一種從羅漢果中提取羅漢果甙v的方法
2023-08-07 05:40:06
一種從羅漢果中提取羅漢果甙v的方法
【專利摘要】本發明公開了一種從羅漢果中提取羅漢果甙V的方法，包括下述步驟:原料處理、高壓微射流超微粉碎處理、超臨界CO2流體萃取，收集萃取完後得到的提取液，離心，上清液進行HP-20ss樹脂柱層析，再用50-60％的乙醇溶液洗脫，經濃縮、噴霧乾燥，得到羅漢果甙V。具有含量高，工藝簡單，適合生產，生產成本低等優點。
【專利說明】一種從羅漢果中提取羅漢果甙V的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物【技術領域】的提取方法，具體說是一種從羅漢果中提取羅漢果甙V 的方法。
【背景技術】
[0002] 羅漢果，被人們譽為"神仙果"，是我國特有的珍貴葫蘆科植物，素有良藥佳果之 稱。羅漢果屬葫蘆科植物，是一種多用途的藥用和保健果品，是全世界特有的藥用植物， 1977年中國藥典收載作為中藥使用，1987年衛生部又將羅漢果列為既是藥品又是食品的 中藥之一，據《中藥大辭典》等書記載，羅漢果味極甜、性涼、無毒，入脾肺，具有清肺止咳、潤 腸通便、清熱解毒、祛痰補血、益肝、健脾、鎮靜、止渴、促進腸胃機能、抑制哮喘以及降壓等 功效，常用於肺火燥咳、咽痛失音、腸燥便秘等症。
[0003] 羅漢果提取物的主要成分為羅漢果甜甙，羅漢果甜甙具有很好的保健作用，對促 進腸胃機能和清熱止咳、滑腸排毒、嫩膚益顏、清熱潤肺的效果更為顯著，可廣泛應用於營 養保健品、食品、藥品等行業中。羅漢果甜甙中的有效成分主要是萜類化合物，包括甙III、 甙IV、甙V等，其中羅漢果甜甙V(也稱為羅漢果甙V，下同）是其甜味的主要成分，研究表 明：羅漢果果頭中分尚並鑑定出了羅漢果式III、羅漢果式IV (mogroside IV)、羅漢果式V、 羅漢果甙II E、羅漢果甙IIIE、羅漢果甙VI、羅漢果甙A、羅漢果新甙（neomogroside)、賽門甙 I (Siamenside I )、ll-〇xo_mogroside、羅漢果二醇苯甲酸酯（mogroester)共 11 種葫蘆 燒三廠式類（cucurbitaneglycosides)化合物，該類化合物是羅漢果果實中的主要活性物 質，約佔乾果重4%，除少數為無甜[如羅漢果式IV (mogroside IV)]或苦味[如羅漢果新 式（neomogroside)]物質外，大多為甜味成分或微甜物質。其中羅漢果式V為三廠系糖式 類S-5的強甜物質，是羅漢果果實中含量和甜度均較高的成分，是主要的甜味成分，其甜度 相當於蔗糖的300倍，比甜菊甙（甜度相當蔗糖100-150倍）要甜得多，而且沒有甜菊甙的 苦異味，這種強甜物質味甜而純正，無異味、回味感強、熱穩定好，在l〇〇°C水溶液中穩定，在 120°C連續加熱12小時以上仍不被破壞，屬非發酵物質，利於加工貯存。根據中國藥學資 料和日本學者竹本常松教授的研究證明：羅漢果對各種疾病起主要效果的就是羅漢果甜甙 V。
[0004] 目前，人們從羅漢果中獲得提取物的方法主要有以下幾種：1、水提加樹脂分離 法：其生產工藝是將羅漢果破碎後裝入壓力罐內，加水加溫水提，將多次水提液合併過濾， 上樹脂進行吸附分離，用乙醇或甲醇洗脫，洗脫液去醇後，噴霧乾燥而成；2、醇提（浸）膜分 離法：其工藝是將羅漢果破碎，加入50%乙醇，裝入儲罐內常溫或加溫浸提，多次浸提液合 並過濾，過濾液通過膜分離濃縮，濃縮液進行真空乾燥而成；3、採用加熱提取的方法。現有 技術採用上述方法得到的羅漢果提取物均存在一定的缺陷：所得到的提取物色澤深並具有 濃烈的中藥味和強烈的後苦味、有效成分含量低、提取液的顏色加深，而不利於後續的脫色 提純處理，能源消耗大、生產成本高的缺點。
[0005] 高壓微射流超微粉碎技術是國外近些年發展起來的性能優異的溼法超微粉碎技 術，高壓微射流超微粉碎設備可產生擠壓力、剪切力、衝擊力，經過液-液、液-固之間的高 速撞擊、高剪切、空穴作用等，使物料的分子結構發生變化。高壓微射流超微粉碎設備可以 做到納米分散，細化效果可達0. lum甚至以下，壓力高達100-200MPa，因此也稱為納米均質 機或超高壓均質機，具有顆粒粒徑分布均勻、操作簡單、無汙染、可在線清潔消毒、可高效率 進行細胞破壁等諸多優點。如中國專利CN101019627A，公開了一種用微射流瞬時高壓技術 製備高性能百合全粉的方法，使用該設備改善百合超微全粉的物理特性和產品性能；又如 中國專利CN101940320B，公開了一種薄膜分散-動態高壓微射流製備中鏈脂肪酸納米脂質 體的方法，也使用該設備製備性質優良的中鏈脂肪酸納米脂質體。
