一種促進神經損傷修復的藥物組合物及其應用的製作方法
2023-08-13 08:18:46 1
專利名稱：一種促進神經損傷修復的藥物組合物及其應用的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫藥保健品領域，涉及一種促進神經損傷修復的藥物組合物及其應用。
背景技術：
20世紀60年代，科學家首先證實哺乳動物的中樞神經系統具有某種內源性修復的特性，在成年大腦和脊髓的神經元軸突及主要分支在某種程度的損傷後可以修復，在成年鳥類、非靈長類和人類的大腦中新的神經元出生的現象稱之為神經修復。神經修復藥是指那些通過直接作用於人或動物腦內的神經幹細胞促進神經元修復、具有能使腦內神經元增加的作用的藥劑，該神經修復藥可作為神經變性或伴隨損傷引起的神經疾病的治療藥使用。 至今針對脊髓損傷治療的藥物有許多，但只有甲潑尼龍被肯定了治療脊髓損傷的效果而大量應用。其餘有很多藥物還處於試驗階段，基於基礎研究脊髓損傷機制的深入，不斷有新藥或老藥被證明治療實驗性脊髓損傷有效，但由於種種原因卻難以進入臨床驗證，故新藥不少，卻難以廣泛應用於臨床，大多數藥物只針對脊髓損傷的某一環節產生作用，而脊髓損傷涉及多種損傷環節及機制，故這些新藥效果有限，脊髓損傷後特有的治療窗口期特點也影響了藥物研製，目前治療脊髓損傷趨向於聯合應用各種藥物，其療效比單用一種藥物方法要好。在促進神經修復因子的研究中，報告最早、唯一闡明分子結構的神經細胞調節因子是神經生長因子(NGF)。同時，研究較為集中的還有神經節苷脂，鹼性成纖維細胞生長因子(bFGF)，分別被證明有不同程度的促神經生長作用。目前以單因子的研究和應用為主，但上述因子對神經修復的作用非常有限，療效不確定，價格昂貴，難以在臨床推廣應用。國外目前在臨床上研究與應用的神經生長因子及神經管養因子的替代物與誘生劑等進展緩慢，至今沒有一種可靠的促進神經修復的藥物。因此，如何促進神經損傷後的修復，恢復其功能已日益成為研究的重點。急性脊髓炎(acute myelitis)是指脊髓的一種非特異性炎性病變，多發生在感染之後，炎症常累及幾個髓節段的灰白質及其周圍的脊膜、並以胸髓最易受侵而產生橫貫性脊髓損害症狀。臨床表現以病損平面以下的肢體癱瘓、傳導束性感覺障礙和尿便障礙為特徵。急性脊髓炎的早期治療，精心護理，早期康復訓練對於預後十分重要。而受累脊髓節段位置是影響療效的主要因素之一。脊髓節段由較低節段逐步向上發展，治療效果較差。目前治療主要包括一是免疫抑制治療，主要為皮質類固醇激素、免疫球蛋白等；其次為對症治療，主要是營養神經、抗感染及支持療法。但現有的治療方法由於其副作用大，療效不顯著而限制了其應用。胺基酸是構成生物體蛋白質並同生命活動有關的最基本的物質，是在生物體內構成蛋白質分子的基本單位，與生物的生命活動有著密切的關係。它在抗體內具有特殊的生理功能，是生物體內不可缺少的營養成分之一。其在人體內通過代謝可以發揮下列一些作用①合成組織蛋白質變成酸、激素、抗體、肌酸等含氨物質；③轉變為碳水化合物和脂肪；@氧化成二氧化碳和水及尿素，產生能量。L-鳥氨酸是非蛋白胺基酸，在生物體內主要參與尿酸循環，對於體內氨態氮的排出有重要作用，與門冬氨酸合同可以增強肝臟排毒功能，迅速降低血氨，促進肝細胞自身的修復和再生，因此，胺基酸在人體中的存在，不僅提供了合成蛋白質的重要原料，而且對於促進生長，進行正常代謝、維持生命提供了物質基礎。如果人體缺乏或減少其中某一種，人體的正常生命代謝就會受到障礙，甚至導致各種疾病的發生或生命活動終止，具有營養神經，促進酶代謝，促進神經遞質生成，細胞功能恢復。B族維生素是水溶性維生素，包括維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B12、煙酸、泛酸、葉酸等，是推動體內代謝，把糖、脂肪、蛋白質等轉化成熱量時不可缺少的物質。