新型肽，其製備及應用的製作方法

2023-05-27 09:40:36

專利名稱：新型肽，其製備及應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種新型肽及其衍生物，與Dolastatin-10相比，其在醫療上治療腫瘤疾病中具有潛在的廣泛的實用性。並且，它不象dolastatin-10那樣，必須通過實驗從少量的天然資源中提純，本發明的化合物可以按下文詳述的方法方便地進行合成。而且，Dolastatin-10對酸不穩定。據悉一點微小的結構上的變化就會導致其活性的完全喪失(Biochemical Pharmacology，Vol，40，No.8，1859-64，1990)。
本發明的化合物包括通式Ⅰ所示的新型肽及其生理上可接受的酸形成的鹽，
其中R1為烷氧基，優選的為C1-4烷氧基;烷基，優選的為C1-7烷基;環烷基，優選的為C3-6環烷基;烷基磺醯基，優選的為C1-C6磺醯基;三氟乙基;氟乙基;二氟乙基;三氟乙醯基;脒基;脲基;哌啶子磺醯基;嗎啉代磺醯基;苄氧羰基;烷氧羰基，優選的為C1-4烷氧羰基;可被烷基，優選C1-5的烷基取代的氨基磺醯基;羥基;至多可被三個取代基取代的苯磺醯基，取代基可單獨選自烷基(優選的為C1-4)，N(CH3)2，硝基，滷素和CF3;或NR8R9，其中R8和R9可以分別為氫或烷基，優選的為C1-4烷基;
R2為氫;烷基，優選C1-4烷基;環烷基，優選C3-7環烷基;醯基，優選C1-8醯基;苯甲醯基或至多可被三個取代基取代的苄基，取代基可單獨選自硝基，滷素，CF3，烷基(優選C1-4)和烷氧基(優選C1-4);或R1-N-R2共同形成5-或6元的雜環，其中雜環為未被取代的或者為被一個或多個取代基所取代的環，取代基可單獨選自苯基，苄基，烷基((優選C1-4)，N(CH3)2，硝基，氧代基，噻吩基，CONH2，COOMe和COOEt;
X是氫;烷基(優選為C1-5);環烷基(優選環己基);-CH2-環己基或苄基;
A是選自由下列殘基組成的基團纈氨醯，異亮氨醯，亮氨醯，別異亮氨醯，α-氨基異丁醯，3-叔丁基丙氨醯，2-叔丁基甘氨醯，3-環己丙氨醯，2-乙基甘氨醯或環己基甘氨醯;
R3是氫或烷基(優選C1-5);
B是氫，烷基(優選C1-5)，環烷基(優選環己基);-CH2-環己基或苄基;
D是氫，乙酸基;羥基或烷氧基(優選C1-5);
E是氫，或烷基(優選C1-5);或B和E一起為-(CH2)3-，-(CH2)2-，-CH(CH3)CH2CH2-，-CH(CH3)-CH2-，-C(CH3)2CH2CH2-，或-C(CH3)2-CH2-;
R7為-NR4-CHG-CHK-CHL-CO-或
其中V是氧或硫;Y1是氫;Z1是氫或低級烷基(優選C1-4);或Y1和Z1共同形成一個鍵;
W1是氫，烷基(優選C1-6)和苯基;
R4是氫或烷基(優選C1-5);
G是氫，烷基(優選C1-5)，環己基，-CH2-環己基，或苄基;
K是氫，乙酸基，羥基或烷氧基(優選C1-5);
L是氫，或烷基(優選C1-5);或R4和G一起為-(CH2)4-，-(CH2)3-，或CH2-CH(OH)-CH2-;
M是選自由下列殘基組成的基團1-氨基-戊基-1-羰基，纈氨醯，2-叔-丁基甘氨醯;脯氨醯，羥基脯氨醯，異亮氨醯，亮氨醯，3-環己基丙氨醯，苯丙氨醯，四氫異喹啉基-2-羰基，3-噻唑基丙氨醯，3-噻吩基丙氨醯，組氨醯，2-氨基吲哚基-2-羰基，酪氨醯，3-吡啶丙氨醯，3-叔丁基丙氨醯，2-環己基甘氨醯，或3-萘基丙氨醯;
或R1R2N-CHX-CO和A一起形成
其中T為氫或低級烷基(優選的是甲基或乙基);U為氫或低級烷基(優選C1-5);n為1，2或3，V為氧或硫;Y為氫;Z為氫或低級烷基(優選的是甲基);或Y和Z一起形成一個鍵;W為氫，低級烷基(優選的為C1-4)或苯基;
a，b和d分別為0或1;
Q為羥基，烷氧基(優選的是C1-5)，苯氧基，苄氧基或者是被取代的或未被取代的氨基;若當b和d為0時，Q不應為羥基或烷氧基。
本發明還提供了製備通式Ⅰ所示化合物的方法，含上述化合物和藥物上可接受的載體的藥物組合物，以及利用其治療哺乳動物癌症的方法。
本發明的一亞類化合物包括，其中R1-N-R2是下式所示的5-或6-元雜環的通式Ⅰ化合物
這些雜環可以是未被取代的或已被一個或多個取代基取代的雜環，取代基可單獨選自苯基，苄基和烷基(優選C1-4)，N(CH3)2，硝基，噻吩基，CONH2，COOEt或氧代基。
本發明的另一亞類化合物為包括其中Q為式R5-N-R6的氨基部分的通式Ⅰ所示化合物，其中R5是H，或羥基，或C1-7-烷氧基或苄氧基或C1-7-烷基，或氟乙基或二氟乙基，或三氟乙基或C3-7-環烷基，R6是H，或C1-7-烷基，或苯基(其至多可被三個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，可形成環系的C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基或C1-7-烷基-磺醯基);或苄基(可至多被三個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，可形成環系的C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或萘基(可至多被兩個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苄氧基，苯氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或二苯甲基(可至多被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或二苯基(至多可被兩個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或三苯甲基(至多可被三個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或二苯甲基乙基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或二苯甲基甲基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或萘甲基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或苊基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨被選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或苊基甲基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或吡啶基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或吡啶甲基(可至多被二個取代基取代，取代基分別為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