一種兩面針的組織培養方法
2023-06-03 02:53:41 1
一種兩面針的組織培養方法
【專利摘要】本發明涉及一種兩面針的組織培養方法，屬於作物種植【技術領域】；包括原料預處理、接種、培養、移栽、培育管理、苗木出圃六個步驟，于晴天選取生長健壯、無病蟲害的優良植株，用自來水衝洗乾淨後在高錳酸鉀溶液中浸泡6～8min，再用無菌水衝洗2～3次，在無菌條件下切成0.5～0.8cm長的帶芽小段，在無菌條件下接種在培養基上，在30～35℃條件下培養4～5天；待培養完全後，將小苗在自然環境下進行煉苗3～5天，使其適應自然條件後進行移栽到基質上，在溫度為25～35℃，溼度為50～70%條件下進行培育；移栽後進行澆水，保持土壤溼潤，每周施肥1次，4～5個月後，待苗高長到20cm以上即可出圃種植；採用本方法種植的兩面針成活率最高，達95%以上；培養方法簡單，培育時間短，有利於規模化生產。
【專利說明】一種兩面針的組織培養方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種植物的組織培養方法，具體涉及一種具有多種功效的兩面針的組織培養方法，屬於作物栽培【技術領域】。
【背景技術】
[0002]兩面針Zanthoxylum nitidum (Roxb.) DC.曾以蔓椒之名始載於《神農本草經》，列為下品，清朝趙其光《本草求原》一書將其定名為入地金牛。經本草考證為芸香科(Rumceae)花椒屬(Zanthoxylum)木質藤本植物乾燥根、莖，自1977年始被收入《中國藥典》。兩面針在我國藥用歷史悠久，用途廣泛，且用量大，為南方地區常用中藥材之一，主要分布於廣西、福建、湖南、雲南、臺灣等地。
[0003]兩面針具有很好的功效，其根和莖皮具有驅風化溼、消腫止痛、行氣之功效，主治跌打損傷、風溼痺痛、胃痛、牙痛，毒蛇咬傷；外用治湯火資傷。化學成分及藥理學研究發現兩面針莖皮、根和根皮中含有生物鹼類、木脂素類、黃酮甘類、留醇類、無機元素等成分，具有解痙、鎮痛、抗炎、抗菌、抗癌等藥理活性。目前，隨著研究的深入，兩面針所具有的多種藥理活性，已被逐漸應用到臨床，市售多種中成藥和日用品均含有兩面針，如風痧衝劑、金雞系列、婦炎淨膠囊、正骨水、跌打萬花油、骨刺片、兩面針鎮國痛片以及兩面針中藥牙膏等。據調查，2009年兩面針需求量已達到約2400噸，強大的市場需求對兩面針野生資源造成了巨大壓力，致使兩面針野生資源逐年減少。
[0004]隨著社會經濟的發展，兩面針應用於各個領域越來越廣泛，需求量也越來越大，人工種植兩面針的數量目前還較少，不能滿足市場發展的需求，因此人工栽培和種植兩面針成為社會發展的必要趨勢。通過對兩面針的培育，進行人工栽培，保證了兩面針原材料的供給，穩定兩面針藥材市場，給我國兩面針製藥行業健康可持續發展提供堅強的後盾。同時減少了人為的泛濫採挖，對兩面針的自然生態保護起到十分重要的作用。
[0005]兩面針苗木培育方法有種子繁殖、扦插繁殖和組織培養3種方法，文件CN101099433B公開了一種植物兩面針的繁殖方法，利用扦插床，鋪上沙壤，將已木質化的插條休整後直接扦插，半年到一年後進行移栽；文件CN102986437A公開了一種兩面針的人工栽培方法，採用種子育苗或者營養杯育苗或扦插方式進行育苗，產量高，產品質量穩定；而對於兩面針的組織培養方法研究的較少，本發明針對兩面針的組織培養方法進行深入的研究，提供一種兩面針人工栽培的新方法，成活率高，長勢好。
【發明內容】
[0006]本發明的目的是提供一種兩面針的組織培養方法，採用本方法培育的兩面針成活率高，生長快。
[0007]為實現上述發明的目的，本發明採取的技術方案如下:
一種兩面針的組織培養方法，包括如下步驟:·(O原料預處理:于晴天選取生長健壯、無病蟲害的優良植株，用自來水衝洗乾淨後在高錳酸鉀溶液中浸泡6~8min，再用無菌水衝洗2~3次，在無菌條件下切成0.5^0.8cm長的帶芽小段；
(2)接種:將上述芽段在無菌條件下接種在培養基上；
(3)培養:將接種好的芽段在3(T35°C條件下培養4飛天； (4)移栽:待培養後，將小苗在自然環境下進行煉苗3飛天，使其適應自然條件後進行移栽到基質上，進行培育；