它們具有協同作用，調節新陳代謝，維持皮膚和肌肉的健康，增進免疫系統和神經系統功能，促進細胞生長和分裂，有助於神經功能 的修復。維生素B1對神經組織和精神狀態有良好的影響，能夠保持精神警覺和情緒穩定，促進血液循環，輔助鹽酸製造，血流形成，糖類代謝，有助於人體感知，並使腦功能發揮到最佳狀態；對能量代謝、生長、食慾、學習能力均起著積極的作用。維生素B12儲於肝臟中，但是很容易通過尿液排除體外。維持身體正常生長和紅血球生長，有助於維持神經系統健康。B6可能是所有維生素B族中最重要的一種。人體的肌肉裡含有全身70% 80%的B60 B6在蛋白、脂質和碳水化合物的代謝中發揮著關鍵的作用。所以，大量損耗B6的人會出現包括胺基酸代謝紊亂。維生素B6是機體內許多重要酶系統的輔酶，參與胺基酸的脫羧作用、色氨酸的合成、含硫胺基酸的代謝和不飽和脂肪酸的代謝等生理過程，是動物正常發育、細菌和酵母繁殖所必需的營養成分。另外，維生素B6還是一種天然的利尿劑，利尿就能解毒，靜脈輸入維生素B65g，大約能利出尿液380ml左右。維生素B6是人體胺基酸代謝、神經遞質Y-氨基丁酸(GABA)和穀氨酸(Glu)的輔酶，現已知肝臟有60多種酶需要維生素B6參與，在促進機體正常酶代謝方面起到十分重要的作用。維生素B6能夠保持神經遞質Y-氨基丁酸(GABA)和穀氨酸(Glu)的水平，另外，維生素B6在體內的半衰期短，很快就排出體外。脊髓損傷後內源性抗氧化劑，如維生素C，E等明顯減少或耗竭。維生素C兼有抗炎及抗氧化作用，其相對分子質量較小能直接進入細胞內，直接或間接清除氧自由基，阻斷脂質過氧化反應，維生素C還能通過恢復維生素E的活性發揮抗氧化作用。它能促進骨膠原的生物合成，利於組織創傷口的更快癒合；促進胺基酸中酪氨酸和色氨酸的代謝，延長肌體壽命；增強肌體對外界環境的抗應激能力和免疫力。改善鐵、鈣和葉酸的利用；改善脂肪和類脂特別是膽固醇的代謝，預防心血管病。EPC-Kl是近來合成的維生素C與維生素E衍生物，它能獨立清除水溶性及脂溶性自由基。Katoh等在大鼠脊髓損傷模型中運用EPC-Kl後能明顯阻止脊髓損傷後脂質過氧化反應及清除自由基(水溶性+脂溶性)，從而到達保護損傷脊髓的作用。
發明內容
本發明的目的是提供一種促進神經損傷修復的藥物組合物，該藥物組合物是針對脊髓疾病患者設計的一種以複方胺基酸和維生素的組合物，它能促進神經修復，使病變節段以下神經、肌肉等功能大部分或全部恢復正常，生活基本上能自理。本發明另一個目的是提供上述藥物組合物的用途。
本發明的目的是通過下列技術方案實現的一種促進神經修復的藥物組合物，每單位該藥物組合物含有L_鳥氨酸0. 5"8g,天冬氨酸I飛g，精氨酸3 10g，維生素B63 10g，其餘可為輔料和/或其他成分。所述的藥物組合物，每單位該藥物組合物中還含有下列物質中的一種或多種異亮氨酸，亮氨酸，賴氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，蘇氨酸，色氨酸，纈氨酸，組氨酸，甘氨酸，丙氨酸，脯氨酸，天冬醯胺，半胱氨酸，穀氨酸，絲氨酸，酪氨酸，維生素B1,維生素B2,泛酸，生物素，葉酸，維生素B12,維生素C。所述的藥物組合物，每單位該藥物組合物中胺基酸的用量分別是異亮氨酸3^10g,亮氨酸5 15g,賴氨酸3 10g,蛋氨酸0. 5 3g,苯丙氨酸0. 5 3g,蘇氨酸3 10g,色氨酸0. 5^3g,纈氨酸5 15g，組氨酸3 8g，甘氨酸3 8g，丙氨酸3 10g，脯氨酸3 8g，天冬醯胺
