一種高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法
2023-06-10 01:44:26 2
專利名稱：一種高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法
技術領域：
本發明屬於中藥有效成分提取方法，特別涉及一種高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法。
背景技術：
穿心蓮[Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees]為爵床科穿心蓮屬植物，別名欖核蓮、一見喜、印度草、斬蛇劍、苦草、四方草、圓錐須藥草等。原產於印度，我國華南、西南、華東等地均有栽培，其味苦，性寒，歸肺、胃、大腸、小腸經，目前發現其除了具有清熱解毒，消腫止痛、抗菌、抗病毒作用外還具有抗腫瘤作用、抑制HIV(愛滋病毒)病毒作用及增強免疫力的作用。穿心蓮是臨床上廣泛應用的清熱解毒植物藥，其化學成分主要為內酯類和黃酮類。內酯類主要含於穿心蓮葉中，成分主要有脫氧穿心蓮內酯(Deoxyandrographolide，又稱穿心蓮甲素)，穿心蓮內酯(Angrographolide，又稱穿心蓮乙素)，新穿心蓮內酯(Neoandrographolide，又稱穿心蓮丙素)，14-脫氧-11，12-二去氫穿心蓮內酯(14-Deoxy-11，12-dideoxyhydro-andrographolide，又稱脫水穿心蓮內酯或穿心蓮丁素)，14-去氧穿心蓮內酯甙，脫氧穿心蓮內酯-19-β-D葡萄糖甙，14-去氧-12-甲氧基穿心蓮內酯，14-去氧-11-氧化穿心蓮內酯及穿心蓮寧，全草內酯在2％～5％左右。脫水穿心蓮內酯是從穿心蓮中提取分離的有效單體，分子式C20H28O4，分子量332.42。無色針狀結晶(30％或50％乙醇)，mp.204℃。易溶於乙醇、丙酮，可溶於氯仿，微溶於苯，幾乎不溶於水。
脫水穿心蓮內酯具有解熱、抗炎、促進腎上腺皮質功能及鎮靜作用，可促進中性粒細胞、巨噬細胞吞噬能力，提高血清溶菌酶含量等作用，用於病毒性肺炎、嬰幼兒痢疾、膽道感染、泌尿道感染等，療效顯著，副作用少，是穿心蓮所含內酯化合物中作用最強的一個，是一種極有前途的藥物，具有極大的開發價值。國內用於製備穿琥寧、炎琥寧等注射劑及其它口服劑。但其在穿心蓮植物中含量低且分離困難。
國內生產穿心蓮提取物的製備方法有多種，以乙醇為溶劑的提取方法最為常用，但該法的缺點是提取物中脫水穿心蓮內酯的含量低，基本上在5％～15％之內；國內有以穿心蓮提取穿心蓮內酯為原料，在催化劑作用下發生脫水反應後重結晶得到含量較高的脫水穿心蓮內酯，該方法採用的原料較貴，採取的是化學合成方法，儘管工藝較為簡單，但使用的有機溶劑較多，不太可取。
發明內容
本發明的目的是提供一種高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法，所得到的提取物中脫水穿心蓮內酯含量達99％以上。
本發明的製備方法採用以下步驟(1)取穿心蓮全草用乙醇熱浸後，過濾，回收乙醇作它用，提取藥渣備用；
(2)將步驟1的藥渣再次用乙醇浸泡24小時，取上清液，備用；(3)將步驟2的上清液過大孔吸附樹脂柱，收集有效洗脫液，洗脫液濃縮後真空乾燥，得乾粉；(4)將步驟3的乾粉用甲醇溶解，裝入矽膠柱，用氯仿和甲醇混合溶劑洗脫，收集有效成份的洗脫液後濃縮，得濃縮液；(5)將步驟4的濃縮液用乙醇結晶，重結晶，得高純度的脫水穿心蓮內酯；為了獲得更好的效果，本發明還可以採用以下優選的製備方法步驟(1)中熱浸穿心蓮全草所用乙醇的濃度為85～95％，熱浸時間為2小時；步驟(2)中浸泡藥渣所用乙醇的濃度為60～70％，用量為8～12倍量，將上清液配至含醇量35～45％；步驟(3)中將含醇量35～45％的上清液過XAD-16大孔吸附樹脂，用2倍量50％的乙醇洗柱，洗脫液棄去，用75～85％的乙醇洗柱，至洗脫液呈無色，收集洗脫液，洗脫液濃縮至相對密度1.3以上的稠膏，在真空度-0.05～-0.08，蒸汽壓力0.10～0.15Mpa條件下真空乾燥，得乾粉；步驟(4)中將所述乾粉，用少許甲醇溶解，加4倍量的80～100目矽膠粉拌均，乾燥，以26份矽膠粉裝入1份乾燥粉裝入矽膠柱，用氯仿∶甲醇＝50∶1的混合溶劑洗脫，收集有效成份的洗脫液，洗脫液濃縮，回收氯仿甲醇混合溶劑，得濃縮液；步驟(5)中將所述濃縮液，加少量30～50％乙醇結晶，重結晶，得高純度脫水穿心蓮內酯。
脫水穿心蓮內酯的鑑別採用薄層色譜法，而含量測定採用高效液相色譜(HPLC)法。
