCR來測定特定mRM的含量時。將mRNA的結^4示為"任意單位(UA)/28S的#"。對於兩個或三個^f的培養物以三次重複進行測量。MMP3:溶総蛋白酶l，其負責蛋白^^細0卜総的^iSL^分的tableseeoriginaldocumentpage28通過石爐葡糖^i秀導了證3的mRNA水平的錄斷氐(p<0.005)。結論:葡糖胺斷氐了,3的表ii7jc平。i^4明了MiCi^糹iLW^分(特別是蛋白聚^Mt胺彩瞎)降解的活性。這些結果證明，葡糖胺是能夠保護真皮大分子的試劑，所述真皮大分子的文變促成了皮膚緊實度的喪失或者由蜂窩織炎51起的M病症的加重。實施例3:;爐葡糖胺對於成纖維細胞的麟棒l"生的影響在細菌學亞中，將經純化的天然膠原的無菌溶液與成纖維細胞懸浮液、DMEM-FCS培養^^待測試的產品相混合。將該^^物帶至37。C，這導im原聚合，並且形成了限制成纖維細^JL漂浮在培養基中的三維^f、皿。細胞附著在膠原纖維上，並且在成纖維細胞的細胞骨架的收縮活性之下，該^^逐步回縮。這種^^通常被稱為"回輸hiM^艦(RetractingCollagenGel)"或RCG。下述文章描述了此類l^^^的用途CharlesA.Lambert等入"AnInterleukin-lloopisinducedinhumanskinfibroblastsuponstressrelaxationinathree—dimensionalcollagengelbutisnotinvolvedintheup-regulationofMatrixMetalloproteinase1"，/ow加7o屍A/oA^/ca/C力e邁/"/7，Vol.273，No.36，pp.23143—23149，1998。a-製備了第一系列的含有25000個成纖維細胞的劍交。以三次重複，在血漿^y^w葡糖胺進行測試。對照培絲僅接受溶劑。^MJ:徑的測量表明，對於對照而言在18小時內直徑減少了21ran,而對於葡糖胺而言勤目同時間段內直徑減少了23鵬。這個微小的差別隨著時間推移而減少，直到培養50小時。b-這些結果促"ft^發明人重做同一類型的實驗，其中以2x、5x和10x血漿濃度^^I單獨的石滅葡糖胺，稍微鹹少成纖維細胞的數目(20000)以放緩該過程。回縮狄確實減慢了，因為在46小時之時XSL^到^J:徑減小19咖。再次，^^所ii^t葡糖胺測試艦，M^到稍高的回縮(22mm，在46小時之時)。結論圖1圖解說明了回縮，並從而說明了^P爐葡糖胺存在下所M^到的對於成纖維細胞,特性的刺激。這些結果證明了葡糖胺在刺激成纖維細胞的細胞骨*代3財面的活性，^明葡糖胺因而是能夠對於M緊實度以及由蜂窩織炎引起的皿病^^揮正面作用的試劑。實施例4:碌酸葡糖胺對於與M緊實度相關的真JCA^標誌物的表達的影響1.研究方案在限制下隨才;M匕的與安慰劑相Hs^的雙盲單中心研究。在8周期間，對年齡為50至65歲的15名女J"生補充安慰劑(n=7)或者等針250mg葡糖腐GLU)的石誠葡糖胺("8)。在開始補充前(T0)和補充8周結束時(T8)獲取3咖直徑的皮膚活糹iUK檢查樣品(手臂內側)。提取^CJ^樣本中所包含的總RNA，並用"AmbionRiboPurekit"試劑盒絲雄化。如前所述，通過RT-PCR對特異真皮標誌物進行分析(Nusgens等人JID，116:853-859，2001)。所有結果均表示為相對於28SrRNA的量而言的任意單位。在TO時，驗證了在安慰劑組和GLUT組之間每種mRNA的值的一致性(ANOVA;^r#Tukey多重》b^l;^驗)。