或苯並噻唑基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或苯並異噻唑基(至多可被二個取代基取代，取代基可為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或苯並吡唑基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或苯並噁唑基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或芴基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或氨芴基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或嘧啶基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，COOEt、CONHBzl，CON(Bzl)2，可形成環系的C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基);或五元的雜芳基[至多可被三個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，氰基，COOMe、COOEt，硫甲基，硫乙基，硫苯基，吡啶甲基，乙醯基，-CH2-COOEt，CONH2，CONHBzl，CON(Bzl)2，可形成環系的C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，苯基(至多可被四個取代基取代，取代基或單獨為硝基，CF3，滷素或C1-4-烷基)，苄基(可至多被四個取代基取代，取代基分別為硝基，CF3，滷素，C1-4-烷基，萘基，C1-7-烷基-磺醯基，苯磺醯基，或C1-4-二烷基氨基)];或-CHR7-5元的雜芳基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，COOMe，COOEt，COOCH(CH3)2，CONH2，COOBzl，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，苯基，苄基，萘基，或C1-7-烷基-磺醯基[R7＝H，直鏈或支鏈的C1-5-烷基，苄基或R7和R5一起形成基團-(CH2)3-或-(CH2)4-])。
在本發明的另一亞類化合物中，R5-N-R6一起形成的結構選自下列組成的基團
這些基團是未被取代的或者是被一個或多個取代基取代的，取代基可單獨選自由CF3，硝基，滷素，氧代，氰基，N，N-二甲基氨基，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-6-烷基(可形成環系)，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，萘基，嘧啶基，COOEt，COOBzl，C3-6-環烷基，吡咯烷基，哌啶基，噻吩基，吡咯基，-CH2-CO-NCH(CH3)2，-CH2-CO-N(CH2)4，-CH2-CO-N(CH2)4O，苄基(至多可被三個取代基取代，取代基可單獨選自硝基，滷素，CF3，硫甲基或相應的亞碸或碸，硫乙基或相應的亞碸或碸，C1-4-烷基，和C1-4烷氧基)，和苯基(至多可被三個取代基取代，取代基單獨選自硝基，滷素，CF3，硫甲基，硫乙基，C1-4-烷基和C1-4-烷氧基。
本發明另一亞類化合物包括其中b為零的通式Ⅰ化合物。
本發明另一亞類化合物包括通式Ⅰ化合物，其中d為零，b是-NR4-CHG-CHK-CHL-CO-，和Q不是羥基或烷氧基。
本發明另一亞類化合物包括通式Ⅰ化合物，其中b和d為零，Q不是羥基或烷氧基。
本發明另一亞類化合物包括通式Ⅰ化合物，其中d為零，R7是
本發明另一亞類化合物包括其中a為零的通式Ⅰ所示化合物。
本發明另一亞類化合物包括通式Ⅰ所示化合物，其中a和d為零。
本發明另一亞類化合物包括通式Ⅰ所示化合物，其中b和d為1，Q是羥基，C1-4-烷氧基或苄氧基。
優選的化合物其取代基如下R1為乙基，甲基，三氟乙基，氟乙基，二氟乙基，異丙基，正-丙基，正-丁基，正-戊基，環丙基，環戊基，脲基，甲磺醯基，甲苯磺醯基，萘磺醯基，苯磺醯基，2，4，6-三甲基磺醯基，苄氧羰基，叔-丁氧羰基，甲氧羰基，嗎啉代磺醯基，叔-丁氨磺醯基，甲氨磺醯基，三氟乙醯基，NH2，N(CH3)2，N(CH2CH3)2，N[CH(CH3)2]2，脒基或CH3O-，R2是H，甲基，乙基，異丙基，正-丙基，正-丁基，環丙基，甲醯基，乙醯基，丙醯基，(CH3)2CHCO-，新戊醯基，苯甲醯基或
或R1-N-R2一起為
X是氫，甲基，乙基，異丙基，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，叔丁基，-CH2-環己基，或苄基;
A是纈氨醯，異亮氨醯，亮氨醯，別異亮氨醯，3-叔丁基丙氨醯，2-叔丁基甘氨醯，3-環己基丙氨醯，2-乙基甘氨醯，或2-環己基甘氨醯;
R3是氫，甲基，或乙基;
B是氫，甲基，乙基，異丙基，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3-，叔丁基，-CH2-環己基，或苄基;
D是氫，羥基，甲氧基，乙氧基，異丙氧基或叔-丁氧基;
E是氫，甲基，乙基，異丙基或叔丁基;或B和E一起形成基團-(CH2)2-，(CH2)3-，-CH(CH3)-CH2-，或-C(CH3)2-CH2-;
R7是-NR4-CHG-CHK-CHL-CO-，或
其中V是氧或硫;Y1是氫;Z1是氫或甲基;或Y1和Z1可共同形成一個鍵;W1是氫，甲基，乙基，異丙基，叔-丁基或苯基;
R4是氫或甲基;
G是氫，甲基，乙基，異丙基，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，叔丁基，-CH2-環己基，或苄基;
K是氫，羥基，甲氧基，乙氧基，異丙氧基或叔-丁氧基;
L是氫，甲基，乙基或異丙基;或R4和G一起為-(CH2)4-，-(CH2)3-，或CH2-CH(OH)-CH2-，M選自由下列基團組成的基團纈氨醯，2-叔-丁基甘氨醯，脯氨醯，羥脯氨醯，異亮氨醯，亮氨醯，3-環己基丙氨醯，苯丙氨醯，四氫異喹啉-2-羰基，3-噻唑基丙氨醯，3-噻吩基丙氨醯，2-氨基吲哚基-2-羰基，酪氨醯，3-吡啶丙氨醯，3-叔丁基甘氨醯，2-環己基甘氨醯，或3-萘基-丙氨醯;
a，b和d分別為0或1;
或R1R2N-CHX-CO和A一起為
Q是羥基，C1-5烷氧基，苄氧基或氨基部分NR5R6其中R5是氫，甲基，乙基，三氟乙基，氟乙基，二氟乙基，丙基，異丙基或
R6是氫，甲基，乙基，三氟乙基，丙基，異丙基，叔-丁基或
或R5-N-R6一起為
更為優選的化合物的取代基具有下列含義R1是乙基，甲基，三氟乙基，氟乙基，二氟乙基，異丙基，丙基，環丙基，苄氧羰基，甲氧羰基，乳醯基，甲基氨基磺醯基，甲苯磺醯基，脲基，甲磺醯基，N(CH3)2，脒基或CH3O-;
