食品中5種新出現致病菌的檢測試劑盒及檢測方法
2023-08-02 22:16:11
>2、食品中5種新出現致病菌的檢測方法,其特徵在於使用權利要求1所述的試劑盒,包括如下步驟①PCR反應取lpl待測樣品DNA溶液,根據檢測目標菌加入相應的檢測溶液10|il和14pl滅菌超純水,總體積25^1;將以上各組分加入至0.2mLPCR反應管中,混勻,5000r/min離心10s,然後按下列參數進行PCR循環預變性94°C,3min;進入循環94。C變性60s,60。C退火60s,72。C延伸60s,35次循環;終止延伸72°C,7min;②將PCR擴增產物進行DHPLC分析色譜柱PS-DVB&CI8DNASep色譜柱,4.6mmx50mm,粒度3|am;tableseeoriginaldocumentpage3;其中,緩衝溶液A是濃度O.lmM的TEAA水溶液;緩衝溶液B是濃度為0.1MTEAA水溶液與乙腈按體積比3:1的混合溶液;流速0.9mL/min;檢測器螢光檢測器,光源150WXenon燈;激發譜帶寬15nm;發射譜帶寬15.3nm;檢測靈敏度在波長350nm積分2s;上樣量PCR產物5pL。全文摘要一種用於食品中5種新出現致病菌的檢測試劑盒及檢測方法,該試劑盒包括5種檢測溶液,其中均含有10mmTris·Cl、50mmKCl、25mmMgCl2、dNTP各2.5mm及TaqDNA聚合酶5U/μl;此外,檢測溶液A、B、C、D或E中還分別含有香港海鷗型菌、粘質沙雷氏菌、氣味沙雷氏菌、類志賀鄰單胞菌或梅氏弧菌特異性引物對各10μm。使用本發明的檢測試劑盒及檢測方法,可以高靈敏度地檢測食品中的香港海鷗型菌、粘質沙雷氏菌、氣味沙雷氏菌、類志賀鄰單胞菌及梅氏弧菌,並且檢側耗時短,操作簡捷,可以節省大量的勞力和財力,適合快速檢測的要求。文檔編號C12Q1/68GK101659992SQ200910010799公開日2010年3月3日申請日期2009年3月20日優先權日2009年3月20日發明者曹際娟申請人:曹際娟