然後，通i^t於"^i志願者，Hs^各自的在T8和T0時的mRNA表達，來分析所述補充(安慰劑或GLU)的影響。因此，計算了T8/T0這一比率。通it^於^t數^i^f吏用Student檢驗，來tb^/斤述兩個組的每個比率的平均值。2.結果表2概括了在安慰劑組和GLU組中，在補充前(TO)和補充8周後(T8)各自的mRNA7jc平的平均值。tableseeoriginaldocumentpage30能夠注意到，用安慰劑獲得的結果是不M的，而用葡糖胺獲得的結果是絲的。3.結論葡糖胺(GLU)絲增加了-波形蛋白的表達，該蛋白質是細胞骨架的細L^^分，-飾膠蛋白，、Wl蛋白^t^^Ut^蛋白,的^Ji,它們屬於SLRP(小的富含亮氨酸的蛋白質(S咖llleucineRichProtein))家族。這些標誌物^了M結構的構iil且織4匕，一透明質W^的表達，該蛋白質為^透明質酸合成的酶，所iiit明質酸的水4沐性^:^4頁^^支^A員已知的。，劑對於這些不同的標誌物沒有影響。這些結^4明，葡糖胺對於編4皮結構大分子的特異基因的表達具有有益的效應。這種#顯##別有益於維#^/或恢^^映緊實度以及預防和/或治療蜂窩織炎，iiA特^fc於真皮構造的改變的兩種現象。實施例5:探索性臨M究，其涉及由攝取食品補充劑Al而誘導的耙mRNA的過食品蜂卜充劑Al的配方食品補充劑Al^ii^用於這樣的人，^/f門遵循瘦身飲^^制度並且面臨由於體重減輕而引起的力映緊實度的喪失。綠茶和鉤分別是已知為瘦身飲食制度的輔藥的成分或^脂質代謝的成分。—蓋侖氏形式嚢劑(sachet)-月^劑量l嚢劑/天tableseeoriginaldocumentpage31*石爐葡糖絲餘臨床^^目的^M聶取食品補充劑Al2個月後，相對於安慰劑而言，^fi^食品補充劑Al對於可能與M的生物力學特性的變^Nl關的^J!^物標誌物的影響。方法-對於16名已絕^i過兩年的女性(7名位於^J]食品補充劑Al的組中/9名位於安慰劑組中)進行的2個月的研究，所述女性的*為超過50歲，^M至歷激^a療法，並JL^手臂內側水平Ji^現出缺^JC^緊實度。-在TO和T2月從手臂Ji^取3mm的活^ai口、檢查樣品，以用於提取悉mRNA。-按照下述實M案，對於特定fflRM進行定量，所述mRNA編碼可能與皮膚的生物力學棒性的tt相關的蛋白質。製備mRNA以便用於RT-PCR^f兩個活組織檢查樣品，並在液氮中ii^f亍^f磨(MikroDismenbratorS，B.BraunBiotechInternational),然後^t取悉RNA，並在氯^^f弟;tJiit過超速離心來i^ff^/化。通過測量260nm處的0D(光密度)(Nanodrop)來#純化的RNA的量，M過計算OD260/OD280這一比率來確ii^斤提取的RNA的品質。艦過使用Agilent的BioAnalyzer驗汪了所提取的RNA的完塾性。製備了RNA的#~液，以^t^得接近1.25ng/jli1的M。^i^C^物標誌物的量相對於28S核糖體RNA的量，；jM示準化RNA的M。通過下列方式來使RT-PCR技術成為定量的在每個反應管中添加已知M的內部標準，其由合成的RNA糹M，該合成的RNA將與,膽究的RM-^同時共轉^a共擴增。徊目同系列中分析每個志願者的相應於T0和T2的樣品，並J^口載到相同的聚丙烯^^^Ji^在該相同的聚丙烯^^^Ji進行遷移。對於成對樣。^Mt助於單側Student檢驗^i^豫計學分析，其中在每個組中Hs^TO時和在T2時的值。比率T2/T0-1.00:t^絲，這兩^ji相當的。