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一種含酶與陳皮提取物的漱口水及其製備方法

2023-05-27 05:08:26 2

一種含酶與陳皮提取物的漱口水及其製備方法
【專利摘要】本發明屬於口腔護理【技術領域】,公開了一種含酶與陳皮提取物的漱口水及其製備方法。所述漱口水由陳皮提取物、α-葡聚糖酶(≥50U/mg)、β-葡聚糖酶(≥50U/mg)、α-澱粉酶(≥50U/mg)、薄荷提取物、食鹽以及水組成;每100mL漱口水包含2.5~10mL的陳皮提取物、0.25~10mg的α-葡聚糖酶、0.25~10mg的β-葡聚糖酶、0.25~10mg的α-澱粉酶、2.5~5mL的薄荷提取物以及1g食鹽。本發明所製備的漱口水清除牙菌斑效果顯著、有效抑制需氧、厭氧菌生長,特別對鏈球菌的增殖有明顯抑制作用;安全、綠色、環保;同時又能清新口氣。
【專利說明】一種含酶與陳皮提取物的漱口水及其製備方法

【技術領域】
[0001] 本發明屬於口腔護理【技術領域】,涉及一種漱口水,特別涉及一種含酶與陳皮提取 物的漱口水及其製備方法。

【背景技術】
[0002] 牙菌斑是口腔菌群、特別是與齲齒密切相關的變形鏈球菌在牙齒上形成的生物膜 群落,富含葡聚糖和果聚糖等多糖成分,可提高其中細菌耐受和對抗外界脅迫的能力,相當 於口腔細菌生長的"溫床"和"保護傘"。牙菌斑一旦大量形成,將有助於口腔致齲細菌的快 速滋生,引發齲齒、牙齦炎和其他口腔疾病,更甚者會增加罹患其他全身疾病的風險。目前 的口腔漱口水大多關注對口腔細菌個體的消滅作用,如添加溶菌酶來殺菌抑菌,較少關注 對已形成生物膜群落-牙菌斑的清除效果。


【發明內容】

[0003] 為了克服現有技術的缺點和不足,本發明的目的在於提供一種含酶與陳皮提取物 的漱口水。所述漱口水能有效清除牙菌斑,同時抑制口腔需氧和厭氧細菌的生長,用於口腔 日常護理。
[0004] 本發明的另一目的在於提供上述含酶與陳皮提取物的漱口水的製備方法。
[0005] 本發明的目的通過以下技術方案實現:
[0006] -種含酶與陳皮提取物的漱口水,由陳皮提取物、α-葡聚糖酶(彡50U/mg)、 β -葡聚糖酶(彡50U/mg)、α -澱粉酶(彡50U/mg)、薄荷提取物、食鹽以及水組成。
[0007] 所述漱口水中各物質的用量關係為每100mL的漱口水由2. 5?10mL的陳皮提取 物、0· 25?10mg的α -葡聚糖酶、〇· 25?10mg的β -葡聚糖酶、0· 25?10mg的α -澱粉 酶、2. 5?5mL的薄荷提取物、lg的食鹽以及餘量水組成。
[0008] 所述陳皮提取物的製備方法為將陳皮粉末加入乙醇溶液A中,均質,離心,取上清 液;向離心後的沉澱中再加入乙醇溶液B,繼續均質、離心,取上清液,如此反覆處理,最後 將各上清液合併、旋轉蒸發濃縮,得到陳皮濃縮物;向陳皮濃縮物中加入水溶解,儲存,得到 陳皮提取物。
[0009] 所述陳皮粉末與乙醇溶液A的質量體積比為2. 0g :30mL ;所述乙醇溶液A與乙醇 溶液B濃度和用量相同;乙醇溶液A體積濃度為80?100%;所述乙醇溶液A與B為4°C預 冷的乙醇溶液。
[0010] 所述陳皮粉末與水的質量體積比為2. 0g :10mL。
[0011] 所述水為反滲透純淨水。
[0012] 所述均質採用高速均質機進行均質,均質的轉速為10000?12000rpm,均質時間 為 5 ?10min ;
[0013] 所述離心轉速為3000?5000rpm,離心時間為3?8min ;
[0014] 所述反覆處理次數為3?6次;
[0015] 所述蒸發濃縮採用的儀器為旋轉蒸發儀,於40°C下真空旋轉蒸發濃縮至陳皮濃縮 物中沒有流動的液體;
[0016] 所述儲藏的溫度為-40°c。
