Mdm2與p53間相互作用的抑制劑的製作方法

2023-07-16 22:17:06

M.P.」意指熔點；『『CH3CN」意指乙腈；『『EtOAc」意指乙酸乙酯；『『DIPE」意指二丙醚；『『DMF」意指N，N-二甲基甲醯胺；「THF」意指四氫呋喃；"V2O5」意指氧化釩；「NaBH4」意指四氫硼酸(-1)鈉；「NaCl」意指氯化鈉；「EtOH」意指乙醇；「ΝΗ40Η」意指S氧化銨°Sunfire柱色譜(columnchromatographyoverSunfire)意指使用購自Waters公司(Milford，Massachusetts)的C18-結合的矽膠固定相柱Sunfire的反相HPLC。A.中間體的製備實施例Ala)中間體1的製備將1,2,3-三氟-5-硝基苯(0.0037mol)、1H-吲哚_3_乙胺(0.0037mol)和DIPEA(0.0189mol)的混合物在120°C下攪拌18小時，然後冷卻到室溫，傾入10%K2C03水溶液中並且用CH2C12/CH30H(少量)萃取。分離有機層，乾燥(MgS04)、過濾並且將溶劑蒸發至幹，得到1.3g(>100%)中間體1。b)中間體2的製備將中間體1(0.0037mol)和Pd/C10%(0.13g)在甲苯中的混合物於室溫，在大氣壓下氫化三天，然後經硅藻土過濾。將濾液蒸發至幹。使殘留物溶於CH2C12中。分離有機層，乾燥(MgS04)、過濾並且將溶劑蒸發至幹，得到1.2g(>100%)中間體2。實施例A2a)中間體3的製備將2-氯-5-硝基-1，3-雙(三氟甲基)苯(0.002mol)、1H_吲哚_3_乙胺(0.0024mol)和NaHC03(0.0026mol)在DMS0(4ml)中的混合物在100°C下攪拌48小時，然後冷卻至室溫，並且傾入H20中。過濾沉澱物，用二乙醚洗滌並乾燥，得到0.41g(49%)中間體3(M.P.:152°C)oa)中間體4的製備將中間體3(0.0008mol)和雷尼鎳(0.36g)在CH30H(10ml)中的混合物於室溫，在大氣壓下氫化18小時，然後經硅藻土過濾。將濾液蒸發至幹。將殘留物溶解在CH2C12中。分離有機層，乾燥(MgS04)、過濾並且將溶劑蒸發至幹，得到0.32g(96%)中間體4。實施例A3a)中間體5a的製備將1，3-二氯-2-氟-5-硝基苯(0.0048mol)、1H_吲哚_3_乙胺(0.0048mol)和NaHC03(0.0057mol)在DMSO(lOml)中的混合物在60°C下攪拌過夜，冷卻至室溫。加入冰水。將混合物用EtOAc萃取。潷析有機層，乾燥(MgSO4)、濾出並將溶劑蒸發至幹。使殘留物從CH3CN/DIPE中結晶。將沉澱物濾出並乾燥，得到1.03g(62%)中間體5a(M.P.:98°C)。b)中間體6a的製備將V2O5(O-Olg)中的中間體5a(0.0027mol)和Pt/C5%(0.lg)、噻吩在DIPE(0.Iml)和THF(20ml)中的4%溶液的混合物於室溫，在大氣壓下氫化18小時。通過過濾去除催化劑。將濾液蒸發至幹，得到0.91g(100%)中間體6a。c)中間體5b的製備將1，3-二氨-2-氟-5-硝基苯(0.0048mol)、1Η_吲哚_2_甲基_3_乙胺(0.004mol)和NaHCO3(0.0048mol)在DMSO(IOml)中的混合物在60°C下攪拌過夜，冷卻至室溫。加入冰水。過濾沉澱物，用CH3CN洗滌並乾燥，得到0.48g(28%)中間體5b(Μ.P.147°C)。d)中間體6b的製備將V2O5(0.005g)中的中間體5b(0.0013mol)和Pt/C5%(0.05g)、噻吩在DIPE(0.05ml)和THF(IOml)中的4%溶液的混合物於室溫，在大氣壓下氫化18小時，然後過濾。將濾液蒸發至幹，得到0.48g(100%)中間體6b。e)中間體5c的製備將1，3-二氯-2-氟-5-硝基苯(0.0048mol)、IH-吲哚_6_甲氧基_3_乙胺(0.0048mol)和NaHCO3(0.0057mol)在DMSO(IOml)中的混合物在60°C下攪拌過夜，冷卻至室溫。加入冰水。過濾沉澱物，用CH3CN洗滌並將溶劑蒸發至幹，得到1.2g(66%)中間體5c(M.P.:116°C)。f)中間體6c的製備將V205(0.012g)中的中間體5c(0.0031mol)禾PPt/C5%(0.12g)、噻吩在DIPE(0.12ml)和THF(25ml)中的4%溶液的混合物於室溫、在大氣壓下氫化18小時，然後經硅藻土過濾。將濾液蒸發至幹，得到1.2g(100%)中間體6c。實施例A4a)中間體7a的製備將1-氯-5-氟-4-甲基-2-硝基苯(0.0026mol)、1H_吲哚_3_乙胺(0.0026mol)和NaHC03(0.0032mol)在DMS0(5ml)中的混合物在60°C下攪拌過夜，冷卻至室溫。加入冰水。將沉澱物濾出，用CH3CN洗滌並乾燥，得到0.54g(62%)中間體7a(M.P.:146°C)。b)中間體8a的製備將V205(0.005g)中的中間體7a(0.0012mol)和Pt/C5%(0.049g)、噻吩在DIPE(0.049ml)和THF(lOml)中的4%溶液的混合物於室溫，在大氣壓下氫化18小時。通過過濾去除催化劑。將濾液蒸發至幹，得到0.36g(100%)中間體8a。c)中間體7b的製備將1-氯-5-氟-4-甲基-2-硝基苯(0.0026mol)、1H_吲哚甲基_3_乙胺(0.0026mol)和NaHC03(0.0032mol)在DMS0(5ml)中的混合物在60°C下攪拌過夜，冷卻至室溫。加入冰水。將沉澱物濾出，用CH3CN洗滌並將溶劑蒸發至幹，得到053g(58%)中間體7b(M.P.:171°C)。d)中間體8b的製備將V205(0.005g)中的中間體7b(0.0014mol)和Pt/C5%(0.05g)、噻吩在DIPE(0.05ml)和THF(15ml)中的4%溶液的混合物於室溫，在大氣壓下氫化18小時，然後經硅藻土過濾。將濾液蒸發至幹，得到0.49g(100%)中間體8b。實施例A5a)中間體9的製備在5°C下，將NaBH4(0.024mol)分批加入到4_溴_5_氟_2_硝基苯甲醛(0.02mol)的CH3OH(50ml)溶液中。將混合物在室溫下攪拌2小時。加入飽和NaCl水溶液。將混合物用CH2Cl2萃取。分離有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並且將溶劑蒸發至幹，得到5g(100%)中間體9。b)中間體10的製備將中間體9(0.Olmol)、IH-吲哚_3_乙胺(0.Olmol)和NaHCO3(0.012mol)在DMSO(25ml)中的混合物在60°C下攪拌過夜，然後冷卻至室溫。加入冰和水。將沉澱物濾出，用CH3CN洗滌並乾燥，得至IJ1.77g(45%)中間體10。c)中間體11的製備將中間體10(0.0045mol)、Pt/C5%(0.18g)和V2O5(0.02g)在4%噻吩溶液(0.18ml)和THF(50ml)中的混合物於室溫，在大氣壓下氫化48小時，然後經硅藻土過濾。將濾液蒸發直到乾燥，得到1.7g(100%)中間體11。實施例A6a)中間體12的製備將1-氟-2-甲基-4-硝基苯(0.0103mol)、7-甲基-IH-吲哚-3-乙胺(0.0103mol)和DIPEA(0.0515mol)的混合物在120°C下攪拌18小時，然後冷卻至室溫，稀釋於CH2Cl2/CH3OH(少量)中並且用10%K2CO3水溶液洗滌。分離有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並且將溶劑蒸發至幹。通過矽膠柱色譜(洗脫劑=CH2Cl2/環己烷70/30；15-35μm)純化殘留物(4.Ig)。收集純級分並且蒸發溶劑，得到1.45g(45%)中間體12。