1,25-二羥基-16,22,23-三脫氫-膽鈣化醇衍生物的製作方法

2023-06-14 13:29:51 3

專利名稱：：1,25-二羥基-16,22,23-三脫氫-膽鈣化醇衍生物的製作方法
技術領域：
：本發明涉及下式化合物，其中R是羥基，R1是H2或CH2，或者R是氫或氟，R1是CH2。本文所用的術語「低級烷基」是指一種含有1到4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如，甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，正丁基等。術語「芳基-低級烷基」是指對甲苯基，苄基，苯乙基，苯丙基等。術語「芳基」是指可以被一個或多個低級烷基取代或不被取代的一種衍生於芳香烴的基團，例如」芳基「可是苯基和對-甲苯基。如上通式I所描述的化合物可用作治療過度增生的皮膚病如牛皮癬的藥劑。式I的化合物也可用作治療腫瘤疾病如白血病的藥劑。式I的化合物也可用作治療皮質腺疾病如粉刺和脂溢性皮炎的藥劑。式I的化合物也可用作治療需要調節免疫系統的疾病如移植排斥、移植物對宿主的疾病等的藥劑。本發明涉及一種藥物組合物，尤其是用來抑制皮膚過度增生和腫瘤細胞，具體是治療過度增生的皮膚病如牛皮癬，腫瘤病如白血病，和皮質腺疾病如粉刺和皮炎，該藥物組合物含有通式I的化合物或兩種或多種式I化合物的混合物。本發明也涉及式I化合物在製備具有抗過度增生活性和抑制腫瘤細胞活性，具體是治療上述疾病狀態的藥物組合物中的用途。本發明也涉及製備式I化合物和下列所述的通式為IX，X，VIa，VIb，II，III，XI和XII中間體的方法。在式I化合物的優選技術方案，R是羥基和/或R1是CH2。在另一個技術方案中，R1是H2。最優選的是，1，25-二羥基-16，22S，23-三烯-膽鈣化醇和1，25-二羥基-16，22R，23-三烯-膽鈣化醇。在製備式I化合物的方法最後步驟中包括從通式I中相應的甲矽烷基化的二醇或三醇除去甲矽烷保護基，該甲矽烷保護基優選是Si(R4，R5，R6)，其中R4和R6是低級烷基而R5是低級烷基、芳基或芳基-低級烷基，並且通過在一種極性溶劑中與一種氟鹽反應的方法去除甲矽烷保護基是方便有效的。如下文所述製備式I化合物的22S表異構體，具體參見結構式的圖解和下列實施例。路線I路線II路線III在上述路線I中，在室溫下於對質子惰性溶劑如無水四氫呋喃或更優選無水二氯甲烷中用氧化劑如2，2』-雙吡啶鎓氯代鉻酸鹽或吡啶鎓二氯鉻酸鹽把式II的化合物氧化成式III的化合物。把所得到的式III化合物與相應的下式化合物其中Ph是苯基；R1、R4、R5和R6如上所述；R7是氫、氟或OSi(R4，R5，R6)反應將其轉化為通式為IVa、IVb或IVc的化合物。該反應是在-60℃到-90℃，優選-78℃，在極性、對質子惰性有機溶劑如無水乙醚或更優選無水四氫呋喃中，在用強鹼如象丁基鋰的烷基鋰存在下進行的。式V的化合物是公知的或能夠用已知方法製得。在有機溶劑如乙醚或更優選四氫呋喃中通過與已知氟鹽如氟化四丁基-胺反應除去式IVa，IVb或IVc化合物上的保護基得到相應的式Ia，Ib或Ic的化合物。具體參考路線II和下列實施例所描述的製備如上所述的式II中間體在路線II中，式VIa化合物通過與苯磺醯氯和三乙胺反應轉化為式VII化合物。式VII化合物通過與甲醇和叔丁基鋰反應轉化為式II化合物。具體參考路線III和下列實施例所描述的製備如上所述的式VIa中間體在路線III中，在鹼如咪唑存在下在對質子惰性溶劑如無水N，N-二甲基甲醯胺中把已知的式VIII與三烷基甲矽烷氯如叔丁基二甲基甲矽烷氯反應將其轉化為式IX化合物。以無水四氫呋喃作溶劑優選-78℃下把式IX化合物與鹼如正丁基鋰和N，N-二甲基甲醯胺反應將其轉化為式X化合物。在氯化的烴基溶劑如二氯甲烷優選-78℃溫度下把式X化合物與作為路易酸的(3aR-Z，3aa，4b，7ab)-1-亞乙基-八氫-7a-甲基-1H-4-茚酚乙酸酯和氯化二甲基鋁進行反應。處理所得到的化合物，分離它的表異構體，得到式VIa的化合物和式VIb的化合物。具體參考路線IV-V和下列實施例所述製備式I化合物的22R表異構體。路線IV路線V在上述路線IV中，按將化合物II氧化成化合物III所述把式XI化合物氧化成式XII化合物。把所得到的式XII化合物按如上在把式III化合物轉化為式IVa，IVb或IVc化合物中所述與相應的下式化合物反應將其轉化成式XIIIa，XIIIb或XIIIc化合物。按如上對式Ia，Ib或Ic如述，把式XIIIa，XIIIb或XIIIc化合物的保護基團除去得到按式Id，Ie或If化合物。