微生物滅活的有機過氧化物化合物的製作方法

2023-06-14 11:16:01 2

專利名稱：微生物滅活的有機過氧化物化合物的製作方法
技術領域：
本發明用於滅活微生物和/或降解核酸(並且特別是降解DNA)的化合物領域。
背景技術：
處理病毒和細菌使其滅活在多個領域重要，包含廢水或汙水的衛生處理，和胃腸 外藥物領域例如疫苗。例如，很多疫苗基於滅活的微生物，以確保最終疫苗中不含活體感染材料。滅活失敗能引起嚴重的安全危險，如20世紀50年代脊髓灰質炎病毒滅活失敗的「Cutter 事件(Cutter incident)」 所知。滅活處理通常是基於化學方法。化學處理包含使用洗滌劑、甲醛(通常作為福馬林)、β丙內酯(BPL)、戊二醛、乙烯亞胺、苯酚等。這些滅活劑已經使用了很多年，如見參考文獻I。一些所述滅活劑也用於降解核酸。所述降解不僅在滅活所述病毒或細菌本身中起作用，而且也用於在生長中使用的任何細胞底物中除去殘餘核酸。例如，病毒能在細胞培養基中生長以提供製備疫苗的材料，並且生產中經常包含從細胞培養底物中降解任何殘餘核酸的步驟，從而除去潛在的致癌材料。參考文獻2描述了使用BPL滅活病毒和降解宿主細胞 DNA。所述最佳滅活劑根據所述特定微生物而改變。例如，病毒形態(大小、衣殼化、包膜等)的差異導致滅活靈敏度的差異，如見參考文獻3的附錄2。儘管一些處理能廣泛滅活微生物(如非常嚴酷的熱、消毒劑、強UV光或輻射)，這些也破壞免疫原性，因此不適合製備有效疫苗。改為選擇滅活處理，從而對所研究的微生物有效而保持疫苗免疫原性。不幸的是，所述處理因此可以留下活性形式的汙染劑，很可能通過強感染劑產生疫苗汙染。因此需要廣泛範圍滅活劑，所述滅活劑會使靶標微生物和潛在汙染物滅活。所述滅活劑也用於處理產品，例如牛血清或胰蛋白酶，其中推薦病毒滅活[4]。—些滅活劑的另一個難點是其穩定性。甲醛是有效滅活劑，特別在高溫時有效，但是其非常穩定並且因此滅活後留有殘餘。這些殘餘能干擾下遊殘餘活性微生物的測試。因此在這些測試中使用高度稀釋，但是這降低其靈敏度。另外，所述殘餘能在最終疫苗中幹擾免疫反應，如參考文獻5指示福馬林滅活疫苗對產生超敏反應有高風險。最後，甲醛滅活在一些情況下能是可逆的[6，7]。因此，需要新且改善的微生物滅活劑。這些應該對多種微生物(包含耐寒微生物)有用，而不除去所需免疫原性。其也應該留下很少或沒有幹擾或有害殘餘，並且所述滅活應該不可逆。其理想上也應適於降解核酸並且應甚至在液體培養基存在下顯示活性
發明內容
本發明使用多官能有機過氧化物作為微生物滅活劑和/或用於降解核酸。這些滅活劑包含α)至少一個碳原子或骨架和(ii)至少兩個過氧化物基團，即至少兩個基團包含兩個氧原子之間的單鍵-0-0-。所述滅活劑理想地是氫過氧化物，即包含基團-0-0-H。所述化合物為本領域已知，但是其現在顯示是微生物的潛在滅活劑，所述微生物包含能實現滅活而不負面影響免疫原性的極其穩定病毒如呼腸孤病毒。另外，其能為高度水溶性，生成沒有毒性的降解產物(如只生成簡單羧酸如乙酸、丙酸或丁酸等)，並且在廣泛PH和溫度下有活性。另外，其能在液體條件下顯示令人驚奇的穩定性，並且對降解細胞DNA有效。因此，本發明提供處理含微生物樣品(如液體樣品)的工藝，包含將樣品接觸多官能有機過氧化物。此工藝能造成樣品中微生物的滅活。本發明也提供處理包含核酸(例如DNA，如細胞DNA)的樣品(例如液體樣品)的工藝，包含將樣品接觸多官能有機過氧化物。此工藝能造成樣品中核酸的降解。本發明還提供製備藥物組合物的方法，其包括以下步驟(i)將包含微生物的樣品接觸多官能有機過氧化物以滅活其中的微生物；(ii)從步驟(i)的產物製備藥物組合物。所述藥物組合物是可用的疫苗，例如病毒疫苗。本發明也提供藥物組合物，包含(i)活性劑，例如病毒免疫原，和(ii)多官能有機過氧化物和還原劑的反應產物。所述還原劑和所述反應產物應該沒有毒性，例如都可以是糖。