蘑菇的液體種菌的生產方法
2023-07-24 21:30:56
專利名稱：蘑菇的液體種菌的生產方法
技術領域：
本發明涉及用於生產蘑菇子實體的蘑菇液體種菌的生產方法、以及使用該液體種菌生產蘑菇子實體的方法。
背景技術：
近年來，已開發了蘑菇的人工栽培技術，從而提供各種蘑菇子實體(佔地菇、荷葉菇、真姬菇、杏鮑菇、香菇、金針菇等)。通常，這樣對蘑菇進行人工栽培通過將蘑菇的種菌接種於碎塊木或固體培養基中，經由培養、生長等工序，收穫子實體。蘑菇的種菌包括使用鋸屑等培養基的固體種菌和使用液體培養基的液體種菌。近年來，在蘑菇的人工栽培中正在推進機械化，例如，在大型設備的工廠系統中實施等。但是，為了商業上大量且穩定地生產蘑菇子實體，需要大量培養所使用的種菌。目前，從蘑菇的種菌保存性良好且可容易運輸等理由考慮，可以使用固體種菌；但是從易於避免蘑菇子實體生產時的生產差異(其起因於固體種菌的批次差異)的風險、或有害菌·害蟲對設備的嚴重汙染(其起因於接種固體種菌時溢出的種菌所引起的瓶或貨櫃的汙染)等問題、能夠大幅縮短種菌的生產時間、且易於擴大規模等方面考慮，液體種菌被認為是有利的，其使用正在增加。作為用於大量培養液體種菌的方法，對液體深部培養法(其為用於從菌絲體得到有用成分的大量培養方法)進行研究，為了嚴格地控制培養條件等，通用的是利用進行機械攪拌、通氣、溫度管理的小型發酵罐來通氣攪拌的方法 (例如，非專利文獻1)。但是，為了以商業規模生產蘑菇子實體，需要設置大容量的包含小型發酵罐的高價且大規模的培養設備。[非專利文獻1]醌酵協會誌，第M卷，第7期，第四3_304頁，1966年
發明內容
發明要解決的問題鑑於上述現狀，本發明的目的在於提供一種在蘑菇子實體的大規模商業生產中廉價且有效地生產液體種菌的方法、以及使用該液體種菌生產蘑菇子實體的方法。本發明人對大量生產用於大規模商業生產的蘑菇液體種菌的方法進行了潛心研究，結果發現，令人驚奇的是，在攪拌中使用氣泡的液體深部培養(無動力攪拌鼓氣泡)意外地也對用於生產蘑菇子實體的液體種菌的生產有用。另外發現，在該培養中，通過在液體培養基中含有低濃度的植物油，從而可以在具有蘑菇子實體形成能力的狀態下有效且穩定地大量生產菌絲體。進而，通過進一步提高迄今為止在固體種菌中使用的菌床栽培用培養基的菌座，且使菌座表面均勻地平面化，從而可以進行更穩定的菌循環(菌廻)，可以有效地進行由搔菌(菌+爸)所引起的發生誘導，與使用固體種菌的情況相比，可以生產優良的蘑菇子實體，該蘑菇子實體均勻且商品價值高，而該生產方法包含種菌生產時間在內的時間短，由此完成了本發明。本發明概述如下
[1] 一種蘑菇的液體種菌的生產方法，其為用於生產蘑菇子實體的蘑菇液體種菌的生產方法，其特徵在於，在含有植物油的液體培養基中，通過使用氣泡攪拌培養基來對蘑菇的菌絲體進行液體深部培養；[2]如[1]所述的生產方法，其中，基本上僅使用氣泡來攪拌培養基；[3]如[1]或[2]所述的生產方法，其中，所述植物油為選自色拉油、米糠油、菜籽油、紅花油、玉米油、橄欖油、芝麻油、大豆油及棉籽油中的1種或多種；[4]如[1] [3]中任一項所述的生產方法，其中，所述培養基中的植物油濃度為 0. 001 0. 1 體積 ％ ；[5] 一種蘑菇子實體的生產方法，其特徵在於，使用通過[1] W]中任一項所述的生產方法所得到的蘑菇液體種菌；[6]如[5]所述的蘑菇子實體的生產方法，其為瓶栽法；[7]如[5]或[6]所述的蘑菇子實體的生產方法，其特徵在於，使用菌座提高了的菌床栽培用培養基。[8]如[7]所述的蘑菇子實體的生產方法，其特徵在於，使用菌座表面均勻平面化了的菌床栽培用培養基。發明效果根據本發明，可以提供一種用於蘑菇子實體的大規模商業生產的、在短時間內廉價地大量生產蘑菇液體種菌的方法。另外，也可以提供一種使用該液體種菌生產蘑菇子實體的方法。
[圖1]是示出用於本發明生產方法的栽培瓶中菌座提高了的菌床栽培用培養基的菌座位置的圖。