R2是H，甲基，乙基，異丙基，丙基，丁基，環丙基，甲醯基，乙醯基，丙醯基，新戊醯基，苯甲醯基或苄基;或R1-N-R2一起為
X是氫，甲基，異丙基，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，叔-丁基，或苄基;
A是纈氨醯，異亮氨醯，亮氨醯，2-叔-丁基甘氨醯或2-乙基甘氨醯;
R3是氫，甲基，或乙基;
B是氫，甲基，異丙基，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，叔-丁基，或苄基;
D是氫，羥基，甲氧基或叔-丁氧基;
E是氫，甲基，異丙基，叔-丁基，或乙基;或B和E一起為-(CH2)3-或-(CH2)2-;
R7是
M選自由下列殘基組成的基團脯氨醯，羥脯醯，纈氨醯，異亮氨醯，2-叔-丁基甘氨醯，苯丙氨醯，四氫異喹啉-2-羰基，2-氨基吲哚基-2-羰基，酪氨醯，3-萘基丙氨醯;
a，b和d分別為0或1;
或R1R2N-CHX-CO和A一起為
Q是羥基，C1-4烷氧基，苄氧基或氨基部分-NR5R6其中R5是氫，甲基，乙基，三氟乙基，氟乙基，二氟乙基，丙基，異丙基，環丙基，環戊基，環己基;
R6是氫，甲基，乙基，丙基，異丙基，叔丁基，苄基，4-苯氧苄基，4-苄氧苄基，3，4，5-三甲氧苄基，苯基，4-苯氧苯基，4-苄氧苯基，3，4，5-三甲氧苯基或
或R5-N-R6一起為
這些例子只用來說明本發明，並不能限制本發明的範圍。
通式Ⅰ所示的化合物最好是由L型胺基酸或L型胺基酸的衍生物組成，但它們也可包含一個或多個D型胺基酸或D型胺基酸的衍生物。
特別地，適宜的生理上可接受的酸為鹽酸，檸檬酸，酒石酸，乳酸，磷酸，甲磺酸，乙酸，甲酸，馬來酸，富馬酸，蘋果酸，琥珀酸，丙二酸，硫酸，L-穀氨酸，L-天冬氨酸，丙酮酸，粘酸，苯甲酸，葡萄糖醛酸，草酸，抗壞血酸和N-乙醯甘氨酸。
新型化合物可用已知方法製備。因此，這些化合物可以通過逐個按序連接或將合適的片段進行連接的方法製得。採用逐個連接方式時，從肽鏈羧末端開始每次連接一個胺基酸或一個結構單元。採用片段偶聯時，可以連接不同長度的片段，這些片段是按序將胺基酸或結構單元連接來製成的。
無論是按序逐個連接還是片段偶聯，其單元之間必須是以形成醯胺鍵為連接方式的。酶法及化學方法均適用於此。
在下列文章中詳細描述了化學法形成醯胺鍵Müller，Methodender organischen Chemie Vol.XV/2，pp1-364，Thieme Verlag，Stuttgart，1974;Stewart，Young，Solid Phase Peptide Synthesis，pp31-34，71-82，Pierce Chemical Company，Rockford，1984;Bodanszky，Klausner，Ondetti，Peptide Synthesis，pp85-128，John Wiley Sons，New York，1976和其他肽化學方面的常規工作。特別優選的方法是疊氮法，對稱和混合酸酐法，在原位發生或完成的活化酯法，利用脲烷保護的胺基酸的N-羧酸酐和使用偶聯劑形成醯胺鍵，偶聯劑特別是二環己基碳化二亞胺(DCC)，二異丙基碳化二亞胺(DIC)，1-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氫喹啉(EEDQ)，1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽(EDCI)，正-丙烷磷酸酐(PPA)，N，N-雙(2-氧代-3-噁唑烷基)-醯胺磷醯氯(BOP-Cl)，溴代-三-吡咯烷基鏻六-氟磷酸鹽(Py Brop)，二苯磷醯疊氮(DPPA)，Castro′s試劑(BOP，PyBop)，鄰-苯並三唑基-N，N，N′，N′-四甲基尿鎓鹽(HBTU)，二乙基磷醯基氰化物(DEPCN)，2，5-二苯基-2，3-二氫-3-氧代-4-羥基噻吩二氧化物(Steglich′s試劑，HOTDO)和1，1′-羰基二咪唑(CDI)。偶聯劑可單獨使用或與諸如N，N′-二甲基-4-氨基吡啶(DMAP)，N-羥基-苯並三唑(HOBt)，N-羥基苯並三嗪(HOOBt)，N-羥基琥珀醯亞胺(HOSu)或2-羥基吡啶等添加劑一起使用。
在酶法肽合成中通常可以免除保護基，但在化學合成時對反應物必須使用可逆的保護基，使其在形成醯胺鍵時不帶有這些被保護基團。化學合成的三種優選的經典的保護基技術苄氧羰基(Z)，叔-丁氧羰基(Boc)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)技術。肽鏈延伸中的每一步都要確定鏈擴展單元的α-氨基的保護基。對胺基酸保護基技術的詳細描述可見Müller，Methoden der Organischen Chemic Vol.XV/l，pp20-906，Thieme Verlag Stuttgart，1974。構建肽鏈所用的單元可以在溶液中，也可在懸浮液中反應，或用相似於Merrifield在J.Amer.Chem.Soc，85(1963)2149中所描述的方法。特別優選的方法是製備肽時，利用Z，Boc或Fmoc保護技術進行按序逐個連接或片段偶聯，其和Merrifield技術中的一種鍵合在不溶性的聚合物支持體上(後文中也稱之為樹脂)的反應物進行反應，這就使用Boc或Fmoc保護技術順序構成的肽固定於聚合的支持體上，使生長的肽鏈(見

圖1或2)的羧基末端與不溶性樹脂顆粒呈共價鍵合。這種步驟可以通過過濾的方法除去反應試劑和副產物，並且不必重結晶中間體。
被保護胺基酸或結構單元能與任一適宜的聚合物連結，這些聚合物不溶於所用的溶劑並且具有穩定的物理形式從而使其易於過濾。聚合物必須含有一個功能基團，使第一個被保護胺基酸可以通過共價鍵與其能牢固結合。有許多聚合物適於此目的，例如纖維素，聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸酯，磺化的聚苯乙烯，氯甲基化的苯乙烯/二乙烯基苯共聚物(Merrified樹脂)，4-甲基二苯甲基胺樹脂(MBHA-樹脂)、苯乙醯胺甲基樹脂(Pam-樹脂)，對-苄氧-苄基-醇-樹脂、二苯甲基胺樹脂(BHA樹脂)，4-羥甲基苯甲酸-甲基樹脂，Breipohl樹脂等等(Tetrahedron Letters 28(1987)565;BACHEM提供)。4-(2，4-二甲氧苯氨甲基)苯氧-樹脂(Novabiochem提供)或鄰-氯三苯甲基-樹脂(Biohellas提供)。
反應條件下穩定的所有溶劑都適於溶液體系中醯胺鍵的形成，尤其是水，N，N-二甲基甲醯胺(DMF)，二甲基亞碸(DMSO)，乙腈，二氯甲烷(DCM)，1，4-二噁烷，四氫呋喃(THF)，N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)和這些溶劑的混合物。在聚合支持體上的合成可以在所有隋性有機溶劑中進行，這時所有胺基酸衍生物應是可溶的。然而，優選的溶劑還應具有樹脂-溶脹的性質。如DMF，DCM，NMP，乙腈和DMSO，和這些溶劑的混合物。合成完成後，化合物從聚合物支持體上裂解下。裂解條件針對不同類型的樹脂在文獻中均有說明。裂解反應通常大多需用酸，和Pd催化，尤其是在液體無水氟化氫中，在無水三氟甲烷磺酸中，在稀釋或濃縮的三氟乙酸中裂解;在如嗎啉這樣的弱鹼存在條件下，在THF或THF-DCM混合物中需以Pd-催化裂解，或在乙酸/二氯甲烷/三氟乙醇混合物中裂解。
