用於靶向免疫療法的化合物的製作方法

2023-08-13 01:09:26 1

用於靶向免疫療法的化合物的製作方法
【專利摘要】本發明公開了用於靶向免疫療法的化合物，含有該化合物的組合物以及該化合物在諸如癌症之類的疾病的治療方面的應用。所述化合物具有通式TM-Ln-AM的結構，其中，TM是靶向部分，AM是能夠活化人樹突細胞、NK細胞或腫瘤細胞或者它們的組合的活化部分，Ln是連接體，並且n是選自0和1的整數。
【專利說明】用於靶向免疫療法的化合物
[0001] 相關申請的奪叉引用
[0002] 本申請要求2012年7月18日提交的中國專利申請第201210248481.9號的權益 以及優先權，該中國專利申請的全部內容在此通過引用併入本文。

【技術領域】
[0003] 本發明涉及用於靶向免疫療法的化合物以及含有該化合物的組合物。本發明還涉 及所述化合物在治療諸如癌症之類的疾病中的應用。

【背景技術】
[0004] 治療性抗體已用於臨床應用二十多年。目前已有十五種抗腫瘤抗體藥物用於 臨床，這些藥物包括：Rituxan(1997)，Herceptin(1998)，Mylotarg(2000)，Campath(20 01),Zevalin(2002),Bexxer(2003),Avastin(2004),Erbitux(2004),Vectibix(2006)； Arzerra(2009) ;Benlysta(2011) ;Yervoy(2011) ;Adcetris(2011) ;Perjeta(2012);和 Kadcyla(2013)。這些抗體主要靶定四種分子：EGFR、Her2、CD20和VEGF。
[0005] 總體而言，治療性抗體通過三種機制（ScottAM,WolchokJD,OldLJ.Antibody therapyofcancer.NatRevCancer. (2012),12:278-87)殺傷腫瘤細胞：（1)抗體直接 作用，也就是阻斷或激動配體/受體信號轉導活性，誘導細胞凋亡並遞送藥物或細胞毒素 齊U。抗體受體活化活性可產生直接殺傷腫瘤細胞的作用。例如，一些抗體可與腫瘤細胞 表面的受體結合，活化受體，導致細胞凋亡（例如，在線粒體中）。抗體還可通過受體拮抗 活性介導腫瘤細胞殺傷。例如，一些抗體可與細胞表面受體結合併阻斷二聚化作用、激酶 活化以及下遊信號轉導，從而抑制增殖並促進細胞凋亡。抗體與酶的結合可導致中和作 用、信號阻斷以及細胞死亡。（2)免疫介導的細胞殺傷機制，該機制包括補體依賴性細胞 毒性（CDC)、抗體依賴性細胞介導的細胞毒性（ADCC)、T細胞功能調節，等等。免疫介導的 腫瘤細胞殺傷可通過如下方式完成：誘導吞噬作用、活化補體、抗體依賴性細胞介導的細 胞毒性、通過單鏈可變片段（scFv)使基因修飾的T細胞靶定腫瘤，通過樹突細胞的抗體 介導的抗原交叉呈遞活化T細胞、抑制T細胞抑制性受體（例如，細胞毒性T淋巴細胞相 關抗原4 (CTLA4))。其中，抗體的Fc部分的特性對於CDC和ADCC介導的腫瘤細胞殺傷作 用特別重要。（3)抗體對腫瘤脈管系統和基質的特異性效應，通過捕獲血管受體拮抗劑或 配體誘導血管和基質細胞消融，包括：抑制基質細胞、將毒素遞送至基質細胞以及將毒素 遞送至脈管系統（ScottAM,WolchokJD,OldLJ.Antibodytherapyofcancer.NatRev Cancer. 2012, 12(4) :278-87)。
[0006] 治療性單克隆抗體藥物推進了抗癌藥物的研究和開發。然而，仍然存在一些問題 需要進一步研究解決，例如，抗體的免疫原性、長期使用腫瘤靶標的耐受性以及單純地單一 阻斷信號轉導通路的長期作用。簡言之，大多數抗體難以實現對腫瘤細胞長期有效的抑制 和殺傷作用。
[0007] 1964年，"自然（Nature) "雜誌發表了抗體-藥物偶聯（ADC)技術這一新觀點，該 觀點近年來得到突破性發展。ADC使抗體與高毒性藥物（毒素）通過化學連接體（連接體） 共價連接。抗體識別癌細胞表面抗原分子，內吞作用將ADC帶入細胞質內，具體而言，連接 體水解之後釋放的細胞內環境毒素殺傷細胞。
[0008] SeattleGenetics已研發了BrentuximabVedotin(商品名為Adcetris)這種藥 物，其已被FDA批准上市。其為單甲基auristatinE(MMAE)，一種合成的毒性抗癌藥物，其 與靶向淋巴瘤細胞特異性CD30分子的抗體連接，具有改進的殺傷腫瘤細胞的效用。
[0009] 目前，已對幾十種這樣的ADC藥物開展了臨床試驗。其中，Genentech和Immunogen 聯合開發了用於治療乳腺癌的與美登素（maytansine)偶聯的曲妥珠單抗，一種名為 ado-曲妥珠單抗emtansine的藥物（Kadcyla),其也被稱為T-DM1。2013年2月，FDA已 批准T-DMl用於人表皮生長因子受體2 (Her2)-陽性轉移性乳腺癌。美登素為一種小分子 毒素，其可與微管蛋白結合併可通過形成非還原性雙-馬來醯亞胺-丙二醇複合物防止微 管形成。曲妥珠單抗通過靶向人Her2對乳腺癌和胃癌起作用。曲妥珠單抗已被批准用於 Her2-陽性癌症。然而，曲妥珠單抗無法促進所有的Her2-陽性細胞的細胞凋亡。T-DMl使 選擇性靶向Her2受體的曲妥珠單抗與有效的細胞毒性劑美登素結合，從而殺傷腫瘤細胞。 T-DMl抗體結合Her2受體，導致從偶聯物中釋放的美登素產生細胞內在化作用，從而殺傷 腫瘤細胞。T-DMl具有更好的整體療效、藥代動力學性質以及較低的毒性。
[0010] 傳統的小分子化療藥物具有很強的毒性和藥代動力學優勢，但是在治療腫瘤的過 程中傳統的小分子化療藥物可影響其他生理靶標，產生嚴重的副作用。抗體-藥物偶聯物 使靶向作用和具有特定的藥代動力學的小分子藥物結合。抗體-藥物偶聯物的結構為具有 靶向功能的單克隆抗體與具有特定的藥理學性質的化合物的連接。這種技術需要治療性抗 體與靶標特異性結合，與諸如細胞毒素之類的具有治療作用或其他功能的分子偶聯。諸如 偶聯的抗體的內吞作用、偶聯的穩定性以及毒素的釋放和殺傷活性之類的許多因素影響這 種類型的抗體的作用。
[0011]目前正在使用的毒素分子包括微管蛋白抑制劑Auristatin類似物單甲基auristatinE、單甲基auristatinF和美登素。單甲基auristatinE為合成的微管聚 合物抑制劑，其可抑制微管聚集，幹擾腫瘤細胞有絲分裂並且可誘導細胞凋亡（Naumovski LandJunutulaJR.Glembatumumabvedotin,aconjugateofananti-glycoprotein non-metastaticmelanomaproteinBmAbandmonomethylauristatinEfortreatment ofmelanomaandbreastcancer.CurrOpinMolTher2003 ; 12 (2):248-57.Francisco JA，CervenyCG等人，cAClO-vcMMAE，ananti-CD30_monomethylauristatinEconjugate withpotentandselectiveantitumoractivity.Blood102 (4) : 1458-65) 〇 單甲基 auristatinF為抗有絲分裂Auristatin衍生物，在C末端具有帶電荷的苯丙氨酸殘基。 與不帶電荷的MMAE相比，單甲基auristatinF最小化對細胞信號通路的破壞並且最小化 細胞毒性。大量CD30細胞測試發現mAb-馬來醯亞胺己醯基-纈氨酸-瓜氨酸-P-氨基 苄氧基羰基-MMAF(mAb-Ll-MMAF)的毒性比單獨的MMAF的毒性強2, 200倍OoroninaSO 等人，EnhancedactivityofmonomethylauristatinFthroughmonoclonalantibody delivery:effectsoflinkertechnologyonefficacyandtoxicity.Bioconjug Chem，2006 ;17(1) :pll4-24)。美登素為起到微管蛋白聚合的抑制劑作用的抗有絲分裂劑， 其幹擾細胞核內的微管的形成。美登素還抑制DNA、RNA和蛋白質合成，已經發現美登素的 最大影響是對與DNA合成。
[0012] 抗體-藥物偶聯物具有直接和間接抗癌作用。抗體阻斷或活化配體/受體信號 轉導，誘導細胞凋亡，並且同時抗體可直接或間接地向腫瘤細胞呈遞或遞送有效載荷藥物 (例如，藥物、毒素、小幹擾RNA或放射性同位素）。治療性抗體藥物偶聯物使用抗體和偶聯 的藥物的雙重特性，第一為與靶標分子特異性結合的結合功能，第二為抗體自身的腫瘤細 胞殺傷功能，以及第三為偶聯的藥物的特定作用。目前使用的抗體-藥物偶聯藥物限於如 何直接殺傷腫瘤細胞。然而，由於在抗體、連接體分子、毒素分子、偶聯方面的嚴格的技術要 求以及能夠帶入腫瘤微環境分子內的毒素有限，在實際的臨床研究中仍然存在一些難題。


【發明內容】

[0013] 一方面，本發明提供一種具有通式（I)的結構的化合物：
[0014] TM-Ln-AM(I)，
[0015] 其中，TM為靶向部分，AM為能夠活化人免疫細胞的活化部分，Ln為連接體，η為選 自0和1的整數，所述人免疫細胞包括但不限於：樹突細胞、巨噬細胞、單核細胞、骨髓衍生 的抑制細胞、NK細胞、B細胞、T細胞或腫瘤細胞或者它們的組合。
[0016] 在一些實施方式中，人樹突細胞為漿細胞樣樹突細胞。在一些實施方式中，人樹突 細胞為髓樣樹突細胞。
[0017] 在一些實施方式中，AM能夠特異性結合人toll樣受體7 (TLR7)和/或人TLR8或 者能夠通過TLR7和/或TLR8活化人免疫細胞。
[0018] 另一方面，本發明提供一種具有通式（I)的結構的化合物：
[0019] TM-Ln-AM(I)，
[0020] 其中，TM為靶向部分，AM為能夠特異性結合人TLR7和/或人TLR8或者能夠通過 TLR7和/或TLR8活化人免疫細胞的活化部分，Ln為連接體，η為選自0和1的整數。