具體實施例方式對於能夠用於本發明的「蘑菇」沒有特別的限定，可以列舉荷葉菇、佔地菇、真姬菇、平菇、香菇、金針菇、滑菇、平菇、舞茸、杏鮑菇、姬松茸、鮑魚菇、黑耳平菇等食用蘑菇。 作為這些蘑菇的菌株，只要是可作為液體種菌進行培養且可生產子實體的菌株即可，可以為市售的菌株，也可以為來自野生子實體的組織分離株，還可以為通過篩選、雜交、細胞融合、基因重組等方法進行育種而得到的菌株。作為本發明的優選的一個實施方式，可以舉出荷葉菇(Lyophyllum decastes)。作為荷葉菇，可以例示公知的菌株，例如，Lyophyllum decastes K-3303 株(FERM BP-4347)、Lyophyllum decastes K-3304 株(FERM BP-4348)、 Lyophyllum decastes K-3305 株(FERM BP-4349) > Lyophyllum decastes F-623 株(FERM P-13165)、Lyophyllum decastes F-1154 株(FERM P-13166)、Lyophyllum decastes F-1488株(FERM P-13167)及適於生產子實體的這些菌株的突變株等。另夕卜，作為本發明中優選的本佔地菇(Lyophyllum shimeji)的菌株的實例， 可以例示LyophylIum shimeji La 01-27 (FERM BP—10960)、Lyophyllum shimeji La 01-20 (FERM BP-10959)、Lyophyllum shimeji LaO 1-37 (FERM P-17456)、Lyophyllum shimeji La 01-45 (FERM P-17457)、Lyophyllum shimeji La 01-46 (FERM P-17458)及適於生產子實體的這些菌株的突變株等。此外，作為本發明中優選的真姬菇的菌株，有表示為榆生離褶傘(Lyophyllum ulmarium)的菌株、表示為Hypsizygus marmoreus的菌株等，例如可以例示Lyophyllum ulmarium M-8171(FERM BP-1415) > Lyophyllum ulmarium K-0259(FERM P—12981)、 Lyophyllum ulmarium Lul-172 株(FERM BP-8354)、Lyophyllum ulmarium Lul-173 株 (FERM BP-8355)、LyophylIum ulmarium Lul-174株(FERM BP-8356)、LyophylIum ulmarium Lul-181^ (FERM BP-8357) >Hypsizygus marmoreus K-4975 (FERM BP-11321) >Hypsizygus marmoreus K-4979(FERM BP-11322)、Hypsizygus marmoreus K-4980(FERM BP-11323)、 Hypsizygus marmoreus K_4981(FERM BP-11324)及適於生產子實體的這些菌株的突變株寸。此外，作為本發明中優選的黑耳平菇的菌株，可以例示=Pleurotus cystidiosus subsp. abalonus K-4986(FERM P-22064)、Pleurotus cystidiosus subsp.abalonus K-4987(FERM P-22065) >Pleurotus cystidiosus subsp. abalonus K-4988(FERM P-22066) 及適於生產子實體的這些菌株的突變株等。對上述菌株沒有任何限定，只要為可人工栽培的菌株、並且為可適用本發明的菌株即可。本申請說明書中，所謂「菌絲體」為上述蘑菇的菌絲體，對其沒有特別的限定，只要為可在液體培養基中培養、且可用作用於生產蘑菇子實體的液體種菌即可。