注射用大黃素、含大黃素的提取物在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連藥物的應用的製作方法

2023-07-04 22:27:21

專利名稱：注射用大黃素、含大黃素的提取物在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連藥物的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種注射用大黃素及含有大黃素的提取物在製藥領域中的新應用，具體涉及其在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物中的新應用。
背景技術：
腹部手術是外科最常見的手術，一般手術後病人的胃腸功能比較虛弱，手術後胃腸功能的恢復對病人的康復，包括疾病的痊癒，減少腸粘連等併發症，均具有重要意義。
恢復手術後的胃腸功能，主要是恢復一定強度的胃腸蠕動。但由於手術後病人不能進食，如果使胃的過早蠕動，會因胃內無食物而引起上腹不適。
據文獻報導，腹部手術後發生不同程度腸粘連的比例高達80-90％(Menies D，Ellis H.Intestinal obstruction from adhesion howbig is the problem.Ann R Coll Surg Engl，1990，7260)，手術後滲出的纖維蛋白，10小時起開始形成纖維粘連[靳珠華等.大黃素對豚鼠離體腸管作用的影響。《中國中西醫結合雜誌》，1994，14(7)429～431]；而腸粘連的發生，與手術後的腹腔滲出及腸蠕動過弱有關，減少滲出或改善蠕動，將可減少粘連的發生。
目前，胃腸動力藥物，對胃腸特別是胃的作用過強，易引起上腹不適及嘔吐，雖可促進腸蠕動藥物能促進腸蠕動，但不能減輕炎性反應，減少炎性物質及纖維蛋白滲出；且基本為口服給藥，因手術後禁食不能使用，因此，不適於手術後胃腸功能的恢復。
可減少腸粘連藥物有非甾體類抗炎藥和甾體類抗炎藥。甾體類抗炎藥如地塞米松能減輕炎性反應，減少炎性物質及纖維蛋白滲出，但抑制腸粘連發生的同時，也嚴重影響腹腔內手術部位及腹壁切口的癒合；非甾體抗炎藥可減少滲出，但現在臨床使用劑量常常引起胃腸道不良反應；促進纖維蛋白溶解吸收的藥物有東菱克栓酶等，應用時有出血傾向等副作用。

發明內容
針對上述技術缺陷，本發明所要解決的技術問題是提供一種注射用大黃素在製備治療恢復胃腸功能及預防腸粘連的藥物的新用途。
其中，本發明中大黃素可以採用現有技術進行化學合成或從植物中提取，但優選從植物中提取。
本發明內容進一步為含有大黃素的植物提取物在製備治療胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物新用途，其中含有大黃素的提取物優選從大黃、虎杖、何首烏或決明子中提取得到；當從大黃植物中提取時，本發明中含有大黃素的植物提取物為含有大黃素的蒽醌提取物；優選為含有大黃素的游離型蒽醌提取物。
在本發明中上述的含有大黃素的植物提取物當中，大黃素在提取物中的重量百分比含量為22％-99％，優選重量百分比為60-99％。
當從大黃植物中提取時，本發明中含有大黃素的進一步優選為含有大黃素和蘆薈大黃素的游離蒽醌提取物，其中大黃素和蘆薈大黃素在提取物中的重量百分比含量為22％-99％，優選重量百分比為60-99％。
本發明大黃素及含有大黃素的植物提取物在製備治療胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物的應用中，本發明大黃素及含有大黃素的植物提取物的給藥方式為以注射方式給藥，如肌肉注射、腹腔注射、靜脈注射、皮下注射等，其中優選靜脈注射；本發明中，大黃素及含有大黃素的植物提取物可以和本領域常規藥用輔料採用常規的製備工藝製成注射液或注射用凍乾粉針劑以靜脈注射的方式給藥。
本發明中，進一步優選為大黃素或含有大黃素植物提取物和鹼性物質如氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉或胺等反應製成大黃素鹽，然後單獨或和藥用輔料組合製成注射液或凍乾粉針劑以靜脈注射方式給藥；優選和胺反應製成大黃素胺鹽，然後單獨或和藥用輔料組合製成注射液或凍乾粉針劑以靜脈注射方式給藥。