b)中間體13的製備將中間體12(0.0045mol)和Pt/C5%(0.15g)在甲苯(40ml)中的混合物於室溫，在3巴壓力下氫化18小時，然後過濾。將濾液蒸發至幹，得到1.25g(100%)中間體13。c)中間體14的製備將中間體13(0.04mol)、(7S)~4~氯-6,7-二氫_5H_環戊烷並[b]吡啶醇(0.0044mol)、HC1/二噁烷4M(2ml)在CH3CN/EtOH(150ml)中的溶液在65°C下攪拌一個周末。加入10%1(20)3水溶液和EtOAc。將混合物萃取。分離有機層，乾燥(MgS04)、濾出並蒸發溶劑。通過柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H93/7/1)純化殘留物(23g)。收集純級分並蒸發溶劑。將殘留物(14.2g，85%)從CH3CN中結晶。將沉澱物濾出並乾燥，得到10.4g(63%)中間體14。實施例A7a)中間體15的製備將1-氟-2，3-二甲基-4-硝基苯(0.003mol)、lH-吲哚-3-乙胺(0.0036mol)和NaHC03(0.0039mol)在DMS0(4ml)中的混合物在100°C下攪拌三天，然後冷卻至室溫，加入水。過濾沉澱物，用EtOH洗滌，然後用二乙醚洗滌並乾燥。在60°C下將該級分的一部分真空乾燥18小時，得到0.052g中間體15(M.P.:178°C)。b)中間體16的製備將中間體15(0.0022mol)和雷尼鎳(0.7g)在CH30H/THF(90/10)(20ml)中的混合物於室溫，在大氣壓下氫化3小時，然後經硅藻土過濾。將濾液蒸發至幹。將殘留物溶於二乙醚中。分離有機層，乾燥(MgS04)、過濾並且將溶劑蒸發至幹，得到0.64g(100%)中間體16(M.P.:161°C)。實施例A8a)中間體17的製備將6-氟-2-(4-嗎啉基)-3_硝基苯甲腈(0.002mol)UH-吲哚_3_乙胺(0.002mol)和NaHCO3(0.0024mol)在DMS0(5ml)中的混合物在60°C下攪拌過夜，冷卻至室溫，加入冰水。將沉澱物濾出，用CH3CN洗滌並乾燥，得到0.64g(82%)中間體17(M.P.2050C)。b)中間體18的製備將V2O5(0.Olg)中的中間體17(0.0015mol)和Pt/C5%(0.06g)、噻吩在DIPE(0.06ml)和THF(15ml)中的4%溶液的混合物於室溫，在大氣壓下氫化18小時。通過過濾去除催化劑。將濾液蒸發至幹，得到0.61g(100%)中間體18。實施例A9a)中間體19的製備將N-(4，5-二氟-2-硝基苯基)-乙醯胺(0.0023mol)、IH-吲哚_3_乙胺(0.0023mol)和NaHCO3(0.0028mol)在DMSO(5ml)中的混合物在60°C下攪拌過夜，然後冷卻至室溫，加入冰和水。將沉澱物濾出並乾燥，得到0.73g(88%)中間體19(M.P.:166°C)。b)中間體20的製備將中間體19(0.002mol)和雷尼鎳(0.8g)在CH3OH(15ml)中的混合物於室溫，在大氣壓下氫化4小時，然後經硅藻土過濾。將濾液蒸發至幹。將殘留物溶解在CH2Cl2中。分離有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並將溶劑蒸發至幹，得到0.68g(100%)中間體20。實施例AlOa)中間體21的製備將1，2-二氟-3-甲氧基-4-硝基苯(0.0074mol)、7-甲氧基-IH-吲哚-3-乙胺(0.0074mol)和NaHCO3(0.0088mol)在DMS0(15ml)中的混合物在60°C下攪拌過夜，然後冷卻至室溫，加入冰和水。過濾沉澱物，用CH3CN洗滌並乾燥，得到2.27g(85%)中間體21(M.P.:164°C)。b)中間體22的製備將中間體21(0.0058mol)、Pt/C5%(0.21g)和V2O5(0.021g)在噻吩在DIPE(0.21ml)和THF(30ml)中的4%溶液中混合物於室溫，在大氣壓下氫化48小時，然後經硅藻土過濾。將濾液蒸發至幹，得到2.lg(100%)中間體22。實施例All在IH-吲哚-3-基環上進一步包含取代基的中間體化合物可以採用進一步取代的IH-B引哚-3-基，例如2-甲基-IH-吲哚-3-乙胺、7-甲基-IH-B引哚_3_乙胺、6_甲氧基-IH-吲哚-3-乙胺或7-甲氧基-IH-吲哚-3-乙胺，用相似於上述方法製備。實施例Al2a)中間體23的製備將1-甲氧基-4-硝基-萘(0.0005mol)和IH-吲哚_3_乙胺(0.0005mol)在EtOH(3ml)中的混合物在100°C下攪拌18小時，然後蒸發至幹。通過矽膠柱色譜(洗脫劑CH2Cl2IOO)純化殘留物。收集純級分並且蒸發溶劑，得到0.03g(10%)中間體23(熔點2110C)。b)中間體24的製備將中間體23(0.002mol)和雷尼鎳(0.7g)在EtOH(50ml)中的混合物於室溫，在3巴壓力下氫化18小時，然後過濾。將濾液蒸發至幹。通過kromasil柱色譜(columnchromatographyoverkromasil)(洗脫劑CH2Cl2/CH30H/NH40H99/l/0.1至Ij97/3/0.3;5微米)純化殘留物(0.6g)。收集純級分並蒸發溶劑，得到0.32g(53%)中間體24(熔點148°C)。實施例Al3a)中間體25的製備將甲基碘(0.0215mol)滴加在3_[(二甲基氨基)甲基]_1Η_吲哚_7_羧酸甲酯(0.0215mol)的EtOH(50ml)溶液中。將混合物在室溫下攪拌24小時。濾出沉澱物，並且用EtOH洗滌，得到7.5g中間體25。將該產物直接用於接下來的反應步驟。b)中間體26的製備將中間體25(0.02mol)和氰化鈉(0.026mol)在DMF(75ml)中的混合物在100°C下攪拌2小時。加入水。將沉澱物濾出，得到2.2g中間體26。將該產物直接用於接下來的反應步驟。c)中間體27的製備在氮氣下將雷尼鎳(37.485mol)加入到中間體26和氨(7M，25ml)的溶液中。將混合物在3巴壓力下於室溫氫化5小時。將粗產物經硅藻土過濾，並且蒸發溶劑，得到2.2g中間體27。d)中間體28的製備將中間體27(0.00504mol),2,3-二氟_6_硝基苯甲醚(0.00504mol)和碳酸氫鈉(0.00605mol)在DMSO(IlOml)中的混合物在60°C下加熱過夜。將混合物冷卻至室溫，然後加入冰水並將沉澱物濾出，用CH3CN洗滌並乾燥，得到0.0860g中間體28。e)中間體29的製備將中間體28(0.0022mol)和雷尼鎳(0.0147mol)在CH3OH(25ml)中的混合物於室溫在H2大氣壓下氫化一個周末。通過過濾去除催化劑並且將濾液蒸發至幹。將殘留物用CH2Cl2溶解，有機層經MgSO4乾燥、過濾並且蒸發至幹，得到0.6g中間體29。將該產物直接用於接下來的反應步驟。f)中間體30的製備製備中間體29(0.00168mol)、4_氯-6，7-二氫-5H-環戊烷並[b]吡啶_7_醇(0.00168mol)和4M鹽酸的二噁烷溶液(0.000336mol)在CH3CN/Et0H(25ml)溶液中的混合物。將混合物在65°C下攪拌過夜。加入10%K2COjK溶液並且將有機層用CH2Cl2萃取、乾燥(MgSO4)、過濾並蒸發溶劑。通過矽膠柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H梯度97/3/0.5；90g，15-40微米)純化殘留物。收集純級分並蒸發溶劑，使殘留物在CH3OH中結晶，得到0.160g中間體30。實施例A14a)中間體31的製備將在EtOH(300ml)中的3_[(二甲基氨基)甲基]-H-吲哚_7_醛(0.13mol)、碘甲烷(0.14mol)在室溫下攪拌兩天，將沉澱物濾出並乾燥，得到47g中間體31。b)中間體32的製備將在DMF(400ml)中的中間體31(136.5mmol)、氰化鈉(177.5mol)在室溫下攪拌2小時。