[0017] 所述薄荷提取物的製備方法為將薄荷加入乙醇中,均質,離心,取上清液,旋轉蒸 發濃縮,得到薄荷濃縮物;向薄荷濃縮物中加入水溶解,儲存,得到薄荷提取物。
[0018] 所述薄荷與乙醇的質量體積比為2. 0g :30mL ;所述薄荷與水的質量體積比為 2. 0g : 10mL。
[0019] 所述水為反滲透純淨水。
[0020] 所述均質採用高速均質機進行均質,均質的轉速為lOOOOrpm,均質時間為lOmin ; 所述離心轉速為5000rpm,離心時間為lOmin ;
[0021] 所述蒸發濃縮採用的儀器為旋轉蒸發儀,於40°C下真空旋轉蒸發濃縮至陳皮濃縮 物中沒有流動的液體;
[0022] 所述儲藏的溫度為_40°C。
[0023] 所述含酶與陳皮提取物的漱口水的製備方法,包括以下步驟:
[0024] (1)將陳皮提取物、α-葡聚糖酶、β-葡聚糖酶、α-澱粉酶、薄荷提取物以及食 鹽溶於水中,得到混合液;
[0025] (2)將步驟⑴中混合液離心,過濾,得到含酶與陳皮提取物的漱口水。
[0026] 步驟(1)中所述水為反滲透純淨水;
[0027] 步驟⑵中所述離心條件為離心轉速為5000?lOOOOrpm,離心時間為5?lOmin, 離心溫度為4?20°C ;
[0028] 步驟(2)中所述過濾採用滅菌的濾膜過濾,濾膜的孔徑為0. 22 μ m。
[0029] α-葡聚糖酶作用於α-葡聚糖的1,6糖苷鍵;β-葡聚糖酶專一作用於β-葡聚 糖的1,3及1,4糖苷鍵;α -澱粉酶可作用於α -1,4-葡聚糖,無差別地隨機切斷糖鏈內部 的α-1,4_糖苷鍵。這三種酶組合可以降解牙菌斑,破壞口腔細菌生長的基礎。陳皮提取 物有良好地抑制口腔細菌形成牙菌斑的效果。薄荷提取物能夠清新口氣。
[0030] 與現有技術相比,本發明具有如下優點和效果:
[0031] (1)本發明所製備的漱口水清除牙菌斑效果顯著、能有效抑制需氧、厭氧菌生長, 特別對鏈球菌的增殖有明顯抑制作用;
[0032] (2)所述漱口水安全無毒、無刺激、無殘留;並且漱口水的酸鹼度即pH值為7. 0? 7. 2,綠色,環保;同時能清新口氣;
[0033] (3)本發明生產工藝簡單,容易實現。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0034] 圖1為實施例一所製備的陳皮提取物的HPLC譜圖;
[0035] 圖2為實施例一?三所製備的漱口水對口腔細菌生長影響的柱狀圖。

【具體實施方式】
[0036] 下面結合實施例以及附圖對本發明做進一步詳細的描述,但本發明的實施方式不 限於此。
[0037] 實施例一
[0038] (1)陳皮提取物的製備方法:
[0039] 向30mL預冷的乙醇溶液(質量百分比濃度為80% )中加入2. 0g乾燥的陳皮粉 末,得到分散液;以12000rpm的轉速,在高速均質機中將分散液均質5min ;採用離心機以 3000rpm的轉速離心3min,收集上清液;
[0040] 向離心後的沉澱中加入30mL預冷的乙醇溶液(質量百分比濃度為80% )繼續均 質(轉速為12000rpm,均質時間為5min)、離心(離心轉速為3000rpm,離心時間為3min), 取上清液,如此反覆5次,合併上清液。
[0041] 將合併的上清液於旋轉蒸發儀濃縮至濃縮物中沒有流動的液體,得到陳皮濃縮 物,用10mL反滲透純淨水溶解陳皮濃縮物,分裝後於-40°c儲存備用。所製備的陳皮提取物 的高效液相色譜分析(HPLC)如圖1所示。
[0042] (2)薄荷提取物的製備方法:
[0043] 向30mL乙醇中加入2. 0g乾燥的薄荷葉片,在高速均質機中以lOOOOrpm的轉速 均質10min ;採用離心機以5000rpm的轉速離心10min,收集上清液。將上清液於旋轉蒸發 儀濃縮至濃縮物中沒有流動的液體,得到薄荷濃縮物,用10mL反滲透純淨水溶解薄荷濃縮 物,分裝後於_40°C儲存備用