具體參考路線V和下列實施例所描述的製備式XI中間體在上述路線V中，把式VIb的化合物與苯磺醯氯和三乙胺反應將其轉化為式XIV化合物。再把式XIV化合物與甲醇和叔丁基鋰反應將其轉化為式XI化合物。具體參考路線III和下列實施例所描述製備式VIb中間體。給需治療的溫血動物口服如上所述的式I化合物能夠治療a)過度增生的皮膚病如牛皮癬，基底細胞癌，角化細胞疾病和角化病，b)腫瘤疾病如白血病，c)皮質腺疾病如粉刺或脂溢性皮炎，或d)需要調節免疫系統的疾病如移植排斥，移植物對宿主的疾病等。更優選，給成人以每天大約0.5到50mg的範圍口服上述式I化合物治療上述疾病。給需治療的溫血動物局部使用如上所述的式I化合物能夠治療a)過度增生的皮膚病如牛皮癬，或b)皮質腺疾病如粉刺或脂溢性皮炎。更優選，給成人以每天大約0.5到50mg的範圍局部使用上述式I化合物治療上述疾病。根據被治療的疾病、患者的年齡和個體差異以及給藥方式可以在較寬的限定範圍內改變式I化合物的劑量，當然，在每一具體情況中應根據個體需要採用合適劑量。通過以下試驗能夠證實用作治療過度增生皮膚病藥劑的式I化合物的活性。角化細胞增生的抑制使用HaCaT細胞系-無限增殖化的人細胞系HaCaT(從N.E.Fusenig，GermanCancerResearchCenter，Heidelberg，Germany得到)。在指數生長培養基中有試驗化合物存在下培養6天後測定3H-胸苷混合物。在含有4.5g葡萄糖和營養混合物Ham’sF12，3∶1(v/v)的Dulbecco改進的Eagle培養基混合物中培養細胞培養物-HaCaT細胞。該混合物是用10％胎牛血清(FCS)，2mML-穀氨醯胺，50UI/ml青黴素，50mg/ml鏈黴素，10ng/mlEGF，400ng/ml氫化可的松，8.5ng/ml霍亂毒素和5ng/ml胰島素填充。把細胞保持在含有5％CO2和95％空氣的潮溼環境下並每3-4天傳代。把攝入3H-胸苷-HaCaT細胞抑制物(每180ml填充混合物中250個細胞)接種到96孔的培養皿上並在37℃有5％CO2和95％空氣條件下溫育。接種後，馬上把20ml用含有1％乙醇的補加混合物稀釋的下表II中所列的試驗化合物加入到孔中得到在10-9和10-6M之間的最終濃度(起始為在乙醇中的1mM的母液，在-20℃下存放並避光保護)。6天後，以1mCi/孔的濃度向孔中加入3H-胸苷(5Ci/mmol)。在生長期間最後6小時脈衝標記該細胞。然後，在37℃強烈攪拌下把細胞胰蛋白酶化10分鐘並用一臺細胞收集器收集到96孔濾板上。在40℃真空乾燥20-30分鐘後，加入20ml的閃爍體並計算結合到濾板上的放射活性。數值是用對照組(沒有使用試驗化合物的樣品)的百分數表示的。用圖解法測定達到50％對照值的濃度，在表I中給出了作為IC50(抑制濃度)的濃度。表I從上述結果能夠看出式I化合物能夠抑制角化細胞的增生。所以，式I化合物可用於治療過度增生的皮膚病如牛皮癬。通過以下試驗操作能夠證實用作治療腫瘤疾病藥劑的式I化合物的活性。HL-60細胞分化的誘發通過還原氮蘭四唑(NBT)測定它們的氧化釋放電位來分析HL-60細胞分化的誘發。把HL-60細胞保存在用10％FCS，2mML-葡萄糖，1mM丙酮酸鈉，1％非必需胺基酸，50U/ml青黴素和50mg/ml鏈黴素補充的RPMI1640培養液中。把HL-60細胞(在90ml補充的RPIM培養基中有30,000個細胞)接種在平底微升孔中。接種後，馬上向孔中加入用補充的RPIM培養液稀釋的下列表II中所列的10ml試驗化合物得到在10-11和10-6M之間的最終濃度(起始為在乙醇中的10-2M的母液，在-20℃下存放並避光保護)。3天後，用一隻多刻度吸管從孔中除去培養液並替換為100ml的NBT溶液(含有200nM豆蔻酸乙酸大戟二萜酯的1mg/ml磷酸鹽緩衝液)。在37℃又溫育一小時之後除去NBT溶液並加入100ml在0.01N的HCl的10％十二烷基磺酸鈉。用一臺平皿自動讀數器在540nm處用光度精確測定還原的NBT的量。計算3個孔的平均值。S.E.M.是在5和10％之間。數值是用在相同試驗中100-1000nM鈣三醇所得到的最大分化的百分數表示的。用圖解法測定導致50％最大值的濃度(nM)，在表I中給出了作為ED50的濃度。表II從上述結果能夠看出式I化合物誘發了HL-60細胞的分化並由此終止了這些生長的腫瘤細胞。所以，式I的化合物可用於治療腫瘤疾病如白血病。通過以下試驗操作能夠證實用作治療皮質腺疾病如粉刺和脂溢性皮炎藥劑的式I化合物的應用活性。對脂溢性細胞的抑制從成人皮質腺分離脂溢性細胞，其中皮質腺來自化妝手術中除去的面部皮膚。該方法在J.Inxest.Dermatol.96341-348(1991)中的Doran等的一片文章中進行了描述。