比率T2/T0>1.00;l^斤研究的轉錄物增加的反映。相狄，比率T2/T0<1.00^/斤研究的mRNA的^Ji斷氐的反映。結果/把mRNA的定量tableseeoriginaldocumentpage33VIM:波形蛋白；BMP1:骨形態^jt蛋白1;DEC:飾膠蛋白;白l^t;FIBMOD:,蛋白，；ACTIN:肌動蛋白。LUM:光亮蛋-編碼波形蛋白的mRNA的濃度在才聶取食品補充劑Al後顯著增加(p=0.025)，而^U安慰劑卻沒有絲差異。波形蛋白是一種作為真皮細胞細胞骨架的4分的蛋白質。攝取食品補充劑A12個月導致編碼肌動蛋白的mRM在統計學Ji^增加(p=0.0005),肌動蛋白^J5—種構成細胞骨架的蛋白質。"$#劑對於標誌物沒有影響。術語"細胞骨架"表示在所有細胞運動(例如細胞器的細胞內運輸或細胞形狀的維持)中所牽涉的動態細胞內纖維網狀物。細胞骨架的成分會,*增M少，導致細^^成代謝的減lt。在間^t來源的細胞例如成纖維細^內皮細胞中，波形蛋白是中間纖絲的主要結構^^物。該細胞骨架網狀物直接M細胞的積械功能。特別地，波形蛋白的^^Ji影響了瘢痕形成的過程。缺乏波形蛋白的細胞尤其呈現出低的才M^I定性，以;W氐的運動')"沐雌特性。》"卜，波形蛋白還M焦點複合物的空間組織化、肌動蛋白，性微絲的組織化以及與細^卜基質的相互作用。這些相互作用中的某一些直接受到;^衰老的影響，如同影響細胞遷移、增殖和收縮的控制，或^i影響代5射^^型的控制的那些一才羊。肌動蛋白是一種細胞骨架蛋白質，其^肌動球蛋白應力纖維和贈肌動蛋白聚*(其牽涉在細胞骨架內細胞的才成功能)的形成。因此，編碼肌動蛋白和波形蛋白的raRNA的增加表明，食品補充劑A1有利順用於成纖維細胞的細胞骨架。狄細艇性增加的徵象。一在攝取食品補充劑Al後，飾膠蛋白絲的基因^^iik^itlJi(p=0.02),而該基因的表#攝取安慰劑後沒有改變。屬於小的富含亮氨酸的蛋白,(SLRP)家族的飾膠蛋白聚糖是一種小的糖基^^白(蛋白聚瞎)。飾膠蛋白聚糖存在於整個真皮中，W^在於M中。它由成纖維細l^^^r分泌。jl^卜，在攝卜充劑後，還注意到了編碼無小的富含亮氨酸的蛋白麟(SLRP)的基因的M增加，特別是編碼光亮蛋白,的基因(p=0.004)和編碼,蛋白賺的基因(p=0.03)。這些標誌物^了組結構的構ilia織化。^，食品補充劑Al的攝取導致了編碼BMP-1(骨形態^A蛋白)的mRNA的表錄統計學Ji^增加(p=0.03)，而翻安慰劑^JC艦一順。BMP-1是一種酶，其切割前^f、I和III,從而形成能夠^j^f原纖維內進^^S己的成熟單體。通麟BMP-1和ADAMTS-2的聯合作用，前膠原的前肽被切割，以便1^使得它們能夠自動聚合^M^方面更堅固的膠原纖維和膠原纖維束。這些纖維的尺寸以及它們的規則性由飾膠蛋白彩瞎、光亮蛋白^纖調蛋白聚糖控制。jtk^卜，酶BMP-1直接參與了前^|^蛋白彩瞎向雙#^蛋白彩瞎的轉化。關於SLRP和BMP-1的結U明，食品補充劑Al似乎對於膠原纖維的結構具有穩定作用，並因it沐助於改善真皮的細船卜基質的品質。通iiit兩個結果，即一方面是通過研究波形蛋白和肌動蛋白而揭示出的對於細胞骨架的作用，和另一方面是通過研究飾膠蛋白^I^BMP-1而揭示出的對於M^、纖維的作用，食品補充劑Al呈現出對於真皮的全面而補充性的作用。實施例6:旨在"M^品補充劑Al在遵稱^g/t大食制度的重量負荷過重的女l"生中對於皮膚特性的影響的臨床研究食品4卜充劑Al的配方食品補充劑Al^i^用於這樣的人，W門遵循瘦身飲食制度並且面臨由於體重減輕而《I起的M緊實度的喪失。