一種天然活性水溶蛋白質和多肽及其製備方法
2023-07-20 10:24:56
專利名稱：一種天然活性水溶蛋白質和多肽及其製備方法
一種天然活性水溶蛋白質和多肽及其製備方法所屬領域本發明屬於生物製品新技術，涉及天然活性植物激素、飼料添加劑、食品添加劑、 保健品和醫療領域，尤其涉及一種天然活性水溶蛋白質和多肽及其製備方法。
背景技術：
1986年的諾貝爾生理學獎頒給了發現多肽生長因子(NGF與EGF)的麗塔·萊維-蒙塔爾奇尼(Rita Levi-Mont. alcini)和斯坦利 科恩(Stanley Co-hen)，表彰他們為基礎科學研究開闢了一個具有廣泛重要性的新領域。多肽是涉及生物體內各種細胞功能的生物活性物質。伴隨著分子生物學、生物化學技術的飛速發展，多肽的研究取得驚人的、 劃時代的進展，人們發現存在於生物的多肽已有數萬種，並且發現所有的細胞都能合成多肽，同時，幾乎所有生物的細胞都受多肽調節，涉及激素、神經、細胞生長、生長、生殖等各個領域。在動物細胞中，按化學本質不同，細胞外第一信使(化學信號)主要包括氣體信號分子、有機小分子以及多肽及蛋白質類，其中多肽及蛋白質類信號的種類很多，包括各種神經肽、激素(如胰島素)及生長因子(如表皮生長因子)等，說明細胞廣泛地利用多肽作為第一信使。在醫療和保健方面，活性多肽物質因來源不同，功能上各有差異。象胰島素樣生長因子活性多肽類物質能有效促進皮膚膠原蛋白生成，從而延緩和減少皮膚皺紋產生； 大豆多肽消化吸收性好，具有增強免疫、降低膽固醇、抗氧化、降血壓和調節胰島素等作用； 蜂毒中含蜂毒素I和II，屬於多肽類，在體外有抗血液凝固和防止血栓形成作用。倪莉等研究腐乳中大豆蛋白酶酶解產物主要為分子量小於10，000多肽和胺基酸，它們具有降壓作用；管華詩等「對海洋活性多肽進行研究，發現其具有很強抗腫瘤、抗病毒、調節免疫等功能；宋益民等對蠍毒活性多肽進行分離研究，證實它具有明顯改善腸繫膜微循環、靜脈血流速度及血管口徑，增加毛細血管開放數目作用；顧俊峰等按Kharma院士授權使用專利技術從印度引進專用苦瓜種子提取一種降糖多肽，經小鼠實驗證明，能使四氧嘧啶所導致高血糖小鼠空腹血糖降低。李巒峰等通過胰蛋白酶水解酪蛋白純化得到一種具有抗菌活性多肽 (Trpi)，研究表明該肽可抑制大腸桿菌和金黃色葡萄球菌等多種細菌生長。總體來講，在醫學方面活性多肽具有抗腫瘤、抗神經生理活性、抗炎、降壓、抗氧化及增強免疫力等功能。活性多肽還具有降低血壓、降脂、減肥、通便，防治心臟病、中風，清洗血管，淨化血液，防治血栓的功效；可以促進人體有益菌的生長；可促進人體對大豆所含各種營養的吸收及人體平常所食營養的吸收，並對消化系統未成熟的嬰兒，可促進其對各種營養的吸收， 促進嬰兒生長發育，改善老人因機能退化而引起的機能失調；可強身健體，抵禦各種疾病的發生，改善人的亞健康狀態。植物中系統素(Systemin)作為的第1個多肽激素是由Pearce等於1991年在番茄中發現的，植物多肽激素的發現是植物激素研究上的重大突破，為植物激素的進一步深入研究開闢了一條嶄新的道路。植物多肽信號分子的發現改變了人們對植物信號調控的傳統認識，開闢了植物科學研究的新領域。