根據所選保護基，在裂解條件下可以維持保護基或裂解保護基。當進行某些衍生反應時肽的部分脫保護也是很有意義的。N-末端的二烷基化化合物可以通過偶聯溶液中或聚合支持物上的適宜的N，N-二烷基胺基酸進行製備，或在溶液中進行還原烷基化反應(例如和甲醇中的NaCNBH3反應)進行製備或通過樹脂鍵合的化合物的還原烷基化反應，即與NaCNBH3和適宜的醛在DMF/1%乙酸中反應製備。可以將合適的內醯胺鍵連接的二肽單元插入肽鏈製備具有γ或δ-內醯胺鍵的化合物(R.Freidinger，J.Org.Chem.(1982)104～109)。將適合的二肽單元插入肽鏈，製得具有噻唑-，噁唑-，噻唑啉或噁唑啉的含有二肽結構部分的化合物(U.Schmidt等人，Synthesis(1987)，233-236;P.Jouin等人，Tetrahedron Letters(1992)，2807～2810，P.Wipf等人，Tetrahedron Letters(1992)，907～910;W.R.Tully，J.Med.Chem.(1991)，2065;Synthesis(1987)，235;T.Shioiri等人，J.Org.Chem.(1987)，1252～1255;R.Pettit等人.，J.Am.Chem.Soc.(1989)，5463-65)。具有-NR3-CHB-CHD-CHE-CO-和NR4-CHG-CHK-CHL-CO-的結構單元可按文獻所述方法，例如通過相應的被保護胺基酸醛與適當的烷基化試劑反應，如膦酸鹽、膦內鎓鹽Evan′s試劑等製備(S.Shibuya等人.，Heterocycles(1990)，1597～1600;M.Braun等人.，Angew.Chem(1987)，24-37;Angew.Chem.1992，104，No.10;T.Shioiri等人.，Peptide Chemistry 1989，N.Yanaihara(Ed.)，291～296;Pettit等人，J.Am.Chem.Soc，1989，111，5463;T.Shioiri;Tetrahedron Letters 1991，931-934;K.Koga，Tetrahedron Letters 1991，2395-2398;)。
通過給哺乳動物體服用本發明化合物，該化合物可用來抑制或治療固體腫瘤(例如肺，胸，結腸，前列腺，膀胱，直腸，或子宮膜內腫瘤)或血液學上的惡性腫瘤(例如白血病，淋巴瘤)。可以採用任一常規的藥學上(尤其是腫瘤學，藥劑學)的方法給藥，包括口服和非腸道給藥如皮下，靜脈內，肌肉和腹內幾種方式。這些化合物可以單獨服用或以藥物組合物的形式服用，該組合物包含通式Ⅰ所示化合物及藥物上可接受的適於所用的給藥方法的載體。這些藥物組合物可以是混合產品，即也可含有其它治療用活性成分。
哺乳動物所服劑量，應含有有效量的抑制腫瘤的活性成分，這取決於常規因素，包括所用特定化合物的生物活性;給藥方法，受治療者的年齡、健康狀況及體重，原來的和後來的症狀;治療的頻率;接受的其它療法以及所希望產生的效果。典型的日用劑量為口服約5～250mg/Kg體重，非腸道給藥約1～100mg/Kg體重。
適宜的劑量形式含有約10～500mg活性成份/每單位，這樣，活性成份一般佔組合物總重的1～90%。
這些新型化合物能夠以常規的固態或液態狀藥物形式服用，例如無包衣或包衣的片劑，膠囊，粉末，顆粒，栓劑或溶液。這些均是以常規方法生產。為此，活性物質可以和常規的藥物輔劑一同進行加工，藥物輔劑如片劑結合劑，填充劑，防腐劑，藥片崩解劑，流體調節劑，增塑劑，潤溼劑，分散劑，乳化劑，溶劑，緩釋劑，抗氧化劑和/或助進氣體(參見H.Sucker等人Pharmazeutische Technologie，Thieme-Verlag，Stuttgart，1978)。這樣的給藥形式通常含有1～90%的(重量百分比)活性物質。
下列實施例用以說明本發明。生成蛋白質的胺基酸在實施例中縮寫為公知的三字碼。其它字符所代表的意思是TFA＝三氟乙酸，Ac＝乙酸，Bu＝丁基，Et＝乙基，Me＝甲基，Bzl＝苄基。
A.一般步驟Ⅰ.權利要求1的化合物以上述的標準Z-和Boc-技術進行經典液相合成，也可用人工或在APPLIED BIOSYSTEMS提供的431A型全自動合成儀上進行標準固相合成。使用Boc和Fmoc保護基不同的合成循環步驟如下a)以Boc保護的合成循環步驟1.30%TFA溶於DCM 1×3分2.50%TFA溶於DCM 1×1分3.以DCM洗滌 5×1分4.5%二異丙基乙胺(DIA)溶於DCM 1×1分5.5%二異丙基乙胺(DIA)溶於NMP 1×1分6.以NMP洗滌 5×1分7.加入預活化的保護胺基酸(與1當量的DCC和在NMP/DCM中的1當量的HOBt活化)肽偶聯(第一部分) 1×30分8.加DMSO到反應混合物中至其體積含量為20%9.肽偶聯(第二部分) 1×16分10.加入3.8當量的二異丙基乙胺至反應混合物中11.肽偶聯(第三部分) 1×7分12.DCM洗滌 3×1分13.若轉化非完全，重複偶聯步驟(返回第5步)14.10%的乙酸酐，5%二異丙基乙胺溶於DCM 1×2分15.10%的乙酸酐溶於DCM 1×4分16.DCM洗滌 4×1分17.返回1Boc-Cl和PyBrop被用作在N-甲基胺基酸或含N-甲基的結構單元後偶聯胺基酸的試劑。反應時間相應增長。在液相合成時，分別使用Boc-胺基酸NCAs(N-叔-丁基氧羰基-胺基酸-N-羧酸酐)或Z-胺基酸-NCAs(N-苄氧羰基-胺基酸-N-羧酸酐)於這種偶合方式最為有利。
b)以Fmoc保護基的合成循環步驟1.DMF洗滌 1×1分2.20%哌啶溶於DMF 1×4分3.20%哌啶溶於DMF 1×16分4.DMF洗滌 5×1分5.加入預活化的保護胺基酸(以1當量的TBTU和1.5當量的DIPEA在DMF活化);肽偶聯 1×61分6.DMF洗滌 3×1分7.若轉化反應未完全，重複偶聯(返回5)8.10%的乙酸酐溶於DMF 1×8分9.DMF洗滌 3×1分10.返回2Boc-Cl和PyBrop用作在N-甲基胺基酸或含N-甲基的結構單元後偶聯胺基酸的試劑。反應時間相應增長。
Ⅱ.N末端的還原烷基化AⅠa或AⅠb中製備的肽-樹脂在N端脫去保護(AⅠb的2-4步或AⅠa的1-6步)然後與3倍過量的醛或酮在加入3當量的NaCNBH3的DMF/1%的乙酸溶液反應。反應完全後(Kaiser陰性實驗)用水，異丙醇，DMF和二氯甲烷洗滌樹脂數次。
Ⅲ.Ⅰa和Ⅱ的肽-樹脂處理減壓乾燥肽-樹脂，並將其放入-TEFLON HF裝置(由PENINSULA提供)的反應器中。加入清洗劑，優選的是苯甲醚(1ml/g樹脂)，在肽鏈中含色氨酸情況下用硫醇移去吲哚甲醯基;優選的是乙二硫醇(0.5ml/g樹脂)，然後液氮冷卻下在HF中縮合。混合物熱至0℃，在此溫下攪拌45min。氟化氫被減壓除去，為除去殘留的清洗劑用乙酸乙酯洗滌剩餘物，化合物以30%強醋酸提取並過濾，濾液凍幹。
