天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法
2023-07-28 06:31:11
專利名稱：天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法
技術領域：
本發明屬於臟器提取技術領域，具體涉及臟器提取中採用天然澄清抑菌劑對料液進行澄清抑菌處理，繼後分離純化製得有效成分。
背景技術：
臟器提取是指從動物的組織、器官、腺體、體液、以及胎盤、骨、毛、皮、角中提取、分離、純化獲得如胺基酸、多肽、蛋白質、酶類、脂類、激素、核酸等有效成分的過程。這些有效成分具有毒性低、副作用小、容易被人體吸收的特點。作為藥物、生物試劑、醫用材料、食品添加劑、日化產品可廣泛用於藥品、食品、保健品和化妝品中。
目前多數臟器提取廠家，在臟器提取(水解)步驟後，為了保證下一步分離、純化步驟的高效，首先要進行固體-液體的分離，一般採用自然沉降、自然過濾、離心、化學試劑沉澱等手段來達到固液分離的目的，並且對於分離出的料液還需加入抑菌劑以達到防腐的目的。這些方法在不同方面或程度上存在著缺陷工藝周期長、分離效果差、設備成本高、分離液易被染菌、加入的化學沉澱試劑和化學抑菌劑有的對人體有毒有害。
例如毛髮水解提取胱氨酸的工藝，是將毛髮經酸水解後，直接加鹼液調整料液PH值至胱氨酸的等電點(PH值4.8)，利用胱氨酸在等電點PH值時溶解度最低的原理，沉澱結晶出胱氨酸。但由於在水解液中膠體、蛋白質、色素等雜質影響，使胱氨酸沉澱結晶的純度不高，一般為60～70％，收率也僅為8％左右，並且料液在沉澱結晶過程中易被染菌，影響胱氨酸結晶的品質。
再如動物眼提取物(眼氨肽注射液、眼氨肽滴眼液的中間體)的製備工藝，是用豬、牛、羊眼球經提取、除蛋白質後製備而成的一種生物製劑。在工藝中為使料液澄清，採用濾紙自然過濾；為了除掉蛋白質，採用磺基水揚酸沉澱；為了防止中間體料液染菌，加入苯甲酸鈉、氯仿作為抑菌劑。其工藝缺陷是自然過濾時間長，效果不佳，並且磺基水揚酸、苯甲酸鈉等是對人體存在有毒有害隱患的物質。
發明內容
針對上述缺陷，本發明提供天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法。採用天然澄清抑菌劑對臟器提取過程中的料液進行澄清抑菌處理，繼後分離純化製得有效成分。具體地講，就是在臟器提取中的料液中加入10～1500ppm的一種或多種天然澄清抑菌劑，經過攪拌，靜置沉澱，固液分離，純化製得有效成分。所述的天然澄清抑菌劑是從天然動植物中提取的一種或多種多糖類物質。如卡拉膠、海藻酸、殼聚糖、陽離子澱粉。配成0.2～2％濃度的液體後使用，其中殼聚糖採用胺基酸溶解。在料液中的加入量最好為50～1000ppm。臟器提取過程中的料液是指提取液、水解液、離心液、過濾液或濃縮液。
本發明所述的天然澄清抑菌劑是一類聚陽離子或聚陰離子的大分子物質，具有分子吸附、「架橋」以及幹擾細菌細胞質膜的代謝作用，可使料液中的大分子雜質尤其是細菌快速絮凝沉澱。
本發明與現有技術相比優點在於(1)澄清抑菌效率高，處理後的澄清料液消光值(OD值)可從0.9左右降到0.01～0.1之間。再有，以往臟器提取的固液分離方法所獲得的料液極易被染菌，使料液變渾濁，需加抑菌劑。而本發明在澄清過程中就具有除菌的作用，以達到抑菌的目的，處理後的料液自然放置至少90天仍為澄清，經測定，料液的細菌總數在0～10個/ml，抑菌效果極佳，從而保證了下一步的分離純化的高效。(2)安全無毒，本發明澄清抑菌劑的使用方法，不存在對人體有毒有害的隱患。(3)本發明由於可使料液中的大分子雜質尤其是細菌快速絮凝沉澱，可縮短生產周期。(4)本發明應用簡便經濟，設備投資小，適於各種規模的臟器提取。
實施方式通過下面將要敘述的非限定實施例對本發明作進一步描述。
實施例1胱氨酸。取1000L以豬毛髮為原料的酸水解液，在水解液中加入30～40％氫氧化鈉調整料液PH值2.5～3.0。再加入預先配製0.2％濃度的卡拉膠水溶液，加入量為10ppm，稍加攪拌後，可見絮凝現象發生，靜置1小時，板框過濾獲得澄清料液。再用30～40％氫氧化鈉調整料液PH至4.8沉澱結晶。本發明與現有技術相比分離純化效果好，收得胱氨酸40kg，純度75％，收率9％，純度和收率分別提高15％和12％。