在含有10％胎牛血清Iscovep培養基和在生長捕獲的的3T3鼠成纖維細胞層上的4mg/ml地塞米松中培養該細胞。把細胞植入沒有試驗化合物的培養基中，然後在植入起24-48小時後在新鮮的培養基中加入該化合物。隔48小時把該培養物加入含有試驗化合物的新鮮培養基中。在收集當天，用0.03％乙二胺四乙酸(EDTA)的磷酸緩衝鹽水(PBS)衝洗該培養物只除去3T3成纖維細胞。在0.05％胰蛋白酶/0.03％EDTA中溫育所得到的皮質細胞克隆來生成皮質細胞的單一細胞懸浮液。懸浮該細胞並劇烈混合以製得單一細胞懸浮液並在血細胞計數器中計數。用下列方式處理所有的化合物。用除氣的100％乙醇配製10-2M母液並在-20℃黑暗處存放。存放一個月以上的溶液不再使用。在使用該溶液的試驗期間，將其等分並融化一次，然後直接稀釋成適當濃度的完全培養基。測試該化合物在試管內以下列濃度10-8，10-7或10-6M對皮質細胞的增生的抑制。與對照組、只用載體處理，培養基相比抑制50％(ED50)nM的皮質細胞的增生所需的化合物的量的結果總結在下列表III中。從上述結果能夠看出，式I的化合物能夠抑制皮質細胞的增生。因此，式I的化合物可用於治療皮質腺疾病如粉刺和脂溢性皮炎。通過以下試驗能夠證實用作治療需要調節免疫系統疾病藥劑的式I化合物的應用活性。對人T-細胞中γ-幹擾素釋放的抑制通過離心Ficoll-Paque上淡黃色白細胞從健康自願者的靜脈血中分離單核細胞。把淋巴細胞(70-80％T-細胞)懸浮於用10％FCS補加的RPMI1640培養基中並調節到106個細胞/ml。把100ul這種細胞懸浮液接種到平底微量滴定孔並用1mg/ml的T-細胞特異性促絲裂素植物凝集素(PHA)刺激。接種後馬上加入下列表IV所列的試驗化合物得到在1×10-11M到1×10-6M之間的最終濃度。一式四份地操作所有的試驗。在第3和4天，從孔中除去培養液並用ELISA測定IFN-g的含量。數值用對照組(沒用試驗化合物的樣品)的百分數表達。用圖形方法測定達到50％對照組數值的濃度並在表IV中給出IC50(抑制濃度)。表IV對人T-細胞增殖的抑制通過離心分離Ficoll-Paque上淡黃色白細胞從健康自願者的動脈血中分離單核細胞。把淋巴細胞(70-80％T-細胞)懸浮於用10％FCS補加的RPMI1640培養基中並調節到106個細胞/ml。把100ul這種細胞懸浮液接種到平底微量滴定孔並用1mg/ml的PHA刺激。接種後馬上加入下列表V所列的試驗化合物得到在1×10-11M到1×10-6M之間的最終濃度。一式四份地操作所有的試驗。在第3和4天後，以1mCi/孔的濃度向孔中加入3H-胸苷(5Ci/mmol)。在生長期的最後6小時脈衝標記該細胞。然後用一臺細胞收集器把該細胞收集在96孔的濾板上。在真空下40βC下乾燥20-30分鐘後，加入20ul閃爍體並對結合在濾器上的放射活性進行計數。數值用對照組(沒用試驗化合物的樣品)的百分數表達。用圖形方法測定達到50％對照組數值的濃度並在表V中給出IC50(抑制濃度)。表V化合物IC50(nM)1，25-二羥基-膽鈣化醇10.01，25-二羥基-16，22S，23-三烯-膽鈣化醇6.01，25-二羥基-16，22R，23-三烯-膽鈣化醇0.55從上述結果能夠看出，式I的化合物能夠抑制人T-細胞中g-幹擾素的釋放和抑制人T-細胞的增殖。因此，式I的化合物可用於治療皮質腺疾病如移植排斥，移植物對宿主的疾病等。小鼠中鈣耐受性試驗鈣體內平衡的顯著變化強烈影響小鼠體重的發展。連續四天小鼠(25-30g體重)都每天接受化合物的皮下注射。在5天治療期之前和之後記錄體重。「最高耐受劑量」(HTD)是在治療期間造成零重量的劑量。結果列在表VI中。表VI化合物HTD(μg/kg)1，25-二羥基-膽鈣化醇0.51，25-二羥基-16，22S，23-三烯-膽鈣化醇50.01，25-二羥基-16，22R，23-三烯-膽鈣化醇2.5從上述結果能夠看到式I化合物比1，25-二羥基膽鈣醇有更好的耐受性。含有本發明式I化合物的口服劑型可以是與藥學上可接受的載體物質摻在一起的膠囊、片劑等。可摻在膠囊等中的藥學上可接受的載體物質的說明如下粘合劑如黃耆膠、阿拉伯膠、玉米澱粉或明膠；賦形劑如磷酸鈣；崩解劑如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、藻酸等；潤滑劑如硬脂酸鎂；甜味劑如蔗糖、乳糖或糖精；調味劑如薄荷油、冬青油或櫻桃油。其他各種物質可以包衣劑存在用於改進劑量單位的物理形態。例如，片劑可以用蟲膠、糖或二者包衣。糖漿或酏劑可以含有活性化合物、蔗糖作甜味劑、對羥基苯甲酸甲酯和丙酯作防腐劑，染料和調味劑如櫻桃或橘味調料。