一種治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑及其製備方法和應用的製作方法

2023-08-03 15:31:21

專利名稱：一種治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑及其製備方法和應用的製作方法
技術領域：
本發明屬中藥領域，具體涉及一種含中藥材月腺大戟的治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑及其製備方法和應用。
背景技術：
人乳頭瘤病毒感染症是指人乳頭瘤病毒(Human papillomavirus, HPV)感染皮膚以及黏膜的上皮組織細胞後使棘細胞增生形成乳頭瘤損害，從而引起的人類多種良性與惡性增殖性疾病的統稱。有發生於皮膚的疣狀損害皮膚疣、皮膚腫瘤；發生於黏膜部位的尖銳溼疣、肛門直腸疣、宮頸癌、外陰癌，呼吸道乳頭瘤病、口腔灶性上皮增生(FEH)，口腔腫瘤、 食道癌等。近年來的研究發現越來越多的人類皮膚、黏膜疾患與HPV存在相關性，到目前為止，根據DNA鹼基排列的不同，確定的HPV基因型已達到120多種，不同型別的HPV在基因組結構、組織親嗜性與致病譜上存在一定的差異，根據其致癌性的高低分為高危型與低危型； 根據其易感染的部位不同可分為皮膚型與黏膜型。其中皮膚型常見的疣狀損害皮膚疣，如掌蹠疣主要由HPV 1，2，4，7，26，27，40，41，49，57，63，65等型引起；黏膜型常見的發生於黏膜部位的損害，如近年來位居性傳播疾病前列的尖銳溼疣，主要由HPV6、11、40、42等型感染所致；女性生殖系統常見的惡性腫瘤之一子宮頸癌，大量流行病學和分子生物學研究已經肯定了 HPV16、18、31、33等型HPV感染在子宮頸癌發生中具有重要作用，證實了 HPV是子宮頸癌發生的主要和必需致病因子。目前，國內外主要採用(1)液氮冷凍，C02雷射，電燒灼等物理療法；(2)外科手術切除；(3)5-氟尿嘧啶，硫酸博萊黴素，平陽黴素等抗腫瘤類藥物外用或疣損害內注射；(4) 酞丁胺，幹擾素，聚肌胞等抗病毒類藥物外用或疣損害內注射；( 水楊酸或乳酸、苛性鉀， 福馬林，鴉膽子，斑蟊等腐蝕性藥物，角質剝脫劑的外用；(6) BCG或卡介菌素免疫刺激療法，DNCB致敏療法等免疫治療；(7)維甲酸，鬼臼毒素，咪喹莫特等方法。雖然治療手段繁多，但目前臨床上仍無公認的確切的治癒療法，尤其是有效的抗HPVs病毒感染的藥物。且皮損局部的物理或化學治療後會出現局部疼痛、水腫、化膿、過敏反應及色素沉著等副作用；雷射，外科手術療法雖對單個的疣體有效，但易留疤痕，復發率高；全身性的免疫療法療效並不明確。因此皮膚科常見的多發性頑固性掌蹠疣、鑲嵌疣、多發性甲周疣，仍是臨床治療困難的疾病。醫藥界一直在致力於開發較理想的治療人乳頭瘤病毒感染症的藥物，尋找安全有效、使用簡便、價格適度的中藥新藥。

發明內容
本發明要解決的技術問題之一是提供一種月腺大戟提取物。本發明要解決的技術問題之二是提供一種安全有效、使用簡便、價格適度的治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑。本發明要解決的技術問題之三是提供一種上述中藥製劑的製備方法。
本發明要解決的技術問題之四是提供上述月腺大戟提取物在製備治療人乳頭瘤病毒感染症的藥物中的應用。中醫學對人乳頭瘤病毒感染症早有認識「千日瘡」、「枯筋箭」即是指掌蹠疣；「臊瘊」、「尿瘊」即是指尖銳溼疣。祖國醫學古籍中雖無子宮頸癌病名的記載，但依據其發病特徵及臨床表現，可將其歸屬為中醫的帶下病。中藥月腺大戟為多年生草本植物，是傳統的中醫外科藥，生命力強，繁殖迅速，其根入藥，有毒，功用逐水祛痰，破積殺蟲；主治結核，水氣腫脹；外用治疥癬，頑固性皮炎，痔瘻等；性味苦辛，平，有毒。《永類鈐方》中記載，「治久年乾疥乾癬及一切癩瘡」；其在難治性皮膚病治療中有重要作用。大量實驗研究表明其具有抗腫瘤，抗菌，抗炎，抗驚厥、抗癲癇等方面作用，但目前尚未有其治療人乳頭瘤感染症方面的實驗研究的報導。