乳清滲透物用於治療代謝症候群的用途的製作方法

2023-08-12 23:37:46 2

專利名稱：乳清滲透物用於治療代謝症候群的用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及代謝症候群或2型糖尿病的治療。進一步公開的是乳清滲透物用於生產預防和治療代謝症候群或2型糖尿病症狀的飲食品和藥物組合物的用途。
背景技術：
根據WHO標準，工業化國家中63％的所有男性和55％的所有女性的體重過重。此危險性發展的原因是碳水化合物和脂肪的熱量營養過度，同時每天能量釋放卻進一步降低。甚至每天能量平衡的非常小的差異在數年中對體重將有大的累積效果。每天熱量的攝入高於熱量消耗的0.3％將導致25到55歲美國人9.1kg的體重增加。超重的個體經常顯現代謝症候群(ReavenGM，Curr.Opin.Lipidol.，1997，8(1)，p.23～27)。
與術語「代謝症候群」的使用相關，保健專家通常提到所謂的「死四重奏」，它由超重(肥胖症)、高血壓、升高的胰島素水平和脂類代謝紊亂組成。在技術文獻中，代謝症候群也稱為第一早期症候群或「前驅糖尿病」(「Pschyrembel，Klinisches Wrterbuch」，257thed.(1994)，p.321)。
本領域技術人員理解「症候群」表示複合症狀；具有大多數不一致或未知病因學和/或發病機理的某些臨床特點為特徵的一組疾病徵兆(症狀)。
當代謝症候群進一步惡化時通常顯現2型糖尿病。血糖的增加是其最清楚特徵。此外，這些疾病增加了繼發症如動脈硬化的危險。由與糖尿病相關的病理變化引起的進一步危害健康的風險是眼病、心臟和血管疾病、中風、心臟病發作、腎臟疾病等。
在過去的幾十年中，2型糖尿病的頻發相當大地增加。德國聯邦統計局預測大約四百萬德國人目前患有該病。然而，其它研究推測的數字更高。根據德國糖尿病協會的預測，十分之一的德國人將在2006年患2型糖尿病。超重糖尿病患者的血脂水平(膽固醇、甘油三酯)和血壓通常也增加。
與1型糖尿病相反，胰島素的確在2型糖尿病患者的體內產生。然而，這些胰島素不能被身體適當地採用。胰島素在胰腺中形成，並保證來自食品的葡萄糖進入細胞。當將來自食品的葡萄糖提供到身體中，並使血液中的血糖水平上升時，增加數量的胰島素將釋放到血液中以將葡萄糖輸送到細胞，因此引起血糖水平再次下降。一旦身體不再對胰島素產生正確反應，細胞變成耐受胰島素的。根據1999年由UrbanFischer出版的Roche LexikonMedizin第4版的記載，胰島素抵抗力被定義為胰島素療效的強烈減輕或缺失。存在三種對出現胰島素抵抗力的解釋。首先，IgG抗體可抑制胰島素的生物效率，因此每日需求增加到大於100IU(國際單位)。其次，可能發生增加的胰島素酶裂化，或第三，胰島素與其受體的結合可能降低。結果是，達到細胞的能量不足，而同時血糖水平又保持較高。這引起胰腺釋放甚至更多的胰島素以期降低血糖水平。胰島素的持續過度產生導致胰腺中產生胰島素的β細胞的耗盡，並最終導致胰島素缺乏。
目前，2型糖尿病通常由口服抗糖尿病的藥物進行治療。這些藥物包括a)延遲碳水化合物攝入的藥物，如α葡萄糖苷酶抑制劑；b)雙胍——既延遲糖的吸收，也抑制肝中糖新生物的一組物質。此外，雙胍可促進糖進入肌肉組織的吸收，並同時抑制食慾；c)胰島素增敏劑(glitazones)，在仍然生產胰島素時促進細胞對胰島素的敏感性——因此有效地降低血糖水平；d)新格列萘類降糖藥(glinides)由特殊的機理通過刺激從胰腺的β細胞的短期胰島素釋放調節進餐之後的血糖，e)磺醯脲類，它降低血糖的閾值，從該閾值開始胰腺的β細胞釋放胰島素。
