狹葉蕁麻多糖的製備及其用途的製作方法
2023-08-05 07:23:31 1
專利名稱：：狹葉蕁麻多糖的製備及其用途的製作方法
技術領域：
：本發明屬於食品、醫藥
技術領域：
，尤其是指狹葉蕁麻多糖的製備及其抗疲勞的用途。
背景技術：
：蕁麻為被子植物門、蕁麻科、蕁麻屬(Urtica.L.)，一年生或多年生草本植物，味辛、苦、溫、澀、有小毒。生命力極強，天然資源豐富，尤其在我國東北部資源更為豐富。狹葉蕁麻(Urticaangustifolia)，亦稱為蜇麻，多年生草本植物。莖高40150釐米，四稜形，有螫毛，分枝或不分枝。葉對生，披針形或狹卵形，長410釐米，寬1.22.8釐米，先端漸尖，基部圓形，邊緣有尖鋸齒，上面疏生短毛，下面沿脈上有疏生短毛；託葉分生，條形。雌雄異株，花序長達4釐米，多分枝；雄花花被片4，雄蕊4;雌花較雄花小，花被片4，在果期增大，柱頭畫筆頭狀。皮果卵形，扁，長約1毫米，光滑。在東北地區民間常用於治療風溼性關節炎、蕁麻疹、蛇咬傷、糖尿病等症。具有袪風除溼，活血止痛，平肝定驚，消積通便，解毒等功效。多糖具有免疫調節、抗腫瘤、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗輻射、降血糖、降血脂、保肝等多種功能。
發明內容本發明提供一種狹葉蕁麻多糖的製備及其用途，狹葉蕁麻多糖具有抗疲勞的功能。本發明狹葉蕁麻多糖多糖的提取方法是一、取狹葉蕁麻，陰乾、粉碎，加810倍量的水、加熱到IOO'C，浸提23次，每次23小時；二、過濾，合併濾液，減壓濃縮、濃縮至原液體積1/12，三、以3500轉/分鐘、離心15分鐘，取上清液，95%乙醇醇沉；四、Sevage法脫蛋白3次，以3500轉/分鐘、離心10分鐘，濃縮揮去溶劑，冷凍乾燥。本發明狹葉蕁麻多糖在製備具有抗疲勞功能的藥物中的應用。本發明還提供用狹葉蕁麻多糖以及藥學上可接受的載體或賦形劑製備的各種新藥。這些新藥包括口服給藥製劑、舌下片、栓劑、泡騰片、注射劑等。口服給藥製劑包括口服固體製劑、口服液體製劑。口服固體製劑可以是片劑、膠囊、顆粒劑、丸劑、錠劑等。這些製劑中，除包括本發明總有效部位外，還可以任選含有藥學上可接受的填充劑、助流劑、潤滑劑、著色劑、矯味劑等。這些製劑還可以根據需要製備成緩釋或控釋製劑。口服液體製劑可以是溶液、混懸液、乳化液等。這些製劑中，除包括本發明總有效部位外，還可以任選含有藥學上可接受的溶劑、助溶劑、增溶劑、助懸劑、乳化劑、表面活性劑、矯味劑等。本發明提供的以狹葉蕁麻多糖為原料製得的新藥不僅包括單方製劑，還包括在複方製劑中添加狹葉蕁麻多糖作為活性成分的藥物。本發明的有益效果是抗疲勞的效果明顯，狹葉蕁麻多糖人用量為0.1~1.5克/天，具有抗疲勞的功能，且安全無毒作用。具體實施方式下邊通過狹葉蕁麻多糖的藥效學實驗來進一步說明本發明。1、負重遊泳試驗檢驗原理，運動耐力的提高是抗疲勞能力加強最直接的表現，遊泳時間的長短可以反應動物運動疲勞的程度。儀器與器材遊泳箱(大小約50cmx50cmx40cm);AL104電子天平，梅特勒-託利多儀器有限公司；鋁絲；實驗動物清潔級昆明種小鼠，體重1822g。劑量分組實驗設三個劑量組和一個空白對照組，低、中、高劑量組受試量分別為100mg/Kg、200mg/Kg、300mg/Kg，濃度分別為4g/ml、8g/ml、12g/ml。實驗步驟末次給予受試樣品30min後，置小鼠在遊泳箱中遊泳。水深不少於30cm，水溫25。C土1.(TC，鼠尾根部負荷5%體重的鋁絲。記錄小鼠自遊泳開始至死亡的時間，作為小鼠遊泳時間。