加入水，將反應混合物用EtOAc萃取，分離有機層，經MgSO4乾燥，過濾並蒸發。通過高效液相色譜(不規則的SiOH20-45微米IOOOgMATREX/流動相環己烷70%E0Ac30%)。收集純級分並蒸發溶劑，得到11.Sg中間體32。c)中間體33的製備將甲基氯化鎂(0.07mol)滴加到中間體32(0.022mmol)的THF(50ml)溶液中。加入10%NH4Cl水溶液和EtOAc.對反應混合物進行萃取，分離有機層，經MgSO4乾燥，過濾並蒸發。通過高效液相色譜(不規則的SiOH20-45微米450gMATREX/流動相環己烷60%E0Ac40%)純化殘留物(2.9g)。收集純級分並蒸發溶劑，得到2g中間體33。d)中間體34的製備在室溫下將鄧斯-馬丁氧化劑(Dess-Martinperiodinane,24.9ml)滴加到中間體33(IOmmol)的CH2Cl2(20ml)溶液中。在室溫下將反應混合物攪拌1小時，然後傾入冰水中，經硅藻土過濾並用CH2Cl2萃取濾液。分離有機層，經MgSO4乾燥，過濾並蒸發溶劑。通過矽膠柱色譜(洗脫劑60/40環己烷/EtOAc)純化殘留物(2.Sg)。收集純級分並蒸發溶劑，得到0.8g中間體34。e)中間體35的製備於5°C、在氮氣下，將甲基氯化鎂(12.9mmol)滴加到中間體34(4mmol)的THF(15ml)溶液中。在室溫下將反應混合物攪拌30分鐘。在5°C下小心加入10%NH4Cl水溶液。加入EtOAc並對反應混合物進行萃取。分離有機層，經MgSO4乾燥，過濾並蒸發。通過柱色譜(洗脫劑70/30環己烷/EtOAc)純化殘留物(1.3g)。收集純級分並蒸發溶劑，得到0.8g中間體35。f)中間體36的製備將中間體35(2.8mmol)、雷尼鎳(0.6g)在CH30H/NH3(IOml)中的混合物於室溫，在3巴壓力下氫化2小時。將殘留物用硅藻土過濾，用CH2Cl2洗滌，並蒸發溶劑，得到0.7g中間體36。r)中間體37的製備將中間體36(1.60讓01)、2，3-二氟-6-硝基苯甲醚(1.76mmol)、碳酸鈉鹽(1.92毫mol)在DMSO(5ml)中的混合物在60°C下加熱過夜。將混合物冷卻至室溫。加入冰水，力口ACH2Cl215對反應混合物進行萃取，分離有機層，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮。通過高效液相色譜(不規則的SiOH15-40微米300gMERCK/流動相環己烷70%E0Ac30%)純化殘留物(0.Sg)。收集純級分並蒸發溶劑，得到450mg中間體37。h)中間體38的製備將在THF(20ml)中的中間體37(1.03mmol)、Pt/C5%(0.lg)、V2O5(5mg)、4%噻吩的DIPE(30yl)溶液於室溫，在大氣壓下氫化一夜。將反應混合物用硅藻土過濾，用CH2Cl2洗滌並蒸發濾液，得到0.33g中間體38。B.最終產物的製備實施例Bl化合物11的製備將中間體2(0.0012mol)、4-溴卩比啶鹽酸鹽(11)(0.012mol)和DIPEA(0.OOlmol)在CH3CN(IOml)中的混合物在65°C下攪拌18小時，然後冷卻至室溫，傾入10%K2CO3水溶液中並用CH2C12/CH30H(少量)萃取。分離有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並將溶劑蒸發至幹。通過kromasil柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H97/3/0.3到91/9/0.9；3.5微米)純化殘留物(0.47力。收集純級分並蒸發溶劑，將殘留物從CH3CN中結晶。將沉澱物濾出並乾燥，得到0.163g(36%)化合物11(M.P.:164°C)。按照實施例Bl製備化合物No.12、13和65。實施例B2a)化合物3的製備將中間體4(0.0002mol)、4-溴卩比啶鹽酸鹽(11)(0.0002mol)和DIPEA(0.0002mol)在CH3CN(Iml)和EtOH(0.5ml)中的混合物在65°C下攪拌18小時。加入HCl(0.2當量)和4N二噁烷(14μ1)。將混合物在65°C下攪拌18小時，然後冷卻至室溫，在CH2Cl2中稀釋並用10%K2CO3水溶液洗滌。分離有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並將溶劑蒸發至幹。將通過Sunfire柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H100/0/0到93/7/0.7;5微米)純化殘留物(0.24g)。收集純級分並蒸發溶劑，將殘留物(0.073g，57%)從CH3CN中結晶。濾出沉澱物並乾燥，得到0.039g(30%)化合物3(Μ·P.187°C)。按照實施例B2a)製備化合物No.4。b)化合物5的製備將中間體4(0.0002mol)和4_氯-6，7_二氫_5H_環戊烷並[b]吡啶_7_醇(0.0002mol)在HC1/4N二噁烷(14μ1),CH3CN(Iml)和EtOH(0.5ml)中的混合物在65°C下攪拌18小時。加入HCl(0.2當量)和4N二噁烷(14μ1)。將混合物在65°C下攪拌18小時，然後冷卻至室溫，在CH2Cl2中稀釋並用10%K2CO3水溶液洗滌。分離有機層，乾燥(MgS04)、過濾並且將溶劑蒸發至幹。通過Simfire柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H100/0/0到92/8/0.8;5微米)純化殘留物(0.14g)。收集純級分並蒸發溶劑，將殘留物(0.072g,50%)從CH3CN中結晶。濾出沉澱物並且乾燥，得到0.049g(30%)化合物5(Μ.P.:178°C)。實施例B3化合物14的製備將中間體2(0.0012mol)、4_氯-2-吡啶甲醇(0.0012mol)和HC1/4N二噁烷(0.0002mol)在CH3CN(IOml)中的混合物在65°C下攪拌18小時，然後冷卻至室溫，傾入10%K2CO3水溶液中並用CH2C12/CH30H(少量)萃取。分離有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並將溶劑蒸發至幹。通過kromasil柱色譜(洗脫劑CH2Cl2/CH30H/NH40H97/3/0.3到91/9/0.9；3-5微米)純化殘留物(0.52g)。收集純級分並蒸發溶劑，將殘留物(0.3g，60%)從CH3CN中結晶。濾出沉澱物並乾燥，得到0.292g(51%)呈鹽酸鹽的化合物14(·1.52HC1，M.P.:110°C)。按照實施例B3製備化合物No.15、16和60。請確認實施例B4化合物24的製備將中間體6a(0.0007mol)和4_氯_2_吡啶甲醇(0.0007mol)在HC1/4N二噁烷(0.OOOlmol)>CH3CN(2.5ml)和EtOH(Iml)中的混合物在65°C下攪拌18小時。將混合物冷卻至室溫，用CH2Cl2稀釋並用10%K2CO3水溶液洗滌。潷析有機層，乾燥(MgS04)、過濾並將溶劑蒸發至15ml。濾出殘留物並乾燥，得到0.168g(64%)化合物24(M.P.:115°C)。b)化合物25的製備將中間體6b(0.0007mol)、4_氯_2_吡啶甲醇(0.0007mol)在HC1/4N二噁烷(0.OOOlmol)>CH3CN(2ml)和Et0H(0.8ml)中的混合物在65°C下攪拌18小時。將混合物冷卻至室溫，傾入10%K2CO3水溶液中並用CH2Cl2萃取。將沉澱物過濾，用CH3CN洗滌並乾燥，得到0.155g(53%)化合物25(M.P.186°C)。按照實施例B4b)製備化合物No.26、27和28。