除口服抗糖尿病的藥物以外，可能必須將胰島素提供給患者。在此，進行針對患者需要的個性化形式的治療。
代謝症候群的治療基本依賴通過改變患者的飲食習慣和做更多運動而使體重減輕。然而，通常必須用另外的藥物以降低血壓、血糖和血脂。在美國，由上述治療形式產生的直接支出的費用和由生產率的損失導致的間接費用使每年發生的費用總計為980億美元——並且此數量仍在增加。
因此必須提供代謝症候群或2型糖尿病預防和治療的措施和方式。此外，還需要防止或延緩症狀惡化以及緩解或治癒它們的措施。特別地，需要代謝症候群的改進治療以抵抗其進一步發展成2型糖尿病。
在如下內容中，術語「防止」表示防止症狀或疾病的發展。術語「治療」在此表示用於疾病症狀的改進、疾病進展的延緩、疾病的退化或疾病症狀的緩解的每種治療形式。


以下附圖顯示採用甜乳清滲透物用於測定與代謝症候群或糖尿病症狀有關的不同參數的動物試驗的結果。
圖1顯示在採用甜乳清滲透物(SMP)和其對照物治療的動物中在6周觀察期內食物和飲水的攝入。
圖2顯示在採用甜乳清滲透物(SMP)和其對照物治療的動物中在觀察期內體重的增長和血糖曲線。
圖3(a)顯示在採用或不採用SMP的治療開始之前、治療3周之後和治療6周之後，試驗動物的血液中非酯化脂肪酸(NEFA)和胰島素的濃度。
圖3(b)顯示在採用或不採用SMP的治療開始之前、3周之後和6周之後，試驗動物的血液中總膽固醇和HDL膽固醇的濃度。
圖3(c)顯示在採用或不採用SMP的治療開始之前、3周之後和6周之後，試驗動物的血液中LDL膽固醇和甘油三酯的濃度。
圖3(d)顯示在採用或不採用SMP的治療開始之前、3周之後和6周之後，試驗動物的血液中C反應性蛋白的濃度。
圖3(e)顯示當採用或不採用SMP治療時在6周的治療期間內試驗動物的白血球數目。
圖4(a)顯示在治療開始之前口服葡萄糖耐量試驗(oGTT)中的血糖曲線和葡萄糖過量面積。
圖4(b)顯示在治療開始之前oGTT中的血清胰島素濃度曲線和胰島素過量面積。
圖5(a)顯示在3周治療之後oGTT中的血糖曲線和葡萄糖過量面積。
圖5(b)顯示在3周治療之後oGTT中的血清胰島素濃度曲線和葡萄糖過量面積。
圖6(a)顯示在6周治療之後oGTT中的血糖曲線和葡萄糖過量面積。
圖6(b)顯示在6周治療之後oGTT中的血清胰島素濃度曲線和葡萄糖過量面積。
圖7顯示在治療開始之前血糖和乳酸鹽的晝間情況。
圖8顯示在6周治療之後血糖和乳酸鹽的晝間情況。
具體實施例方式
令人驚奇地發現乳清滲透物對公認為代謝症候群和2型糖尿病模型的動物的給藥導致防止葡萄糖不耐性和胰島素抵抗力，並導致血清中甘油三酯濃度的降低。
因此，根據本發明，提供包括乳清滲透物的藥物組合物。此藥物組合物用於哺乳動物，優選用於人類以預防、治療或防止代謝症候群或2型糖尿病以及由其引發的繼發症中的高甘油三酯血症、葡萄糖不耐性和胰島素抵抗力。
伴隨代謝症候群或糖尿病的繼發症的例子是血管疾病、冠狀動脈功能不全、動脈阻塞性疾病、心肌梗塞、黃瘤、腹部不適、脾肝大、胰腺炎、視網膜脂血症和/或中風。
乳清在從奶生產乳酪的過程中累積。根據本發明，牛奶、山羊奶、綿羊奶、水牛奶和駱駝奶可用於在沉澱的奶中在提供酪蛋白之後提取乳清。依賴於提取的類型，產生甜乳清和酸乳清，其中通過凝乳酶的酪蛋白的酶沉澱之後得到的乳清為甜乳清，通過酸沉澱分離酪蛋白之後提取的為酸乳清。在甜和酸乳清之間的pH邊界不好定義，通常在5.6～5.9的範圍上下。甜乳清優選用於本發明。
根據本發明使用的乳清包含奶的所有水溶性組分，除非這些組分被凝乳酶或酸沉澱。在特定的實施方案中，使用包含約4.9％乳糖、0.8％蛋白質、0.5％礦物質、0.2％乳脂和0.2％乳酸的甜乳清。
