一株叢赤殼屬真菌及其在製備菌紋木中的應用的製作方法

2023-06-26 11:53:01 1

一株叢赤殼屬真菌及其在製備菌紋木中的應用的製作方法
【專利摘要】本發明公開了一株叢赤殼屬真菌（Nectria?rigidiuscula）J12WU及其在製備菌紋木中的應用，屬於微生物【技術領域】。所述菌株保藏於中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC?No：5963。所述菌株對木質基材料具有優良的浸染能力，浸染時間短，在材料表面能形成美觀的色彩及紋理，且對物理力學強度無影響。用所述菌株製備菌紋木的方法包括菌株活化、擴繁與接菌培養步驟，首先將菌株接種到活化與擴繁培養基上擴繁，在22~30℃下活化與擴繁7-15天，然後將木質基材料滅菌，與活化及擴繁後的菌株充分接觸，在22~30℃下培養1周或1周以上以上即可。本發明所述方法工藝合理，操作簡單，所製得的菌紋木具有很好的裝飾效果，且對基材的物理力學性質無影響，有利於大規模生產和推廣應用。
【專利說明】一株叢赤殼屬真菌及其在製備菌紋木中的應用
【技術領域】
[0001]本發明屬於微生物【技術領域】，具體涉及一種侵染時間短，色澤及紋理美觀，對木質基材料物理力學強度無影響的叢赤殼屬真菌菌株及其在製備菌紋木中的應用。
【背景技術】
[0002]木材的真菌色變長期以來被視為木材的缺陷，降低了木材的價值，實際上真菌的色變，如線條、染色等，具有自然天成、獨一無二的特點，具有唯一性的自然美，當腐朽不嚴重時可以作為木材的一種奇妙的修飾。若利用這種帶有自然線條或色彩的木材製作工藝品，如花瓶、耳環、鋼筆、貼木單板等，可提高木材的附加價值。帶有天然花紋和色澤的菌紋木在市場，尤其裝飾、裝修、工藝品市場 將會受到歡迎。
[0003]但是天然獲得的菌紋木仍存在以下不足:1、原料不易獲得，帶有很強的偶然性，因為天然菌紋木在自然界中只有在具有可形成菌紋木的菌種存在時才有可能形成，所以只有少部分林中的枯枝倒木中能找到少量菌紋木；2、天然菌紋木形成的時間長，受到很多氣候、環境因素的影響，如乾燥、寒冷、缺氧、陽光強烈、其他微生物幹擾等；3、天然菌紋木在自然條件下形成，易受到蟲害或其他真菌侵染，使木材不完整或形成不美觀的腐朽或變色。
[0004]因此，有必要分離、改良一種侵染時間短，色澤及紋理美觀，對木質基材料物理力學強度無影響的菌株，用其對木質基材料進行侵染處理製備菌紋木，以滿足裝飾、裝修、工藝品製作的需要。

【發明內容】

[0005]本發明要解決的第一技術問題在於提供一種侵染時間短，色澤及紋理美觀，對木質基材料物理力學強度無影響的真菌菌株。
[0006]本發明要解決的第二技術問題在於提供所述真菌菌株在製備菌紋木中的應用。
[0007]為解決上述技術問題，本發明採用如下技術方案。
[0008]除非另有說明外，本發明中所採用的百分數均為體積百分數。
[0009]一株叢赤殼屬真菌菌株(Afectria命名為J12WU,經鑑定為叢赤殼屬的一種真菌iNectria rigidiuscula)的一個株系，是從腐朽的樹樁、倒木或枯枝中分離得到，已於2012年4月6日保藏於中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱06110:，地址為:北京市朝陽區北辰西路I號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100080)，其保藏編號為 CGMCC No:5963。
[0010]一種用所述叢赤殼屬真菌菌株(AfectriaJ12WU製備菌紋木的方法，包括菌株活化與擴繁、接菌培養工序，具體包括以下步驟:
A、菌株活化與擴繁:將叢赤殼屬真菌菌株J12WU接種到活化與擴繁培養基上，在22~30°C下培養7~15天至生長旺盛的菌落形成，得活化與擴繁菌株；
活化與擴繁培養基為PDA培養基、PDA液態培養基、MA培養基、OA培養基中的任一種；
B、接菌培養:將待接種的木質基材料滅菌後，與活化及擴繁後的菌株充分接觸，在22~30°C下培養I周或以上，即得菌紋木。
[0011]本發明的有益效果包括以下幾個方面。
[0012]1、本發明所述菌株對木質基材料的侵染效果好，在非常短的時間內即可在木質基材料表面產生彩色染色花紋。採用固體接菌法，在處理後的第2周，基材表面即有染色花紋產生。採用液體接菌法，在處理後的第I周，基材表面即有染色花紋產生。
[0013]2、本發明所述菌株及菌紋木的製備方法對木質基材料的物理力學性能，如質量、硬度、強度等無影響。接菌處理後的第4周，電鏡掃描結果顯示，真菌對木材細胞的損傷輕微，表明菌紋木的質量、硬度、強度等與健康正常材均無顯著差別。
[0014]3、本發明所述菌紋木的製備方法技術路線合理、操作流程簡單、原料易得、成功率高，有利於大規模生產和推廣應用。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0015]圖1為實施例2中西南榿木處理4周後橫切面的表面的花紋。
[0016]圖2為實施例2中西南棺木處理4周後橫切面的表面的花紋。
[0017]圖3為實施例2中西南榿木處理4周後縱切面的表面的花紋。
[0018]圖4為實施例5中西南棺木處理後橫切面表層花紋處掃描電鏡圖。
[0019]圖5為實施例5中西南棺木處理後弦切面靠近花紋處掃描電鏡圖。
[0020]【具體實施方式】
下面對本發明作進一步的說明，但不以任何方式對本發明加以限制，基於本發明教導所作的任何變換，均落入本發明的保護範圍。
[0021]一株叢赤殼屬真菌菌株(Afectria rigidiuscula) J12WU,於2012年4月6日保藏於中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為:北京市朝陽區北辰西路I號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100080)，其保藏編號為CGMCC No:5963。
[0022]所述菌株能夠在木質基材料表面形成彩色的線狀、帶狀、塊狀、團狀、點狀花紋中的任一種或幾種。
[0023]所述菌株在木質基材料表面形成紅色系的線狀、帶狀、塊狀、團狀或點狀花紋中的任一種或幾種的概率更高，高於其他色系的花紋的形成概率。
[0024]所述菌株在接種到木質基材料後的第I周即能在木質基材料的表面產生枚紅色、大紅色、暗紅色、棕紅色的染色花紋。
[0025]所述菌株在接種到木質基材料第I周后，所產生的花紋能深入木塊達
0.05^0.09cm。
[0026]所述菌株是通過下述具體步驟獲得的:
A、標本採集:在腐朽樹樁、倒木或枯枝中，採集具有彩色的線狀、帶狀、塊狀、團狀或點狀花紋中的任一種或幾種的木質基材料組織，連帶其上面生長的真菌子實體，保存備用；
B、菌株分離與篩選:將採集的木質基材料組織，連帶其上面生長的真菌子實體破碎、消毒後，置於富集培養基中在22~30°C黑暗中靜置培養疒15天至長出菌絲；富集培養基為PDA培養基、MA培養基、OA培養基中的任一種；
然後將向四周周圍呈發散狀、疏鬆的絲狀、大紅色、邊緣平整、甚至形成粘液狀鮮黃色分生孢子的菌落挑取，接種至增殖培養基中在22~3(TC黑暗中靜置培養f 12天至菌落長出；增殖培養基為PDA培養基、MA培養基、OA培養基中的任一種；
