一種治療實體腫瘤的克拉屈濱緩釋植入劑的製作方法

2023-06-09 18:48:51 2

專利名稱：一種治療實體腫瘤的克拉屈濱緩釋植入劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種治療實體腫瘤的緩釋植入劑，屬於藥物技術領域。(二) 背景技術關於癌症的研究雖已取得了較大進展，但其死亡率仍居各種常見死因的前列。最新的數 據表明，2006年我國有300萬人死於癌症。癌症發病率逐年上升且呈年輕化趨勢，有資料顯 示，在不到20年的時間裡，我國癌症發病率上升了69%，死亡率增長了29.4%。據世界衛生組 織最新統計，到2020年全球癌症發病率將增加百分之五十，發病人數增到一千五百萬。預計 2020年我國每年將有400萬人死於癌症因此，探討一種有效的治療癌症的方法或藥物已經成 為目前研究的熱點。克拉屈濱(氯法拉賓、Cladribine， clodarabine， Leustatin)是一種抗白血病新藥， 主要用於治療慢性淋巴細胞性白血病，非霍奇金淋巴肉瘤，皮膚T細胞淋巴瘤， Waldenstrom' s巨球蛋白血症和兒童急性髓性細胞白血病。然而該要單獨用於治療其它腫瘤 的效果不清楚。雖然與其它抗癌藥聯合對某些腫瘤可能具有一定的作用，但通過常規途徑給 藥所引起的全身毒副作用限制了其臨床應用。(三) 發明內容基於以上對現有技術的考査，本發明對其它腫瘤進行了比較，結果發現克拉屈濱對腦腫 瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱癌、睪丸癌、結腸癌及直腸癌等實 體腫瘤具有較為明顯的作用效果。進一步研究發現克拉屈濱局部緩釋對甲狀腺癌、鼻咽癌、 卵巢癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它顱外實體腫瘤也具有很好的治療作 用。局部藥物緩釋在保證了局部用藥範圍內持久而較穩定的藥物濃度的同時，明顯降低了全 身藥物濃度，減輕了毒副作用。本發明針對現有技術的不足，提供一種緩釋植入劑，用於治療實體腫瘤。 本發明治療實體腫瘤的緩釋植入劑，其特徵在於該緩釋植入劑含抗癌有效量的克拉屈濱 、緩釋輔料和一定量的緩釋調節劑，其中各組成成分的重量比為(1) 克拉屈濱 0. 1%-60%(2) 緩釋輔料 40%-99%(3) 緩釋調節劑 0-15%緩釋輔料包括下列之一或其組合 (1)生物相容性多聚物，包括生物可降解的或生物不可降解的多聚物及其混合物或共 聚物，(2)水溶性低分子化合物，或/和(3)用於實現針劑和緩釋劑等藥物劑型的合適的添加劑及賦型劑。上述生物可降解的多聚物包括天然的和/或合成的多聚物。合成的多聚物如，但不限於，聚酐類、聚羥基酸、聚酯(polyesters)、聚醯胺(polyamides)、聚原酸酯( polyorthoesters)、聚磷腈(polyphosphazenes)、對羧苯基丙烷(p-CPP)、癸二酸( sebacic acid)、聚苯丙生(對羧苯基丙烷與癸二酸的共聚物)等；天然的多聚物如，但不 限於，蛋白質及多糖，包括透明質酸、膠原蛋白、軟骨素、明膠、白蛋白等。上述聚酐類可選用，但不限於，芳香聚酐、脂肪族聚酐；其中芳香聚酐將解較慢，熔點 高，有機溶劑中溶解度低，然而，芳香聚酐與脂肪族聚酐的共聚物卻較為理想(美國專利 4757128)。其中的代表物是聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)與癸二酸(SA)的共聚物)， 而對羧苯基丙烷為芳香聚酐，癸二酸則是一個芳香二酸與一個脂肪二酸的共聚物。可選用的 其它芳香或脂肪族聚酐的共聚物在其它美國專利中已有詳細描述(US4857311; 4888176; 4789724)。緩釋輔料優選聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、聚苯丙生、乙烯乙酸乙烯酯共聚 物；緩釋調節劑選自木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、甘露醇、山梨醇、透明質酸、 膠原蛋白、軟骨素、明膠及白蛋白中的一種或其組合。上述聚羥基酸可選用，但不限於，聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸(PLA)與 聚乙醇酸的混合物、乙醇酸和羥基羧酸的共聚物(PLGA);當PLA和PLGA混合時，其含量重 量百分比分別為O. 1-99. 9%和99. 9-0. 1%。聚乳酸的分子量可為，但不限於，5000 100， 000，但以IO， 000 50000為優選，以10， 000 20000為最優選；聚乙醇酸的分子量可為， 但不限於，5000 100， 000，但以IO， 000 50000為優選，以IO， 000 20000為最優選；以 上聚羥基酸可單選或多選。當單選時，以聚乳酸(PLA)或羥基羧酸和乙醇酸的共聚物( PLGA)為優選，共聚物的分子量可為，但不限於，1000 100， 000，但以IO， 000 50000為 優選；以IO， 000 20000為最優選；當多選時，以高分子多聚物或不同高分子多聚物組成的 複合多聚物或共聚物為優選，以含不同分子量聚乳酸或癸二酸的複合多聚物或共聚物為最優 選，如，但不限於，分子量為5000到10000的聚乳酸與分子量為20000到50000的聚乳酸混合 、分子量為10000到20000的聚乳酸與分子量為30000到80000的PLGA混合、分子量為5000到 10000的聚乳酸與癸二酸混合、分子量為30000到80000的PLGA與癸二酸混合。上述生物不可降解的多聚物包括，但不限於有機矽聚合物、乙烯乙酸乙烯酯共聚物( Ethelene-vinyl acetate copolymer, EVAc)、 聚丙烯腈(polyacrylonitriles)， 聚氨基甲 酸酯(polyurethanes)及聚磷腈(polyphosphazenes)等。