含有本發明式I化合物的局部給藥劑型包括含有具有油性的、吸收性的、水溶性的和乳狀液型的基質如凡士林、羊毛脂、聚乙二醇等配方的膏劑和霜劑。洗液是液體製劑並且可由簡單溶液到含油分散極細的物質的含水或醇製劑之間變化。洗液能夠含有乳化劑或分散劑如纖維素的衍生物象乙基纖維素、甲基纖維素等；明膠或口膠，它們能夠與活性成分一起摻入由水、醇、甘油等組成的載體中。凝膠是通過把載體中的活性成分的溶液或乳狀液凝膠化製得的半固體製劑。用凝劑如羧多亞甲基將含水或無水的載體凝膠化並用鹼如氫氧化鈉和氨類如聚亞乙基可可氨中和到適當的凝膠稠度。本文所用的術語「局部」是指把活性成分摻和到適當的藥物載體中並塗到疾病部位發揮局部作用。所以，局部用的組合物包括直接把該化合物與皮膚接觸外用的那些藥物製劑。這些局部用的劑型包括凝膠劑、霜劑、洗液、膏劑、粉劑、氣霧劑和其他通過把式I化合物與已知的藥物局部用載體物質混合得到的向皮膚塗藥的常規劑型。提供下列實施例用來進一步描述本發明但不是以任何方式限定本發明的。實施例13-甲基-3-叔丁基二甲基甲矽烷氧-丁炔(式IX)向25g(0.29mol)的3-甲基-3-羥基-丁炔的50ml無水N，N-二甲基甲醯胺中加入44.5g(0.65mole)咪唑。在冰浴中把反應混合物冷卻然後加入50g(0.33mole)叔丁基二甲基甲矽烷基氯化物。在冰浴中把反應混合物攪拌15分鐘並在室溫下過夜。然後加入250mg的二甲基氨基吡啶並在70℃加熱2小時。把反應混合物倒入1升的冷水中並用5×150ml的乙醚提取。把該乙醚提取物用水和鹽水洗，在硫酸鎂上乾燥並蒸發至幹。在矽膠柱上用戊烷進行閃式色譜層析來純化，並在真空下(b.p.120℃)蒸餾得到31.81g(54％)的題目化合物。1H-NMR(CDCl3)δ0.87(s，9H)，1.47(s，6H)，2.39(s，1H)。元素分析C11H22OSi計算值C66.60，H11.18；實測值C66.13，H11.46。實施例24-甲基-4-叔丁基二甲基甲矽烷氧-戊炔醛(式X)向冷卻到-78℃的10g(50mmole)的3-甲基-3-叔丁基-二甲基-甲矽烷氧-丁炔的25ml無水四氫呋喃溶液中滴加40ml(63mmole)1.6M正丁基鋰己烷，用時40分鐘。在-78℃攪拌1小時後，滴加31ml(400mmole)的N，N-二甲基甲醯胺並持續攪拌1/2小時。然後把該反應混合物倒入300ml的水和鹽水中並用4×75ml的戊烷提取。用氯化銨溶液、水和鹽水洗該提取物，在硫酸鈉上乾燥並蒸發至於。通過蒸餾進行純化得到8.88g(78％)的題目化合物，在8mmHg處b.p.為92-94℃。。1H-NMR(CDCl3)δ0.87(s，9H)，1.54(s，6H)，9.24(s，1H)。實施例3表異構體混合物3aR-[1(R*)，3aα，4β，7αb]-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1[2(R，S)-羥基-5-(叔丁基-二甲基甲矽烷氧基)-1，5-二甲基-3-己基]-4H-茚酚乙酸酯(式VI)在10分鐘內向在-78℃冷卻的2g(9mmole)的[3aR-Z，3aα，4β，7αβ]-1-亞乙基-八氫-7a-甲基-1H-4-茚酚乙酸酯和2.25g(9mmole)的4-甲基-4-叔丁基-二甲基甲矽烷氧基-戊炔醛的5ml無水二氯甲烷中加入20ml(20mmole)1M二甲基鋁氯化物溶液。由於兩小時後TCL檢測的反應只完成一半，又加入2.25g的甲醛和20ml的二甲基鋁氯化物。又攪拌1小時後反應完成。將反應混合物倒入600ml的2N碳酸氫鉀中，用4×100ml的乙酸乙酯提取；用水和鹽水衝洗提取物，在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。先用二氯甲烷然後用己烷-乙酸乙酯(3∶1)在矽膠柱上進行閃式層析得到4.16g(100％)的題目表異構體混合物。用己烷-乙酸乙酯10∶1的HPLC方法完成表異構體的分離得到3.25g(78％)的2R-表異構體，m.p.47-48℃；[α]25D+7.20℃(c0.555乙醇)；1H-NMR(CDCl3)δ0.15(s，3H，SiCH3)，0.16(s，3H，SiCH3)，0.86(s，9H，SitBu)，1.04(s，3H，CH3)，1.14(d，3H，j＝6.9Hz，CH3)，1.14(s，6H，2CH3)，2.05(s，3H，CH3CO)，2.40(p，1H，J＝6.4Hz，CH)，4.43(t，1H，j＝6.3Hz，CH)，5.21(brs，1H，CHOAc)，5.68(brs，1H＝CH-)；元素分析C26H44O4Si計算值C69.59，H9.88；實測值C69.85，H9.74。