C、菌種保存:挑取增殖培養基中生長旺盛者接種至保存培養基中，在22~3(TC黑暗中靜置培養5~12天，於4°C冰箱中凍存；保存培養基為PDA培養基、MA培養基、OA培養基中的任一種；
PDA培養基成分以g/L計為:馬鈴薯160~240、葡萄糖10~20、瓊脂14~20、自然pH ;
PDA培養基成分以g/L計優選為:馬鈴薯200、葡萄糖15、瓊脂17、pH 6.5^7.0 ；
MA培養基成分以g/L計為:麥芽膏21~28、瓊脂14~20、PH6.0~7.5 ；
MA培養基成分以g/L計優選為:麥芽膏25、瓊脂17、PH6.5~7.0 ；
OA培養基成分以g/L計為:燕麥片27~33、瓊脂14~20、PH6.0~7.5 ；
OA培養基成分以g/L優選為:燕麥片30、瓊脂17、PH6.5~7.0。
[0027]步驟A所述的標本採集是在溫暖潮溼的闊葉林、針葉林或針闊葉混交林中進行。
[0028]步驟A所述的標本採集優選在溫暖潮溼的闊葉林中進行。
[0029]步驟A所述的木質基材料組織，連帶其上面生長的真菌子實體採集後需冷藏保存備用，冷藏溫度為4°C。
[0030]步驟A所述的標本採集優選在楊柳科楊屬、樺木科榿屬、樺木屬、薔薇科櫻桃屬、木棉科輕木屬或殼鬥科櫟屬樹種的腐朽樹樁、倒木或枯枝中，採集具有彩色的線狀、帶狀、塊狀、團狀或點狀花紋中的任一種或幾種的木質基材料組織，連帶其上面生長的真菌子實體，保存備用。
[0031]所述楊屬樹種優選毛白楊。
[0032]所述樺木屬樹種優選西南樺。
[0033]所述棺屬樹種優選西南棺木。
[0034]步驟B所述的破碎，是用解剖刀將木質基材料組織，連帶其上面生長的真菌子實體切成0.3~0.7cmX0.3~0.7cmX0.3~0.7cm的小塊。
[0035]步驟B所述的消毒，是用75%酒精浸泡消毒1(T15s，再用0.1%升汞浸泡消毒3^7min,再用滅菌蒸餾水清洗3次。
[0036]步驟B所述的富集培養的條件優選:26°C黑暗靜置培養10天。
[0037]步驟B所述的菌株分離與篩選是從富集培養基中將菌落大紅色，圓周狀發散生長，具輪紋；具大量大紅色氣生菌絲，疏鬆，邊緣平整，邊緣菌絲下沉於培養基內生長，甚至已形成鮮黃色粘液狀分生孢子團的菌落挑取，接種至增殖培養基中。
[0038]步驟B所述的增殖培養的條件優選:26°C黑暗靜置培養9天。
[0039]步驟C所述的保存培養的條件優選:26°C黑暗靜置培養9天。
[0040]一種用所述的叢赤殼屬真菌菌株(Afectria製備菌紋木的方法，包括菌株活化與擴繁、接菌培養工序，具體包括以下步驟:
A、菌株活化與擴繁:將叢赤殼屬真菌菌株J12WU接種到活化與擴繁培養基上，在22~30°C下培養疒15天至生長旺盛的菌落形成，得活化與擴繁菌株；活化與擴繁培養基為PDA培養基、PDA液態培養基、MA培養基、OA培養基中的任一種；
B、接菌培養:將待接種的木質基材料滅菌後，與活化與擴繁後的菌株充分接觸，在22~30°C下培養I周或以上，即得菌紋木。[0041]所述的製備方法，還可以包括後處理步驟，將接菌培養後得到的菌紋木刮去表面的菌絲，洗淨後乾燥至含水率8~10%。
[0042]PDA液態培養基成分以g/L計為:馬鈴薯160~240、葡萄糖10~20、自然PH。
[0043]PDA液態培養基成分以g/L計優選為:馬鈴薯200、葡萄糖15、PH 6.5~7.0。
[0044]步驟B所述的木 質基材料為原木、實木塊、木板、木皮、木薄片、木棒、異形木製品中的任一種或幾種。
[0045]步驟B所述的木質基材料的樹種可以為任意樹種。