本申請說明書中，所謂「使用氣泡的液體深部培養」是指通過在培養槽內產生的氣泡來使培養液運動(流動)，從而對培養基實施攪拌的培養方法。優選基本上僅使用氣泡來對培養基進行攪拌的培養方法，也可以包含通過攪拌器、螺旋槳形狀的鼓風機之類的裝置進行的機械攪拌，只要為不引起菌絲切斷的程度即可。特別優選為不伴有機械性攪拌而僅使用氣泡來對培養基進行攪拌的培養方法。對用於所述培養方法的培養槽而言，不需要用於攪拌或振蕩的使用機械動力的裝置，只要具備產生氣泡的裝置即可。本發明中，可以使用 (例如)文獻「日本応用t O 二學會誌，第8卷，第1期，第1-11頁Q000)」中記載的氣泡塔型培養裝置等，可以使用帶有可從底面及/或側面產生無菌氣泡那樣的裝置的培養槽。另外，也可以將可以產生氣泡的管子等直接加入到培養槽中。作為培養槽中的氣泡的通氣量， 優選0. 2 0. 8vvm(volume per volume per minute :每單位體積的氣體通氣量)，優選為 0. 2 0. 6vvm，或者也可以為10 50L/min(表示在1分鐘內將10 50L無菌空氣通氣到 25 83L液體培養基中的量)，優選為20 40L/min。本發明中使用的培養槽只要是具有可以保持期望量培養液的容量、且能夠防止微生物從外部混入的容器即可。優選的是，可以使用具有可對所保持的培養基進行加熱加壓殺菌的構造的培養槽，但是如果保持培養液的培養槽本身可由高壓滅菌器等進行殺菌，則不需要用於加壓殺菌的功能。另外，優選具有將無菌空氣導入容器內的功能、或能夠附加用於該功能的裝置的培養槽。也可以使用通常的小型發酵罐，但在該情況下，培養時不需要使用機械攪拌功能。本發明中使用的培養槽的大小根據生產的液體種菌的量來適宜調整即可。在本發明的液體種菌生產中，可以為連續培養或單次培養中的任意一者，優選為單次培養，即，優選每次培養進行蘑菇子實體生產的每單位所使用的液體種菌。另外，在液體種菌的生產中進行大量培養(在本申請說明書中也稱為「本培養」)的情況下，可以將在瓊脂培養皿等中生長的菌絲體直接用於本培養。作為優選的實施方案， 首先通過使用燒瓶等對菌絲體進行攪拌或振蕩來進行小規模的預培養，然後使用該預培養物進行本培養。在該情況下，通過在本培養時採用本發明的液體種菌生產方法，可以有效且廉價地大量生產液體種菌。本發明人發現，即使在上述通過使用燒瓶等的振蕩來進行的小規模預培養中，通過使所使用的液體培養基中含有低濃度的植物油，與不含有低濃度的植物油的情況相比， 也可以較多地獲得菌絲體。因此，通過使預培養時及本培養時所使用的液體培養基中含有低濃度的植物油，能夠更有效且廉價地大量生產液體種菌。本申請說明書中使用的液體培養基使用通常用作蘑菇的液體培養營養源的那些物質作為營養源，可以使用(例如)含有碳源、氮源、無機鹽等可以同化的營養源的液體培養基。例如，可以使用葡萄糖、麥芽糖、糖蜜、糊精、甘油、澱粉等碳水化合物等碳源，以及蛋白腖、肉提取物、棉籽粉、大豆粉、酵母提取物、酪蛋白、玉米漿、NZ-胺、硫酸銨、硝酸銨、氯化銨等氮源，還可以含有磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸鈉、食鹽、碳酸鈣、硫酸鎂、氯化錳等無機鹽，只要是可培養上述蘑菇菌絲體的液體培養基即可。對本申請說明書中所謂的「植物油」沒有特別的限定，只要為來自植物的油即可， 從安全性及獲得難易的方面考慮，優選為食用油。作為食用油，可以列舉(例如)米糠油、 菜籽油、紅花油、玉米油、橄欖油、芝麻油、大豆油、棉籽油等。另外，以這些油為原料的色拉油等加工油也可用於本發明。這些植物油可以用公知的方法進行製備，也可以使用市售品。 本發明中，也可以將這些植物油中的1種或2種以上混合在培養基中而使用。本發明中，培養基中植物油的含量相對於液體培養基總量可以為低濃度，適宜為 0. 001 0. 1體積％ (ν/ν)，優選為0. 005 0. 