目前公認的植物多肽激素包括4種系統素(Systemin)、植物硫肽激素(Phytosulfokine-PSK)、SCR/SPII 和 CLV3，分別參與了植食性昆蟲防禦反應、細胞增殖、自交不親和的識別，以及莖分生組織幹細胞分裂與分化平衡的維持。多肽不僅可為植物提供有機態營養成分，而且對於植物的生理調節、細胞組織活化、激活植株分解除草劑和殺蟲劑殘留活性、降低植物發病指數、提高植物生命力、促進植物對養分的吸收等方面具有明顯的效果。尤其在提高肥料和農藥等的利用率、提高植物抗逆性、提高植物品質等方面具有顯著成效。多肽一定會在高效、低殘留、有機、綠色生態農業方面發揮越來越重要的作用。目前，我國多肽製備研究中還存在以下幾個問題1)水解產物存在苦味。2、水解用蛋白酶種類的選擇。幻蛋白酶水解機理研究及過程控制。4)酶法水解產物的精製工藝研究。5)多肽結構與功能之間的關係。
發明內容
為了解決現有多肽存在的問題，本發明的目的是提供了一種全新結構和概念的多肽的生產方法。既保護了有用的基團，又克服了一般多肽的異味和顏色。為了達到上述目的本發明的技術方案是一種天然活性水溶蛋白質和多肽及其製備方法；採用天然的富含蛋白質原料，通過研磨製漿，利用蛋白提取劑提取出粗蛋白，利用溶劑簡單脫脂，再用酶法精細脫脂，酶法精細脫纖維素，得到精製蛋白漿，然後利用封端劑保護有用蛋白端基、再用局部酸化劑把蛋白長鏈局部酸化，再用酸性蛋白酶初步酶水解，中性蛋白酶深度酶水解，適時檢測水溶性蛋白和多肽分子量、分子量分布和胺基酸含量等控制指標，當控制指標至所需值後，終止酶解反應，然後加入脫味劑脫異味、脫色劑脫色，經過濾器過濾分離，冷凍或噴霧乾燥即得到水溶性蛋白和多肽的成品。本發明所述的天然活性水溶蛋白質和多肽的原料包括富含蛋白質原料動物皮、魚皮、蠶蛹、沙蠶、貝類裙邊、蚯蚓、蝸牛、豆栢、菜籽餅的至少其中一種，或幾種的混合物。蛋白質提取劑1 %的氫氧化鈉溶液、1 %的氫氧化鉀溶液的至少其中一種。脫脂劑環己烷、六號溶劑油、乙醇、甲醇、丙酮的至少其中一種，或幾種的混合物。脫脂酶解脂假絲酵母脂肪酶。脫纖維素酶纖維素酶。保護性封端改性劑甲醇、乙醇、碘乙酸、氯乙酸、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉的至少其中一種。局部酸化劑0. 03N的鹽酸、0. 03N的碳酸氫銨的至少其中一種。酸性蛋白酶胃蛋白酶、糜蛋白酶的至少其中一種、或兩種的混合物。中性蛋白酶木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、胰蛋白酶的至少其中一種、或幾種的混合物。脫色劑活性碳、活性白土、自製色澤吸附劑的至少其中一種、或幾種的混合物。脫味劑自製脫味劑A、自製脫味劑B的至少其中一種或兩種的混合物。去離子水。本發明所述天然活性水溶性蛋白質和多肽的原料規格如下動物皮精選豬、牛、羊、驢皮幹製品
魚皮精選各種魚皮幹製品
蠶蛹精選家蠶蛹幹製品
沙蠶精選沙蠶幹製品
貝類裙邊精選各種貝類裙邊幹製品
蚯蚓精選蚯蚓幹製品
蝸牛精選蝸牛幹製品
豆栢固體粉末
菜籽餅固體塊狀物
1%的氫氧化鈉溶液隨時配製的1%的氫氧化鈉新鮮溶液
1%的氫氧化鉀溶液隨時配製的1%的氫氧化鈉新鮮溶液
環S烷含量％%液體
六號溶劑油含量99%液體
乙醇含量卯％液體
甲醇含量95%液體