組合物可通過直接擴散的方式將有 效成分釋放出來。為調節藥物釋放速度或改變本發明抗癌緩釋植入劑的其它特性，可以改變聚合物的單體 成分或分子量、添加或調節緩釋輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不 限於，各種糖和鹽等。其中糖可為，但不限於，木糖醇、低聚糖及甲殼素等，其中鹽可為但 不限於，鉀鹽和鈉鹽等。本發明緩釋植入劑所用的緩釋輔料可為上述緩釋輔料中的任何一種或多種物質，但以水 溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、癸二酸、含聚乳酸或癸二酸 的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限於，PLGA、乙醇 酸和羥基羧酸的混合物、癸二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羥基 羧酸的共混比例是10/90-90/10 (重量)，最好是25/75-75/25 (重量)。共混的方法是任意 的。乙醇酸和羥基羧酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90%和90-10%。芳香聚酐的代表 物是對羧苯基丙烷(P-CPP)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與癸二酸共聚時的含量分別為重量百分比 10-60%和20-90%，共混重量比是10-40: 50-90，最好是重量比15-30: 65-85。緩釋輔料在《緩釋輔料大全》(第123頁，四川科學技術出版社1993年出版，羅明生和 高天惠主編)中已有詳細描述。另外，中國專利(申請號96115937.5;91109723. 6;9710703. 3;01803562.0)及美國發明專利(專利號5， 651， 986)也列舉了某些 緩釋輔料。包括充填劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑 或阻滯劑。以上緩釋輔料有的具有多重作用，因此有的同種物質被列為不同的類別。本發 明抗實體腫瘤組合物可選用的支持物可為上述緩釋輔料中的任何一種或多種物質，並不完全 根據其分類或定義來限制組合物的技術特徵。因此，本發明的緩釋輔料主要選自聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物( PLGA)、聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP):癸二酸(SA)共聚物)、乙烯乙酸乙烯酯共 聚物(EVAc)、木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質酸、膠原蛋白、明膠及白蛋 白中的一種或其組合。其中聚乳酸(PLA)的分子量峰值為5000-15000、 10000-20000、 20000-35000或30000-50000;聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)的分子量峰值為 5000-15000、 15000-35000、 35000-45000或45000-80000;聚乙醇酸與羥基乙酸的重量百分 比為10: 90， 20: 80， 30:70， 40: 60， 50: 50或60: 40;聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP):癸二酸(SA)共聚物)中對羧苯基丙烷(p-CPP)與癸二酸(SA)的重量百分比為 10: 90， 20: 80， 30:70， 40: 60， 50: 50或60: 40。本發明的特點在於所用的緩釋輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它 緩釋輔料。添加的緩釋輔料統稱為添加劑。添加劑可根據其功能分為充填劑、致孔劑、賦型 劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻滯劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑等。緩釋輔料還可為流質，如，但不限於芝麻油、混懸液、蒸餾水、生理衝液、以及半固態 物質，如(但不限於)果凍、糊劑、軟膏等，上述緩釋輔料適用於含或不含添加劑的組合物為調節藥物釋放速度或改變本發明抗癌體內植入劑的其它特性，可以改變聚合物的單體 成分或分子量、添加或調節緩釋輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不 限於，各種糖和鹽等。其中糖可為但不限於，木糖醇、低聚糖及甲殼素等，其中鹽可為但不 限於，鉀鹽和鈉鹽等。緩釋植入劑的用量取決於很多因素，如，但不限於，腫瘤體積、病人體重、給藥方式、 病情進展情況及治療反應。但其原則是在能夠降低腫瘤細胞的修復能力，增加化療作用效 果的同時並不明顯增加藥物的毒性反應。有效劑量為O. 01-100毫克/患者，以l-50毫克/患 者為理想，以2-30毫克/患者為最理想。本發明可製成各種形狀，其中有效成份的含量因不同需要而定。可製成各種劑型，如， 但不限於，針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、植入劑、緩釋劑及植入緩釋劑等，其中植入劑主要 為緩釋植入劑、控釋植入劑或遲釋植入劑；呈各種形狀，如，但不限於，顆粒樣、片狀、球 形、塊狀、針狀、棒狀及模樣；可經各種途徑給藥，如動脈、皮下、肌肉、皮內、腔內、瘤 內、瘤周等。