實驗結果與分析表l多糖對小鼠負重遊泳時間的影響(X土SD)tableseeoriginaldocumentpage5*;與對照組比有顯著差異(P<0.05)由表1可見，與對照組相比，低劑量組遊泳時間提高了85.4%，中劑量組遊泳時間提高了114.6%，高劑量組遊泳時間提高了151.2%(P<0.05)。2、血清尿素氮的測定試驗方法末次給小鼠受試物30min後，在溫度為30。C的水中不負重遊泳90min，休息60min後撥眼球取血。於4。C靜止3h後2000r/min離心15min，取出血清，用全自動生化分析儀測定血清尿素氮含量。小鼠尿素氮實驗結果與分析見表2:tableseeoriginaldocumentpage6與對照組比*P<0.05;**P<0.01由表2可見，與對照組相比，低劑量組小鼠運動後的血清尿素氮降低了12.8%(P<0.05);中劑量組降低了13.6%(P<0.05);高劑量組降低了19.8%(P<0.01)。3、肝糖原測定蒽酮法。檢測原理蒽酮可與游離糖或多糖起反應，反應後溶液呈藍綠色，於620nm處有最大吸收。測定其光密度，可以確定糖原的含量。儀器和試劑723型分光光度計，遼寧科欣科學器材開發公司，Z200A離心機，德國哈默(Hermle)，fsh-2可調高速電動勻漿器，無錫中恆實驗儀器有限公司，振蕩器，移液泵，沸水浴，灌胃針頭，手術器械，玻璃漏鬥，加樣器，2mL、5mL、10mL吸量管，20mL帶塞刻度試管，10mL帶塞離心管。試劑5%三氯醋酸(用蒸餾水配)(TCA)，葡萄糖標準液，濃硫酸(AR)，蒽酮試劑。蒽酮試劑溶液中含0.05%的蒽酮，1%的硫脲，用72X的H2S04配製。配製方法如下①72XH2S04配製燒杯中加入280mL蒸餾水，再加入高純度的濃硫酸720mL(比重1.84)。②蒽酮試劑配法當H2S04溫度降至80-9(TC時放入500mg純的蒽酮，10g高純度的硫脲，適當搖動燒杯混勻。冷卻後存放於冰箱中，可保存兩周。實驗方法實驗動物清潔級昆明種小鼠，體重18—22g。劑量設計和分組，實驗設三個劑量組和一個空白對照組，低、中、高劑量組受試量分別為100mg/Kg、200mg/Kg、300mg/Kg，濃度分別為4g/ml、8g/ml、12g/ml。實驗步驟末次給樣後30min處死動物，取肝臟經生理鹽水漂洗後用濾紙吸千，精確稱取肝臟100mg，加入8mLTCA，每管勻槳lmin，將勻漿液倒入離心管，以3000轉/min離心15min，將上清液轉移至另一試管內。取lmL上清液放入lOmL離心管中，每管加入95%的乙醇4mL，充分混勻至兩種液體間不留有界面。用乾淨塞子塞上，室溫下豎立放置過夜(也可選用將試管放在37-4(TC水浴3h)。沉澱完全後，將試管於3000轉/min離心15min。小心倒掉上清液並使試管倒立放置10min用2mL蒸餾水溶解糖原，加水時將管壁的糖原洗下。如管底的糖原不立即溶解，振蕩管子直到完全溶解。製作試劑空白和標準管-.試劑空白吸2mL蒸餾水到乾淨離心管；標準管吸0.5mL葡萄糖標準液，含100mg/dL葡萄糖和1.5mL蒸餾水放入同樣的管子。此時將10mL蒽酮試劑用力加入各管，液流(蒽酮試劑)直接進入管子中央，保證充分混合好。從管子中注入蒽酮試劑時起，將管子放在冷水龍頭下衝涼。在所有管子都達到涼水溫度後，將其浸於沸水浴(水浴深度略高於管子液面)15min，然後移到冷水浴，冷卻到室溫。將管內液體移入比色管，在620nm波長下，用試劑空白管調零後測定吸光度。並根據標準曲線計算出糖原含量，根據所稱取的肝臟重量換算成肝糖原含量(以mg/g肝表示)，並進行統計分析。糖原含量計算DU(樣品A)V(提取液的體積ml)肝糖原(mg/100g肝)=-XO.5X-X100X0.9DS(標準A)'G(乾重g)DU:樣品管吸光度，DS:標準管吸光度，0.5:為0.5mL葡萄糖標準液中的葡萄糖含量。0.9:為將葡萄糖換算成糖原的係數。