丙酮含量98%液體
解脂假絲酵母脂肪酶生物製劑
纖維素酶生物製劑
碘乙酸固體粉末
氣乙酸固體粉末
亞硫酸氫鈉固體粉末
焦亞硫酸鈉固體粉末
0. 03N的鹽酸隨時配製的0. 03N的鹽酸新鮮溶液
0. 03N的碳酸氫銨隨時配製的0. 03N的碳酸氫銨新鮮溶液
胃蛋白酶生物製劑
糜蛋白酶生物製劑
木瓜蛋白酶生物製劑
枯草桿菌蛋白酶生物製劑
胰蛋白酶生物製劑
活性碳固體顆粒
活性白土固體顆粒
自製色澤吸附劑固體顆粒
自製脫味劑A固體粉末
_制脫味劑B固體粉末
去離子水經過去離子處理的自來水本發明所述的天然活性水溶性蛋白質和多肽的各組分的質量配比分數如下天然的富含蛋白質原料100份
蛋白提取劑200 800份
脫脂劑50 250份
脫脂酶0.01 0.2份
脫纖維素酶0. 05 0. 5份
保護性封端改性劑0. 02 0.1份
局部酸化劑3 30份
酸性蛋白酶0.02 0.4份
中性蛋白酶0.01 0.3份
脫色劑2 20份
脫味劑0.5 10份
去離亍水200 1200份
本發明所述的天然活性水溶性蛋白質和多肽的組分的質量最佳配比分數如下天然的富含蛋白質原料100份
蛋白提取劑250 600份
脫脂劑50 150份
脫脂酶0. 02 0.1份
脫纖維素酶0. 2 0. 5份
保護性封端改性劑0. 02 0. 05 份局部酸化劑5 15份酸性蛋白酶0. 02 0.1 份中性蛋白酶0. 02 0.1 份脫色劑5 8份脫味劑1 4份去離子水300 600份本發明所述的天然活性水溶性蛋白質和多肽的工藝流程如下天然的富含蛋白質原料——研磨製漿——提取粗蛋白——簡單脫脂——酶法脫脂——酶法脫纖維素——封端保護、局部酸化——初步酶水解——深度酶水解——脫苦、 脫色——過濾分離——噴霧乾燥或冷凍——成品。本發明所述的天然活性水溶性蛋白質和多肽的具體製造操作方法如下(1)取質量配比為100份的天然的富含蛋白質原料，一邊加入質量配比200 800 份蛋白質提取劑，一邊研磨製漿，然後在攪拌的條件下加入反應釜內，加熱至40 75°C，反應Ih 他；降溫，過濾，取濾液用酸或鹼調節pH值至3 4. 5，沉澱，傾倒掉上清液，過濾沉澱物，烘乾，粉碎製得粗蛋白粉；(2)在攪拌的條件下，把質量配比為50 250份的脫脂劑和(1)製得的粗蛋白粉加入配有回流裝置的反應釜內，加熱至60 85°C，反應4h 12h ；降溫，過濾，烘乾，粉碎製得簡單脫脂粗蛋白粉；(3)在攪拌的條件下，加入質量配比為200 1200份的去離子水，和(2)製得的簡單脫脂粗蛋白粉，用酸或鹼調pH值至6. 0 7. 5，加熱至35 45°C，再加入質量配比為 0. 01 0. 2份的脫脂酶，水解30min 120min，反應結束後，終止酶解反應，得到酶法脫脂粗蛋白漿。(4)在攪拌的條件下，在(3)得到的酶法精細脫脂粗蛋白漿中加入酸或鹼調PH值至4. 0 5. 5，加入質量配比為0. 05 0. 5份的纖維素酶，加熱至46 55°C，反應Ih 6h，反應結束後，終止酶解反應，得到酶法脫脂、脫纖維素的精製蛋白漿；(5)在攪拌的條件下，在⑷得到的精製蛋白漿中加入質量配比為0. 02 0. 