本發明也提供多官能有機過氧化物的水溶液，其中所述多官能有機過氧化物存在的濃度是(a)小於1%重量或(b)5_70%重量。所述溶液特別是選擇(a)中，也可以包含微生物。選擇(a)中，所述濃度範圍通常為O. 001-0. 5%，例如O. 01-0. 25%,O. 01-0. I或約O. 05%。選擇(b)中，所述濃度範圍能是6-60%、7-50%、8-40%、9-35%或10-30%。本發明也提供液體組合物，包含⑴滅活的微生物，和(ii)小於1%重量(例如，在範圍O. 001-0. 5%中，如O. 01-0. 25%,O. 01-0. I或約O. 05%)的多官能有機過氧化物。本發明也提供包含微生物和多官能有機過氧化物的反應產物的液體組合物。
本發明也提供包含多官能有機過氧化物的消毒劑組合物。所述溶液包含上面討論的水溶液，但沒有微生物。本發明也提供任何上述組合物，以用於藥物生產，如用於疫苗的生產。類似地，本發明提供生產藥物的工藝，其中所述工藝使用任何上述組合物。本發明也提供使用多官能有機過氧化物作為微生物滅活劑。本發明也提供多官能有機過氧化物用作微生物滅活劑。本發明也提供使用本發明水溶液作為微生物滅活劑。本發明也提供本發明水溶液用作微生物滅活劑。樣品本發明用於處理包含微生物的樣品。這些樣品優選液體樣品，但是也能是固體，如容器或工作場所的表面。所述樣品包括但不限於微生物培養液體；血液製品、血清、血漿、或血液衍生製劑(如抗凝藥)；源自動物的原料和產品；其他可能被微生物汙染的原料；疫苗和診斷生成中的重組蛋白、材料和中間物(如ELISA);來自使用微生物試劑工藝的廢材料；廢水，汙水；食品(如牛奶)等。本發明還用於樣品的消毒或滅菌，並且特別是表面消毒以破壞生活在其上的微生物。例如，本發明能用於使用前的工作表面消毒，使用前的手術設備或植入物消毒，或需要消毒或滅菌的任何其他目的。本發明用於滅活多種微生物，包含病毒和細菌。其能用於包膜病毒和無包膜病毒。其能用於有RNA基因組(單或雙鏈)或DNA基因組(單或雙鏈)的病毒，並且單鏈基因組可以是+或-義。其能用於分區段基因組或非區段基因組的病毒。其能用於有衣殼(單個或多個)的病毒或沒有衣殼的病毒。其能用於革蘭氏陰性菌或革蘭氏陽性菌。因此，所述樣品也可含有以下一種或多種 正粘病毒本發明可用於滅活正粘病毒，例如甲型、乙型、丙型流感病毒。甲型或乙型流感病毒可以是大流行(每年/季節)毒株，或來自可能引起爆發流行的毒株(即，與目前流行毒株的血凝素相比具有新型血凝素的流感毒株，或對禽類對象有致病性並可能水平傳播給人群的流感毒株，或對人有致病性的流感毒株)。根據特定季節和病毒株特性，甲型流感病毒可以衍生自下列一種或多種血凝素亞型H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、··H11、H12、H13、H14、H15 或 H16。·副粘病毒科病毒本發明可用於滅活副粘病毒科病毒，如肺炎病毒(RSV)、副粘病毒(PIV)和麻疹病毒(麻疹)。·肺炎病毒本發明可用於滅活肺炎病毒或偏肺病毒，例如呼吸道合胞病毒(RSV)、牛呼吸道合胞病毒、小鼠肺炎病毒和火雞鼻氣管炎病毒。優選所述肺炎病毒是RSV或偏肺病毒(HMPV)。 副粘病毒本發明可用於滅活副粘病毒，如1、2、3或4型副流感病毒(PIV)、流行性腮腺炎病毒(Mumps)、仙臺病毒、猴病毒5、牛副流感病毒和新城疫病毒。優選所述副粘病毒是PIV或流行性腮腺炎病毒。·麻疹病毒本發明可用於滅活麻疹病毒，例如麻疹。·小核糖核酸病毒本發明可用於滅活小核糖核酸病毒，如腸道病毒、鼻病毒、嗜肝RNA病毒、心臟病毒和口蹄疫病毒。·腸道病毒本發明可用於滅活腸道病毒，如1、2或3型脊髓灰質炎病毒，柯薩奇(Coxsackie)病毒A組1_22型和24型，柯薩奇病毒B組1_6型，艾柯(ECHO)病毒1_9、11-27和29-34型和腸道病毒68-71。