在本發明的一方面，提供一種月腺大戟提取物，，該月腺大戟提取物含有月腺大戟甲素、月腺大戟乙素、月腺大戟素A、月腺大戟素B、24-亞甲基環阿爾廷醇、月腺大戟素C、 β -香樹脂醇乙酸酯、三萜酸、大戟素Α、3_乙醯-α -香樹脂醇、巖大戟內酯B月腺大戟苷 B、月腺大戟苷C、異槲皮苷、狼毒甲素[雙(5-甲醯基-糖基)-醚]、狼毒乙素[2，4_ 二羥基-6-甲氧基-3-甲基-1-苯乙酮]、2-羥基-6-甲氧基-3-甲基苯乙酮2-4-β-葡萄糖苷；該月腺大戟提取物的製備方法，包括如下步驟將月腺大戟浸泡於乙醇中7天，取浸出液備用。在本發明的另一方面，提供一種治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑，它是由有效成分與藥物載體製成，所述有效成分是月腺大戟提取物，所述月腺大戟提取物佔該中藥製劑的重量百分比為15-100%。所述藥物載體指常規的可接受的藥物載體，例如乙醇。本發明的中藥製劑，由下列重量份的原料藥與藥用載體製成月腺大戟1-2份，乙醇1-5份。優選月腺大戟1份，乙醇1份。所述乙醇優選75%的乙醇水溶液。本發明所涉及的原料藥材為中華人民共和國藥典1977年版一部所收載中藥，並符合藥典質量要求。在本發明的另一方面，提供一種上述中藥製劑的製備方法，其通過下述步驟製備取月腺大戟1-2份，加乙醇1-5份，浸泡7天後，取浸出液，即得本發明中藥溶液製劑。所述的中藥溶液製劑中月腺大戟提取物的有效作用濃度為0. 01 μ g/ml-100 μ g/ ml，該有效作用濃度是指能夠抑制HPV和/或HPV感染細胞的濃度。在本發明的另一方面，提供一種上述月腺大戟提取物在製備治療人乳頭瘤病毒感染症的藥物中的應用。所述的人乳頭瘤病毒感染症是人乳頭瘤病毒感染皮膚以及黏膜的上皮組織細胞後使棘細胞增生形成乳頭瘤損害，從而引起的人類多種良性與惡性增殖性疾病。所述的人乳頭瘤病毒感染症包括疣狀損害皮膚疣、皮膚腫瘤、尖銳溼疣、肛門直腸疣、宮頸癌、外陰癌，呼吸道乳頭瘤病、口腔灶性上皮增生，口腔腫瘤和食道癌等。優選地，本發明的月腺大戟提取物在製備治療掌蹠疣或宮頸癌的藥物中的應用。本發明中藥製劑的用量和療程可根據劑型、患者的年齡、疾病的輕重程度作適當調整，但一般為每日3次塗於患處，每次20ml (中藥溶液製劑中月腺大戟提取物的有效作用濃度為0. 01 μ g/ml-100 μ g/ml)，以1個月為一個療程，可連續使用6個療程或更長時間。
本發明中藥製劑經細胞實驗，結果表明，其能明顯抑制細胞的增殖、抗HPV作用及引起細胞凋亡的作用，能持續改善人乳頭瘤病毒感染症的症狀和體徵，臨床研究採用臨床綜合療效指標觀察，結果顯示，本發明中藥製劑使用3周後能使人乳頭瘤病毒感染症(掌蹠多發性疣)病人的皮損明顯好轉。本發明製劑能較好治療人乳頭瘤病毒感染症，使用方便， 用量少，外用無毒副作用，病人評價好。


圖1是試驗例3中相差顯微鏡下形態學改變示意圖；圖IA表示對照組(X200)， 圖IB表示藥物組(X200)；圖2是試驗例3中螢光顯微鏡下形態學改變示意圖；圖2A表示對照組(X400)， 圖2B表示藥物組(X400)；圖3-6是試驗例4中本發明製劑用藥前後對比圖；圖3為腳背治療前，圖4為腳背治療6個月後，圖5為腳底治療前，圖6為腳底治療3個月後。
具體實施例方式下面結合具體實施例，對本發明作進一步詳細說明，但不對本發明進行限制。實施例1月腺大戟提取物的製備(即本發明中藥製劑的製備)取月腺大戟15g，加75 %乙醇75g，浸泡7天後，取浸出液，備用。實施例2月腺大戟提取物的製備(即本發明中藥製劑的製備)取月腺大戟50g，加75 %乙醇100g，浸泡7天後，取浸出液，備用。實施例3月腺大戟提取物的製備(即本發明中藥製劑的製備)取月腺大戟IOOgJn 75%乙醇100g，浸泡7天後，取浸出液，備用。實施例4月腺大戟提取物的製備(即本發明中藥製劑的製備)取月腺大戟100g，W 75%乙醇50g，浸泡7天後，取浸出液，備用。以下通過試驗例對本發明的有益效果作進一步的闡述試驗例1增殖抑制作用研究試驗1、藥物本發明中藥製劑(月腺大戟提取物)(由實施例1製得)