提取液體積為8ML;200910067177.2肝組織克數為0.1g;實驗結果與分析表3多糖對小鼠肝糖原的影響(X±SD)動物只數給藥量(mg/Kg)氮含量(mg/g)空白對照組低劑量組中劑量組高劑量組與對照組比**P<0.01由表3可見，與對照組相比，低劑量組小鼠運動後的肝糖原含量提高了87.0%;中劑量組提高了469.6。/0(P〈0.01);高劑量組提高了747.8%(P<0,01)。4、結果與討論經口灌胃小鼠IO天多糖後，與對照組相比低劑量、中劑量、高劑量都提高了小鼠的遊泳時間，高劑量組與空白對照組相比有統計學的意義，且P<0.05;運動後的小鼠與空白對照組相比，血清尿素氮含量均低於空白對照組，且均具有統計學意義，低劑量組與空白對照P<0.05，中劑量組與空白對照P〈0.05，高劑量組與空白對照P〈0.01;肝糖原含量均高於空白對照組，且中劑量和高劑量組都有統計學意義，中劑量組與空白對照組相比P<0.01;高劑量組與空白對照組相比P<0.01。因此，中、高劑量組多糖對小鼠具有抗疲勞的作用。實施例1狹葉蕁麻多糖的製備一、取狹葉蕁麻，陰乾、粉碎，加8倍量的水、加熱到10(TC，浸提3次，每次3小時；二、過濾，合併濾液，減壓濃縮、濃縮至原液體積1/12，三、以3500轉/分鐘、離心15分鐘，取上清液，95%乙醇醇沉；四、Sevage法脫蛋白3次，以3500轉/分鐘、離心10分鐘，濃縮揮去溶劑，冷凍乾燥。實施例2一、取狹葉蕁麻，陰乾、粉碎，加9倍量的水、加熱到10(TC，浸提3次，每次2.5小時；二、過濾，合併濾液，減壓濃縮、濃縮至原液體積1/12，三、以3500轉/分鐘、離心15分鐘，取上清液，95%乙醇醇沉；四、Sevage法脫蛋白3次，以3500轉/分鐘、離心10分鐘，濃縮揮去溶劑，冷凍乾燥。實施例3一、取狹葉蕁麻，陰乾、粉碎，加8倍量的水、加熱到10(TC，浸提2次，每次2小時；二、過濾，合併濾液，減壓濃縮、濃縮至原液體積1/12，三、以3500轉/分鐘、離心15分鐘，取上清液，95%乙醇醇沉；四、Sevage法脫蛋白3次，以3500轉/分鐘、離心10分鐘，濃縮揮去溶劑，冷凍乾燥。實施例4本發明膠囊劑的製備狹葉蕁麻多糖50.00g,藥用澱粉200.00g，二者充分混合，裝膠囊，製成1000粒膠囊，每粒重0.25g，含狹葉蕁麻多糖50mg。實施例5本發明片劑的製備狹葉蕁麻多糖25.00g,製備片劑的常規輔料225.00g，壓片，審U成1000片，每粒重0.25g，含狹葉蕁麻多糖25mg。權利要求1、一種狹葉蕁麻多糖的製備方法，包括下列步驟一、取狹葉蕁麻，陰乾、粉碎，加8～10倍量的水、加熱到100℃，浸提2～3次，每次2～3小時；二、過濾，合併濾液，減壓濃縮、濃縮至原液體積1/12，三、以3500轉/分鐘、離心15分鐘，取上清液，95％乙醇醇沉；四、Sevage法脫蛋白3次，以3500轉/分鐘、離心10分鐘，濃縮揮去溶劑，冷凍乾燥。2、狹葉蕁麻多糖在製備具有抗疲勞功能的藥物中的應用。全文摘要本發明涉及狹葉蕁麻多糖的製備及其用途，屬於食品、醫藥領域。一、取狹葉蕁麻，陰乾、粉碎，加8～10倍量的水、加熱到100℃，浸提2～3次，每次2～3小時；二、過濾，合併濾液，減壓濃縮、濃縮至原液體積1/12，三、以3500轉/分鐘、離心15分鐘，取上清液，95％乙醇醇沉；四、Sevage法脫蛋白3次，以3500轉/分鐘、離心10分鐘，濃縮揮去溶劑，冷凍乾燥。狹葉蕁麻多糖在製備具有抗疲勞功能的藥物中的應用。其抗疲勞的效果明顯，且安全無毒作用。文檔編號A23L1/29GK101580552SQ20091006717公開日2009年11月18日申請日期2009年6月24日優先權日2009年6月24日發明者張海悅申請人:張海悅