通過超濾(膜過程，平均孔度25～100千道爾頓)，乳清蛋白可以從乳清中分離。此「脫白的」乳清包括約95％，並可以由噴霧乾燥進一步加工成粉末。此粉末在此稱為乳清滲透物。在本發明中，優選使用從甜乳清中提取的乳清滲透物。其中平均包含的組分是84.9％乳糖、4.5％蛋白質、0.1％脂肪和7.5％礦物質。剩餘部分是未分離的水。依賴於生產方式，這些量是平均值，具體值可變化5～10％(相對的)。乳清滲透物可以就這樣使用，或者在乳糖(部分)水解之後使用。乳清的優選給藥形式是作為糖漿或粉劑，但其它給藥形式也是可能的。
根據本發明可使用水解的以及部分水解的甜乳清滲透物。
在本發明的進一步實施方案中，包括乳清滲透物的藥物組合物的微囊化被證明是特別有利的。微囊化可按照尤其在專利未決公開出版物DE 198 54 749A1和DE 100 08 880 A1及實用新型DE 296 23 285 U1中所述的進行。將化合物牢固地封閉在，例如由多糖，如藻酸鹽組成的包衣中。可消化組分如澱粉可以加入包衣中，使得可能不可消化的覆蓋物質不能阻止化合物的釋放，而使由有機體的營養利用不可能。微囊化的藥物組合物對腸道不同區域的輸送可因此由熟練選擇和/或結合可溶的和不溶的包衣組分而進行靶向控制。在腸中的逐步釋放，如在小腸中釋放50～80wt％、優選60～70wt％、特別地62.5wt％，和在大腸中釋放20～50wt％、優選30～40wt％、特別地62.5wt％，是可能的定向釋放類型。可以通過保護囊化的化合物免受例如環境的影響而延長耐久性從而獲得進一步有利的效果。
術語甜乳清或甜乳清滲透物的使用也包括可以從其中提取的所有物質。這些物質是蛋白質、糖和它們的組分，以及礦物質。
此外，優選使用部分或完全除去乳糖的甜乳清滲透物。該甜乳清滲透物對於本發明的目的稱為乳糖降低的甜乳清滲透物。乳糖降低的甜乳清滲透物通常包含約85％乳糖，然而，該乳糖可以提取出來用於進一步的用途。因此，乳糖降低的甜乳清滲透物中保留包含0.1～80％、優選1～50％、更優選5～25％的乳糖。特別優選的乳糖降低的甜乳清滲透物仍然包含10～20％乳糖。
本發明進一步提供具有如下效果的製劑，也如在如下實施例中所示-降低血清胰島素水平，-防止葡萄糖不耐性的發展，-防止胰島素抵抗力，-降低胰島的體積，-降低胰腺中β細胞的體積，-防止胰管上皮細胞中β細胞的新生，-防止高胰島素血症的發展，-防止胰腺炎症(胰腺炎)或小島和/或β細胞的選擇性炎症(胰島炎)。
進一步的目的是乳清滲透物用於2型糖尿病的預防和/或治療，特別地用於延緩疾病的進展，優選用於改進其病理學的用途。
根據本發明令人驚奇地發現對於高胰島素血症存在形態學關聯。這意味著β細胞體積增加，在外分泌的胰腺中出現β細胞的小簇，在胰管的上皮細胞中檢測到β細胞(新生的指示)和β細胞有絲分裂速率增加。此形態學關聯暗示對此器官需要的增加，它由細胞的增殖而得到補償，例如以利用過量的可代謝的能量。
此外，根據本發明不可預料地發現乳清滲透物的給藥導致β細胞體積增加的防止，和這些物質導致胰島體積的降低。因此對於此目的用本發明的藥物組合物和製劑給藥是優選的。
根據本發明優選乳清滲透物的使用導致血脂值的下降，特別地導致甘油三酯濃度的下降。
進一步令人驚奇地發現當乳清滲透物單獨使用或與進一步有效的物質結合使用時，採用乳清滲透物的治療可部分地顯著降低血清胰島素水平。這些有效物質是α葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、胰島素增敏劑(glitazones)、磺醯脲類、新格列萘類降糖藥(glinides)或胰島素。乳清滲透物的使用以及除乳清滲透物以外進一步包含活性物質的製劑的使用也在本發明的範圍內提供，只要進一步有效的物質不對乳清滲透物的效果具有負面影響。
