滇丁香的組培快繁方法
2023-08-08 17:29:36
滇丁香的組培快繁方法
【專利摘要】本發明提供一種滇丁香的組培快繁方法，於當年生枝條帶芽莖段為外植體，接入初代培養基中誘導出不定芽，之後將誘導出的不定芽切成帶腋芽的莖段接種於增殖培養基中培養出叢生芽，將叢生芽剪下，接種於生根培養基中，培養成生根苗，經煉苗得滇丁香移栽苗。本發明以當年生枝條帶芽莖段為外植體，不僅取材容易、方便，在短期內能用較少的材料繁殖大量優質種苗，而且材料來源單一，遺傳背景均一，不受季節和地區等的限制，重複性好，移栽後成活率達90%以上，能夠滿足市場對滇丁香的需求量。
【專利說明】
【技術領域】
[0001] 本發明涉及滇丁香的組培快繁方法，屬於植物組織培養【技術領域】。 滇丁香的組培快繁方法
【背景技術】
[0002] 滇丁香(ZwcWia 為茜草科(TfoAiaceae)滇丁香屬(ZwcWia)植物，主 要分布於雲南西部和東南部，西藏東部以及緬甸北部等地。滇丁香色彩鮮豔，姿態秀麗，花 期長，是園林中寶貴的花木；同時還是很好的中藥材，滇丁香的根有活血調經、消炎止痛和 降壓的功能，花果有止咳化痰的功效，葉有消腫的功能。滇丁香的繁殖多以種子進行，但由 於種子細小較難收集，利用常規扦插方法成活率又不高，極大地影響了滇丁香植株的產量， 難於滿足市場對滇丁香植株的需求量，阻礙了這一具有較高開發價值的園林觀賞樹種的推 廣應用。
【發明內容】
[0003] 為解決現有滇丁香繁育方法存在成活率不高、產量小等問題，本發明提供一種滇 丁香的組培快繁方法，以獲得數量多、繁殖係數高、健壯的滇丁香移栽植株。
[0004] 本發明通過以下技術方案實現：一種滇丁香的組培快繁方法，其特徵在於經過下 列各步驟： A、 將消毒滅菌的外植體接入下列初代培養基中：MS+6-BA 0. 1?1. Omg/L+NAA 0. 01? 0. 10mg/L+蔗糖20. 0?40. Og/L，在溫度為20?30°C、光照時間為8?12h/d、光照強度為 30?50 μ mol/m2 · s的條件下進行培養30?40天，誘導出不定芽； B、 將步驟A誘導出的不定芽剪下，切成帶腋芽的長0. 5?1. 0cm的莖段，再接種於下列 增殖培養基中：MS+6-BA 0· 2 ?1. 0 mg/L+NAA 0· 02 ?0· 10mg/L+ 蔗糖 20. 0 ?40. Og/L，在 溫度為20?30°C、光照時間為8?12h/d、光照強度為30?50 μ mol/m2 · s的條件下進行 增殖培養20?40天，再轉入上述新的增殖培養基中，並在相同條件下繼續培養一次，得到 叢生芽； C、 將步驟B所得叢生芽剪下，接種於下列生根培養基中：1/4 MS+IBA 0. 2?1. Omg/ L+蔗糖15. 0?30. 0g/L，在溫度為20?30°C、光照時間為8?12h/d、光照強度為30? 50 μ mo/m2 · s的條件下培養15?25天，得到生根苗； D、 將步驟C所得生根苗移至溼度為70?85%的煉苗棚中，揭蓋煉苗3?5天，取出生 根苗，洗去根部培養基，移栽到消毒營養袋中，於溼度為70?85%的條件下培養1周後，得 滇丁香的移栽苗。
[0005] 所述步驟A中消毒滅菌的外植體是：將採回來的當年生滇丁香枝條剪去葉片，切 成0. 5?1. 5 cm的帶芽莖段，經自來水衝洗乾淨後，先用質量濃度為0. 2?2%的次氯酸鈉 溶液浸泡5?15分鐘，以無菌水衝洗3?5次，再用質量濃度為0. 1?1%的升汞溶液浸泡 5?20分鐘，以無菌水衝洗4?8次，然後用無菌濾紙吸乾表面水分，即得消毒滅菌的外植 體。
[0006] 所述步驟D的消毒營養袋是經800?1000倍甲基託布津消毒的消毒營養袋。
[0007] 本發明與常規方法相比具有下列優點和效果：本發明以當年生枝條帶芽莖段為外 植體，取材容易、數量多，不僅在短期內能用較少的材料繁殖大量優質種苗，而且材料來源 單一、遺傳背景均一，不受季節和地區等的限制，重複性好。移栽後成活率達90%以上，具有 用材少、周期短、速度快、繁殖係數高等特點，通過本方法容易獲得大量健壯無病的滇丁香 植株，完全能夠滿足市場對滇丁香的需求量。
【具體實施方式】
[0008] 下面結合實施例對本發明做進一步描述。