0.l 3g，半胱氨酸0. l 3g，穀氨酸Tl0g，絲氨酸0. 5飛g，酪氨酸0. r3g ；B族維生素的用量分別是=VitB1 I 2mg, VitB2 I 2mg,泛酸 3 5mg,生物素 0. I 0. 2mg,葉酸 0. I 0. 4mg, VitB122 6iig;VitC I 3g。所述的藥物組合物，該藥物組合物含有維生素B族中的任意一種或多種與維生素C的組合，以維生素C和維生素B6複方尤佳。所述的藥物組合物，該藥物組合物還含有適量的5%葡萄糖氯化鈉注射液或0. 9%氯化鈉注射液。所述的藥物組合物，該藥物組合物的劑型為藥劑學上任意一種劑型，優選劑型為顆粒劑、片劑、膠囊劑或注射劑。所述的藥物組合物在製備促進神經修復的藥物和/或保健品中的應用。所述的應用，促進神經修復的藥物為脊髓損傷治療藥物。所述的應用，其中脊髓損傷疾病為急性脊髓炎。本發明的有益效果本發明藥物組合物以胺基酸和維生素為原料，經科學配伍，既能為患者提供營養支持，增強機體免疫力，又能營養神經，促進酶代謝，促進神經遞質生成，細胞功能恢復。與現有治療脊髓損傷性疾病的藥物相比具有療效確切，副作用小等優點。對於臨床繼發脊髓炎病人在綜合治療基礎上採用複方胺基酸聯用大劑量B6新療法確有利尿、解毒、抗氧化、減少滲出、促進機體酶代謝、保護大腦及神經系統功能的功效。維生素B1和B6作為多種神經介質合成的輔酶，又具有特殊的神經調節功能，同時口服易吸收，毒副作用極低，鑑於上述特點，將其開發研製成為一類新型的神經疾病神經營養和保護藥物具有廣闊的應用前景。本發明組合物的藥理學實驗及臨床觀察情況實驗一藥物組合物對大鼠脊髓損傷後神經修復和運動功能的影響I.實驗材料及方法I)造模及給藥方法選用60隻清潔級標準成年健康Wistar大鼠，雌雄不限，體重25(T300g，1%戊巴比妥鈉(50mg/kg)腹腔注射麻醉，俯臥位固定，無菌條件下顯露TfTlO椎板棘突，切除椎板，暴露硬脊膜，重物墜落法(IOgX 4cm)製作脊髓損傷模型。脊髓損傷模型製作成功的標準為打擊後脊髓組織水腫，硬膜下充血，出血，且術後24h行為學檢查BBB(Basso-Beattie-Bresnahan)評分< I分。術後及時止血、縫合，加強保暖和防感染等護理，每天按摩膀胱兩次，並且碘伏消毒會陰部，直至膀胱功能恢復。取造模成功大鼠60隻隨機分為2組生理鹽水組，藥物組合物治療組，治療組術後於腹腔給予藥物組合物注射液2mL/kg，每日I次，連續4周。生理鹽水組腹腔注射同體積生理鹽水。本實驗採用本發明組合物按實施例3製備。2)斜板試驗將大鼠頭朝左橫放在改良Rivlin斜板上，從水平位置起逐漸增大角度，以動物能夠在板上停留5s而不跌落的最大角度作為評分標準，重複3次取其平均值作為最終結果。2組分別在術後ld、2d、3d、lw、2w、3w和4w進行。3) BBB運動評分採用雙盲法對2組大鼠進行運動功能評分，將動物置於平坦不滑，光線充足的桌面上觀察後肢各關節活動狀況，並對其運動功能評分，大鼠在損傷前評分一次，然後在造模後的ld、2d、3d、lw、2w、3w和4w分別評分,共檢測3次,取均值,評分主要體現運動功能的恢復，正常大鼠可評最高分(21分)，損傷最嚴重的大鼠為0分。4)組織取材及切片製備兩組大鼠分別於術後3個時間點(l，48，72h)，麻醉動物，經左心室灌注肝素生理鹽水約200mL直至流出澄清液，再使用4%多聚甲醛約200mL灌洗固定，取損傷為中心的長約8mm脊髓組織，用4%多聚甲醛固定24h，常規石蠟包埋，連續切片， 每個樣本切片25張，片厚5 ii m，常規蘇木精-伊紅染色。5)免疫組織化學染色採用Super Picture免疫組織化學染色檢測NF表達。NF-抗的工作濃度為1:400，即用型第2代免疫組化廣譜試劑盒Super PicTure (Mouse/RabbitKIT)，Zymed分裝。DAB顯色試劑盒(DAB-0031)。光學顯微鏡下觀察染色結果，免疫陽性細胞呈棕黃色或棕褐色著色。每張切片在400倍光學顯微鏡下選10個不同視野，採用病理圖像分析儀，Leica Qffin圖像分析軟體，對同一批染色的切片，先根據染色的灰度定下同一標準，根據染色的底色計算出神經絲蛋白(NF)的平均灰度值。灰度值可間接反映細胞蛋白的表達活性，灰度值越大，表達活性越低，灰度值越小，表達活性越高。2.主要觀察指標大鼠運動功能、脊髓病理組織學觀察、NF染色陽性細胞灰度測定。3.