c)化合物31的製備將中間體6c(0.0008mol)和4-氯喹啉(0.0009mol)在HC1/4N二噁烷(0.0001mol)、CH3CN(2.5ml)和EtOH(lml)中的混合物在65°C下攪拌48小時。將混合物冷卻至室溫，傾入10%K2C03水溶液中並用CH2C12萃取。將沉澱物過濾，用CH3CN洗滌並乾燥，得到0.266g(71%)化合物31(M.P.:175°C)。按照實施例B4c)製備化合物No.29、30和32。實施例B5化合物17的製備將中間體2(0.0012mol)、4-氯_6，7-二氫_5H_環戊烷並[b]吡啶_7_醇(0.0012mol)和HC1/4N二噁烷(0.0025mol)在CH3CN(10ml)中的混合物在65°C下攪拌18小時，然後冷卻至室溫，傾入10%K2C03水溶液中並用CH2C12/CH30H(少量)萃取。分離有機層、乾燥(MgS04)、過濾、並將溶劑蒸發至幹。通過kromasil柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H97/3/0.3到88/12/1.2；3-5微米)純化殘留物(0.54g)。收集純級分並蒸發溶劑。將殘留物(0.14g，26%)從CH3CN中結晶。濾出沉澱物並乾燥，得到0.113g(21%)化合物17(M.P.:147°C)。按照實施例B5製備化合物No.18、19、20、21、22、23、33、34、35、36、37和61。實施例B6a)化合物9的製備將中間體8a(0.0006mol)和4_氯_6，7-二氫_5H_環戊烷並[b]吡啶醇(0.006mol)在HC1/4N二噁烷(0.OOOlmol)、CH3CN(2ml)和CH30H(0.8ml)中的混合物在65°C下攪拌18小時，然後在室溫下冷卻，加入3NHC1(0.0025mol)。將混合物在65°C下攪拌18小時，在室溫下冷卻，用012(12稀釋並用10%K2C03水溶液洗滌。潷析有機層、乾燥(MgS04)、過濾、並將溶劑蒸發至幹。通過kromasil柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H98/2/0.2到90/10/1；3.5微米)純化殘留物(0.36g)。將純級分(0.14g)從CH3CN中結晶。濾出沉澱物並乾燥，得到0.120g(47%)化合物9(M.P.:207°C)。按照實施例B6a)製備化合物No.7和8。b)化合物10的製備將中間體8b(0.0007mol)和4_氯_6，7_二氫_5H_環戊烷並[b]吡啶_7_醇(0.0008mol)在HC1/4N二噁烷(0.OOOlmol)、CH3CN(2ml)和CH3OH(0.8ml)中的混合物在65°C攪拌48小時，然後冷卻至室溫，傾入10%K2CO3水溶液中並用CH2Cl2洗滌。分離有機層、乾燥(MgSO4)、過濾、並蒸發溶劑。通過kromasil柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H98/2/0.2到90/10/1;3.5微米)純化殘留物。收集純級分並將溶劑蒸發至幹。將殘留物從CH3CN中結晶。濾出沉澱物並乾燥，得到0.055g(17%)化合物10(M.P.237°C)。實施例B7化合物53的製備將中間體11(0.OOllmol)、4_氯喹啉(0.0012mol)和HC1/4N二噁烷(0.0002mol)在CH3CN(2.5ml)和EtOH(Iml)中的混合物在65°C下攪拌18小時，然後冷卻至室溫，傾入10%K2CO3水溶液中並用CH2Cl2萃取。分離有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並蒸發溶劑。濾出沉澱物並乾燥，得到0.366g(66%)化合物53(M.P.192°C)。按照實施例B7製備化合物No.51、52、53和54。實施例B8化合物59的製備將中間體14(0.0005mol)在3ΝHCl(5ml)和THF(Iml)中的溶液在100°C下攪拌10天。加入10%K2COwK溶液和CH2Cl2。對混合物進行萃取。將有機層分離、乾燥(MgSO4)、濾出並濃縮。通過柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H93/7/0.1)純化殘留物(0.2g)。通過柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H93/7/0.7)純化殘留物(0.010g，5%)。收集純級分並蒸發溶劑，得到0.003g(l.5%)化合物59。實施例B9a)化合物1的製備將中間體16(0.0005mol)、4_溴卩比啶鹽酸鹽(11)(0.0005mol)和DIPEA(0.0004mol)在CH3CN(1.5ml)和Et0H(0.5ml)中的混合物在65°C下攪拌18小時，力口入HCl(0.2eq)和4N二噁烷(29μ1)。將混合物在65°C下攪拌18小時，然後冷卻至室溫，傾入10%K2CO3水溶液中並用EtOAc萃取。分離有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並將溶劑蒸發至幹。通過kromasil柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H93/7/0.5；10微米)純化殘留物(0.24g)。收集純級分並蒸發溶劑，得到0.039g(19%)化合物1(M.P.186°C)。b)化合物2的製備將中間體16(0.0005mol)、4_氯_2_吡啶甲醇(0.0005mol)和HC1/4N二噁烷(0.OOOlmol)在CH3CNd.5ml)和EtOH(0.5ml)中的混合物在65°C下攪拌18小時，加入HCl(0.2eq)和4N二噁烷(29μ1)。將混合物在65°C下攪拌18小時，然後冷卻至室溫，傾入10%K2CO3水溶液中並用EtOAc萃取。分離有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並將溶劑蒸發至幹。通過矽膠柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H93/7/0.5；10微米)純化殘留物(0.18g)。收集純級分並蒸發溶劑。將殘留物(0.03g，14%)從CH3CN/DIPE中結晶。將沉澱物濾出並乾燥，得到0.03g(9%)化合物2(Μ.P.163°C)。實施例BlO化合物55的製備將中間體18(0.0008mol)和4-溴吡啶鹽酸鹽(11)(0.0008mol)在DIPEA(0.0006mol)、CH3CN(2.5ml)和EtOH(Iml)中的混合物在65°C下攪拌18小時然後在室溫下冷卻，傾入10%K2CO3水溶液中並用CH2Cl2萃取。潷析有機層，乾燥(MgS04)、過濾並且將溶劑蒸發至幹。通過矽膠柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H95/5/0.5，1540微米)純化殘留物(0.357g)。將純級分的溶劑蒸發至幹。將殘留物(0.135g)從CH3CN/EtOH/DIPE中結晶，得到0.126g(35%)呈鹽酸鹽的化合物55(·0.99HC1，M.P.245°C)。按照實施例BlO製備化合物No.56,57和58。實施例Bll化合物50的製備將中間體20(0.OOlmol)、4_溴卩比啶鹽酸鹽(11)(0.OOlmol)和DIPEA(0.0008mol)在CH3CN(2.5ml)和EtOH(Iml)中的混合物在65°C下攪拌18小時然後冷卻至室溫，傾入10%K2CO3水溶液中並用CH2Cl2萃取。將有機層分離，乾燥(MgSO4)、過濾並將溶劑蒸發至幹。通過kromasil柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H98/2/0.2至88/12/1.2，3.5微米)純化殘留物(0.37g)。