不含右泛醇、鈣離子和磷酸鹽的藥物組合物以及鈣螯合劑和眼科相容粘度調節劑的應用的製作方法

2023-05-27 21:31:06 1

專利名稱：：不含右泛醇、鈣離子和磷酸鹽的藥物組合物以及鈣螯合劑和眼科相容粘度調節劑的應用的製作方法不含右泛醇、鈣離子和磷酸鹽的藥物組合物以及鈣螯合劑和眼科相容粘度調節劑的應用本發明涉及一種不含右泛醇、鈣離子和磷酸鹽的藥物組合物。本發明還涉及鈣螯合劑和眼科相容粘度調節劑在製備用於治療和/或預防上皮缺損(epithelialdefects)的不含磷酸鹽的藥物組合物中的應用。粘度調節劑，尤其是透明質酸和透明質酸鹽，用於眼睛潤溼障礙，即"乾眼"症候群，也稱為乾燥症候群(siccasyndrome)或其它乾燥症候群，並用於治療潤溼障礙導致的上皮損傷。在"乾眼"症候群中，這些症狀表現為灼傷、刺激、眼中砂粒感及視力模糊。這些症狀可能是淚溢和/或淚液膜功能紊亂的結果。使用包含磷酸鹽緩衝液和透明質酸的滴眼劑來治療乾眼症候群是已知的(醫學科學以色列雜誌(IsraeliJournalofMedicalScience)1997，33，第194-197頁，眼科學英國雜誌(BritishJournalofOphthalmology)2002，86，第181-184頁)。EP0698388Al進一步描述了人工淚液，其包含透明質酸、鈣離子、檸檬酸鹽和磷酸鹽離子。然而，磷酸鹽與摻合或沉積在眼睛角膜和結膜內或上的內源性麵或內源性鈣離子或藥物製劑中包含的鈣離子不利地形成溶解性差的磷酸鈣。這種結合和/或沉積也可稱為鈣化或硬化，會由於角膜混濁而導致視力嚴重受損。角膜變性也稱為角膜韌帶變性或帶狀角膜病。即使輕微的角膜混濁也可導致對眩光的敏感性顯著提高，這可能是磷酸鈣沉積或摻合所引起的光散射的結果。因此夜晚的視力嚴重受損。在角膜和/或結膜上皮缺損區域尤其易於發生這種溶解性差的磷酸鈣或其它溶解性差的鈣化合物的沉積。鑑於磷酸鈣沉積可能導致的副作用，因而需要一種能夠降低和/或消除上述缺點且適合局部應用於眼睛的藥物組合物。DE10161110Al描述了一種藥物組合物，其至少包含泛醇和/或泛酸和透明質酸或/透明質酸鹽以及任選的藥用賦形劑。DE10161110Al中描述的藥物組合物適用於治療乾眼症候群。DE60203691T2描述了含右泛醇的隱形眼鏡護理組合物。用含右泛醇的護理組合物處理隱形眼鏡適用於乾燥和/或受刺激眼睛的佩戴。EP0414373A2描述了含轉且不含磷酸鹽的含透明質酸鹽的組合物，它可用作眼睛外科手術期間的等張和滲透平衡鹽溶液。US4,409205描述了用於校正哺乳動物眼睛的不規則結構淚液膜的眼用溶液。US4,409,205描述的組合物能夠防止蛋白樣物質從淚液中沉澱出來並促進沉澱的蛋白樣物質重新溶解。WO84/04681描述了另一種用於緩解乾眼症狀的眼用溶液，所述組合物包含羧乙烯基聚合物。本發明的目的通過如下技術方案來實現一種不含右泛醇、鈣離子和磷酸鹽的藥物組合物，其包含至少一種鈣螯合劑和至少一種眼科相容的粘度調節劑，所述的粘度調節劑選自硫酸軟骨素、聚丙烯醯胺、聚丙烯酸、聚丙烯酸樹脂、聚乙二醇、多糖、聚乙烯吡咯烷酮、透明質酸、透明質酸鹽及其衍生物和混合物，以及任選地一種藥用賦形劑或多種藥物賦形劑。本發明優選的不含磷酸鹽的藥物組合物如從屬權利要求2-9所述。將本發明藥物組合物局部應用於眼睛表面，尤其眼睛角膜和/或結膜中上皮缺損處的眼睛表面。上皮缺損可以是眼睛損傷和/或手術的結果。本發明所述"不含磷酸鹽(phosphate-free)的藥物組合物"應理解為磷酸鹽離子含量小於7毫摩爾/升，優選小於3毫摩爾/升，更優選小於l毫摩爾/升，最優選沒有磷酸鹽離子的藥物組合物。本發明所用術語"磷酸鹽離子"應理解為具體表示P043—、HPO^和/或H2P04。