和0.754g(18％)的2S-表異構體，m.p.77-79℃，[α]25D+18.12℃(c0.524，乙醇)；1H-NMR(CDCl3)δ0.17(2s，6H，2SiCH3)，0.87(s，9H，Sit.Bu)，1.03(s，3H，CH3)，1.14(d，3H，j＝6.9Hz，CH3)，1.47(s，6H，2CH3)，2.05(s，3H，CH3CO)，2.37(p，1H，CH)，4.40(dd，1H，j＝3.7和7.8Hz，CH)，5.21(brs，1H，CHOAc)，5.54(brs，1H＝CH-)；元素分析C26H44O4Si計算值C69.59，H9.88；實測值C69.42，H10.15。實施例4[3aS-[3(1S*，2S*)，3aα，7α，7αβ]]-3-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基-甲矽烷基]氧-1，5-二甲基-4-(苯基亞磺醯基)-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1氫-茚-7-酚乙酸酯(式VII)向802mg(1.8mmole)的[3aS-[3(1S*，2S*)，3aα，7α，7αβ]]-7-(乙醯氧基)-α-[3[[(1，1-二甲基乙基)二甲基-甲矽烷基]氧-3-甲基-1-丁炔基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-β，3a-二甲基-1H-茚-3-乙醇的20ml無水乙醚中加入0.5ml(3.6mmole)三乙胺。在冰浴中冷卻到-78℃後，在2小時內加入8ml(4mmole)的新鮮製得的苯基磺醯氯。然後用水稀釋該反應混合物並用乙醚提取。用2N碳酸氫鉀接著用水和鹽水衝洗該乙醚提取物直到中性。在硫酸鈉上乾燥後，把乙醚溶液蒸乾。用己烷-乙酸乙酯4∶1的閃式色譜層析法接著用己烷-乙酸乙酯3∶1的製備性HPLC純化粗產物得到878mg(88.2％)的題目化合物，其為兩種表異構體亞碸的混合物。實施例5[3aS-[3(1S*，2R*)，3aα，7α，7αβ]]-3-[5-[[(1，1-二甲基-乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-1，5-二甲基-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1氫-茚-7-酚(式II)向1.68g(3.02mmole)的[3aS-[3(1S*，2S*)，3aα，7α，7αβ]]-3-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基-甲矽烷基]氧-1，5-二甲基-4-(苯基亞磺醯基)-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1氫-茚-7-酚乙酸酯的550ml無水乙醚中加入0.432ml(11.174mmole)的無水甲醇。在戊烷-液氮浴中把所得到的混合物冷卻到-100℃並在10分鐘內滴加10.6ml(18.12mmole)的1.7M叔丁基鋰。TLC表示該反應完成。用8.0ml甲醇熄滅該反應並用水然後用鹽水衝洗乙醚部分，在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。把殘餘物溶於12ml的乙醇中並在加入7ml2N的氫氧化鈉後於70℃加熱三小時。用水-鹽水1∶1稀釋反應混合物，用乙酸乙酯萃取。用水和鹽水衝洗萃取物，在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。用己烷-乙酸乙酯7∶1的製備性HPLC純化該粗產物。獲得593mg(50.25％)題目化合物，它在冷藏箱中結晶，mp64-65℃；[α]25D+99.62℃(c0.5，乙醇)；1H-NMR(CDCl3)δ0.07(s，6H，SiMe2)，0.85(s，9H，Si-叔丁基)，1.09(s，3H，CH3)，1.11(d，3H，J＝7Hz，CH3)，1.29(s，3H，CH3)，1.30(s，3H，CH3)，1.98，2.27(m，2H，CH2)，2.83(brm，1H，CH)，4.18(brs，1H，CH)，5.28(t，1H，J＝6.3Hz，＝CH-)，5.32(dd，1H，j＝2.8和6.3Hz，＝CH-)，5.43(brs，1H，＝CH-)。元素分析C24H42O2Si2計算值C73.78，H10.84；實測值C73.89，H11.08。