在進一步優選的實施方案中，用於代謝症候群或2型糖尿病預防或治療的乳清滲透物從牛、山羊、綿羊、水牛、駱駝或其它產奶動物的奶中提取。
特別優選的實施方案涉及形式為食品增補劑的包含乳清滲透物的本發明組合物或製劑的存在。在此也優選使用(部分)水解的甜乳清滲透物。
在進一步優選的實施方案中，乳清滲透物用於生產包括合適的藥物可接受的添加劑的飲食和/或濃縮食物。添加劑的例子是本領域技術人員已知的著色劑、香味增強劑、防腐劑、結合劑或填充物。
根據本發明，上述物質也可用於生產食物，例如飲食食物和/或食品增補劑，通過這些，能夠防止代謝症候群或2型糖尿病的進展和/或減輕或治癒這些適應症的症狀。這樣食物的例子是富含本發明組合物的乳製品或果汁，然而，也可以是其它食物。
在藉助於含乳清滲透物的組合物或製劑，治療和預防代謝症候群和2型糖尿病症狀中，劑量隨個體不同而變化，其中適當的情況下，根據被治療人的疾病徵候、年齡、體重和性別而變化。
根據本發明含乳清滲透物的組合物或製劑在飲食和/或濃縮食物中的濃度可依賴於選擇的合適添加劑和/或載體而不同，特別要考慮最終產品的感官特性。
此外，根據本發明的組合物可以包含在用於代謝症候群或2型糖尿病症狀的預防或治療的結合製劑中。特別優選除本發明的組合物以外，結合製劑包含一種或多種如下物質α葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、胰島素增敏劑(glitazones)、新格列萘類降糖藥(glinides)和磺醯脲類。結合製劑的給藥也可適於患者個體的需要。根據本發明，這些結合製劑可以在兩個或多個單獨的劑量中分別，或一起給藥。
此外，用於生產藥物的本發明的組合物的用途是特別優選的，優選用於緩解或防止代謝症候群症狀，治療或防止2型糖尿病的發展，預防其進展以及可從代謝症候群或糖尿病發展的繼發症。
本發明的結合製劑或藥物用於代謝症候群或2型糖尿病症狀的緩解/防止的用途特別涉及在人類中的應用，但其它哺乳動物如狗、貓、馬、綿羊、奶牛或豬等的治療也包括在本發明的範圍中。
本發明的組合物和製劑特別用於控制/防止胰腺中β細胞的生長、胰腺中β細胞的增殖、β-細胞和/或小島體積的增加或哺乳動物特別是人類的胰腺炎。
此外，特別優選本發明的組合物或製劑導致血清胰島素水平降低的用途。
進一步優選由於本發明組合物或製劑的給藥，防止葡萄糖不耐性的發展，或緩和葡萄糖不耐性。
此外，優選本發明組合物或製劑的給藥導致早晨高血糖症的延遲增加。
此外，特別優選本發明組合物或製劑的消耗導致血脂值的下降，特別是甘油三酯濃度的下降，然而，對其它血脂的影響也包括在本發明的保護範圍中。
根據本發明，不將乳酸鈣加入包括乳清滲透物的藥物組合物或製劑中。
當在血清中存在甘油三酯的升高的含量(＞160mg/100ml)時，這稱為高甘油三酯血症(高脂血症)。這狀況可在動脈疾病和冠心病的發展中起作用(Vega和Grundy，Adv.Exp.Med.243，311(1989))。此外，嚴重的高甘油三酯血症(＞1.000mg/dl)與乳糜微粒血症相關，並引起急性胰腺炎(參見K.Soergel，急性胰腺炎，胃腸疾病91，第3版(Sleisenger，M.H.和Fordtran，J.S.，eds.)，W.B.Saunders Company，費城，Pa.，1983，p.1462-1485；和Brown，M.S.和Goldstein，J.L.，用於高脂蛋白血症治療的藥物，Goodman and Gillman′s，治療學的藥理學基礎34，第7版，(Macmillan Publishing Co.，紐約，1985，p.827-845))。