(5)培育管理:移栽後進行澆水，保持土壤溼潤，每周施肥I次；
(6)苗木出圃:移栽4飛個月後，待苗高長到20cm以上即可出圃種植。
[0008]步驟(2)所述的培養基為MS+6-BA lmg/L+IBA 0.lmg/L +NAA 0.15mg/L + 瓊月旨 80mg/L + 鹿糖 20mg/L。
[0009]步驟(4)所述的基質是指黃心土:細沙:塘泥:過磷酸鈣按重量比70:25:3:2的比例混合均勻得到。
[0010]步驟(4)所述的培養條件為溫度為25~35°C，溼度為50~70%。
[0011]步驟(5)所述的施肥是指施用添加其重量份5%鈣鎂磷的農家肥，施肥量f2kg/m3。
[0012]與現有技術相比，本發明具有以下有益效果:
(1)成活率高，生長快:採用本發明的種植方法，兩面針培養成活率最高，達90%以上，移栽後成活率達到95%以上。
[0013](2)方法簡單，培育時間短，有利於規模化生產。
【具體實施方式】
[0014]下面通過實例對本發明做進一步詳細說明，這些實例僅用來說明本發明，並不限制本發明的範圍。
[0015]實施例1
一種兩面針的組織培養方法，包括如下步驟:
(O原料預處理:于晴天選取生長健壯、無病蟲害的優良植株，用自來水衝洗乾淨後在高錳酸鉀溶液中浸泡6min，再用無菌水衝洗2次，在無菌條件下切成0.5cm長的帶芽小段；
(2)接種:將上述芽段在無菌條件下接種在培養基上，培養基配方為MS+6-BAImg/L+1 BA 0.lmg/L +NAA 0.15mg/L + 瓊脂 80mg/L + 鹿糖 20mg/L ；
(3)培養:將接種好的芽段在30°C條件下培養5天；
(4)移栽:待培養後，將小苗在自然環境下進行煉苗3天，使其適應自然條件後進行移栽到基質上在溫度為25°C，溼度為70%條件下進行培育，基質為黃心土:細沙:塘泥:過磷酸鈣按重量比70:25:3:2的比例混合均勻得到；
(5)培育管理:移栽後進行澆水，保持土壤溼潤，每周施肥I次，施用含5%重量份鈣鎂磷的農家肥，施肥量lkg/m3;
(6)苗木出圃:移栽4個月後，待苗高長到20cm以上即可出圃種植。
[0016]實施例2
一種兩面針的組織培養方法，包括如下步驟:
(O原料預處理:于晴天選取生長健壯、無病蟲害的優良植株，用自來水衝洗乾淨後在高錳酸鉀溶液中浸泡8min，再用無菌水衝洗3次，在無菌條件下切成0.8cm長的帶芽小段；
(2)接種:將上述芽段在無菌條件下接種在培養基上，培養基配方為MS+6-BAImg/L+1 BA 0.lmg/L +NAA 0.15mg/L + 瓊脂 80mg/L + 鹿糖 20mg/L ；
(3)培養:將接種好的芽段在35°C條件下培養4天；
(4)移栽:待培養後，將小苗在自然環境下進行煉苗5天，使其適應自然條件後進行移栽到基質上在溫度為35°C，溼度為50%條件下進行培育，基質為黃心土:細沙:塘泥:過磷酸鈣按重量比70:25:3:2的比例混合均勻得到；
(5)培育管理:移栽後進行澆水，保持土壤溼潤，每周施肥I次，施用含5%重量份鈣鎂磷的農家肥，施肥量2kg/m3;
(6)苗木出圃:移栽5個月後，待苗高長到20cm以上即可出圃種植。
[0017]實施例3
一種兩面針的組織培養方法，包括如下步驟:
(O原料預處理:于晴天選取生長健壯、無病蟲害的優良植株，用自來水衝洗乾淨後在高錳酸鉀溶液中浸泡7min，再用無菌水衝洗3次，在無菌條件下切成0.6cm長的帶芽小段；
(2)接種:將上述芽段 在無菌條件下接種在培養基上，培養基配方為MS+6-BAImg/L+1 BA 0.lmg/L +NAA 0.15mg/L + 瓊脂 80mg/L + 鹿糖 20mg/L ；
(3)培養:將接種好的芽段在33°C條件下培養4天；
(4)移栽:待培養後，將小苗在自然環境下進行煉苗4天，使其適應自然條件後進行移栽到基質上在溫度為28°C，溼度為60%條件下進行培育，基質為黃心土:細沙:塘泥:過磷酸鈣按重量比70:25:3:2的比例混合均勻得到；
