誘導癌細胞凋亡的方法和應用的製作方法

2023-07-10 19:45:21 2

專利名稱：誘導癌細胞凋亡的方法和應用的製作方法
誘導癌細胞凋亡的方法和應用相關申請的交叉引用本申請要求享有2008年4月11日提交的美國臨時申請61/044，085的權利和優 先權，該臨時申請的全部公開內容通過參考併入本文。
背景技術：
程序性細胞死亡(凋亡)對於生命的維持是不可或缺的，因為恆定的組織更新為 再生代謝提供生理支持。凋亡促進細胞更新的穩態平衡，允許總體組織健康，從而維持組織 代謝的增生、免疫調節和血管發生成分的完整性。上述過程中的任一個或其組合的調節障 礙可導致凋亡控制的缺乏。這種凋亡控制的缺乏，任選地與基因突變相結合，可能導致促進 性的致癌環境。在健康條件下，基因組的「守衛」 p53識別何時細胞的完整性受到損害，以及通過 在線粒體中利用Bcl-2蛋白質家族使之經歷凋亡，導致核破碎。參見，例如，Selivanova 等 人，"Reactivation of mutant p53 :molecular mechanisms and therapeutic potential,，，Oncogene (2007) 26，2243-2254。而且，Bcl-2蛋白質家族的「促」凋亡和「抗」凋亡成員之間的平衡可以決定細胞的 總體凋亡潛力。在所有癌症的超過60%中，p53被突變或滅活，而Bcl-2蛋白過量表達，導 致對細胞死亡和化療方法的抗性。已經證明，癌症患者的血清CoQlO水平總體下降，這可導致不適、虛弱和嗜睡的 指徵和症狀，特別是當使用化療方案時。參見，例如，Okamoto等人「Serum levels of coenzyme QlO and lipids inpatients during total parenteral nutrition,"J Nutr Sci Vitaminol (Tokyo), (1986) Feb ；32(1) :1-12.邁阿密大學採用無胸腺小鼠模型進行的 研究已經證明CoQlO脂質體製劑在30天內使人黑素瘤減少53.2%，同時觀察到腫瘤血管發 生總體減弱。參見，例如，Persaud等人,「Attenuation of tumor angiogenesis in murine melanoma model usingliposomal formulation of coenzyme Q10, "Proceedings of the AmericanAssociation for Cancer Research, (2006) ；47 :A977。另夕卜，後來證明 CoQlO 的 效果是通過Bcl-2蛋白的下調來介導的。參見，例如，Narain等人，「Coenzyme QlO =A novel Bcl-2 drug target for thetreatment of melanoma,，，Proceedings of the American Association forCancer Research, (2006) ；47 :A791。在恢復促凋亡和抗凋亡蛋白質的平衡的努力中，已經開發了通過直接抗體抑制或 通過利用幹擾可導致二聚化或寡聚化的結合的特異性構建體針對Bcl-2蛋白質家族的藥 物。參見，例如，美國專利Nos. 6，514，761和6，040，181。然而，在能夠使特定細胞經歷凋亡 的P53再活化後，這基本上不改變Bcl-2蛋白質家族的主要凋亡成員如Bcl-2、Bax和Bid 的上遊水平。

發明內容
本公開內容描述了向細胞內遞送CoQlO或其代謝物並且與內源性CoQlO和膜脂形成複合物的方法，該複合物通過調節Bcl-2亞家族成員誘導癌細胞中p53的激活和Bcl-2 介導的凋亡的啟動。在一些實施方案中，本發明提供了一種包含CoQlO和磷脂脂質體的組合物，其結 合維持膜完整性的內源性脂質，如油酸以及甲羥戊酸和醌類。本發明還涉及在細胞是致癌 細胞時以使特定細胞經歷凋亡的方式活化P53和調節Bcl-2蛋白質家族的表達的方法。在一些實施方案中，本發明提供了一種用於治療癌症的組合物，其包含CoQlOJg 質體和藥學可接受的載體。在某些實施方案中，所述組合物包含大約0. 001%至大約60% (w/w)的輔酶QlO。在其它實施方案中，所述組合物可以是凝膠、軟膏、乳膏、油膏、洗劑、摩絲 (mousse)、泡沫、噴劑和/或氣霧劑、液體(靜脈內)、霧化粉末、栓劑或任何其它商業上可行 的腸胃外途徑的形式。在其它實施方案中，本發明提供了治療癌症的方法，該方法包括向需要的患者的 腫瘤形成(oncogenesis)區域施用包含治療有效量的CoQIO、脂質體和藥學可接受的載體 的組合物。在一些實施方案中，所述組合物包含大約0. 001%至大約60% (w/w)的輔酶Q10。在其它實施方案中，本發明提供了通過向需要的患者向腫瘤形成區域施用包含治 療有效量的CoQIO、脂質體和藥學可接受的載體的組合物來接觸內源性CoQlO的方法。所述 組合物可包含大約0. 001%至大約60% (w/w)的輔酶QlO。本發明還提供了靶向Bcl-2蛋白質家族的方法，該方法包括向需要的患者的腫瘤 形成區域施用包含治療有效量的CoQIO、脂質體和藥學可接受的載體的組合物。在一些實施 方案中，所述組合物包含大約0.001%至大約60% (w/w)的輔酶Q10。本發明還提供了再激活p53蛋白的方法，包括向需要的患者的腫瘤形成區域施用 包含治療有效量的CoQ 10、脂質體和藥學可接受的載體的組合物。在一些實施方案中，所述 組合物包含大約0.001%至大約60% (w/w)的輔酶Q10。本發明還提供了調節Bcl-2家族的BH3結合域(例如Bid、Bim, Bik)的方法，包 括向需要的患者的腫瘤形成區域施用包含治療有效量的CoQIO、脂質體和藥學可接受的載 體的組合物。