乳糜微粒的嚴重增加直接引起胰腺炎，這可以通過降低甘油三酯而被防止(美國Department of Health and Human Services，NIH-Publication No.89-2925，p.74-77，1989年1月，「專家組對成人高血液膽固醇的檢測、評價和治療的報告」)。另外顯示可以通過降低血漿中甘油三酯含量降低冠心病患者中風的危險(D.Tanne，等人；Circulation 2001，104，2892-2897)。此外，與非糖尿病患者相比，2型糖尿病患者的預期壽命縮短三分之一。這可能與升高的甘油三酯水平直接相關(Diabety Care；2001，24，1335-1341)。因此需要作為代謝症候群或2型糖尿病症狀治療的一部分，也提供在高甘油三酯血症的患者中降低血漿甘油三酯的過程。
本發明組合物或製劑的口服給藥是特別優選，然而，其它給藥方式的可能性也包括在根據本發明的保護範圍中，如胃腸外、靜脈內給藥等。
在特別優選的實施方案中，給予根據本發明的組合物或製劑的組分以防止代謝症候群或2型糖尿病的症狀，或用以減輕或治癒這些疾病。
乳清滲透物在藥物或食品增補劑製劑中的濃度為0.01％～99.99％，優選0.1～99.9％，更優選1～99％，特別優選1～80％，甚至更優選10～80％，最優選10～50％，相對於食品增補劑和/或藥物製劑的總重量。
根據本發明的食品增補劑或根據本發明的藥物製劑可以每天一次或幾次如在早晨、中午、晚上，與每餐一起、在餐前或餐後服用或給予，然而，也可以設想其它給藥計劃。
現在參考試驗解釋本發明，該試驗並不進一步限制本發明的範圍。
試驗部分動物模型/測試系統Zucker鼠用作研究對有限葡萄糖耐量，分布的脂類代謝，對心血管變化和炎症參數的危險標準的影響的動物模型。
Zucker鼠是在麻薩諸塞州斯託(Stow)的比較病理學實驗室中Theodore和Lois Zucker的13M品系中自發突變的產物(表型fa＝脂肪過多)，它導致所謂的「肥胖」或「脂肪過多」表型。兩個術語表徵超重和肥胖的鼠。
Zucker鼠在早期階段顯現攝食過多，導致體重的快速增加(超重)。在5～6周大時，它已經顯現高甘油三酯血症。高脂血症。胰島素抵抗力，伴隨著葡萄糖不耐性和血胰島素過多症的顯現。在12周大時，葡萄糖耐量紊亂變得明顯，高血糖症可顯現，因此相似於2型糖尿病的臨床症狀的表現。在此動物模型中，2型糖尿病伴隨有胰島的組織病理變化。此外，心血管系統的變化也在此動物模型中被報導。因此，血壓的增加在5到7個月大的動物中被檢測到(Yoshioka，Metabolism，Vol.42(1)，1993，p.75-80)。
乳清滲透物用於控制代謝症候群的影響的研究用所謂的WOK.W鼠進行。WOK.W鼠是遺傳多源有性生殖紊亂和顯現幾乎代謝症候群所有症狀的動物模型，雄性動物以更顯著的方式表現這些症狀。WOK.W鼠的具體特性描述在，例如-P.Kovacs等人，Ann.N.Y.Acad.Sci.，1997，827，94-99；-P.Kovacs等人，Biochem.Biophsy.Res.Commun.，2000，660-665；-J.van den Brandt等人，Int.J.Obesity，2000，24，1618-1622；-J.van den Brandt等人，Metabolism 49，2000，1140-1144。
當研究代謝症候群時，此模型動物適於以介入研究形式進行外因調節，特別地由於初步研究顯示發病率可以由例如富含脂肪的營養物而變化。
動物維持將動物在12:12小時光照/黑暗循環(光照從6:00a.m.到6:00p.m.)下養在半屏障條件下。為它們提供永久可能的食物(RM標準食物，Sniff，Soest，德國)和飲用水的途徑。