[0021] 在一些實施方式中，AM能夠特異性結合人TLR7和人TLR8這兩者；或者能夠通過 TLR7和/或TLR8活化人免疫細胞。
[0022] 在一些實施方式中，當TM包括抗體時，AM不包括CpG寡核苷酸。
[0023] 在一些實施方式中，其中，所述靶向部分能夠特異性結合腫瘤細胞或者相對於非 腫瘤細胞優先結合腫瘤細胞。在一些實施方式中，所述腫瘤細胞為癌細胞、肉瘤細胞、淋巴 瘤細胞、骨髓瘤細胞或中樞神經系統癌症細胞。
[0024] 在一些實施方式中，所述靶向部分能夠特異性結合腫瘤抗原或者相對於非腫瘤抗 原優先結合腫瘤抗原。在一些實施方式中，所述腫瘤抗原選自：⑶2,⑶19,⑶20,⑶22,⑶27 ，CD33,CD37,CD38,CD40,CD44,CD47,CD52,CD56,CD70,CD79 和CD137。在一些實施方式中， 所述腫瘤抗原選自：4-1ΒΒ，5T4,AGS-5,AGS-16,血管生成素 2,B7. 1，B7. 2,B7DC，B7H1，B7H2 ，B7H3,BT-062,BTLA,CAIX,癌胚抗原，CTLA4,Cripto,ED-B,ErbBl,ErbB2,ErbB3,ErbB4,EGF L7,EpCAM，EphA2,EphA3,EphB2,FAP，纖連蛋白，葉酸鹽受體，神經節苷酯GM3,⑶2,糖皮質 激素誘導的腫瘤壞死因子受體（GITR)，gpl00，gpA33，GPNMB，IC0S，IGFlR，整聯蛋白αV， 整聯蛋白〇乂@，1(11?，1^-3，1^18￥，間皮素，(3-1^1'，麗碳酸酐酶1父，1^(：1，1^(：16，粘連 蛋白-4,NKGD2,NOTCH, 0X40, 0X40L,PD-1,PDLl,PSCA,PSMA,RANKL,R0R1,R0R2,SLC44A4,多 配體蛋白聚糖-1，TACI,TAG-72,腱生蛋白，--Μ3,TRAILRl,TRAILR2,VEGFR-1,VEGFR-2,VEG FR-3和它們的變體。
[0025] 在一些實施方式中，所述靶向部分包含免疫球蛋白、蛋白質、肽、小分子、納米顆粒 或核酸。
[0026] 在一些實施方式中，所述靶向部分包含抗體或其功能片段。在一些實施方式中，所 述抗體選自：美羅華（利妥昔單抗）、赫賽汀（曲妥珠單抗）、愛必妥（西妥昔單抗）、維克 替比（帕尼單抗）、Arzerra(Ofatumumab)、Benlysta(貝利木單抗）、Yervoy(伊匹單抗）、 Perjeta(帕妥珠單抗）、Tremelimumab、Nivolumab、Dacetuzumab、Urelumab、MPDL3280A、 Lambrolizumab和Blinatumomab0
[0027] 在一些實施方式中，所述靶向部分包含Fab、Fab'、F(ab'）2、單結構域抗體、T和 Abs二聚物、Fv、scFv、dsFv、ds-scFv、Fd、線性抗體、微抗體、雙體抗體、雙特異性抗體片段、 bibody、tribody、sc-雙體抗體、κ(λ)body、BiTE、DVD-Ig、SIP、SMIP、DART或者含有一個 或一個以上⑶R的抗體類似物。
[0028] 在一些實施方式中，所述靶向部分包含VEGFR的ATWLPPR多肽、血小板反應蛋白-1 模擬物、CDCRGDCFCG(環狀）多肽、SCH221153 片段、NCNGRC(環狀）多肽、CTTHWGFTLC多 肽、CGNKRTRGC多肽（LyP-I)、奧曲肽、伐普肽、蘭樂肽、C-3940多肽、達必佳、利普安、諾雷德 或西曲瑞克。
[0029] 在一些實施方式中，所述靶向部分包含葉酸或其衍生物。
[0030] 在一些實施方式中，所述靶向部分包含細胞外結構域（E⑶）或ro-1，CTLA4,BTLA， KIR，HM3,4-1BB，LAG3的可溶形式、全長的部分表面配體雙調蛋白、β動物纖維素、EGF、肝 配蛋白、印igen、上皮調節蛋白、IGF、神經調節蛋白、TGF、TRAIL或VEGF。
[0031] 在一些實施方式中，所述靶向部分包含納米顆粒。
[0032] 在一些實施方式中，所述靶向部分包含適體。
[0033]在一些實施方式中，所述活化部分包含：(a)單鏈RNA(ssRNA)，優選地為0RN02、 0RN06、ssPoly(U)、ssRNA40、ssRNA41、ssRNA-DR或Poly(dT);或者（b)toll樣受體配體 (TLRL)類似物，優選地為CL075、CL097、CL264、CL307、Gardiquimod、洛索立賓、咪喹莫特或 瑞喹莫德。
[0034] 在一些實施方式中，所述連接體選自：肼基團，多肽，二硫化物基團和硫醚基團。
[0035] 在一些實施方式中，所述連接體為酶可裂解的。在一些實施方式中，所述連接體不 為酶可裂解的。
[0036] 在一些實施方式中，本發明提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含本文提供 的化合物或其藥學上可接受的鹽，以及一種或一種以上藥學上可接受的載體。
[0037] 在一些實施方式中，所述藥物組合物還包含第二化療劑。在一些實施方式中，所述 化療劑選自：它莫西芬（tamoxifen),雷洛昔芬（raloxifene),阿那曲唑（anastrozole), 依西美坦（exemestane),來曲唑（letrozole)，imatanib,紫杉醇，環磷醯胺，洛伐他汀 (Iovastatin) ,minosine,吉西他濱（gemcitabine),阿糖胞苷（cytarabine), 5-氟尿啼 陡，甲氨蝶呤，多西他賽（docetaxel),戈舍瑞林（goserelin),長春新鹼，長春鹼，噻氨 酯咕唑（nocodazole),替尼泊苷（teniposide),依託泊苷（etoposide),吉西他濱，埃博 黴素，長春瑞濱（vinorelbine),喜樹鹼，道諾黴素（daunorubicin),放線菌素D,米託蒽 醌，吖啶，阿黴素，表柔比星，或去甲氧基柔紅黴素。
[0038] 另一方面，本發明提供一種用於治療需要這種治療的受治者體內的疾病病症的方 法，所述方法包括將藥物組合物給藥於所述受治者，所述藥物組合物包含治療有效量的本 文提供的化合物或其藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的載體。
[0039] 在一些實施方式中，所述疾病病症為腫瘤。在一些實施方式中，所述疾病病症包括 異常細胞增殖。在一些實施方式中，所述異常細胞增殖包括癌前病變。在一些實施方式中， 所述異常增殖的細胞為癌細胞。
[0040] 在一些實施方式中，所述癌症選自：乳腺癌、結腸直腸癌、瀰漫性大B細胞淋巴瘤、 子宮內膜癌、濾泡性淋巴瘤、胃癌、膠質母細胞瘤、頭頸癌、肝細胞癌、肺癌、黑色素瘤、多發 性骨髓瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和腎細胞癌。
[0041] 又一方面，本發明提供一種具有通式（I)的結構的化合物：
[0042]TM-Ln-AM(I)，
[0043] 其中，TM為靶向部分，AM為活化部分，Ln為連接體，η為選自0和1的整數，條件 是，當TM包含抗體時，AM不包含CpG寡核苷酸或治療劑。
[0044] 在一些實施方式中，所述活化部分包含TLR配體、Nod樣受體配體、RIG樣受體配 體、CLR配體、⑶S配體或炎性體誘導物。
[0045] 在一些實施方式中，所述活化部分包含一種或一種以上選自以下的TLR(toll樣 受體配體，TLRL)的配體：TLR2,TLR3,TLR4,TLR5,TLR7,TLR8,TLR7/TLR8,TLR9,和TLR10。
[0046] 在一些實施方式中，所述活化部分包含：
[0047] (i)TLR2的配體，其選自：(a)熱殺死的細菌產物，優選地為HKAL，HKEB，HKHP，HKLM ，HKLP,HKLR,HKMF,HKPA,HKPG,或HKSA,HKSP，和（b)細胞壁成分產物，優選地為LAM,LM,LP 5, LTA,LTA,PGN,FSL,Pam2CSK4,Pam3CSK4,或酵母聚糖；
[0048] (ii)TLR3 的配體，其選自：Poly(I:C)和Poly(A=U);
[0049] (iii)TLR4 的配體，其選自：LPS和MPLA;
[0050] (iv)TLR5的配體，其選自：FLA和鞭毛蛋白；
[0051] (V)TLR7/8的配體，其選自：(《冊2，(《冊6,88?〇17卬)，881?隱40,881?隱41，881?隱-DR,Poly(dT)，CL075,CL097,CL264,CL307,Gardiquimod,洛索立賓，咪喹莫特，和瑞喹莫 德；
[0052] (vi)TLR9 的配體，其選自：0DN1585, 0DN1668, 0DN1826, 0DN2006, 0DN2007, 0DN221 6, 0DN2336, 0DN2395,和ODNM362 ;
[0053] (Vii)TLRlO的配體；
[0054] (viii)核苷酸-寡聚結構域（NOD)樣配體，其選自：NODl激動劑 (C12-iE-DAP，iE-DAP，Tri-DAP)、N0D2 激動劑（L18-MDP，MDP，M-TriLYS,M-TriLYS-D-ASN, 莫拉丁酯（Murabutide),N-羥乙醯基-MDP)和N0D1/N0D2 激動劑（M-TriDAP,PGN);
[0055] (ix) -個或一個以上RIG-I樣受體（RLR)的配體，其選自：5'ppp-dsRNA，Poly(dA
[0056] (X) -個或一個以上C型植物凝集素受體（CLR)的配體，其選自：凝膠多糖AL, HKCA，HKSC，WGP，酵母聚糖和海藻糖-6, 6-二山嵛酸鹽；
[0057] (xi) -個或一個以上細胞溶質DNA傳感器（⑶S)的配體，其選自：c-GMP，c-G-AMP ，c-G-GMP，c-A-AMP，c-di-AMP，c-di-MP，c-di-GMP，c-di-UMP，HSV-60,ISD，pCpG，Poly(dA: dT)，Poly(dG:dC)，Poly(dA),和VACV-70 ;或