(5)培育管理:移栽後進行澆水，保持土壤溼潤，每周施肥I次，施用含5%重量份鈣鎂磷的農家肥，施肥量1.5kg/m3;
(6)苗木出圃:移栽5個月後，待苗高長到20cm以上即可出圃種植。
[0018]實施例4
一種兩面針的組織培養方法，包括如下步驟:
(O原料預處理:于晴天選取生長健壯、無病蟲害的優良植株，用自來水衝洗乾淨後在高錳酸鉀溶液中浸泡8min，再用無菌水衝洗3次，在無菌條件下切成0.6cm長的帶芽小段；
(2)接種:將上述芽段在無菌條件下接種在培養基上，培養基配方為MS+6-BAImg/L+1 BA 0.lmg/L +NAA 0.15mg/L + 瓊脂 80mg/L + 鹿糖 20mg/L ；
(3)培養:將接種好的芽段在32°C條件下培養4天；
(4)移栽:待培養後，將小苗在自然環境下進行煉苗5天，使其適應自然條件後進行移栽到基質上在溫度為30°C，溼度為70%條件下進行培育，基質為黃心土:細沙:塘泥:過磷酸鈣按重量比70:25:3:2的比例混合均勻得到；
(5)培育管理:移栽後進行澆水，保持土壤溼潤，每周施肥I次，施用含5%重量份鈣鎂磷的農家肥，施肥量2kg/m3;
(6)苗木出圃:移栽5個月後，待苗高長到20cm以上即可出圃種植。
[0019]實施例5
一種兩面針的組織培養方法，包括如下步驟:
(O原料預處理:于晴天選取生長健壯、無病蟲害的優良植株，用自來水衝洗乾淨後在高錳酸鉀溶液中浸泡8min，再用無菌水衝洗2次，在無菌條件下切成0.8cm長的帶芽小段；
(2)接種:將上述芽段在無菌條件下接種在培養基上，培養基配方為MS+6-BAImg/L+1 BA 0.lmg/L +NAA 0.15mg/L + 瓊脂 80mg/L + 鹿糖 20mg/L ；
(3)培養:將接種好的芽段在35°C條件下培養4天；
(4)移栽:待培養後，將小苗在自然環境下進行煉苗5天，使其適應自然條件後進行移栽到基質上在溫度為29°C，溼度為66%條件下進行培育，基質為黃心土:細沙:塘泥:過磷酸鈣按重量比70:25:3:2的比例混合均勻得到；
(5)培育管理:移栽後進行澆水，保持土壤溼潤，每周施肥I次，施用含5%重量份鈣鎂磷的農家肥，施肥量1.8kg/m3; (6)苗木出圃:移栽5個月後，待苗高長到20cm以上即可出圃種植。
【權利要求】
1.一種兩面針的組織培養方法，其特徵在於:包括如下步驟: (1)原料預處理:于晴天選取生長健壯、無病蟲害的優良植株，用自來水衝洗乾淨後在高錳酸鉀溶液中浸泡6~8min，再用無菌水衝洗2~3次，在無菌條件下切成0.5^0.8cm長的帶芽小段； (2)接種:將上述芽段在無菌條件下接種在培養基上； (3)培養:將接種好的芽段在3(T35°C條件下培養4飛天； (4)移栽:待培養後，將小苗在自然環境下進行煉苗3飛天，使其適應自然條件後進行移栽到基質上，進行培育； (5)培育管理:移栽後進行澆水，保持土壤溼潤，每周施肥I次； (6)苗木出圃:移栽4飛個月後，待苗高長到20cm以上即可出圃種植。
2.根據權利要求1所述的一種兩面針的組織培養方法，其特徵在於:步驟(2)所述的培養基為 MS+6-BA lmg/L+IBA 0.lmg/L +NAA 0.15mg/L + 瓊脂 80mg/L + 鹿糖 20mg/L。
3.根據權利要求1所述的一種兩面針的組織培養方法，其特徵在於:步驟(4)所述的基質是指黃心土:細沙:塘泥:過磷酸鈣按重量比70:25:3:2的比例混合均勻得到。
4.根據權利要求1所述的一種兩面針的組織培養方法，其特徵在於:步驟(4)所述的培養條件為溫度為25~35°C，溼度為50~70%。
5.根據權利要求1所述的一種兩面針的組織培養方法，其特徵在於:步驟(5)所述的施肥是指施用添加其重量份5%鈣鎂磷的農`家肥，施肥量f 2kg/m3。
【文檔編號】A01G1/00GK103651148SQ201310747780
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年12月31日 優先權日:2013年12月31日
【發明者】鍾國義, 楊曉敏 申請人:茂名市天一農業科技發展有限公司