綠茶和4丐分別是已知為瘦身飲食制度的輔藥的成分或^脂質代謝的成分。-蓋侖氏形式嚢劑(sachet)-月^1劑量l嚢劑/天臨床"^^J目的該研究的主要目的是^Ml用臨床^^志願者的自我評估而獲得的數據開始，在女性中評價^f亍^ie^欠食制度期間食品補充劑Al對於M特性的影響。方法臨床階段-^f亍^at大食制度的情況下，對於40名^^為25至45歲的女性(安慰劑n=19，Aln=21)進行的3個月的研究，所述女lt^區診所中由營養學^i^行ii^Jt^。與安慰劑相》b^kJMi^i亥研究。-在TO和T3月時由皿病學家來if^介臨床得分。該臨床#^由松他、乾癟、銀彭卜觀和下垂的得分之和而得出，後者的那些得分根椐0(無)到6(大量的)的標度進^W。該4f^Ml映了^L的張力。-在T0和B月時，藉助於O(無)到9(非常)的標度，對於躲患者進行自我瓶結果臨床#^:在3個月後，臨床^^減少在Al組中tb^安慰劑組中在統計學上更大(p=0.04)。應當注意到，所述臨床評分在TO時是相當的。該結果支持了在攝取食品補充劑Al後皮膚的生物力學特性得到改善。自我評估^^聶取A112周後，由志願者所進行的if^證明了統計學Ji^著的變化_在;Uil7jc平上橙皮外觀減輕，在觸摸時(p=0.004)和^fJ^後(p-0.01)。-在手臂水平上(p=0.04)和在腹部7jc平上(p=0.04);f^&的^:外觀減輕。-在;yCJi4夾捏時的^減輕(P=0.05)。這兩個結果證明了食品補充劑Al對於^:特性的有M應，其改善了皿張力和^^下脂肪組織lt^物(其是降窩織炎的特徵'It^象)變平滑。實施例7:石滅葡糖胺+多酚(海松樹皮的提,)對於與M的生物力學特寸&目關的真^^標誌物的JJ^的影響1.研究方案在P艮制下隨才;M匕的與安慰劑相H^的雙盲單中心研究。在8周期間，對年齡為50至65歲的15名女性補充安慰劑(n=7)或者石誠葡糖胺(等針250mg的葡糖胺)和海松樹皮提取物(30mg)的濕合物(n=8,GLU02)。在開始補充前(TO)和補充8周結束時(T8)獲取3mm直徑的皮膚活iai只檢查樣品(手臂內側)。提取it^樣本中所包含的總RNA,並用"AmbionRiboPurekit"試劑盒絲摘化。如前所述，通過RT-PCR對特異真皮標誌物進行分析(Nusgens等入JID，116:853-859，2001)。所有結果均表示為相對於28SrRNA的量而言的任意單位。在TO時，驗汪了在安慰劑組和GLUT組之間每種mRNA的值的一致性(AN0VATukey多重tb^^;^驗)。然後，通，於4^志願者，tb^各自的在T8和T0時的mRNA表達，來分析所述補充(安慰劑或GLU02)的影響。因此，計算了T8/T0這一比率。通過對於^f數4^f吏用Student檢"驗，來J^^斤述兩個組的每個比率的平均值。2.結果表5概括了在安慰劑糹脈GLU02組中，在補充前(TO)和補充8周後(T8)各自的mRNA7jc平的平均值。tableseeoriginaldocumentpage37能夠注意到，用安慰劑獲得的結果是不M的，而用葡糖胺+多敏4t一聯^^^尋的結果^^的。3.結論葡糖胺+多S^it—聯合M增加了-i型和ni型膠原的^ii，它們是真皮構造的主要M^A分；-波形蛋白和肌動蛋白的表達，它們是細胞骨架的^L^A分，一飾l^蛋白,、,蛋白，、光亮蛋白^l^^u^^蛋白,的^ii，它們均是SLRP(小的富含亮M的蛋白質)的成員。這些標誌物^了皮膚結構的構iiia^只化。安慰劑對於這些不同的標誌物沒有影響。這些結u明，葡糖胺與提取自海松樹皮的多酚^^的聯合對於編碼真皮結構大分子的特異基因的表達具有有益的效應。