1體積％ (ν/ν)，進一步優選為0. 01至小於 0.05體積％ (ν/ν) 0利用該低濃度的植物油，可以在液體培養中在不覆蓋液體培養基表面的條件下進行使用。本發明的液體種菌培養可以通過公知的方法進行，培養溫度和培養時間可以在蘑菇菌絲體可繁殖的範圍內來適宜地決定。作為一個例子而不是對本發明的特別限定，例如， 可以按照下述工序進行。在200mL PGY液體培養基[組成葡萄糖1.49% (w/v)、蛋白腖 0. 15% (w/v)、酵母提取物 0. 15% (w/v)、KH2PO4O. 0373 % (w/v)、及 MgSO4 · 7Η200· 0373 % (w/v),pH 6.0]中接種荷葉菇的菌絲體，在25°C培養14天，製備預培養物。接著，在另行製備的430L PGY液體培養基中以相對於培養基為0.001 0.04體積％的量添加植物油(例如，色拉油[日清色拉油，日清才4 1J才夕·^一株式會社制])，製備本培養用的液體培養基。將該液體培養基填充到培養槽中，在118°C下進行90分鐘高壓蒸氣滅菌。自然冷卻開始後立即利用無菌空氣進行通氣，將培養槽內調成正壓。將該培養基冷卻後，接種上述全部的預培養物，在培養溫度25°C、通氣量0. ^vvm、內壓0. 075MPa、無動力攪拌(鼓泡)的培養條件下，進行6 7天培養，生產液體種菌。將如上生產的液體種菌無菌轉移到適當的容器(例如，聚丙烯制的圓形瓶等)中， 直到攝取至菌床培養基為止的這一期間，可以保持在控制為3 -1°C範圍的環境下以保存。接著，使用上述液體種菌，可以通過(例如)作為菌床栽培方法的瓶栽、袋栽、箱栽等來生產蘑菇子實體。作為一個例子，對利用瓶栽的本發明的使用液體種菌的蘑菇子實體的生產方法進行描述，該方法由菌床培養基的製備、裝瓶、滅菌、液體種菌的接種、菌床培養、(如果需要，搔菌)、發芽、(如果需要，插芽的分離、插芽的移植)、生長繁殖、收穫等各工序組成。例如，可以將通過本發明的方法所生產的液體種菌用作以下種菌如果為荷葉菇， 則用作進行日本特開平04-211308號公報所述的菌床栽培時的種菌；如果為香菇，則用作進行日本特開平04-075538號公報所述的菌床栽培時的種菌；如果為真姬菇，則用作進行日本特開平05-268942號公報所述的菌床栽培時的種菌；或者，如果為本佔地菇，則用作進行日本特開2000-106752號公報所述的菌床栽培時的種菌。另外，如果為進行插芽的分離及插芽的移植的菌床栽培的情況，則也可以將通過本發明的方法所生產的液體種菌用作進行日本特開2009-017872號公報所述的菌床栽培時的種菌。但是，與使用固體種菌時的菌床栽培用培養基或通常使用的菌床栽培用培養基相比，本發明的蘑菇子實體的生產方法中使用的菌床栽培用培養基優選使菌座提高，適當的是，使菌座位於比瓶口低2 IOmm的下方。另外，優選將菌座表面均勻地平面化。進而，瓶中央部的穴(也稱為孔或接種孔)不是特別需要的，可以使用在每個瓶的瓶淵附近(即，瓶中央部的周邊)開2 6處、優選4處口徑3 IOmm左右、優選5mm左右、深度100 200mm 左右、優選110 150mm左右的小穴(也稱為孔或接種孔)的菌床栽培用培養基。在此，本申請說明書中，所謂「菌座」是指栽培用培養基上部表面的菌接種部位。 例如，在瓶栽用培養基中，將瓶開口部的露出的培養基表面稱為菌座。本發明中，優選的是， 與使用固體種菌時的菌床栽培用培養基(也稱為菌床栽培用固體培養基、菌床栽培用培養基)相比，使菌座提高(即距離瓶口近)，例如，在瓶栽的情況(如圖1所示使用固體種菌的情況)下，推薦的是，將通常的瓶栽所使用的市售的850mL瓶或IlOOmL瓶的瓶口(瓶淵) 下方15mm處設為菌座，但本發明中，優選的是，與使用固體種菌時的菌床栽培用培養基的菌座相比，使菌座提高，優選將位於瓶口下方2 IOmm處、進一步優選瓶口下方5 9mm處設為菌座。