向日葵秸稈抑菌劑、製備方法及其在防治馬鈴薯早疫病中的應用與流程
2023-05-27 18:33:56
本發明涉及一種新型農藥及製備方法和應用，具體涉及一種向日葵秸稈抑菌劑及其製備方法和在防治馬鈴薯早疫病中的應用。
背景技術：
馬鈴薯早疫病(Alternaria solani Sorauer)是互隔交鏈孢(Alternaria alternata)引起的一種世界性病害，在我國馬鈴薯產區分布較為普遍。早疫病多發生在馬鈴薯生長後期，引起葉片提前乾枯，產量降低，個別嚴重地塊全田無收。近年來，早疫病在許多馬鈴薯產區頻繁反生並有上升趨勢，一般年份可造成馬鈴薯減產5％～10％，嚴重的年份減產量可達50％以上。由互隔交鏈孢引起的貯藏期馬良數塊莖腐爛也成為馬鈴薯產業的一個嚴重問題，在一些地區，貯藏塊莖損失達到30％。馬鈴薯早疫病病情嚴重，產量損失越大，病害嚴重為50％時，產量損失20％，病害嚴重度為100％時，產量損失為40％。
在實際生產中抗早疫病的馬鈴薯品種較少，主要依靠化學藥劑防治，常用的殺菌劑主要有代森錳鋅、百菌清、嘧菌酯等，但是這些化學藥劑防治效果不理想，使用成本較高，且國外報導互隔交鏈孢第嘧菌酯已產生抗藥性。為了提高防治效果和降低成本，現有技術中常利用生產中的殺菌劑進行混配，來延緩病菌抗藥性的產生，例如臺蓮梅等人研究混配殺菌劑對馬鈴薯早疫病的防效及對產量的影響(混配殺菌劑對馬鈴薯早疫病的防效及對產量的影響,臺蓮梅,江蘇農業科學,第42卷第9期，2014：110-112)，採用嘧菌酯和代森錳鋅混用達到優勢互補，但是混配殺菌劑依然能夠促使病菌產生抗藥性。
技術實現要素：
有鑑於此，本發明的目的在於提供一種植物源抑菌劑-向日葵秸稈提取物，使所述向日葵秸稈提取物對引起的馬鈴薯早疫病的互隔交鏈孢有抑制作用，從而達到對馬鈴薯早疫病的防效的目的。
為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：
本發明提供了向日葵秸稈抑菌劑，包括以向日葵秸稈為原料，採用溶劑提取獲得的向日葵秸稈提取物，所述溶劑為石油醚。
優選的，所述向日葵秸稈的質量與溶劑的體積比為1kg：(5～15)L。
優選的，所述提取的方法包括以下步驟：
1)將向日葵秸稈粉碎，得到的向日葵秸稈粉末；
2)將所述向日葵秸稈粉末與溶劑混合，浸提，得到浸提液；
3)將所述步驟2)得到的浸提液離心，得到的上清液為向日葵秸稈抑菌劑。
優選的，所述浸提的時間為3～5d。
優選的，所述步驟3)中的離心後還包括：將得到的上清液進行濃縮和乾燥。
本發明還提供一種所述的向日葵秸稈抑菌劑的製備方法，包括以下步驟：
1)將向日葵秸稈粉碎，得到的向日葵秸稈粉末；
2)將所述向日葵秸稈粉末與溶劑混合，浸提，得到浸提液，所述溶劑為石油醚、乙酸乙酯或石油醚；
3)將所述步驟2)得到的浸提液離心，得到的上清液為向日葵秸稈抑菌劑。
優選的，所述步驟2)中的向日葵秸稈粉末在與溶劑混合前過60～100目篩。
優選的，所述步驟3)中離心的轉速為2000～4000r/min轉速；所述步驟3)中的離心的時間為10～20min。
本發明還提供了所述的向日葵秸稈抑菌劑在抑制馬鈴薯早疫病菌中的應用。
優選的，所述的向日葵秸稈抑菌劑的質量濃度為80～360mg/ml。
本發明提供了向日葵秸稈抑菌劑，包括以向日葵秸稈為原料採用溶劑提取獲得的向日葵秸稈提取物，所述溶劑為石油醚。採用石油醚為提取溶劑從向日葵秸稈中的提取活性物質，所得向日葵秸稈石油醚提取物中的活性物質均有抑菌功能。
同時，本發明提供了向日葵秸稈抑菌劑，提取的原料來源廣泛，容易獲得，通過將向日葵秸稈提取抑菌物質，將向日葵秸稈變廢為寶，同時減少了向日葵秸稈因焚燒對環境造成的汙染，也降低了向日葵秸稈的處理成本。