1份的保護性封端改性劑，質量配比為3 30份的局部酸化劑，加熱至70 105°C，反應Ih 4h，得到保護性封端、局部酸化的精製蛋白漿；(6)在攪拌的條件下，將( 得到的保護性封端、局部酸化的精製蛋白漿降溫至 35 45°C，加入酸或鹼，調節pH至1. 5 3. 5，加入質量配比為0. 02 0. 4份酸性蛋白酶， 反應Ih 4h，製得初步酶解水溶性蛋白和多肽粗液；(7)在攪拌的條件下，在(6)製得的初步酶解水溶性蛋白和多肽粗液中加入酸或鹼，調節pH至6. 5 7. 5，加熱至46 65°C加入質量配比為0. 01 0. 3中性蛋白酶，繼續反應Ih 12h，每0.證取樣，檢測水溶性蛋白和多肽分子量、分子量分布和胺基酸含量等控制指標，當控制指標至所需值後，終止酶解反應，加入質量配比為2 20份的脫色劑、質量配比為0.5 10份的脫味劑，攪拌0.證 l.Oh然後降溫至室溫，製得天然活性水溶性蛋白質和多肽粗液；(8)取(7)製得的酶解水溶性蛋白和多肽粗液，過濾，分裝，冷凍保存，即為含水天然活性水溶性蛋白質和多肽產品；(9)取(7)製得的酶解水溶性蛋白和多肽粗液，過濾，把濾液閃蒸，分裝，保存，製得粉狀天然活性水溶性蛋白質和多肽產品。本發明的有益效果提高了活性水溶蛋白質和多肽的內在質量，而且工藝簡單、容易掌握，實用性強。 活性多肽具有降低血壓、降脂、減肥、通便，防治心臟病、中風，清洗血管，淨化血液，防治血栓的功效；可以促進人體有益菌的生長；可促進人體對大豆所含各種營養的吸收及人體平常所食營養的吸收，並對消化系統未成熟的嬰兒，可促進其對各種營養的吸收，促進嬰兒生長發育，改善老人因機能退化而引起的機能失調；可強身健體，抵禦各種疾病的發生，改善人的亞健康狀態。農業方面，可以提高肥料和農藥等的利用率、提高植物抗逆性、提高植物品質等方面具有顯著成效，一定會在高效、低殘留、有機、綠色生態農業方面發揮越來越重要的作用。
具體實施例方式下面通過實施例對本發明進行具體描述。有必要指出的是實施例對本發明進行只是具體進一步說明，不對本發明的保護範圍有限制。實施例1本實施例的質量配比分數如下天然的富含蛋白質原料精選家蠶蛹幹製品100份；蛋白提取劑1 %的氫氧化鈉溶液800份；脫脂劑環己烷250份去離子水1000份脫脂酶解脂假絲酵母脂肪酶0. 01份脫纖維素酶纖維素酶0. 05份保護性封端改性劑碘乙酸0. 1份局部酸化劑0. 03N的鹽酸30份酸性蛋白酶胃蛋白酶0. 4份中性蛋白酶木瓜蛋白酶0.3份脫色劑活性碳20份脫味劑自製脫味劑A5份本實施例的反應步驟和具體操作如下(1)取質量配比為100份的精選家蠶蛹幹製品，一邊加入質量配比800份的的氫氧化鈉溶液，一邊研磨製漿，然後在攪拌的條件下加入反應釜內，加熱至^°C，反應他； 降溫，過濾，取濾液用酸或鹼調節PH值至3，沉澱，傾倒掉上清液，過濾沉澱物，烘乾，粉碎製得粗蛋白粉；(2)在攪拌的條件下，把質量配比為250份的環己烷和(1)製得的粗蛋白粉加入配有回流裝置的反應釜內，加熱至85°C，反應12h ；降溫，過濾，烘乾，粉碎製得簡單脫脂粗蛋白粉；(3)在攪拌的條件下，加入質量配比為1000份的去離子水，和(2)製得的簡單脫脂粗蛋白粉，用酸或鹼調PH值至7. 5，加熱至45°C，再加入質量配比為0. 01份的解脂假絲酵母脂肪酶，水解120min，反應結束後，終止酶解反應，得到酶法脫脂粗蛋白漿。