更進一步優選為取大黃素加入甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丙酮溶液中，加熱使之溶解；另取甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丙酮溶解的葡甲胺溶液，在攪拌下將其滴加到大黃素溶液中，攪拌，過濾，減壓蒸除溶劑，乾燥，即得大黃素葡甲胺鹽；然後採用常規的製備工藝將其單獨或和藥用輔料組合製成注射液或凍乾粉針劑以靜脈注射方式給藥。
本發明大黃素及含有大黃素的提取物在製備治療胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物應用中，其相對於成人的給藥劑量範圍為100～200mg/日(以大黃素計算)；其相對於大鼠的給藥劑量範圍為10～20mg/kg(以大黃素計算)。
本發明經過實驗研究發現，手術後前期(手術後1-3天)靜脈注射給藥大黃素或含有大黃素的提取物，一次靜脈給藥10mg/kg(以大黃素計算)對大鼠結腸墨汁有明顯的推動作用，明顯增加大鼠在體迴腸張力與活動力；一次靜脈給藥5mg/kg明顯抑制小鼠毛細血管通透性；靜脈給藥10mg/kg7天明顯抑制大鼠棉球肉牙腫形成；用藥5天明顯抑制大鼠腸粘連的形成，表明大黃素能減輕炎性反應，減少炎性物質及纖維蛋白滲出，促進胃腸蠕動藥物。
本發明注射用大黃素及含有大黃素的植物提取物在製備治療胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物新應用，具有療效好，副作用低；並克服了手術後短期內(手術後1-3日)口服給藥而不利於胃腸功能恢復的缺陷。
具體實施例方式
下面結合實驗例和實驗例對本發明做進一步的闡述，但並不受限於此。
實施例1、大黃素的製備取虎杖粗粉100g，加入3倍量95％乙醇加熱回流3次，每次1小時，合併提取液，減壓濃縮成浸膏，然後用少量95％乙醇加熱溶解，之後加10倍量水稀釋，用酸調至PH＝2，攪拌、靜置、抽濾得棕色粉末沉澱，然後用吡啶加乙醇重結晶，即得大黃素，為橙黃色晶體。
實施例2、含有大黃素的游離性蒽醌提取物製備。
大黃粗粉100g，加入5倍量70％乙醇加熱回流水解1小時，抽濾，用2倍量70％乙醇清洗，合併濾液並減壓濃縮至原液體積的30％，得稀糖漿狀物，趁熱加入濃HCL(1體積濃鹽酸/10倍量藥材)攪拌10min以上，然後加入甲苯(2體積/1倍量藥材)加熱回流1小時以上，分液，甲苯層(上層液)用5％的Na2CO3溶液萃取，往Na2CO3萃取液中加鹽酸調PH值為2，過濾、水洗至中性、乾燥即得，棕色粉末。
實施例3、大黃素葡甲胺鹽的製備稱取2.7g大黃素，加入300ml乙醇，加熱使之溶解；另取1.95g葡甲胺，用100ml乙醇超聲溶解，在攪拌下，將葡甲胺乙醇液滴加到大黃素乙醇液中，加畢，繼續攪拌30分鐘，濾液減壓蒸除溶劑，加水溶解，過濾，冷凍乾燥即得。
實施例4、大黃素葡甲胺鹽的製備稱取2.7g大黃素，加入300ml丙酮，加熱使之溶解；另取1.95g葡甲胺，用100ml丙酮加熱溶解，製得葡甲胺甲醇溶液，攪拌下將葡甲胺丙酮液滴加到大黃素丙酮液中，加畢，繼續攪拌30分鐘，過濾，濾液減壓蒸除溶劑，乾燥即得。
實施例5、大黃素注射液的製備取大黃素葡甲胺10g，用注射用水溶解至1000ml，調節PH值，過濾、除熱原，分裝，滅菌後即得大黃素注射液。
實施例6、大黃素凍乾粉針劑的製備取大黃素葡甲胺10g，5％甘露醇，用注射用水溶解至1000ml溶解，過濾、除熱原，分裝，採用常規凍幹工藝製成凍乾粉針劑。
以下實驗例1-5中所用的大黃素均為按本發明實施例5的方法製備而獲得的。