在一些實施方案中，所述組合物包含大約0.001%至大約60% (w/w)的輔酶 Q10。也提供了調節Bax蛋白的方法，在一些實施方案中，所述方法包括向需要的患者 的腫瘤形成區域施用包含治療有效量的CoQIO、脂質體和藥學可接受的載體的組合物。在一 些實施方案中，所述組合物包含大約0.001%至大約60% (w/w)的輔酶Q10。本發明還提供了通過向需要的患者的腫瘤形成區域施用包含治療有效量的 CoQIO、脂質體和藥學可接受的載體的組合物來調節諸如VEGF、FGF、Hif-I α和制管張素 (angiostatin)等血管生成因子的方法。在一些實施方案中，所述組合物包含大約0. 001% 至大約60% (w/w)的輔酶Q10。在另一實施方案中，提供了調節諸如s(細胞周期蛋白依 賴性激酶)和ΡΙΙ/akt等細胞周期因子的方法，包括向需要的患者的腫瘤形成區域施用包 含治療有效量的CoQIO、脂質體和藥學可接受的載體的組合物。在一些實施方案中，所述組 合物包含大約0.001%至大約60% (w/w)的輔酶Q10。


參考以下描述，結合附圖，可以更好地理解本發明的以上和其它優點，在這些附圖 中圖1是CoQlO的代謝合成圖；圖2是凋亡誘導中Bax、P53和Bcl_2相互作用的概括；圖3顯示用50 μ M CoQlO處理後黑素瘤細胞和新生成纖維細胞中的Bcl_2表達；圖4顯示與50μΜ和ΙΟΟμΜ CoQ 10溫育M小時的黑素瘤細胞中的Bcl_2表達；圖5顯示採用M小時Take Away (TA)法，在存在和不存在CoQlO的條件下處理的 黑素瘤細胞中的Bcl-2表達。在TA實驗中，用CoQlO處理黑素瘤細胞6、12和M小時。溫 育後，將培養基替換為正常培養基M小時。測定Bcl-2表達以評估凋亡情況；圖6顯示與CoQ10(50yM和ΙΟΟμΜ)溫育12和M小時後黑素瘤細胞中的Bax表 達；圖7顯示採用M小時Take Away (TA)法，在存在和不存在CoQlO的條件下處理的 黑素瘤細胞中的Bax表達。在TA實驗中，用CoQ 10處理黑素瘤細胞6、12和M小時。溫 育後，將培養基替換為正常培養基M小時。測定Bax表達以評估凋亡情況；圖8顯示與CoQlO溫育12小時後黑素瘤細胞中的Bid表達；圖9顯示在無胸腺裸鼠中誘導的人黑素瘤的組織病理學分析。治療組接受CoQlO 局部應用30天。腫瘤病理學分析表明腫瘤血管系統遭到破壞；圖IOa-IOd顯示與CoQlO和/或血管內皮生長因子(VEGF)溫育M小時的黑素瘤 細胞中的Bcl-2表達；圖11顯示與50μΜ和ΙΟΟμΜ CoQlO溫育M小時的黑素瘤細胞中的ρ53表達；圖12是顯示與50μ M和ΙΟΟμΜ CoQlO溫育12小時的黑素瘤細胞中的ρ53表達 的圖；圖13顯示與CoQlO溫育6小時的黑素瘤細胞中的Bcl_xl表達；圖14顯示與CoQlO溫育12小時的黑素瘤細胞中的Bcl_xl表達；圖15是定量用CoQlO處理12小時的黑素瘤細胞中的Bcl_xl表達的圖；圖16顯示用CoQlO處理12小時的黑素瘤細胞中的胱天蛋白酶-3 (Caspase-3)表 達；圖17是定量用CoQlO處理12小時的黑素瘤細胞中的胱天蛋白酶_3表達的圖；圖18顯示用輔酶QlO處理3、6、12和M小時的黑素瘤細胞中的Mcl-I表達；圖19a是定量與CoQlO溫育12小時的黑素瘤細胞中的Mcl-I表達的圖；圖19b是 定量與CoQlO溫育M小時的黑素瘤細胞中的Mcl-I表達的圖；圖20是定量與CoQlO溫育4小時的PC_3 (前列腺癌)細胞中的BAX表達的圖；圖21是定量與CoQlO溫育4小時的PC_3細胞中的Bcl_2表達的圖；圖22是顯示用CoQlO處理4和M小時的PC_3細胞中的Bcl_2表達的時間點比 較的圖；圖23是定量與CoQlO溫育4小時的SkBr_3 (乳腺癌)細胞中的Bcl_2表達的圖；圖M是定量與CoQlO溫育8小時的SkBr_3細胞中的Bax表達的圖；圖25顯示與CoQlO溫育8小時的SkBr3細胞中的Bax表達；
圖沈是比較用CoQlO處理M小時後的Bcl-2和Bax表達的圖。發明詳述本發明提供了包含輔酶QlO(C0QlO)的藥物組合物和連接到內源性脂質分子上以 調節與致癌狀態有關的分子機制的方法。本發明的範圍涉及分子醫學和腫瘤學領域，特別 是p53途徑和Bcl-2基因家族的基因調節。根據本公開內容及在此使用時，除非另外明確說明，以下術語定義為具有以下含 義。此處使用的「一」包括複數形式，除非上下文清楚地說明不是這樣。此處使用的「藥學上可接受的」成分是適合人和/或動物使用、沒有不當的不利副 作用(如毒性、刺激和變應性應答)、具有合理的效益/風險比的成分。如此處所用的術語「安全和治療有效的量」是指當以本發明的方式使用時足以產 生希望的治療反應而沒有不當的不利副作用(如毒性、刺激或變應性應答)，具有合理的效 益/風險比的成分的量。「治療有效量」的意思是有效產生希望的治療反應的本發明化合 物的量。例如，加速創傷癒合、緩解疼痛和疲勞。具體的安全和有效的量或治療有效量隨諸 如所治療的具體病症、患者的身體狀況、所治療的哺乳動物或動物的類型、治療持續時間、 同時治療(如果有的話)的性質和使用的具體製劑和化合物或其衍生物的結構等因素而不 同。如此處使用的「藥用鹽」包括但不限於鹼性殘基如胺的無機酸或有機酸鹽、酸性殘 基如羧酸的鹼金屬鹽或有機鹽。合適的鹽可以使用有機酸或無機酸製備。這樣的鹽包括氯 化物、溴化物、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、磺酸鹽、甲酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、蘋果酸鹽、檸 檬酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、抗壞血酸鹽等。