Ⅳ.Ⅰb和Ⅱ的肽-樹脂處理減壓乾燥-樹脂並針對胺基酸組合物按下列裂解步驟之一操作(Wade，Tregear，Howard Florey Fmoc Workshop Manual，Melbourne 1985)。
裂解條件TFA 清洗劑 反應時間1 95% 5%H2O 1.5h2 95% 5%乙二硫醇/苯甲醚 1.5h(1:3)室溫下攪拌適宜的TFA混合物中的肽-樹脂懸浮液一定時間，然後樹脂被濾掉，以TFA和DCM洗滌。濾液和洗滌液被濃縮，加入二乙醚沉澱化合物，冰浴冷卻後，沉澱物被濾掉，放入含30%乙酸中並凍幹。
Ⅴ.當使用鄰-氯三苯甲基-樹脂(Biohellas提供)時，將在乙酸/三氟乙醇/二氯甲烷混合物(1∶1∶3)的肽-樹脂懸浮液室溫下攪拌1h。空吸濾去樹脂並用裂解溶液洗滌。合併濾液在真空中濃縮並以水處理。沉澱的固體通過過濾或離心除去，以二乙醚洗滌並減壓乾燥。
Ⅵ.化合物的純化和鑑定使用或不用後序中壓色譜(固定相HD-SIL C-18，20～45μ，100A;流動相梯度A＝0.1%TFA/甲醇，B＝0.1TFA/H2O)以凝膠色譜法(SEPHADEX G-10 G-15/10%醋酸;SEPHADEX LH20/甲醇)進行純化。產物純度以分析HPLC法測定(固定相100 2.1mm VYDAC C-18，51，300
;流動相CH3CN/H2O梯度，1%的TFA緩衝，40℃)。用快速原子轟擊質譜和1H或13C-譜進行鑑定。
B.具體步驟實施例1
0.4g鹽酸苯丙氨醯胺(2mmol)和0.55gBoc-N(CH3)-CH[CH(CH3)2]-CH(OCH3)-CH2-COOH(2mmol;以文獻方法合成S.Shibuya，等人，Heterocycles，Vol.31，no，9，1597-1600(1990))溶於DMF中。加入0.4g DEPCN(2.2mmol)和1.4ml二異丙基胺(DIPEA)，反應混合物室溫下攪拌一晝夜，減壓蒸發溶劑，剩餘物溶於乙酸乙酯並以5%檸檬酸水溶液，水，5%NaHCO3和NaCl溶液徹底洗滌。有機層以Na2SO4充分乾燥，過濾，並蒸發至乾燥狀態。剩餘物(0.66g)真空乾燥，以5ml TFA/DCM(1∶1)去保護2小時並蒸發至乾燥狀態。這樣得到的去保護片斷溶於DMF中並在45℃下與0.44gN-叔丁氧羰基-纈氨酸-N-羧酸酐(1.8mmol)反應。攪拌5h後，溶劑在真空蒸發，加入乙酸乙酯，有機層以5%檸檬酸水溶液，5% NaHCO3水溶液，水，NaCl水溶液徹底洗滌有機層，以Na2SO4乾燥。減壓蒸發溶劑，並用5ml TFA/DCM(1∶1)處理剩餘物(0.7g，1.3mmol)2h。溶劑混合物蒸發之後，用KOH乾燥，剩餘物溶於DMF和0.19g N，N-二甲基纈氨酸(1.3mmol);按文獻方法合成參見，例如R.E.Bowmann，J.Chem.Soc.1959，1342)中，加入0.25gDEPCN(1.5mmol)和0.7ml DIPEA。室溫下攪拌反應混合物一晝夜，蒸發至乾燥並以SEPHADEXLH-20柱層析。收集各鎦分產品並蒸發掉溶劑，化合物1的產量為0.46g。
實施例2
0.29g苄胺(2mmol)和0.55g Boc-N(CH3)-CH[CH(CH3)2]-C(OCH3)-CH2-COOH(2mmol，按下列文獻所述方法合成S.Shibuya等人，Heterocycles，Vol.31，no.9，1597-1600(1990))溶於DMF。加入0.4g DEPCN(2.2mmol)和1.4ml DIPEA後，室溫下攪拌反應混合物一晝夜，減壓蒸發溶劑，剩餘物溶於乙酸乙酯，並以5%檸檬酸溶液，水，5% NaHCO3，和NaCl溶液充分洗滌。有機層以Na2SO4乾燥，過濾，並蒸發至乾燥狀態。剩餘物(0.51g)真空乾燥，以5ml TFA/DCM(1∶1)脫去保護2h並蒸發至乾燥狀態。將這樣得到的脫保護片段溶於DMF，並與0.4g N-叔丁氧羰基-纈氨酸-N-羧酸酐(1.6mmol)在45℃反應。攪拌5h後，真空蒸發溶劑，加入乙酸乙酯，並以5%的檸檬酸水溶液，5%的NaHCO3水溶液，水和NaCl水溶液充分洗滌有機層，並以Na2SO4乾燥。減壓蒸發溶劑，殘餘物(0.51g，1.1mmol)以5ml TFA/DCM(1∶1)處理2h。蒸發溶劑混合物後，用KOH乾燥，殘餘物溶於DMF，並加入0.16g N，N-二甲基纈氨酸(1.1mmol)。
0.23g DEPCN(1.4mmol)和0.7ml DIPEA。室溫下攪拌反應混合物一晝夜，蒸發至乾燥狀態，並以SEPHADEX LH-20柱層析。收集產物餾分，蒸發溶劑，獲得0.36g化合物1。
可以製備下述化合物，且可以根據實施例1和2的方法製備下列化合物3. Xaa Val Xdm Xcx Xab4. Xaa Val Xdm Xcx Xac5. Xaa Val Xdm Xcx Xat6. Xaa Val Xdm Xcx Xbp7. Xaa Val Xdm Xcx Xbt8. Xaa Val Xdm Xcx Xbu9. Xaa Val Xdm Xcx Xbv10. Xaa Val Xdm Xcx Xbw11. Xaa Val Xdm Xcx Xby12. Xaa Val Xdm Xcx Xca13. Xaa Val Xdh Xcx Xbq14. Xaa Val Xdh Xcx Xbs15. Xaa Val Xdm Xat16. Xaa Val Xdm Xbp17. Xav Val Xdm Xbq18. Xav Val Xdm Xbs19. Xbo Val Xdm Xbt20. Xbo Val Xdm Xbu21. Xaa Xaf Xdm Xbv22. Xaa Xaf Xdm Xbw
23. Xav Leu Xdm Xby24. Xaa Leu Xdm Xca25. Xaa Val Xdm Xcx Xcf26. Xaa Val Xdm Xcx Xao27. Xax Val Xdm NH228. Xax Val Xdm Xcf29. Xax Val Xdm Xao30. Xaa Xdm NH231. Xax Xdm NH232. Xaa Xdm Xcf33. Xax Xdm Xcf34. Xaa Xdm Phe Xcf35. Xax Xdm Phe Xcf36. Xaa Val Xda Xda NH237. Xaa Val Xda Xda Phe NH238. Xaa Val Xdh Xdh NH239. Xaa Val Xdh Xdh Phe NH240. Xaa Val Xda NH241. Xaa Val Xdb NH242. Xaa Val Xdc NH243. Xaa Val Xdd NH244. Xaa Val Xde NH245. Xaa Val Xdf NH246. Xaa Val Xdg NH247. Xaa Val Xdh NH248. Xaa Val Xdi NH249. Xaa Val Xdk NH250. Xaa Val Xdl NH251. Xaa Val Xdn NH252. Xaa Val Xdo NH253. Xaa Val Xdp NH254. Xaa Val Xdq NH255. Xaa Val Xdm Xcx NH256. Xaa Val Xdm Xcy NH257. Xaa Val Xdm Xcz NH258. Xaa Val Xdm Xds NH259. Xaa Val Xdm Xcw NH260. Xaa Val Xdm Xda NH261. Xaa Val Xar NH262. Xaa Val Xdm Xdc NH263. Xaa Val Xdm Xbf NH264. Xaa Val Xdm Xbg NH265. Xaa Val Xdm Xck66. Xaa Val Xdm Xcl67. Xaa Val Xdm Xcx Phe NH268. Xaa Val Xdm Xcx Phe Xcf69. Xaa Val Xdm Xcx Phe Xao
