用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠的製作方法
2023-07-08 12:30:16 2
專利名稱：用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠的製作方法
所屬領域本發明屬於一種新型的防粘連劑，特別是用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠，在防止外科手術後組織粘連領域具有非常廣泛的應用。
2.透明質酸的防粘連作用透明質酸和交聯的透明質酸在預防粘方面有很明顯的作用，其基本原理是基於透明質酸及和交聯的透明質酸分子良好的生物相容性、物理(流變學)特性和獨特的生物作用。但是，天然的透明質酸由於在植入部位存留時間較短，其預防粘連作用不能達到理想的效果。20世紀80年代中期，Balazs等研製出了交聯的透明質酸，並對它的生物特性和臨床應用進行了探索(Balazs EA，Leshchiner EA.Hyluronan，its cross-linked derivative——hylan andtheir medical applications.InInagaki H，Phillips GO，eds.In cellulosicsutilizationresearch and rewards in cellulossics.New YorkElsevier Appl Science，1989.233～241)，發現交聯的透明質酸具有良好的生物相容性，且在組織那的存留時間較長。自此，交聯的透明質酸作為預防和減少術後粘連的有效製劑，其應用引起廣泛的重視。
3.膠原抑制劑作用曲尼斯特(tranilast)，其化學名為N-(3，4-二甲氧基肉桂醯)鄰氨基苯甲酸，化學結構式如下 曲尼斯特可以抑制膠原合成酶組胺和前列腺素的釋放，抑制膠原再生(M.Furukawa，S.Taniguchi，T.Kono and M.Ishii.inhibition of collagen biosynthesis of fibroblastsfrom hypertrophic scar tissue and normal tissue by tranilast of pemirolastpotassium.Journal of Dermatological Science.1995(10))。而膠原是粘連的主要成分之一，也是組成瘢痕組織的主要成分，通過抑制膠原再生，可以抑制粘連的產生。(HaruyoshiYamada，Shingo Tajima，Takeji Nishikawa.Tranilast inhibits collagen synthesis innormal，scleroderma and keloid fibroblasts at a late passage culture but not at anearly passae culture.Journal of Dermatological Science.1995，945-47)臨床藥代動力學研究表明，口服曲尼斯特膠囊，給藥後可被迅速吸收，約2～3小時後達最高血藥濃度，血漿消除半衰期為8小時左右。藥物主要從尿中排除，其代謝產物主要是曲尼斯特的4位脫甲基與硫酸及葡萄糖醛酸的結合物。
4.透明質酸防粘連試劑的開發情況透明質酸預防粘連形成的報導最早於30年前，研究表明透明質酸在體內保留較長的時間，是獲得足夠而持久的粘連預防作用所必需的。據資料報導，透明質酸能有效減少粘連形成，特別是減少肌腱粘連的形成。1986年，大量的動物實驗發現，交聯的不溶性透明質酸凝膠可顯著地減少肌腱粘連形成。在這個實驗中，交聯的透明質酸凝膠在受傷部位有較長地存留時間，不會引起炎症反應，也不會抑制傷口癒合(Weiss C，Levy H，Denlinger IL，et al.Therole of Na-hylan in reducing postsurgical tendon adhesion.Part 1.Bull Hosp Jt DisOrthop Inst.1987，469～15 Weiss C，Suros J，Michalow A，et al.The role of Na-hylanin reducing postsurgical tendon adhesion.Part 2.Bull Hosp Jt Dis OrthopInst.1987，4731～39)。