[0046]步驟B所述的木質基材料的樹種優選自楊柳科楊屬、樺木科榿屬、樺木屬、薔薇科樓桃屬、木棉科輕木屬或殼鬥科櫟屬樹種。
[0047]步驟B所述的木質基材料的樹種更優選自毛白楊、西南樺、西南榿木、思茅松。
[0048]步驟B所述的木質基材料在接種前，可根據需要加工成任意的形狀。
[0049]步驟B所述的滅菌，是將木質基材料在高壓蒸汽式滅菌器中，在121 °C下滅菌處理20分鐘以上。
[0050]步驟B所述的滅菌，是將木質基材料置於培養瓶中，將蛭石倒入培養瓶中至覆蓋木質基材料，加少量水使木質基材料及蛭石溼潤，蓋上瓶蓋，置於高壓蒸汽式滅菌器中，在121°C滅菌60分鐘。
[0051]步驟B所述的將待接種的木質基材料與活化及擴繁後的菌株充分接觸，在固體接菌時是將含有菌落的培養基切成與待接種木質基材料大小、形狀相近的菌塊，將至少一塊菌塊貼在木質基材料表面。
[0052]所述菌塊的尺寸和形狀優選為邊長f4cm的三角形、方形、多邊形或面積相近的圓形。
[0053]所述菌塊的總面積在2cm2以上。
[0054]步驟B所述的將待接種的木質基材料與活化及擴繁後的菌株充分接觸，在液體接菌時，是將待接種的木質基材料浸入含有菌落的培養液中，且/或將成團的菌絲體夾取置於木質基材料的表面或附近。
[0055]所述菌絲體的夾取量與木質基材料的體積比為0.r0.5:1。
[0056]所述菌絲體的夾取量的總體積在Icm3以上。
[0057]實施例1
-叢赤殼屬真菌(Afectria rigidiuscula ) J12WU的獲得、鑑定與保藏。
[0058](I)叢赤殼屬真菌iNectria rigidiuscula ) J12WU的獲得與鑑定。
[0059]本發明所述的叢赤殼屬真菌，是從西南榿木的腐朽的樹樁、倒木或枯枝中分離得到。樣品採自雲南省昆明市金殿公園蕨壑雲深景點，採集已腐朽的且在木質部出現紅色系花紋的樹樁、樹枝樣品100g，連帶其上面生長的真菌子實體，在4°C冷藏保存備用。
[0060]將米集的已腐朽樹樁樣品，以解剖刀切成0.3~0.5cmX0.3~0.5cmX0.3~0.5cm的小塊，用75%酒精浸泡消毒l(Tl5s,再用0.1%升萊浸泡消毒5min,再用滅菌蒸懼水清洗3次。接於PDA培養基中，26°C ±2°C黑暗靜置培養10天，至菌落長出。
[0061]然向四周周圍發散狀、疏鬆的絲狀、大紅色、邊緣平整、甚至形成粘液狀鮮黃色分生孢子的菌落挑取，接種至增殖培養基中在26°C ±2°C黑暗靜置培養9天，至菌落長出。增殖培養基為PDA培養基。待菌落長出後，挑取長勢旺盛者至保存培養基中，保存培養，保存培養基為PDA培養基，保存培養的條件為在26°C ±2°C黑暗靜置培養9天。
[0062]PDA培養基成分以g/L計為:馬鈴薯200、葡萄糖15、瓊脂17、pH 6.5^7.0。
[0063]對上述分離的菌株J12WU，通過生物學特性觀察，進行進一步的形態鑑定，實驗結果記錄如下。
[0064]A、形態特徵:在PDA培養基上培養7天，菌落直徑約4.9cm,生長速度較慢；菌落大紅色，圓周狀發散生長，具輪紋；具大量氣生菌絲，疏鬆，邊緣平整，邊緣菌絲下沉於培養基內生長，於中央部位形成鮮黃色粘液狀分生孢子團。具鐮刀形及卵圓形分生孢子，成熟鐮刀形孢子產自瓶型分生孢子梗，具6-9分隔，形狀彎曲，向兩尖端端逐漸變為窄細，中間細胞為深色，尖端兩細胞顏色變為透明長60-80 ii mX寬7-12 u m,卵圓形分生孢子長5-7 u mX寬 3-4 um。[0065]B、培養特徵:在PDA培養基上培養7天左右即可於中央部位形成鮮黃色粘液狀分生孢子團。以液體馬鈴薯培養基在搖床上培養7天，其菌絲體呈直徑為0.1、.5cm形狀不規則的小顆粒，培養液大紅色。在木塊上接種培養期間也形成大紅色菌落及鮮黃色粘液狀分生孢子團。