70. Xaa Val Xdm Xcx Xad NH271. Xaa Val Xdm Pro NH272. Xaa Val Xdm Xcx Xdr NH273. Xaa Val Xdm Xcx Xcu NH274. Xav Val Xdm Xcx Phe NH275. Xax Val Xdm Xcx Phe NH276. Xaa Val Xdm Phe NH277. Xav Val Xdm Phe NH278. Xax Val Xdm Phe NH279. Xas Val Xdm Phe NH280. Xaa Val Xdm Xab81. Xaa Val Xdm Xac82. Xbh Xdm NH283. Xbi Xdm Xcx NH284. Xbk Xdm Xcx Phe NH285. Xbl Xdh NH286. Xbm Xdh Xcx NH287. Xbn Xdh Xcx Phe NH288. Xaa Xdm Phe NH289. Xas Xdm Phe Xao90. Xav Xdm Phe Xcf91. Xax Xdm Phe NH292. Xaa Val Xdm OH93. Xaa Val Xdm OBzl94. Xaa Val Xdm NH295. Xaa Val Xdm Xan96. Xaa Val Xdm Xao97. Xaa Val Xdm Xap98. Xaa Val Xdm Xau99. Xaa Val Xdm Xaq100. Xaa Val Xar Pro NH2101. Xaa Val Xdm Xbz102. Xaa Val Xdm Xcb103. Xaa Val Xdm Xcc104. Xaa Val Xdm Xcd105. Xaa Val Xdm Xce106. Xaa Val Xdm Xcf107. Xaa Val Xdm Xcg108. Xaa Val Xdm Xch109. Xaa Val Xdm Xci110. Xaa Val Xdm Xcm111. Xaa Val Xdm Xcn112. Xaa Val Xdm Xco113. Xaa Val Xdm Xcp114. Xaa Val Xdm Xcq115. Xaa Val Xdm Xcr116. Xaa Val Xdm Xao
117. Xag Val Xdm NH2118. Xah Val Xdm NH2119. Xag Val Xdm NH2120. Xai Val Xdm NH2121. Xak Xaf Xdm NH2122. Xal Xaf Xdm NH2123. Xam Xaf Xdm NH2124. Xas Xaf Xdm NH2125. Xav Xaf Xdm NH2126. Xaw Val Xdm NH2127. Xax Val Xdm NH2128. Xay Val Xdm NH2129. Xaz Val Xdm NH2130. Xba Xaf Xdm Xcf131. Xbb Xaf Xdm Xcf132. Xbc Val Xdm NH2133. Xbd Val Xdm NH2134. Xbe Val Xdm NH2135. Xbo Xaf Xdm NH2136. Xcs Xaf Xdm NH2137. Xct Val Xdm NH2138. Xcv Val Xdm NH2139. Xaa Val Xdt Xcx Phe NH2140. Xaa Val Xdt Xcx NH2141. Xaa Val Xdt NH2142. Xaa Val Xdu Xcx NH2143. Xaa Val Xdu NH2144. Xdv Val Xdm Xcf145. Xdw Val Xdm Xcf146. Xdx Val Xdm Xcf147. Xaa Val Xar Xae148. Xaa Val Xar Xdy
表Ⅰ 按實施例1和2製備的化合物的序列鑑定
符號Xaa…的含義歸納如下XaaN，N-二甲基纈氨酸
Xad四氫異喹啉羧酸Xae
Xaf叔-亮氨酸或2-叔-丁基甘氨酸
XagN，N-二甲基異亮氨酸XahN，N-二甲基亮氨酸XaiN，N-二甲基-叔-亮氨酸XakN-脒基-纈氨酸XalN-乙醯基-N-甲基纈氨酸XamN-甲基-N-苄基纈氨酸
XasN-甲基-N-異丙基纈氨酸
XavN，N-二乙基纈氨酸XawN-氟乙基纈氨酸XaxN，N-二丙基纈氨酸XayN-環丙基纈氨酸
XcsN-脲基-纈氨酸XctN，N-二甲基苯丙氨酸Xcu3-噻吩基丙氨酸XcvN-甲基-N-異丙基-叔-亮氨酸
Xdr3-萘丙氨酸
XdvN-甲基氨基磺醯-纈氨酸XdwN-甲基-N-甲基磺醯-纈氨酸XdxN-乳醯-N-甲基-纈氨酸
末端的-NH2表示C-末端胺基酸或結構單元呈醯胺形式。
用常規方法對本發明化合物進行抗癌活性分析，例如包含下述方法。
A.體外實驗方法細胞毒性可以通過附著細胞系的標準方法測定，如微培養四唑鎓分析(MTT)。這種分析方法的細節已公開(Alley，Mc等人，Cancer Research48589-601，1988)。指數生長培養的腫瘤細胞如HT-29結腸癌細胞或LX-I肺腫瘤可用於製備微滴平板培養物。96個小井的平板中(在150μl培養基中)每個小井接種5000-20，000個細胞，37℃下生長一晝夜。加入於10倍稀釋液中，濃度從10-4M到10-10M的要測試的化合物。然後培養細胞48小時。為確定每個小井中活細胞數，加入MTT染料(50μl的3mg/ml的3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基溴化四唑鎓鹽水溶液)。此混合物於37℃培養5h，然後在每個小井中加入50μl的25%pH2 SDS。培養一晝夜之後，以ELISA讀數器讀出每一小井中550nm下的吸收值，利用公式%T/C計算平行的每個小井的+/-SD平均值(處理成活細胞/對照成活細胞%)。
(處理細胞的OD值)/(對照細胞的OD值) ×100%＝%T/C以生長抑制為50%的T/C時給出的實驗化合物的濃度，稱為ⅠC50。
B.活體內實驗本發明化合物可以進一步用任何一種不同的活體活性的預診斷分析方法測試，活體活性可表明其在診斷上的實用性。使用裸鼠進行這種診斷分析實驗，以本領域公知的方法將原本是人類的腫瘤組織移入小鼠體內，通過給帶有移植腫瘤的小鼠服藥，來評價這種實驗化合物的抗腫瘤效果。