優選所述腸道病毒是脊髓灰質炎病毒，例如I型毒株如Mahoney或Brunenders, 2型毒株如MEF-I或3型毒株如Saukett。·嗜肝RNA病毒本發明可用於滅活嗜肝RNA病毒(也稱為肝病毒)，例如A型肝炎病毒。·披膜病毒本發明可用於滅活披膜病毒，例如風疹病毒、α病毒或動脈炎病毒。優選風疹病毒屬，例如風疹病毒。用於滅活的有用α病毒包含水生α病毒，例如鮭魚胰腺病病毒(salmon pancreas disease virus)和昏睡病病毒。 黃病毒本發明可用於滅活黃病毒，如蜱媒腦炎(TBE)、登革熱(1、2、3或4型)、黃熱病、日本腦炎、西尼羅河腦炎、聖路易斯腦炎、俄國春夏腦炎、波瓦生腦炎。·C肝病毒本發明可用於滅活C肝病毒(HCV)。 瘟病毒本發明可用於滅活瘟病毒，如牛病毒性腹瀉(BVDV)、豬瘟(CSFV)或邊界病(BDV)病毒。·嗜肝DNA病毒本發明可用於滅活嗜肝DNA病毒,例如B肝病毒。 杆狀病毒本發明可用於滅活杆狀病毒，例如恐水病病毒(如狂犬病病毒)和水泡病毒(VSV)。 杯狀病毒本發明可用於滅活杯狀病毒例如沃克病毒，和諾沃克樣病毒例如夏威夷病毒和雪山病毒，和水泡病毒例如豬小皰疫病毒。·冠狀病毒本發明可用於滅活冠狀病毒，例如SARS、人呼吸道冠狀病毒、禽傳染性支氣管炎(IBV)、小鼠肝炎病毒(MHV)和豬傳染性腸胃炎病毒(TGEV)。 逆轉錄病毒本發明可用於滅活逆轉錄病毒，如腫瘤病毒、慢病毒或泡沫病毒。腫瘤病毒可以是HTLV-I、HTLV-2或HTLV-3。慢病毒抗原可以是SIV、HIV-I或HIV-2。·呼腸孤病毒本發明可用於滅活呼腸孤病毒，如正呼腸孤病毒、輪狀病毒、環狀病毒或科羅拉多壁蝨熱病毒(Coltivirus)。··細小病毒本發明可用於滅活細小病毒,例如細小病毒B19或博卡病毒。·其他肝炎病毒本發明可用於滅活丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒或庚型肝炎病毒。·人皰疫病毒本發明可用於滅活人皰疫病毒，如單純皰疫病毒(HSV),水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)，EB病毒(EBV)，巨細胞病毒(CMV)，人皰疹病毒6 (HHV6)，人皰疹病毒7 (HHV7)和人皰疹病毒8 (HHV8)。·乳頭狀多瘤空泡病毒本發明可用於滅活乳頭狀多瘤空泡病毒，例如乳頭瘤病毒和多瘤病毒。乳頭瘤病毒包括HPV血清型 1、2、4、5、6、8、11、13、16、18、31、33、35、39、41、42、47、51、57、58、63 和 65。·腺病毒本發明可用於滅活腺病毒,包含任何人腺病毒A、B、C、D、E、F或G。 包特氏菌屬(Bordetella):本發明可用於滅活包特氏菌(Bordetella),例如百日咳博德特菌(B. pertussis)。 梭菌科(Clostridiaceae):本發明可用於滅活梭菌,例如破傷風梭菌(C. tetani)和肉毒梭菌(C. botulinum)。·棒狀桿菌科(Corynebacteriaceae):本發明可用於滅活棒狀桿菌(Corynebacteria),例如白喉棒桿菌(C. diphtheriae)。·巴斯德菌科(Pasteurellaceae):本發明可用於滅活巴斯德菌種,例如流感嗜血桿菌(Haemophilus influenzae)。·分支桿菌科(Mycobacter iceaea):本發明可用於滅活分枝桿菌(Mycobacteria),例如結核分枝桿菌(M. tuberculossi )>牛分支桿菌(M. bovis)和減毒卡介苗(BacillusCalmette Guerin)。·奈瑟球菌科(Neisseriaceae):本發明可用於滅活奈瑟球菌種(Neisseria),例如腦膜炎奈瑟球菌(N. meningitidis)和淋病奈瑟球菌(N. gonorrhoeae)。