[0066]C、菌株的穩定性:該菌生長溫度範圍在3~35°C，適宜生長溫度為20~30°C，生長PH值在5.5~7.5，最適宜PH值為6.5~7.2。
[0067]D、5.8S rDNA序列分析:對該菌株進行5.8S rDNA序列測定，以菌株J12WU 的總 DNA 為模板，在弓丨物 ITSl (5，-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3』)和 ITS4(5，-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3』 )的引導下PCR擴增該菌株的5.8S rDNA序列，PCR反應體系為:2iUDNA 模版、1.5iil 引物 ITSU1.5 ill 引物 ITS4、Taqmix22 yl、去離子水 20u I,共 50ul。PCR 反應程序:a、94°C 4min ;b、94°C lmin，50°C 45s，72°C lmin，35 個循環；c、72°C IOmin。
[0068]將PCR反應產物送到生物公司測序得ITS序列，經復檢，在美國國家生物技術信息中心(NCBI)中比對，比對結果表明，菌株J12WU與叢赤殼屬真菌(Afedria rigidiuscula、的5.8S rDNA序列的相似性達到了 99%。通過序列比對和形態特徵將菌株J12WU鑑定為叢赤殼屬真菌(Afectria rigidiuscula)0本發明所述的菌株J12WU其5.8S rDNA序列如序列表所示。
[0069](2)叢赤殼屬真菌(Afectria rigit/i) Jl2WU 的保藏。
[0070]通過上述鑑定結果，確認菌株J12WU為叢赤殼屬真菌(Afectria rigidiuscula')的一個株系，編號命名為J12WU，於2012年4月6日保藏於中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為:北京市朝陽區北辰西路I號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100080)，其保藏編號為CGMCC No:5963。
[0071]實施例2
-由叢赤殼屬真菌{Nectria rigidiuscula ) J12WU製備菌紋木。
[0072](1)菌紋木製備。
[0073]首先，將叢赤殼屬真菌iNectria rigidiuscula)J12WU接種到PDA液態培養基上，在26°C ±2°C下黑暗搖床培養9天，形成紅色的菌絲體及其菌絲體孢子懸浮液。
[0074]PDA液態培養基成分以g/L計為:馬鈴薯200、葡萄糖15、pH6.5~7.0。
[0075]然後，將待接種的西南榿木原木鋸成2cmX2cmX 2cm的方形木塊(共計12塊)，分別裝在底面直徑6cm高Ilcm的培養瓶中。接著，將蛭石倒入培養瓶中至覆蓋木塊，加少量水使木塊及蛭石溼潤，蓋上瓶蓋，置於高壓蒸汽式滅菌器中，在121°C滅菌40分鐘。
[0076]夾取木塊放入菌懸液中沾上菌絲或孢子後，放入一併經過消毒的蛭石中，並將成團的菌絲體夾取置於木塊表面，所夾菌絲體積與木塊體積的比值約為0.3:1。在26°C ±2°C下黑暗培養，I周后取出其中6塊木塊，4周後取出剩餘6塊木塊。最後，將木塊刮去表面的菌絲，洗淨後乾燥至含水率10%，得菌紋木。
[0077](2)結果觀察。