給藥途逕取決於多種因素，如腫瘤所在部位、是否手術或轉移、腫瘤體積大小 、腫瘤類別、病人年齡、身體狀況、生育狀況及要求等。為於腫瘤所在部位獲得有效藥物濃 度，可選擇性地動脈灌注，腔內灌注(intracavitary),腹腔(intraperitoneal)或胸腔 (intrapleural)及椎管內(intraspinal)給藥，也可臟器內放置，如腸腔內、膀胱內、宮腔 內、陰道內、胃內及食道內等。在各種途徑中，以局部給藥，如以選擇性動脈、瘤內、瘤 周注射為主，以瘤內、瘤周或瘤腔放置緩慢釋放的形式為優選，如可選用可種緩釋泵、緩釋 膠囊、緩釋劑、植入劑及緩釋植入劑。可用任意的方法製備。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳 細描述，包括若干種製備緩釋製劑的方法:如，但不限於，(i)把載體支持物粉末與藥物混 合然後壓製成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然後固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解於溶劑中，把待包裝的藥物溶解 或分散於聚合物溶液中，然後蒸發溶劑，乾燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧乾燥法；及(v)冷凍乾燥法等。其中溶解法可用以微球的製造，其方法是任意的，抗癌緩釋植入劑也 可包裝脂質體中。組合物的有效成分可均勻地包裝於整個緩釋輔料中，也可包裝於載體支持 物中心或其表面；可通過直接擴散或經多聚物降解的方式或如此兩種方式將有效成分釋放。 緩釋植入劑中各組份及其在組合物中的重量百分含量優選下列之一(A) 1%-5%的克拉屈濱和95%-99%的聚乳酸；(B) 5%-10%的克拉屈濱和90%-95%的聚乳酸；(C) 10%-15%的克拉屈濱和85%-90%的聚乳酸；(D) 15%-25%的克拉屈濱和75%-85%的聚乳酸；(E) 25%-40%的克拉屈濱和60%-75%的聚乳酸；(F) 1%-10%的克拉屈濱和90%-99%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(G) 10%-20%的克拉屈濱和80%-90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(H) 20%-30%的克拉屈濱和70%-80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(I) 30%-40%的克拉屈濱和60%-70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物； (J) 5%-15%的克拉屈濱和85%-95%的聚苯丙生；或(K) 15%-35%的克拉屈濱和65%-85%的聚苯丙生。緩釋植入劑中各組份及其在組合物中的重量百分含量進一步優選下列之一(A) 1%-5%的克拉屈濱和85%-98%的聚乳酸和0. 5%-15%的甘露醇；(B) 5%-10%的克拉屈濱和90%-95%的聚乳酸和0. 5%-10%的山梨醇；(C) 10%-15%的克拉屈濱和85%-90%的聚乳酸和0. 5%-10%的氯化鈉；(D) 15%-25%的克拉屈濱和75%-85%的聚乳酸和0. 25%-5%的甘露醇；(E) 25%-40%的克拉屈濱和60%-75%的聚乳酸0. 1%-8%的山梨醇；(F) 1%-10%的克拉屈濱和90%-99%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0. 5%-15%的甘露醇；(G) 10%-20%的克拉屈濱和80%-90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0. 5%-10%的山梨醇;(H) 20%-30%的克拉屈濱和70%-80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0. 5%-10%的氯化鈉;(I) 30%-40%的克拉屈濱和60%-70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0. 25%-5%的甘露醇; (J) 5%-15%的克拉屈濱和85%-95%的聚苯丙生和1%-5%的甘露醇；或(K) 15%-35%的克拉屈濱和65%-85%的聚苯丙生和0. 25%-7. 5%的甘露醇。 緩釋植入劑用於治療實體腫瘤，包括腦腫瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結 腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮膚癌、頭頸部腫瘤和源於膽囊、口腔、外周神經系統、黏膜、腺 體、血管、骨組織、淋巴結、眼睛、的原發或繼發的癌、肉瘤或癌肉瘤。因此，本發明的應 用是用於製造治療上述腫瘤的上述各種藥物製劑，其中以針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、植 入劑、緩釋劑及緩釋植入劑為優選，以緩釋植入劑、控釋植入劑或遲釋植入劑為最優選。該抗癌緩釋植入劑中還可加入其它藥用成分，如，但不限於，抗菌素、止疼藥、抗凝藥 、止血藥等。由於本發明抗癌緩釋植入劑可使常規化療、免疫治療、高熱治療、光化學治療 、電療、生物治療、激素治療、磁療、超聲治療、放療及基因治療等方法的作用效果加強。 因此在局部緩慢釋放的同時可與上述非手術療法合用，從而使其抗癌效果進一步加強。當與 上述非手術療法合用時，本發明抗癌緩釋植入劑可與非手術療法同時應用，也可在非手術療 法實施前幾天內應用，其目的在於儘可能增強腫瘤的敏感性，從而為根治各種人體及動物原 發和轉移實體腫瘤提供一種更有效的新的方法，具有非常高的臨床應用價值及顯著的經濟和 社會效益。