(4)在攪拌的條件下，在(3)得到的酶法精細脫脂粗蛋白漿中加入酸或鹼調pH值至4. 0，加入質量配比為0. 05份的纖維素酶，加熱至46°C，反應6h，反應結束後，終止酶解反應，得到酶法脫脂、脫纖維素的精製蛋白漿；(5)在攪拌的條件下，在(4)得到的精製蛋白漿中加入質量配比為0. 1份的碘乙酸，質量配比為30份的0. 03N的鹽酸，加熱至105°C，反應lh，得到保護性封端、局部酸化的精製蛋白漿；(6)在攪拌的條件下，將( 得到的保護性封端、局部酸化的精製蛋白漿降溫至 35°C，加入酸或鹼，調節pH至1.5，加入質量配比為0.4份的酸性蛋白酶，反應4h，製得初步酶解水溶性蛋白和多肽粗液；(7)在攪拌的條件下，在(6)製得的初步酶解水溶性蛋白和多肽粗液中加入酸或鹼，調節PH至7.0，加熱至46°C加入質量配比為0.3份的木瓜蛋白酶，繼續反應12h，每0. 5h 取樣，檢測水溶性蛋白和多肽分子量、分子量分布和胺基酸含量等控制指標，當控制指標至所需值後，終止酶解反應，加入質量配比為20份的活性碳、質量配比為5份的自製脫味劑A， 攪拌1. Oh然後降溫至室溫，製得天然活性水溶性蛋白質和多肽粗液；(8)取(7)製得的酶解水溶性蛋白和多肽粗液，過濾，分裝，冷凍保存，即為冷凍天然活性水溶性蛋白質和多肽產品。實施例2本實施例的質量配比分數如下天然的富含蛋白質原料精選家蚯蚓幹製品100份；蛋白提取劑的氫氧化鉀溶液600份；脫脂劑六號溶劑油200份去離子水800份脫脂酶解脂假絲酵母脂肪酶0. 04份脫纖維素酶纖維素酶0. 02份保護性封端改性劑焦亞硫酸鈉0. 1份局部酸化劑0. 03N的鹽酸20份酸性蛋白酶胃蛋白酶0. 2份中性蛋白酶胰蛋白酶0. 1份脫色劑自製色澤吸附劑10份脫味劑自製脫味劑B 2份本實施例的反應步驟和具體操作如下(1)取質量配比為100份的精選家蚯蚓幹製品，一邊加入質量配比600份的的氫氧化鉀溶液，一邊研磨製漿，然後在攪拌的條件下加入反應釜內，加熱至65°C，反應4h; 降溫，
過濾，取濾液用酸或鹼調節pH值至3，沉澱，傾倒掉上清液，過濾沉澱物，烘乾，粉碎製得粗蛋白粉；(2)在攪拌的條件下，把質量配比為200份的六號溶劑油和(1)製得的粗蛋白粉加入配有回流裝置的反應釜內，加熱至75V，反應12h ；降溫，過濾，烘乾，粉碎製得簡單脫脂粗蛋白粉；(3)在攪拌的條件下，加入質量配比為800份的去離子水，和(2)製得的簡單脫脂粗蛋白粉，用酸或鹼調PH值至7. 0，加熱至40°C，再加入質量配比為0. 04份的解脂假絲酵母脂肪酶，水解lOOmin，反應結束後，終止酶解反應，得到酶法脫脂粗蛋白漿。(4)在攪拌的條件下，在(3)得到的酶法精細脫脂粗蛋白漿中加入酸或鹼調PH值至4. 5，加入質量配比為0. 02份的纖維素酶，加熱至46°C，反應6h，反應結束後，終止酶解反應，得到酶法脫脂、脫纖維素的精製蛋白漿；(5)在攪拌的條件下，在(4)得到的精製蛋白漿中加入質量配比為0. 1份的焦亞硫酸鈉，質量配比為20份的0. 03N的鹽酸，加熱至85°C，反應lh，得到保護性封端、局部酸化的精製蛋白漿；(6)在攪拌的條件下，將( 得到的保護性封端、局部酸化的精製蛋白漿降溫至 35°C，加入酸或鹼，調節pH至3.0，加入質量配比為0.2份的胃蛋白酶，反應4h，製得初步酶解水溶性蛋白和多肽粗液；(7)在攪拌的條件下，在(6)製得的初步酶解水溶性蛋白和多肽粗液中加入酸或鹼，調節PH至7. 