更具體地，將上述生長於無胸腺nede裸鼠中的人體腫瘤用約50mg大小的腫瘤片斷，移植入一新的受體動物中，移植那天記為0天，6～10天之後，靜脈內或腹膜內注射此實驗化合物治療病鼠，每次劑量5～10隻老鼠為一組。每天給藥，劑量從10～100mg/Kg體重，給5天，10天或15天，每周兩次測定腫瘤直徑和體重，用Vernier Capliper測得的直徑並用下面公式計算腫瘤體積(長×寬2)/2＝腫瘤重量mg相對於未治療的腫瘤，每組治療都要計算腫瘤重量的平均值，確定每組的T/C值。
序列清單(1)一般信息(ⅰ)申請人(A)姓名BASF Aktiengesellschaft(B)街道Carl-Bosch-Strasse 38(C)城市Ludwigshafen(E)國家聯邦德國(F)郵政編碼(ZIP)D-67056(G)電話0621/6048526(H)傳真0621/6043123(I)電傳1762175170(ⅱ)發明名稱新型肽，其製備及應用(ⅲ)序列數目9(ⅳ)計算機可讀方式(A)介質軟盤(B)計算機IBM PC 兼容機
(C)作業系統PC-DOS/MS-DOS(D)軟體Patent In Release ＃1.0，＃125版(EPO)(2)I DNo∶1序列的信息(ⅰ)序列特徵(A)長5個胺基酸(B)類型胺基酸(C)鏈數單鏈(D)拓撲結構線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述序列IDNo∶1Xaa Val Xaa Xaa Xaa1 5(2)I DNo∶2序列的信息(ⅰ)序列特徵(A)長5個胺基酸(B)類型胺基酸(C)鏈數單鏈(D)拓撲結構線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述I DNo∶2序列Xaa Val Xaa Xaa Xaa1 5(2)I DNo∶3序列的信息
(ⅰ)序列特徵(A)長4個胺基酸(B)類型胺基酸(C)鏈數單鏈(D)拓撲結構線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述I DNo∶3序列Xaa Xaa Xaa Xaa1(2)I DNo∶4序列的信息(ⅰ)序列特徵(A)長4個胺基酸(B)類型胺基酸(C)鏈數單鏈(D)拓撲結構線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述I DNo4序列Xaa Leu Xaa Xaa1(2)I DNo∶5序列的信息(ⅰ)序列特徵(A)長5個胺基酸(B)類型胺基酸(C)鏈數單鏈
(D)拓撲結構線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述I DNo∶5序列Xaa Val Xaa Xaa Phe1 5(2)I DNo∶6序列的信息(ⅰ)序列特徵(A)長4個胺基酸(B)類型胺基酸(C)鏈數單鏈(D)拓撲結構線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述I DNo∶6序列Xaa Xaa Phe Xaa1(2)I DNo∶7序列的信息(ⅰ)序列特徵(A)長4個胺基酸(B)類型胺基酸(C)鏈數單鏈(D)拓撲結構線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述I DNo∶7序列Xaa Val Xaa Phe
(2)I DNo∶8序列的信息(ⅰ)序列特徵(A)長4個胺基酸(B)類型胺基酸(C)鏈數單鏈(D)拓撲結構線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述I DNo∶8序列Xaa Xaa Xaa Phe1(2)I DNo∶9序列的信息(ⅰ)序列特徵(A)長4個胺基酸(B)類型胺基酸(C)鏈數單鏈(D)拓撲結構線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述I DNo∶9序列Xaa Val Xaa Pro1
流程圖1在聚合物支持體上的Boc保護基技術
Boc＝叔-丁氧羰基保護基PG＝側鏈保護基R＝胺基酸側鏈流程圖2在聚合物支持體上的Fmoc保護基技術
Fmoc＝9-芴甲氧羰基保護基PG＝側鏈保護基R＝胺基酸側鏈
權利要求
1.通式所示的肽及其與生理上可接受的酸形成的鹽
式中R1是烷氧基；烷基；環烷基；烷基磺醯基；三氟乙基；氟乙基；二氟乙基；三氟乙醯基；脒基；脲基；哌啶子磺醯基；嗎啉代磺醯基；苄氧羰基；烷氧羰基；可被烷基取代的氨基磺醯基；羥基；可被一個或多個取代基取代的苯磺醯基，這些取代基選自烷基，-N(CH3)2，硝基，滷素，和CF3；或者是NR8R9，其中R8和R9分別為氫或烷基；R2是氫；烷基；環烷基；醯基；苯甲醯基或苄基，其至多可被三個取代基取代，這些取代基選自硝基，滷素，CF3，烷基和烷氧基(優選的為C1-4)；或者R1-N-R2一起形成5-或6-元的雜環，其可以是非取代的，或可以被一個或多個取代基取代，這些取代基選自苯基，苄基，烷基，N(CH3)2，氧代基，硝基，噻吩基，CONH2，COOMe和COOEt；X是氫，烷基，環烷基，-CH2-環己基或苄基；A選自由下列殘基組成的基團纈氨醯，異亮氨醯，亮氨醯，別異亮氨醯，α-氨基異丁醯，3-叔丁基丙氨醯，2-叔丁基甘氨醯，3-環己基丙氨醯，2-乙基甘氨醯或2-環己基甘氨醯；R3是氫或烷基；B是氫或烷基，環烷基，-CH2-環己基或苄基；D是氫，羥基，乙酸基，或烷氧基；E是氫或烷基；或B和E一起形成-(CH2)3-，-(CH2)2-，-CH(CH3)CH2CH2-，-CH(CH3)CH2-，-C(CH3)2CH2CH2-，或-C(CH3)2CH2-；R7是-NR4-CHG-CHK-CHL-CO-；或
其中V是氧或硫；Y1是H；Z1是H或低級烷基；或Y1和Z1一起形成一個鍵；W1是H，烷基或苯基；R4是氫或烷基；G是氫，烷基，環己基，-CH2-環己基，或苄基；K是氫，羥基，乙酸基，或烷氧基；L是氫，或烷基，或R4和G一起形成-(CH2)4-，-(CH2)3-或-CH2-CH(OH)-CH2-；M選自由下列基團組成的一組殘基1-氨基-戊基-1-羰基，纈氨醯，2-叔丁基甘氨醯，脯氨醯，羥基脯氨醯，異亮氨醯，亮氨醯，3-環己基丙氨醯，苯丙氨醯，四氫異喹啉基-2-羰基，3-噻唑基丙氨醯，3-噻吩基丙氨醯，組氨醯，2-氨基吲哚基-2-羰基，酪氨醯，3-吡啶基丙氨醯，3-叔丁基丙氨醯，2-環己基甘氨醯，或3-萘基丙氨醯；或者R1R2N-CHX-CO-和A一起形成
其中T是氫或低級烷基；U是氫或低級烷基；n是1，2或3；V是氧或硫；Y是氫；Z是氫或低級烷基；或Y和Z一起形成一個鍵；W是氫，低級烷基或苯基；a，b和d分別為0或1；Q是羥基，烷氧基，苯氧基，苄氧基或取代的或未被取代的氨基；條件是b和d為0時，Q不能是羥基或烷氧基。
2.根據權利要求1通式Ⅰ所示的化合物，其中R1-N-R2為5-或6-元的雜環，其結構式如下
其可以為非取代的或者被一個或多個取代基取代，這些取代基可單獨選自苯基，苄基，烷基，N(CH3)2，硝基，噻吩基，CONH2，COOEt或一個氧代基。