·沙門氏茵科(Salmonellaceae):本發明可用於滅活沙門氏茵種(Salmonella),例如傷寒沙門菌(S. typhi)、甲型副傷寒沙門菌(S. paratyphi )、鼠傷寒沙門氏菌(S. typhimurium)、腸炎沙門氏菌(S. enteritidis)。·鏈球菌科(Steptococcaceae):本發明可用於滅活鏈球菌(Streptococci),例如肺炎鏈球菌(S. pneumoniae)(肺炎球菌)、無乳鏈球菌(S. agalactiae)和化膿鏈球菌(S.pyogenes)。 支原體科(Mycoplasmataceae):本發明可用於滅活支原體(Mycoplasmas)JSl^PI肺炎支原體(M. pneumonia)、豬鼻支原體(M. hyorhinis)、牛支原體(M. bovis)、無乳支原體(M. agalactiae)、雞毒支原體(M. gallisepticum),包含任何可以在汙染的細胞培養物或細胞培養物衍生材料中發現的支原體種。除了微生物之外，樣品也能包含溶液中的核酸，如殘餘的細胞DNA。例如，當裂解病毒在細胞培養基上生長和製備無細胞的收集物時，能出現這些情況。在所述示例中，所述多官能有機過氧化物能滅活所述微生物和降解溶液中的核酸，因此在疫苗(並且特別是病毒疫苗)生產中提供雙重優勢。因此，本發明處理的樣品可以包含微生物和細胞DNA (例如細胞系如MDCK的基因組DNA)。當樣品包含核酸(也包含或不包含微生物)時，所述核酸通常包含DNA，如細胞DNA。核酸不是在微生物內(例如，在細菌內，或病毒顆粒內)，通常溶液中沒有所述核酸，如溶液中的細胞DNA，而不是細胞內的細胞DNA (即是細胞來源的DNA，但不再出現在細胞內)。所述微生物可以特意存在(如在病毒生長後以製備疫苗後)或作為汙染物(如在汙水中，或來自重組蛋白表達後的受汙染細胞培養基成分、細胞或培養物)。同樣，在一些實施方式中，樣品可以特意包含微生物，但也可以包含汙染微生物。本發明特定用於滅活病毒，並且因此處理包含微生物樣品的工藝優選是在包含病毒的樣品中滅活病毒的工藝。在一些實施方式中，本發明能用於處理不必需包含微生物的樣品，但是所述樣品懷疑包含微生物或有包含微生物的風險。在這些實施方式中，所述處理不是必需的，但是用於確保微生物滅活以避免風險(如消毒中)。通常，所述樣品能支持微生物生長或持續性。除了包含微生物以外，樣品可以包含其他材料，如細胞底物或其殘留物、細胞核酸(如DNA)、雞蛋蛋白等。除了滅活微生物以外，有機過氧化物可以與這些其他材料反應。儘管理想上所述樣品不包含大量的、與所述感染材料競爭以和滅活劑反應的非感染材料。這些反應浪費所述滅活劑。能經歷這些無效反應的材料包含，例如還原劑(見下)。因此，例如，能避免保持高水平殘留葡萄糖的培養。在根據本發明處理所述樣品後，能除去和/或破壞殘留的或多餘的過氧化物。這能以多種方式實現，例如通過加入還原劑。合適的還原劑包括但不限於，硫代硫酸鈉、抗壞血酸、糖(例如葡萄糖或蔗糖；優選還原糖)、多糖、多酚等。還原糖通常以摩爾過量加入(每個還原基團計算)到所述過氧化物中，例如以還原基團與化學滅活劑2:1-4:1的摩爾過量。還原劑可以足夠量加入以阻滯所述過氧化物的起始濃度。然而，對已知最終濃度範圍的標準化良好的工藝而言，使用者優選加入更低濃度，如濃度足夠阻止會在滅活後殘餘的過氧化物量。根據所述化學滅活劑和根據使用的所述還原劑，所滅活的滅活劑能留在所述反應溶液中(例如，如果其無害，如單糖)，或可以稀釋，或可以除去。移除步驟可作為所述感興趣試劑的下遊工藝的一部分(如在從所述滅活材料中純化蛋白或病毒成分期間)。因此，移除可以涉及超濾/滲濾、透析、色譜純化等。多官能有機過氧化物本發明使用多官能有機過氧化物。所述化合物包含至少一個碳原子或骨架，即是有機物，而不像&02。其也包含至少兩個組，即包含多個官能性過氧化物基團，而不像過氧乙酸。
