一種三七總皂苷提取液的脫色方法
2023-06-03 15:02:11 2
專利名稱：一種三七總皂苷提取液的脫色方法
技術領域：
本發明涉及醫藥發明領域，具體涉及一種三七總皂苷提取液的脫色方法。
背景技術：
三七，為五加科人參屬植物，是我國中醫藥寶庫中的瑰寶，著名珍貴的傳統地道藥材，與人參相似，傳統入藥部位是根塊。三七所含藥用化學成分極多，以化合物計，大的組分計有皂苷、多糖、黃酮、胺基酸、揮髮油等。現代藥理研究表明三七的活性成分三七總皂苷對人體血液系統、心血管系統、神經系統和代謝系統作用，而在三七提取過程中，未經脫色處理的三七總皂苷呈深褐色，而在大孔樹脂吸附分離的純化過程中，可以除去大部分雜質，但仍有少量色素、雜質影響產品的質量，如果直接將這種三七總皂苷製成注射劑，這些不明色素雜質甚至會對使用的患者產生無法預期的不良反應，因此必須在提取時對三七總皂苷提取液進行脫色處理。早期對三七總皂苷脫色的樹脂並沒有明確，如中國專利申請01108591.6(公開號為CN 1334267A)公開了用離子交換樹脂組成的脫色柱。隨著現代研發手段的進步及設備的更新，三七總皂苷在提取時採用的離子交換樹脂大多為弱鹼性陰離子交換樹脂、強鹼型陰離子交換樹脂、含強弱鹼功能基的大孔樹脂等， 而在三七總皂苷脫色處理中，普遍採用的方法有活性炭脫色法和離子交換樹脂法，現在常用的樹脂為D941樹脂、D900、氧化鋁樹脂或上述樹脂與活性炭結合的方法。如中國專利申請201010141578.0公開了一種酶處理提取鮮三七中三七總皂苷的方法，採用鮮三七為提取原料，經用粉碎機把鮮三七破碎成10目的鮮顆粒，加生物酶A和生物酶B然後用70%乙醇提取三次，提取液回收乙醇，濃縮液上DlOl大孔吸附樹脂吸附，先用水洗去雜質，再用乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮液通過大孔弱鹼性陰離子交換樹脂D-941柱子來脫色即可，該方法可使三七總皂苷提取率達到14%以上，提取率比其他提取方法至少高2個百分點。同時，在「三七總皂苷純化和脫色工藝研究」(發表於《海峽藥學》，2008年，第20卷第1期，公開了通過大孔弱鹼性陰離子交換樹脂D941對三七總皂苷上柱液進行脫色，脫色後總固物呈白色，總固物中人參皂苷％、Rg1純度和提高了 10%，轉移率大於95%。中國專利申請201010003434. 9提供了一種三七提取物，該提取物脫色採用D900
樹脂和藥用炭兩步脫色。中國專利申請200810233775. 8揭示了一種三七總皂苷的提純方法。在以三七為原料，提取三七總皂苷的生產工藝中使用超濾和納濾技術，用以除雜，純化三七總皂苷。即 三七一粉碎一乙醇浸提一上大孔樹脂柱一過氧化鋁柱一加適量針用活性炭，鈦棒過濾一超濾一納濾一精製濃縮一乾燥一粉碎一三七總皂苷，脫色步驟中採用了氧化鋁柱和活性炭兩步脫色。中國專利申請200610027962. 1公開了從三七中提取止血成分三七素時，用苯乙烯和二乙苯為單體聚合的離子交換樹脂(如DOOl型離子交換樹脂)柱工藝除去其中的糖分、植物色素。中國專利申請200810052216. 7公開了一種三七葉總皂苷離子交換樹脂法脫色精製工藝，其中脫色方法是將脫色原液先D-72陽離子交換樹脂柱(強酸陽離子交換樹脂)，後串聯流入陰離子交換樹脂柱(含有強弱鹼功能基的大孔型陰離子交換樹脂)上柱脫色。該發明中的陰離子交換樹脂是以氯甲基聚苯乙烯與三乙烯二胺反映得到的，三乙烯二胺化學名稱為1，4_ 二氮雜雙環-[2. 2. 2.]-辛烷(TEDA)為對稱的籠狀分子，製得的樹脂，分子結構中同時含有季銨強鹼和叔胺弱鹼功能團，具有單位重量交換量較高的特點，同時結構中含有的含孤電子對氮原子能提供形式分子間氫鍵的受體，可以在離子交換的同時具氫鍵協同效應，因此，具有特殊的吸附性能，對色素類雜質的吸附能力強，脫色性能好，再生容易。