在一些實施方案中，可以使用鹽酸鹽。「診斷」或「診斷的」是指確定病理狀況的存在或性質。診斷方法在靈敏度和特異 性方面不同。診斷試驗的「靈敏度」是檢測為陽性的患病個體的百分比(「真陽性」的百分 比)。該試驗未檢測出的患病個體為「假陰性」。在該試驗中檢測為陰性的未患病對象被稱 為「真陰性」。診斷試驗的「特異性」是1減假陽性率，其中「假陽性」率被定義為檢測為陽 性的未患病者的比例。儘管一種具體的診斷方法可能無法提供疾病的明確診斷，但是該方 法能提供幫助診斷的陽性指徵就足夠了。術語「患者」或「個體」在此可以互換使用，是指將要治療的哺乳動物對象，在一些 實施方案中人類患者是合適的。在某些情況下，本發明的方法可用於實驗動物、獸醫應用以 及開發疾病的動物模型，包括但不限於嚙齒類動物，包括小鼠、大鼠和倉鼠；以及靈長類動 物。「樣品」在此最廣義地使用。包含多核苷酸、多肽、肽、抗體等的樣品可以包括體液； 細胞製品的可溶性級分，或細胞在其中生長的培養基；從細胞分離或提取的染色體、細胞器 或膜；溶液中的或與基底結合的基因組DNA、RNA或cDNA、多肽或肽；細胞；組織；組織印漬 (tissue print)；指紋、皮膚或毛髮；等等。「治療」是意圖阻止疾病病理或症狀的發展或對其進行改變而進行的幹預。因此， 「治療」是指治療性處置和預防性措施兩者。需要治療者包括已患疾病的個體以及想要預防 疾病的個體。如本文使用的「改善」或「治療」是指症狀接近正常值(例如在健康患者或個體中獲得的值)，例如，與正常值相差不到50%，在一些實施方案中與正常值相差不到大約 25 %，在其它實施方案中與正常值相差不到10 %，在其它實施方案中，利用常規統計學檢驗 確定，症狀的存在與正常值沒有明顯不同。如此處所用的「改善的症狀」或「治療的症狀」是指症狀接近正常值，例如與正常 值相差不到50%，在一些實施方案中與正常值相差不到大約25%，在其它實施方案中與正 常值相差不到大約10 %，在其它實施方案中，利用常規統計學檢驗確定，症狀的存在與正常 值沒有明顯不同。受試者來自許多不同種的受試者可以用本發明的組合物治療。這些動物的非窮盡實例列 表包括哺乳動物如小鼠、大鼠、兔、山羊、綿羊、豬、馬、牛、狗、貓，和靈長類動物如猴、猿和人 類。已知患有肌肉疲勞、疼痛、創傷等的那些動物受試者可能適用於本發明。具體地，遭受 損傷、手術、關節炎、肌肉疲勞等的人類患者是用於本發明的合適的動物受試者。通過使此 處所述的方法適應於醫學或獸醫學已知的其它方法(例如根據受試動物的體重調整施用 物質的劑量)，可以容易地優化本發明使用的組合物以用於其它動物。藥物組合物和對警試者的給藥在一些實施方案中，本發明提供了用於治療和預防癌症的CoQlO組合物。2，3_ 二 甲氧基-5-甲基-6-癸異戊烯基-1，4-苯醌(輔酶Q-10)的透皮、口服、靜脈內和其它腸胃 外製品可以包含輔助劑、有效量的肺表面活性劑和/或與脂質體聯合。在一些實施方案中，包含CoQlO的組合物可以局部給藥。例如CoQlO的活性成分 作為藥物製劑提供可能是理想的。在下面的實施例中詳細描述了示例性的組合物。對於局 部給藥，在終產品中活性成分可以包括製劑重量的0. 001%至大約60% w/w，儘管它可以包 括多達80% w/w，在某些實施方案中為製劑的大約0. 001%至大約60(% /^。本發明的局部 製劑包含活性成分以及一種或多種可接受的載體和任選的任何其它治療成分。在與製劑的 其它成分相容的意義上，該載體必須是「可接受的」，而且對其接受者必須無害。在某些實施方案中，CoQlO可以包含在組合物中，如系列號為12/052,825的美國 專利申請中公開的組合物，該申請的全部公開內容通過參考併入本文。本發明的組合物可以以其自身的形式給藥，或者與合適的載體或賦形劑混合的藥 物組合物給藥。在治療表現出目標紊亂的患者時，施用治療有效量的一種或多種藥劑。治 療有效劑量是指導致患者症狀改善或存活期延長的化合物的量。這些化合物的毒性和療效可以通過標準藥學方法在細胞培養或實驗動物中確定， 例如用於確定LD5tl(致群體中50%死亡的劑量)和ED5Q(對於群體中的50%治療有效的劑 量)。毒性和療效之間的劑量比是治療指數，可以表示為LD5(i/ED5(i比值。顯示高治療指數 的化合物是理想的。從這些細胞培養試驗和動物研究獲得的數據可以用於制定用於人類的 劑量範圍。這些化合物的劑量可以在沒有毒性或只有極小毒性的包括ED5tl的循環濃度範圍 內。劑量可以根據使用的劑型和採用的給藥途徑在該範圍內變化。對於在本發明方法中使用的任一化合物，開始時可以通過細胞培養試驗估計治療 有效劑量。例如，可以在動物模型中制定劑量，以達到包括在細胞培養中確定的IC5tl的循環 血漿濃度範圍。該信息可以用來更準確地確定在人類中有用的劑量。血漿水平例如可以通 過HPLC測定。
確切的製劑、給藥途徑和劑量可以由醫生個人根據患者的狀況來選擇。(參見，例 如 Fingl 等人，The Pharmacological Basis ofTherapeutics，1975，Ch. 1 ρ· 1)。應當注 意，主治醫生將知道如何以及何時由於毒性或器官機能障礙而終止、中斷或調整給藥。相 反，如果臨床反應不足，主治醫生也將知道調整治療至更高的水平(避免毒性)。控制目標 致癌紊亂時給予的劑量水平將隨所治療的病症的嚴重程度和給藥途徑而變化。例如，可以 通過標準預後評估法部分評估病症的嚴重程度。進一步地，劑量，以及也許給藥頻率，也隨 著患者個體的年齡、體重和反應而不同。在獸醫中可以使用與以上對於人類所述相當的計 劃。本發明的組合物可以通過為患者(如損傷類型、損傷的嚴重程度、損傷部位)制定 的治療方案應用於患者。例如，在治療期間可以再次根據損傷的嚴重程度、類型等調整活性 組合物的百分比。在最終產品中，活性成分CoQlO可以佔製劑重量的0. 001%至大約60% w/w，儘管它可以佔多達80% w/w，在某些實施方案中為製劑的大約0. 001%至大約60% w/