[0078]分別將接種I周及4周 的木塊用BenQ Scanner 5560掃描儀在2400解析度下掃描後劈開木塊觀察。
[0079]侵染深度:在接種的第I周內，木塊表面即出現花紋，到第I周結束時，深入木塊超過0.07cm。在接種到第4周結束時，深入木塊超過0.09cm。
[0080]花紋的顏色和類型:到第I周結束時，木塊表面形成玫瑰紅色的無規則、不均勻的團塊狀、線狀染色；到第4周結束時，木塊表面形成面積更大顏色更深的玫瑰紅色的連續的無規則、不均勻的團狀組合成似抽象花紋狀的花邊裝飾的染色。
[0081]實施例3
-由叢赤殼屬真菌{Nectria rigidiuscula ) J12WU製備菌紋木。
[0082](I)菌紋木製備。
[0083]首先，將叢赤殼屬真菌iNectria rigidiuscula)J12WU接種到PDA液態培養基上，在28±2°C下黑暗搖床培養7天，形成紅色的菌絲體及其菌絲體孢子懸浮液。
[0084]PDA液態培養基成分以g/L計為:馬鈴薯160、葡萄糖20、pH7.0^7.5。
[0085]然後，將待接種的西南榿木原木鋸成2cmX 2cmX 3cm的方形木塊(共計40塊，按照GB1931-1991《木材含水率測定方法》烘至絕幹,用精確到0.001的電子天秤稱每一木塊的絕幹質量)，分別裝在底面直徑6cm高Ilcm的培養瓶中。接著，將蛭石倒入培養瓶中至覆蓋木塊，加少量水使木塊及蛭石溼潤，蓋上瓶蓋，置於高壓蒸汽式滅菌器中，在121°C滅菌40分鐘。
[0086]夾取木塊放入菌懸液中沾上菌絲或孢子後，放入一併經過消毒的蛭石中，並將成團的菌絲體夾取置於木塊表面，所夾菌絲體積與木塊體積的比值約為0.5:1。在25°C ±2°C下黑暗培養4周。最後，將木塊刮去表面的菌絲，洗淨後乾燥至含水率8%，得菌紋木。
[0087](2)結果觀察。
[0088]侵染深度:取其中10塊劈開觀察侵染深度。木塊表面遍布花紋，花紋深入木塊超過 0.1cm。
[0089]花紋的顏色和類型:到第4周結束時，木塊表面形成玫瑰紅色的不均勻的團狀染色，團塊邊緣呈曲線，組合成無規則的連片的花紋狀染色。
[0090]實施例4
-由叢赤殼屬真菌{Nectria rigidiuscula ) J12WU製備菌紋木。
[0091](I)菌紋木製備。
[0092]首先，將叢赤殼屬真菌iNectria rigidiuscula)J12WU接種到PDA液態培養基上，在24°C ±2°C下黑暗搖床培養15天，形成紅色的菌絲體及其菌絲體孢子懸浮液。
[0093]PDA液態培養基成分以g/L計為:馬鈴薯240、葡萄糖10、pH6.5~7.0。[0094]然後，將待接種的西南榿木原木鋸成7CmX5CmX5Cm的方形木塊(共計40塊)，分別裝在底面直徑IOcm高12cm的培養瓶中。接著，將蛭石倒入培養瓶中至覆蓋木塊，加少量水使木塊及蛭石溼潤，蓋上瓶蓋，置於高壓蒸汽式滅菌器中，在121°C滅菌60分鐘。
[0095]夾取木塊放入菌懸液中沾上菌絲或孢子後，放入一併經過消毒的蛭石中，並將成團的菌絲體夾取置於木塊表面，所夾菌絲體積與木塊體積的比值約為0.1:1。在28°C ±2°C下黑暗培養4周。最後，將木塊刮去表面的菌絲，洗淨後乾燥至含水率9%，得菌紋木。
[0096](2)結果觀察。
[0097]侵染深度:取其中10塊木塊劈開觀察侵染深度。木塊表面遍布花紋，花紋深入木塊超過0.09cm。
[0098]花紋的顏色和類型:到第4周結束時，木塊表面形成玫瑰紅色的不均勻無規則的染色，組合成各種抽象花紋狀的圖案。
[0099]實施例5
—菌紋木表面花紋面積百分率。
[0100]實驗材料:接種後的實施例2中的菌紋木，接種時間分別為I周和4周。