這種^顯得特別有益於維#^/或^^的生物力學特性，其中包括維#/或'1^^緊實度以及預防和/或治療蜂窩織炎，il^特棘於真皮構造的tt的兩種現象。實;^例8:明皿囊形式(魚明膠)tableseeoriginaldocumentpage38實施例10:用^^#6^^末形式(囊劑)tableseeoriginaldocumentpage38月M)劑量為2嚢劑/天。實施例ll:M形式(魚明膠)tableseeoriginaldocumentpage39權利要求1.葡糖胺通過口服和/或腸胃外途徑的美容用途，所述葡糖胺作為用於預防和/或治療由蜂窩織炎引起的皮膚病症和/或用於維持和/或恢復皮膚緊實度的活性物質。2.才W權矛漆求l的用途，^4爭棘於，它用於'1^C^緊實度，所狄膚緊實度的喪失由時序寸老引起。3.才娥權矛決求i的用途，^Hr棘於，它用於'ltt^緊實度，所狄膚緊實度的喪失由激素'f錄老引起。4.才W擬，虔求1的用途，^ft棘於，它用於^^緊實度，所狄膚緊實度的喪失由外因性衰老，特別*衰老引起。5.才娥權矛漆求l的用途，^#棘於，它用於'KJJ^緊實度，所狄膚緊實度的喪失由體重減輕引起，尤其是^M亍,M大食制度期間所xc^到的體重減輕。6.4Nt前i^又利要求中任一項的用途，其特徵在於，它用，防和/或對抗由蜂窩織炎引起的^I或夾M。7.才娥前i^5^'J^求中任一項的用途，其特徵在於，它用，防和/或治療與蜂窩織炎相關的視覺夕卜觀。8.才鵬前^^Uf'J^求中^^項的用途，>^#絲於，所述葡糖辦為^^合成的激活劑，和/或作為重建M內環樹i定的^ii劑，和/或作為MMP3的表達的試劑而發揮:用，所述^^^i、"尤其選自波形蛋i、飾l^蛋白彩瞎、纖調蛋白，、^t^蛋白^^透明質酸i^i^。9.葡糖M過口月^/或腸胃外途徑的美容用途，所述葡糖,為用於預防和/或治療由絕經引起的^C^病症，特別A^L緊實度的喪失的活性物質。10.才娥前i^5U']要求中^-項的用途，絲棘於，所述葡糖胺與多酚^N目聯合。11.才M^前一項權矛虔求的用途，其特徵在於，所述多酚^^物來源於選自下列的植物提W/:綠茶提,；葡萄例如歐洲葡萄的提,；松樹，尤其是松Wt皮的提取物；蘋果提取物；歐洲4W提取物；啤酒花提取物；番石榴提,；^HT提Wb;^#例如慄樹、,、七葉樹、##的提,。12.才WI權利要求lO或ll的用途，^#棘於，所述多iH^^以原花色素類、類黃酮、^J旨體類、木質素類、荒類和香豆素類的形式存在。13.才^t前一項權矛JJ^求的用途，其特徵在於，所述多酚^^為選自下列的乂L^素多酚JL^素、^Jl^素、沒食子^L^素、扇J殳食子^L^素，其以WiU^L物的形式。14.才前一項權矛]^求的用途，^tt攤於，所述^^物包含2至14個錄素單元。15.葡糖胺和至少一種多酚^^的聯^it過口mit徑的美容用途，所述聯合作為用於維彬。/或'ltt^的生物力學棒性，和/或用防和/或治療由蜂窩織炎fI起的M病症的活性物質》'^^。16.才鵬前一項^f'漆求的用途，^Nr絲於，它用於^^/或'l^CJ^的伸展性、張力、緊實度、柔鈿性、密度和/或斷生的特性。17.才鵬權利要求15或16的用途，絲棘於，它用預防和/或對抗由時序性衰老引起的M病症。18.衝權利要求15或16的用途，絲棘於，它用預防和/或對抗由外因性衰老，特別A^:老引起的M病症。19.才娥權利要求15或16的用途，^#棘於，它用預防和/或對抗由體重減輕，尤其是^f亍^C^食制度期間所，*到的體重減輕51起的M病症。20.