Wo組合物可以給患者應用每天至少一次。在其它實施方案中，藥物組合物可以每天 應用兩次、每天三次或更多。時間和含有活性成分的組合物可以由醫生容易地確定。根據所治療的具體病症，這些藥劑可以配製並全身或局部給藥。配製和給藥技 術可見於 Remington 『 s Pharmaceutical Sciences，18th ed.，Mack Publishing Co.， Easton, Pa. (1990)。合適的途徑可包括，例如，口服、直腸、經皮、陰道、經黏膜或腸內給藥； 腸胃外給藥，包括肌肉內、皮下、髓內注射，以及鞘內、直接心室內、靜脈內、腹膜內、鼻內或 眼內注射。上述組合物可以在任何適當的製劑中給受試者施用。除了用CoQlO的局部製劑治 療癌症以外，在本公開內容的其它方面，CoQlO也可以利用其它方法遞送。例如，CoQlO可以 配製用於腸胃外遞送，例如用於皮下、靜脈內、肌肉內或腫瘤內注射。可以採用其它遞送方 法，例如脂質體遞送或從充滿組合物的裝置擴散。組合物可以通過單一大團劑、多次注射或 通過連接輸注(例如靜脈內或通過腹膜透析)給藥。對於腸胃外給藥，組合物可以配製為 滅菌的無熱原形式。本發明的組合物也可以在體外通過將該組合物簡單地添加到包含細胞 的液體中而給予細胞(例如，細胞或體外培養中的Bcl-2產生)。根據所治療的具體病症，這些藥劑可以配製並全身或局部給藥。配製和給藥技 術可見於 Remington 『 s Pharmaceutical Sciences，18th ed.，Mack Publishing Co.， Easton, Pa. (1990)。合適的途徑可包括，例如，口服、直腸、經皮、陰道、經黏膜或腸內給藥； 腸胃外給藥，包括肌肉內、皮下、髓內注射，以及鞘內、直接心室內、靜脈內、腹膜內、鼻內或 眼內注射。對於注射，本發明的藥劑可以配製在水溶液中，例如，在生理相容的緩衝液，如 Hanks液、Ringer液或生理鹽水緩衝液中。對於這種經黏膜給藥，在製劑中使用適合於將要 滲透的屏障的滲透劑。這樣的滲透劑是本領域公知的。應用藥學可接受的載體將此處公開的用於實施本發明的化合物配製為適合全身 給藥的劑量屬於本發明的範圍內。通過適當選擇載體和合適的製備實踐，本發明的組合物， 特別是配製為溶液的組合物，可以腸胃外給藥，例如通過靜脈注射給藥。這些化合物可以使 用本領域公知的藥學可接受的載體容易地配製為適合口服的劑量。這些載體能夠使本發明
9的化合物配製為片劑、丸劑、膠囊、液體、凝膠、糖漿、漿液、懸浮劑等，用於所治療的患者口 服攝入。打算細胞內給藥的藥劑可以利用本領域技術人員公知的技術給藥。例如，這樣的 藥劑可以包封到脂質體內，然後如上所述給藥。脂質體是具有水性內部的球狀脂雙層。在 脂質體形成時存在於水溶液中的所有分子都併入水性內部。脂質體內容物針對外部微環境 受到保護，並且由於脂質體與細胞膜融合，有效遞送到細胞質內。另外，由於它們具有疏水 性，有機小分子可以直接細胞內給藥。適用於本發明的藥物組合物包括其中含有達到預期目的的有效量的活性成分的 組合物。有效量的確定在本領域技術人員的能力範圍內，特別是根據此處提供的詳細公開 內容。除了活性成分外，這些藥物組合物還可含有合適的藥學可接受的載體，包括有利於活 性化合物加工為可以藥用的製劑的賦形劑和輔助劑。配製用於口服的製劑可以是片劑、糖 錠劑、膠囊或溶液的形式。本發明的藥物組合物可以以本身已知的方式製備，例如利用常規 的混合、溶解、粒化、制錠、飄浮、乳化、包封、圈閉(entrapping)或凍幹方法來製備。適合局部給藥的製劑包括適合透過皮膚滲透到需要治療的部位的液體或半液體 製劑，如搽劑、洗劑、乳膏、軟膏或糊劑，以及適合向眼、耳或鼻給藥的滴劑。根據本發明的 滴劑可包括無菌水溶液或油狀溶液或懸浮液，並且可以通過將活性成分溶解在殺細菌和/ 或殺真菌劑的合適的水溶液中和/或任何其它合適的防腐劑(在某些實施方案中包括表 面活性劑)中而製備。然後可以通過過濾澄清並滅菌得到的溶液，並通過無菌技術轉移 到容器中。適合包含在滴劑中的殺細菌劑和/或殺真菌劑的例子有硝酸苯汞或醋酸苯汞 (0.002% )、苯扎氯銨(0.01%)和醋酸洗必泰(0.01%)。用於製備油狀溶液的合適的溶 劑包括甘油、稀釋的乙醇和丙二醇。本發明的洗劑包括適合應用於皮膚或眼睛的洗劑。眼洗劑可以包括任選地包含殺 細菌劑的無菌水溶液，並可通過類似於製備滴劑的方法來製備。應用於皮膚的洗劑或搽劑 也可包含加速乾燥和冷卻皮膚的藥劑，如醇或丙酮，和/或溼潤劑如甘油或諸如蓖麻油或 花生油的油。本發明的乳膏、軟膏或糊劑是外用的活性成分的半固體製劑。它們可以通過以下 方法來製備藉助合適的機制，使用油脂樣或非油脂樣基質，將細分的或粉末化形式的活性 成分單獨地或在水或非水流體的溶液或懸浮液中混合。該基質可以包括烴類，如硬、軟或液 體石蠟、甘油、蜂蠟、金屬皂；粘液；天然來源的油，如杏仁油、玉米油、花生油、蓖麻油或橄 欖油；羊毛脂或其衍生物，或脂肪酸，如硬脂酸或油酸，以及醇，如丙二醇或大粒凝膠。製劑 中可以摻入任何合適的表面活性劑，如陰離子、陽離子或非離子表面活性劑，如脫水山梨糖 醇酯或其聚氧乙烯衍生物。也可以包含懸浮劑如天然樹膠、纖維素衍生物或無機材料如二 氧化矽(silicaceous silicas)和其它成分如羊毛脂。用於腸胃外給藥的藥物製劑包括水溶性形式的活性化合物的水溶液。另外，活性 化合物的懸浮液可以製備為適當的油狀注射懸浮液。合適的親脂性溶劑或載體包括脂肪油 如芝麻油，或合成脂肪酸酯如油酸乙酯或甘油三酯，或脂質體。水性注射懸浮液可以含有提 高懸浮液粘度的物質，如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇或葡聚糖。