[0101]實驗方法:分別將接種後的實施例2中的接種時間分別為I周和4周的菌紋木的花紋面，用BenQ Scanner 5560掃描儀在2400解析度下掃描後，所得圖片以Scion ImageSoftware軟體進行統計分析。
[0102]實驗結果:接種I周和4周後菌紋木表面帶線及染色花紋面積百分率分別為63.17% 和 81.02%。
[0103]實施例6
——菌紋木的質量損失率。
[0104]實驗材料:實施例3中的接種4周後的菌紋木。
[0105]實驗方法:按照GB1931-1991《木材含水率測定方法》將實施例3中的接種4周後的菌紋木(未劈開的30塊)烘至絕幹，用精確到0.001的電子天秤稱木塊質量，得到菌紋木木塊的絕幹質量。按下式計算菌紋木的質量損失率。
[0106]質量損失率=(接種前木塊絕幹質量-菌紋木木塊絕幹質量)接種前木塊絕幹質量X 100%。
[0107]以30塊木塊的質量損失率的平均值為菌紋木平均質量損失率。
[0108]實驗結果:接種4周後菌紋木的平均質量損失率為2.01%。
[0109]實施例7
——菌紋木的表面硬度損失率。
[0110]實驗材料:接種後的實施例4中的菌紋木與同樹種健康材。
[0111]實驗方法:按照GB/T 1941-2009《木材硬度試驗方法》對未處理的西南榿木健康材及實施例4所得的菌紋木(未劈開的30塊)進行表面硬度測試。按下式計算菌紋木的平均表面硬度損失率。
[0112]平均表面硬度損失率=(未處理健康材表面硬度平均值-菌紋木表面硬度平均值)+未處理健康材表面硬度平均值X100%。
[0113]實驗結果:接種4周後菌紋木的平均表面硬度損失率為5.24%。
[0114]實施例8——菌紋木的順紋抗壓強度損失率。
[0115]實驗材料:實施例6中的菌紋木和同樹種健康材。
[0116]實驗方法:將實施例6中的菌紋木(共計30塊)和未處理的西南榿木健康材按照GB1931-1991《木材含水率測定方法》將木塊烘至絕幹。然後參照GB 1935-2009-T《木材順紋抗壓強度試驗方法》，測定木塊的順紋抗壓強度。按下式計算菌紋木的平均順紋抗壓強度損失率。
[0117]平均順紋抗壓強度損失率=(未處理健康材順紋抗壓強度平均值-菌紋木順紋抗壓強度平均值)+未處理健康材順紋抗壓強度平均值X100%。
[0118]實驗結果:接種4周後菌紋木的平均順紋抗壓強度損失率為6.39%。
[0119]實施例9
——菌紋木微觀結構觀察。
[0120]實驗材料:實施例2中接種4周的菌紋木。
[0121]實驗方法:將接種後的實施例2中的菌紋木鋸成0.6cmX0.6cmX0.6cm的立方體，立方體至少一個表面含有花紋，置於恆溫水浴鍋中在80°C ±5°C水煮至木塊下沉。以切片機削平含花紋的表面，在真空裝置中對含花紋的表面及其垂直面實施噴金，置於掃描電鏡下觀察拍照。
[0122]實驗結果:菌絲體分布於菌紋木形成染色花紋的區域，染色花紋附近有少量菌絲，距花紋0.2cm外無菌絲分布；從 菌絲體分布情況來看，菌絲體主要位於西南榿木的細胞腔中，通過細胞壁上的紋孔出入細胞腔，而西南榿木的各類細胞壁，尤其是木纖維的細胞壁結構完整，與無菌絲體分布區域未有明顯差別。由於西南榿木的細胞壁結構完整無損，其木材的物理力學性質受到的影響極其輕微，與健康材幾無差別。
【權利要求】
1.一株叢赤殼屬真菌菌株(AfectriaJ12WU,已於2012年4月6日保藏於中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為:北京市朝陽區北辰西路I號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100080)，其保藏編號為CGMCC No:5963。
