一種海洋紅酵母培養物的發酵方法
2023-06-12 22:29:06
專利名稱：一種海洋紅酵母培養物的發酵方法
技術領域：
本發明涉及的是一種微生物培養物的發酵方法，具體地說是一種海洋紅酵母培養 物的生產方法。
背景技術：
海洋紅酵母(Phodotorula benthica)是海洋中存在的一類抗逆性很強的天然真 菌。菌體圓形或卵圓形，菌落色紅，亮麗。富含蛋白質、胺基酸、維生素，不飽和脂肪酸、肝糖、 類胡蘿蔔素、蝦青素和各種未知營養因子等生物活性物質。海洋紅酵母抗氧化能力極強，被 譽為「超級維生素E」，並具有增食、益生腸道和抗病功效，多用於水產養殖業。如何降低海 洋紅酵母的生產成本，使其更廣泛應用於畜禽水產動物的養殖，具有重要的實踐意義。申請號為200610047848的中國專利申請文件中公開了一種海參用海洋膠紅酵 母的生產方法，目的是獲取活的一種在海參上應用效果好的海洋紅酵母菌。申請號為 200810238710的中國專利申請文件中公開了一種海洋紅酵母發酵飼料的製備方法，是一種 海洋紅酵母和乳酸菌混合發酵的製備方法。對固體發酵和固體發酵階段對海洋紅酵母培養 物的破壁過程等生產過程沒見報導。
發明內容
本發明的目的在於提供一種充分產海洋紅酵母代謝產物、酵母細胞壁和酵母內容 物的發酵方法。本發明的目的是這樣實現的包括如下步驟(1)將海洋紅酵母菌菌種分離、篩選與純化；(2)純化後的海洋紅酵母菌進行液體發酵擴繁與轉化；(3)經液體發酵擴繁與轉化海洋紅酵母菌進行固體有氧發酵以及固體厭氧發酵海 洋紅酵母破壁；(4)低溫乾燥。本發明還可以包括1、所述液體發酵擴繁與轉化，是在重量百分比為葡萄糖1 3%、蛋白腖0.5 1.2%、酵母膏0.2 0.5%、硫酸銨0.5 1.0%、磷酸氫二鉀0. 1 0.3%、磷酸二氫鉀 0. 1 0. 3%、硫酸鎂0. 1 0. 5%、餘量為海水或半海水構成的液體發酵培養基中，發酵轉 化72 100小時。2、所述固體發酵培養基是由葡萄糖、蔗糖、油脂、豆粕、棉粕、菜粕、花生粕、胡麻 粕、甜菜粕、麥麩、稻糠、次粉、木薯粉、大豆皮、玉米酒精糟、玉米或大米一種或者是兩種或 兩種以上的混合物組成的固體發酵培養基；液體發酵擴繁與轉化後的轉化液與固體發酵培 養基的重量比為比例為1 2 1 3。3、所述固體厭氧發酵是在不超45°C的溫度下發酵36小時；所述固體厭氧發酵海洋紅酵母破壁是在50 60°C溫度下，發酵12 24小時。本發明方法所得產品，具有獨特的芳香氣味。經破壁後紅酵母細胞壁、內容物等益 生成分，可發揮活菌所不具備或體現不充分的增食、抗氧化、吸附毒素、腸道益生等功效，按 0. 01% 20%添加比例生產豬、牛、羊、禽類、水產動物、毛皮動物飼料。本發明的產品與方法相對於現有技術的優點(1)本發明吸取有關微生物製劑生產方法的優點，採用已知的海洋紅酵母為菌種， 以蔗糖、豆粕(餅)、棉粕(餅)、菜粕(餅)、花生粕(餅)、胡麻粕(餅)等為原料，來源廣 泛，方法過程簡單，產品價格低廉。(2)本發明採用微生物液體-固體兩相發酵新方法，通過大劑量接種，能夠解決固 體發酵過程中，發酵周期長，容易汙染等問題，生產的產品質量穩定。(3)本發明採用微生物液體_固體兩相發酵新方法，還通過破壁產生大量酵母培 養物成分，具有益生飼料的特點。(4)本發明生產出的海洋紅酵母培養物用於畜禽水產毛皮動物飼料，可以提高動 物抗應激能力，提高增重速度，改善母畜繁殖性能，提升肉、蛋、奶、水產品品質。(5)本發明所有培養菌液均混入固體料，繼續發酵製成成品，無廢液廢渣排放，完 全符合環保要求。(6)本產品低溫乾燥，極大保護了生物學效價，具有發酵香味，從而增加了飼料的 適口性。
具體實施例方式下面舉例對本發明做更詳細地描述實施例11、菌種本發明所述酵母為海洋紅酵母。菌種分離、篩選與純化步驟中，可在海水 或半海水特定的紅酵母培養基中，表現出脂溶性豔麗紅色色素的特定特徵，以此確定所用 菌株。2、培養基葡萄糖3.0%、蛋白腖1.0%、酵母膏1.0%、硫酸銨0.5、磷酸氫二鉀 0. 1%、磷酸二氫鉀0. 1%、硫酸鎂0. 1%、瓊脂2%、餘量為海水或半海水。pH 6.8，培養4811， 確認菌種能在上述培養液中保持生長良好。3、斜面培養基與培養條件葡萄糖3.0%、蛋白腖1.0%、酵母膏1.0%、磷酸氫二鉀0. 1%、磷酸二氫鉀0. 1%, 硫酸鎂0. 1%、瓊脂2. 0%、餘量為海水或半海水，PH 6. 8、115°C滅菌18分鐘。