實施例6[3aS-[3(1S*，2R*)，3aα，7αβ]]-3-[5-[[(1，1-二甲基-乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-1，5-二甲基-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1氫-茚-7-酚(式III)用1.694g(4.5mmole)的重鉻酸吡啶鎓和85mg的對甲苯磺酸吡啶鎓分批處理390mg(1mmole)[3aS-[3(1S*，2R*)，3aα，7αβ]]-3-[5-[[(1，1-二甲基-乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-1，5-二甲基-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1氫-茚-7-醇的8ml無水二氯甲烷溶液。在室溫下把反應混合物攪拌4.5小時。加入20ml乙醚後，把混合物攪拌20分鐘然後在Celite上過濾，並用3×50ml的乙醚洗殘餘物。用20ml冰冷的1NHCl、水、40ml2N碳酸氫鈉和水-鹽水的混合物洗滌濾液。用2×100ml的乙酸乙酯萃取含水層。把合併的有機相在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。用己烷-乙酸乙酯15∶1的閃式色譜層析法純化粗產物得到350mg(90％)的題目化合物。實施例71，25-二羥基-16，22S，23-三烯-膽鈣化醇於-78℃下向820mg(0.141mmole)[3S-(1Z，3a，5b)]-2-[3，5-雙[[(1，1-二甲基)二甲基甲矽烷基]氧]-2-亞甲基-環-己二烯]-乙基-二苯基膦氧化物的8ml無水四氫呋喃溶液中滴加0.856ml(1.37mmole)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘後，在10分鐘內向這樣形成的紅色溶液中滴加350ml(0.9mmole)[3aS-[3(1S*，2R*)，3aa，7ab]]-3-[5-[[(1，1-二甲基-乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-1，5-二甲基-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1氫-茚-7-酮的5ml無水四氫呋喃。在氬氣下-78℃攪拌反應90分鐘，然後加入10ml1∶1的2N含水酒石酸鉀鈉和2N含水KHCO3的混合物熄滅反應，用3×125ml乙酸乙酯萃取。用鹽水洗有機層，在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。用己烷-乙酸乙酯40∶1的閃式色譜層析法純化殘餘物得到475mg三甲基甲矽烷化的題目化合物，將其溶於6ml的無水四氫呋喃並在氬氣下用6.4ml1M氟化叔丁基銨的四氫呋喃處理。在室溫下把反應混合物攪拌45.5小時。用5ml水熄滅該反應，並在真空下除去四氫呋喃後用3×120ml乙酸乙酯萃取。有機層用水和鹽水的混合物洗，在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。用己烷-乙酸乙酯1∶3的閃式色譜層析法純化粗產物得到172mg(46.5％)的題目化合物。[α]25D+67.52℃(c0.2，乙醇)。UV最大(乙醇)258-259nm(e11520)。1H-NMR(20∶1，CDCl3DMSO-d6)δ0.73(s，3H，CH3)，1.16(d，3H，J＝6.7Hz，CH3)，1.34(s，6H，2CH3)，4.22(brm，1H，CH)，4.43(brm，1H，CH)，4.98(s，1H，＝CH2的CH)，5.34-5.42(m，4H，＝CH2的CH，丙二烯，＝CH-)，6.14(d，1H，J＝11Hz，＝CH-)，6.35(d，1H，J＝11Hz，＝CH-)。實施例8[3aS-[3(1S*，2R*)，3aα，7α，7αβ]]-3-[5-[[(1，1-二甲基-乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-1，5-二甲基-4-(苯基亞磺醯基)-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1氫-茚-7-醇乙酸酯(式XIV)向681mg(1.52mmole)的[3aS-[3(1S*，2R*)，3aα，7α，7αβ]]-7-乙醯氧基)-α-3-[[(1，1-二甲基-乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-3-甲基-1-丁炔基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-β，3a-二甲基-1H-茚-3-乙醇的40ml無水乙醚溶液中加入0.423ml(3.04mmole)的三乙胺。