本發明所述粘度調節劑是指具有增加粘度作用的物質。在本發明的涵義內，"眼科相容的"應理解為具體表示對眼睛無刺激性且優選對視力無副作用。優選地，粘度調節劑表現為粘彈性行為。根據本發明，粘彈性行為應理解為表示在壓力、張力、剪切和/或剪切應力的作用下粘度改變。尤其優選地，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物基於粘度調節劑而顯示非牛頓流體行為。粘度優選為2-1000mPa's，更優選為2-500mPa's，尤其優選2-100mPa-s。粘度增加作用極其有利於使應用於眼睛表面的不含磷酸鹽的藥物組合物的保留時間延長並且以遲緩方式從眼睛表面流失。粘度調節劑的非粘度流體行為引出了眼用傑出特徵，即粘度隨剪切速率增加而降低。將包含粘度調節劑的不含磷酸鹽的藥物組合物應用於眼睛表面之後，通過眨眼對不含磷酸鹽的藥物組合物施加剪切應力，因而最初增加的粘度開始降低。眨眼導致粘度降低，因而在眼睛表面形成均一薄膜。眨眼後粘度增加，薄膜很好地粘附於眼睛薄膜，僅以延遲方式流失。優選地，粘度調節劑在眼睛上用作助流劑或潤滑劑。如果眼睛表面，尤其是結膜表面出現損傷，尤其是上皮損傷，助流和潤滑作用尤其有益。根據一個優選的實施方式，粘度調節劑的含量約為0.005-5重量％，優選約0.01-1重量％，各種情況都以不含磷酸鹽的藥物組合物的總重量計。本發明不含磷酸鹽的藥物組合物包含眼科相容的粘度調節劑，選自硫酸軟骨素、聚丙烯醯胺、聚丙烯酸、聚丙烯酸樹脂、聚乙二醇、纖維素衍生物、多糖、聚乙烯吡咯烷酮、透明質酸、透明質酸鹽、以及它們的衍生物和/或混合物。尤其優選地，所用眼科相容的粘度調節劑是透明質酸、透明質酸鹽及其衍生物和/或混合物。透明質酸是眼睛玻璃體液的成分，因而對人體來說不是異物。因此，從免疫學的角度來看，透明質酸高度相容。而且，透明質酸或透明質酸鹽與粘蛋白結構類似。粘蛋白形成三層淚液膜的最下層，提高結膜和結膜上皮的最佳潤溼。而且，透明質酸在眼用時還具有傑出的特徵，即粘度隨剪切速率的增加而降低。因此，透明質酸具有非牛頓流體行為。透明質酸和/或其鹽，透明質酸鹽，尤其是透明質酸鈉具有傑出的光學性質，因而不會對患者造成視力損害。透明質酸或透明質酸鹽可從牛眼玻璃體液或其它來源如雞冠中分離得到。透明質酸或透明質酸鹽也可在菌株中以藥用品質製備。可使用的透明質酸的鹽包括.*透明質酸鉀、透明質酸鈉和/或透明質酸鎂。尤其優選透明質酸鈉。根據這些物理性質，透明質酸鈉的水性溶液和/或透明質酸是尤其傑出的助流劑和潤滑劑，具有優良粘附作用並且在結膜和角膜上皮上保留時間延長而不會損害視力。根據本發明的另一方面，透明質酸和/或透明質酸鹽的分子量為50000-10000000道爾頓，優選約250000-5000000。尤其優選地，透明質酸或透明質酸鹽的分子量為50000-4000000道爾頓。最優選地，透明質酸或透明質酸鹽的分子量約為1500000-3500000道爾頓。優選透明質酸和/或透明質酸鹽的用量為0.01-1.0重量％，更優選0.05-0.8重量％，尤其優選0.08-0.4重量％，各種情況都以不含磷酸鹽的藥物組合物的總重量計。所有透明質酸或透明質酸鹽(例如透明質酸鈉)的高分子量導致低濃度下的高粘彈性。分子鏈在溶液中以纏結無序排列。在眼瞼運動產生的剪切力的作用下，大分子基本上平行排列。這種剪切力作用下三維結構的改變很可能對其傑出粘彈性是重要的。本發明所述的鈣螯合劑優選應理解為表示通過絡合和/或結合鈣離子防止鈣鹽沉澱的物質。優選地，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物的鈣螯合劑選自檸檬酸鹽、檸檬酸、EDTA(乙二胺四乙酸)、EGTA(乙二醇二(2-氨基乙基)-N，N,N，，N，-四乙酸)以及它們的混合物。