一種婦炎康丸的檢測方法
2023-05-28 00:38:01
專利名稱：一種婦炎康丸的檢測方法
技術領域：
本發明屬於中藥檢測領域，具體涉及一種婦炎康丸的檢測方法，更具體地說是檢測婦炎康丸中苦參鹼和氧化苦參鹼的總量。
背景技術：
婦炎康丸以丹參、赤芍、當歸、延胡索、川楝子、香附、三稜、莪朮、山藥、芡實、苦參、 黃柏、土茯苓等13味中藥組成，經過中藥材炮製、提取、濃縮、乾燥、粉碎、加入煉蜜製成水蜜丸。為純中藥製劑。方中丹參、赤芍、當歸活血化瘀，為君藥。延胡索、川楝子、香附合用行氣解鬱止痛，加之三稜、莪朮增強行氣止痛兼軟堅散結，山藥、芡實滋腎止帶，苦參、黃柏清熱燥溼，土茯苓解毒利溼，諸藥配合可達到活血化瘀，清熱解毒、軟堅散結、止痛利溼的目的，能消除炎症，解除病人腰腹疼痛，減少白帶，有治癒慢性盆腔炎等婦科炎症的療效。具有活血化瘀，堅散結，清熱解毒，消炎鎮痛的功能。用於慢性附件炎、盆腔炎、陰道炎、膀胱炎、 慢性闌尾炎、尿路感染。苦參本品為豆科植物苦參Sophora flavescens Ait.的乾燥根。性味苦，寒。歸經歸心、肝、胃、大腸、膀胱經。功能主治清熱燥溼，殺蟲，利尿。用於熱痢，便血，黃疸尿閉，赤白帶下，陰腫陰癢， 溼疹，溼瘡，皮膚瘙癢，疥癬麻風；外治滴蟲性陰道炎。化學成份苦參中含有大量的生物鹼，其中含量最高的是苦參鹼和氧化苦參鹼，加總佔苦參藥材根幹總重的2% (其中大部分以氧化苦參鹼的形式存在)，同時還有其他的相近的生物鹼其中主要是槐果鹼(Sophocarpine，C15H22N20)，還含有少量白勺槐酉享 sophoranol,槐月安 sophoramine, 1 PjS M (Sophoridine) allomatrine,異苦參 1 (Iosmatrine)等其他生物鹼成分。藥理作用①利尿作用苦參煎劑及其中所含之苦參鹼給兔口服或注射，皆可產生利尿作用，尿量增加前即有鹽分排出之增多。但實驗中所用家兔之數目較少，又未敘述飲水控制之情況，因而有人認為需進一步研究。②抗病原體作用煎劑在試管中，高濃度(1 100)對結核桿菌有抑制作用。煎劑(8% )、水浸劑 (1 ；3)在體外對某些常見的皮膚真菌有不同程度的抑制作用。醇浸膏在體外尚有抗滴蟲作用，強度弱於黃連，而與蛇床子相近。③其他作用苦參鹼注射於家兔，發現中樞神經麻痺現象，同時發生痙攣，終則呼吸停止而死。 注射於青蛙，初呈興奮，繼則麻痺，呼吸變為緩慢而不規則，最後發生痙攣，以致呼吸停止而死；其痙攣的發作，恐系起因於脊髓反射的亢進。對家兔的最小致死量為0. 4克/公斤。
從上述文獻報導表明，苦參及其有效成分生物鹼的藥理作用與婦炎康丸的臨床作用是相一致的。嚴格控制婦炎康丸中苦參有效成分的含量，是保證產品質量的關鍵。在現有國家食品藥品監督管理局婦炎康丸試行標準中〔WS-10394-(ZD-0394)-2002〕，採用薄層色譜法測定苦參鹼的含量，方法誤差較大，含量結果不準確。另外苦參中的生物鹼含量最高的是苦參鹼和氧化苦參鹼，佔苦參藥材根幹總重的2%，其中大部分以氧化苦參鹼的形式存在，只測定苦參鹼，不能準確說明苦參生物鹼的含量。
發明內容
本發明提供一種婦炎康丸的檢測方法，以解決只測定苦參鹼，不能準確說明苦參生物鹼的含量，導致含量結果不準確的問題。採用高效液相色譜法測定婦炎康丸苦參鹼和氧化苦參鹼的總量。本發明包括下列步驟(a)供試品溶液製備取本品50g，研成細粉，取5 15g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入三氯甲烷50ml，濃氨試液0. 5 3. 0ml，密塞，稱定重量，放置M小時，超聲處理30 90分鐘，功率250W，頻率40kHz，放置室溫，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液IOml蒸乾，殘渣用乙腈無水乙醇=80 20混合溶液適量分次使溶解並移至IOml量瓶中，加乙腈無水乙醇=80 20、混合溶液稀釋至刻度，搖勻，即得；(b)色譜條件色譜柱為氨基鍵合矽膠柱4. 