[0058] (xii)炎性體誘導物，其選自：(a)NLRP3炎性體蛋白質複合物，優選地為明鞏晶 體，ATP,CPF1D晶體，Hermozoin，MSU晶體，納米Si02,奈及利亞菌素（Nigericin)，以及（b) AM2炎性體蛋白質複合物，優選地為Poly(dA:dT)。
[0059] 在一些實施方式中，所述活化部分包含頂02134、頂0205、MGN-1703、MGN-1704、 Agatolimod、SD-101、QAX-935、DIMS0150、PollinexQuattro、0M-174、Eritoran、TAK-242、 NI-0101、I型幹擾素、II型幹擾素、III型幹擾素、IL-12、IL-23、IL-18、IL-7 或IL-15。
[0060] 通討引用的合併
[0061] 說明書中提到的所有公開出版物、專利和專利申請在此通過引用併入本文，如同 具體地且單獨地說明通過引用將每個單獨的公開出版物、專利或專利申請併入本文一樣。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0062] 本發明的新特點在所附的權利要求書中具體說明。通過參考後面列舉的對示例性 的實施方式的詳細描述可更好地對本發明的特點和優勢加以理解，其中，使用了本發明的 原理，並且具有如下附圖：
[0063] 圖1表示偶聯的化合物的特性。如通過FACS分析所確定的，將曲妥珠單抗 MC-VC-瑞喹莫德和曲妥珠單抗-瑞喹莫德偶聯物與表達Her2的L細胞的結合與未偶聯的 曲妥珠單抗（作為參比）、對照人IgG和不相關人IgGl抗體比較。
[0064] 圖2表示曲妥珠單抗、曲妥珠單抗MC-vc-TLRL和曲妥珠單抗MC-TLRL偶聯物的體 外抗體依賴性細胞毒性（ADCC)分析。PBMC(效應細胞）與SKBR3細胞（靶細胞）一同加至 含有不同濃度的對照人IgGl、曲妥珠單抗或曲妥珠單抗MC-vc-TLRL和曲妥珠單抗MC-TLRL 偶聯物的96孔平板（靶標/效應物比例為1/60)中持續17小時。所有實驗一式兩份進行。 分析基於陰性SKBR3群測定。用LDH對死細胞進行染色。
[0065] 圖3A表示富集前後的DC百分數。上部的兩個圖中的數字表示譜系消減前後 總細胞中的DC(HLA-DR+Lin_)百分數。下部圖中的數字表示譜系消減前後總DC中的 mDC(CDllC+CD123_)和pDC(CD123+CDllC_)的百分數。圖3B至圖3D表示純化的人DC的 細胞因子產量分析。純化的人DC被接種在96孔平板中並且與異基因的未處理的（培養 基）或處理的不同濃度的TLRL或曲妥珠單抗MC-vc-TLRL和曲妥珠單抗MC-TLRL在37°C 下的孵育箱中直接培養20小時至22小時。在另一實驗中，提供濃度逐漸增加的西妥昔單 抗MC-vc-TLRL和西妥昔單抗MC-TLRL與人DC-同處理。收集上清液，通過ELISA分析人 IFN-a，IL-6,IL-12 (p70)和TNF-α。數據表示為一式三份的培養物的平均值土SD並且數 據代表來自三個健康供體中的兩個的獨立的實驗。
[0066] 圖4Α至圖4C表示I3DX胃腫瘤模型中曲妥珠單抗MC-vc-TLRL和曲妥珠單抗 MC-TLRL的治療效果。皮下帶有來源於患者的胃腫瘤的6至8周齡的雌性BALB/c裸鼠（nu/ nu)通過靜脈注射10mg/kg曲妥珠單抗MC-vc-TLRL,曲妥珠單抗MC-TLRL或未偶聯的曲妥 珠單抗或鹽水進行治療（每組12隻小鼠）。每周進行治療持續45天的周期。當腫瘤達到 平均尺寸為170mm3時開始治療。圖4A:數據表示平均腫瘤體積（平均值土SD)。當腫瘤達 到尺寸為2000mm3時腫瘤生長曲線停止。圖4B:治療過程中和治療後小鼠體重的變化。沒 有觀察到可檢測的失重。圖4C:治療組和對照組的存活曲線；接受曲妥珠單抗MC-vc-TLRL 或未偶聯的曲妥珠單抗的小鼠的壽命大幅度延長。
[0067] 圖5A至圖5B表示裸鼠/H1650人肺癌模型中西妥昔單抗MC-vc-TLRL的療效。皮 下帶有H1650肺癌細胞的6至8周齡雌性BALB/c裸鼠（nu/nu)通過靜脈注射10mg/kg西 妥昔單抗MC-vc-TLRL或未偶聯的西妥昔單抗或鹽水進行治療（每組12隻小鼠）。每周進 行治療持續45天的周期。當腫瘤達到平均尺寸為170mm3時開始治療。數據表示平均腫瘤 體積（平均值土SD)。當腫瘤達到尺寸為2000mm3時腫瘤生長曲線停止。圖5A:人肺癌模 型中西妥昔單抗MC-vc-TLRL的療效。圖5B:治療過程中和治療後小鼠體重的變化。沒有 觀察到可檢測的失重。

【具體實施方式】
[0068] 本發明的許多方面參考用於舉例說明的示例性應用在下面進行描述。應當理解的 是，列舉出許多具體的細節、關係以及方法來全面理解本發明。然而，本領域普通技術人員 可容易地意識到本發明可不按照具體細節中的一種或一種以上來實施或者可以其他方法 來實施。本發明不受舉例說明的操作順序或事件的限制，因為，一些操作可以不同的順序進 行和/或可同時與其他操作或事件一同進行。
[0069] 進一步地，不是所有舉例說明的操作或事件都需要根據本發明的方法來實施。
[0070] 本文使用的術語是僅僅是為了說明【具體實施方式】，而無意限定本發明。除非另 有明確說明，如本文使用的不指明具體數目的冠詞（"a"，"an"和"the"）意在包括複數 形式。此外，在【具體實施方式】部分和/或權利要求中使用的術語"包括（"including"， "include"）、具有（"having"，"has"，"with"）或其變體意在包括與術語"包含 (comprising) "類似的方式。
[0071] 術語"約"或"大約"是指由本領域普通技術人員測定的特定值在可接受的誤差範 圍內，該誤差範圍部分取決於該值如何測量或確定，即，測量系統的限制。例如，"約"可意 味著在本領域中每一操作在1個標準偏差範圍內或超過一個標準偏差。可選地，"約"可意 味著高達給定值的20 %的範圍，優選地高達給定值的10%的範圍，更優選地高達給定值的 5%的範圍並且更優選地高達給定值的1 %的範圍。可選地，尤其對於生物系統或過程而言， 該術語可意味著在某個值的某個數量級範圍內，優選地在某個值的5倍範圍內，更優選地 在某個值的2倍範圍內。在本申請和權利要求書中描述特定值的條件下，除非另有說明，應 當假定術語"約"意味著在特定值的可接受的誤差範圍內。
[0072] I.定義和縮寫
[0073] 除非另有說明，本文使用的所有技術術語和科學術語通常具有與本發明所屬技術 領域的普通技術人員通常理解的含義相同的含義。總體而言，本文使用的命名系統和細胞 培養、分子遺傳學、有機化學和核酸化學以及雜交中的實驗操作是本領域熟知的且普遍使 用的那些命名系統和實驗操作。標準技術用於核酸和肽的合成。所述技術和操作通常根據 本領域的常規方法和各種不同的常規參考文獻進行，本領域的常規方法和各種不同的常規 參考文獻在本文中提供。本文使用的命名系統和下面描述的分析化學和有機合成中的實驗 操作是本領域熟知的且普遍使用的命名系統和實驗操作。標準技術或其改良用於化學合成 和化學分析。
[0074] 除非另有說明，術語"烷基"其自身或作為另一取代基的一部分是指含有指定數目 的碳原子（即，C1-Cltl是指1至10個碳原子）的直鏈或支鏈或環狀烴自由基或者其組合，所 述直鏈或支鏈或環狀烴自由基或者其組合可為完全飽和的、單不飽和的或多不飽和的並且 可包括二價和多價自由基。飽和的烴自由基的實例包括但不限於如下基團，例如，甲基、乙 基、η-丙基、異丙基、η-丁基、叔丁基、異丁基、仲丁基、環己基、（環己基）甲基、環丙基甲基、 其同系物或異構體，例如，η-戊基、η-己基、η-庚基、η-辛基等等。不飽和烷基為具有一個 或一個以上雙鍵或三鍵的烷基。不飽和烷基的實例包括但不限於：乙烯基、2-丙烯基、巴豆 基、異戊烯基、2- ( 丁二烯基）、2, 4-戊二烯基、3- (1，4-戊二烯基）、乙塊基、1-丙塊基和 3_丙炔基、3-丁炔基以及高級同系物和異構體。除非另有說明，術語"烷基"還意在包括下 面更加詳細定義的那些烷基衍生物，例如，"雜烷基"。限定為烴基的烷基基團被稱為"均烷 基（homoalkyl)"。
[0075] 術語"亞烷基"其自身或作為另一取代基的一部分是指從烷烴衍生得到的二價自 由基，例如，但不限於：-ch2ch2ch2ch2-，並且還包括下面如"雜亞烷基"所描述的那些基團。 通常，烷基（或亞烷基）基團可具有1至24個碳原子，本發明中優選地為具有10個或更少 的碳原子的那些基團。"低級烷基"或"低級亞烷基"是較短鏈烷基或亞烷基基團，通常具有 8個或更少的碳原子。
[0076] 術語"燒氧基"、"燒基氣基"和"燒硫基"（或硫代燒氧基）以其常規含義使用，並 且分別是指通過氧原子、氨基基團或硫原子與分子的剩餘部分連接的那些烷基基團。
[0077] 除非另有說明，術語"雜烷基"其自身或與另一術語結合是指由規定數目的碳原子 和至少一個選自0、N、Si和S的雜原子構成的、穩定的直鏈或支鏈或環狀烴自由基或者其 組合，並且，其中，氮和硫原子可被任選地氧化並且氮雜原子可被任選地季銨化。雜原子〇、 N和S以及Si可位於雜烷基的任何內部位置或者位於烷基與分子的剩餘部分連接的位置。 實例包括但不限於：-CH2-CH2-〇-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3 ,-Ch2-CH2j-S(O)-CH3j-CH2-CH2-S(O)2-CH3j-CH=CH-O-CH3l-Si(CH3)3l-CH2-CH=N-OCH3, 和-CH=CH-N(CH3) -CH3。最多兩個雜原子可以連續，例如，-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(CH3) 3。 類似地，術語"雜亞烷基"其自身或作為另一取代基的一部分是指從雜烷基衍生得到的二價 自由基，例如但不限於：-CH2-CH2-S-CH2-CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。對於雜亞烷基基 團而言，雜原子還可佔據鏈端中的一個末端或者鏈端的兩個末端（例如，亞烷基氧、亞烷基 二氧、亞烷基氨基、亞烷基二氨基，等等）。而且，對於亞烷基和雜亞烷基的連接基團而言， 所寫的連接基團的分子式中的方向並不暗示連接基團的方向。例如，分子式-c(o)2r' -代 表-C(0)2R' -和-R'C(0)2-。