3.根據權利要求1的通式Ⅰ所示的化合物，其中Q是R5-N-R6中的一個氨基部分，其中R5是H，或羥基，或C1-7的烷氧基，或苄氧基，或C1-7的烷基，或氟乙基，或二氟乙基，或三氟乙基，或C3-7的環烷基;R6是H，或C1-7的烷基，或三氟乙基，或苯基(其可以至多被三個取代基取代，這些取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，可形成環系的C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或苄基(至多可被三個取代基取代，取代基單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，可形成環系的C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或萘基(至多可被二個取代基取代，取代基或單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或二苯甲基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或二苯基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或三苯甲基(至多可被三個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或二苯甲基乙基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或二苯甲基甲基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或萘甲基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或苊基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或苊甲基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或吡啶基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或吡啶甲基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或苯並噻唑基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或苯並異噻唑基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或苯並吡唑基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或苯並噁唑基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或芴基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或氨芴基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或吡啶基(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，COOEt，CONHBzl，CON(Bzl)2，可形成環系的C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，或C1-7-烷基-磺醯基)，或5-元雜芳基[至多可被三個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，氰基，COOMe，COOEt，硫代甲基，硫代乙基，硫代苯基，吡啶甲基，乙醯基，-CH2-COOEt，CONH2，CONHBzl，CON(Bzl)2，可形成環系的C1-4-烷基，C1-4烷氧基，苯氧基，苄氧基，苯基(至多可被四個取代基取代，取代基可單獨為硝基，CF3，滷素，或C1-4烷基)，苄基(至多可被四個取代基取代，取代基可單獨為硝基，CF3，滷素，C1-4烷基，萘基，C1-7-烷基-磺醯基，苯磺醯基，或C1-4-二烷基氨基)]，或-CHR7-5-元雜芳環(至多可被二個取代基取代，取代基可單獨為CF3，硝基，滷素，CONHBzl，CON(Bzl)2，COOMe，COOEt，COOCH(CH3)2，CONH2，COOBzl，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，苯基，苄基，萘基，或C1-7-烷基-磺醯基[R7＝H，直鏈或支鏈的C1-5-烷基，苄基;或R7和R5一起形成-(CH2)3-或-(CH2)4-])。
4.根據權利要求1的通式Ⅰ所示的化合物，其中Q是式R5-N-R6的氨基部分，其形成的結構選自由下列組成的基團
上述基團可以是未被取代的或可被一個或多個取代基取代，取代基可單獨選自CF3，硝基，滷素，氧代基，氰基，N，N-二甲基氨基，CONHBzl，CON(Bzl)2，C1-6-烷基(可以形成一環系)，C1-4-烷氧基，苯氧基，苄氧基，萘基，嘧啶基，COOEt，COOBzl，C3-6環烷基，吡咯烷基，哌啶基，噻吩基，吡咯基，-CH2-CO-NCH(CH3)2，-CH2-CO-N(CH2)4，-CH2-CO-N(CH2)4O，苄基(至多可被三個取代基取代，取代基可單獨選自硝基，滷素，CF3，硫代甲基，或相應的亞碸或碸，硫代乙基，或相應的亞碸或碸，C1-4-烷基，和C1-4烷氧基)，和苯基(至多可被三個取代基取代，取代基可單獨選自硝基，滷素，CF3，硫代甲基，硫代乙基，C1-4-烷基，和C1-4烷氧基)。
5.根據權利要求1的通式Ⅰ所示的化合物，其中b為零。
6.根據權利要求1的通式Ⅰ所示的化合物，其中d為零，b為-NR4-CHG-CHK-CHL-CO，且Q不為羥基或烷氧基。
7.根據權利要求1的通式Ⅰ所示的化合物，其中b和d為零，且Q不為羥基或烷氧基。
8.根據權利要求1的通式Ⅰ所示的化合物，其中d為零，R7為
9.根據權利要求1的通式Ⅰ所示的化合物，其中a為零。
10.根據權利要求1的通式Ⅰ所示的化合物，其中a和d為零。
11.根據權利要求1的通式Ⅰ所示的化合物，其中b和d為1，Q為羥基，C1-6-烷氧基或苄氧基部分。
12.一種藥物組合物，包括藥物上可接受的載體和一種於治療上有效量的權利要求1的化合物。
13.一種治療哺乳動物腫瘤的方法，包括對生有此腫瘤的哺乳動物體給藥抑制腫瘤量的權利要求1的化合物。
14.根據權利要求1的通式Ⅰ所示的化合物的製備方法，其特徵在於按肽化學中公知的方法製備上述化合物。
全文摘要
公開了以上通式所示的新型肽。其中R
文檔編號C07K5/02GK1095724SQ9311264
公開日1994年11月30日 申請日期1993年12月16日 優先權日1992年12月16日
發明者A·豪特, B·揚森, K·裡特, D·克林格, G·凱爾豪爾, C·羅默達爾, T·巴羅扎裡, X·-D·錢 申請人:Basf公司