試驗例1、大黃素對大鼠結腸推動的影響取大鼠50隻，雄性，體重180～220g，分5組，20％烏拉坦麻醉，麻醉體積0.5mg/100g，沿大鼠腹中線剪開，找出回盲端，回盲端中部注射墨汁，注射體積0.5ml/只，隨後立即靜脈給藥，給藥體積0.4ml/100g，模型組給予同體積的NS，2小時後處死大鼠，以墨汁在結腸中的推進距離與結腸總長之比值為指標，進行組間t檢驗。試驗結果如下(表1)表1 大黃素對大鼠結腸墨汁的推進影響組別 劑量 推進距離結腸長度推進率(％)NS 2.5±2.114.3±0.9 17.2±14.8硫酸新斯的明 0.10mg/kg 5.9±1.115.6±0.58 37.5±5.9ΔΔ大黃素高劑量組20mg/kg4.9±2.714.5±0.8 33.6±18.7Δ大黃素中劑量組10mg/kg4.4±1.914.5±0.7 30.2±13.9Δ大黃素低劑量組5mg/kg 3.6±2.013.8±0.7 26.6±15.6ΔΔP＜0.01；ΔP＜0.05試驗結果表明 大黃素高劑量組、中劑量組與模型組比較，對大鼠結腸墨汁推進有明顯作用，P＜0.05；大黃素低劑量組對大鼠結腸墨汁推進沒有顯著性作用，但有一定趨勢。
試驗例2、大黃素對小鼠毛細血管通透性的影響取小鼠60隻，雄性，體重19～21g，隨機分為5組，每組12隻，給藥體積0.20ml/20g，給藥後立即給小鼠靜脈注射0.5％伊文思藍溶液，給藥體積0.20ml/20g。隨即腹腔注射1.0％的醋酸0.20ml，20分鐘後處死小鼠，吸取6.0ml生理鹽水，注入腹腔，輕揉腹部，吸取腹腔液，離心(3000rpm，10min)，於590nm波長處測定吸收值，進行組間t檢驗。試驗結果如下(表2)表2 大黃素對小鼠毛細血管通透性的影響組別 劑量 ODSNS 0.603±0.159雙氯芬酸鈉5mg/kg0.301±0.102ΔΔ大黃素高劑量組20mg/kg 0.469±0.103Δ大黃素中劑量組10mg/kg 0.487±0.099Δ大黃素低劑量組5mg/kg0.579±0.134Δp＜0.05；ΔΔp＜0.01試驗結果表明大黃素高劑量組、中劑量組與模型組比較，對抑制小鼠毛細血管通透性有明顯作用，P＜0.05。
試驗例3、大黃素對大鼠腸粘連的影響動物禁食16h，以10％水合氯醛腹腔內麻醉。麻醉體積0.35ml/100g，麻醉後將大鼠仰臥固定於手術板上，腹部脫毛，消毒皮膚，鋪無菌巾，取下腹部正中長約2cm切口，提出盲腸，置於幹紗布上約5分鐘，使漿膜乾燥，以解剖刀片輕刮整個盲腸漿膜10遍，造成輕度滲血，以止血鉗用同樣力度夾小腸兩下，再滴入無水酒精於創面上。分兩層以1-0絲線關腹，隨機分組，隨後立即給藥，分籠飼養。每天給藥一次，給藥體積0.4ml/100g，模型組給予同體積的NS，陽性對照組給予地塞米松，隔天給藥，劑量10mg/kg，給藥體積同給藥組。術後第7d處死，腹部取「n」形切口開腹，分別進行粘連程度分級評分。觀察指標粘連程度分級判斷標準參考Nair1制定的5級分類法，確定分級標準，見附表1，試驗結果進行組間秩和檢驗，試驗結果如下(表3、4)表3 腸粘連程度分級評定標準

表4 iv大黃素對大鼠腸粘連的影響

試驗結果表明大黃素高劑量組、中劑量組與模型組比較，對抑制大鼠腸粘連有明顯作用，P＜0.05。
試驗例4、大黃素對棉球致大鼠肉牙腫形成的影響大鼠隨機分為5組(生理鹽水組，陽性藥組，EMD大、中、小劑量組)，每組10隻，乙醚麻醉，肩胛部皮膚碘酊消毒，酒精脫碘，肩胛間切一1cm的切口，止血鉗鈍性分離兩側皮膚與皮下組織，切口兩側皮下各植入消毒棉球一個(重19.8～20.2mg)，縫合切口。手術當日開始給藥。陽性對照組隔日im注射給藥一次，給藥劑量10mg/kg，給藥體積0.4ml/100g；生理鹽水組及EMD給藥組，每次給藥體積0.4ml/100g。一周後脫臼處死，取出棉球，剔除脂肪組織，70℃烘24小時，稱重，減去棉球原重，即為肉牙腫重量，進行組間t檢驗。試驗結果如下(表5)表5 大黃素對大鼠棉球肉牙腫形成的影響組別 劑量(mg/kg)肉牙腫重(mg)生理鹽水組-42.2±12.5地塞米松組10 13.6±4.8ΔΔ大黃素低劑量組537.2±6.9大黃素中劑量組10 27.8±7.0ΔΔ大黃素高劑量組20 21.0±5.2ΔΔΔΔP＜0.01，與生理鹽水組比較。
試驗結果表明iv大黃素高劑量組、中劑量組與模型組比較，對抑制大鼠棉球肉牙腫形成有明顯作用，P＜0.01。
試驗例5、大黃素對在體大鼠小腸張力的影響取大鼠30隻，體重180～220g，雌雄各半，20％烏拉坦麻醉，麻醉體積0.5mg/100g，沿大鼠腹中線剪開，找出距回盲部3cm處迴腸，兩頭固定，腸中點穿孔縫一棉線與換能器連接，張力為2g，用Powerlab記錄一段正常收縮曲線後，靜脈給藥，給藥組劑量為10mg/kg，給藥體積0.4ml/100g，陽性對照組給予im新斯的明劑量為0.10mg/kg，給藥體積0.4ml/100g，模型組給予NS，給予體積同給藥組。觀察給藥後1小時後小腸張力與收縮頻率，進行組間t檢驗。