任選地，懸浮液也可含有合 適的穩定劑或提高化合物的溶解度的試劑，以允許製備高度濃縮的溶液。用於口服使用的藥物製劑可以如下獲得將活性化合物與固體賦形劑混合，任選地研磨得到的混合物，在加入合適的輔助劑(需要的話)後加工該顆粒混合物，以獲得片劑 或糖錠劑核心。合適的賦形劑尤其是填料如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇；纖維素 製品，例如，玉米澱粉、小麥澱粉、水稻澱粉、馬鈴薯澱粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羥丙基 甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。若需要，可以加入崩解劑，如交 聯的聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或海藻酸或其鹽如海藻酸鈉。糖錠劑核心具有適當的包衣。為此目的，可以使用濃縮的糖溶液，其任選地可含有 阿拉伯樹膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波普(carbopol)膠、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶 液和合適的有機溶劑或溶劑混合物。染料或色素可以添加到片劑或糖錠劑包衣中用於識別 或區分活性化合物劑量的不同的組合。可以口服使用的藥物製劑包括由明膠製成的推入-配合膠囊，以及由明膠和諸如 甘油或山梨糖醇等增塑劑製成的密封軟膠囊。推入-配合膠囊可以含有與諸如乳糖的填 料、諸如澱粉的粘合劑和/或諸如滑石或硬脂酸鎂的潤滑劑以及任選的穩定劑混合的活性 成分。在軟膠囊中，活性化合物可以溶解或懸浮在合適的液體中，如脂肪油、液體石蠟或液 體聚乙二醇。另外，也可以添加穩定劑。如果需要，組合物可以包括緩衝液系統。選擇緩衝液系統以維持或緩衝組合物的 PH在希望的範圍內。本文使用的術語「緩衝液系統」或「緩衝液」是指一種或多種當在水溶 液中時能夠穩定該溶液使得在添加酸或鹼時PH(或氫離子濃度或活性)沒有大的變化的溶 質試劑。導致起始緩衝PH值在上述範圍中抵抗變化的一種或多種溶質試劑是公知的。盡 管有無數的合適的緩衝液，但是一水合磷酸鉀是合適的緩衝液。藥物組合物的最終pH值可以在生理相容的範圍內變化。最終pH值應當不刺激人 類皮膚，並且也可以經過選擇使得可以促進活性化合物如CoQlO的透皮轉運。在不違背這 一限制的情況下，可以選擇PH以提高CoQlO化合物的穩定性並在需要時調節一致性。在一 個實施方案中，PH值可以是大約3至大約7. 4，在某些實施方案中為大約3. 2至大約6. 5， 在另外一些實施方案中為大約3. 5至大約6。在某些實施方案中，局部遞送載體的其餘成分可以是水，在某些實施方案中，是純 化水例如去離子水。這樣的遞送載體組合物可含有基於組合物的總重量為大約50%至大 約95%的水。但是，具體的含水量不是關鍵的，可進行調節以獲得希望的粘度(通常為大約 50cps至大約10，OOOcps)和/或其它成分的濃度。局部遞送載體可具有至少大約30釐泊 的粘度。也可以使用其它已知的透皮皮膚滲透增強劑以促進CoQlO的遞送。說明性 的例子有亞碸類，如二甲亞碸(DMSO)等；環醯胺類，如1-十二烷基氮雜環庚烷-2-酮 (AZONE ，Nelson Research, Inc.的註冊商標)等；醯胺類，如N，N-二甲基乙醯胺 (DMA)、N，N-二乙基甲苯醯胺、N，N-二甲基甲醯胺、N，N-二甲基辛醯胺、N，N-二甲基癸醯胺 等；吡咯烷酮衍生物，如N-甲基-2-吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、2-吡咯烷酮-5-甲酸、N-羥 乙基)-2-吡咯烷酮或其脂肪酸酯、1-月桂基-4-甲氧羰基-2-吡咯烷酮、N-牛脂烷基吡 咯烷酮等；多元醇類，如丙二醇、乙二醇、聚乙二醇、二丙二醇、甘油、己三醇等；直鏈及支鏈 脂肪酸類，如油酸、亞油酸、月桂酸、戊酸、庚酸、己酸、肉豆蔻酸、異戊酸、新戊酸、三甲基己 酸、異硬脂酸等；醇類，如乙醇、丙醇、丁醇、辛醇、油醇、硬脂醇、亞油醇等；陰離子表面活性 劑，如月桂酸鈉、十二烷基硫酸鈉等；陽離子表面活性劑，如苯扎氯銨、十二烷基三甲基氧化銨、鯨蠟基三甲基溴化銨等；非離子表面活性劑，如丙氧基化聚氧乙烯醚，例如Poloxamer 231、Poloxamer 182,Poloxamer 184 等，乙氧基化脂肪酸，例如 Tween 20,Myrj 45 等，脫水 山梨糖醇衍生物，例如Tween 40、Tween 60、Tween 80、Span 60等，乙氧基化醇類，例如聚 氧乙烯(4)月桂醚(Brij 30)、聚氧乙烯(2)油基醚(Brij 93)等，卵磷脂和卵磷脂衍生物 等；萜類，如D-檸檬烯、α -菔烯、β -蒈烯、α -萜品醇、香芹醇(carvol)、香芹酮、薄荷酮、 氧化檸檬烯、α-菔烯氧化物、桉油等。有機酸類和酯類，如水楊酸、水楊酸甲酯、檸檬酸、琥珀酸等，也適合作為皮膚滲透 增強劑。有效量上述組合物可以以有效量施用於受試者。有效量是能夠在被處理的動物或細胞中 產生希望的結果的量。醫學和獸醫學領域公知，用於任一種動物的劑量取決於許多因素， 包括具體的動物大小、體表面積、年齡、所施用的具體組合物、施用時間和途徑、一般健康狀 況、以及同時施用的其它藥物。預期用於局部施用本發明組合物的合適劑量是大約0.1至 大約2. 5mg CoQ10/kg體重(例如，對於大約110至大約300磅的受試者為大約10至大約 500mg)。用於培養中的細胞的有效量也是變化的，但是可以根據經驗容易地確定(例如，通 過向細胞添加不同的濃度，並且選擇產生希望的結果的最佳濃度)。預期合適的濃度為大約 1至大約250 μ M0