以上文獻提到，大孔弱鹼性陰離子交換樹脂D941脫色工藝處理過程是D101樹脂純化後的三七總皂苷洗脫液上D-941樹脂柱，收集過柱液後，再分別用水、不同濃度的乙醇把吸附在D-941樹脂柱裡的三七總皂苷洗脫下來。由此可見，大孔弱鹼性陰離子交換樹脂 D941不但吸附色素部分雜質，同時亦吸附了大部分的三七總皂苷，使脫色過程中要增加一個洗脫環節，造成了三七總皂苷的損失及增加生產成本。由以上可見，使用D900、氧化鋁柱、DOOl或強弱鹼功能基的大孔型陰離子交換樹脂吸附三七總皂苷中的色素，或者吸附色素不完全、或者吸附了三七總皂苷使損耗率增大。 實際上，現使用於脫色的大多離子交換樹脂在脫色過程中，或多或少均吸附了三七總皂苷， 造成三七總皂苷在脫色環節的損失。現有技術中已知強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7的用途如下發明專利申請200710050043. 0用於吸附羅漢果甙；發明專利申請200810216065. 4用於吸附甜菊糖苷；《大孔樹脂ADS-7分離純化多穗柯黃酮工藝研究》用於對多穗柯粗提物進行分離純化； 《大孔吸附樹脂純化甘草黃酮類化合物的研究》用於吸附甘草黃酮類化合物；《大孔樹脂吸附染料木素的研究》用於吸附染料木素。已公開的文獻中，強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7僅用於吸附羅漢果甙、甜菊糖苷及各種黃酮類化合物，未見報導用於三七總皂苷脫色。針對現有三七總皂苷脫色處理中存在的問題，發明人經過大量的實驗，最終確定並提出了本發明。
發明內容
本發明的目的是提供一種三七總皂苷的脫色方法。本發明提供的三七總皂苷提取液的脫色方法，是使用強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7聯合中性氧化鋁對三七提取液進行脫色處理。所述強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7，為強極性吸附樹脂，淺黃色球粒； 粒徑範圍0. 1-1. 25mm ；溼視密度0. 5-0. 9g/ml ；平均孔經10_40nm，孔隙率30-50%。具體的，本發明提供的三七總皂苷提取液的脫色方法，包括以下步驟三七提取液加壓通過藥材量5-100%的強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7 柱，控制該樹脂柱的內壓為l-20kg/cm2，流速為0. 5-15BV/h，收集流出液，流出液再加壓通過藥材量的10-150%的中性氧化鋁柱，控制氧化鋁柱的柱內壓為1-lOOkg/cm2，流速為0. 5-15BV/h，收集流出液，流出液精製，回收乙醇至無醇味，濾液濃縮至相對密度為
41.06-1. 10，乾燥，即得脫色後的三七總皂苷提取液。本發明還提供了含上述脫色方法的三七提取方法，該方法包括以下步驟1)取三七粉碎成粗粉，用2-20倍50-95%乙醇加熱提取2_5次，每次1_5小時，合併提取液，濾過，濾液回收乙醇並減壓濃縮，製成每Iml含生藥約0. 1 Ig ；2)按濃縮液體積加0. 5-1. 5%氯化鈉，攪勻，靜置12_36小時，濾過；3)濾液經脫脂處理後，以流速為0. 5-15BV/h過大孔吸附樹脂柱，用水洗滌，水洗液棄去，繼用40-80%不同濃度乙醇液洗脫，收集洗脫液；4)洗脫液加壓通過藥材量5-100%的強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7 柱，柱內壓為l-20kg/cm2，流速為0. 5-15BV/h，收集流出液；5)流出液加壓通過藥材量的10% 150%的中性氧化鋁柱(柱內壓1-lOOkg/cm2， 流速為0. 5-15BV/h)，收集流出液；6)流出液精製，回收乙醇至無醇味，濾液濃縮至相對密度為1.06-1. 