當局部應用時，該組合物可直接置於原發或轉移的實體腫瘤周圍或瘤體內，也可直接置 於原發或轉移的實體腫瘤全部或部分切除後所形成的腔內。本發明的主要成份以生物可容性物質為支持物，故不引起異物反應。支持物體內放置 後可降解吸收，故不再手術取出。因在腫瘤局部釋放所含藥物，從而選擇性地提高並延長局部 藥物濃度，同時可降低由常規途徑給藥所造成的全身毒性反應。對顱外實體腫瘤具有明顯的 治療作用。本發明抗癌組合物可通過許多方案予以實施，其目的只是為了進一步說明，並非對本發 明的實施加以任何限制。試驗一、克拉屈濱對腫瘤細胞生長的抑制作用。為驗證克拉屈濱對其它腫瘤細胞生長的抑制作用，本試驗將克拉屈濱(15 ug/ml)加到 體外培養24小時的各種腫瘤細胞中(表1)，繼續培養48小時後計數細胞總數並計算其對腫 瘤細胞生長的抑制率(％)。腫瘤細胞生長的抑制率(％)=((對照組細胞數-試驗組細胞數)/對照組細胞數)X100%表1腫瘤細胞抑制率(％)肝癌88肺癌72食管癌76冃3出86乳腺癌84胰腺癌80甲狀腺癌78鼻咽癌72卵巢癌80子宮內膜癌88子宮頸癌78腎癌80前列腺癌82膀胱癌82結腸癌82直腸癌80皮膚癌68睪丸癌72試驗一的結果表明，與對照組相比，克拉屈濱對所試腫瘤的生長均有明顯抑制作用(p〈0.05)，其中對。這一意外發現構成本發明的主要技術特徵，為實體腫瘤的治療提供了新 的選擇。含有克拉屈濱的緩釋植入劑可製成任意劑型或形狀，但以植入的緩慢釋放劑為優選。本發明緩釋植入劑的製備方法如下1、 將稱重的緩釋輔料放入容器中，加一定量的有機溶劑溶解均勻，有機溶劑的量不嚴格 限定，以充分溶解為宜。2、 加入稱重之抗癌有效成份重新搖勻。抗癌有效成份與緩釋輔料的用量比例因具體要 求而定。3、 去除有機溶劑。真空乾燥或低溫乾燥法均可。4、 將乾燥後的固體組合物根據需要製成各種形狀。5、 分裝後射線滅菌(射線劑量因體積而異)備用。也可用其它方法滅菌。 具體實施方式
實施例一、將稱重(90mg)的緩釋輔料(分子量為10000-20000的聚乳酸(PLA))放入容器中，力口 一定量的有機溶劑溶解混勻(以充分溶解為準)後，加入10毫克克拉屈濱，重新搖勻後真空幹 燥去除有機溶劑。將乾燥後的固體組合物立即成形，分裝後射線滅菌，得到緩釋植入劑含 10%克拉屈濱。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為14-20天，在小鼠皮下的釋藥時 間為20-30天。實施例二按實施例一所述方法製成緩釋植入劑，但所含之抗癌有效成分為下列之一(A) 1%的克拉屈濱和和99%的聚乳酸；(B) 5%的克拉屈濱和和95%的聚乳酸；(C) 10%的克拉屈濱和90%的聚乳酸；(D) 15%的克拉屈濱和85%的聚乳酸；(E) 20%的克拉屈濱和80%的聚乳酸。 實施例三將稱重(85mg)的緩釋輔料(分子量為l 5000-30000的PLGA， 50: 50)放入容器中，加 一定量的有機溶劑溶解混勻(以充分溶解為準)後，加入15mg克拉屈濱，重新搖勻後真空乾燥 去除有機溶劑。將乾燥後的固體組合物立即成形，分裝後射線滅菌，得到緩釋植入劑含15% 克拉屈濱。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為14-22天，在小鼠皮下的釋藥時間 為20-26天。實施例四按實施例三所述方法製成緩釋植入劑，所不同的是所含之抗癌有效成分為下列之一(1) 1%-10%的克拉屈濱和90%-99%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(2) 10%-20%的克拉屈濱和80%-90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(3) 20%-30%的克拉屈濱和70%-80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(4) 30%-40%的克拉屈濱和60%-70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(5) 5%的克拉屈濱和95%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(6) 10%的克拉屈濱和90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(7) 20%的克拉屈濱和80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(8) 30%的克拉屈濱和70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物。 實施例五將稱重(85mg)的緩釋輔料(分子量為20000-30000的PLGA， 75:25)放入容器中，加一 定量的有機溶劑溶解混勻(以充分溶解為準)後，加入10mg克拉屈濱和5mg甘露醇，重新搖勻 後真空乾燥去除有機溶劑。將乾燥後的固體組合物立即成形，分裝後射線滅菌，得到緩釋植 入劑含10%克拉屈濱。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為18-25天，在小鼠皮下的 釋藥時間為25-30天。實施例六按實施例五所述方法製成緩釋植入劑，所不同的是所含之抗癌有效成分為下列之一(1) 1%-10%的克拉屈濱和90%-99%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0. 