收集純級分並將溶劑蒸發至幹。將殘留物從CH3CN中結晶。將沉澱物濾出並乾燥，得到0.095g(23%)化合物50(M.P.:241°C)。實施例B12化合物49的製備將中間體22(0.0015mol)和4_氯_6，7-二氫_5H_環戊烷並[b]卩比啶-7醇(0.0016mol)在HC1/4N二噁烷(0.0003mol)、CH3CN(3ml)和EtOH(1.2ml)中的混合物在65°C下攪拌18小時，然後在室溫下冷卻。傾入10%K2CO3水溶液中並用CH2Cl2萃取。潷析有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並將溶劑蒸發至幹。通過kromasil柱色譜(洗脫劑=CH2Cl2/CH30H/NH40H100至93/7/0.7，5微米)純化殘留物(0.74g)。將溶劑蒸發至幹。將殘留物(0.445g)從EtOH中結晶。將殘留物濾出並乾燥，得到0.244g(36%)化合物49(Μ.P.1230C)。按照實施例Β12製備化合物No.38、39、40、41、42、43、44、45、46、47和48。實施例Β13化合物6的製備將中間體24(0.0008mol)和4_溴吡啶鹽酸鹽(11)(0.0008mol)在DMF(3ml)中的混合物在105°C下攪拌1小時30分鐘，然後冷卻至室溫，並傾入K2CO3IO^水溶液中。將沉澱物濾出，用水洗滌數次並溶於CH2C12/CH30H(少量)中。分離有機層，乾燥(MgSO4)、過濾並將溶劑蒸發至幹。通過kromasil柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H96/4/0.4至88/12/1.2，5微米)純化殘留物(0.38g)。收集純級分並蒸發溶劑。將粗製油(0.09g,23%)溶解在異丙醇中並在冰浴中冷卻。加入HCl/異丙醇5N(2當量)。將沉澱物濾出並乾燥，得到0.063g(16%)化合物6(熔點1660C)。實施例B14化合物62的製備在5°C下將在IMTHF(0.389mmol)中的氫化鋁鋰分批加入到中間體30的THF溶液中。將混合物在室溫下攪拌2小時。在5°C下小心加入水。加入EtOAc。反應混合物經硅藻土過濾並進行萃取。分離有機層，用MgSO4乾燥，過濾並濃縮。通過矽膠柱色譜(洗脫劑CH2C12/CH30H/NH40H95/5/0.5，30g，1540微米)純化粗製物(0.12g)。收集純級分並蒸發溶劑，得到0.042g化合物62。實施例B15中間體63和64的製備化合物63和化合物64將中間體38(0.92mmol)、4-氯-6，7-二氫-5H-環戊烷並[b]吡啶_7_醇(Immol)、4M鹽酸的二噁烷(46μ1)溶液在CH3CN(IOml)中的溶液在65°C下加熱5小時。加入10%K2COyK溶液和EtOAc。對反應混合物進行萃取，分離有機層，用MgSO4乾燥，過濾並蒸發。通過高效液相色譜(穩定性矽膠5μm150X30.0mm,流動相(NH4OHO.2%；梯度CH2C12/CH30H從92/2到88/12)純化殘留物(0.4g)，得到49mg化合物63和114mg化合物64。C.藥理學實施例A2780細胞為帶有野生型p53的人卵巢癌細胞所述化合物將p53保持在A2780細胞中的能力用p53酶聯免疫吸附分析(ELISA)來測量。P53分析為採用兩種多克隆抗體的」三明治」酶免疫分析。將對p53蛋白質具有特異性的多克隆抗體固定在塑料孔的表面上。任何存在於待分析樣品中的P53將結合至捕捉抗體上。生物素化的檢測劑多株抗體也識別P53蛋白質，並將結合至任何p53，其通過捕捉抗體被保持。反之，所述檢測劑抗體被辣根過氧化物酶-綴合(conjugated)的鏈黴抗生素蛋結合。所述辣根過氧化物酶催化顯色底物鄰-苯二胺的轉化，其強度與結合至板上的P53蛋白的量成正比。使用分光光度計將顯色反應產物定量。通過使用已知濃度的純化的重組HIS標記的p53蛋白構建標準曲線來獲得定量(參見實施例C.1)式(I)化合物的細胞活性在A2780細胞腫瘤細胞上利用比色分析法對細胞毒性或存活率測定(參見實施例C.2)。C.1p53ELISA在37°C下，在潤溼的含有5%CO2的培養箱中，在補充有10%胎牛血清(FCS)、2mML-穀氨醯胺和慶大黴素的RPMI1640中培養A2780細胞(ATCC)。在96孔板中，以每孔20.000個細胞接種A2780細胞，培養24小時，並在37°C下於潤溼的培養箱中用化合物處理16小時。在培養後，用磷酸緩衝鹽水洗滌細胞一次，且每孔加入30μ1的低鹽RIPA緩衝液(20mMtris、pH7.0、0.5mMEDTAU%NonidetP40.0.5%D0C、0.05%SDSUmMPMSF、1μg/ml抑蛋白酶肽和0.5μ/ml亮抑酶肽)。將板置於冰上30分鐘，以完成裂解。通過使用如下所述的三明治ELISA檢測在裂解物中的p53蛋白。用在塗覆緩衝液(0.IMNaHCO3pH8.2)中濃度為1μg/ml的捕捉抗體pAb180KAbcamab28_100)塗覆高結合性聚苯乙烯EIA/RIA96孔板(Costar9018)，每孔50μ1。允許抗體在4°C下粘附過夜。用磷酸緩衝鹽水(PBS)/0.05%吐溫20洗滌塗覆的板一次，加入300μ1的阻斷緩衝液(PBS，1%牛血清白蛋白(BSA))，在室溫下培養2小時。在阻斷緩衝液中製備純化的重組HIS標記的p53蛋白的稀釋液(範圍為3-200ng/ml)並用作標準品。用PBS/0.05%吐溫20洗滌板兩次，並以80μ1/孔加入阻斷緩衝液或標準品。向標準品中加入20μ1裂解緩衝液。將以20μ1裂解物/孔將樣品加入到其它孔中。在4°C下培養過夜後，用PBS/0.05%吐溫20洗滌板兩次。將100μ1二次(secondary)多克隆抗體(secondarypolyclonalantibody)p53(FL-393)(Tebubio，sc-6243)的等分試樣以在阻斷緩衝液中1μg/ml的濃度加入到各孔中，並允許在室溫下粘附2小時。用PBS/0.05%吐溫20洗滌板三次。以0.04μg/ml加入在PBS/1%BSA中的檢測抗體抗兔HRP(sc-2004,Tebubio)，並在室溫下培養1小時。用PBS/0.05%吐溫20洗滌板三次，並加入100μ1底物緩衝液(底物緩衝液是在使用前不久通過將1片IOmg來自Sigma的鄰-苯二胺(OPD)禾口125μ1的3%H2O2加入至25mlOPD緩衝液(35mM檸檬酸，66mMNa2HPO4,ρΗ5·6)而製備的)。在5至10分鐘後，通過每孔加入50μ1終止緩衝液(1ΜH2SO4)來終止顏色反應。使用Biorad微板讀數器測量在雙波長490/655nm處的吸光度，然後分析結果。對於每個試驗，平行進行對照(不含藥物)和空白培養(不含細胞或藥物)。從所有的對照值和樣品值減去空白值。對於每個樣品，P53的值(吸光度單位)表示為存在於對照中的P53值的百分比。高於140%的百分比保持定義為顯著。本文中，試驗化合物的效果表示為提供至少140%的存在於對照中的p53的值的最低劑量(LAD)(參見下表3)。在一些實驗中，使所述分析適合於並在384孔培養板中使用。表3.在以上p53ELISA規程(protocol)(A2780細胞)中試驗的化合物的結果C.2增殖分析將人U87MG膠質瘤細胞在補充有2ML_穀氨醯胺、ImM丙酮酸鈉、1.5g/L碳酸氫鈉、50ug/ml慶大黴素和10%熱失活胎牛血清的DMEM培養基中培養。(U87MG細胞為帶有野生型p53的人膠質母細胞瘤細胞。在該細胞系中MDM2密切地控制p53表達)。人A2780卵巢癌細胞為由T.C.Hamilton博士(FoxChase癌症中心，Pennsylvania,U.S.A.)慷慨贈予。將所述細胞配培養在補充有2mML-穀氨醯胺，50ug/ml健大黴素和10%胎牛血清的RPMI1640培養基中。