實施例2動物眼提取物。量取以80kg羊眼為原料經75％乙醇提取所得的提取液200L，經1200r/min離心過濾，先後加入預先配製0.2％濃度的卡拉膠水溶液、1％濃度的穀氨酸和殼聚糖液體，加入量分別為50和300ppm，經過攪拌，稍後，可見絮凝物產生，靜置2小時，布氏漏鬥過濾分離出上清液，再經濃縮除醇、布氏漏鬥過濾，即得動物眼提取物中間體溶液。經胺基酸含量測定，符合國家標準。與現有技術相比可縮短濃縮前過濾分離周期70％，動物眼提取物中間體溶液在未加抑菌劑苯甲酸鈉的情況下，存放三個月無染菌，抑菌效果佳。並且本發明使用方法不存在對人體有毒有害的隱患，可備用製劑。
實施例3動物眼提取物。量取以40kg牛眼為原料經95％乙醇提取所得的提取液80L，經1600r/min離心過濾，減壓濃縮除醇後，攪拌下，在濃縮液中加入預先配製2％濃度的陽離子澱粉溶液，加入量為1500ppm。可見絮凝物產生，靜置1小時，濾紙漏鬥過濾分離出上清液，即為動物眼提取物溶液。本發明使用方法與實施例2效果相同，在未加抑菌劑氯仿的情況下，中間體溶液存放三個月無染菌，其結果胺基酸含量符合國家標準，可用作製劑。
實施例4轉移因子。將健康豬脾去除脂肪和筋膜，稱重20kg，切碎，加入等量生理鹽水，用膠體磨進行勻漿處理兩次。勻漿物在-20℃冷凍，然後常溫融化，反覆凍融三次。1600r/min離心過濾，調整料液PH值6，攪拌下加入預先配製1％濃度的穀氨酸和殼聚糖液體、1％濃度的海藻酸水溶液，加入量分別為300和200ppm。稍後，可見絮凝物產生，靜置2小時，布氏漏鬥過濾得澄清液。將澄清液經截留分子量5000的超濾膜超濾，超濾液中轉移因子含量以福林酚測定法測定，為2.8mg/ml。與現有技術相比轉移因子收率可提高10％，並且避免現有技術中採用高速冷凍離心機的設備投入，具有簡便經濟，設備投資小的優點。
實施例5轉移因子。將健康豬脾去除脂肪和筋膜，稱重18kg，切碎，用膠體磨進行勻漿處理一次，放置-20℃冷凍。冷凍物稍融化後，加入半量生理鹽水，攪均，再用膠體磨進行勻漿處理一次。放置-20℃冷凍，然後常溫融化，反覆凍融兩次。1600r/min離心過濾，調整料液PH值6。攪拌下，先後加入預先配製0.2％濃度的卡拉膠液體和2％陽離子澱粉液體，加入量分別為100和900ppm，稍後，可見絮凝物產生，停止攪拌。靜置2小時，布氏漏鬥過濾得澄清液。將澄清液裝入截留分子量6000的透析袋中，紮緊兩頭。在4℃的生理鹽水中透析，透析96小時透析。透析液中轉移因子含量以福林酚測定法測定，為2.6mg/ml。現有技術中，當透析超過36小時易產生染菌，而本發明透析長達96小時未發現染菌腐敗現象，同時還可節省高速冷凍離心機和超濾器的投資。
權利要求
1.天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特徵是，在臟器提取的料液中加入10～1500ppm的一種或多種天然澄清抑菌劑，經過攪拌，靜置沉澱，固液分離，純化製得有效成分。
2.根據專利要求書1所述的天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特徵是，所述的天然澄清抑菌劑是從天然動植物中提取的一種或多種多糖類物質。
3.根據專利要求書1所述的天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特徵是，所述的天然澄清抑菌劑是卡拉膠、海藻酸、殼聚糖、陽離子澱粉。
4.根據專利要求書1所述的天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特徵是，所述的天然澄清抑菌劑配成0.2～2％濃度的液體後使用，其中殼聚糖採用胺基酸溶解。
5.根據專利要求書1所述的天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特徵是，所述的天然澄清抑菌劑在料液中的加入量最好為50～1000ppm。
6.根據專利要求書1所述的天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法，其特徵是，所述的臟器提取過程中的料液是提取液、水解液、離心液、過濾液或濃縮液。
全文摘要
本發明公開了天然澄清抑菌劑在臟器提取中的使用方法。其特徵是，在臟器提取的料液中加入10～1500ppm的一種或多種天然澄清抑菌劑，經過攪拌，靜置沉澱，固液分離，純化製得有效成分。本發明具有澄清抑菌效率高、生產周期短、安全無毒、簡便經濟，設備投資小，適於各種規模的臟器提取。
文檔編號A01N31/00GK1669420SQ20051000759
公開日2005年9月21日 申請日期2005年2月17日 優先權日2004年3月17日
發明者趙傑, 趙嘉偉 申請人:趙嘉偉