所述過氧化物化合物理想地是氫過氧化物，即包含基團-0-0-H。其可以包含多個氫過氧化物基團。其他多官能有機過氧化物能是過氧基縮酮，如CR1R2(00R3) (00R4)或四惡燒(tetraoxane),但是優選包含連接到碳原子上的至少一個-0-0-H基團的化合物。至少一個過氧化物基團連接到碳原子上以生成有機過氧化物，並且在一些實施方式中，各個過氧化物基團中至少一個氧原子連接到碳原子上。所述過氧化物化合物理想地是成對過氧化物(或氫過氧化物)，其中兩個過氧化物(或氫過氧化物)基團連接到相同碳原子上。所述化合物理想地有2、3或4個過氧化物基團，儘管不排除有更高過氧化物基團 數目的化合物。所述化合物能是同雙官能，即包含兩個相同的過氧化物(或氫過氧化物)官能基團，因此滅活劑可以是成對的二氫過氧化物(bishydroperoxide)。或者,滅活劑可以是異雙官能，即包含兩個不同的過氧化物官能基團，如，可以包含氫過氧化物(-00H)和不同的過氧化物(-00R，其中R關H)。優選的化合物是水溶性的。這促進其在疫苗生產中的應用。優選化合物不含滷素，因為所述化合物通常視作不太有害。因此，滅活劑可以只由碳、氫、氧和氮原子組成。特別優選化合物只由碳、氫和氧原子組成。優選化合物有低於500的分子量，如〈300、〈250、〈200、〈150、〈100。優選化合物不含-C (=0) OOH基團，並且因此在滅活中沒有產生非常酸性的pH(如不像過氧乙酸)。這些條件能破壞PH敏感性免疫原，並且也能造成用於所述滅活工藝的設備和機器的腐蝕。優選化合物是非爆炸性的，例如不優選三過氧化三丙酮。滅活中，所述化合物理想地不形成對動物(包括人)毒性高於比所述起始產物的反應或降解產物。優選化合物能滅活(i)a彡5的人甲型流感病毒，優選彡71ogl0的感染效價(titre)下降，和/或(ii)a彡3的3型呼腸病毒，優選彡5，並且特別優選彡71ogl0的感染效價下降。優選化合物能滅活微生物而不降低其免疫原性。特別優選的化合物能滅活甲型流感病毒而不降低其血凝素的免疫原性。可用的化合物如式I所示
OOH
D\
K2a\
OOR3其中Rla 是 H、C1^ 焼基、C2_6 稀基、C^6 塊基、Cu 焼氧基、C2_6_ 稀氧基、C (O) H、C (O) C1^ 焼基、C (O) OC1^烷基，可選N-單CV6烷基化或N- 二 C^6烷基化氨基，可選N-單C^6烷基化或N- 二 Cp6烷基化氨基羰基、S(0)。—2(^—6烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基；R2a 是 H、Cp6 焼基、C2_6 稀基、Cp6 塊基、Cu 焼氧基、C2_6_ 稀氧基、C (O) H、C (O) C1^ 焼基、C (O) OCV6烷基，可選N-單Cp6烷基化或N- 二 Cu烷基化氨基，可選N-單Cu烷基化或N- 二 C^6烷基化氨基羰基、S (O) mCh烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基、-(CR4R5)nCR6 (OOH) 2或R2a通過L連接R2b ；R3 是 H 或 C(OOH)RlbR2b,Rlb是H、C卜6燒基、C2_6稀基、C卜6塊基、Cu燒氧基、C2_6_稀氧基、C (O) H、C (O)Ck燒基、C (O) OCV6烷基，可選N-單Cp6烷基化或N- 二 Cu烷基化氨基，可選N-單Cu烷基化或N- 二 CV6烷基化氨基羰基、S(O)ch2Ch烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基，R2b 是 H、C1^ 燒基、C2_6 稀基、Cp6 塊基、Cu 燒氧基、C2_6_ 稀氧基、C (O) H、C (O) C1^ 燒基、C (O) OCV6烷基，可選N-單Cp6烷基化或N- 二 Cu烷基化氨基，可選N-單Cu烷基化或N- 二 CV6烷基化氨基羰基、S(O)ch2Ch烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基或R2b通過L連接R2a ；