5%-15%的甘露醇；(2) 10%-20%的克拉屈濱和80%-90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和O. 5%-10%的山梨醇；(3) 20%-30%的克拉屈濱和70%-80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0. 5%-10%的氯化鈉；(4) 30%-40%的克拉屈濱和60%-70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和O. 25%-5%的甘露醇；(5) 5%的克拉屈濱和92%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和2%的氯化鈉；(6) 10%的克拉屈濱和85%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇；(7) 20%的克拉屈濱和75%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇；(8) 30%的克拉屈濱和75%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇。 實施例七將85mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP):癸二酸(SA)為50: 50)放入容器中，加入 IOO毫升二氯甲烷溶解混勻後，加入15mg克拉屈濱，重新搖勻後真空乾燥去除有機溶劑。將幹 燥後的固體組合物立即成形，分裝後射線滅菌，得含重量百分比15%克拉屈濱緩釋植入劑。 該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為25-35天。實施例八按實施例七所述方法製成緩釋植入劑，但所不同的是所含抗癌有效成分為下列之一(1) 1%-15%的克拉屈濱和85%-95%的聚苯丙生；(2) 15%-35%的克拉屈濱和65%-85%的聚苯丙生；(3) 5%的克拉屈濱和95%的聚苯丙生；(4) 10%的克拉屈濱和90%的聚苯丙生；(5) 15%的克拉屈濱和85%-95%的聚苯丙生；(6) 20%的克拉屈濱和80%的聚苯丙生。 實施例九將80 mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP):癸二酸(SA)為20: 80)和5mg氯化鈉放入 容器中，加入IOO毫升二氯甲烷溶解混勻後，加入15mg克拉屈濱，重新搖勻後真空乾燥去除有 機溶劑。將乾燥後的固體組合物立即成形，分裝後射線滅菌，得含重量百分比15%克拉屈濱 緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時 間為25-35天。實施例十按實施例十所述方法製成緩釋植入劑，但所不同的是所含抗癌有效成分為下列之一(1) 5%-15%的克拉屈濱和85%-95%的聚苯丙生和1%-5%的甘露醇；或(2) 15%-35%的克拉屈濱和65%-85%的聚苯丙生和0. 25%-7. 5%的甘露醇。 實施例十一將85mg緩釋輔料(分子量為15000-30000的聚乳酸(PLA))和10mg甘露醇放入容器中， 加一定量的有機溶劑溶解混勻(以充分溶解為準)後，加入5毫克克拉屈濱，重新搖勻後真空 乾燥去除有機溶劑。將乾燥後的固體組合物立即成形，分裝後射線滅菌，得到緩釋植入劑含 5%克拉屈濱。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為18-20天，在小鼠皮下的釋藥時 間為20-30天。實施例十二按實施例十一所述方法製成緩釋植入劑，所用緩釋輔料選自下列之一或其組合(A) 1%的克拉屈濱和和95%的聚乳酸和4%的甘露醇；(B) 5%的克拉屈濱和和93%的聚乳酸和2%的甘露醇；(C) 10%的克拉屈濱和85%的聚乳酸和5%的甘露醇；(D) 15%的克拉屈濱和82%的聚乳酸和3%的氯化鈉；(E) 20%的克拉屈濱和78%的聚乳酸和2%的氯化鈉。 實施例十三按實施例l到十一所述方法製成緩釋植入劑，所用緩釋輔料選自下列之一或其組合a) 分子量為5000-15000、 10000-20000、 20000-35000或30000-50000的聚乳酸(PLA)b) 分子量為5000-15000、 15000-35000、 35000-45000或45000-80000的聚乙醇酸和羥基 乙酸的共聚物(PLGA);c) 聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP):癸二酸(SA)共聚物)，對羧苯基丙烷( p-CPP)與癸二酸(SA)的重量百分比為10: 90、 20: 80、 30:70、 40: 60、 50: 50或60: 40在上述緩釋的基礎上，本發明進一步發現體內植入克拉屈濱對腦腫瘤、肝癌、肺癌、食 管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱癌、睪丸癌、結腸癌、直腸癌、卵巢癌、子宮內膜癌、 子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它實體腫瘤也具有很好的治療作用。局部藥物緩釋在保證了 局部用藥範圍內持久而較穩定的藥物濃度的同時，明顯降低了全身藥物濃度，減輕了毒副作 用。以下體內試驗用於說明而非對本發明的限制。實施例十四、腫瘤內植入克拉屈濱對實體腫瘤的抑制作用方法和步驟腫瘤細胞接種於小鼠的右側腋窩皮下，當腫瘤直徑生長至O. 8cm左右時( 接種後第8天)，將動物隨機分為7組，每組10隻。即生理鹽水組、克拉屈濱腹腔注射組(以 下簡稱克拉屈濱腹腔組)、克拉屈濱局部注射組(簡稱克拉屈濱局部組)、高分子聚合物組(簡稱高聚組)、克拉屈濱緩釋植入劑組用實施例四所制的緩釋植入劑(5%組、10%組，和 20%組，簡稱植入劑5%、植入劑10%、植入劑20%)。