將通過發明的方法生產的液體種菌接種在菌床栽培用培養基中時，對於每瓶 850mL的廣口培養瓶，無菌地移植(例如)約10 20mL即可。作為接種上述液體種菌的方法，不需要使用特殊的機械以噴霧狀地在菌座及接種孔上均勻地進行接種，僅直接將必需量的液體種菌無菌地添加在菌座上即可。添加液體種菌的菌座上的位置優選位於菌座的中央部附近。與用於大規模蘑菇子實體的商業生產的固體種菌相比，根據本發明，能夠在極短時間內生產用於蘑菇子實體的商業生產的液體種菌。例如，在生產上述固體種菌的情況下， 將預培養後的液體菌絲或固體菌絲接種在固體培養基中。然後，使菌絲在固體培養基中蔓延約30 60天。將得到的蔓延有菌絲的固體培養基作為固體種菌，用於蘑菇子實體的商業生產。與此相對，在通過本發明方法得到液體種菌的情況下，將預培養後的液體菌絲接種於本發明的液體培養基。然後，通過進行約3 7天、優選6 7天的培養，從而可以生產液體種菌，且可以用於蘑菇子實體的商業生產。另外，將通過本發明方法生產的液體種菌用於大規模的蘑菇子實體的商業生產， 由此可以避免由固體種菌的批次差造成的蘑菇子實體生產時的生產差異，並且可以穩定地生產優良的蘑菇子實體。以上列舉實例對瓶栽方法進行了說明，但是通過本發明的方法生產的液體種菌並不限定於在利用上述瓶栽的菌床栽培中的使用。[實施例]下面通過實施例對本發明進行更具體說明，但本發明並不僅限定於以下實施例的範圍。實施例1在200mL PGY液體培養基組成葡萄糖1. 49% (w/v)、蛋白腖0. 15% (w/v)、酵母提取物 0. 15% (w/v)、KH2PO4O. 0373% (w/v)、及 MgSO4 · 7H20 0. 0373% (w/v)，pH 6· 0中接種 Lyophyllum decastes K-3304 (FERM BP-4348)的菌絲體，在 25°C下進行 14 天振蕩培養(IOOrpm)，製備預培養物。接著，在另行製備的430L PGY液體培養基中，以相對於培養基為約0. 02% (ν/ν) 的比率添加作為植物油的色拉油(日清色拉油，日清才^ 'J才夕·^一株式會社制)，製備本培養用的液體培養基。培養槽使用的是沒有攪拌能力的非第一類壓力容器。將加入有本培養用液體培養基的培養槽在118°C下進行90分鐘高壓蒸汽殺菌，自然冷卻開始後立即進行利用無菌空氣的通氣，將培養槽內調成正壓。將該培養基冷卻後，接種上述全部的預培養物，在培養溫度25°C、通氣量0. 26vvm,內壓0. 075MPa、無動力攪拌(鼓泡)的培養條件下， 進行6 7天培養，製備液體種菌。同時，僅利用PGY液體培養基進行無動力攪拌(鼓泡)培養，作為比較對照。其他的培養條件與上述條件相同，比較菌體的收穫量。將其結果示於表1。[表 1]
條件乾燥菌體重量(g/L)有色拉油4. 1無色拉油3. 0表1表明，在使用本發明的添加有色拉油的培養基的、使用不伴有機械攪拌的氣泡所進行的培養中，與沒有添加時的情況相比，可以得到約多1. 36倍的菌體。實施例2為了確認通過本發明的方法生產的液體種菌的子實體形成能力，進行如下的子實
體生產。液體種菌通過與實施例1同樣的方法進行製備。作為比較對象，固體種菌如下進行製備。首先，在聚丙烯制的廣口培養瓶(850mL，信越農材株式會社制)中加入IOOg鋸屑 (杉材)、86g米糠、2g矽酸鋁鎂(富士化學工業株式會社制，商品名Neusilin FH1)、5g碳酸鈣(Nacalai Tesque株式會社制，一級試劑)、3g—水檸檬酸(Nacalai Tesque株式會社制，一級試劑)，並將水分含量設定為63 65重量％，充分混合，壓實成為溼潤狀態的物質。 在壓實物表面的中央開直徑Icm左右的接種孔部，蓋上蓋子後，在118°C下進行90分鐘高壓蒸汽殺菌，自然冷卻至20°C。對這樣得到的固體培養基接種約10 20mL的實施例1所述預培養物。然後，在暗處，在溫度25°C、溼度55%的條件下培養菌絲體約60天，使菌絲蔓延到固體培養基整體，製備固體種菌。