本發明還提供一種所述的向日葵秸稈抑菌劑的製備方法，將向日葵秸稈粉碎後得到的粉末與溶劑混合，浸提，離心，得到的上清液為向日葵秸稈抑菌劑。所述製備方法具有方法簡單，操作簡便，製備方法對操作人員的技術要求不高，重複性好的特點。
本發明還提供所述的向日葵秸稈抑菌劑在抑制馬鈴薯早疫病菌中的應用。所述向日葵秸稈抑菌劑能夠有效抑制引起馬鈴薯早疫病的互隔交鏈孢的生長，從而達到對馬鈴薯早疫病的抑制作用，抑菌率達到10.57％～18.02％。
進一步的，本發明所述的向日葵秸稈抑菌劑在質量濃度為80～360mg/mL時對引起馬鈴薯早疫病的互隔交鏈孢的抑菌圈直徑為12.30～12.83mm，對互隔交鏈孢的抑菌率為15.27％～17.75％。
具體實施方式
本發明提供了向日葵秸稈抑菌劑，包括以向日葵秸稈為原料，採用溶劑提取獲得的向日葵秸稈提取物，所述溶劑為石油醚。
本發明提供了向日葵秸稈抑菌劑，採用弱極性的溶劑石油醚提取向日葵秸稈中的活性物質，得到的向日葵秸稈石油醚提取物中的活性物質有抑菌功能。
在本發明中，所述向日葵秸稈的質量與溶劑的體積比優選為1kg：(5～15)L，更優選為1kg：10L。
在本發明中，所述提取的方法優選包括以下步驟：
1)將向日葵秸稈粉碎，得到向日葵秸稈粉末；
2)將所述向日葵秸稈粉末與溶劑混合，浸提，得到浸提液；
3)將所述步驟2)得到的浸提液離心，得到的上清液為向日葵秸稈提取物。
在本發明中，所述向日葵秸稈選擇無蟲害、黴變的向日葵秸稈。
在本發明中，所述向日葵秸稈優選在粉碎之前進行烘乾。所述烘乾的溫度優選為35～60℃，更優選為37～50℃；烘乾的時間優選為1～5h，更優選為2～4h。
在本發明中，所述粉碎的方法沒有特殊限制，採用本領域技術人員所熟知的粉碎方法即可。在本發明中，所述的粉碎通過研磨的方法實現。
在本發明中，所述粉碎後向日葵秸稈的粒度優選為60～100目，更優選為70～90目。
得到向日葵秸稈粉末後，本發明將所述向日葵秸稈粉末與溶劑混合，浸提，得到浸提液。本發明對所述混合的方法沒有特殊限制，採用本領域技術人員所熟知的混合方法即可。在本發明實施例中，所述的混合採用攪拌的方法使原料和溶劑混合均勻。
在本發明中，所述浸提的時間為3～5d。所述浸提優選在常溫條件下進行。
得到浸提液後，本發明對所述浸提液進行離心，得到上清液。在本發明中，所述離心的速度優選為2000～4000r/min，更優選為3500r/min。所述離心的時間為10～20min，更優選為15min。
得到上清液後，本發明優選將所述上清液進行濃縮和乾燥，得到向日葵秸稈提取物固體粉末。
在本發明中，所述濃縮優選為旋轉蒸餾濃縮。所述的旋轉蒸餾濃縮的溫度優選為30～45℃，更優選為35～40℃。所述濃縮的時間優選為1～5h，更優選為2～4h。
在本發明中，所述的乾燥優選為真空乾燥。所述的真空乾燥的冷阱溫度優選為-25～-55℃，更優選為-30～-45℃。所述的真空乾燥的真空度優選為15～110KPa，更優選為30～100KPa。
在本發明中，向日葵秸稈抑菌劑優選還包括農藥領域接受的輔料，製成農藥領域的劑型。
本發明還提供一種所述的向日葵秸稈抑菌劑的製備方法，包括以下步驟：
1)將向日葵秸稈粉碎，得到的向日葵秸稈粉末；
2)將所述向日葵秸稈粉末與溶劑混合，浸提，得到浸提液，所述溶劑為石油醚、乙酸乙酯或石油醚；
3)將所述步驟2)得到的浸提液離心，得到的上清液為向日葵秸稈抑菌劑。
在本發明中，所述向日葵秸稈粉末在與溶劑混合前過60～100目篩，更優選為70～90目。