向在-78℃下攪拌過的混合物滴加剛製備的苯基磺醯氯直到出現黃色。再攪拌1小時後，把反應混合物加熱到室溫，用水稀釋並用乙醚萃取。乙醚部分用2N碳酸氫鉀、水和鹽水洗，在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。先用乙酸乙酯的閃式色譜層析法再用己烷-乙酸乙酯3∶1的HPLC純化粗產物得到655mg(51％)的題目表異構體亞碸。實施例9[3aS-[3(1S*，2S*)，3aα，7α，7αβ]]-3-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-1，5-二甲基-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1H-茚-7-醇(式XI)向655mg(1.18mmole)的[3aS-[3(1S*，2R*)，3aα，7α，7αβ]]-3-[5-[[(1，1-二甲基-乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-1，5-二甲基-4-(苯基亞磺醯基)-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1氫-茚-7-醇乙酸酯的200ml無水乙醚中加入0.176ml(4.35mmole)無水甲醇。在戊烷-液氮浴中把這樣得到的混合物冷卻到-100℃並當顏色變成棕黃色時，滴加8ml(14.1mmole)的1.7M叔丁基鋰。TLC表示該反應完成。用4ml甲醇熄滅反應，用水洗到中性，然後用鹽水洗滌，在硫酸鈉上乾燥並蒸發。把該殘餘物(730mg)溶於8ml乙醇中並在加入4ml的2N氫氧化鈉後，在70℃加熱1-1/2小時。用鹽水-水稀釋後，用乙酸乙酯萃取。用水把萃取物洗到中性，然後再鹽水洗滌，在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。用己烷-乙酸乙酯7∶1的HPLC純化該粗產物(610mg)得到208mg(45.2％)的題目化合物；[α]25D+10.82℃(c0.5％，乙醇)；1H-NMR(CDCl3)δ0.08(s，CH，SiMe2)，0.86(s，9H，Si-叔丁基)，1.09(s，3H，CH3)，1.13(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)，1.99，2.27(m，2H，CH2)，2.83(m，1H，CH)，4.18(brs，1H，CH)，5.21(t，1H，J＝6.4Hz，＝CH-)，5.34(dd，1H，J＝2.7和6.4Hz，＝CH-)，5.44(brs，1H，＝C-)。實施例10[3aS-[3(1S*，2S*)，3aa，7ab]]-3-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-1，5-二甲基-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1H-二氫茚-7-酮(式XII)用1.2g(3.19mmole)的重鉻酸吡啶鎓和60mg對甲苯磺酸吡啶鎓處理415mg(1.06mmole)的[3aS-[3(1S*，2S*)，3aa，7a，7ab]]-3-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-1，5-二甲基-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1H-茚-7-醇的9ml無水二氯甲烷溶液。在室溫下攪拌2小時後，再加入546mg(1.5mmole)的重鉻酸吡啶鎓和28mg的對甲苯磺酸吡啶鎓並在室溫下把反應混合物攪拌2.5小時。然後加入25ml乙醚，攪拌20分鐘後，把混合物在硅藻土上過濾並用乙醚衝洗(3×50ml)。用冰浴的20ml1N的HCl、水、2NKHCO3(40ml)以及水和鹽水的混合物洗滌濾液。用乙酸乙酯萃取含水部分。把合併的有機部分在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。用己烷-乙酸乙酯15∶1的閃式色譜層析法純化該粗產物得到310mg(75％)的題目化合物。