用70%酒精消毒腫瘤表麵皮膚，選擇距腫 瘤下緣lcm處，剪開lmm長切口，用穿刺針將克拉屈濱植入劑植入腫瘤組織中，不含藥高分子 聚合物、克拉屈濱植入劑5%、克拉屈濱植入劑10%、克拉屈濱植入劑20%。縫合切口防止植入 劑漏出。每3天用遊標卡尺測量腫瘤大小，植入劑包埋後15天處死動物，稱體重後完整剝離 腫瘤並稱瘤重。計算腫瘤抑制率％， DAS . verl.O藥理學軟體做統計學處理。腫瘤抑制率=(i-給藥組平均瘤重/生理鹽水組平均瘤重)X100%實施例十五腫瘤內植入克拉屈濱汀緩釋植入劑對小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用 按照實施例十四所述方法和步驟檢驗克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用 。所用的植入劑輔料為PLGA(分子量為15000-30000，乙醇酸和羥基乙酸的共混比為50: 50) ，源自實施例四。本次實驗結果證明不同劑量的克拉屈濱植入劑能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關係。克拉屈濱植入劑腫瘤抑制率分別為43%、 72%、 82%，與 克拉屈濱局部注射組比較，P值均小於0.001。重複實驗腫瘤抑制率分別為44%、 70%、 80% ，與局部注射組比較，P值均小於0.001。差異有高度統計學意義。克拉屈濱腹腔注射組和 克拉屈濱局部注射組與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為16%和8. 5%，重複實驗腫瘤抑制率為 11. 8%和11. 2%。克拉屈濱植入劑的抑瘤率明顯超過克拉屈濱腹腔注射組和局部注射組，兩次 實驗結果重複性好。實施例十六腫瘤內植入克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠乳腺癌的抑瘤作用 按照實施例十四所述方法和步驟檢驗克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠乳腺癌的抑瘤作用，所 用的植入劑來自實施例一。實驗結果表明1%、 10%和25%克拉屈濱植入劑的腫瘤抑制率分別為 37%、 70%、 78%，與克拉屈濱局部注射組比較，P值均小於0.001。重複實驗表明腫瘤抑制率 分別為36%、 72%、 82%，與克拉屈濱局部注射組比較，P值均小於0.001。差異有高度統計學 意義。克拉屈濱腹腔注射組和局部注射組與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為14%和10%，重複實 驗腫瘤抑制率為13%和8%。克拉屈濱植入劑的抑瘤率明顯超過克拉屈濱腹腔注射組和局部 注射組，兩次實驗結果重複性好。實施例十七腫瘤內植入克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠肝癌的抑瘤作用 按照實施例十五所述方法和步驟檢驗克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠肝癌的抑瘤作用，所用 的植入劑為5%、 10%和20%聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)與癸二酸(SA)的重量百分比 為50: 50)，來自實施例八。實驗結果證明不同劑量的克拉屈濱植入劑植入小鼠肝癌(H22 )實體腫瘤中能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關係。克拉屈濱植入 劑腫瘤抑制率分別為50%、 60%、 74%，與克拉屈濱局部注射組比較，低劑量組P值等於O. 001 ，中、高劑量組P值均小於O.OOl。重複實驗表明腫瘤抑制率分別為47%、 60%、 72%，與克拉 屈濱局部注射組比較，低劑量組P值小於0.05，而中、高劑量組P值均小於O.OOl。差異有高 度統計學意義。克拉屈濱腹腔注射組和克拉屈濱局部注射組與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為 30%和20%，重複實驗腫瘤抑制率為27%和20%。克拉屈濱植入劑的抑瘤率明顯超過克拉屈濱 腹腔注射組和局部注射組，兩次實驗結果重複性好。實施例十八腫瘤內植入克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠食道癌的抑瘤作用 按照實施例十五所述方法和步驟檢驗克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠食道癌的抑瘤作用，所 用的植入劑選自實施例六。實驗結果證明不同劑量的克拉屈濱植入劑植入裸鼠模型人食管癌 (9706)實體腫瘤中，均能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關係。克 拉屈濱植入劑腫瘤抑制率分別為40%、 64%、 70%，與克拉屈濱局部注射組比較，P值均小於0.001。重複實驗發現腫瘤抑制率分別為50%、 60%、 68% ，與克拉屈濱局部注射組比較，P值 均小於0.001。差異有高度統計學意義。克拉屈濱腹腔注射組和局部注射組與生理鹽水組比 較腫瘤抑制率為13%和5. 5%，重複實驗表明腫瘤抑制率為12%和14%。克拉屈濱植入劑的抑瘤 率明顯超過腹腔注射組和局部注射組，兩次實驗結果重複性好。實施例十九 腫瘤內植入克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠胰腺癌的抑瘤作用 按照實施例十五所述方法和步驟檢驗克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠胰腺癌的抑瘤作用，所 用的植入劑輔料為PLGA(分子量為20000-35000，乙醇酸和羥基乙酸的共混比為50: 50)。