實驗結果I)各組大鼠脊髓組織學觀察造模72h後，病理檢查結果表明，對照組大鼠脊髓組織結構紊亂，有較多片狀出血及出血壞死後形成的囊腔，神經細胞腫脹較明顯，並有大量炎細胞聚集，有的神經細胞無法辨認，灰白質界限不清，中央管部分消失或偏位，脊髓邊緣粘連。用藥組大鼠脊髓組織結構一般清晰，出血、壞死程度較輕，形成囊腔少，神經細胞腫脹不明顯，炎細胞浸潤數量較少，神經細胞豐富，白質區水腫，脊髓皮質區邊緣不清。2) NF 的表達脊髓損傷後脊髓組織神經細胞的NF表達隨時間發展逐漸增強，在脊髓前角運動神經元最早出現，而在脊髓后角神經元出現較晚。在形態學方面，神經元的胞體和胞核均有增大。藥物組合物治療組在傷後Ih即可見NF表達增加，至72h仍可見其高表達，在各時間點藥物組合物治療組的NF表達水平均高於生理鹽水組，藥物組合物治療組的NF灰度值與生理鹽水組相比較，差異有顯著性(P < 0. 05)。見表I。表I兩組不同時間損傷區周圍脊髓NF染色陽性細胞灰度值士S')IBSlJIh48h72h
水 HI. 231.42 x 6iM193.37x4,201S9,4I±4J6
藥物治療紐I 190.32x428* I85J4x5Ji *175.80±(>.65**與生理鹽水組比較P < 0. 053)各組大鼠行為學變化兩組大鼠造模前BBB評分均為21分，造模後見雙下肢全癱，全部出現尿瀦留，脊髓休克表現，前3天評分較低，但隨著時間的延長，大鼠脊髓功能逐漸恢復，其後肢肌力不斷增強，傷後7天兩組都有所升高，治療組與生理鹽水組相比有顯著性差異(P < 0.05)。術後 斜板試驗結果表明，損傷後3天起，斜板最大角度兩組均有上升，但差異性不明顯，7天後用藥組和對照組比較有明顯差異性P < 0. 05 (見表2，表3)。說明藥物組合物注射液能明顯促進受傷後脊髓神經功能的恢復。表2各組大鼠受傷後不同時間段斜板試驗結果(.r±.v )
In]句照_
Icl26JS土 2.9630.S2 土 2J2
2d28,42± 1.9832.68土3,23
3d30,28+± 2.4336.53+ 2,35
Iw33.74± 2.824I,KI± 4J2'
2w3又5士 5.364.VM 士 4.76*
3w42.67士 5J453.65士
4w45.31 +士 5」256.19 士 6.25 *注*與對照組比較P < 0. 05表3各組大鼠受傷後BBB評分結果
損IlHI—時問禮f圓川藥fl!
Id0Cl
2d}.24± 0.821.42± 0.57
3d3,03 ± 0,814,0+7土 1,42
Iw5.29 X 1.68S.3S+: 133*
2\\8.24± I 581134 ± 1.65士
3\v10.59± 1.8615^81 ± 2.63*
4wI2.68±Ij691823121(
注*與對照組比較P < 0. 05實驗二 臨床觀察實驗I、病例選入標準按2002年橫貫性脊髓炎聯合研究小組(transv Workinggr0 up,即TMcwG)提出的急性脊髓炎診斷標準(I)由於脊髓損傷所導致的進行性的感覺、運動、尿便障礙；(2)有雙側受累的症狀或體徵(不一定要雙側對稱)；(3)有確切的感覺平面；
(4)通過影像學檢查除外脊髓受壓；(5)腦脊液中細胞增多證明炎症反應，如果沒有炎症反應，有MRI上的表現並且細胞數在(2 7)*106/L也符合診斷；(6)病情進展在4h至21d達高峰；(7)排除以下診斷脊髓血管病，血清學檢查或臨床證實為結締組織病，梅毒、HIV、淋巴瘤、HTLV21，支原體感染或特殊病毒(如HSV，VZV等)異常所致脊髓炎頭部MRI異常，診斷為多發性硬化，曾經診斷為視神經炎。急性脊髓炎分期參考TMCWG提出的標準按病程進展分為急性期、恢復期急性期發病3周以內；恢復期發病3周以後。2、研究方法本組30例急性脊髓炎患者均依據臨床表現、腦脊液、MR臉查證實。病變定位於胸段18例、腰段6例、頸段5例、骶段I例。