乙醇注入-動態高壓微射流製備丁香酚納米脂質體的方法
2023-07-16 13:37:11 2
乙醇注入-動態高壓微射流製備丁香酚納米脂質體的方法
【專利摘要】一種乙醇注入-動態高壓微射流製備丁香酚納米脂質體的方法，是以丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫為原料，採用乙醇注入-動態高壓微射流法製備得到納米脂質體。本發明製備的脂質體平均粒徑為58.6±3.4nm，分布係數為0.381±0.053，包封率達到了59.2%±4.7%，它具有緩釋性，24h後有76.6%的丁香酚釋放出來。
【專利說明】乙醇注入-動態高壓微射流製備丁香酚納米脂質體的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及涉及水溶性藥物納米脂質體的製備方法，具體涉及一種乙醇注入-動態高壓微射流製備丁香酚納米脂質體的方法。
【背景技術】
[0002]丁香酚具有消炎、止痛、抗氧化、抑菌等功能，是保健食品、藥品等的潛在使用對象，但它較差的水溶性限制了其在食品中的應用。脂質體(liposome)是由磷脂雙分子層形成的內部包含水相的封閉囊泡。研究表明，脂質體具有緩釋性、細胞親和性、組織相容性和靶向性等優點，已成功應用於生物醫藥、化工農業等領域。脂質體用於包裹營養素、酶、食品添加劑、食品抗菌劑等食品運載體系顯示出誘人前景。利用脂質體技術將丁香酚包封起來，可以克服丁香酚上述缺點。乙醇注入-動態高壓微射流法製備的脂質體可以克服粗脂質體粒徑大，不穩定等缺點，同時乙醇注入法突破了薄膜法洗膜難和小批量生產的障礙。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是為優化丁香酚脂質體的製備工藝，提高脂質體的穩定性，評價丁香酚脂質體的抗菌活性、儲藏穩定性等，為丁香酚脂質體的開發提供一種乙醇注入-動態高壓微射流製備丁香酚納米脂質體的方法。
[0004]本發明所述方法包括:
(O 丁香酚納米脂質體的組分丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80、pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液與無水乙醇的質量體積比為:在IOOmL pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液中:丁香酚0.38-1.16g、卵磷脂2.32-6.99g、膽固醇0.35-1.04g、吐溫-80 0.52-1.55g、無水乙醇 25-35mL ；
(2)按上述重量百分比分別稱取丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80，在40-50°C條件下，溶於無水乙醇；
(3)將步驟(2)中所得溶液緩慢注入到pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液中，在攪拌的條件下將形成乳液；
(4)將步驟(3)中所得乳液移入圓底瓶，置於真空旋轉蒸發儀上，在50°C水浴條件下除去乙醇，用磷酸鹽緩衝溶液定溶，得到丁香酚粗脂質體；
(5)用動態高壓微射流處理步驟(4)得到的粗脂質體，壓力為120MPa，處理I次，即得丁香酚納米脂質體。
[0005]本發明的有益效果是:
(I)包封率:乙醇注入-動態高壓微射流法製備的丁香酚納米脂質體的具有比較高的包封率，包封率達到59.2%±4.7。
[0006](2)粒徑:乙醇注入-動態高壓微射流法製備的丁香酚納米脂質體的平均粒徑為58.6±3.4nm，分布係數為 0.381 ±0.053。
[0007](3)微觀形貌圖:乙醇注入-動態高壓微射流法製備的丁香酚納米脂質體，其透射電鏡圖如圖2所示，脂質體成球形，大小及分布都比較均勻。
[0008](4)乙醇注入-動態高壓微射流法製備的丁香酚納米脂質體具有緩釋性，24h後有76.6%的丁香酚釋放出來，其釋放曲線如圖3所示。
[0009](5)儲藏穩定性:分別將製備好的丁香酚納米脂質體與丁香酚微乳(將丁香酚和吐溫-80溶於PBS溶液中，持續攪拌)置於4°C和室溫環境中，每隔一周測其粒徑分布及包封率。如圖4所示，丁香酚微乳有明顯的油狀沉澱，而丁香酚納米脂質體則較為穩定。而圖5所展示的平均粒徑及包封率變化也證明丁香酚納米脂質體在儲藏期間較為穩定。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0010]圖1為乙醇注入-動態高壓微射流法製備丁香酚納米脂質體的工藝路線圖；
圖2為丁香酚納米脂質體透射電鏡圖；
圖3為丁香酚納米脂質體及丁香酚微乳的體外釋放曲線；
圖4為丁香酚納米脂質體及丁香酚微乳在4°C及室溫環境中穩定性觀察圖；
圖5為丁香酚納米脂質體及丁香酚微乳在4°C及室溫環境中粒徑及包封率隨時間的變化。
【具體實施方式】
[0011]實施例1