尤其優選地，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物包含檸檬酸鹽緩衝劑。使用檸檬酸鹽緩衝劑是尤其優選的，因為一方面檸檬酸鹽緩衝劑用作緩衝系統而在另一方面則用作鈣螯合劑，因而無需再加入緩衝系統。在一個實施方式中，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物包含0.04-0.06mg/ml的檸檬酸和7.5-9.5mg/ml的檸檬酸三鈉二水合物，本發明藥物組合物的pH優選為6.6-7.8。為了製備檸檬酸鹽緩衝劑，使用檸檬酸和伯、仲和/或叔檸檬酸鹽。所用檸檬酸鹽優選是檸檬酸鹼金屬鹽，更優選檸檬酸鈉。優選地，使用檸檬酸、檸檬酸鈉、檸檬酸二鈉和/或檸檬酸三鈉。在一個實施方式中，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物中鈣螯合劑的含量為0.05-10重量％，更優選0.1-5重量％，尤其優選0.5-3重量％,各種情況都以藥物組合物的總重量計。在另一個實施方式中，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物中鈣螯合劑的含量為0.8-1.0重量％，各種情況都以藥物組合物的總重量計。不含磷酸鹽的藥物組合物本身不含鈣離子。本發明所述不含鈣離子是指不含磷酸鹽的藥物組合物中鈣離子含量小於0.3毫摩爾/升，優選小於0.1毫摩爾/升，更優選沒有藥離子。因為不存在磷酸鹽離子並且因為至少一種鈣螯合劑的存在，本發明藥物組合物能夠防止眼中磷酸鈣絡合物和/或磷酸^化合物和/或其它溶解性差的鈣化合物的形成，這些物質可能在角膜上或結膜內沉積或摻合(incorporations)，由於磷酸鈣絡合物和/或磷酸鈣化合物和/或其它溶解性差的鈣化合物引起的光散射而導致視力嚴重受損。溶解性差的鈣化合物優選應理解為表示在角膜中形成沉積或摻合的化合物。鈣螯合劑絡合生理存在的鈣離子，從而對抗溶解性差的鈣化合物的形成，尤其是磷酸鈣化合物的形成，這些物質可能引起眼睛角膜和/或結膜中沉積或摻合。本發明藥物組合物能夠防止或減少角膜和/或結膜鈣化。而且，本發明不含磷酸鈣的組合物還能夠溶解已經沉積在角膜上和/或角膜中(depositedfromand/oroutofthecornea)的磷酸鈣絡合物和/或磷酸鈣化合物和/或其它溶解性差的鈣化合物。透明質酸或透明質酸鹽傑出的助流和潤滑性質與鈣螯合劑協同作用，在用本發明不含磷酸鹽的藥物組合物處理的眼睛中，防止含鈣化合物或絡合物在角膜中的沉積和/或摻合，並提供通常高度相容的潤溼溶液。意外地發現，無磷酸鹽離子的含透明質酸的溶液和/或含透明質酸鹽的溶液的粘度比相同量的透明質酸和/或透明質酸鹽的含磷酸鹽離子的溶液的粘度高。優選地，本發明不含磷酸鹽的組合物中採用較低濃度的透明質酸或透明質酸鹽以實現眼中長時間潤溼。由於藥品級的透明質酸或透明質酸鹽非常昂貴，因此節約了相當的成本。優選地，提供無防腐劑形式的不含磷酸鹽的藥物組合物。防腐劑可能破壞角膜前膜並導致表面角膜上皮細胞微絨毛和微足數量減少。因此，用包含防腐劑的眼科藥物組合物長期治療本身可能導致上皮損傷。具體地說，廣泛使用的苯扎氯銨具有很大的破壞可能。鑑於理想的眼睛治療，應避免加入防腐劑引起的刺激。而且，防腐劑阻止眼睛上皮再生，因而在已受損眼睛的治療中應避免，例如乾眼症候群，或創傷之後，例如外科手術之後。在一個實施方式中，本發明藥物組合物不含泛醇、泛酸、肝素、莫沙維林和/或它們的鹽。術語泛醇或泛酸還應理解為包括它們的衍生物。例如，泛醇可以右泛醇的形式存在。