最近，Biomatrix公司開發了利用矯形外科地透明質酸防粘連製劑。在預防腹腔、心血管和盆腔手術後粘連中，屏障型物質是最有效的，可以機械隔離受傷部位，防止組織表面之間形成血纖蛋白網狀結構。最早以透明質酸為主要成分上市的隔離劑是Genzyme公司的Seprafilm，該製劑是以細菌發酵法製備的透明質酸和羧甲基纖維素鈉(CMC)結合在一起的一種透明質酸-CMC膜，容易水合併溶解於水溶性介質中。
很多研究機構已經認識到透明質酸溶液和膜是一種預防或減少粘連的有效方法，並積極開放透明質酸基的防粘連製劑。Lifecore biomedical公司的產品Lubricoat就是一種鐵交聯的透明質酸製劑，對預防手術後粘連有一定的作用。
為實現上述目的，本發明提出一種用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠，製備方法在於(1)將透明質酸加入去離子水，配置成質量百分比為1％的透明質酸溶液，充分攪拌至溶解；(2)將FeCl3加入1M HCl，配置成FeCl3溶液；(3)將1M HCl逐滴加入透明質酸溶液，同時攪拌，使二者充分混和，直至其pH值達到4.75；(4)將FeCl3溶液逐滴加入上述溶液，充分攪拌；(5)在上述溶液中逐滴加入1M NaOH，直至溶液成凝膠，pH值為7；(6)將上述凝膠凍幹，壓成粉末；(7)將上述粉末放入消毒櫃用臭氧消毒2次；(8)將上述粉末和曲尼斯特藥物粉末以一定的比例(1％∶99％)-(30％∶70％)混和，溶入0.1M無菌PBS，充分攪拌至形成均勻的凝膠體系。
步驟(8)中所述的曲尼斯特藥物粉末也可以在步驟(1)～(7)的任一步驟間加入。
步驟(7)中所述的消毒方法也可以採用包括紫外照射、Co50照射等其他消毒方法。
該體系可用於包括骨科、婦科、腹腔等所有外科手術所造成的損傷所引起的粘連的預防。
本發明所用的鐵交聯的透明質酸在預防粘方面有很明顯的作用，其基本原理是基於其分子良好的生物相容性、物理(流變學)特性和獨特的生物作用。
許多研究表明，由於透明質酸分子量較小，在體內局部存留時間短，只有在術後早期對預防粘連有一定的效果，晚期作用不明顯。我們根據已有專利技術選擇引入鐵離子，使其與透明質酸交聯，增加透明質酸的分子量，延長材料在體內存留時間。交聯後的透明質酸衍生物由於具有更密集的網狀結構和較長的存留時間，在組織表面形成物理屏障將組織隔離，抑制炎症細胞的激活和聚集，減少成纖維細胞、血纖蛋白原的聚集等方面均比透明質酸更強，預計會有更好的防粘連效果。而鐵離子是對人體必須的元素，不用擔心在降解後產物會對人體造成傷害。
在交聯的透明質酸中加入膠原抑制劑，增強交聯的透明質酸預防粘連形成的能力。研究指出，曲尼斯特可以抑制膠原合成酶、組胺和前列腺素的釋放，抑制膠原再生。而膠原是粘連的主要成分之一，也是組成瘢痕組織的主要成分，通過抑制膠原再生，可以抑制粘連的產生。
由於直接用藥物預防粘連存在全身給藥缺乏有效的藥物載體不能達到粘連部位、腹膜的快速吸收限制了藥物的半衰期等原因使得其預防效果不理想。而交聯的透明質酸是良好的給藥體系，有控釋作用和定向給藥的作用。在手術後直接將該體系塗敷損傷部位，從而可以使藥物準確到達粘連部位，且腹膜吸收的速度受到控制，藥物預防效果得以提升，從而更好的預防術後粘連。
由於本發明的生物相容性好，在體內存留時間較長。且鐵交聯的透明質酸既是良好的隔離層，又是良好的給藥體系，配合膠原抑止劑，能夠從根本上解決手術後防粘連的問題。
本發明的關鍵內容在於利用透明質酸做給藥體系，在透明質酸製劑中加入膠原抑制劑來進一步抑制粘連的形成。利用膠原抑制劑的藥效增強透明質酸製劑的防粘連效果。
(6)將上述凝膠凍幹，壓成粉末；(7)將上述粉末放入消毒櫃用臭氧消毒2次；(8)將上述粉末和曲尼斯特藥物粉末以1∶20(重量比)的比例混和，溶入0.1M無菌PBS，充分攪拌至形成均勻的凝膠體系。