[0078] -般而言，"醯基取代基"也選自上面列舉的基團。如本文使用的術語"醯基取代 基"是指連接至本發明的化合物的多環核心的基團且該基團滿足直接或間接地連接至本發 明的化合物的多環核心的羰基碳的化合價。
[0079] 除非另有說明，術語"環烷基"和"雜環烷基"其自身或者與其他術語的組合分別 表示"烷基"和"雜烷基"的環狀形式。此外，對於雜環烷基而言，雜原子可佔據雜環與分子 的剩餘部分連接的位置。環烷基的實例包括但不限於：環戊基、環己基、1-環己烯基、3-環 己烯基、環庚基，等等。雜環烷基的實例包括但不限於：1_ (1，2, 5, 6-四氫吡啶基）、1_哌啶 基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-嗎啉基、3-嗎啉基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫噻 吩-2-基、四氫噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基，等等。
[0080] 除非另有說明，術語"滷代"或"滷素"其自身或作為另一取代基的一部分是指氟、 氯、溴或碘原子。此外，諸如"滷代烷基"之類的術語意在包括單滷代烷基和多滷代烷基。例 如，術語"滷代（C1-C4)烷基"意在包括但不限於：三氟甲基、2, 2, 2-三氟乙基、4-氯代丁基、 3_漠代丙基，等等。
[0081] 除非另有說明，術語"芳基"是指多不飽和的芳香族烴取代基，其可為單環或多環 (優選地為1個環至3個環），其可稠合在一起或共價連接。術語"雜芳基"是指含有1個 至4個選自N、0和S的雜原子的芳基（或環），其中，氮和硫原子被任選地氧化，並且氮原 子被任選地季銨化。雜芳基基團可通過雜原子連接至分子的剩餘部分。芳基和雜芳基的非 限定性的實例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-聯苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡 唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-惡唑基、4-惡唑基、2-苯基-4-惡唑基、5-惡唑基、 3-異惡唑基、4-異惡唑基、5-異惡唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋 喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯並 噻唑基、嘌呤基、2-苯並咪唑基、5-吲哚基、1 -異喹啉基、5-異喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔 啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。上述芳基和雜芳基環系統的每一個的取代基選自下述可接受 的取代基基團。
[0082] 為了簡潔起見，當與其他術語（例如，芳氧基、芳硫氧基、芳基烷基）組合使用時， 術語"芳基"包括上述芳基和雜芳基環。因此，術語"芳基烷基"意在包括其中芳基連接至 燒基的那些自由基（例如，節基、苯乙基、批陡甲基，等等），所述燒基包括碳原子（例如，亞 甲基）被例如氧原子取代的那些烷基（例如，苯氧基甲基、2-吡啶基氧甲基、3-(1-萘基氧） 丙基7等等）°
[0083] 上述術語（例如"烷基"、"雜烷基"、"芳基"和"雜芳基"）的每一個包括所指定的 自由基的取代形式和未取代形式這兩者。每種類型的自由基的優選的取代基在下文提供。
[0084] 燒基和雜燒基自由基（包括通常稱為亞燒基、稀基、雜亞燒基、雜稀基、塊基、環 烷基、雜環烷基、環烯基和雜環烯基的那些基團）的取代基通常分別被稱為"烷基取代 基"和"雜烷基取代基"，並且它們可為選自下列基團的多種基團中的一種或一種以上， 所述基團選自但不限於下列基團：-〇R'，=〇, =NR'，=N-〇R'，-NR'R"，-SR'，_滷 素，-SiR，R"R"，，-OC(0)R，，-C(0)R，，H：02R，，-C0NR，R"，-OC(0)NR，R"，-NR"C(0) R，，-NR，-C(0)NR"R"，，-NR"C(0) 2R，，-NR-C(NR，R"R，，，）=NR""，-NR-C(NR，R"）= NR'"，-S(0)R'，-S(0)2R'，-S(0)2NR'R"，-NRS02R'，-CN和-NO2，數量為 0 至（2m，+1)，其 中，m'為該自由基的碳原子總數。R'，R"，R"'和R""優選地分別獨立地指氫、取代或未取 代的雜烷基、取代或未取代的芳基（例如，1至3個滷素取代的芳基），取代或未取代的烷 基、烷氧基或硫代烷氧基，或者芳基烷基基團。例如，當本發明的化合物包括一個以上R基 團時，R基團中的每一個獨立地選自各R'，R"，R"'和R""基團（當存在這些基團中的一個 以上時）。當R'和R"連接至相同的氮原子時，它們可與氮原子結合形成5元環、6元環或7 元環。例如，-NR'R"意在包括但不限於：1-吡咯烷基和4-嗎啉基。通過以上對取代基的 討論，本領域技術人員會理解的是，術語"烷基"意在包括如下基團：該基團包括連接至除了 氫基團以外的基團的碳原子，例如肩代烷基（例如，-CF3和-CH2CF3)和醯基（例如，-C(O) CH3,-C(0)CF3,-C(0)CH2OCH3,等等）。
[0085] 類似於對於烷基自由基的取代基的描述，芳基取代基和雜芳基取代基通常被分別 稱為"芳基取代基"和"雜芳基取代基"，並且為不同的，選自例如，滷素，-OR'，= 0, =NR'， =N-OR，，-NR，R"，-SR，，-滷素，-SiR，R，'R，'，，-OC(0)R，，-C(0)R，，-C02R，，-C0NR，R"，-OC(0) NR'R"，-NR"C(O)R'，-NR' -C(O)NR"R"'，-NR"C(O)2R'，-NR-C(NR，R"）=NR'"，-S(0)R'， -S(0) 2R'，-S(0) 2NR'R", -NRS02R'，-CN和-NO2, -R'，-N3,-CH(Ph) 2，氟代（C「C4)烷氧基，和 氟代（C1-C4)烷基，數量為0至芳香族環系統上開放的化合價的總數，並且其中R'，R"，R"' 和R""優選地獨立地選自：氫、（C1-C8)烷基和雜烷基、未取代的芳基和雜芳基，（未取代的 芳基P(C1-C4)烷基以及（未取代的芳基）氧-(C1-C4)烷基。例如，當本發明的化合物包含 一個以上R基團時，R基團中的每一個獨立地選自各R'，R"，R"'和R""基團（當存在這些 基團中的一個以上時）。
[0086] 芳基環或雜芳基環的相鄰原子上的芳基取代基中的兩個可任選地被通 式-T-C(0) - (CRR'）q-u-的取代基取代，其中，T和U獨立地為-NR-，-0-，-CRR' -或單個化 學鍵，並且q為〇至3的整數。可選地，芳基環或雜芳基環的相鄰原子上的取代基中的兩個 可任選地被通式-A-(CH2)r-B-的取代基取代，其中，A和B獨立地為-CRR'-，-0-，-NR-，-S -，-S(0)-，-S(0)2_，-S(0) 2NR'-或單個化學鍵，並且r為1至4的整數。由此形成的新環中 的單個化學鍵中的一個可被雙鍵任選地取代。可選地，芳基環或雜芳基環的相鄰原子上的 取代基中的兩個可任選地被通式-(CRR'）s-X_(CR"R'"）d-的取代基取代，其中，s和d獨 立地為 0 至 3 的整數，並且X為-0-，-NR' -，-S-，-S(0) -，-S(0) 2_，或-S(0) 2NR' _。取代 基R，R'，R"和R"'優選地獨立地選自氫或者取代或未取代的（C1-C6)烷基。
[0087] 如本文使用的術語"雜原子"包括氧（0)、氮（N)、硫（S)、磷（P)和矽（Si)。
[0088] II.組合物
[0089] -方面，本發明提供一種具有通式（I)的結構的化合物：
[0090]TM-Ln-AM (I)，
[0091] 其中，TM為靶向部分，AM為能夠活化人樹突細胞、NK細胞或腫瘤細胞或者它們的 組合的活化部分，Ln為連接體，η為選自0和1的整數。
[0092] 另一方面，本發明提供一種具有通式（I)的結構的化合物：
[0093]TM-Ln-AM (I)，
[0094] 其中，TM為靶向部分，AM為能夠特異性結合人TLR7和/或人TLR8的活化部分， Ln為連接體，η為選自0和1的整數。
[0095] 又一方面，本發明提供一種具有通式（I)的結構的化合物：
[0096]TM-Ln-AM (I)，
[0097] 其中，TM為靶向部分，AM為活化部分，Ln為連接體，η為選自0和1的整數，條件 是當TM包含抗體時，AM不包含CpG寡核苷酸或治療劑。
[0098] A.靶向部分
[0099] 總體而言，本發明的化合物包含靶向部分。
[0100] 本文中的"靶向部分（TM) "或"靶向劑"是指特異性地或選擇性地與目標分子、細 胞、顆粒、組織或聚集體結合的分子、複合物或聚集體，所述目標分子、細胞、顆粒、組織或聚 集體通常稱為"靶標"或"標記物"並且本文將進一步詳細討論這些目標分子、細胞、顆粒、 組織或聚集體。
[0101] 在一些實施方式中，靶向部分包含免疫球蛋白、蛋白質、肽、小分子、納米顆粒或核 酸。