泛酸還應理解為包括鹽，即泛酸鹽，例如泛酸鈉。術語"肝素"應理解為表示"具有肝素活性的粘多糖"。"具有肝素活性的粘多糖"優選應理解為表示具有相當於肝素的生物或生理學活性的任何粘多糖或葡糖胺聚糖。具有肝素活性的粘多糖選自例如，類肝素(heparinoids)、人肝素、動物肝素、重組肝素、化學修飾肝素、酶修飾肝素、截短肝素、低分子量肝素、硫酸乙醯肝素(heparan)以及它們的混合物。根據優選的實施方式，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物中不含上述藥物泛醇，尤其是右泛醇、泛酸、肝素、莫沙維林和/或它們的鹽。意外地發現，不含泛醇，尤其是不含右泛醇的不含磷酸鹽的組合物非常適用於眼睛的角膜和/或結膜上皮缺損的治療。雖然活性成分泛醇，尤其是右泛醇在傷口的治癒中被廣泛使用，但是完全無法說明在眼睛角膜和/或結膜損傷的情況下，不含泛醇，尤其是不含右泛醇的藥物組合物具有優良的治癒效果。因此，本發明提供了僅包含幾種成分而具有傑出活性特徵的藥物組合物。因此，可更加成本有效地製備本發明的組合物，因為能夠省卻活性成分右泛醇，而不會使治癒作用更差。使用本發明不含磷酸鹽的藥物組合物時，不會發生溶解性差的鈣化合物如磷酸鈣化合物的摻合和/或沉積。另一方面，使用常規包含磷酸鹽緩衝劑的眼科製劑時，在眼睛角膜和/或結膜的治癒過程中會發生諸如磷酸鈣化合物的摻合和/或沉積。因此，本發明代表了大的進步，因為使用本發明組合物時，能夠可靠地避免眼睛的角膜和/或結膜中和/或角膜和/或結膜上的上述摻合和/或沉積，同時具有非常優良的角膜和/或結膜治癒效果。根據一個優選的實施方式，不含磷酸鹽的藥物組合物包含至少一種鈣螯合劑和至少一種眼科相容的粘度調節劑以及任選的一種藥用賦形劑或多種藥用賦形劑。在這種情況下，"至少一種"表示不含磷酸鹽的藥物組合物包含一種或多種鈣螯合劑和一種或多種眼科相容的粘度調節劑以及任選的一種或多種藥用賦形劑。根據一個尤其優選的實施方式，不含磷酸鹽的藥物組合物包含檸檬酸和/或檸檬酸鹽、透明質酸鹽和/或透明質酸以及任選藥用賦形劑或多種藥用賦形劑。在一個實施方式中，本發明藥物組合物不包含除轉螯合劑、透明質酸和/或透明質酸鹽之外的另外的藥物。本發明涵義內的藥物具體應理解為表示能夠在活體中防止、治癒和/或緩解疾病的物質。優選地，在本發明不含防腐劑的藥物組合物的儲存和釋放方面，採用"當今PTA(PTAtoday)"1996，第12期，第1230-1232頁所述的C0M0D⑧來實現本發明不含磷酸鹽的藥物組合物的無菌儲存及重複釋放。當然，也可使用常規單劑量容器，使用後丟棄。在一個實施方式中，不含磷酸鹽的藥物組合物還可包含眼科相容的藥用賦形劑。藥用賦形劑優選不含磷酸鹽離子。優選地，藥用賦形劑選自無機緩衝物質、有機緩衝物質、無機鹽、有機鹽、粘度調節劑、溶劑、增溶劑、溶液加速劑、成鹽劑、鹽、粘度和稠度作用試劑、膠凝劑、乳化劑、增溶劑、潤溼劑、鋪展劑、抗氧化劑、防腐劑、填充劑和載體、滲透壓調節劑以及它們的混合物。更優選地，不含磷酸鹽的藥物組合物以溶液、混懸液或乳劑的形式，以凝膠、軟膏或糊劑的形式，以粉末、顆粒或片劑的形式存在。不含磷酸鹽的藥物組合物優選是眼科試劑，更優選是局部應用的眼科試劑。對於眼用軟膏或眼用凝膠形式的不含磷酸鹽的藥物組合物，以石油凝膠或石蠟的形式提供，添加或不添加乳化劑如膽固醇、羊毛蠟、羊毛蠟醇、十六醇等。根據一個優選的實施方式，不含磷酸鹽的藥物組合物以溶液的形式存在，因而可以滴眼劑或眼用噴霧的形式應用於以及表面。在一個實施方式中，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物的滲量為100-900mOsm/1。