用於艾瑪藍(AlamarBlue)分析的試劑刃天青(Resazurin)購自Aldrich(產品編號199303)。亞鐵氰化鉀、鐵氰化鉀、KH2P04和K2HP04購自Sigma(產品編號分別為P9387、P8131、P5655和P8281)。如下製備磷酸鉀緩衝液0.1M(PPB)將2.72g腿#04和13.86gK2HP04溶解在500mlmi11i-Q水中，將pH調節至pH7.4，並用mi11i-Q水使體積達到1升；將緩衝液過濾滅菌，並貯存在室溫下。通過將45mg刃天青溶解在15mlPBS中新鮮製備刃天青母液(PPB-A)。通過將0.987g亞鐵氰化鉀溶解在100mlPPB中製備30mM亞鐵氰化鉀(PPB-B)。通過將1.266g鐵氰化鉀溶解在100mlPPB中製備30mM鐵氰化鉀(PPB-C)。通過將等體積的各自溶液混合來製備PPB-A、PPB_B和PPB-C的混合物。通過將所述混合物在PPB中稀釋20倍(體積/體積)並且過濾滅菌來製備刃天青工作溶液(本文中稱為「艾瑪藍」溶液)；所述艾瑪藍溶液可以在4°C下保存最多兩周。艾瑪藍分析程序為了在384孔板中實驗，將細胞以5X103個細胞/ml的密度接種在Falcon384孔培養板中(LifeTechnologies，Merelbeke，Belgium)，所述板呈黑色而具有透明底部，於45yl培養基中。允許細胞粘附至塑料孔，保持24小時。將試驗化合物預稀釋(1/50於培養基中)，並將5yl預稀釋的化合物加入到孔中。4天培養之後，向各孔中加入10u1艾瑪藍溶液，並將細胞在37°C下進一步培養5小時(A2780)或6小時(U87MG)。用螢光讀板儀(Fluorskan,Labsystems,540nm激發波長和590nm發射波長)測量各孔的螢光強度。抗增殖活性計算為在處理對對照(未處理細胞)條件下保持存活的細胞的百分比。在實驗中，各個試驗條件的結果為3個重複孔的平均值。適當時，重複實驗直至建立完整的濃度反應曲線。適當時，使用分級數據的概率單位分析計算IC5tl-值(降低細胞生長至對照的50%所需的藥物的濃度)(Finney,D.J.，ProbitAnalyses，第2版，第10章，GradedResponses,CambridgeUniversityPress,Cambridge1962)。Ιψ，i式Hb^^lJ白勺雙胃表示為PlC5tl(IC5tl-值的負對數值)(參見表4)。表4.以上細胞增殖規程中試驗的化合物的結果表示大約D.分析數據液相餼譜(LC)的一般程序使用UPLC(超高效液相色譜)Acquity(Waters)系統進行LC測量，所述系統包含具有脫氣裝置的二元泵、自動取樣器、二極體陣列檢測器(DAD)和在以下各自方法中指明的柱，所述柱保持在40°C的溫度下。來自柱的流被帶到MS檢測器。所述MS檢測器配置有電噴霧電離源。毛細管針電壓為3kV，且於Quattro(購自Water的三重四極質譜儀)上，該電離源的溫度保持在130°C。氮氣用作為噴霧器氣體。用Waters-MicromassMassLynx-Openlynx數據系統進行數據獲得。除了以上的一般程序，在WatersAcquityBEH(橋連的乙基矽氧烷/矽雜交體)C18柱(1.7微米，2.1X100mm)上以0.35ml/分鐘的流速進行反相UPLC。採用兩種流動相(流動相A:95%7mM乙酸銨乙腈；流動相B100%乙腈)來運行以下梯度條件在3.5分鐘內從90%A和10%B(保持0.5分鐘)至8%A和92%B,保持2分鐘，在0.5分鐘內回到初始條件，保持1.5分鐘。使用2微升的注射體積。正和負離子化模式的錐電壓為20V。通過使用0.1秒的間隔掃描延遲在0.2秒鐘內從100至1000進行掃描來獲得質譜。表5分析的LCMS數據Rt為以分鐘計的保留時間；[MH+]表示化合物的質子化質量；E.組合物實施例薄膜包衣片片芯的製備將IOOg式(I)化合物、570g乳糖和200g澱粉的混合物充分混合，然後用5g十二烷基硫酸鈉和IOg聚乙烯-吡咯烷酮在約200ml水中的溶液潤溼。將溼粉末混合物過篩，乾燥並再次過篩。然後，加入IOOg的微晶纖維素和15g的氫化植物油。將全部物質充分混合併壓製成片，得到10.000片，每片包含IOmg式(I)化合物。包衣將5g的乙基纖維素在150ml二氯甲烷中的溶液加入到IOg甲基纖維素在75ml變性乙醇中的溶液中。然後，加入75ml二氯甲烷和2.5ml的1，2，3_丙三醇。使IOg聚乙二醇熔融並將其溶於75ml的二氯甲烷中。將後者溶液加入到前者中，然後加入2.5g十八酸鎂、5g的聚乙烯吡咯烷酮和30ml濃縮的有色混懸液，並將全部物質均質化。在包衣裝置中，用如此得到的混合物包衣所述片芯。權利要求式(I)化合物；包括任何其立體化學異構體形式；其N-氧化物形式；其加成鹽或其溶劑合物，其中m為0、1或2，且當m為0，則意指直接的鍵；n為0、1、2或3，且當n為0，則意指直接的鍵；p為0或1，且當p為0，則意指直接的鍵；s為0或1，且當s為0，則意指直接的鍵；t為0或1，且當t為0，則意指直接的鍵；X為C(＝O)或CHR8，其中R8選自氫；C1-6烷基；C3-7環烷基；-C(＝O)-NR17R18；羧基；芳基C1-6烷氧基羰基；雜芳基；雜芳基羰基；雜芳基C1-6烷氧基羰基；哌嗪基羰基；吡咯烷基；哌啶基羰基；C1-6烷氧基羰基；被選自羥基、氨基、芳基和雜芳基的取代基取代的C1-6烷基；被選自羥基、氨基、芳基和雜芳基的取代基取代的C3-7環烷基；被選自羥基、羥基C1-6烷基和羥基C1-6烷氧基C1-6烷基的取代基取代的哌嗪基羰基；被羥基C1-6烷基取代的吡咯烷基；和被選自羥基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基(二羥基)C1-6烷基和C1-6烷氧基(羥基)C1-6烷基的一個或兩個取代基取代的哌啶基羰基；R17和R18各自獨立選自氫、C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羥基C1-6烷基、羥基C1-6烷基(C1-6烷基)或羥基C1-6烷基(芳基C1-6烷基)；為-CR9＝C＜，且虛線為鍵；-C(＝O)-CH＜；-C(＝O)-N＜；-CHR9-CH＜或-CHR9-N＜，其中每個R9獨立為氫或C1-6烷基，或其中R9與R2或R20中的一個一起形成直接的鍵；R1為氫；芳基；雜芳基；C1-6烷氧基羰基；C1-12烷基；或被一個或兩個取代基取代的C1-12烷基，所述取代基獨立選自羥基、芳基、雜芳基、氨基、C1-6烷氧基、單或二(C1-6烷基)氨基、嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、C1-6烷基哌嗪基、芳基C1-6烷基哌嗪基、雜芳基C1-6烷基哌嗪基、C3-7環烷基哌嗪基和C3-7環烷基C1-6烷基哌嗪基；R2和R20各自獨立選自滷素、羥基、氰基、硝基、羧基；多滷代C1-6烷基、多滷代C1-6烷氧基；C1-6烷基、C3-7環烷基、C2-6烯基、芳基、雜芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基C1-6烷基、C3-7環烷基C1-6烷基、嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、C1-6烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、C1-6烷硫基、芳硫基、雜芳硫基、C1-6烷基羰基、C3-7環烷基羰基、芳基羰基、雜芳基羰基、C1-6烷氧基羰基、C3-7環烷氧基羰基、芳氧基羰基、雜芳氧基羰基、C1-6烷基羰基氧基、C3-7環烷基羰基氧基、芳基羰基氧基或雜芳基羰基氧基，所述基團中的任一種任選且獨立地被一個或多個、優選一個或兩個選自以下的取代基取代滷素、羥基、氰基、硝基、羧基、氨基、單或二