實施例111，25-二羥基-16，22R，23-三烯-膽鈣化醇在氬氣下向-78℃下的755mg(1.3mmole)的[3S-(1Z，3α，5β]-2-[3，5-雙[[(1，1-二甲基)二甲基甲矽烷基]氧]-2-亞甲基-環-己二烯]-乙基]-二苯基膦氧化物的8ml無水四氫呋喃溶液滴加0.79ml(1.26mmole)的1.6M正丁基鋰己烷。攪拌5分鐘後，在10分鐘內向這樣形成的紅色溶液中滴加310mg(0.8mmole)[3aS-[3(1S*，2S*)，3aα，7αβ]]-3-[5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷基]氧]-1，5-二甲基-2，3-己二烯基]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-1H-茚-7-酮的4ml無水四氫呋喃溶液。在-78℃氬氣下再攪拌該混合物90分鐘，然後加入10ml1∶1的2N含水酒石酸鈉鉀和2N含水KHCO3中止反應，用3×120ml乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌有機相，在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。用己烷-乙酸乙酯40∶1的閃式色譜層析法純化三甲矽烷化的該粗產物。在氬氣室溫下攪拌71小時把434mg由此純化的中間體溶於5.5ml無水四氫呋喃並用9.96ml1M氟化叔丁胺的四氫呋喃溶液處理。用5ml水中止反應後，真空除去四氫呋喃，用水稀釋殘餘物並用3×120ml乙酸乙酯萃取。用水和鹽水的混合物洗滌該有機，在硫酸鈉上乾燥並蒸乾。用己烷-乙酸乙酯1∶3的閃式色譜層析法純化該粗產物得到215mg(65.5％)的題目化合物，它能夠從四氫呋喃和甲酸甲酯的(1∶7)混合物中結晶出來；m.p.174-176℃，[α]25D+0℃(c0.2，乙醇)。UV最大(乙醇)264nm(e17080)。1H-NMR(CD3OD)δ0.74(s，3H，CH3)，1.18(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)，1.30(s，3H，CH3)，1.31(s，3H，CH3)，1.52(m，1H，CH2的CH)，1.89(t，2H，J＝5.6Hz，CH2)，4.13(q，1H，J＝5.3Hz，CH)，4.36(t，1H，J＝5.8Hz，CH)，5.21(t，1H，J＝6.7Hz，＝CH-)；5.30(s，1H，＝CH2的CH)，5.33(dd，1H，J＝2.3和6.2Hz，＝CH-)，5.45(s，1H，＝CH-)，6.17(d，1H，J＝11.2Hz，＝CH-)，6.3(d，1H，J＝11.2Hz，＝CH-)。權利要求1.一種具有下列通式的化合物其中R是羥基，R1是H2或CH2，或者R是氫或氟，R1是CH2。2.根據權利要求1的化合物，其中R是羥基和/或其中R1是CH2。3.根據權利要求2的化合物，它是1，25-二羥基-16，22S，23-膽鈣化醇或1，25-二羥基-16，22R，23-膽鈣化醇。4.一種化合物，通式為或其中R4和R6是低級烷基，R5是低級烷基、芳基或芳基-低級烷基。5.一種化合物，通式為或其中R4和R6是低級烷基，R5是低級烷基、芳基或芳基-低級烷基。6.一種化合物，通式為或其中R4和R6分別是低級烷基，R5分別是低級烷基、芳基或芳基-低級烷基。7.尤其是抑制皮膚過度增生和腫瘤細胞，具體用於治療過度增生的皮膚病如牛皮癬，腫瘤疾病如白血病，和皮質腺疾病如粉刺和脂溢性皮炎的藥物組合物，它包括有效量的如權利要求1，2或3的式I化合物和惰性載體。8.製備如權利要求1的式I化合物的方法，它包括從通式I中相應的甲矽烷基化的二醇或三醇除去甲矽烷保護基，該甲矽烷保護基優選是Si(R4，R5，R6)，其中R4和R6是低級烷基而R5是低級烷基、芳基或芳基-低級烷基，一般通過在極性溶劑中與一種氟鹽反應的方法去除甲矽烷保護基。9.權利要求1的化合物在製備具有抗過度增生活性和抑制腫瘤細胞活性，具體是治療過度增生的皮膚病如牛皮癬，腫瘤疾病如白血病，和皮質腺疾病如粉刺和脂溢性皮炎的藥物組合物中用途。10.基本上如上所述的新化合物、中間體、製劑、方法和用途。全文摘要本發明涉及一種具有右通式的化合物,其中R是羥基,R文檔編號A61P35/00GK1172793SQ97103358公開日1998年2月11日申請日期1997年3月20日優先權日1996年3月21日發明者B·M·赫尼思,J·A·拉克比利,M·R·尤斯庫科維克申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司