根據一個優選的實施方式，在這種情況下優選的水性溶液是基於淚液的等張溶液。在等張溶液中，滲量優選為200-350mOsm/1，優選300mOsm/1。根據另一個優選的實施方式，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物低滲量(hypoosmolar)。在這種情況下，滲量約為160-180mOsm/1。具體地說，需要補償乾眼患者異常高的淚液滲量時，使用低滲量溶液。根據所需治療的症狀，低滲量溶液也可能是有益的。此時，藥物組合物也可具有非常高的滲量700-900mOsm/1。為實現水性溶液的等張化，優選使用氯化鈉、硼酸、山梨糖醇、甘油等。水性溶液的pH優選為pH5-9，更優選pH6.8-7.6，尤其優選pH7.2-7.4。為了調節pH，可使用緩衝液如醋酸鹽緩衝液、醋酸鹽/硼酸鹽緩衝液和硼酸鹽緩衝液。但是，根據本發明，不能使用磷酸鹽緩衝液。當然，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物也可以固體形式存在，先溶解在水性溶液如緩衝液如緩衝液中再使用。固體溶解在水性緩衝液中之後，溶液可過濾除菌，然後以眼用噴霧或滴眼劑的形式應用於眼睛表面。優選地，固體和溶劑原本就以無菌形式儲存在各自的容器中，因而溶液製備後的過濾除菌不是必需的。因此，使用者可以在製備混合物或溶液之後直接應用不含磷酸鹽的藥物組合物。不含磷酸鹽的藥物組合物以固體，例如粉末、顆粒或片劑形式存在時，不含磷酸鹽的藥物組合物優選包含檸檬酸鈉和/或檸檬酸、透明質酸和/或透明質酸鈉，因為這些混合物是高度水溶性的。事實上，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物也可以眼用片劑的形式引入結膜囊中。在淚液是作用下眼用片劑快速溶解。然而，優選地，不含磷酸鹽的藥物組合物以滴眼劑、眼用噴霧和/或眼用凝膠的形式使用。上述溶液或固體的使用之前，化合物以所需的比例與其它物質混合併溶解，然後加水或水性粉末溶液過濾除菌。本發明的目的是使用至少一種眼科相容的粘度調節劑和至少一種鈣螯合劑來製備由於治療和和/或防止角膜和/或結膜上皮缺損的不含磷酸鹽的藥物組合物。本發明的優選實施方式如從屬權利要求11-28中所述。根據本發明，使用不含磷酸鹽的藥物組合物來治療和/或預防角膜韌帶鈣化或混濁。鈣化尤其易於在上皮缺損處發生，存在多種原因。例如，上皮缺損選自機械和/或化學作用引起的上皮缺損、外科手術後形成的上皮缺損、眼睛表面潤溼障礙導致的上皮缺損、或用含防腐劑的藥物組合物長期治療或長期佩戴隱形眼鏡導致的上皮缺損。上皮缺損，例如切口、化學灼傷和損傷，可能導致溶解性差的鈣化合物，尤其是磷酸鈣摻合和/或沉積到眼睛角膜中和/或角膜上。例如，潤溼障礙選自舍格倫症候群、乾燥症候群以及隱形眼鏡配戴者的潤溼障礙。眼睛潤溼障礙將導致眼睛或眼睛表面磨損增加。僅僅是這種磨損的結果，將引起上皮缺損而顯著增加鈣化風險。機械作用導致的上皮缺損可以是事故相關損傷。化學作用導致的上皮缺損可以是酸和/或鹼化學灼傷的結果。在一個實施方式中，外科手術選自眼睛前區的外科手術、移植人工晶狀體的白內障摘除術、屈光外科手術、角膜和角膜移植手術。在一個實施方式中，使用本發明不含磷酸鹽的眼科藥物組合物進行長期治療，尤其是慢性眼病的治療。具體地說，使用本發明不含磷酸鹽的眼科藥物組合物長期治療過敏和/或青光眼。本發明涵義內的長期治療應理解為表示優選治療一年以上，尤其優選一個月以上，最優選一周以上。優選地，在本發明的應用中，不含磷酸鹽的組合物不含鈣和/或不含右泛醇。