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基、多滷代C1-6烷基、芳基、雜芳基、C1-6烷氧基、C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基羰基和C1-6烷基羰基氧基；以及-(CH2)w-(C(＝O))yNR21R22，其中w為0、1、2、3、4、5或6，且當w為0，則意指直接的鍵；y為0或1，且當y為0，則意指直接的鍵；R21和R22各自獨立選自氫、C1-6烷基、C3-7環烷基、C1-6烷基羰基和芳基C1-6烷基羰基，所述基團中的任一種任選且獨立地被一個或多個、優選一個或兩個選自以下的取代基取代滷素、羥基、氨基、單或二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基、多滷代C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基和雜芳基；或R21和R22與它們所連接的氮一起形成嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基或哌嗪基，所述基團中的任一種任選且獨立地被一個或多個、優選一個或兩個選自以下的取代基取代C1-6烷基、多滷代C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-7環烷基、C3-7環烷基C1-6烷基、芳基C1-6烷基和雜芳基C1-6烷基；或R2和R20與它們所連接的苯環一起形成萘基，其任選被一個或多個、優選一個或兩個獨立選自以下的取代基取代滷素、羥基、氨基、單-或二-(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基、多滷代C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基和雜芳基；或R2和R20一起形成式-(CH2)b-的二價基團，其中b為3、4或5，所述二價基團任選被一個或多個、優選一個或兩個選自以下的取代基取代滷素、羥基、氨基、單-或二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基、多滷代C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基和雜芳基；或R2或R20中的一個如以上所定義，且R2或R20中的另一個與R9一起形成直接的鍵；R3為氫；C1-6烷基；雜芳基；C3-7環烷基；被選自羥基、氨基、芳基和雜芳基的取代基取代的C1-6烷基；或被選自羥基、氨基、芳基和雜芳基的取代基取代的C3-7環烷基；R4和R5各自獨立為氫、滷素、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、多滷代C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、羥基、氨基、C2-6烯基或C1-6烷氧基；或R4和R5一起形成選自亞甲二氧基或亞乙二氧基的二價基團；R6為氫、C1-6烷氧基羰基或C1-6烷基；當p為1，則R7為氫、芳基C1-6烷基、羥基或雜芳基C1-6烷基；Z為選自以下的基團其中R10或R11各自獨立選自氫、滷素、羥基、氨基、C1-6烷基、硝基、多滷代C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、四唑基C1-6烷基、芳基、雜芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基C1-6烷基、芳基(羥基)C1-6烷基、雜芳基(羥基)C1-6烷基、芳基羰基、雜芳基羰基、C1-6烷基羰基、芳基C1-6烷基羰基、雜芳基C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基、C3-7環烷基羰基、C3-7環烷基(羥基)C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C1-6烷氧基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C2-6烯基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氧基、氨基羰基、羥基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羥基羰基、羥基羰基C1-6烷基和-(CH2)v-(C(＝O))r-(CHR19)u-NR13R14，其中v為0、1、2、3、4、5或6，且當v為0，則意指直接的鍵；r為0或1，且當r為0，則意指直接的鍵；u為0、1、2、3、4、5或6，且當u為0，則意指直接的鍵；R19為氫或C1-6烷基；R13和R14各自獨立選自氫；C1-12烷基；C1-6烷基羰基；C1-6烷基磺醯基；芳基C1-6烷基羰基；C3-7環烷基；C3-7環烷基羰基；-(CH2)k-NR15R16；被選自羥基、羥基羰基、氰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氧基、芳基或雜芳基的取代基取代的C1-12烷基；或被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基、氨基、芳基C1-6烷基、雜芳基或雜芳基C1-6烷基的取代基取代的C3-7環烷基；或R13和R14與它們所連接的氮一起形成嗎啉基；哌啶基；吡咯烷基；哌嗪基；或被選自以下的取代基取代的哌嗪基C1-6烷基、芳基C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基羰基、雜芳基C1-6烷基、C3-7環烷基和C3-7環烷基C1-6烷基；其中k為0、1、2、3、4、5或6，且當k為0，則意指直接的鍵；R15和R16各自獨立選自氫；C1-12烷基；芳基C1-6烷氧基羰基；C3-7環烷基；被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基和雜芳基的取代基取代的C1-12烷基；以及被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基和雜芳基C1-6烷基的取代基取代的C3-7環烷基；或R15和R16與它們所連接的氮一起形成嗎啉基、哌嗪基或被C1-6烷氧基羰基取代的哌嗪基；R12為氫；C1-6烷基；C3-7環烷基；被選自羥基、氨基、C1-6烷氧基和芳基的取代基取代的C1-6烷基；被選自羥基、氨基、芳基和C1-6烷氧基的取代基取代的C3-7環烷基；芳基為苯基或萘基；每個苯基或萘基可任選被一個、兩個或三個取代基取代，所述取代基各自獨立選自滷素、羥基、C1-6烷基、氨基、多滷代C1-6烷基和C1-6烷氧基；以及每個苯基或萘基可任選被選自亞甲二氧基和亞乙二氧基的二價基團取代；雜芳基為吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噁二唑基、四唑基、苯並呋喃基或四氫呋喃基；每個吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噁二唑基、四唑基、苯並呋喃基或四氫呋喃基可任選被一個、兩個或三個取代基取代，所述取代基各自獨立選自滷素、羥基、C1-6烷基、氨基、多滷代C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基或C1-6烷氧基；或每個吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、苯並呋喃基或四氫呋喃基可任選被選自亞甲二氧基和亞乙二氧基的二價基團取代。