[0102] 諸如抗體（例如，嵌合抗體、人源化抗體和人抗體）、受體的配體、植物凝集素和糖 類以及一些酶的底物之類的示例性的靶向劑在本領域中被識別並且不受限制地用於實施 本發明。其他靶向劑包括一類如下化合物：該化合物不包括特異性分子識別基序，該化合物 包括將分子量加至活化部分的納米顆粒、諸如聚（乙二醇）之類的大分子、多糖，以及聚氨 基酸。額外的分子量影響活化部分的藥代動力學，例如血清半衰期。
[0103] 在一些實施方式中，靶向部分為抗體，抗體片段，雙特異性抗體或其他基於抗體的 分子或化合物。然而，靶向部分的其他實例為本領域已知的並且可使用靶向部分的其他實 例，例如，適體、avimer、受體結合配體、核酸、生物素-親和素結合對、結合肽或蛋白質，等 等。術語"靶向部分"和"結合部分"在本文中同義使用。
[0104] IEfe
[0105] 本文中的"靶標"或"標記物"是指能夠特異性結合特定的靶向部分的任何實體。 在一些實施方式中，靶標與一個或一個以上特定細胞或組織類型特別相關。在一些實施方 式中，祀標與一種或一種以上特定疾病狀態特別相關。在一些實施方式中，祀標與一種或一 種以上特定發育階段特別相關。例如，細胞類型特異性標記物在該細胞類型中的表達水平 通常比在參比細胞群中的表達水平高至少兩倍。在一些實施方式中，細胞類型特異性標記 物的水平比在參比群中的平均表達高至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、 至少8倍、至少9倍、至少10倍、至少50倍、至少100倍或者至少1，000倍。細胞類型特異 性標記物的檢測或測量可將一種目標細胞類型或多種目標細胞類型與許多其他細胞類型、 大多數其他細胞類型或所有其他細胞類型區分開。在一些實施方式中，靶標可包含本文所 描述的蛋白質、碳水化合物、脂質和/或核酸。
[0106] 如果一種物質與核酸的靶向部分特異性結合，那麼該物質可被認為是為了本文所 述的目的而"被靶向的"。在一些實施方式中，核酸靶向部分在嚴格條件下與靶標特異性結 合。如果靶向部分與靶標特異性結合，那麼含有靶向部分的本發明的複合物或化合物被認 為是"被靶向的"，從而將整個複合物或化合物組合物遞送至特定的器官、組織、細胞、細胞 外基質成分和/或細胞內腔室。
[0107] 在一些實施方式中，根據本發明的化合物包含靶向部分，所述靶向部分特異性結 合與器官、組織、細胞、細胞外基質成分和/或細胞內腔室有關的一個或一個以上靶標（例 如，抗原）。在一些實施方式中，化合物包含靶向部分，所述靶向部分特異性結合與特定器官 或器官系統有關的靶標。在一些實施方式中，根據本發明的化合物包含核靶向部分，該核靶 向部分特異性結合一個或一個以上細胞內靶標（例如，細胞器、細胞內蛋白質）。在一些實 施方式中，化合物包含靶向部分，所述靶向部分特異性結合與病態的器官、組織、細胞、細胞 外基質成分和/或細胞內腔室有關的靶標。在一些實施方式中，化合物包含靶向部分，所述 靶向部分特異性結合與特定細胞類型（例如，內皮細胞、癌細胞、惡性癌細胞、前列腺癌細 胞，等等）有關的祀標。
[0108] 在一些實施方式中，根據本發明的化合物包含靶向部分，所述靶向部分與對一種 或一種以上特定組織類型（例如，肝臟組織和前列腺組織）具有特異性的靶標結合。在一些 實施方式中，根據本發明的化合物包含靶向部分，所述靶向部分與對一種或一種以上特定 細胞類型（例如，T細胞和B細胞）具有特異性的靶標結合。在一些實施方式中，根據本發 明的化合物包含靶向部分，所述靶向部分與對一種或一種以上特定疾病狀態（例如，腫瘤 細胞和健康細胞）具有特異性的靶標結合。在一些實施方式中，根據本發明的化合物包含 靶向部分，所述靶向部分與對一種或一種以上特定發育階段（例如，幹細胞和分化的細胞） 具有特異性的靶標結合。
[0109] 在一些實施方式中，靶標可為標記物，所述標記物僅僅或主要與一種或幾種細胞 類型、一種或幾種疾病和/或一種或幾種發育階段有關。細胞類型特異性標記物在該細胞 類型中的表達水平通常比在參比細胞群中的表達水平高至少兩倍，例如，所述參比細胞群 可由含有幾乎等量的來自多種（例如，5-10種，或者更多）不同的組織或器官的細胞的混 合物構成。在一些實施方式中，細胞類型特異性標記物的表達水平比在參比群中的平均表 達水平高至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、至少9倍、至少10 倍、至少50倍、至少100倍或至少1000倍。細胞類型特異性標記物的檢測和測量可將一種 目標細胞類型或多種目標細胞類型與許多其他細胞類型、大多數其他細胞類型或所有其他 細胞類型區分開。
[0110] 在一些實施方式中，靶標包含蛋白質、碳水化合物、脂質和/或核酸。在一些實施 方式中，靶標包含蛋白質和/或其特徵部分，例如，腫瘤標記物、整聯蛋白、細胞表面受體、 跨膜蛋白、細胞間蛋白、離子通道、膜轉運蛋白、酶、抗體、嵌合蛋白、糖蛋白，等等。在一些實 施方式中，靶標包含碳水化合物和/或其特徵部分，例如，糖蛋白，糖（例如，單糖、二糖、多 糖）、多糖包被（即，大多數真核細胞的外表面上富集碳水化合物的外周區域），等等。在 一些實施方式中，靶標包含脂質和/或其特徵部分，例如，油、脂肪酸、甘油酯、激素、類固醇 (例如，膽固醇、膽汁酸）、維生素（例如，維生素E)、磷脂、神經鞘脂、脂蛋白，等等。在一些 實施方式中，靶標包含核酸和/或其特徵部分，例如，DNA核酸、RNA核酸、修飾的DNA核酸、 修飾的RNA核酸、包括DNA、RNA、修飾的DNA和修飾的RNA的任何組合在內的核酸。
[0111] 本領域已知多種標記物。典型的標記物包括細胞表面蛋白質，例如，受體。示例性 的受體包括但不限於：轉鐵蛋白受體、LDL受體、生長因子受體（例如，表皮生長因子受體家 族成員（例如，EGFR、Her2、Her3、Her4))或血管內皮生長因子受體、細胞因子受體、細胞粘 附分子、整聯蛋白、選擇素和⑶分子。所述標記物可為僅僅存在於或大量存在於惡性腫瘤 細胞上的分子，例如，腫瘤抗原。
[0112] 腫瘤抗原
[0113] 在一些實施方式中，靶向部分能夠特異性結合腫瘤細胞或相對於非腫瘤細胞優先 結合腫瘤細胞。
[0114] 靶向部分與腫瘤細胞的結合可使用本領域已知的檢測方法來測量。
[0115] 在一些實施方式中，腫瘤細胞為癌細胞、肉瘤細胞、淋巴瘤細胞、骨髓瘤細胞或中 樞神經系統癌症細胞。
[0116] 在一些實施方式中，靶向部分能夠特異性結合腫瘤抗原或者相對於非腫瘤抗原優 先結合腫瘤抗原。
[0117] 本文中的"特異性結合"或"優先結合"是指在兩個結合搭檔之間（例如，在靶向部 分及其結合搭檔之間）的結合對兩個結合搭檔具有選擇性並且可從不想要的或非特異性 相互作用中區分出來。例如，抗原結合部分結合特異性抗原決定簇的能力可通過酶聯免疫 吸附分析法（ELISA)或其他本領域技術人員熟悉的技術（例如，表面等離子共振技術（在 BIAcore儀器上分析）（Liljeblad等人，GlycoJ17,323-329(2000))和傳統的結合分析 (Heeley，EndocrRes28,217-229(2002)))測量。術語"抗-[抗原]抗體"和"與[抗原] 結合的抗體"是指能夠通過足夠的親合力結合各自的抗原的抗體，這樣，所述抗體用作靶向 抗原的診斷劑和/或治療劑。在一些實施方式中，抗-[抗原]抗體結合不相關的蛋白質的 程度小於所測量（例如，通過放射性免疫分析（RIA))的抗體抗原結合程度的約10%。在一 些實施方式中，結合[抗原]的抗體的解離常數（KD)小於ΙμΜ、小於ΙΟΟηΜ、小於ΙΟηΜ、小 於InM、小於0.InM、小於0.OlnM或小於0.OOlnM(例如，KT8M或更小，例如，KT8M至KT13M, 例如，KT9M至I(T13M)。應當理解的是，上述定義還可應用於與抗原結合的抗原結合部分。
[0118] 在一些特定的實施方式中，靶標為腫瘤標記物。在一些實施方式中，腫瘤標記物為 存在於腫瘤中的抗原，所述抗原不存在於正常器官、組織和/或細胞中。在一些實施方式 中，腫瘤標記物為抗原，所述抗原在腫瘤中比在正常器官、組織和/或細胞中更加普遍。在 一些實施方式中，腫瘤標記物為抗原，所述抗原在惡性癌症細胞中比在正常細胞中更加普 遍。
[0119] 本文中的"腫瘤抗原"是指腫瘤細胞中產生的抗原性物質，即，該物質觸發宿主體 內的免疫反應。體內的正常蛋白質由於自體耐受而不是抗原性的，所述自體耐受為如下過 程：在該過程中，自身反應性的細胞毒性T淋巴細胞（CTL)和產生自身抗體的B淋巴細胞在 初級淋巴組織（BM)中被"中心性地"剔除並在次級淋巴組織（產生T細胞的大多數胸腺和 產生B細胞的脾/淋巴結）中被"外周性地"剔除。因此，未暴露於免疫系統的任何蛋白質 觸發免疫反應。這可包括與免疫系統完全隔絕的正常蛋白質、以極少的量正常生成的蛋白 質、僅僅在某些發育階段正常生成的蛋白質或者結構由於突變而發生改變的蛋白質。
[0120] 在一些實施方式中，相對於在正常組織和/或細胞中的表達，靶標優先在腫瘤組 織和/或細胞中表達。
[0121] 在本發明的一些實施方式中，標記物為腫瘤標記物。所述標記物可為多肽，所 述多肽在分裂的細胞中的表達水平比在未分裂的細胞中的表達水平高。例如，Her-2/ neu(也稱為ErbB-2)為EGF受體家族成員並在與乳腺癌相關的腫瘤細胞表面表達。另 一實例為稱為F3的肽，該肽為用於將納米顆粒引向核仁蛋白的合適的靶向劑（Porkka etal. ,2002,Proc.Natl.Acad.Sci.，USA, 99:7444;andChristian等人，2003,J.Cell Biol.，163:871)。包含納米顆粒和AlO適體（與PSM特異性結合）的靶向顆粒表現出能 夠特異性且有效地將多西他賽遞送至前列腺癌腫瘤。
[0122] 特異性靶向這些腫瘤靶標的抗體或其他藥物特異性地幹擾並調節腫瘤細胞生物 行為的信號通路，直接調節或阻斷信號通路，從而抑制腫瘤細胞生長或誘導細胞凋亡。迄今 為止，已批准了幾十種靶向藥物用於實體瘤或血液系統惡性腫瘤的臨床研究和治療，並且 已有多種用於血液系統惡性腫瘤的靶向藥物。