2.如權利要求1所述的菌株，其特徵在於，所述菌株能夠在木質基材料表面形成枚紅色、大紅色、暗紅色、棕紅色的帶狀、塊狀、團狀、點狀花紋中任一種或幾種。
3.如權利要求1或2任一項所述的菌株，其特徵在於，所述菌株在接種到木質基材料後的第I周即能在木質基材料的表面產生彩色的染色花紋。
4.如權利要求1所述的菌株，其特徵在於，所述菌株是通過下述具體步驟獲得的: A、標本採集:在腐朽樹樁、倒木或枯枝中，採集具有彩色的線狀、帶狀、塊狀、團狀或點狀花紋中的任一種或幾種的木質基材料組織，連帶其上面生長的真菌子實體，保存備用； B、菌株分離與篩選:將採集的木質基材料組織，連帶其上面生長的真菌子實體破碎、消毒後，置於富集培養基中在22~30°C黑暗中靜置培養疒15天至長出菌絲；富集培養基為PDA培養基、MA培養基、OA培養基中的任一種； 然後將向四周周圍發散狀、疏鬆的絲狀、大紅色、邊緣平整、甚至形成粘液狀鮮黃色分生孢子的菌落挑取，接種至增殖培養基中在22~3(TC黑暗中靜置培養5~12天至菌落長出；增殖培養基為PDA培養基、MA培養基、OA培養基中的任一種； C、菌種保存:挑取增殖培養基中生長旺盛者接種至保存培養基中，在22~3(TC黑暗中靜置培養5~12天，然後於4°C冰箱中凍存；保存培養基為PDA培養基、MA培養基、OA培養基中的任一種。`
5.如權利要求4所述的菌株，其特徵在於，步驟A所述的標本採集是在溫暖潮溼的闊葉林、針葉林或針闊葉混交林中進行。
6.如權利要求4或5任一項所述的菌株，其特徵在於，步驟A所述的標本採集優選在優選在楊柳科楊屬、樺木科棺屬、樺木屬、松科松屬、薔薇科樓桃屬、木棉科輕木屬或殼鬥科櫟木屬樹種的腐朽樹樁、倒木或枯枝中，採集具有彩色的線狀、帶狀、塊狀、團狀或點狀花紋中的任一種或幾種的木質基材料組織，連帶其上面生長的真菌子實體，保存備用。
7.一種用權利要求1所述的叢赤殼屬真菌(Afectria rigit/iyscy/a) J12WU製備菌紋木的方法，包括菌株活化與擴繁、接菌培養工序，其特徵在於，包括以下具體步驟: A、菌株活化與擴繁:將叢赤殼屬真菌菌株(Afectriarigidiuscula ) J12WU接種到活化及擴繁培養基上，在22~3(TC下培養7~15天，得活化與擴繁菌株；活化及擴繁培養基為PDA培養基、PDA液態培養基、MA培養基、OA培養基中的任一種； B、接菌培養:將待接種的木質基材料滅菌後，與活化及擴繁菌株充分接觸，在22~3(TC下培養I周或以上，即得菌紋木。
8.如權利要求7所述的製備方法，其特徵在於，還可以包括後處理步驟，將接菌培養後得到的菌紋木刮去表面的菌絲，洗淨後乾燥至含水率8~10%。
9.如權利要求7所述的製備方法，其特徵在於，步驟B所述的將待接種的木質基材料與活化菌株充分接觸，在固體接菌時是將含有菌落的培養基切成與待接種木質基材料大小、形狀相近的菌塊，將至少一塊菌塊貼在木質基材料表面。
10.如權利要求7所述的製備方法，其特徵在於，步驟B所述的將待接種的木質基材料與活化菌株充分接觸，在液體接菌時，是將待接種的木質基材料浸入含有菌落的培養液中，且/或將成團的菌絲體夾 取置於木質基材料的表面或附近。
【文檔編號】C12N1/14GK103525707SQ201310428219
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年9月20日 優先權日:2013年4月19日
【發明者】伍建榕, 何海珊, 邱堅, 羅蓓, 伍建玲, 甘昌濤 申請人:西南林業大學