本發明是將穿心蓮全草經傳統工藝初步提取後，充分利用提取藥渣採取優化工藝對渣中脫水穿蓮內酯成份進行再次提取，採取現代高科技方法進行分離、提純和精製。所得的脫水穿心蓮內酯純度高，達99.0％以上，可作為以穿心蓮為原料的藥用製劑和功能食品的生產原料。
下面通過實施例可以進一步說明本發明的製備方法。本實施例不應作為對本發明方法的限制。
具體實施例方式
實施例(1)取穿心蓮全草1000g，用95％乙醇40000ml熱浸2小時，過濾，回收乙醇作它用，提取藥渣800g，脫水穿心蓮內酯含量10％；(2)將(1)中所提取的藥渣400g，用65％乙醇4000ml浸提24小時，取上清液配至乙醇含量為40％，濃縮，得黑色固體200g，脫水穿心蓮內酯含量14.5％；(3)將(2)中上清液過XAD-16大孔樹脂柱，用2倍量50％的乙醇洗柱，洗脫液棄去，用80％的乙醇洗柱，至洗脫液呈無色，收集洗脫液，濃縮至相對密度1.3的稠膏，在真空度-0.05～-0.08，蒸汽壓力0.10～0.15Mpa條件下真空乾燥，得乾粉96g，脫水穿心蓮內酯含量30％；
(4)將(2)中乾粉96g，用少許甲醇溶解，加384g矽膠粉(80～100目)拌均，乾燥，以26份矽膠粉裝入1份乾燥粉裝入矽膠柱，用氯仿和甲醇(氯仿∶甲醇＝50∶1)的混合溶劑洗脫，收集有效成份的洗脫液，洗脫液濃縮，回收氯仿甲醇混合溶劑，得濃縮液；(5)加少量30％或50％乙醇結晶，重結晶，得脫水穿心蓮內酯25g，含量99.0％。
權利要求
1.一種高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法，其特徵在於採用以下步驟(1)取穿心蓮全草用乙醇熱浸後，過濾，回收乙醇作它用，提取藥渣備用；(2)將步驟1的藥渣再次用乙醇浸泡24小時，取上清液，備用；(3)將步驟2的上清液過大孔吸附樹脂柱，收集有效洗脫液，洗脫液濃縮後真空乾燥，得乾粉；(4)將步驟3的乾粉用甲醇溶解，裝入矽膠柱，用氯仿和甲醇混合溶劑洗脫，收集有效成份的洗脫液後濃縮，得濃縮液；(5)將步驟4的濃縮液用乙醇結晶，重結晶，得高純度的脫水穿心蓮內酯。
2.根據權利要求1所述的高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法，其特徵在於步驟(1)中熱浸穿心蓮全草所用乙醇的濃度為85～95％，熱浸時間為2小時。
3.根據權利要求1所述的高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法，其特徵在於步驟(2)中浸泡藥渣所用乙醇的濃度為60～70％，用量為8～12倍量，將上清液配至含醇量35～45％。
4.根據權利要求1所述的高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法，其特徵在於步驟(3)中將含醇量35～45％的上清液過XAD-16大孔吸附樹脂，用2倍量50％的乙醇洗柱，洗脫液棄去，用75～85％的乙醇洗柱，至洗脫液呈無色，收集洗脫液，洗脫液濃縮至相對密度1.3以上的稠膏，在真空度-0.05～-0.08，蒸汽壓力0.10～0.15Mpa條件下真空乾燥，得乾粉。
5.根據權利要求1所述的高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法，其特徵在於步驟(4)中將所述乾粉，用少許甲醇溶解，加4倍量的80～100目矽膠粉拌均，乾燥，以26份矽膠粉裝入1份乾燥粉裝入矽膠柱，用氯仿∶甲醇＝50∶1的混合溶劑洗脫，收集有效成份的洗脫液，洗脫液濃縮，回收氯仿甲醇混合溶劑，得濃縮液。
6.根據權利要求1所述的高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法，其特徵在於步驟(5)中將所述濃縮液，加少量30～50％乙醇結晶，重結晶，得高純度脫水穿心蓮內酯。
全文摘要
本發明公開了一種高純度脫水穿心蓮內酯的製備方法，採用以下步驟(1)取穿心蓮全草用乙醇熱浸後，過濾，提取藥渣備用；(2)將步驟1的藥渣再次用乙醇浸泡24小時，取上清液，備用；(3)將步驟2的上清液過大孔吸附樹脂柱，收集有效洗脫液，洗脫液濃縮後真空乾燥，得乾粉；(4)將步驟3的乾粉用甲醇溶解，裝入矽膠柱，用氯仿和甲醇混合溶劑洗脫，收集有效成份的洗脫液後濃縮，得濃縮液；(5)將步驟4的濃縮液用乙醇結晶，重結晶，得高純度的脫水穿心蓮內酯。用本法所得的脫水穿心蓮內酯純度高，達99.0％以上，可作為以穿心蓮為原料的藥用製劑和功能食品的生產原料。
文檔編號A61K36/19GK1962650SQ20061003254
公開日2007年5月16日 申請日期2006年11月9日 優先權日2006年11月9日
發明者姜新宇, 羅帆, 龔志華, 戴利鳳, 王麗, 李江新 申請人:中美合資湖南麓山天然植物製藥有限公司