根據另一個優選的實施方式，在本發明的應用中，粘度調節劑選自硫酸軟骨素、聚丙烯醯胺、聚丙烯酸、聚丙烯酸樹脂、聚乙二醇、纖維素衍生物、多糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯垸酮、透明質酸、透明質酸鹽、以及它們的衍生物和混合物。不含磷酸鹽的藥物組合物還可用作人工淚液，對於隱形眼鏡配戴者來說用於重新潤溼。附帶地，本發明的應用參照本發明組合物的上述實施方式，相應地也適用於根據本發明的其它應用。實施例實施例11ml滴眼劑包含透明質酸鈉(分子量(MW):1.5X106-3.5X106Da)l.Omg山梨糖醇32.0mg檸檬酸，無水0.05mg擰檬酸鈉X2H208.5mg注射用水至1.0mlpH6.8-7.6實施例2透明質酸鈉(MW:1.5X106-3.5X106Da)5.0mg檸檬酸，無水29.5mg檸檬酸鈉X2H20500mg注射用水至50mlpH6.25109mOsm/kg實施例3透明質酸鈉(MW:1.5X106-3.5X106Da)lO.Omg檸檬酸，無水0.3mg檸檬酸鈉X2H2050mg甘油，無水2500mg注射用水至100mlpH7.11270mOsm/kg實施例l-3所用的擰檬酸鈉是藥典品質的檸檬酸三鈉二水合物。實施例1-3的組合物可還包含用於等張化或等水合化(isohydratkm)的成分。實施例4在該實施例中，考慮到角膜中的硬化和鈣化現象，對含磷酸鹽的滴眼劑與本發明不含磷酸鹽的滴眼劑的治癒效果進行比較。在這種情況下，用作對照的含磷酸鹽的滴眼劑具有以下組成透明質酸鈉(MW:1.5X106-3.5X106Da)1mg山梨糖醇27mg磷酸鹽緩衝劑pH7.250mM注射用水至1ml在這種情況下，本發明不含磷酸鹽的滴眼劑具有以下組成透明質酸鈉(MW:1.5X106-3.5X106Da)1mg山梨糖醇32mg檸檬酸，無水0.05mg檸檬酸鈉X2H208.5mg注射用水至1mlpH7.2考慮到眼睛角膜的硬化或鈣化現象，在從二氧化碳氣體新鮮處死的兔子摘除眼球獲得的角膜上研究治癒效果。除去視網膜、脈絡膜、晶狀體和虹膜之後，將留有鞏膜的角膜固定在培養室的保持裝置上。然後在培養室中用培養介質小心填充角膜後的眼睛前室。所用培養介質是Earle，sMEMT031-05(Biochrom公司，德國柏林)。加入NaHC03將培養介質的pH調節至7.2。在流速10微升/分鐘的持續流動下，保持更換培養基質。人造前室的平均容積為0.5-0.9ml，取決於角膜曲率。然後保持更好培養介質50-90分鐘。在培養箱中32。C、100%大氣溼度下，無菌孵育角膜。為了研究考慮到角膜鈣化現象的治癒效果，用牙科磨刀(Arkansasgrinder638XF，Meisinger，德國)。在角膜表面製備四個小的磨損區域，每個面積約0.2-1.5mm2。在角膜頂點上方，設置一滴管，滴在角膜中央上。採用微泵，每小時分別滴加一滴體積約30微升培養介質的液體，各自是包含磷酸鹽的滴眼劑或不含磷酸鹽的滴眼劑。為了能夠研究角膜鈣化現象，再將CaCh濃度14.58毫摩爾/升的含氯化鈣的鹽水溶液以每小時一滴(30微升)的速率滴加到角膜上。含氯化鈣的生理鹽水溶液的滴加用於模擬淚液分泌。游離鈣離子的濃度在這裡對應於分泌淚液中的鈣含量。滴眼劑或氯化鈣溶液的滴加交替進行，各自間隔30分鐘。所研究的角膜在試驗過程中具有完全活力。通過培養室介質中的pH以及葡萄糖和乳酸鹽的濃度來測定活力。所有值在測量期間恆定。測定時間各自為4天。角膜鈣化和治癒的結果總結在表1中。表1鈣化3陽治癒結果tableseeoriginaldocumentpage15表格注釋1.)n.d.:未檢測2.)%表示的治癒結果表示治癒區域相對於原始角膜損傷區域的比例。3.)