實施例用於這些實驗以產生本申請公開內容提供的數據的材料包括以下材料 Skmel-28(HTB-72)、PC-3 (CRL-1435)和 SkBr3 (HBT-30)購自 ATCC0 細胞系在補充有 5% 小牛血清的DMEM/F 12培養基(Dulbecco改良Eagle培養基養分混合物F-12，購自 Invitrogen Corporation)中培養。Bcl_2 (Cat# :2872)、Bax (Cat# :2774)、Bid (Cat# 2002)、p53 (Cat# :9282)、Bcl-xl (Cat# :2762)、胱天蛋白酶 _3 (Cat# :9662)、Mcl-I (Cat# 4572)、Bax(Cat# :2772)、抗兔 IgG(Cat# :7074)和抗小鼠 IgG(Cat# :7076)抗體購自 Cell Signaling Technology (Boston, MA)。試劑和化學品購自 Sigma Aldrich (St Louis, M0)。 Western印跡凝膠和緩衝液購自Bio-Rad(Hercules，CA)。實施例1蛋白質表達方案(產生圖3、4、5、6、7、10a_10d、13、14、16、18、19a和25中的數據)Skme 1-28, PC-3和SkBr3細胞生長至80%匯合併且在培養皿中亞培養。M小時 後，提取貼附到平板上的細胞和培養基。向每塊板上添加處理培養基。在預期的溫育時間 後，除去培養基，用冷磷酸鹽緩衝液(PBS)洗滌細胞。將細胞刮到冷PBS中，收集在離心管 中。然後沉澱細胞，並用冷PBS洗滌(3次)。除去PBS，之後添加裂解緩衝液，並超聲處理， 以分散蛋白質結構。向每個管中添加樣品緩衝液，煮沸溶液5分鐘。使用BCA(二辛可寧 酸)蛋白質分析試劑盒，定量每個樣品的蛋白質濃度。這些數值決定了每種樣品的加樣體 積。將樣品加樣到4%積層膠和12% Tris-Hcl電泳膠western印跡凝膠上。分離 後，利用電泳將蛋白質條帶轉移到硝酸纖維素紙上。硝酸纖維素紙用5%牛奶溶液封閉過 夜。向含有蛋白質樣品的每張硝酸纖維素紙上添加相應的抗體。M小時後，除去第一抗體，洗滌提取試紙以除去任何未結合的第一抗體。根據第一抗體的類型，向蛋白質提取物中添 加抗小鼠或抗兔第二抗體。溫育後，除去抗體，洗滌硝酸纖維素紙。添加Pico化學發光劑 (Chemo-Iuminescent)，在暗室條件下將硝酸纖維素紙暴露於X-射線顯色膜。使膜顯色以 記錄蛋白質表達。Western印跡分析的圖形分析(產牛圖12、15、17、19a、20、21、22、23、24、26中的數 據)利用蛋白質表達程序獲得蛋白質表達的攝影圖象。將這些圖像掃描為圖像文件用 於計算機分析。利用美國國立衛生研究院(NIH)開發的ImageJ軟體，定量蛋白質表達水平。 然後基於作為樣品的負載對照的肌動蛋白的表達水平計算表達。統計學分析數值的統計學 顯著性。組織學標本Skmel-觀細胞在補充有5%血清的DMEM/F12培養基中生長至80%匯合。用胰蛋 白酶消化細胞，利用離心沉澱。然後將沉澱物重懸浮在冷PBS中。用於該研究的對象為無 胸腺裸鼠。每個對象在小鼠的背區接受兩次細胞懸浮液的注射。目視評估腫瘤的形成後， 開始通過局部應用進行處理。處理30天後，從小鼠中切除腫瘤，並置於福馬林中。將每 個腫瘤樣品包埋在石蠟中，並用切片機切片。對切片進行H&E或S-100染色。然後由病理 學家分析這些樣品，以評估腫瘤的血管完整性。附圖提供了關於CoQlO合成的細節，和癌症狀態下內源性蛋白質的相互作用，包 括其在癌症狀態的表達。附圖也顯示了從上述實驗獲得的數據，並證明了施用不同濃度的 化合物如CoQlO不同時間對各種類型癌細胞的效果。簡要地說，附圖包括以下各圖圖1是CoQlO的代謝合成圖；圖2是凋亡誘導中Bax、P53和Bcl_2相互作用的概括；圖3顯示用50 μ M CoQlO處理後黑素瘤細胞和新生成纖維細胞中的Bcl-2表達；圖4顯示與50μΜ和100 μ M CoQlO溫育M小時的黑素瘤細胞中的Bcl_2表達；圖5顯示採用M小時Take Away (TA)法，在存在和不存在CoQlO的條件下處理的 黑素瘤細胞中的Bcl-2表達。在TA實驗中，用CoQlO處理黑素瘤細胞6、12和M小時。溫 育後，將培養基替換為正常培養基M小時。測定Bcl-2表達以評估凋亡情況；圖6顯示與CoQ10(50yM和100 μ M)溫育12和M小時後黑素瘤細胞中的Bax表 達；圖7顯示採用M小時Take Away (TA)法，在存在和不存在CoQlO的條件下處理的 黑素瘤細胞中的Bax表達。在TA實驗中，用CoQlO處理黑素瘤細胞6、12和M小時。溫育 後，將培養基替換為正常培養基M小時。測定Bax表達以評估凋亡情況；圖8顯示與CoQlO溫育12小時後黑素瘤細胞中的Bid表達；圖9顯示在無胸腺裸鼠中誘導的人黑素瘤的組織病理學分析。治療組接受CoQlO 局部應用30天。