治療組15例，男9例，女6例，年齡16飛8歲，應用常規量的皮質類固醇激素治療，同時給予本發明的藥物組合物(按實施例5製備)治療。對照組15例，男8例，女7例，年齡19 72歲，應用常規量的皮質類固醇激素治療；兩組給予藥物治療的同時均給予營養神經、對症支持等治療，加強護理，防治併發症。3、療效指標癱瘓肢體肌力改善2級的時間；括約肌功能恢復時間；可自行下地行走的時間4、療效判斷治癒從癱瘓恢復至獨立行走和大小便功能良好；顯效從癱瘓恢復至持物能走；好轉經治療後肌力和膀胱功能有進步，但不能行走或自行小便；無效或加重症狀及體徵無改善或加重，死亡。5、結果治療組治癒5例,顯效6例,好轉3例,無效I例,死亡0例；對照組治癒2例,顯效4例，好轉6例，無效2例，死亡I例，本發明治療組神經功能恢復時間明顯小於對照組，治癒率、顯效率明顯高於對照組，差異有顯著性(見表1，表2)。兩組在治療期間均未見併發症，也無不適反應，生命體徵，肝、腎功能等生化指標及心電圖均無異常。表I療效與治療方法的關係
權利要求
1.一種促進神經修復的藥物組合物，其特徵在於每單位該藥物組合物含有L-鳥氨酸O.5^8g,天冬氨酸I飛g，精氨酸3 10g，維生素B63 10g，其餘可為輔料和/或其他成分。
2.根據權利要求I所述的藥物組合物，其特徵在於每單位該藥物組合物中還含有下列物質中的一種或多種異亮氨酸，亮氨酸，賴氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，蘇氨酸，色氨酸，纈氨酸，組氨酸，甘氨酸，丙氨酸，脯氨酸，天冬醯胺，半胱氨酸，穀氨酸，絲氨酸，酪氨酸，維生素B1,維生素B2,泛酸，生物素，葉酸，維生素B12,維生素C。
3.根據權利要求2所述的藥物組合物，其特徵在於每單位該藥物組合物中胺基酸的用量分別是異亮氨酸3 10g，亮氨酸5 15g，賴氨酸3 10g，蛋氨酸O. 5^3g,苯丙氨酸O. 5^3g,蘇氨酸3 10g，色氨酸O. 5^3g,纈氨酸5 15g，組氨酸3 8g，甘氨酸3 8g，丙氨酸3 10g，脯氨酸3 8g，天冬醯胺O. Γ3δ,半胱氨酸O. Γ3δ,穀氨酸3 10g，絲氨酸O. 5飛g，酪氨酸O. Hg ；B族維生素的用量分別是VitB1 r2mg, VitB2 I 2mg，泛酸T5mg，生物素O. I O. 2mg，葉酸O.Γ0. 4mg, VitB12 2^6 μ g ；VitC I 3g。
4.根據權利要求I所述的組合物，其特徵在於該組合物含有維生素B族中的任意一種或多種與維生素C的組合，以維生素C和維生素B6複方尤佳。
5.根據權利要求f4所述的任一藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物還含有適量的5%葡萄糖氯化鈉注射液或O. 9%氯化鈉注射液。
6.根據權利要求f4所述的任一藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物的劑型為藥劑學上任意一種劑型，優選劑型為顆粒劑、片劑、膠囊劑或注射劑。
7.根據權利要求f4所述的任一藥物組合物在製備促進神經修復的藥物和/或保健品中的應用。
8.根據權利要求7所述的應用，其特徵在於促進神經修復的藥物為脊髓損傷治療藥物。
9.根據權利要求8所述的應用，其特徵在於脊髓損傷疾病為急性脊髓炎。
全文摘要
本發明屬於醫藥保健品領域，涉及一種促進神經損傷修復的藥物組合物及其應用。每單位該藥物組合物含有L-鳥氨酸0.5~8g，天冬氨酸1~5g，精氨酸3~10g，維生素B63~10g，其餘可為輔料和/或其他成分。本發明的藥物組合物可顯著促進脊髓神經功能的修復，可用於製備神經損傷修復的藥物，尤其是對急性脊髓炎有很好療效。
文檔編號A23L1/305GK102772407SQ20121027272
公開日2012年11月14日 申請日期2012年8月1日 優先權日2012年8月1日
發明者萬紅貴, 嶽茂興, 黃彤舸 申請人:萬紅貴, 嶽茂興, 黃彤舸