在每次出現時，R4選自H或CV3烷基、羥基、氰基、硝基、C2_4_烯基、C1+烷氧基、C2_4_烯氧基、C1+烷基羰基、羧基、C1-6-烷氧基羰基，可選N-單Cu烷基化或N- 二 C1^烷基化氣基擬基、Cu硫代燒基、Cu燒基亞橫酸基Xn燒基橫酸基、Cu燒基氣基橫酸基和二 -C1+烷基氨基磺醯基；在每次出現時，R5選自H或Cp3烷基、輕基、氰、硝基、C2_4_烯基、C1+烷氧基、C2_4_烯氧基、C1+烷基羰基、羧基、C1-6-烷氧基羰基，可選N-單Cu烷基化或N- 二 Cu烷基化氨基羰基、C1+硫代烷基、C1+烷基亞磺醯基、C1+烷基磺醯基、C1+烷基氨基磺醯基和二 -C1+烷基氨基磺醯基；L是Cu亞燒基；R6 是 H、C^6 燒基、C2-6 稀基、C1^ 塊基、Cu 燒氧基、C2_6_ 稀氧基、C (O) H、C (O) C1^ 燒基、C (O) OCV6烷基，可選N-單Cp6烷基化或N- 二 Cu烷基化氨基，可選N-單Cu烷基化或N- 二 CV6烷基化氨基羰基、S(O)ch2Ch烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基；和η 是 I 至 8。除了對Rla、R2a, R3, Rlb、R2b, R4, R5和R6的這些選擇外，這些基團各自也能是所列選擇的衍生物。燒基、燒氧基基團的燒基部分、稀基、稀基基團的稀基部分、塊基或亞燒基可以是分枝或不分枝的，和/或可以是取代或未取代的。當取代時，各個取代基可以選自羥基、
氰基、硝基、C1^烷基、C6_10_芳基、苄基、C2_6_烯基、C1+烷氧基、C2_6_烯氧基、C1^烷基羰基、羧基、C1I烷氧基羰基，可選N-單Cu烷基化或N- 二 Cu烷基化氨基，可選N-單Cu烷基化或N- 二 CV6烷基化氨基羰基，可選N-單CV6烷基化或N- 二 CV6烷基化氨基亞磺醯基、CV6-硫代燒基、Cu燒基亞橫酸基、Cu燒基橫酸基、氣基橫酸基、Cu燒基氣基橫酸基和二 -C1+烷基氨基磺醯基。其中R3不是-H，並且Rla不同於R2a,這些化合物能以不同的對映體形式存在。本發明能使用特定的對映體或外消旋混合物。在一些實施方式中，Rla和R2a相同。在另一些實施方式中，Rla和R2a不同。在一些實施方式中，Rla和Rlb相同。在另一些實施方式中，Rla和Rlb不同。在一些實施方式中，R2a和R2b相同。在另一些實施方式中，R2a和R2b不同。Rla優選是H或Ch6烷基或CV4烷基。因此Rla能是H或CH3。R2a優選是H或Cp6烷基或Cp4烷基或-(CH2) nCH(00H)2或通過L連接R2b。因此R2a能是 CH3、Et、n-Pr 或-(CH2) 2_4CH (OOH) 2Rlb優選是H或C^6烷基或CV4烷基。因此Rlb能是H或CH3。R2b優選是C1^烷基或通過L連接R2a。因此R2b能是CH3、Et或n-Pr。各個R4 (可以相同或不同)優選是H或-CH3或羥基。各個R5 (可以相同或不同)優選是H或-CH3或羥基。L優選是C2_5亞烷基，例如-(CH2) 3-。R6優選是H或Cu烷基或C^4烷基。
η優選是2至6，或是2至4，或是3。在一個實施方式中1^是!1或013;1^是0134^- 1'或-(012)1101(00隊或1^通過 L 連接 R2b ;R3 是 H 或 C (OOH) RlbR2b ；Rlb 是 H 或 CH3 ；R2b 是 CH3、Et 或 n-Pr 或 R2b 通過 L 連接 R2a ;L 是-(CH2) 3_ ;和 η 是 3。所述混合物可以如式II所示
權利要求
1.一種處理包含微生物或有含微生物風險的樣品的工藝，所述工藝包含將所述樣品接觸多官能有機過氧化物。