FPA00001140835900011.tif,FPA00001140835900012.tif,FPA00001140835900031.tif2.根據權利要求ι的化合物，其中R4和R5各自獨立為氫、滷素、Ch6烷基、多滷代Ch6烷基、氰基、氰基Ch6烷基、羥基、氨基或Ch6烷氧基；或R4和R5—起形成選自亞甲二氧基或亞乙二氧基的二價基團；R15和R16各自獨立選自氫；CV6烷基；芳基Cp6烷氧基羰基；C3_7環烷基；被選自羥基、CV6烷氧基、芳基和雜芳基的取代基取代的Ch2烷基；以及被選自羥基、C1^6烷氧基、芳基、芳基(V6烷基、雜芳基和雜芳基CV6烷基的取代基取代的c3_7環烷基；或R15和R16與它們所連接的氮一起形成嗎啉基、哌嗪基或被CV6烷氧基羰基取代的哌嗪基。3.根據權利要求1或2的化合物，其中一為-CR9=C<，且虛線為鍵；-c(=0)-CH<；-CHR9-CH<或-CHR9-N<，其中每個R9獨立為氫或C1^烷基，或其中R9連同R2或R2tl中的一個形成直接的鍵。4.根據權利要求3的化合物，其中一Q=YC為-CR9=C<，且虛線為鍵；-CHR9-CH<或-CHR9-N<。5.根據權利要求4的化合物，其中一(3^￥<為-CR9=C<，且虛線為鍵。6.根據權利要求1或2的化合物，其中X為C(=0)或CHR8，且R8為氫；-c(=0)-NR17R18；芳基C1^6烷氧基羰基；被羥基取代的Cp6烷基；被羥基取代的哌嗪羰基；輕基Cp6烷基；輕基Cp6烷氧基Cp6烷基；被羥基CV6烷基取代的吡咯烷基；或被一個或兩個選自以下的取代基取代的哌啶基羰基羥基、CV6烷基、羥基Ch6烷基、C1^6烷氧基Ch6烷基、CV6烷氧基(二羥基)CV6烷基或Ch6烷氧基(羥基)C1-6焼基；R17和R18各自獨立選自氫、Cp6烷基、二((V6烷基)氨基Cp6烷基、芳基Cp6烷基、CV6烷氧基Cp6烷基或羥基Ch6烷基；—Q=·^為_cr9=C<、-CHR9-CH<或-CHR9-N<；R1為氫、雜芳基、CV6烷氧基羰基、C1^12烷基或被雜芳基取代的CV12烷基；R3為氫，CV6烷基或雜芳基；R4和R5各自獨立為氫、滷素、Cp6烷基、氰基、氰基Cp6烷基、羥基或CV6烷氧基；當P為1，則R7為芳基CV6烷基或羥基；Z為選自(a-1)、(a-2)、(a_3)、(a_4)、(a_5)、(a_6)、(a_7)、(a_8)和(a_9)的基團；Rltl或R11各自獨立選自氫、滷素、羥基、氨基、Cp6烷基、硝基、多滷代CV6烷基、氰基、氰基(V6烷基、四唑基CV6烷基、芳基、雜芳基、雜芳基Ch6烷基、芳基(羥基)CV6烷基、芳基羰基、C1-B燒基羰基、c3_7環燒基羰基、C3_7環燒基(輕基)C1-6焼基、方基C卜6烷氧基C1-6焼基、C^6烷氧基Cp6烷氧基Ch6烷基、Ch6烷基羰基氧基Ch6烷基、Ch6烷氧基羰基Ch6烷氧基Ch6烷基、羥基Ch6烷氧基Ch6烷基、CV6烷氧基羰基c2_6烯基、CV6烷氧基CV6烷基、C1^6烷氧基羰基、氨基羰基、羥基CV6烷基、氨基CV6烷基、羥基羰基、羥基羰基CV6烷基和-(CH2)v-(C(=0))r-(CHR19)u-NR13R14；ν為或1；u為或1；R12為氫或Cp6烷基；R13和R14各自獨立選自氫烷基；Cp6烷基羰基；CV6烷基磺醯基；芳基Cp6烷基羰基；C3_7環烷基羰基；-(CH2)k-NR15R16；被選自羥基、羥基羰基、氰基、Cp6烷氧基羰基或芳基的取代基取代的Ch2烷基；或R13和R14與它們所連接的氮一起形成嗎啉基、吡咯烷基、哌嗪基或被選自CV6烷基或芳基Cp6烷氧基羰基的取代基取代的哌嗪基；k為2;R15和R16各自獨立選自氫、C1^6烷基或芳基。烷氧基羰基；或R15和R16與它們所連接的氮一起形成嗎啉基或哌嗪基、或被CV6烷氧基羰基取代的哌嗪基；芳基為苯基或被滷素取代的苯基；以及雜芳基為吡啶基、吲哚基、噁二唑基或四唑基；且每個吡啶基、吲哚基、噁二唑基或四唑基可任選被一個選自Cp6烷基、芳基或芳基Cp6烷基的取代基取代。7.根據權利要求1、35中任一項的化合物，其中s為O;t為O;m為O;p為O;n為1或2為氫；R3為氫；R4和R5各自獨立為氫、CV6烷基、CV6烷氧基、羥基C1^6烷基、C2_6烯基；R6為氫；一Q=Y之為-CR9=C<，且虛線為鍵；R9為氫或Cp6烷基；X為CH2；Z為選自(a-1),(a-2)或(a-4)的基團；Rltl和R11各自獨立選自氫、羥基和羥基C^6烷基。8.根據權利要求17中任一項的化合物，其中R2和R2°各自獨立選自滷素、氰基、多滷代CV6烷基、CV6烷基、嗎啉基、CV6烷氧基、羥基Ch6烷基、-NR21R22,其中R21為氫，且R22為CV6烷基羰基；或R2和R2°與它們所連接的苯環一起形成萘基，或R2或R2°中的一個如以上所定義，且R2和R2°中的另一個與R9—起形成直接的鍵。9.根據權利要求1的化合物；包括其任何立體化學異構體形式；其N-氧化物形式；其加成鹽或其溶劑合物，其中所述化合物選自10.根據權利要求19中任一項的化合物，其用作藥物。11.藥物組合物，其包含藥學上可接受的載體和作為活性成分的治療有效量的權利要求19所要求保護的化合物。12.權利要求19中任一項的化合物在製備治療由p53-MDM2相互作用所介導的病症的藥物中的用途。13.權利要求19中任一項的化合物在製備治療癌症的藥物中的用途。14.根據權利要求13用途，其中所述癌症為乳腺癌、結腸直腸癌、非小細胞肺癌或急性髓細胞源性白血病。15.抗癌藥和權利要求19中任一項的化合物的組合。16.製備權利要求1所要求保護的化合物的方法，其特徵在於a)使式(IV)的中間體與式(V)的中間體反應，其中W為適當的離去基團其中各變量如權利要求1中所定義；b)在氫化鋁鋰的存在下，於合適的溶劑中，將其中X為c(=o)的式(I)化合物，在本文中稱為式(I-b)化合物，轉化成其中X為CH2的式(I)化合物，在本文中稱為式(I-a)化合物，其中各變量如權利要求1中所定義；c)使式(VI)的醛與式(VII)的中間體反應其中各變量如權利要求1中所定義；d)使式(IV)的中間體與式HC(=0)Z的醛反應，以獲得其中t為1的式⑴化合物，在本文中稱為式(I-c)化合物，其中各變量如權利要求1中所定義；e)使式(VIII)的中間體與氫化鋁鋰在合適的溶劑中反應，以獲得其中s為1的式(I)化合物，在本文中稱為式(i-d)化合物其中各變量如權利要求1中所定義；f)使式(XXIV)的中間體與氫化鋁鋰在合適的溶劑中反應，以獲得其中R4為-CH2-OH的式(I)化合物，在本文中稱為式(I-e)化合物，其中各變量如權利要求1中所定義；g)在強酸的存在下，於合適的溶劑中，將式(XIX)的中間體轉化，以獲得式(III)化合物，其中各變量如權利要求1中所定義；h)使其中s為0，R3為氫，HC為-CR9=C<，且R9與R2°—起形成直接的鍵的式(IV)的中間體，本文中稱為式(IV-C)的中間體，與其中W為合適的離去基團的式(V)的中間體在反應惰性溶劑中反應，以獲得其中s為0，且R3為氫的式(III)化合物，在本文中稱為式(ΙΙΙ-a)化合物，其中各變量如權利要求1中所定義；h)從式(XXII)和(XXIII)的中間體開始進行費歇爾吲哚合成，以獲得其中R6為氫的式(III)化合物，本文稱為式(ιιι-b)化合物，其中各變量如權利要求1中所定義。全文摘要本發明提供式(I)的化合物，其作為p53-MDM2相互作用的抑制劑的用途，以及包含所述化合物的藥物組合物其中n、m、p、s、t、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R20、X、Y、Q和Z具有經定義的含義。文檔編號A61P35/00GK101868453SQ200880117463公開日2010年10月20日申請日期2008年9月18日優先權日2007年9月21日發明者B·肖恩特斯,P·-H·斯託克,S·考帕,V·S·龐策萊特申請人:詹森藥業有限公司