葡糖胺和至少一種多酚^^的聯^4t過口月^/或腸胃夕卜途徑的美容用途，所ii^^ft為用於^^痕形成的活性物質;^^。21.才前^^又利要求中任一項的用途，其特徵在於，所述葡糖胺以鹽的形式、以乙醯化的形式和/或以聚#的形式存在。22.才N^前^利要求中^""項的用途，^##於，所述葡糖胺以鹽的形iC^在，所述鹽選自石M葡糖胺、石M葡糖胺氯化鉀JjL、石M葡糖胺氯化鈉復鹽和鹽酸葡^t胺。23.美容方法，其用於^ii^t內i^^急定的重建，和/或用於限制真絲質糹JL^分的降解，和/或用於降低MMP3的^ii7K平，和/或用於刺、激成纖維細胞的細胞骨架，和/或用於改善成纖維細胞的雌特性，和/或用於增加^W示志物，尤其是選自波形蛋白、飾膠蛋白絲、蛋白絲、^!^蛋白絲和透明質^H^的M標誌物的表達，並由此減少蜂窩織炎以;M目關的視覺夕卜觀，和/或維脅/或'l^J^緊實度，所^r法^t過口月詠/il^胃夕hit;f^^1包^^^多斷^^^^i葡糖糊組姚24.用於口月^用的組^，其包含葡糖#至少一種源自松樹樹皮的多酚^^的聯合。25.^^^U'J要求24的組合物，其中所述葡糖胺為^U'J^求21或22中所定義的。26.#^權利要求24或25的組#，其中所述源自松#^皮的多酚^^物所具有的酚三聚體^f:，相對於多酚^^的總重量而言，可以為5-25重抓^i^U0-20重K27.才權利要求24-26中4—項的組#，其中所述源自松##皮的多酚m^所具有的多酚二聚體^i:，相對於多酚^^的總重量而言，可以為5-25重*%，^^10-20重4%。28.才M^5U']要求24-27中^^"項的組*，其中所述源自松Wt皮的多SHt^具有，相對於多酚^^的總重量而言，2-15重1%例如5-10重*%的阿魏酸、對-香豆酸、##酸和原>1^酸類型的,。29.##權利要求24-28中任一項的組合物，其中所述葡糖胺的舍量，相對於所it^且合物的總重量而言，為O.0001-80重*%，^^l-50重f^，更^^i^l0-20重:t4/。。30.才娥權利要求24-29中#—項的組*，其中所述多酚^^/的含量，相對於所i^且^的總重量而言，為0.0001-50重*%，0.05-10重4%，更^i4^0.5-2重*%。31.才N^5U'J要求24-30中^—項的組^^，^NNit^於，所iii且^還包含至少一種M老營養活性物質、光保護營養活性物質、絕經期營養活性物質、和/或^巴營養活性物質。32.才^N5U'JJ^求24-31中^""項的組^;，^#*於，所i^且^以皿嚢、粘集在i的明皿嚢、凝膠劑、幹或液似L劑、片劑、用於稀釋的粉絲口服^^^劑或者功能lt食品的形^4在。33.食品補充劑或功能f生食品，其包含有在第一組^;中的葡糖#在第二組合物中的至少一種源自松樹樹皮的多酚^^物，以作為用於同時、分開或在時間上4斬使用的試劑盒或聯合產品。34.才M居前一項權矛漆求的食品補充劑或功能1"生食品，其中所述葡糖胺為^K矛J^求21或22中所定義的，以;^斤述多酚m^為^M'J^求25-27之一中所定義的。全文摘要本發明涉及任選地與至少一種多酚化合物相聯合的葡糖胺通過口服和/或腸胃外途徑的美容用途，所述葡糖胺作為用於預防和/或治療衰老的皮膚徵候的活性物質。本發明還涉及用於口服和/或腸胃外施用的組合物，其包含葡糖胺和至少一種源自松樹樹皮的多酚化合物的聯合作為活性物質。文檔編號A61K31/05GK101621996SQ200780038705公開日2010年1月6日申請日期2007年10月19日優先權日2006年10月20日發明者A·皮斯瑞爾利,C·蒙塔斯蒂爾,P·馬尼斯爾申請人:Inneov實驗室