腫瘤病理學分析表明腫瘤血管系統遭到破壞；圖IOa-IOd顯示與CoQlO和/或血管內皮生長因子(VEGF)溫育M小時的黑素瘤 細胞中的Bcl-2表達；圖11顯示與50μΜ和100 μ M CoQlO溫育M小時的黑素瘤細胞中的ρ53表達；圖12是顯示與50μΜ和ΙΟΟμΜ CoQlO溫育12小時的黑素瘤細胞中的ρ53表達的圖；圖13顯示與CoQlO溫育6小時的黑素瘤細胞中的Bcl-xl表達；圖14顯示與CoQlO溫育12小時的黑素瘤細胞中的Bcl-xl表達；圖15是定量用CoQlO處理12小時的黑素瘤細胞中的Bcl_xl表達的圖；圖16顯示用CoQlO處理12小時的黑素瘤細胞中的胱天蛋白酶-3表達；圖17是定量用CoQlO處理12小時的黑素瘤細胞中的胱天蛋白酶-3表達的圖；圖18顯示用輔酶QlO處理3、6、12和M小時的黑素瘤細胞中的Mcl-I表達；圖19a是定量與CoQlO溫育12小時的黑素瘤細胞中的Mcl-I表達的圖；圖19b是 定量與CoQlO溫育M小時的黑素瘤細胞中的Mcl-I表達的圖；圖20是定量與CoQlO溫育4小時的PC_3 (前列腺癌)細胞中的BAX表達的圖；圖21是定量與CoQlO溫育4小時的PC_3細胞中的Bcl_2表達的圖；圖22是顯示用CoQlO處理4和M小時的PC_3細胞中的Bcl_2表達的時間點比 較的圖；圖23是定量與CoQlO溫育4小時的SkBr_3 (乳腺癌)細胞中的Bcl_2表達的圖；圖M是定量與CoQlO溫育8小時的SkBr_3細胞中的Bax表達的圖；圖25顯示與CoQlO溫育8小時的SkBr3細胞中的Bax表達；圖沈是比較用CoQlO處理M小時後的Bcl-2和Bax表達的圖。病症/紊亂/應用如上所述，本發明的組合物可用於治療癌症。這些組合物可以在藥學可接受的載 體中包含CoQlO或其代謝物。這種組合物可以實現除了但不限於甲羥戊酸和油酸外內源性 輔酶QlO或其代謝物的細胞接觸，以形成細胞內複合物。在一些實施方案中，這種組合物可 包含大約0.001%至大約60% (w/w)的輔酶Q10。這樣的組合物可以是局部組合物，它可以 是凝膠、軟膏、液體、乳膏、油膏、洗劑、噴劑、氣霧劑、摩絲、泡沫、其組合等。如上所述，本發明的組合物可以是本領域技術人員已知的、能夠通過任何給藥手 段或途徑引入受試者的液體形式。例如，組合物可以通過包括但不限於肺、靜脈內、口服、透 皮、直腸、皮下、經黏膜、口腔、舌下、腫瘤內、它們的組合等的給藥途徑給藥。在某些實施方案中，可能希望噴霧或霧化該組合物用於給藥。還提供了使用此處的組合物治療疾病狀態的方法。這些方法可包括治療癌症。當 用於治療癌症時，組合物可以在藥學可接受的載體中，其可以以治療有效量施用到腫瘤形 成區域作為單一療法、與至少一種其它化療劑聯合用於特定適應症、與放射療法聯合、在根 除腫瘤的手術幹預後、與其它可接受的替代和/或補充癌症治療聯合，等等。在一些實施方案中，本發明還提供了一種通過向患者的腫瘤形成區域施用本發明 的組合物來重新激活突變的/滅活的P53蛋白的方法。本發明還提供了通過向患者的腫瘤形成區域施用本發明的組合物來調節與腫瘤 形成有關的蛋白質的方法。本發明的組合物可以調節的這樣的蛋白質包括但不限於Bcl_2 蛋白；Bax蛋白；Bid蛋白；Bim蛋白；Bad蛋白；Bak蛋白；mcl-1蛋白；Bcl-xl蛋白；Bcl_xs 蛋白；Bcl-w蛋白；Bik蛋白；Bok蛋白；BimL蛋白；Al蛋白；Hrk蛋白；Bik蛋白；BNIP3蛋 白；Blk蛋白；Noxa蛋白；Puma蛋白；VEGF蛋白；FGF-1/FGF-2蛋白；Hif-α蛋白；制管張素 蛋白；TGF-β蛋白；smad蛋白；cdk(細胞周期蛋白依賴性激酶)；ΡΙΙ/akt複合物。
在其它實施方案中，本發明的組合物可用於調節和/或恢復癌細胞的健康凋亡狀 態。線粒體功能障礙和凋亡的調節障礙與諸如癌症和神經退化等許多疾病有關。呼吸鏈 (RC)功能障礙可能在凋亡中具有作用，這利用線粒體DNA突變作為遺傳模型得到了證明。 儘管某些突變消除了整個RC，但是其它一些針對特定複合物，導致電子通量減少或完全喪 失，從而導致呼吸和三磷酸腺苷(ATP)合成受損。儘管具有這些相似性，但是對凋亡刺激物 的反應還是有明顯的差異。缺乏RC的細胞受到保護而免於線粒體和內質網(ER)應激誘導 的凋亡。具有RC但是不能產生電子通量的細胞受到保護而免於線粒體凋亡，儘管它們對ER 應激的敏感性提高。最後，電子通量部分降低的細胞在兩種條件下的凋亡都增加。RC以依 賴於環境的方式調節凋亡，不依賴於ATP的產生，並且凋亡應答是線粒體功能狀態和環境 因素(environmental cues)之間的相互作用的結果。凋亡以及致癌因素之間的通訊的執行也可以由諸如細胞色素C、Endo G或AIF等 釋放的因素通過在膜去極化時打開的線粒體膜孔介導。在存在氧的條件下，癌細胞也產生過量的乳酸鹽(有氧糖酵解)。似乎該現象是 兩個因素的結果恢復到更多的胚胎糖分解代謝和氧化磷酸化(0XPH0Q改變以提高線粒 體活性氧(R0Q的產生。Ras-PI3K-Akt信號轉導途徑的改變可導致誘導己糖激酶II以及 它附著到線粒體孔蛋白上，重新引導線粒體ATP以將葡萄糖磷酸化並驅動糖酵解。此外，線 粒體基因突變(種系突變或體細胞突變)對OXPHOS的部分抑制可減少通過電子傳遞鏈的 電子通量，提高線粒體ROS產生。提高的ROS誘使核原癌基因突變(啟動)並且驅動核復 制(推動)，導致癌症。因此，己糖激酶II和線粒體ROS可能是癌症治療劑的有用的替代目 標。代謝通量由於與癌症有關因此在致癌狀態下受損並且向糖酵解狀態轉變。癌細胞 的存活嚴重依賴於葡萄糖代謝和低氧水平。更複雜的是線粒體活性明顯減弱到休眠點。通 常與從三羧酸循環(TCA)接受電子的複合物I-IV有關的氧化磷酸化基本關閉。自由基含 量和乳酸脫氫酶活性明顯提高。因此，癌細胞處於以下狀態1)氧減少(低氧)2)自由基形成增加3)凋亡調節障礙(細胞死亡)4)葡萄糖代謝依賴性5)血管形成增加6)免疫識別改變(自身調節狀態開始)在一些實施方案中，CoQlO對癌細胞的效應可能部分依賴於癌細胞表現出的代謝 和氧化通量的各種狀態。CoQlO可以用來中斷和/或幹擾致癌細胞的糖酵解依賴性的轉變 和提高的乳酸鹽利用。由於它與癌症狀態有關，這種對腫瘤微環境的糖酵解和氧化通量的 幹擾可能以減少癌細胞生長的方式影響凋亡和血管發生。在一些實施方案中，輔酶QlO與糖酵解和氧化通量因子的相互作用可以提高輔酶 QlO在癌症中發揮其恢復性凋亡效應同時建立用於藥物發現和開發的有效藥物目標的能 力。