稱取48.5g卵磷脂、6.6g膽固醇、12.2g吐溫-80和8.2g 丁香酚，完全溶解於0.32L無水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到I L pH7.4、濃度為0.05M的磷酸鹽緩衝溶液中，形成乳液，然後將其轉移到到圓底瓶中，在50°C水浴條件下真空旋轉除去無水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質體，形成的均勻懸濁液即為粗脂質體。將粗脂質體加入到動態高壓微射流(DHPM)中，於120MPa條件下微流化處理I次，即製備得到丁香酚納米脂質體。製得的納米脂質體為較透明乳白色溶液。製得的丁香酚納米脂質體的包封率為60.1%，平均粒徑為60.4nm，分布係數為0..332，在體外釋放試驗中，經24h釋放後有78%的丁香酚釋放出來。
[0012]實施例2
稱取47.9g卵磷脂、6.1g膽固醇、12.2g吐溫-80和8.0g 丁香酚，完全溶解於0.28L無水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到IL pH 7.4、濃度為0.05M的磷酸鹽緩衝溶液中，形成乳液，然後將其轉移到到圓底瓶中，在50°C水浴條件下真空旋轉除去無水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質體，形成的均勻懸濁液即為粗脂質體。將粗脂質體加入到動態高壓微射流(DHPM)中，於120MPa條件下微流化處理I次，即製備得到丁香酚納米脂質體。製得的納米脂質體為較透明乳白色溶液。製得的丁香酚納米脂質體的包封率為58.6%，平均粒徑為58.4nm，分布係數為0..312，在體外釋放試驗中，經24h釋放後有77.1%的丁香酚釋放出來。
[0013]實施例3
稱取42.5g卵磷脂、5.7g膽固醇、10.5g吐溫-80和7.1g 丁香酚，完全溶解於0.31L無水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到IL pH 7.4、濃度為0.05M的磷酸鹽緩衝溶液中，形成乳液，然後將其轉移到到圓底瓶中，在50°C水浴條件下真空旋轉除去無水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質體，形成的均勻懸濁液即為粗脂質體。將粗脂質體加入到動態高壓微射流(DHPM)中，於120MPa條件下微流化處理I次，即製備得到丁香酚納米脂質體。製得的納米脂質體為較透明乳白色溶液。製得的丁香酚納米脂質體的包封率為58.9%，平均粒徑為60.1nm，分布係數為0..331，在體外釋放試驗中，經24h釋放後有73.2%的丁香酚釋放出來。
[0014]實施例4
稱取55.8g卵磷脂、7.4g膽固醇、13.8g吐溫-80和9.3g 丁香酚，完全溶解於0.31L無水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到IL pH 7.4、濃度為0.05M的磷酸鹽緩衝溶液中，形成乳液，然後將其轉移到到圓底瓶中，在50°C水浴條件下真空旋轉除去無水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質體，形成的均勻懸濁液即為粗脂質體。將粗脂質體加入到動態高壓微射流(DHPM)中，於120MPa條件下微流化處理I次，即製備得到丁香酚納米脂質體。製得的納米脂質體為較透明乳白色溶液。製得的丁香酚納米脂質體的包封率為61.2%，平均粒徑為58.3nm，分布係數為0..323，在體外釋放試驗中，經24h釋放後有75.6%的丁香酚釋放出來。
【權利要求】
1.一種乙醇注入-動態高壓微射流製備丁香酚納米脂質體的方法，其特徵是: (O 丁香酚納米脂質體的組分丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80、pH=7.4濃度為.0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液與無水乙醇的質量體積比為:在IOOmL pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液中:丁香酚0.38-1.16g、卵磷脂2.32-6.99g、膽固醇0.35-1.04g、吐溫-80 0.52-1.55g、無水乙醇 25-35mL ； (2)按上述重量百分比分別稱取丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80，在40-50°C條件下，溶於無水乙醇； (3)將步驟(2)中所得溶液緩慢注入到pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩衝溶液中，在攪拌的條件下將形成乳液； (4)將步驟(3)中所得乳液移入圓底瓶，置於真空旋轉蒸發儀上，在50°C水浴條件下除去乙醇，用磷酸鹽緩衝溶液定溶，得到丁香酚粗脂質體； (5)用動態高壓微射流處理步驟(4)得到的粗脂質體，壓力為120MPa，處理I次，即得丁香酚納米脂質體。
【文檔編號】A23P1/04GK104012991SQ201410219656
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2014年5月23日 優先權日:2014年5月23日
【發明者】劉偉, 彭盛峰, 鄒立強, 劉成梅 申請人:南昌大學