2.—種處理包含核酸的樣品的工藝，所述工藝包含將所述樣品接觸多官能有機過氧化物以降解所述核酸。
3.一種製備藥物組合物的方法，所述方法包含以下步驟(i)將包含微生物的樣品接觸多官能有機過氧化物以滅活其中的微生物；(ii)從步驟(i)的產物製備藥物組合物。
4.一種多官能有機過氧化物的水溶液，其中所述多官能有機過氧化物的存在濃度是(a)小於1%重量或(b) 5-70%重量。
5.一種水性組合物，所述組合物包含(i)滅活的微生物，和(ii)少於1%重量的多官能有機過氧化物。
6.一種水性組合物,所述組合物包含微生物和多官能有機過氧化物的反應產物。
7.如權利要求I所述的工藝，其特徵在於，所述樣品是容器表面或工作場所的表面。
8.如權利要求I所述的工藝或權利要求3所述的方法，其特徵在於，所述包含微生物的樣品也包含溶液中的核酸。
9.如權利要求2或8所述的工藝或權利要求8所述的方法，其特徵在於，所述樣品獲自細胞培養物和所述核酸是來自所述細胞培養物的細胞DNA。
10.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述樣品包含病毒。
11.如權利要求10所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述樣品包含無包膜DNA病毒。
12.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物包含-O-O-H基團。
13.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物是成對過氧化物。
14.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物有2、3或4個過氧化物基團。
15.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物是成對二氫過氧化物。
16.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物是同雙官能有機過氧化物。
17.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物可溶於水。
18.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物不含滷素。
19.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物僅由碳、氫和氧組成。
20.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物的分子量低於300。
21.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物如式I所示
22.如權利要求21所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物如式II所示
23.如權利要求22所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，Rla是H或CH3jPR2a是 CH3、Et 或 n-Pr。
24.如權利要求21所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物如式III所示
25.如權利要求24所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於Rla是H或CH3;1^是CH3> Et 或 n-Pr 或 R2a 通過 L 連接 R2b ；Rlb 是 H 或 CH3 ；R2b 是 CH3> Et、n-Pr 或 R2b 通過 L 連接R2a ;和 L 是-(CH2) 3_。