將試管菌種 擴繁至培養皿，放入30°C恆溫培養箱中培養36h。4、搖瓶種子培養基與培養條件葡萄糖3.0%、蛋白腖1.0%、酵母膏1.0%、硫酸銨0.5%、磷酸氫二鉀0. 1%、磷酸 二氫鉀0. 1%、硫酸鎂0. 1%、餘量為海水或半海水、起始pH 6.8、115°C滅菌18分鐘。將培 養皿菌種接入搖瓶，放入30°C恆溫搖床中，200r/min振蕩培養36h。5、一級種子罐擴繁培養基與培養條件培養基豆粕1.0%、玉米0.5%、蔗糖3.0%、蛋白腖1.0%、酵母膏1.0%、硫酸銨 0. 5 %、磷酸二氫鉀0. 1 %、硫酸銨0.2%、氯化鈉0. 05 %、硫酸鎂0.05%、消泡劑0. 05 %。起
4始pH 6. 8、121°C滅菌30分鐘。搖瓶到種子罐接種量按10%接種，種子罐培養時間為24h。6、二級種子罐擴繁轉化培養基與培養條件二級種子罐擴繁培養基與上述培養基配方相同，培養條件種的培養時間為72h。7、固體發酵將二級種子罐擴繁轉化培養液與固體發酵料按照1 2比例混合；固體培養基於 含有葡萄糖或蔗糖；含有豆粕(餅)、棉粕(餅)、菜粕(餅)、玉米、麥麩中的兩種或多種混 合物；調整固體含水量達到45%開始發酵。對發酵物料溫度進行監控，使溫度不超45°C;有 氧發酵36h後進入厭氧發酵，溫度達到50°C以上，發酵6 10小時破壁，之後在低於80°C 條件下乾燥。乾燥好的發酵料具有發酵香味，呈微酸性。實施例2 將本發明生產出的海洋紅酵母培養物按每噸母豬全價飼料添加1kg，將飼料餵給 哺乳母豬，分組測定採食量，結果使用本發明產品組，母豬日採食量提高200克以上，仔豬 斷奶窩重日提高130克以上。實施例3將本發明生產出的海洋紅酵母培養物按每噸乳豬全價飼料添加1kg，將飼料餵給 斷奶10天後的乳豬，分組測定採食量，結果使用本發明產品組，乳豬日採食量比對照組提 高30克以上。本發明產品測定結果按國標方法進行測定，類胡蘿蔔素含量> 20yg/kg;酵母細胞壁多糖> IOOmg/ kg，粗蛋白含量10% 50% ；黃麴黴毒素< 30yg/kg。
權利要求
一種海洋紅酵母培養物的發酵方法，其特徵是包括如下步驟(1)將海洋紅酵母菌菌種分離、篩選與純化；(2)純化後的海洋紅酵母菌進行液體發酵擴繁與轉化；(3)經液體發酵擴繁與轉化海洋紅酵母菌進行固體有氧發酵以及固體厭氧發酵海洋紅酵母破壁；(4)低溫乾燥。
2.根據權利要求1所述的海洋紅酵母培養物的發酵方法，其特徵是所述液體發酵擴 繁與轉化，是在重量百分比為葡萄糖1 3%、蛋白腖0. 5 1. 2%、酵母膏0. 2 0. 5%, 硫酸銨0.5 1.0%、磷酸氫二鉀0. 1 0. 3%、磷酸二氫鉀0. 1 0.3%、硫酸鎂0. 1 0. 5%、餘量為海水或半海水構成的液體發酵培養基中，發酵轉化72 100小時。
3.根據權利要求1或2所述的海洋紅酵母培養物的發酵方法，其特徵是所述固體發 酵培養基是由葡萄糖、蔗糖、油脂、豆粕、棉粕、菜粕、花生粕、胡麻粕、甜菜粕、麥麩、稻糠、次 粉、木薯粉、大豆皮、玉米酒精糟、玉米或大米一種或者是兩種或兩種以上的混合物組成的 固體發酵培養基；液體發酵擴繁與轉化後的轉化液與固體發酵培養基的重量比為比例為 1 2 1 3。
4.根據權利要求1或2所述的海洋紅酵母培養物的發酵方法，其特徵是所述固體厭 氧發酵是在不超45°C的溫度下發酵36小時；所述固體厭氧發酵海洋紅酵母破壁是在50 60°C溫度下，發酵12 24小時。
5.根據權利要求3所述的海洋紅酵母培養物的發酵方法，其特徵是所述固體厭氧發 酵是在不超45°C的溫度下發酵36小時；所述固體厭氧發酵海洋紅酵母破壁是在50 60°C 溫度下，發酵12 24小時。
全文摘要
本發明提供的是一種海洋紅酵母培養物的發酵方法。包括如下步驟(1)將海洋紅酵母菌菌種分離、篩選與純化；(2)純化後的海洋紅酵母菌進行液體發酵擴繁與轉化；(3)經液體發酵擴繁與轉化海洋紅酵母菌進行固體有氧發酵以及固體厭氧發酵海洋紅酵母破壁；(4)低溫乾燥。本發明具有生產工藝簡單，周期短，成本低，產品質量穩定等特點。本發明的方法得到的產品具有很好的增食、腸道益生、抗氧化作用，可作為飼料原料或飼料添加劑用於畜禽水產毛皮動物的飼養。
文檔編號C12N1/16GK101914460SQ201010226038
公開日2010年12月15日 申請日期2010年7月13日 優先權日2010年7月13日
發明者劉娜, 張偉強, 潘軍, 薛德林 申請人:廣州市博善生物飼料有限公司