[0123] 在一些實施方式中，腫瘤抗原（或腫瘤靶標）選自：⑶2,⑶19,⑶20,⑶22,⑶27,C D33,CD37,CD38,CD40,CD44,CD47,CD52,CD56,CD70,CD79 和CD137。
[0124] 在一些實施方式中，腫瘤抗原（或腫瘤靶標）選自：4-lBB，5T4，AGS-5，AGS-16,血 管生成素 2,B7. 1，B7. 2,B7DC,B7H1,B7H2,B7H3,BT-062,BTLA,CAIX,癌胚抗原，CTLA4,Crip to,ED-B,ErbBl,ErbB2,ErbB3,ErbB4,EGFL7,EpCAM,EphA2,EphA3,EphB2,FAP,纖連蛋白， 葉酸鹽受體，神經節苷酯GM3,GD2,糖皮質激素誘導的腫瘤壞死因子受體（GITR)，gplOO,g pA33，GPNMB，IC0S，IGFlR，整聯蛋白αV，整聯蛋白αV3，KIR，LAG-3，LewisY抗原，間 皮素，c-MET,MN碳酸酐酶IX，MUCl,MUC16,粘連蛋白-4,NKGD2,NOTCH, 0X40, 0X40L,PD-1,PD LI,PSCA,PSMA,RANKL,R0R1,R0R2,SLC44A4,多配體蛋白聚糖-I,TACI,TAG-72,腱生蛋白，T 頂3,TRAILRl,TRAILR2,VEGFR-1,VEGFR-2,VEGFR-3和它們的變體。腫瘤抗原的變體包括本 領域已知的和/或天然生成的各種不同的突變體或多形態。
[0125] 抗體
[0126] 在一些實施方式中，靶向部分包含抗體或其功能片段。
[0127] 本文使用的"免疫球蛋白"或"抗體"是指全長（即，天然生成的或通過正常免疫 球蛋白基因片段重組過程形成的）免疫球蛋白分子（例如，IgG抗體）或免疫球蛋白分子 的免疫活性（即，特異性結合）部分，例如抗體片段。在本發明要求保護的範圍內，抗體或 抗體片段可被偶聯或衍生。這些抗體包括IgGl，lgG2a，IgG3,IgG4(以及IgG4亞型）和IgA 同種型。
[0128] 本文的術語"抗體"以其廣義使用並包含各種不同的抗體結構，包括但不限於：單 克隆抗體、多克隆抗體、多特異性抗體（例如，雙特異性抗體）和抗體片段，只要它們表現出 期望的抗原結合活性並且包含免疫球蛋白的Fc區域或等同於該Fc區域的區域。本文中可 互換使用的術語"全長抗體"、"完整抗體"和"整個抗體"是指具有與天然抗體結構基本類 似的結構的抗體或者具有含本文定義的Fc區域的重鏈的抗體。
[0129] 本文的"天然抗體"是指具有不同結構的天然生成的免疫球蛋白分子。例如，天然 IgG抗體為約150, 000道爾頓的異源四聚體糖蛋白，其由被二硫鍵連接的兩個相同的輕鏈 和兩個相同的重鏈構成。從N端至C端，每一重鏈具有可變區（VH)，也稱為可變重鏈結構域 或重鏈可變結構域，重鏈之後為三個恆定結構域（CH1、CH2和CH3)，也稱為重鏈恆定區。類 似地，從N端至C端，每一輕鏈具有可變區（VL)，也稱為可變輕鏈結構域或輕鏈可變結構域， 輕鏈之後為恆定輕鏈結構域（CL)，也稱為輕鏈恆定區。基於抗體恆定結構域的胺基酸序列， 抗體的輕鏈可指定為兩種類型（稱為κ和λ)中的一種。
[0130] 本文中的"抗體片段"是指不同於完整抗體的分子，所述分子包含結合抗原 的完整抗體的一部分，所述抗原與完整抗體結合。抗體片段的實例包括但不限於： Fv,Fab,Fab'，Fab' -SH,F(ab'）2，雙體抗體，線性抗體，單鏈抗體分子（例如，scFv)，單 結構域抗體和由抗體片段形成的多特異性抗體。關於一些抗體片段的綜述請參見，Hudson 等人，NatMed9,129-134(2003)。關於scFv片段的綜述請參見例如，Pliickthun,in ThePharmacologyofMonoclonalAntibodies,vol. 113,Rosenburg和Moore編 輯，Springer-Verlag,NewYork,pp. 269-315(1994);以及TO93/16185;和美國專利第 5, 571，894號和第5, 587, 458號。關於含有挽救受體結合表位殘基且具有提高的體內半 衰期的Fab和F(ab'）2片段的討論，請參見美國專利第5, 869, 046號。雙體抗體為可 為二價的或雙特異性的具有兩個抗原結合位點的抗體片段。請參見例如，EP404, 097; W01993/01161;Hudson等人，NatMed9,129-134(2003);和Hollinger等人，ProcNatl AcadSciUSA90,6444-6448(1993)。三體抗體和四體抗體也在Hudson等人，NatMed 9,129-134(2003)中描述。單結構域抗體為含有抗體的所有或一部分重鏈可變結構域或者 含有抗體的所有或一部分輕鏈可變結構域的抗體片段。在一些實施方式中，單結構域抗體 為人單結構域抗體（Domantis,Inc.，Waltham,MA;參見例如，美國專利No. 6, 248, 516B1)。 抗體片段可通過各種不同的技術製備，所述技術包括但不限於：如本文描述的，完整抗體的 蛋白水解消化以及通過重組宿主細胞（例如，大腸桿菌或噬菌體）生成。
[0131] 本文中的"抗原結合結構域"是指包含與抗原的全部或一部分特異性結合且互補 的區域的抗體的一部分。抗原結合結構域可通過例如，一個或一個以上抗體可變結構域 (也稱為抗體可變區）來提供。具體而言，抗原結合結構域包含抗體輕鏈可變區（VL)和抗 體重鏈可變區（VH)。
[0132] 本文中的"可變區"或"可變結構域"是指涉及使抗體與抗原結合的抗體重鏈結構 域或輕鏈結構域。天然抗體的重鏈和輕鏈的可變結構域（分別為VH和VL)通常具有類似的 結構，其中，每一結構域包含四個保守的框架區（FR)和三個高變區（HVR)。參見例如，Kindt 等人，KubyImmunology,第六版，W.H.FreemanandCo.，第 91 頁（2007)。單個VH或VL 結構域可足以帶來抗原結合特異性。
[0133] 本文中的"高變區"或"HVR"是指序列高度可變和/或形成結構限定的環（"高變 環"）的抗體可變結構域的各個區域。一般而言，天然四鏈抗體包含六個HVR，三個在VH(H1、 H2、H3)中，三個在VL(LI、L2、L3)中。HVR通常包含來自高變環的胺基酸殘基和/或來自 互補決定區（CDR)的胺基酸殘基，後者具有最高的序列可變性和/或涉及抗原識別。除了 VH中的⑶R1，⑶R通常包含形成高變環的胺基酸殘基。高變區（HVR)也被稱為"互補決定 區（CDR) "並且與形成抗原結合區的可變區部分有關的這些術語在本文中互換使用。該特定 區域已由Kabat等人，U.S.Dept,ofHealthandHumanServices,SequencesofProteins ofImmunologicalInterest(1983)和Chothia等人，JMolBiol196:901-917(1987)描 述，其中，當彼此比較時，定義包括胺基酸殘基的重疊或子集。然而，關於抗體的CDR或其變 體的任何定義的應用意在本文定義的和本文使用的術語的範圍內。包含特定CDR的確切的 殘基數目隨CDR的序列和尺寸的不同而不同。在給出抗體的可變區胺基酸序列的條件下， 本領域技術人員可常規確定哪些殘基包含特定⑶R。
[0134] 本發明的抗體可為嵌合抗體、人源化抗體、人抗體或抗體融合蛋白。
[0135] 本文中的"嵌合抗體"是指包含抗體重鏈和輕鏈這兩者的可變結構域的重組蛋白 質，所述可變結構域包括來源於一個物種的抗體（優選地為齧齒動物抗體，更優選地為鼠 科動物抗體）的互補決定區（CDR)，而抗體分子的恆定結構域來源於人抗體的恆定結構域。 對於獸醫應用而言，嵌合抗體的恆定結構域可來源於其它物種的恆定結構域，所述其它物 種例如，類人類靈長類動物、貓或狗。
[0136] 本文中的"人源化抗體"是指如下重組蛋白：在該重組蛋白中，來自於一個物種的 抗體（例如，齧齒動物抗體）的CDR從齧齒動物抗體的可變重鏈和可變輕鏈轉移至人重鏈 可變結構域和人輕鏈可變結構域中。抗體分子的恆定結構域來源於人抗體的恆定結構域。 在一些實施方式中，人源化抗體的框架區的特定殘基，尤其是接觸或靠近CDR序列的那些 特定殘基，可被修飾，例如可被來自於原始齧齒動物、類人類靈長類動物的相應殘基或其他 抗體代替。
[0137] 本文中的"人抗體"是指例如從轉基因小鼠中獲得的抗體，所述轉基因小鼠已 被"改造"為響應抗原刺激生成特定的人抗體。在該技術中，人重鏈基因座和人輕鏈基因 座的元件被引入來源於胚胎幹細胞系的小鼠品系中，所述胚胎幹細胞系包含內源性重鏈 基因座和輕鏈基因座的靶向斷裂。轉基因小鼠可合成對人抗原具有特異性的人抗體，並 且小鼠可用於生成分泌人抗體的雜交瘤。從轉基因小鼠中獲得人抗體的方法由Green等 人，NatureGenet. 7:13 (1994)，Lonberg等人，Nature368:856 (1994)，Taylor等人，Int. Immun. 6:579(1994)描述。完全人抗體還可通過基因轉染法或染色體轉染法以及噬菌體 展示技術來構建，所有這些方法為本領域已知的。請參見例如，McCafferty等人，Nature 348:552-553 (1990)，其中描述了通過來自於未免疫的供體的免疫球蛋白可變結構域基因 譜系體外生成人抗體及其片段。在該技術中，抗體可變結構域基因框內克隆至絲狀噬菌體 的主要或次要外殼蛋白基因中，並且在噬菌體顆粒的表面上展示為功能抗體片段。因為絲 狀顆粒包含噬菌體基因組的單鏈DNA拷貝，基於抗體的功能性質的選擇還導致對編碼表現 出那些性質的抗體的基因的選擇。通過該方式，噬菌體模仿B細胞的一些性質。噬菌體展 示可以多種形式進行，關於噬菌體展示的綜述請參見例如，Johnson和Chiswell,Current OpinioninStructuralBiology3:5564-571(1993)。人抗體還可通過體外活化B細胞產 生。請參見美國專利第5, 567, 610號和第5, 229, 275號，該美國專利的全部內容通過引用 併入本文。