10，乾燥，即得脫色後的三七總皂苷。所述三七為為三七主根和/或三七蘆頭。所述步驟3)中所用的大孔吸附樹脂的類型為D101、D201、AB_8或NKA-9等。本發明提供的三七總皂苷脫色方法具有以下優點1、強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7帶有不同功能基的極性吸附樹脂，其吸附機理可能包含範德華力、靜電力、氫鍵力等多種吸附力，都屬物理吸附的範疇。表觀上看都可以用有機溶劑進行洗脫。雙功能吸附樹脂不是靠單一的物理吸附機理進行吸附，由不同吸附作用吸附的物質可以用不同的洗脫劑分別洗脫，因此可用於分離不同的物質。此種樹脂也可以在有機溶劑中進行吸附，提取脂溶性物質或去除提取物中的某些雜質，是雙功能吸附樹脂中的一種。現有技術公開認為對ADS-7樹脂對皂甙、黃酮、生物鹼均有吸附能力，選擇性較高。但是，發明人將ADS-7樹脂應用於三七總皂苷提取液的脫色反應時，意外的發現，在本發明規定條件下該樹脂對三七總皂苷吸附力可忽略不計，可用於吸附三七總皂苷中的色素物質。2、本發明使用強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7與氧化鋁聯合進行脫色， 具有以下效果1)脫色效果好經過實驗結果對比，與其他脫色方法相比，本發明提供的三七總皂苷脫色方法脫色效果好，脫色後的三七總皂苷為純白色，不夾雜任何雜色。2)減少三七總皂苷在樹脂的殘留量強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7 吸附了絕大部分的色素雜質，與中性氧化鋁聯合使用後，又將剩餘的微量色素吸附除去，對三七總皂苷有效成分則基本沒有吸附。因為ADS-7不吸附三七總皂苷，因此不需要擔心三七總皂苷殘留在樹脂柱裡，造成損失。3)減少三七總皂苷的水解脫色過程採用加壓過柱，加快三七總皂苷溶液的過柱速度，縮短了洗脫過程可能發生的水解反應，提高三七總皂苷純度。
具體實施例方式以下實施例用於說明本發明，但不用來限制本發明的範圍。
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BV為柱體積的倍數，如IBV為1倍柱體積。以下實施例中大孔吸附樹脂的類型可選用D101、D201、AB_8或NKA-9等常用的類型。實施例1 三七總皂苷的提取及脫色1、三七總皂苷提取液的製備方法 三七粉碎成粗粉，用乙醇提取5次，每次用2倍量50 %的乙醇，每次提取1小時，合併提取液，濾過，濾液回收乙醇並減壓濃縮，製成每Iml含生藥約0. Ig ；加濃縮液體積0. 5%的氯化鈉，攪勻，靜置12小時，濾過；濾液經脫脂處理後，以流速為0. 5BV/h過大孔吸附樹脂柱，用水洗滌，水洗液棄去；然後依次用40%、50%、60%、70%、80%乙醇液梯度洗脫，收集洗脫液。2、三七總皂苷提取液脫色方法三七總皂苷洗脫液加壓通過藥材量50%的強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂 ADS-7柱，柱內壓為lkg/cm2，流速為0. 5BV/h，收集流出液，然後將流出液加壓通過藥材量的 150%的中性氧化鋁柱(柱內壓為lOOkg/cm2，流速為15BV/h)，收集流出液。3、製備三七總皂苷流出液精製，回收乙醇至無醇味，濾液濃縮至相對密度為1. 06，乾燥，即得三七總皂苷。4、含量檢測照高效液相色譜法(附錄VI D)測定。色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以流動相A 乙腈，流動相B 水，按下表進行梯度洗脫；檢測波長為203nm。理論板數按人參皂苷峰計算應不低於6000，人參皂苷與Re的分離度應不低於1. 5。
權利要求