26.如權利要求21所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物如式IV所示
27.如權利要求26所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於Rla是H；Rlb是H ;和η是3。
28.如權利要求17-23中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於 Rla和R2a相同;和/或 Rla和R2b相同;和/或 R2a和R2b相同。
29.如權利要求21-28中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於 Rla是H或CV4烷基；和/或R2a是H或CV4烷基或-(CH2) nCH (OOH) 2或通過L連接R2b;和/或 Rlb是H或CV4烷基；和/或R2b是CV4烷基或通過L連接R2a，因此R2b能是CH3、Et或n_Pr ； 和/或 各個R4是H或CH3;和/或 各個R5是H或CH3;和/或 L是C2_5亞烷基；和/或 R6是H或C^4烷基；和/或η是2至6。
30.如權利要求21-29中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於Rla是H或 CH3 ；R2a 是 CH3、Et、n-Pr 或-(CH2) nCH (OOH) 2 或 R2a 通過 L 連接 R2b ; R3 是 H 或 C (OOH) RlbR2b ；Rlb 是 H 或 CH3 ；R2b 是 CH3、Et 或 n-Pr 或 R2b 通過 L 連接 R2a ;L 是-(CH2) 3_ ;和 η 是 3。
31.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物具有圖I所示結構式。
32.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物選自下組2，2' -二氫過氧_2，2' -二丁基過氧化物；2，2-二氫過氧丁烷；1，I-二氫過氧甲烷；1，I-二氫過氧丙烷；1，I 二氫過氧丁烷；1，P - 二氫過氧-1,1' -二丙基過氧化物；1，I' -二氫過氧-ι，ι' -二丁基過氧化物；1，I' - 二氫過氧-1，I' -二乙基過氧化物；1，I, 5，5-四氫過氧戊烷；3，7- 二-氫過氧-1，2- 二氧雜環庚烷；和1，I-二氫過氧乙烷。
33.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物以O. 01-0. 25%的濃度使用。
34.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物在0-50°C的溫度使用。
35.如前述權利要求中任一項所述的工藝、方法、溶液或組合物，其特徵在於，所述多官能有機過氧化物使用O. 25-72小時以滅活。
36.如前述權利要求中任一項所述的工藝，其特徵在於，在處理所述樣品後除去所述殘留或過量的過氧化物。
37.如權利要求36所述的工藝，其特徵在於，除去所述殘留或過量的過氧化物使用還原劑。
38.如權利要求37所述的工藝，其特徵在於，所述還原劑是抗壞血酸或還原糖。
全文摘要
多官能有機過氧化物用作微生物學滅活劑和/或用於降解核酸。這包含至少一個碳原子和至少兩個有機過氧化物基團。所述滅活劑理想地是氫過氧化物。本發明在病毒疫苗製備中特別有用。
文檔編號A01N43/24GK102946727SQ201180022567
公開日2013年2月27日 申請日期2011年5月6日 優先權日2010年5月6日
發明者J·P·格雷格森, T·格魯恩戴曼 申請人:諾華有限公司