表1各物質的飼餵量

物質的施用將物質溶於酸化飲用水(25g/l)，並隨意地提供給動物以代替沒有補充劑的酸化飲用水。對照組接受純酸化飲用水(pH 2.65)(在試驗動物維持中，將自來水採用鹽酸酸化以降低病菌)。每天監測飲用的數量，並使飲用水總是新製備的；分析方法●血糖和乳酸鹽的濃度通過葡萄糖分析器(Glucoseanalyzer)的方法(SuperGL Ambulance，Ruhrtal Labortechnik，德國)測量。
●免疫反應性胰島素(IRI)濃度的測定通過鼠胰島素-特異性放射免疫測定法(Linco Research，Inc.；美國)進行。
●總膽固醇，HDL膽固醇，LDL膽固醇和甘油三酯的測定由光度法進行。
●C-反應性蛋白由濁度法測定。
●發生的白血球數目的測定通過細胞計數法進行。
評價方法●在口服葡萄糖耐量試驗oGTT中，從葡萄糖給藥之前10分鐘的時間點開始到給藥後120min的時間內做血糖和胰島素曲線。對於每個參數在其各自的治療時間表示測試組的平均曲線。為判斷生理學上的和治療的效果，對於血糖和胰島素的相應於研究方案的每個參數計算反應性和絕對過量面積(G-AUC和I-AUC從0～120min圖4(a)和(b)，5(a)和(b)，6(a)和(b))。
為此，關於血糖和胰島素濃度的數據依賴於取樣時間做圖。反應性面積按照下面的方法計算-絕對面積Fa＝在血糖或胰島素濃度曲線(絕對AUC，曲線下的面積) 下的面積，依賴於時間(0～120min)-反應性面積 Fr＝Fa-t y0(t＝總試驗持續(反應性AUC)時間，y0＝血糖或胰島素的基礎濃度)計算的解釋，使用血糖濃度作為例子
採用試驗設計中規定的120min的總試驗持續時間和取樣時間-10，0，10，20，30，40，60，90，120，從0到120min的絕對面積計算如下Fa＝(10y0+20y10+20y20+20y30+30y40+50y60+60y90+30y120)/2Fr＝Fa-120y0測量單位G-AUC以mmol×min/lI-AUC以ng×min/ml●成對比較在測試和對照狀況之間形成差異，並使用t-檢驗測試該差異釋放異於0(p＜0.05)。
●使用t-檢驗的平均值的比較。
●例外的異常測試根據「VerfahrensbibliothekVersuchsplanung und-auswertung」，第1卷，柏林1978，Rasch D.等人，p.408。
過程/試驗設計將Zucker鼠在約14周齡時移入籠舍，測試在一周適應之後開始。在15周齡時，將動物用涉及葡萄糖和脂類代謝(其中血糖、血清胰島素、膽固醇和甘油三酯的濃度)，葡萄糖耐量(通過口服葡萄糖耐量測試)以及炎症標記(白血球和C-反應性蛋白的數目)的參數進行初始表徵。為此必須的血樣從尾部靜脈取得。然後，開始治療。血糖濃度、體重、白血球數目和攝食的測定以一周的間隔連續進行。每日監測飲用水的攝入。在治療2和6周之後，重新測量葡萄糖和脂類代謝的參數並測定葡萄糖耐量。
為測定葡萄糖耐量，葡萄糖耐量測試斷食奪之後在晚間進行。在此期間，血樣在從葡萄糖施餵(通過胃管)之前10分鐘到葡萄糖給藥(2g/kg)之後120分鐘的時間內進行以測定血糖(取樣時間-10、0、10、20、30、40、60、90和120分鐘)和胰島素濃度(取樣時間0、20、40、60、90和120分鐘)。在治療開始和治療6周之後，得到血糖和乳糖濃度的每日情況(3小時間隔)。在規則的43天觀察期終止之後，治療狀態也在進行最終口服葡萄糖耐量測試之後保持到治療的第62/第63天。通過麻醉劑過劑量的方法處死動物。在發生麻醉之後，將胰腺取出，然後固定並貯存用於在布安液(Bouin’s solution)中用於隨後的組織學研究。