克拉 屈濱在緩釋植入劑中的含量為2. 5%、 7. 5%和12. 5%.實驗結果證明不同劑量的克拉屈濱植入 劑植入裸鼠模型人胰腺癌(JF305)實體腫瘤中，能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物 劑量呈明顯量效關係。克拉屈濱植入劑腫瘤抑制率分別為35%、 47%、 66%，與克拉屈濱局部 注射組比較，P值均小於O.OOl。重複實驗表明腫瘤抑制率分別為58%、 65%、 70% ，與克拉屈 濱局部注射組比較，P值均小於O.OOl。差異有高度統計學意義。克拉屈濱腹腔注射組和局部 注射組與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為21%和6. 6%。重複實驗發現腫瘤抑制率為12%和9%。克 拉屈濱植入劑的抑瘤率明顯超過腹腔注射組和局部注射組，兩次實驗結果重複性好。 實施例二十 腫瘤內植入克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠直腸癌的抑瘤作用 按照實施例十五所述方法和步驟檢驗克拉屈濱緩釋植入劑對小鼠直腸癌的抑瘤作用，所 用的植入劑輔料為PLGA(分子量為20000-35000，乙醇酸和羥基乙酸的共混比為50: 50)。克拉 屈濱在緩釋植入劑中的含量為7. 5%、 15%和25%.實驗結果證明不同劑量的克拉屈濱植入劑， 能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關係。克拉屈濱植入劑腫瘤抑制率 分別為54%、 67%、 78%，與克拉屈濱局部注射組比較，P值均小於O.OOl。重複實驗表明腫瘤 抑制率分別為50%、 68%、 76% ，與克拉屈濱局部注射組比較，P值均小於O.OOl。差異有高度 統計學意義。克拉屈濱腹腔注射組和局部注射組與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為21%和6.6% 。重複實驗發現腫瘤抑制率為12%和9%。克拉屈濱植入劑的抑瘤率明顯超過腹腔注射組和局 部注射組，兩次實驗結果重複性好。另外，腫瘤內植入克拉屈濱緩釋植入劑對胃癌、膀胱癌、睪丸癌、結腸癌、卵巢癌、 子宮內膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它實體腫瘤也具有很好的治療作用，其作用明 顯超過克拉屈濱腹腔注射組和局部注射組。這一意外發現構成本發明的又一主要技術特徵， 為實體腫瘤的治療提供了又一新的選擇。
權利要求
1. 一種治療實體腫瘤的緩釋植入劑，其特徵在於該緩釋植入劑含抗癌有效量的克拉屈濱、緩釋輔料和一定量的緩釋調節劑，其中各組成成分的重量比為(1)克拉屈濱 0.1％-60％(2)緩釋輔料 40％-99％(3)緩釋調節劑0-15％其中，緩釋輔料選自聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、聚苯丙生、乙烯乙酸乙烯酯共聚物中的一種或其組合；緩釋調節劑選自木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、甘露醇、山梨醇、透明質酸、膠原蛋白、軟骨素、明膠及白蛋白中的一種或其組合。
2.根據權利要求l所述之緩釋植入劑，其特徵在於該緩釋植入劑的抗 癌有效成分中各組份及其在植入劑中的重量百分含量為下列之一(A) 1%-5%的克拉屈濱和95%-99%的聚乳酸；(B) 5%-10%的克拉屈濱和90%-95%的聚乳酸；(C) 10%-15%的克拉屈濱和85%-90%的聚乳酸；(D) 15%-25%的克拉屈濱和75%-85%的聚乳酸；(E) 25%-40%的克拉屈濱和60%-75%的聚乳酸；(F) 1%-10%的克拉屈濱和90%-99%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(G) 10%-20%的克拉屈濱和80%-90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(H) 20%-30%的克拉屈濱和70%-80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(I) 30%-40%的克拉屈濱和60%-70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物； (J) 5%-15%的克拉屈濱和85%-95%的聚苯丙生；或(K) 15%-35%的克拉屈濱和65%-85%的聚苯丙生。
3.根據權利要求l所述之緩釋植入劑，其特徵在於該緩釋植入劑的抗癌有效成分中各組份及其在植入劑中的重量百分含量為下列之一(A) 1%-5%的克拉屈濱和85%-98%的聚乳酸和0. 5%-15%的甘露醇；(B) 5%-10%的克拉屈濱和90%-95%的聚乳酸和0. 5%-10%的山梨醇；(C) 10%-15%的克拉屈濱和85%-90%的聚乳酸和0. 5%-10%的氯化鈉；(D) 15%-25%的克拉屈濱和75%-85%的聚乳酸和0. 25%-5%的甘露醇；(E) 25%-40%的克拉屈濱和60%-75%的聚乳酸0. 1%-8%的山梨醇；(F) 1%-10%的克拉屈濱和90%-99%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0. 5%-15%的甘露醇；(G) 10%-20%的克拉屈濱和80%-90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0. 5%-10%的山梨醇(H) 20%-30%的克拉屈濱和70%-80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0. 5%-10%的氯化鈉(I) 30%-40%的克拉屈濱和60%-70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0. 25%-5%的甘露醇(J) 5%-15%的克拉屈濱和85%-95%的聚苯丙生和1%-5%的甘露醇；或(K) 15%-35%的克拉屈濱和65%-85%的聚苯丙生和0. 25%-7. 5%的甘露醇。