由1-5的數量值來表示鈣化強度，評價用肉眼進行，數值表示以下涵義:0:無硬化現象l:最初肉眼可見硬化2:輕度硬化3:中度硬化4:嚴重硬化5:完全硬化圖圖l-9顯示了在透射光觀察下的處理和未處理角膜的顯微照片。在各個情況下可見，經保存、固定並在培養條件下處理的兔眼角膜。圖1顯示了如何用牙科磨刀造成角膜損傷。圖2顯示了角膜表面的損傷，也稱為磨損。圖3中通過螢光素染色更清楚地顯示了眼睛角膜上造成的損傷。圖4顯示了開始試驗時用實施例4的不含磷酸鹽的滴眼劑處理損傷的角膜。圖5顯示了滴加不含磷酸鹽的滴眼劑4天後圖4的角膜。由圖5可見，滴加不含磷酸鹽的滴眼劑4天後完全沒有發生角膜表面鈣化。圖6顯示了試驗開始時用實施例4的含磷酸鹽的滴眼劑處理的角膜。圖7顯示了來自圖6的角膜滴加含磷酸鹽的滴眼劑4天後的情況。由圖7可見，滴加含磷酸鹽的滴眼劑4天後角膜表面發生重度鈣化。圖8顯示了對照試驗開始時用實施例4所述的培養介質處理的角膜。圖9顯示了來自圖8的角膜表面在滴加培養介質4天後的情況。由圖9可見，滴加培養介質4天後角膜表面發生中度到重度鈣化。結果意外地發現，用不含磷酸鹽的含鈣螯合劑的滴眼劑處理眼睛角膜和/或結膜中的上皮缺損時，不會發生角膜表面轉化，即具體地說不會發生磷酸f5化合物的結合。而且，還意外地發現，本發明不含磷酸鹽的藥物組合物，即使不存在常用於各種程度的傷口治癒的右泛醇，也能為眼睛受損角膜帶來非常優良的治癒效果。表l表明，2或3個試驗過程的治癒速率平均為73.8%(培養介質)，57%(含磷酸鹽的滴眼劑)，94.9%(不含磷酸鹽的滴眼劑)。用含磷酸鹽的滴眼劑處理時，角膜表面發生嚴重鈣化，平均評價數值約為4，而使用不含磷酸鹽的滴眼劑的情況下，未能檢測到角膜表面任何鈣化現象。權利要求1.一種不含右泛醇、鈣離子和磷酸鹽的藥物組合物，所述組合物包含至少一種鈣螯合劑、至少一種眼科相容的粘度調節劑以及任選的一種藥用賦形劑或多種藥用賦形劑，所述粘度調節劑選自硫酸軟骨素、聚丙烯醯胺、聚丙烯酸、聚丙烯酸樹脂、聚乙二醇、纖維素衍生物、多糖、聚乙烯吡咯烷酮、透明質酸、透明質酸鹽、及其衍生物和混合物。2.如權利要求l所述的不含磷酸鹽的藥物組合物，其特徵在於，所述粘度調節劑的含量約為0.005-5重量％，優選約0.01-1重量％，各種情況下都以不含磷酸鹽的藥物組合物的總重量計。3.如權利要求1或2所述的藥物組合物，其特徵在於，所述透明質酸、透明質酸鹽和/或其衍生物的分子量約為50000-10000000道爾頓，優選約250000-5000000道爾頓。4.如上述權利要求中任一項所述的不含磷酸鹽的藥物組合物，其特徵在於，所述透明質酸鹽是透明質酸鈉。5.如上述權利要求中任一項所述的不含磷酸鹽的藥物組合物，其特徵在於，所述鈣螯合劑選自檸檬酸鹽、檸檬酸、EDTA、EGTA及其混合物。6.如上述權利要求中任一項所述的不含磷酸鹽的藥物組合物，其特徵在於，所述藥用賦形劑選自無機緩衝物質、有機緩衝物質、無機鹽、有機鹽、粘度調節劑、溶劑、增溶劑、溶液加速劑、成鹽劑、粘度和稠度作用試劑、膠凝劑、乳化劑、增溶劑、潤溼劑、鋪展劑、抗氧化劑、防腐劑、填充劑和載體、滲透壓調節劑以及它們的混合物。7.如上述權利要求中任一項所述的不含磷酸鹽的藥物組合物，其特徵在於，所述不含磷酸鹽的藥物組合物以溶液、滴劑、噴霧、混懸劑或乳劑、凝膠、軟膏或糊劑、粉末或顆粒、或片劑的形式存在。8.如上述權利要求中任一項所述的不含磷酸鹽的藥物組合物，其特徵在於，所述不含磷酸鹽的藥物組合物不含莫沙維林、肝素和/或泛酸。9.如上述權利要求中任一項所述的不含磷酸鹽的藥物組合物，其特徵在於，所述不含磷酸鹽的藥物組合物包含至少一種鈣螯合劑和至少一種眼科相容的粘度調節劑以及任選的藥用賦形劑或多種藥用賦形劑。10.