[0138] 本文中的"抗體融合蛋白"是指通過重組產生的抗原結合分子，其中，連接相同或 不同的天然抗體、具有相同或不同特異性的單鏈抗體或抗體片段中的兩個或兩個以上。融 合蛋白包含至少一個特異性結合位點。融合蛋白的化合價表示融合蛋白具有的與抗原或表 位結合的結合臂或結合位點的總數，即，單價的、二價的、三價的或多價的。多價的抗體融合 蛋白是指該抗體融合蛋白可利用多種與抗原結合的相互作用，因此增加與抗原或不同抗原 結合的親合力。特異性表示抗體融合蛋白能夠與多少種不同類型的抗原或表位結合，即，單 特異性、雙特異性、三特異性、多特異性。使用這些定義，天然抗體（例如，IgG)為二價的， 因為其具有兩個結合臂，但是其為單特異性的，因為其結合一種類型的抗原或表位。單特異 性多價融合蛋白具有一個以上用於相同抗原或表位的結合位點。例如，單特異性雙體抗體 為具有兩個與相同的抗原反應的結合位點的融合蛋白。融合蛋白可包含不同抗體成分的多 價或多特異性組合或同一抗體成分的多個拷貝。融合蛋白還可包含治療劑。
[0139] 在一些實施方式中，祀向部分為抗體或抗體片段，該祀向部分基於其對抗原的特 異性進行選擇，所述抗原在目標靶細胞或靶點上表達。已識別出多種不同的腫瘤特異性抗 原或其他疾病特異性抗原，並且那些抗原的抗體已用於或計劃用於治療這些腫瘤或其他疾 病。本領域已知的抗體可用於本發明的化合物，尤其用於治療與靶抗原有關的疾病。可被 本發明的抗體-連接體-藥物偶聯物靶定的目標抗原（及其相關疾病）的實例包括：CD2 ，CD19,CD20,CD22,CD27,CD33,CD37,CD38,CD40,CD44,CD47,CD52,CD56,CD70,CD79,CD137， 4-1BB, 5T4,AGS-5,AGS-16,血管生成素 2,B7. 1，B7. 2,B7DC,B7H1,B7H2,B7H3,BT-062,BT LA,CAIX,癌胚抗原，CTLA4,Cripto,ED-B,ErbBl,ErbB2,ErbB3,ErbB4,EGFL7,EpCAM,EphA 2，EphA3，EphB2，FAP，纖連蛋白，葉酸鹽受體，神經節苷酯GM3,⑶2,糖皮質激素誘導的 腫瘤壞死因子受體（6幾幻4?10〇4?六33,6?匪氏10)5，16?11?，整聯蛋白〇^整聯蛋白 〇乂3，1(11?，1^6-3，1^￥18￥，間皮素，(3-]\^1'，麗碳酸酐酶1父，]\^(：1，]\^(：16，粘連蛋白-4，疆 ⑶2,NOTCH, 0X40, 0X40L,PD-1,PDLl,PSCA,PSMA,RANKL,R0R1,R0R2,SLC44A4,多配體蛋白聚 糖-I,TACI,TAG-72,腱生蛋白，--Μ3,TRAILRl,TRAILR2,VEGFR-1,VEGFR-2,VEGFR-3。
[0140] 在一些實施方式中，抗體選自：美羅華（利妥昔單抗）、赫賽汀（曲妥珠單抗）、愛 必妥（西妥昔單抗）、維克替比（帕尼單抗）、Arzerra(Ofatumumab)、Benlysta(貝利木單 抗）、Yervoy(伊匹單抗）、Perjeta(帕妥珠單抗）、Tremelimumab、Nivolumab、Dacetuzumab、Urelumab、MPDL3280A、Lambrolizumab和Blinatumomab0
[0141] 美羅華（利妥昔單抗）為用於治療B細胞非霍奇金淋巴瘤的嵌合抗體。其作用於 表達⑶20抗原的B細胞表面，⑶20抗原在90%的B細胞非霍奇金淋巴瘤上表達。美羅華 與⑶20結合，從而誘導B細胞通過⑶C和ADCC溶解並且敏化對一些細胞毒性化療具有耐 藥性的人淋巴細胞。
[0142] 赫賽汀（曲妥珠單抗）為作用於Her2人表皮生長因子受體細胞外結構域的人源 化單克隆抗體,Her2在25%至30%的乳腺癌中表達。曲妥珠單抗被認為具有通過以下三方 面的抗腫瘤作用：（1)下調Her2受體，抑制Her2細胞內信號轉導通路以及誘導細胞凋亡； (2)使抗體依賴性ADCC和CDC與殺傷腫瘤細胞相關聯的免疫機制；（3)提高化療效果。
[0143] 愛必妥（西妥昔單抗）為作用於表皮生長因子受體（EGFR)的嵌合抗體。愛必妥 結合EGFR，從而抑制EGFR的信號轉導通路，影響細胞增殖、浸潤和轉移，以及血管生成。對 EGFR信號轉導通路的抑制可提高化療藥物的療效和放療的療效。
[0144] 阿瓦斯汀（貝伐單抗）為靶定血管內皮生長因子（VEGF)的人源化單克隆抗體。阿 瓦斯汀與VEGFR的結合抑制VEGF和信號轉導，從而抑制了腫瘤血管生成。
[0145]目前正在研發的其他抗體也可用作靶向部分。例如，正在研發用於治療腫瘤的針 對下列靶標的治療性單克隆抗體：⑶2,⑶19,⑶20,⑶22,⑶27,⑶33,⑶37,⑶38,⑶40,⑶44 ，⑶47,⑶52,⑶56,⑶70,⑶79,⑶137。並且也正在研發用於治療腫瘤的針對下列靶標的治 療性單克隆抗體：4-1ΒΒ, 5T4,AGS-5,AGS-16,血管生成素2,B7. 1，B7. 2,B7DC,B7H1,B7H2,B 7H3,BT-062,BTLA,CAIX,癌胚抗原，CTLA4,Cripto,ED-B,ErbBl,ErbB2,ErbB3,ErbB4,EGFL7 ，EpCAM，EphA2,EphA3,EphB2,FAP，纖連蛋白，葉酸鹽受體，神經節苷酯GM3,⑶2,糖皮質激 素誘導的腫瘤壞死因子受體（6幾幻，8?100,8?433,6?匪氏10)5，16?11?，整聯蛋白〇〃，整 聯蛋白αVβ，KIR，LAG-3，Lewis，間皮素，c-MET，MN碳酸酐酶IX，MUCl，MUC16，粘連蛋白-4,NKGD2,NOTCH, 0X40, 0X40L,PD-1,PDLl,PSCA,PSMA,RANKL,R0R1,R0R2,SLC44A4,多配體蛋 白聚糖-1，TACI,TAG-72,腱生蛋白，TIM3,TRAILRl,TRAILR2,VEGFR-1,VEGFR-2,VEGFR-3， 以及它們的變體。（ScottAM,WolchokJD,OldLJ.AntibodyTherapyofCancer.NatRev Cancer. 2012Mar22 ; 12 (4) :278-87)。
[0146] 在一些實施方式中，祀向部分包含Fab,Fab'，F(ab'）2,單結構域抗體，T和Abs 二聚物，Fv，scFv，dsFv，ds-scFv，Fd,線性抗體，微小抗體、雙體抗體、雙特異性抗體片段、 bibody、tribody、sc-雙體抗體、κ(λ)body，BiTE，DVD-Ig，SIP，SMIP，DART，或者含有一個 或一個以上⑶R的抗體類似物。
[0147] 下表顯示正在研究的各種不同的抗體結構和靶標：
[0148]表 1
[0149]

【權利要求】
1. 一種具有通式（I)的結構的化合物： TM-Ln-AM ⑴， 其中，TM為靶向部分，AM為能夠活化人樹突細胞、NK細胞或腫瘤細胞或者它們的組合 的活化部分，Ln為連接體，n為選自0和1的整數。
2. 如權利要求1所述的化合物，其中，所述人樹突細胞為漿細胞樣樹突細胞。
3. 如權利要求1所述的化合物，其中，所述人樹突細胞為髓樣樹突細胞。
4. 如權利要求1所述的化合物，其中，AM能夠特異性結合人TLR7或人TLR8。
5. 如權利要求1所述的化合物，其中，AM能夠特異性結合人TLR7和人TLR8。
6. -種具有通式（I)的結構的化合物： TM-Ln-AM ⑴， 其中，TM為靶向部分，AM為能夠特異性結合人TLR7和/或人TLR8的活化部分，Ln為 連接體，n為選自0和1的整數。
7. 如權利要求6所述的化合物，其中，AM能夠特異性結合人TLR7和人TLR8這兩者。
8. 如權利要求1至7任一項所述的化合物，其中，當TM包含抗體時，AM不包含CpG寡 核苷酸。
9. 如權利要求1至8任一項所述的化合物，其中，所述靶向部分能夠特異性結合腫瘤細 胞或相對於非腫瘤細胞優先結合腫瘤細胞。
10. 如權利要求9所述的化合物，其中，所述腫瘤細胞為癌細胞、肉瘤細胞、淋巴瘤細 胞、骨髓瘤細胞或中樞神經系統癌症細胞。
11. 如權利要求1至8任一項所述的化合物，其中，所述靶向部分能夠特異性結合腫瘤 抗原或者相對於非腫瘤抗原優先結合腫瘤抗原。
12. 如權利要求11所述的化合物，其中，所述腫瘤抗原選自：⑶2,⑶19,⑶20,⑶22,⑶2 7, CD33, CD37, CD38, CD40, CD44, CD47, CD52, CD56, CD70, CD79 和 CD137。
13. 如權利要求11所述的化合物，其中，所述腫瘤抗原選自：4_1BB, 5T4， AGS-5，AGS-16,血管生成素 2，B7.1，B7.2，B7DC，B7H1，B7H2，B7H3，BT-062，BTLA，CAI X，癌胚抗原，CTLA4, Cripto, ED-B, ErbBl, ErbB2, ErbB3, ErbB4, EGFL7, EpCAM, EphA2, Ep hA3，EphB2，FAP，纖連蛋白，葉酸鹽受體，神經節苷酯GM3,⑶2,糖皮質激素誘導的腫 瘤壞死因子受體（GITR)，gpl00，gpA33，GPNMB，IC0S，IGFlR，整聯蛋白a V，整聯蛋白 〇乂3，1(11?，1^6-3，1^￥18￥，間皮素，(3-]\^1'，麗碳酸酐酶1父，]\^(：1，]\^(：16，粘連蛋白-4，疆6 D2, NOTCH, 0X40, 0X40L, PD-1, PDL1, PSCA, PSMA, RANKL, R0R1, R0R2, SLC44A4,多配體蛋白聚 糖-1, TACI, TAG-72,腱生蛋白，TIM3, TRAILR1, TRAILR2, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3 和它們 的變體。
14. 如權利要求1至13中任一項所述的化合物，其中，所述靶向部分包含免疫球蛋白、 蛋白質、肽、小分子、納米顆粒或核酸。