[0044] (3)含酶與陳皮提取物的漱口水的製備:
[0045] 將陳皮提取物2. 5mL,α -葡聚糖酶(彡50U/mg) 0· 25mg ; β -葡聚糖酶(彡50U/ mg)0. 25mg ; α -澱粉酶(彡50U/mg)0. 25mg ;薄荷提取物2. 5mL、食鹽lg加入到反滲透純淨 水中,使得混合液至l〇〇mL;
[0046] 將混合液進行離心(離心轉速為5000rpm,離心時間為lOmin,溫度20°C ), 0. 22 μ m濾膜過濾,得到含酶與陳皮提取物的漱口水。
[0047] 實施例二
[0048] (1)陳皮提取物的製備方法:
[0049] 向30mL預冷的乙醇溶液(質量百分比濃度為90% )中加入2. Og乾燥的陳皮粉 末,得到分散液;以llOOOrpm的轉速,在高速均質機中將分散液均質8min ;採用離心機以 4000rpm的轉速離心5min,收集上清液;
[0050] 向離心後的沉澱中加入30mL預冷的乙醇溶液(質量百分比濃度為90% )繼續均 質(轉速為llOOOrpm,均質時間為8min)、離心(離心轉速為4000rpm,離心時間為5min), 取上清液,如此反覆6次,合併上清液。
[0051] 將合併的上清液於旋轉蒸發儀濃縮至所得濃縮物中沒有流動的液體,得到陳皮濃 縮物,用10mL反滲透純淨水溶解陳皮濃縮物,分裝後於-40°c儲存備用。
[0052] (2)薄荷提取物的製備方法:
[0053] 向30mL乙醇中加入2. Og乾燥的薄荷葉片,在高速均質機中以lOOOOrpm的轉速 均質lOmin ;採用離心機以5000rpm的轉速離心lOmin,收集上清液。將上清液於旋轉蒸發 儀濃縮至濃縮物中沒有流動的液體,得到薄荷濃縮物,用10mL反滲透純淨水溶解薄荷濃縮 物,分裝後於_40°C儲存備用。
[0054] (3)含酶與陳皮提取物的漱口水的製備:
[0055] 將陳皮提取物5mL,α -葡聚糖酶(彡50U/mg) 5mg,β -葡聚糖酶(彡50U/mg) 5mg, α -澱粉酶(彡50U/mg) 5mg,薄荷提取物5mL以及食鹽lg加入到反滲透純淨水中,使得混 合液至lOOmL ;
[0056] 將混合液進行離心(離心轉速為8000rpm,離心時間為8min,溫度10°C ),0· 22 μ m 濾膜過濾,得到含酶與陳皮提取物的漱口水。
[0057] 實施例三
[0058] (1)陳皮提取物的製備方法:
[0059] 向30mL預冷的乙醇溶液(質量百分比濃度為100% )中加入2. Og乾燥的陳皮粉 末,得到分散液;以lOOOOrpm的轉速,在高速均質機中將分散液均質lOmin ;採用離心機以 5000rpm的轉速離心3min,收集上清液;
[0060] 向離心後的沉澱中加入30mL預冷的乙醇溶液(質量百分比濃度為100% )繼續均 質(轉速為lOOOOrpm,均質時間為lOmin)、離心(離心轉速為5000rpm,離心時間為3min), 取上清液,如此反覆3次,合併上清液。
[0061] 將合併的上清液於旋轉蒸發儀濃縮至所得濃縮物中沒有流動的液體,得到陳皮濃 縮物,用10mL反滲透純淨水溶解陳皮濃縮物,分裝後於-40°c儲存備用。
[0062] (2)薄荷提取物的製備方法:
[0063] 向30mL乙醇中加入2. Og乾燥的薄荷葉片,在高速均質機中以lOOOOrpm的轉速 均質lOmin ;採用離心機以5000rpm的轉速離心lOmin,收集上清液。將上清液於旋轉蒸發 儀濃縮至濃縮物中沒有流動的液體,得到薄荷濃縮物,用10mL反滲透純淨水溶解薄荷濃縮 物,分裝後於_40°C儲存備用。