至少一種鈣螯合劑和至少一種眼科相容的粘度調節劑在製備用於治療和/或預防眼睛角膜和/或結膜上皮缺損的不含磷酸鹽的藥物組合物中的應用。11.如權利要求IO所述的應用，其特徵在於，所述上皮缺損選自機械和/或化學作用導致的上皮缺損，外科手術後形成的上皮缺損、眼睛表面潤溼障礙導致的上皮缺損、用含防腐劑的藥物組合物長期治療或長期佩戴隱形眼鏡導致的上皮缺損。12.如權利要求10或11所述的應用，其特徵在於，所述不含磷酸鹽的藥物組合物用於長期使用。13.如權利要求12所述的應用，其特徵在於，所述長期使用在青光眼和過敏中進行。14.如權利要求10-13中任一項所述的應用，其特徵在於，防止和/或減少溶解性差的鈣化合物摻合和/或沉積到眼睛角膜和/或結膜中，尤其是鈣化。15.如權利要求11-14中任一項所述的應用，其特徵在於，所述潤溼障礙選自舍格倫症候群、乾燥症候群以及隱形眼鏡配戴者的潤溼障礙。16.如權利要求11-15中任一項所述的應用，其特徵在於，所述外科手術選自眼睛前部的外科手術、移植人工晶狀體的白內障摘除術、屈光外科手術、角膜和角膜移植物手術、以及結膜手術。17.如權利要求10-16中任一項所述的應用，其特徵在於，所述不含磷酸鹽的藥物組合物不含鈣離子。18.如權利要求10-17中任一項所述的應用，其特徵在於，所述粘度調節劑的含量約為0.005-5重量％，優選約0.0I-1重量％，各種情況下以不含磷酸鹽的藥物組合物的總重量計。19.如權利要求10-18中任一項所述的應用，其特徵在於，所述粘度調節劑選自硫酸軟骨素、聚丙烯醯胺、聚丙烯酸、聚丙烯酸樹脂、聚乙二醇、纖維素衍生物、多糖、聚乙烯醇、乙烯吡咯垸酮、透明質酸、透明質酸鹽以及它們衍生物和混合物。20.如權利要求19所述的應用，其特徵在於，所述透明質酸、透明質酸鹽和/或其衍生物的分子量約為50000-10000000道爾頓，優選約250000-5000OOO道爾頓。21.如權利要求19或20所述的應用，其特徵在於，所述透明質酸鹽是透明質酸鈉。22.如權利要求10-21中任一項所述的應用，其特徵在於，所述鈣螯合劑選自檸檬酸鹽、檸檬酸、EDTA、EGTA及其混合物。23.如權利要求10-22中任一項所述的應用，其特徵在於，所述藥物組合物還包含藥用賦形劑。24.如權利要求23所述的應用，其特徵在於，所述藥用賦形劑選自無機緩衝物質、有機緩衝物質、無機鹽、有機鹽、粘度調節劑、溶劑、增溶劑、溶液加速劑、成鹽劑、粘度和稠度作用試劑、膠凝劑、乳化劑、增溶劑、潤溼劑、鋪展劑、抗氧化劑、防腐劑、填充劑和載體、滲透壓調節劑以及它們的混合物。25.如權利要求10-24中任一項所述的應用，其特徵在於，所述不含磷酸鹽的藥物組合物以溶液、滴劑、噴霧、混懸劑或乳劑、凝膠、軟膏或糊劑、粉末或顆粒、或片劑的形式存在。26.如權利要求10-25中任一項所述的應用，其特徵在於，所述不含磷酸鹽的藥物組合物不含莫沙維林、肝素、泛醇和/或泛酸。27.如權利要求10-26中任一項所述的應用，其特徵在於，所述不含磷酸鹽的藥物組合物不含另外的賦形劑。28.如權利要求10-27中任一項所述的應用，其特徵在於，所述不含磷酸鹽的藥物組合物包含至少一種鈣螯合劑和至少一種眼科相容的粘度調節劑以及任選的一種藥用賦形劑或多種藥用賦形劑。全文摘要本發明涉及一種不含右泛醇、鈣離子和磷酸鹽的藥物組合物，其包含至少一種鈣螯合劑和至少一種眼科相容的粘度調節劑以及任選的一種或多種藥用輔料。本發明還涉及鈣螯合劑和眼科相容的粘度調節劑在製備用於治療和/或預防上皮缺損的不含磷酸鹽的藥物組合物中的應用。文檔編號A61K31/00GK101312711SQ200680043135公開日2008年11月26日申請日期2006年11月17日優先權日2005年11月17日發明者D·格羅斯,F·霍爾澤申請人:烏爾薩法姆藥物兩合公司