15. 如權利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含抗體或其功能片段。
16. 如權利要求15所述的化合物，所述抗體選自：美羅華（利妥昔單抗）、赫賽汀 (曲妥珠單抗）、愛必妥（西妥昔單抗）、維克替比（帕尼單抗）、Arzerra(Ofatumumab)、 Benlysta(貝利木單抗）、Yervoy (伊匹單抗）、Perjeta(帕妥珠單抗）、Tremelimumab、 Nivolumab、Dacetuzumab、Urelumab、MPDL3280A、Lambrolizumab 和 Blinatumomab。
17. 如權利要求15所述的化合物，其中，所述靶向部分包含Fab、Fab'、F(ab'）2、單結 構域抗體、T和Abs二聚物、？￥、80?￥、(18?￥、(18-8〇?￥、？(1、線性抗體、微小抗體、雙體抗體、雙 特異性抗體片段、bibody、tribody、sc-雙體抗體、k ( X ) body、BiTE、DVD-Ig、SIP、SMIP、 DART或者含有一個或一個以上⑶R的抗體類似物。
18. 如權利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含VEGFR的ATWLPPR多肽、血 小板反應蛋白-1模擬物、⑶CRGDCFCG(環狀）多肽、SCH221153片段、NCNGRC(環狀）多肽、 CTTHWGFTLC多肽、CGNKRTRGC多肽（LyP-1)、奧曲肽、伐普肽、蘭樂肽、C-3940多肽、達必佳、 利普安、諾雷德或西曲瑞克。
19. 如權利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含葉酸或其衍生物。
20. 如權利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含細胞外結構域（ECD)或?- 1，CTLA4, BTLA，KIR，TM3, 4-1BB，LAG3的可溶形式、全長的部分表面配體雙調蛋白、0動物 纖維素、EGF、肝配蛋白、印igen、上皮調節蛋白、IGF、神經調節蛋白、TGF、TRAIL或VEGF。
21. 如權利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含納米顆粒。
22. 如權利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含適體。
23. 如權利要求1至22任一項所述的化合物，其中，所述活化部分包含：(a)單鏈 尺隱（881?隱），優選地為（《冊2、(《冊6、88?〇17卬）、881?隱40、881?隱41、881?隱-01?或？〇17((11') ;或者（b)受體配體類似物，優選地為CL075、CL097、CL264、CL307、Gardiquimod、洛索立賓、 咪喹莫特或瑞喹莫德。
24. 如權利要求23所述的化合物，其中，AM包含瑞喹莫德（R848)。
25. 如權利要求1至24任一項所述的化合物，其中，所述連接體選自：肼基團、多肽、二 硫化物基團和硫釀基團。
26. 如權利要求1至24任一項所述的化合物，其中，所述連接體為酶可裂解的。
27. 如權利要求1至24任一項所述的化合物，其中，所述連接體不為酶可裂解的。
28. -種藥物組合物，所述藥物組合物包含權利要求1至27中任一項所述的化合物或 其藥學上可接受的鹽，以及一種或一種以上藥學上可接受的載體。
29. 如權利要求28所述的藥物組合物，所述藥物組合物還包含第二化療劑。
30. 如權利要求29所述的藥物組合物，其中，所述化療劑選自：它莫西芬（tamoxifen), 雷洛昔芬（raloxifene),阿那曲唑（anastrozole),依西美坦（exemestane),來曲唑 (letrozole)，imatanib,紫杉醇，環磷醯胺，洛伐他汀（lovastatin)，minosine,吉西他濱 (gemcitabine),阿糖胞苷（cytarabine),5_氟尿啼陡，甲氨蝶呤，多西他賽（docetaxel), 戈舍瑞林（goserelin),長春新鹼，長春鹼，噻氨酯咕唑（nocodazole),替尼泊苷 (teniposide),依託泊苷（etoposide),吉西他濱，埃博黴素，長春瑞濱（vinorelbine), 喜樹鹼，道諾黴素（daunorubicin),放線菌素D,米託蒽醌，n丫陡，阿黴素，表柔比星， 或去甲氧基柔紅黴素。
31. -種治療需要這種治療的受治者體內的疾病病症的方法，所述方法包括將藥物組 合物給藥於所述受治者，所述藥物組合物包含治療有效量的權利要求1至27任一項所述的 化合物或其藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的載體。
32. 如權利要求31所述的方法，其中，所述疾病病症為腫瘤。
33. 如權利要求31所述的方法，其中，所述疾病病症包括異常細胞增殖。
34. 如權利要求33所述的方法，其中，所述異常細胞增殖包括癌前病變。
35. 如權利要求33所述的方法，其中，所述異常增殖的細胞為癌細胞。
36. 如權利要求35所述的方法，其中，所述癌症選自：乳腺癌、結腸直腸癌、瀰漫性大B 細胞淋巴瘤、子宮內膜癌、濾泡性淋巴瘤、胃癌、膠質母細胞瘤、頭頸癌、肝細胞癌、肺癌、黑 色素瘤、多發性骨髓瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和腎細胞癌。
37. -種具有通式（I)的結構的化合物： TM-Ln-AM ⑴， 其中，TM為靶向部分，AM為活化部分，Ln為連接體，n為選自0和1的整數，條件是當 TM包含抗體時，AM不包含CpG寡核苷酸或治療劑。
38. 如權利要求37所述的化合物，其中，所述活化部分包含TLR配體（TLRL)、Nod樣受 體配體、RIG樣受體配體、CLR配體、⑶S配體或炎性體誘導物。
39. 如權利要求38所述的化合物，其中，所述活化部分包含一種或一種以上選自下列 的 TLR 的配體：TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR7, TLR8, TLR7/TLR8, TLR9 和 TLR10。
40. 如權利要求39所述的化合物，其中，所述活化部分包含： ⑴TLR2的配體，其選自：（a)熱殺死的細菌產物，優選地為HKAL，HKEB，HKHP，HKLM，HKL P, HKLR, HKMF, HKPA, HKPG,或 HKSA, HKSP，和（b)細胞壁成分產物，優選地為 LAM, LM, LPS, LT A, LTA, PGN, FSL, Pam2CSK4, Pam3CSK4,或酵母聚糖； (^)1'1^3的配體，其選自屮〇17(1:〇和卩〇1 7仏:仍； (iii) TLR4的配體，其選自：LPS和MPLA ; (iv) TLR5的配體，其選自：FLA和鞭毛蛋白； (v) TLR7/8 的配體，其選自：0RN02, 0RN06, ssPoly(U), ssRNA40, ssRNA41，ssRNA-DR, Po ly (dT), CL075, CL097, CL264, CL307, Gardiquimod,洛索立賓，咪喹莫特，和瑞喹莫德； (vi) TLR9 的配體，其選自：0DN1585, 0DN1668, 0DN1826, 0DN2006, 0DN2007, 0DN2216, 0D N2336, 0DN2395,和 ODN M362 ; (vii) TLRlO 的配體； (viii) 核苷酸-寡聚結構域（NOD)樣配體，其選自：N0D1激動齊[J (C12-iE-DAP，iE-DAP，Tri-DAP)、N0D2 激動劑（L18-MDP，MDP，M-TriLYS，M-TriLYS-D-ASN， 莫拉丁酯（Murabutide)，N-羥乙醯基-MDP)和 N0D1/N0D2 激動劑（M-TriDAP, PGN); (ix) -種或一種以上RIG-I樣受體（RLR)的配體，其選自：5'ppp-dsRNA，Poly(dA:dT) ，Poly(dG:dC),和 Poly(I:C); (x) -種或一種以上C型植物凝集素受體（CLR)的配體，其選自：凝膠多糖AL，HKCA， HKSC，WGP，酵母聚糖和海藻糖-6, 6-二山嵛酸鹽； (xi) -種或一種以上細胞溶質DNA傳感器（⑶S)的配體，其選自：C-GMP，c-G-AMP，c-G -GMP，c-A-AMP，c-di-AMP，c-di-MP，c-di-GMP，c-di-UMP，HSV-60, ISD，pCpG，Poly (dA: dT)， Poly(dG:dC)，Poly(dA),和 VACV-70 ;或 (xii) 炎性體誘導物，其選自：(a)NLRP3炎性體蛋白質複合物，優選地為明礬晶體， ATP，CPPD 晶體，Hermozoin，MSU 晶體，納米 Si02,奈及利亞菌素（Nigericin)，以及（b)AIM2 炎性體蛋白質複合物，優選地為P〇ly(dA:dT)。
41. 如權利要求37所述的化合物，其中，所述活化部分包含頂02134、M0205、 MGN-1703、MGN-1704、Agatolimod、SD-101、QAX-935、DMS0150、Pollinex Quattro、0M-174、 Eritoran、TAK-242、NI-0101、I 型幹擾素、II 型幹擾素、III 型幹擾素、IL-12、IL-23、IL-18、 IL-7 或 IL-15。
【文檔編號】A61P35/00GK104411329SQ201380033552
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2013年7月16日 優先權日:2012年7月18日
【發明者】李立新 申請人:上海博笛生物科技有限公司