[0064] (3)含酶與陳皮提取物的漱口水的製備:
[0065] 將陳皮提取物10mL, α -葡聚糖酶(彡50U/mg) 10mg, β -葡聚糖酶(彡50U/ mg) 10mg, α -澱粉酶(彡50U/mg) 10mg,薄荷提取物5mL以及食鹽lg加入到反滲透純淨水 中,使得混合液至lOOmL ;
[0066] 將混合液進行離心(離心轉速為lOOOOrpm,離心時間為5min,溫度4°C ),0· 22 μ m 濾膜過濾,得到含酶與陳皮提取物的漱口水。
[0067] 性能及效果測試:
[0068] pH值測定:實施例一?三所製備的漱口液的pH值為7. 0-7. 2。
[0069] 效果測試:
[0070] 採集志願者人群(15人)的新鮮唾液(每人2mL),並在採集後20分鐘內充分混 勻並分裝到無菌的48孔組織培養板的孔中(每孔0.5mL)。將羥基磷灰石圓片(96-Well Compatible HA Disc,購自美國3D Bioteck公司)通過高壓蒸汽滅菌後無菌轉移入48孔 組織培養板上分裝有唾液的孔中。將接種後的培養板室溫下置於頻率為200次/min的搖 床上搖晃20min以使唾液混合均勻,羥基磷灰石圓片充分浸潤在新鮮唾液中。之後將培養 板在厭氧培養箱中(37°C,75% N2,25% C02)培養14h左右。去除唾液,添加0· 5mL實施例 一?三中製備的漱口水,以不含酶和陳皮提取物的食鹽水(質量體積比為lg :100mL)為空 白對照組,在200次/min的搖床上室溫搖晃30min。取出羥基磷灰石圓片,輕柔地浸泡在無 菌磷酸鹽緩衝液中一小時,以去除蓬鬆的細菌。再次用無菌磷酸鹽緩衝液溫和衝洗羥基磷 灰石圓片,此時留在羥基磷灰石圓片上的細菌即為較為穩固附著生長的細菌,類似牙菌斑 菌群。
[0071] 將羥基磷灰石圓片上的細菌群落通過劇烈漩渦振動分散到硫乙醇酸鹽液體培養 基中,稀釋接種到各種培養基:營養瓊脂培養基(NA培養基,適合需氧菌和兼性厭氧菌), Wilkins-Chalgren瓊脂培養基(WC培養基,適合厭氧菌),鏈球菌培養基(KF培養基,適合 鏈球菌)。除營養瓊脂培養基外另外兩種培養基通過覆蓋一層較稀的瓊脂層以營造厭氧環 境。將接種好的培養基於37 °C培養數天後進行菌落計數,統計得出經漱口水處理後仍穩固 附著在羥基磷灰石圓片上的活菌數,從而評價漱口水降解牙菌斑、殺菌抑菌的效果。測試結 果如圖2所示。
[0072] 從圖中可知,以空白對照組的菌落數為100計,實施例一?三製備的漱口水處理 後羥基磷灰石圓片上穩固附著的細菌數顯著下降。在NA培養基、WC培養基和KF培養基上 的菌落數量明顯隨酶含量和陳皮提取物添加量的增加而遞減。
[0073] 使用實施例一的漱口水後,NA培養基上的需氧和兼性厭氧菌降低為對照組的 84. 41 %,WC培養基上生長的厭氧菌減少為對照組的79. 03%,KF培養基上生長的鏈球菌為 對照組的90%。使用實施例2的漱口水後,NA培養基上的需氧和兼性厭氧菌降低為對照組 的69. 09 %,WC培養基上生長的厭氧菌減少為對照組的28. 95 %,KF培養基上生長的鏈球菌 顯著減少為對照組的37. 16%。使用實施例3的漱口水後,NA培養基上的需氧和兼性厭氧 菌僅為對照組的50%,WC培養基上生長的厭氧菌減少為對照組的22. 77%,KF培養基上生 長的鏈球菌顯著減少為對照組的21. 84%。
[0074] 因此,經所述漱口水處理後羥基磷灰石圓片上穩固附著的細菌數量顯著降低,表 明本發明製備的的漱口水較有效地清除穩固附著生長的細菌,可用於清除牙菌斑和消減口 腔細菌。
[0075] 上述實施例為本發明較佳的實施方式,但本發明的實施方式並不受上述實施例的 限制,其他的任何未背離本發明的精神實質與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化, 均應為等效的置換方式,都包含在本發明的保護範圍之內。