樣品貯存將所有的血清樣品在冰箱中在-20℃下貯存直到分析。
結果追蹤研究食物和飲用水的攝入●儘管飲水量在採用SMP治療的動物中有輕微增加(圖1)，但每天消耗的熱量數量在所有的組中相當(圖1a)。關於它們的每天飲食攝入各個組沒有顯著的區別(圖1)。在治療的第42天計算的能量攝入是SMP組87.6±6.6kcal/24hr對照組87.9±25.5kcal/24hr不能確認各組之間的差異。
體重的發展●治療的各組關於它們體重的增長沒有不同(圖2)。
血糖和胰島素曲線●在治療開始之前，即在15周齡時，研究組中動物的血糖濃度(圖2)和胰島素濃度(圖3a)是相當的。而對照組在治療開始之後早晨血糖持續上升，如在此動物模型的老化過程所預期的，這樣的上升在SMP組中很大程度上是不存在的。
●與在治療開始之間的時間相比(n.s./不顯著)，當治療的持續時間增加時，由SMP治療的組中的胰島素濃度(圖3a)下降。胰島素濃度保持在不變的水平(對照組)。
脂類代謝參數●非酯化脂肪酸的濃度在觀察期間保持不變。在各治療組之間沒有差異(圖3a)。
●與對照組相比，膽固醇濃度在觀察期間增加，與SMP組相反(n.s.，圖3b)。
●HDL膽固醇的濃度在觀察期間保持不變(圖3b)。僅在治療開始之前在各組之間存在差異，然而，該差異對於治療的效果不顯著。
●儘管LDL膽固醇濃度(圖3c)的上升，如可以在對照組中觀察到的那樣，不能通過SMP治療防止，但證明了SMP組的上升比對照組少(n.s.)。
●降低甘油三酯濃度的傾向在通過SMP治療的動物組中被認識到(圖3c)。
炎症參數●炎症參數C-反應性蛋白(圖3d)和白血球數目在觀察期間的治療過程中不變。
口服葡萄糖耐量測試的結果●在治療之前各組在口服葡萄糖耐量試驗(oGTT)中的血糖和胰島素濃度曲線是相當的(圖4a和4b)。
●在3周治療之後，在各治療組之間血糖和胰島素的曲線和過量面積沒有檢測到顯著的差異(圖5a和b)。
●在6周治療之後，SMP組的GTT中血糖增加相當少，並且在120分鐘觀察期後它下降到與對照組相比顯著低的水平(圖6a和b)。
在6周治療之前和之後GTT的血糖曲線(BG，mmol/l)的分析，平均值±SD(*相對於對照組p＜0.05)表2

●在6周治療之後，在GTT中作為葡萄糖過量面積(G-AUC)而被測量的葡萄糖耐量與對照組相比在通過SMP治療的組中有顯著的改進。儘管對照組中的G-AUC在觀察期間增加，但G-AUC在治療開始之前與SMP治療組相當。
在6周治療之前或之後反應性G-AUC 0～120min(mmol×min/l)的評價，平均值±SD(相對於對照組p＜0.05)表3

表4患者和WOK.W鼠的選擇的參數的比較

1+++＝非常強烈突出的，2++＝強烈突出的，3+＝存在上表闡明為什麼WOK.W鼠是用於人類中代謝症候群非常合適的動物模型。
胰腺形態測定將待檢查的胰腺在16周齡時，即在12周治療時間之後取出。將胰腺包埋入石蠟中並切割為7μm的厚度的薄片。將每第十個切片採用蘇木精-曙紅染色(以顯示小島體積和評價炎症)或採用抗胰島素抗體培養(以顯示β細胞體積)。為評價炎症(胰島炎)，計數15個小島。免疫組織化學反應採用APAAP直觀化(染紅色)。小島細胞和胰島素形成β細胞分布的形態測定評價與外分泌細胞比較，纖維組織和血管通過計數位於製備物頂部的網上的40,000個點而實現。每個組有四隻動物用於每種情況。
表5胰腺免疫組織化學檢查的結果