實施例二用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠，製備方法在於(1)將透明質酸加入去離子水，配置成質量百分比為1％的透明質酸溶液，充分攪拌至溶解；(2)將FeCl3加入1M HCl，配置成質量體積濃度為1.5％的FeCl3溶液；(3)將1M HCl逐滴加入透明質酸溶液，同時攪拌，使二者充分混和，直至其pH值達到4.75；(4)將與上述溶液體積比為3∶10的FeCl3溶液逐滴加入上述溶液，充分攪拌10~20min；(5)在上述溶液中逐滴加入1M NaOH，直至溶液成凝膠，pH值為7；(6)將上述凝膠凍幹，壓成粉末；(7)將上述粉末紫外照射；(8)將上述粉末和曲尼斯特藥物粉末以1∶2的比例混和，溶入0.1M無菌PBS，充分攪拌至形成均勻的凝膠體系。
實施例三用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠，製備方法在於(1)將透明質酸加入去離子水，配置成質量百分比為1％的透明質酸溶液，充分攪拌至溶解；(2)將FeCl3加入1M HCl，配置成質量體積濃度為1.5％的FeCl3溶液；(3)將1M HCl逐滴加入透明質酸溶液，同時攪拌，使二者充分混和，直至其pH值達到4.75；(4)將與上述溶液體積比為3∶10的FeCl3溶液逐滴加入上述溶液，充分攪拌10~20min；(5)在上述溶液中逐滴加入1M NaOH，直至溶液成凝膠，pH值為7；
(6)將上述凝膠凍幹，壓成粉末；(7)將上述粉末放入Co60照射消毒；(8)將上述粉末和曲尼斯特藥物粉末以5∶1(重量比)的比例混和，溶入0.1M無菌PBS，充分攪拌至形成均勻的凝膠體系。
權利要求
1.用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠，製備方法在於(1)將透明質酸加入去離子水，配置成質量百分比為1％的透明質酸溶液，充分攪拌至溶解；(2)將FeCl3加入1M HCl，配置成FeCl3溶液；(3)將1M HCl逐滴加入透明質酸溶液，同時攪拌，使二者充分混和，直至其pH值達到4.75；(4)將FeCl3溶液逐滴加入上述溶液，充分攪拌；(5)在上述溶液中逐滴加入1M NaOH，直至溶液成凝膠，pH值為7；(6)將上述凝膠凍幹，壓成粉末；(7)將上述粉末放入消毒櫃用臭氧消毒2次；(8)將上述粉末和曲尼斯特藥物粉末以一定的比例(1％∶99％)-(30％∶70％)混和，溶入0.1M無菌PBS，充分攪拌至形成均勻的凝膠體系。
2.按照權利要求1所述的用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠，製備方法在於(8)中所述的曲尼斯特藥物粉末也可以在步驟(1)～(7)的任一步驟間加入。
3.按照權利要求1所述的用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠，製備方法在於(7)中所述的消毒方法也可以採用包括紫外照射、Co60照射等其他消毒方法。
4.用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠，用途在於該體系可用於包括骨科、婦科、腹腔等所有外科手術所造成的損傷所引起的粘連的預防。
全文摘要
用於手術後防粘連的帶藥加鐵離子的透明質酸凝膠，屬於一種新型的防粘連劑，在防止外科手術後組織粘連領域具有非常廣泛的應用。其特點是在酸性條件下混和透明質酸和氯化鐵，使鐵離子和透明質酸充分交聯，通過形成鐵交聯的透明質酸衍生物使透明質酸分子量增加，延長其降解周期。再加入抑制膠原合成有機高分子，進一步增強材料防粘連效果。本發明所製備的防粘連劑生物相容性好，在體內存留時間長，可有效預防外科手術後粘連，在體內可自行降解，無需手術取出，降解後產物對人體無害。
文檔編號A61K31/726GK1473572SQ0313384
公開日2004年2月11日 申請日期2003年7月1日 優先權日2003年7月1日
發明者崔福齋, 田維明, 張存理, 俞興, 董保彥 申請人:大連垠藝生物材料研製開發有限公司