【權利要求】
1. 一種含酶與陳皮提取物的漱口水,其特徵在於:由陳皮提取物、α -葡聚糖酶、β -葡 聚糖酶、α-澱粉酶、薄荷提取物、食鹽以及水組成。
2. 根據權利要求1所述含酶與陳皮提取物的漱口水,其特徵在於:所述漱口水中各物 質的用量關係為每l〇〇mL的漱口水由2. 5?10mL的陳皮提取物、0. 25?10mg的α -葡聚 糖酶、0· 25?10mg的β -葡聚糖酶、0· 25?10mg的α -澱粉酶、2. 5?5mL的薄荷提取物、 lg的食鹽以及餘量水組成。
3. 根據權利要求1所述含酶與陳皮提取物的漱口水,其特徵在於:所述陳皮提取物的 製備方法為將陳皮粉末加入乙醇溶液A中,均質,離心,取上清液;向離心後的沉澱中再加 入乙醇溶液B,繼續均質、離心,取上清液,如此反覆處理,最後將各上清液合併、旋轉蒸發濃 縮,得到陳皮濃縮物;向陳皮濃縮物中加入水溶解,儲存,得到陳皮提取物。
4. 根據權利要求3所述含酶與陳皮提取物的漱口水,其特徵在於:所述陳皮粉末與乙 醇溶液A的質量體積比為2. 0g :30mL ;所述乙醇溶液A與乙醇溶液B濃度和用量相同;乙醇 溶液A體積濃度為80?100 % ; 所述陳皮粉末與水的質量體積比為2. 0g :10mL ;所述水為反滲透純淨水。
5. 根據權利要求3所述含酶與陳皮提取物的漱口水,其特徵在於:所述均質採用高速 均質機進行均質,均質的轉速為10000?12000rpm,均質時間為5?lOmin ;所述離心轉速 為3000?5000rpm,離心時間為3?8min ; 所述蒸發濃縮採用的儀器為旋轉蒸發儀,真空旋轉蒸發濃縮至陳皮濃縮物中沒有流動 的液體;所述反覆處理次數為3?6次。
6. 根據權利要求1所述含酶與陳皮提取物的漱口水,其特徵在於:所述薄荷提取物的 製備方法為將薄荷加入乙醇中,均質,離心,取上清液,旋轉蒸發濃縮,得到薄荷濃縮物;向 薄荷濃縮物中加入水溶解,儲存,得到薄荷提取物。
7. 根據權利要求6所述含酶與陳皮提取物的漱口水,其特徵在於:所述薄荷與乙醇的 質量體積比為2. 0g :30mL ;所述薄荷與水的質量體積比為2. 0g :10ml ;所述水為反滲透純 淨水。
8. 根據權利要求7所述含酶與陳皮提取物的漱口水,其特徵在於:所述均質採用高速 均質機進行均質,均質的轉速為l〇〇〇〇rpm,均質時間為lOmin ; 所述離心轉速為5000rpm,離心時間為lOmin ; 所述蒸發濃縮採用的儀器為旋轉蒸發儀,真空旋轉蒸發濃縮至陳皮濃縮物中沒有流動 的液體。
9. 根據權利要求1所述含酶與陳皮提取物的漱口水的製備方法,其特徵在於:包括以 下步驟: (1) 將陳皮提取物、α-葡聚糖酶、β-葡聚糖酶、α-澱粉酶、薄荷提取物以及食鹽溶 於水中,得到混合液; (2) 將步驟(1)中混合液離心,過濾,得到含酶與陳皮提取物的漱口水。
10. 根據權利要求9所述含酶與陳皮提取物的漱口水的製備方法,其特徵在於:步驟 (1)中所述水為反滲透純淨水;步驟(2)中所述離心條件為離心轉速為5000?lOOOOrpm, 離心時間為5?lOmin,離心溫度為4?20°C ; 步驟(2)中所述過濾採用滅菌的濾膜過濾,濾膜的孔徑為0.22 μ m。
【文檔編號】A61Q11/00GK104188860SQ201410425062
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年8月26日 優先權日:2014年8月26日
【發明者】陳谷, 王宏 申請人:華南理工大學

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