[0006] 目前，沒有高壓微射流超微粉碎技術在植物活性成分提取中應用的報導。
【發明內容】
[0007] 本發明的目的是提供一種從羅漢果中提取羅漢果甙V的方法，具有工藝簡單，適 合生產，生產成本低等優點。
[0008] 本發明通過以下技術方案實現，具體包括如下步驟：
[0009] 1)原料處理：取新鮮的羅漢果，洗淨，破碎；
[0010] 2)高壓微射流超微粉碎處理：將破碎後的羅漢果漿液按照1:8-10的重量比加入 純淨水，用高速剪切乳化機處理10_20min，轉速為8000-12000r/min，然後用高壓微射流超 微粉碎設備於25°C進行處理，處理壓力為80-120MPa，處理次數為2-4次，得到膏狀漿液；
[0011] 3)超臨界C02流體萃取：將高壓微射流超微粉碎處理後的羅漢果膏狀漿液置於萃 取釜中，以超臨界C0 2流體為萃取溶劑，以體積濃度為50-60%的乙醇溶液為夾帶劑進行超 臨界萃取，膏狀漿液的質量與萃取釜的體積比為1:4,乙醇溶液的體積與萃取釜的體積比為 1:2 ;萃取溫度為50-60°C，萃取壓力為15-20Mpa，萃取時間為L5-2.0小時；
[0012] 4)收集萃取完後得到的提取液，離心，上清液進行HP-20SS樹脂柱層析，再用 50-60%的乙醇溶液洗脫，經濃縮、噴霧乾燥，得到羅漢果甙V。
[0013] 本發明步驟4)所述的HP-20SS樹脂柱，樹脂用量為上清液重量的40-60倍。
[0014] 本發明得到的羅漢果甙V，為白色粉末，經HPLC檢測，含量在75%以上。
[0015] 與現有技術相比，本發明的優點：
[0016] 1、現有技術在進行羅漢果甜甙等成分的提取時，前處理一般都是以水或乙醇等為 溶劑，通過加熱提取來將有效成分溶出，而本發明採用高壓微射流超微粉碎來處理羅漢果 原料，相比加熱提取，經過高壓超微粉碎作用，提高了水溶性活性成分（羅漢果甙V等）的 溶出，同時改變了羅漢果中多糖、膳食纖維的組成和結構，暴露更多的結合位點，提高其吸 附性、分散性，不溶性膳食纖維的持水力、持油力和溶脹性增加，水溶性膳食纖維的吸附能 力增強，利於後續工藝的處理，利於提高活性成分的收率，而且，避免了高溫對羅漢果有效 成分的破壞。
[0017] 2、現有技術得到的羅漢果甙V含量一般在40-60%之間，本發明採用高壓微射流 超微粉碎技術、超臨界C0 2流體萃取和柱層析吸附技術的結合，隨著高壓微射流超微粉碎 技術的加入，使得本發明的技術結合出現質的提高，相比水提或醇提後柱層析，本發明時間 短，羅漢果甙V含量高；相比超臨界CCV流體萃取加柱層析，本發明收率高。
[0018] 3、本發明避免了無水乙醇、甲醇等大量有機溶劑的使用，更加環保。【具體實施方式】
【權利要求】
1. 一種從羅漢果中提取羅漢果甙V的方法，其特徵在於： 具體包括如下步驟： 1) 原料處理：取新鮮的羅漢果，洗淨，破碎； 2) 高壓微射流超微粉碎處理：將破碎後的羅漢果漿液按照1:8-10的重量比加入純淨 水，用高速剪切乳化機處理10_20min，轉速為8000-12000r/min，然後用高壓微射流超微粉 碎設備於25°C進行處理，處理壓力為80-120MPa，處理次數為2-4次，得到膏狀漿液； 3) 超臨界C02流體萃取：將高壓微射流超微粉碎處理後的羅漢果膏狀漿液置於萃取 釜中，以超臨界C02流體為萃取溶劑，以體積濃度為50-60%的乙醇溶液為夾帶劑進行超臨 界萃取，膏狀漿液的質量與萃取釜的體積比為1:4,乙醇溶液的體積與萃取釜的體積比為 1:2 ;萃取溫度為50-60°C，萃取壓力為15-20Mpa，萃取時間為L 5-2. 0小時； 4) 收集萃取完後得到的提取液，離心，上清液進行HP-20SS樹脂柱層析，再用50-60% 的乙醇溶液洗脫，經濃縮、噴霧乾燥，得到羅漢果甙V。
【文檔編號】C07J17/00GK104098641SQ201410363574
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2014年7月29日 優先權日:2014年7月29日
【發明者】何偉平 申請人:桂林實力科技有限公司