0，加熱至46°C加入質量配比為0. 1份的胰蛋白酶，繼續反應12h，每0. 5h 取樣，檢測水溶性蛋白和多肽分子量、分子量分布和胺基酸含量等控制指標，當控制指標至所需值後，終止酶解反應，加入質量配比為10份的自製色澤吸附劑、質量配比為2份的自製脫味劑B，攪拌0. 5h然後降溫至室溫，製得天然活性水溶性蛋白質和多肽粗液；(8)取(7)製得的酶解水溶性蛋白和多肽粗液，過濾，把濾液閃蒸，分裝，保存，製得粉狀天然活性水溶性蛋白質和多肽產品。本發明的公開對我國相關的醫藥品、保健品內在質量的提高起到積極作用，使相關產品可以參與國際市場的競爭，在農業方面，可以提高肥料和農藥等的利用率、提高植物抗逆性、提高植物品質，它的推廣應用一定會在高效、低殘留、有機、綠色生態農業方面發揮越來越重要的作用。
權利要求
1.一種天然活性水溶蛋白質和多肽及其製備方法；採用天然的富含蛋白質原料，通過研磨製漿，利用蛋白提取劑提取出粗蛋白，利用溶劑簡單脫脂，再用酶法精細脫脂，酶法精細脫纖維素，得到精製蛋白漿，然後利用封端劑保護有用蛋白端基、再用局部酸化劑把蛋白長鏈局部酸化，再用酸性蛋白酶初步酶水解，中性蛋白酶深度酶水解，適時檢測水溶性蛋白和多肽分子量、分子量分布和胺基酸含量等控制指標，當控制指標至所需值後，終止酶解反應，然後加入脫味劑脫異味、脫色劑脫色，經過濾器過濾分離，冷凍或噴霧乾燥得到水溶性蛋白和多肽的成品。
2.如權利要求1所述的一種天然活性水溶蛋白質和多肽，其原料如下天然的富含蛋白質原料；蛋白提取劑；脫脂劑；保護性封端改性劑；局部酸化劑；去離子水；脫脂酶；脫纖維素酶；酸性蛋白酶；中性蛋白酶；脫色劑；脫味劑。
3.如權利要求1或2所述的一種天然活性水溶蛋白質和多肽，其原料配比(按質量計) 如下天然的富含蛋白質原料100份蛋白提取劑200 800份脫脂劑50 250份去離子水200 1200 份脫脂酶0.01 0.2 份脫纖維素酶0.05 0.5 份保護性封端改性劑0.02 0.1 份局部酸化劑3 30份酸性蛋白酶0.02 0.4 份中性蛋白酶0.01 0.3 份脫色劑2 20份脫味劑0.5 10份
4.如權利要求1所述的一種天然活性水溶蛋白質和多肽，原料的較佳配比(按質量計)如下天然的富含蛋白質原料100份蛋白提取劑250 600份脫脂劑50 150份±離亍水300 600份脫脂酶0.02 0.1份脫纖維素酶0.2 0.5份保護性封端改性劑0.02 0.05 份局部酸化劑5 15份酸性蛋白酶0.02 0.1 份中性蛋白酶0.02 0.1 份脫色劑5 8份脫味劑1 4份
5.如權利要求1所述的一種天然活性水溶蛋白質和多肽的製備方法，其工藝流程如下天然的富含蛋白質原料——研磨製漿——提取粗蛋白——簡單脫脂——酶法脫脂—— 酶法脫纖維素——封端保護、局部酸化——初步酶水解——深度酶水解——脫苦、脫色——過濾分離——噴霧乾燥或冷凍——成品。