本發明製劑用量為0. 01 μ g/ml-ΙΟΟμ g/ml。2、細胞人宮頸癌細胞株Hela，中國科學院上海生命科學研究院生物化學與細胞生物學研究所提供。3、方法取對數處於生長期，生長狀況良好的Hela細胞，接種96孔板，待細胞貼壁24h後， 選取 0.01 μ g/ml, 0. 1 μ g/ml, 1 μ g/ml, 10 μ g/ml, 100 μ g/ml 五個藥物濃度幹預 6h，12h， 24h, 48h，72h後吸光度值的變化。4、結果顯示，用藥後，對Hela細胞的增殖有抑制作用，Hela細胞生長均有不同程度的減慢，並呈時間、濃度相關性。表1本發明中藥製劑作用Hela細胞不同時間後吸光度㈧值(Mean士SD)
權利要求
1.一種月腺大戟提取物，其特徵在於，該月腺大戟提取物含有月腺大戟甲素、月腺大戟乙素、月腺大戟素A、月腺大戟素B、24-亞甲基環阿爾廷醇、月腺大戟素C、β-香樹脂醇乙酸酯、三萜酸、大戟素Α、3-乙醯-α-香樹脂醇、巖大戟內酯B、月腺大戟苷B、月腺大戟苷 C、異槲皮苷、狼毒甲素、狼毒乙素、2-羥基-6-甲氧基-3-甲基苯乙酮2-4-β -葡萄糖苷； 該月腺大戟提取物採用如下方法製得將月腺大戟浸泡於乙醇中7天，取浸出液備用。
2.一種治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑，它是由有效成分與藥物載體製成，其特徵在於，所述有效成分是權利要求1所述的月腺大戟提取物，所述月腺大戟提取物佔該中藥製劑的重量百分比為15-100%。
3.如權利要求2所述的治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑，其特徵在於，由下列重量份的原料藥與藥用載體製成月腺大戟1-2份，乙醇1-5份。
4.如權利要求3所述的治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑，其特徵在於，由下列重量份的原料藥與藥用載體製成月腺大戟1份，乙醇1份。
5.如權利要求3或4所述的治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑，其特徵在於，所述乙醇為75%的乙醇水溶液。
6.如權利要求3所述的治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑的製備方法，其特徵在於，包括下述步驟取月腺大戟1-2份，加乙醇1-5份，浸泡7天後，取浸出液，即得中藥溶液製劑。
7.如權利要求6所述的方法，其特徵在於，所述的中藥溶液製劑中月腺大戟提取物的有效作用濃度為0. 01 μ g/ml-100 μ g/ml，該有效作用濃度是指能夠抑制HPV和/或HPV感染細胞的濃度。
8.如權利要求1所述的月腺大戟提取物在製備治療人乳頭瘤病毒感染症的藥物中的應用。
9.如權利要求8所述的應用，其特徵在於，所述的人乳頭瘤病毒感染症是人乳頭瘤病毒感染皮膚以及黏膜的上皮組織細胞後使棘細胞增生形成乳頭瘤損害，從而引起的人類多種良性與惡性增殖性疾病；所述的人乳頭瘤病毒感染症包括疣狀損害皮膚疣、皮膚腫瘤、尖銳溼疣、肛門直腸疣、宮頸癌、外陰癌，呼吸道乳頭瘤病、口腔灶性上皮增生，口腔腫瘤和食道癌。
10.如權利要求9所述的應用，其特徵在於，所述的人乳頭瘤病毒感染症為掌蹠疣或宮頸癌。
全文摘要
本發明公開了一種月腺大戟提取物和其在製備治療人乳頭瘤病毒感染症的藥物中的應用。本發明還公開了含有該月腺大戟提取物的治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑及其製備方法。本發明的中藥製劑由月腺大戟提取物和藥物載體製成，月腺大戟提取物佔該中藥製劑的重量百分比為15-100％。本發明採用中藥材月腺大戟為主藥，配以輔料，製成治療人乳頭瘤病毒感染症的中藥製劑。實驗表明本發明中藥製劑有明確的抑制細胞增殖、抗病毒、促進細胞凋亡作用，能持續改善人乳頭瘤病毒感染症的症狀和體徵，本發明製劑能較好治療人乳頭瘤病毒感染症，使用方便，用量少，外用無毒副作用，病人評價好。
文檔編號A61P17/12GK102335223SQ201010239740
公開日2012年2月1日 申請日期2010年7月29日 優先權日2010年7月29日
發明者丁佩軍, 何翔, 張慧敏, 徐平, 曾秋妹, 樊梅鳳, 潘祥龍, 邊風華 申請人:上海中醫藥大學附屬曙光醫院