1.一種三七總皂苷提取液的脫色方法，其特徵在於，該方法是通過強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7聯合中性氧化鋁對三七總皂苷提取液進行脫色。
2.根據權利要求1所述的脫色方法，其特徵在於，所述強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7，為強極性吸附樹脂，淺黃色球粒；粒徑範圍0. 1-1. 25mm ；溼視密度0. 5-0. 9g/ ml ；平均孔經:10-40nm ；孔隙率=30-50% 0
3.根據權利要求1或2所述的脫色方法，其特徵在於，所述方法包括以下步驟三七提取液加壓通過藥材量5-100%的強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7柱，柱內壓為 l-20kg/cm2，流速為 0. 5-15BV/h。
4.根據權利要求3所述的脫色方法，其特徵在於，所述方法包括以下步驟三七提取液過強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7後，加壓通過藥材量的10-150%的中性氧化鋁柱，氧化鋁柱的柱內壓為1-lOOkg/cm2，流速為0. 5-15BV/h。
5.根據權利要求1-3任一項所述的脫色方法，其特徵在於，所述方法包括以下步驟 三七提取液加壓通過藥材量5-100%的強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7柱，柱內壓為l-20kg/cm2，流速為0. 5-15BV/h,收集流出液；三七流出液再加壓通過藥材量的 10-150%的中性氧化鋁柱，氧化鋁柱的柱內壓為1-lOOkg/cm2，流速為0. 5_15BV/h，收集流出液，流出液回收乙醇至無醇味，然後濃縮至相對密度為1.06-1. 10，乾燥，即得脫色後的三七總皂苷提取液。
6.一種三七總皂苷的提取方法，其特徵在於，該方法包括以下步驟1)三七用2-20倍50-95%乙醇加熱提取2-5次，每次1-5小時，合併提取液，濾過，濾液回收乙醇並減壓濃縮，製成每Iml含生藥約0. 1 Ig ；2)按濃縮液體積加0.5-1. 5%氯化鈉，攪勻，靜置12-36小時，濾過；3)濾液經脫脂處理後，以流速為0.5-15BV/h過大孔吸附樹脂柱，用水洗滌，水洗液棄去，繼用40-80%不同濃度乙醇液洗脫，收集洗脫液；4)洗脫液通過藥材量5-100%的強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7柱，柱內壓為l-20kg/cm2，流速為0. 5-15BV/h，收集流出液；5)流出液加壓通過藥材量的10-150%的中性氧化鋁柱，氧化鋁柱的柱內壓為 Ι-lOOkg/cm2，流速為0. 5-15BV/h，收集流出液；6)流出液精製，回收乙醇至無醇味，濾液濃縮至相對密度為1.06-1.10，乾燥，即得三七總皂苷。
7.根據權利要求6所述的提取方法，其特徵在於，所述三七為三七主根和/或三七蘆頭。
8.根據權利要求6所述的提取方法，其特徵在於，所述步驟幻的大孔吸附樹脂的類型為 D101、D201、AB-8 或 NKA-9。
全文摘要
本發明涉及一種三七總皂苷提取液的脫色方法，該方法主要是通過強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7聯合中性氧化鋁對三七總皂苷進行脫色。本發明使用強極性聚苯乙烯型共聚體大孔樹脂ADS-7進行脫色，脫色效果好，減少三七總皂苷在樹脂的殘留量，減少三七總皂苷的水解。
文檔編號A61P25/00GK102423329SQ20111041492
公開日2012年4月25日 申請日期2011年12月13日 優先權日2011年12月13日
發明者劉冠萍, 張栩顏, 李釗文, 趙學偉, 陳小傑, 黃宇聲 申請人:廣西梧州製藥(集團)股份有限公司