6.一種天然活性水溶蛋白質和多肽的製造方法如下(1)取質量配比為100份的天然的富含蛋白質原料，一邊加入質量配比200 800份蛋白提取劑，一邊研磨製漿，然後在攪拌的條件下加入反應釜內，加熱至40 75°C，反應Ih 6h ；降溫，過濾，取濾液用酸或鹼調節pH值至3 4. 5，沉澱，傾倒掉上清液，過濾沉澱物，烘乾，粉碎製得粗蛋白粉；(2)在攪拌的條件下，把質量配比為50 250份的脫脂劑和(1)製得的粗蛋白粉加入配有回流裝置的反應釜內，加熱至60 85°C，反應4h 12h ；降溫，過濾，烘乾，粉碎製得簡單脫脂粗蛋白粉；(3)在攪拌的條件下，加入質量配比為200 1200份的去離子水，和(2)製得的簡單脫脂粗蛋白粉，用酸或鹼調PH值至6. 0 7. 5，加熱至35 45°C，再加入質量配比為0. 01 0. 2份的脫脂酶，水解30min 120min，反應結束後，終止酶解反應，得到酶法脫脂粗蛋白漿；(4)在攪拌的條件下，在(3)得到的酶法精細脫脂粗蛋白漿中加入酸或鹼調pH值至 4. 0 5. 5，加入質量配比為0. 05 0. 5份的纖維素酶，加熱至46 55°C，反應Ih 6h， 反應結束後，終止酶解反應，得到酶法脫脂、脫纖維素的精製蛋白漿；(5)在攪拌的條件下，在(4)得到的精製蛋白漿中加入質量配比為0.02 0. 1份的保護性封端改性劑，質量配比為3 30份的局部酸化劑，加熱至70 105°C，反應Ih 4h， 得到保護性封端、局部酸化的精製蛋白漿；(6)在攪拌的條件下，將( 得到的保護性封端、局部酸化的精製蛋白漿降溫至35 450C，加入酸或鹼，調節pH至1. 5 3. 5，加入質量配比為0. 02 0. 4份酸性蛋白酶，反應 Ih 4h，製得初步酶解水溶性蛋白和多肽粗液；(7)在攪拌的條件下，在(6)製得的初步酶解水溶性蛋白和多肽粗液中加入酸或鹼，調節pH至6. 5 7. 5，加熱至46 65°C加入質量配比為0. 01 0. 3中性蛋白酶，繼續反應 Ih 12h，每0.證取樣，檢測水溶性蛋白和多肽分子量、分子量分布和胺基酸含量等控制指標，當控制指標至所需值後，終止酶解反應，加入質量配比為2 20份的脫色劑、質量配比為0.5 10份的脫味劑，攪拌0.證 l.Oh然後降溫至室溫，製得天然活性水溶性蛋白質和多肽粗液；(8)取(7)製得的酶解水溶性蛋白和多肽粗液，過濾，分裝，冷凍保存，即為冷凍天然活性水溶性蛋白質和多肽產品；(9)取(7)製得的酶解水溶性蛋白和多肽粗液，過濾，把濾液閃蒸，分裝，保存，製得粉狀天然活性水溶性蛋白質和多肽產品。
全文摘要
本發明是一種天然活性水溶蛋白質和多肽及其製備方法。採用精選的天然的富含蛋白質原料，通過研磨製漿，利用蛋白提取劑提取出粗蛋白，利用溶劑簡單脫脂，再用酶法精細脫脂，酶法精細脫纖維素，得到精製蛋白漿，然後利用封端劑保護有用蛋白端基、再用局部酸化劑把蛋白長鏈局部酸化，再用酸性蛋白酶初步酶水解，中性蛋白酶深度酶水解，適時檢測水溶性蛋白和多肽分子量、分子量分布和胺基酸含量等控制指標，當控制指標至所需值後，終止酶解反應，然後加入脫味劑脫異味、脫色劑脫色，經過濾器過濾分離，冷凍或噴霧乾燥即得到天然活性水溶蛋白和多肽的成品。
文檔編號C07K1/14GK102286584SQ20111017736
公開日2011年12月21日 申請日期2011年6月29日 優先權日2011年6月29日
發明者何向東, 劉昕, 劉長福 申請人:劉長福