WOK.W鼠的胰腺形態測定顯示不能發現高胰島素血症的形態學關聯(參見上表5)。這自身表現在β細胞體積的增加，β細胞小簇在胰腺外分泌部的出現，在胰管上皮細胞中的檢測到β細胞(新生的指示)和β細胞有絲分裂數的增加，這有原因地涉及高胰島素血症的發展。檢測到的形態暗示對此器官需求的增加(如通過可代謝能量的增加)，這部分由細胞增殖而被補償。
通過乳清滲透物在飲用水中的施加，在12周治療期之後β細胞體積的增加被防止或顯著降低。
儘管乳清是非常有效的，在任何被檢查的動物中沒有檢測到小島和/或β細胞的選擇性炎症(胰島炎)的出現。
WOK.W鼠中血清胰島素水平的研究在治療的鼠中血清胰島素水平的研究顯示當與對照鼠比較時，它們在治療期間顯示血清胰島素水平沒有增加或僅有較低增加。
表6比治療和未治療的WOK.W同齡鼠的血清胰島素值(ng/ml)。

●在觀察期間，通過SMP的治療防止葡萄糖不耐性的增加。
●口服葡萄糖耐量試驗期間的胰島素釋放(測量為胰島素過量面積；I-AUC)在6周治療之後在通過SMP治療的動物組中最高。
●oGTT中的胰島素釋放在SMP治療6周之後被最好的激發。然而，釋放的胰島素僅在SMP組中導致oGTT中血糖的顯著降低。
表7反應性I-AUC 0～120min(ng×min/l)的測定，平均值±SD(標準偏差)

在6周治療之後，來自SMP組動物的胰腺的β細胞能夠最好地對葡萄糖的刺激反應。此外，該動物較少有胰島素抵抗力。
血糖和乳酸鹽的晝間情況●在6周治療之前和之後，血糖的晝間情況顯示在各治療組之間沒有顯著差異(圖7和8)，然而採用SMP治療6周的組的血糖濃度，在一天過程中最低。
●在一些時間，乳酸鹽的晝間情況顯示在各組之間有顯著差異。然而，乳酸酸中毒可以在任何時間排除(圖7和8)。將在治療開始之前更高的乳酸鹽濃度解釋為應激反應，由於在此時動物對血液取樣的熟習效果還沒能產生。
權利要求
1.乳清滲透物在生產預防或治療哺乳動物代謝症候群或2型糖尿病或其繼發症症狀的藥物組合物中的用途。
2.根據權利要求1所述的用途，其中症狀選自葡萄糖不耐性或胰島素抵抗力。
3.根據權利要求1所述的用途，其中繼發症選自動脈硬化、冠狀動脈功能不全、動脈阻塞性疾病、心肌梗塞、黃瘤、腹部不適、脾肝大、胰腺炎、視網膜脂血症、中風或腎衰竭。
4.根據權利要求1～3任意一項所述的用途，其中所述乳清滲透物是甜乳清滲透物。
5.根據權利要求1～4任意一項所述的用途，其中所述乳清滲透物是乳糖降低的乳清滲透物。
6.根據權利要求1～5任意一項所述的用途，其中所述組合物是微囊化的。
7.根據權利要求1～6任意一項所述的用途，其中所述組合物作為口服給藥形式形成。
8.根據權利要求1～7任意一項所述的用途，其中口服給藥形式是錠劑、散劑、顆料劑、糖漿劑或汁液。
9.根據權利要求1～8任意一項所述的用途，其中所述組合物進一步是食品的補充物。
10.根據權利要求9所述的用途，其中所述食品是飲食食物或食品增補劑。
11.根據權利要求1～10任意一項所述的用途，其中組合物進一步包括藥物可接受的添加劑和/或載體。
12.根據權利要求1～11任意一項所述的用途，其中哺乳動物是人類。
13.根據權利要求1～12任意一項所述的用途，其中乳清滲透物是水解的。
14.根據權利要求1～13任意一項所述的用途，其中乳清滲透物是部分水解的。
全文摘要
本發明涉及乳清滲透物，優選甜乳清滲透物和更優選水解的或部分水解的甜乳清滲透物用於生產預防或治療代謝症候群、2型糖尿病和繼發症症狀的藥物組合物的用途，所述組合物用於哺乳動物。
文檔編號A61K35/20GK1822879SQ200480019811
公開日2006年8月23日 申請日期2004年7月12日 優先權日2003年7月10日
發明者賈伯斯特·克洛斯科普, 克裡斯丁·蘇瓦達 申請人:S.K.企業有限公司