儘管以上公開內容集中於輔酶QlO及其代謝物，但是可以代替CoQlO施用或者 與之聯用的與CoQlO有關的其它化合物包括但不限於苯醌類、異戊二烯類、法尼醇類、乙酸法尼酯、焦磷酸法尼酯、1-苯丙氨酸、d-苯丙氨酸、dl-苯丙氨酸、1-酪氨酸、d-酪氨 酸、dl-酪氨酸、4-羥基-苯丙酮酸、4-羥基-苯基乳酸酯、4-羥基-肉桂酸酯、酪氨酸或 苯丙氨酸的二肽類和三肽類、3，4_ 二羥基扁桃酸酯、3-甲氧基-4-羥基苯乙二醇、3-甲氧 基-4-羥基扁桃酸酯、香草酸、乙酸苯酯、吡多辛、S-腺苷甲硫氨酸、泛醇、甲羥戊酸、焦磷酸 異戊酯、丁酸苯酯、4-羥基-苯甲酸酯、焦磷酸十異戊二烯酯、β -羥丁酸酯、3-羥基-3-甲 基-戊二酸酯、乙醯肉鹼、乙醯乙醯基肉鹼、乙醯甘氨酸、乙醯乙醯基甘氨酸、肉鹼、乙酸、 丙酮酸、3-羥基-3-甲基戊二醯肉鹼、絲氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、蘇氨酸、羥脯氨 酸、賴氨酸、異亮氨酸和亮氨酸的所有異構形式、肉鹼和甘氨酸的偶碳原子數C4至C18脂 肪酸(丁酸、己酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸和硬脂酸)鹽，例如棕櫚醯肉鹼 (palmitoylcarnitine)和棕櫚醯甘氨酸，以及4-羥基-苯甲酸聚異戊烯轉移酶，這些化合 物的任何鹽，及其任意組合，等等。附圖是為了說明而提供的，並不是限制。雖然已經提供了具體實施例，但是以上描 述是說明性的而不是限制性的。前面描述的實施方案的任何一個或多個特徵可以與本公開 內容中的任何其它實施方案的一個或多個特徵以任何方式組合。此外，本領域技術人員在 閱讀本說明書後將會明白本公開內容的許多變化。其它參考文獻本申請引用的所有出版物和專利文件通過參考引入相關部分用於所有目的，如同 每一單獨的出版物或專利文件單獨引用。儘管在該文件中引用各篇參考文獻，申請人不承 認任何具體參考文獻是其公開內容的「現有技術」。應當理解，本公開內容已經結合詳細說明進行了描述，前面的描述旨在說明而不 是限制本發明的範圍，本發明的範圍由所附的權利要求書的範圍限定。其它方面、優點和改 變也在以下權利要求及其等同物的範圍內。
權利要求
1.一種方法，包括向細胞施用包含含磷脂的脂質體和含輔酶Qio或其代謝物的生物活性劑的組合物；以及使輔酶QlO或其代謝物與內源性輔酶QlO和膜脂形成複合物， 其中該複合物的形成誘導細胞經歷凋亡。
2.權利要求1的方法，其中所述膜脂包括選自油酸、甲羥戊酸和醌類的內源性脂質。
3.權利要求1的方法，其中所述組合物還包含藥學可接受的載體，並且其中輔酶QlO的 含量為該組合物的大約0. 001%至大約60% (w/w)。
4.權利要求1的方法，其中所述組合物為選自以下的形式凝膠、軟膏、乳膏、油膏、洗 齊IJ、摩絲、泡沫、噴劑、氣霧劑、液體、霧化粉末和栓劑。
5.權利要求1的方法，其中所述複合物的形成誘導選自p53、Bcl-2、Bcl-2亞家族成員 和Bak的細胞蛋白質的調節。
6.權利要求5的方法，其中所述細胞蛋白質的調節包括p53蛋白的再激活。
7.權利要求5的方法，其中所述細胞蛋白質的調節包括調節Bcl-2家族的至少一個 BH3結合域。
8.權利要求7的方法，其中所述Bcl-2家族的至少一個BH3結合域選自Bid、Bim,Bik及其組合。
9.權利要求1的方法，其中所述細胞是致癌細胞。
10.一種治療癌症的方法，包括向致癌細胞施用包含含磷脂的脂質體和含輔酶QlO或其代謝物的生物活性劑的組合 物；以及使輔酶QlO或其代謝物與內源性輔酶QlO和膜脂形成複合物， 其中該複合物的形成調節致癌細胞的血管生成因子。
11.權利要求10的方法，其中所述膜脂包括選自油酸、甲羥戊酸和醌類的內源性脂質。
12.權利要求10的方法，其中所述組合物還包含藥學可接受的載體，並且其中輔酶QlO 的含量為該組合物的大約0. 001%至大約60% (w/w)。
13.權利要求10的方法，其中所述組合物為選自以下的形式凝膠、軟膏、乳膏、油膏、 洗劑、摩絲、泡沫、噴劑、氣霧劑、液體、霧化粉末和栓劑。
14.權利要求10的方法，其中所述複合物的形成調節選自VEGF、FGF、Hif-Iα和制管 張素的血管生成因子。
15.一種治療癌症的方法，包括向致癌細胞施用包含含磷脂的脂質體和含輔酶QlO或其代謝物的生物活性劑的組合 物；以及使輔酶QlO或其代謝物與內源性輔酶QlO和膜脂形成複合物， 其中該複合物的形成調節致癌細胞的細胞周期因子。
16.權利要求15的方法，其中所述膜脂包括選自油酸、甲羥戊酸和醌類的內源性脂質。
17.權利要求15的方法，其中所述組合物還包含藥學可接受的載體，並且其中輔酶QlO 的含量為該組合物的大約0. 001%至大約60% (w/w)。
18.權利要求15的方法，其中所述組合物為選自以下的形式凝膠、軟膏、乳膏、油膏、洗劑、摩絲、泡沫、噴劑、氣霧劑、液體、霧化粉末和栓劑。
19.權利要求15的方法，其中所述複合物的形成調節選自smad蛋白、TGF-β、細胞周 期蛋白依賴性激酶和PI3K/akt的細胞周期因子。
全文摘要
本發明涉及誘導癌細胞凋亡的方法，該方法是通過在藥學可接受的載體中遞送外源性輔酶Q10或其代謝物，以實現內源性輔酶Q10或其代謝物以及但不限於甲羥戊酸和油酸的細胞接觸，以形成細胞內複合物。本發明還提供一種通過在藥學可接受的載體中遞送輔酶Q 10以恢復癌細胞的凋亡潛力的方式調節p53途徑和Bcl-2蛋白質家族的方法。本發明還提供一種按比例將Bcl-2基因家族的促凋亡和抗凋亡成員的比例特異性標準化以再編程癌細胞使之經歷凋亡的方法。
文檔編號A61P35/00GK102083424SQ200980116142
公開日2011年6月1日 申請日期2009年4月9日 優先權日2008年4月11日
發明者I·佩爾索德, J·P·麥克庫克, N·R·納萊恩 申請人:細胞研究有限公司