接著，在聚丙烯制的廣口培養瓶(llOOmL，山田產業株式會社制)中加入134g鋸屑(杉材)、130g米糠、2. 6g矽酸鋁鎂[富士化學工業株式會社制，商品名Neusilin FH1], 6. 5g碳酸鈣(Nacalai Tesque株式會社制，一級試劑)、3. 9g—水檸檬酸(Nacalai Tesque 株式會社制，一級試劑)，將水分含量設定為63% 65重量％，充分混合，將菌座設定在距瓶口約15mm的下方，壓實成為溼潤狀態的物質。在壓實物表面的瓶中央開直徑2cm左右的接種孔部，蓋上蓋子後，在118°C下進行90分鐘高壓蒸汽殺菌，將自然冷卻至20°C的培養基作為菌床栽培用培養基。在該菌床栽培用培養基上接種約20mL上述製備的液體種菌。作為比較對象，準備接種有約35g上述製備的固體種菌的培養基。各製作16瓶分別接種有液體種菌及固體種菌的菌床栽培用培養基。將它們在暗處，在溫度25°C、溼度55%的條件下下培養菌絲體約60天，使菌絲蔓延到菌床栽培用培養基整體。然後，取下蓋子，進行菌床面上部的搔菌，接著，加入自來水至瓶口後，立即排水，供於發芽工序。發芽工序在發芽室中在以下條件下進行照度50勒克司、溫度16°C、溼度控制在作為一 S τ 4 100(鷺宮製作所制)的示值的115% 120%範圍內、二氧化碳濃度控制在1000 1500ppm的範圍。另外，為了避免結露，將瓶倒置，繼續培養11天，形成子實體原基。然後，將瓶反轉 正置，過渡到前期生長工序。在前期生長工序中，在生長室中在以下條件下培養6天照度500勒克司、溫度16°C、溼度控制在作為t-一 S τ 4 100的示值的 115% 120%範圍內、二氧化碳濃度控制在1000 2000ppm的範圍。接著，過渡到後期生長工序。在後期生長工序中，在生長室中在以下條件下繼續培養7天照度500勒克司、溫度16°C、溼度控制在作為匕工一 7、100的示值的95 105%範圍內、二氧化碳濃度控制在1000 2000ppm的範圍。收穫這樣得到的成熟子實體後，比較子實體的平均收穫量(g/ 瓶)。將其結果示於表2。[表 2]
權利要求
1.一種蘑菇的液體種菌的生產方法，其為用於生產蘑菇子實體的液體種菌的生產方法，其特徵在於，在含有植物油的液體培養基中，通過使用氣泡攪拌培養基來對蘑菇的菌絲體進行液體深部培養。
2.如權利要求1所述的生產方法，其中，基本上僅使用氣泡來對培養基進行攪拌。
3.如權利要求1所述的生產方法，其中，所述植物油為選自色拉油、米糠油、菜籽油、紅花油、玉米油、橄欖油、芝麻油、大豆油及棉籽油中的1種或多種。
4.如權利要求1 3中任一項所述的生產方法，其中，所述培養基中的所述植物油濃度為0. 001 0. 1體積％。
5.一種蘑菇子實體的生產方法，其特徵在於，使用了通過權利要求1 4中任一項所述的生產方法而得到的蘑菇的液體種菌。
6.如權利要求5所述的蘑菇子實體的生產方法，其為瓶栽法。
7.如權利要求5或6所述的蘑菇子實體的生產方法，其特徵在於，使用菌座提高了的菌床栽培用培養基。
全文摘要
本發明提供一種蘑菇子實體的大規模商業生產中廉價且有效的液體種菌生產方法、以及使用該液體種菌的蘑菇子實體生產方法。本發明涉及一種蘑菇的液體種菌的生產方法，其為用於生產蘑菇子實體的蘑菇液體種菌的生產方法，其特徵在於，在含有植物油的液體培養基中，通過使用氣泡攪拌培養基來進行液體深部培養。另外，本發明還涉及一種蘑菇子實體的生產方法，其特徵在於，在瓶栽中，使用菌座進一步提高了的菌床栽培用培養基。根據本發明，可以大幅縮短種菌生產時間，另外，可以避免使用固體種菌的蘑菇子實體生產時的生產不均勻性的風險，並且可以穩定地生產優良的蘑菇子實體。
文檔編號A01G1/04GK102369838SQ20111023156
公開日2012年3月14日 申請日期2011年8月11日 優先權日2010年8月11日
發明者喜多昭彥, 大島健一, 日下部克彥, 橋元勇二 申請人:寶生物工程株式會社