[0009] 實施例1 A、 將採回來的當年生滇丁香枝條剪去葉片，切成0. 5?1. 5 cm的帶芽莖段，經自來水 衝洗乾淨後，先用質量濃度為2%的次氯酸鈉溶液浸泡5分鐘，以無菌水衝洗3次，再用質量 濃度為〇. 1%的升汞溶液浸泡20分鐘，以無菌水衝洗4次，然後用無菌濾紙吸乾表面水分， 即得消毒滅菌的外植體，再將消毒滅菌的外植體接入下列初代培養基中：MS+6-BA 0. lmg/ L+NAA 0. 01mg/L+蔗糖20. Og/L，在溫度為25°C、光照時間為12h/d、光照強度為40μπι〇1/ m2 · s的條件下進行培養30天，誘導出不定芽；平均每個外植體分化不定芽1. 1個，芽長 2. 85cm ； B、 將步驟A誘導出的不定芽剪下，切成帶腋芽的長0. 5?1. 0cm的莖段，再接種於下列 增殖培養基中：MS+6-BA 0· 2mg/L+NAA 0· 02mg/L+蔗糖20. Og/L，在溫度為25°C、光照時間為 12h/d、光照強度為40 μ mol/m2 · s的條件下進行增殖培養30天，再轉入上述新的增殖培養 基中，並在相同條件下繼續培養一次，得到叢生芽；平均每個外植體得叢生芽3. 5個，芽長 3. 25cm ； C、 將步驟B所得叢生芽剪下，接種於下列生根培養基中：1/4 MS+IBA 0.2mg/L+蔗糖 15. Og/L，在溫度為25°C、光照時間為12h/d、光照強度為40 μ mo/m2 *s的條件下培養20天， 得到生根苗；生根率達96. 67%，平均生根8. 7條，根長0. 93 cm ; D、 將步驟C所得生根苗移至溼度為70%的煉苗棚中，揭蓋煉苗3天，取出生根苗，洗去 根部培養基，移栽到經800倍甲基託布津消毒的消毒營養袋中，於溼度為70%的條件下培養 1周後，得滇丁香的移栽苗，成活率達90. 4%。
[0010] 實施例2 A、 將採回來的當年生滇丁香枝條剪去葉片，切成0. 5?1. 5 cm的帶芽莖段，經自來水衝 洗乾淨後，先用質量濃度為1%的次氯酸鈉溶液浸泡10分鐘，以無菌水衝洗4次，再用質量 濃度為〇. 5%的升汞溶液浸泡15分鐘，以無菌水衝洗6次，然後用無菌濾紙吸乾表面水分， 即得消毒滅菌的外植體，再將消毒滅菌的外植體接入下列初代培養基中：MS+6-BA 0. 3mg/ L+NAA 0.03mg/L+蔗糖30.0g/L，在溫度為20°C、光照時間為8h/d、光照強度為30μπι〇1/ m2 · s的條件下進行培養40天，誘導出不定芽；平均每個外植體分化不定芽1. 4個，芽長 2. 82cm ； B、 將步驟A誘導出的不定芽剪下，切成帶腋芽的長0. 5?1. 0cm的莖段，再接種於下列 增殖培養基中：MS+6-BA 0· 5mg/L+NAA 0· 05mg/L+蔗糖30. 0g/L，在溫度為20°C、光照時間為 8h/d、光照強度為30 μ mol/m2 · s的條件下進行增殖培養20天，再轉入上述新的增殖培養
【權利要求】
1. 一種滇丁香的組培快繁方法，其特徵在於經過下列各步驟： A、 將消毒滅菌的外植體接入下列初代培養基中：MS+6-BA 0. 1?1. Omg/L+NAA 0. 01? 0. 10mg/L+蔗糖20. 0?40. Og/L，在溫度為20?30°C、光照時間為8?12h/d、光照強度為 30?50 μ mol/m2 · s的條件下進行培養30?40天，誘導出不定芽； B、 將步驟A誘導出的不定芽剪下，切成帶腋芽的長0. 5?1. 0cm的莖段，再接種於下列 增殖培養基中：MS+6-BA 0· 2 ?1. 0 mg/L+NAA 0· 02 ?0· 10mg/L+ 蔗糖 20. 0 ?40. Og/L，在 溫度為20?30°C、光照時間為8?12h/d、光照強度為30?50 μ mol/m2 · s的條件下進行 增殖培養20?40天，再轉入上述新的增殖培養基中，並在相同條件下繼續培養一次，得到 叢生芽； C、 將步驟B所得叢生芽剪下，接種於下列生根培養基中：1/4MS+IBA 0. 2?l.Omg/ L+蔗糖15.0?30.0g/L，在溫度為20?30°C、光照時間為8?12h/d、光照強度為30? 50 μ mo/m2 · s的條件下培養15?25天，得到生根苗； D、 將步驟C所得生根苗移至溼度為70?85%的煉苗棚中，揭蓋煉苗3?5天，取出生 根苗，洗去根部培養基，移栽到消毒營養袋中，於溼度為70?85%的條件下培養1周後，得 滇丁香的移栽苗。
2. 根據權利要求1所述的滇丁香的組培快繁方法，其特徵在於：所述步驟A中消毒滅 菌的外植體是：將採回來的當年生滇丁香枝條剪去葉片，切成〇. 5?1. 5 cm的帶芽莖段，經 自來水衝洗乾淨後，先用質量濃度為0. 2?2%的次氯酸鈉溶液浸泡5?15分鐘，以無菌水 衝洗3?5次，再用質量濃度為0. 1?1%的升汞溶液浸泡5?20分鐘，以無菌水衝洗4? 8次，然後用無菌濾紙吸乾表面水分，即得消毒滅菌的外植體。
3. 根據權利要求1所述的滇丁香的組培快繁方法，其特徵在於：所述步驟D的消毒營 養袋是經800?1000倍甲基託布津消毒的消毒營養袋。
【文檔編號】A01H4/00GK104054578SQ201410327388
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年7月10日 優先權日:2014年7月10日
【發明者】馬宏, 李正紅, 劉秀賢, 萬友名 申請人:中國林業科學研究院資源昆蟲研究所