4.根據權利要求l所述之緩釋植入劑，其特徵在於該緩釋植入劑的抗 癌有效成分中各組份及其在植入劑中的重量百分含量為下列之一(A) 1%的克拉屈濱和和99%的聚乳酸；(B) 5%的克拉屈濱和和95%的聚乳酸；(C) 10%的克拉屈濱和90%的聚乳酸；(D) 15%的克拉屈濱和85%的聚乳酸；(E) 20%的克拉屈濱和80%的聚乳酸；(F) 5%的克拉屈濱和95%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(G) 10%的克拉屈濱和90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(H) 20%的克拉屈濱和80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(I) 30%的克拉屈濱和70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物； (J) 5%的克拉屈濱和95%的聚苯丙生；或(K) 15%的克拉屈濱和85%的聚苯丙生。
5. 根據權利要求l所述之緩釋植入劑，其特徵在於該緩釋植入劑的抗 癌有效成分中各組份及其在植入劑中的重量百分含量為下列之一(A) 1%的克拉屈濱和和95%的聚乳酸和4%的甘露醇；(B) 5%的克拉屈濱和和93%的聚乳酸和2%的甘露醇；(C) 10%的克拉屈濱和85%的聚乳酸和5%的甘露醇；(D) 15%的克拉屈濱和82%的聚乳酸和3%的氯化鈉；(E) 20%的克拉屈濱和78%的聚乳酸和2%的氯化鈉；(F) 5%的克拉屈濱和92%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和2%的氯化鈉；(G) 10%的克拉屈濱和85%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇；(H) 20%的克拉屈濱和75%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇；(I) 30%的克拉屈濱和75%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇； (J) 5%的克拉屈濱和92. 5%的聚苯丙生和2. 5%的甘露醇；或(K) 15%的克拉屈濱和75%的聚苯丙生和10%的甘露醇。6據權利要求l-5所述之抗癌緩釋植入劑，其特徵在於聚乳酸的分子 量峰值為5000-15000、 10000-20000、 20000-35000或30000-50000。7據權利要求l-5所述之抗癌緩釋植入劑，其特徵在於乙醇酸和羥基 乙酸的共聚物的分子量峰值為5000-15000、 15000-35000、 35000-45000或45000-80000;聚 乙醇酸與羥基乙酸的重量百分比為10: 90， 20: 80， 30:70， 40: 60， 50: 50或60: 40。8據權利要求l-5所述之抗癌緩釋植入劑，其特徵在於聚苯丙生(對 羧苯基丙烷-癸二酸共聚物)中對羧苯基丙烷與癸二酸的重量百分比為10: 90， 20: 80， 30:70， 40: 60， 50: 50或60: 40。9權利要求l-5所述之緩釋植入劑，其特徵在於該緩釋植入劑為緩釋 注射劑和固體緩釋植入劑。10根據權利要求l所述之緩釋植入劑，其特徵在於所述緩釋植入劑 用於製備治療腦腫瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、 卵巢癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮 膚癌、頭頸部腫瘤和起源於膽囊、口腔、外周神經系統、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴 結、眼睛的原發或繼發的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物製劑。
全文摘要
一種治療實體腫瘤的緩釋植入劑，其特徵在於該緩釋植入劑含抗癌有效量的克拉屈濱和緩釋輔料。實體腫瘤包括腦腫瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結腸癌、直腸癌、皮膚癌、頭頸部腫瘤和源於外周神經系統、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結的原發或繼發的癌、肉瘤或癌肉瘤。緩釋輔料主要為生物可容性可降解吸收的高分子多聚物，在其降解吸收的過程中能將卡莫司汀緩慢釋放於腫瘤局部，因此在明顯降低其全身毒性反應的同時還可於腫瘤局部維持有效藥物濃度。腫瘤局部放置該抗緩釋植入劑不僅能夠降低卡莫司汀的全身毒性反應，同時還能選擇性地提高腫瘤局部的藥物濃度，增強化療藥物及放射治療等非手術療法的治療效果。
文檔編號A61K9/00GK101219104SQ20071020297
公開日2008年7月16日 申請日期2007年12月11日 優先權日2007年12月11日
發明者孔慶忠, 孔慶新 申請人:山東藍金生物工程有限公司;孔慶忠