試驗結果如下(表6)表6 iv大黃素對在體大鼠小腸張力、頻率、活動力的影響

ΔΔ P＜0.01，與生理鹽水組比較試驗結果表明iv大黃素10mg/kg與模型組比較，對大鼠小腸張力與活動力有明顯的升高作用，P＜0.01。
權利要求
1.一種注射用大黃素在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物的應用。
2.根據權利要求1所述的藥物的應用，其特徵為注射用含有大黃素的植物提取物在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物的應用。
3.權利要求2所述的藥物的應用，其特徵為含有大黃素的大黃植物提取物在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物中的應用。
4.據權利要求2所述的藥物的應用，其特徵為含有大黃素的虎杖植物提取物在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物的應用。
5.據權利要求2所述的藥物的應用，其特徵為含有大黃素的何首烏或決明子植物提取物在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物的應用。
6.根據權利要求3的藥物的應用，其特徵在於含有大黃素的大黃植物提取物為含有大黃素的蒽醌提取物在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物的應用。
7.根據權利要求6所述的藥物的應用，其特徵在於含有大黃素的植物提取物為含有大黃素的游離型蒽醌提取物在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物的應用。
8.根據權利要求7所述的藥物的應用，其特徵在於含有大黃素的植物提取物為含大黃素和蘆薈大黃素的游離型蒽醌提取物在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物的應用。
9.根據權利要求2-7任一所述的藥物的應用，其特徵在大黃素在提取物中重量百分比含量為20-99％。
10.根據權利要求8所述的藥物的應用，其特徵為大黃素和蘆薈大黃素在提取物中重量百分比含量為20-99％。
11.根據上述任一權利要所述的藥物的應用，其特徵在於大黃素或含有大黃素的提取物可以和藥用輔料組合以注射的方式給藥。
12.根據權利要求11所述的藥物的應用，其特徵在於大黃素或含有大黃素的提取物可以和藥用輔料組合以靜脈注射方式給藥。
13.根據權利要求12所述的藥物的應用，其特徵在於大黃素或含有大黃素的提取物和鹼性物質反應製成大黃素鹽，然後可以和藥用輔料組合製成注射液或凍乾粉針劑以靜脈注射方式給藥
14.根據權利要求13所述的藥物的應用，其特徵在於大黃素或含有大黃素的提取物和胺反應製成大黃素胺鹽，然後可以和藥用輔料組合製成注射液或凍乾粉針劑以靜脈注射方式給藥。
15.根據權利要求14所述的藥物的應用，其特徵在於取大黃素加入甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丙酮溶液中，加熱使之溶解；另取甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丙酮溶解的葡甲胺溶液，在攪拌下將其滴加到大黃素溶液中，攪拌，過濾，減壓蒸除溶劑，乾燥，得大黃素葡甲胺鹽；然後採用常規的製備工藝將其單獨或和藥用輔料組合製成注射液或凍乾粉針劑以靜脈注射方式給藥。
全文摘要
本發明公開了一種注射用大黃素及含有大黃素的提取物在製備治療手術後胃腸功能恢復及預防腸粘連的藥物中的新應用，具有療效好，副作用低；並克服了手術後短期內口服給藥而不利於胃腸功能恢復的缺陷。
文檔編號A61P41/00GK1489993SQ02146279
公開日2004年4月21日 申請日期2002年10月18日 優先權日2002年10月18日
發明者傅風華, 蔣王林, 孫盛茂, 田京偉, 劉珂 申請人:山東綠葉天然藥物研究開發有限公司