在本發明中，所述離心的轉速優選為2000～4000r/min，更優選為3500r/min；所述離心的時間優選為10～20min，更優選為15min。
本發明中，所述得到的向日葵秸稈抑菌劑優選還包括農藥領域接收的輔料。
在本發明中，所述農藥領域接受的輔料的種類優選為優選包括潤溼劑，分散劑，崩解劑，穩定劑，pH值調節劑，消泡劑，增效劑和填料中的一種和幾種。
在本發明中，所述向日葵秸稈抑菌劑優選製成農藥領域的抑菌劑劑型。
在本發明中，所述劑型的種類優選為石油醚分散粒劑或可溼性粉劑。
本發明還提供了所述的向日葵秸稈抑菌劑在抑制馬鈴薯早疫病菌中的應用。
在本發明中，所述的向日葵秸稈抑菌劑的質量濃度優選為80～36mg/ml，更優選為160～240mg/ml。
下面結合實施例對本發明提供的向日葵秸稈抑菌劑、製備方法及其在防治馬鈴薯早疫病中的應用進行詳細的說明，但是不能把它們理解為對本發明保護範圍的限定。
實施例1
選擇無蟲害、黴變的向日葵秸稈為原料，用粉碎機製成粉狀，過95目篩，收集得到的向日葵秸稈粉末。稱取粉末1kg，與10L的石油醚混合，加入桶中浸提3天，浸提液以3000r/min轉速離心20min，收集上清液，在45℃的條件下旋蒸濃縮2h，濃縮物經真空冷凍乾燥，得提取物粉末，4℃冰箱中保藏備用。
實施例2
選擇無蟲害、黴變的向日葵秸稈為原料，用粉碎機製成粉狀，過70目篩，收集得到的向日葵秸稈粉末。稱取粉末1kg，與15L的石油醚混合，加入桶中浸提5天，浸提液以4000r/min轉速離心10min，收集上清液，在35℃的條件下旋蒸濃縮3h，濃縮物經真空冷凍乾燥，得提取物粉末，4℃冰箱中保藏備用。
實施例3
選擇無蟲害、黴變的向日葵秸稈為原料，用粉碎機製成粉狀，過60目篩，收集得到的向日葵秸稈粉末。稱取粉末1kg，與5L的石油醚混合，加入桶中浸提4天，浸提液以3500r/min轉速離心15min，收集上清液，在30的條件下旋蒸濃縮4h，濃縮物經真空冷凍乾燥，得提取物粉末，4℃冰箱中保藏備用。
實施例4、5和6
將實施例1，實施例2和實施例3得到的向日葵秸稈石油醚提物粉末分別配製成質量濃度為80mg/mL、160mg/mL、240mg/mL和360mg/mL。
向日葵秸稈石油醚提取物抑菌試驗準備4個含20mLPDA培養皿，待PDA凝固後，將9個濃度的提取液分別滴入1mL至不同培養皿中並塗布均勻作為試驗組，未作處理的培養皿為空白對照。每個培養皿倒置等距離接入3個培養1周的互隔交鏈孢菌餅(直徑為6mm)。接種後，所有培養皿於28℃恆溫培養箱中培養24h。培養結束後，用遊標卡尺以十字交叉法測量計算每個培養皿中3個菌落直徑的平均值，，並根據如下公式計算抑菌率。
實施例1、實施例2和實施例3得到的向日葵秸稈石油醚提取物對互隔交鏈孢的抑制作用見表1。
表1向日葵秸稈石油醚提取物對互隔交鏈孢的產生的抑菌圈與抑菌率結果
由以上實施例可知，本發明提供了向日葵秸稈抑菌劑，包括以向日葵秸稈為原料採用溶劑提取獲得的向日葵秸稈提取物，所述溶劑為石油醚。所述向日葵秸稈抑菌劑有效成分濃度在80mg/mL以上對馬鈴薯早疫病病原菌-互隔交鏈孢具有明顯的抑菌效果，抑菌率為10.72％，並且隨著有效成分濃度增加對互隔交鏈孢具有明顯的抑菌效果增強。從成本角度考慮，優選向日葵秸稈抑菌劑有效成分濃度在160～240mg/mL時能夠達到較好的抑菌效果，抑菌率15.27％～17.75％。當向日葵秸稈抑菌劑有效成分濃度在360mg/mL，抑菌率最高達到18.02％。
以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對於本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。