6mmX 250mm ；檢測器為紫外檢測器；乙腈無水乙醇3%磷酸溶液=70 90 15 5 15 5為流動相；檢測波長為220nm， 理論塔板數按氧化苦參鹼峰計算應不低於2500 ；(c)對照品溶液製備取苦參鹼對照品、氧化苦參鹼對照品適量，精密稱定，加乙腈-無水乙醇=80 20混合溶液溶解，分別製成每Iml含苦參鹼0. 05 0. 15mg,含氧化苦參鹼0. 1 0. 3mg的溶液，即得；(d)測定方法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 15ul，注入液相色譜儀，測定，按外標法計算，即得。本發明的一種實施方式是，包括如下步驟(a)供試品溶液製備取本品50g，研成細粉，取10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中， 精密加入三氯甲烷50ml，濃氨試液Iml，密塞，稱定重量，放置M小時，超聲處理60分鐘，功率250W，頻率40kHz，放置室溫，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液IOml蒸乾，殘渣用乙腈無水乙醇=80 20混合溶液適量分次使溶解並移至 IOml量瓶中，加乙腈無水乙醇=80 20混合溶液稀釋至刻度，搖勻，即得；(b)色譜條件色譜柱為氨基鍵合矽膠柱4. 6mmX 250mm ；檢測器為紫外檢測器；乙腈無水乙醇3%磷酸溶液=80 10 10為流動相；檢測波長為220nm，理論塔板數按氧化苦參鹼峰計算應不低於2500 ；(c)對照品溶液製備取苦參鹼對照品、氧化苦參鹼對照品適量，精密稱定，加乙腈無水乙醇=80 20混合溶液溶解，分別製成每Iml含苦參鹼O.lmg，含氧化苦參鹼 0. 2mg的溶液，即得；(d)測定方法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，按外標法計算，即得。本發明方法學研究表明，採用高效液相色譜法測定本品中苦參鹼和氧化苦參鹼的總量，具有較好重現性、穩定性和精密度。本發明是通過大量試驗所得到的切實可行的方法，本方法具有操作簡便、穩定、精密度高、重現性好、易掌握的特點，達到了有效控制藥物質量的發明目的。
具體實施例方式對於本領域技術人員而言，根據本發明所公開的技術內容，本領域技術人員將很清楚本發明的其它實施方案，本發明實施例僅作為示例。在不違反本發明主旨及範圍的情況下，可對本發明進行各種改變和改進，但只要使用本發明所述的檢測方法，均在本發明的保護範圍之內。實驗例婦炎康丸中苦參鹼和氧化苦參鹼的總量測定方法的建立1.方法1. 1儀器與試劑LC-10A高效液相色譜儀；紫外檢測器；N2000工作站；無水乙醇為色譜純，水為超純水，其他試劑為分析純。1. 2色譜條件色譜柱氨基鍵合矽膠柱(4. 6mmX250mm)；乙腈無水乙醇3%磷酸溶液=80 10 10為流動相；檢測波長為220nm，理論塔板數按氧化苦參鹼峰計算應不低於2000。2.對照品的來源及純度苦參鹼與氧化苦參鹼對照品，購自中國藥品生物製品檢定所，採用反相高效液相色譜法歸一化法標定，色譜條件同上，進樣量20μ 1，純度為苦參鹼 99. 34 %，氧化苦參鹼99. 42 %。3.方法學考察3. 1流動相的選擇比較流動相(1)乙腈無水乙醇=75 25 ； (2)乙腈無水乙醇=80 20 ； (3)乙腈無水乙醇3%磷酸溶液=80 10 20 ； (4)乙腈無水乙醇3%磷酸溶液=80 10 10，結果流動相(3)、(4)中苦參鹼和氧化苦參鹼峰達到基線分離，分離度很好。但考慮到磷酸鹽含的越多越汙染色譜柱，故選用乙腈無水乙醇3% 磷酸溶液=80 10 10。3. 2測定波長的選擇經測定苦參鹼與氧化苦參鹼的紫外吸收光譜，苦參鹼最大吸收波長為212nm，氧化苦參鹼最大吸收波長為206nm，屬於末端吸收，在此波長處，基線嚴重漂移，參考2010版藥典二部188頁苦參的含量測定條件選擇220nm作為檢測波長。3. 3系統適用性試驗根據上述確定的條件，得到苦參鹼對照品及樣品的色譜圖，計算其理論塔板數N = 2500。3. 4供試品提取條件的選擇試驗參考2010年版藥典苦參的含量測定的樣品溶解方法，分別採用三氯甲烷50ml，濃氨試液Iml溶解，濃氨試液^iil、:3ml、0. 5ml，結果見表1。表1不同溶解方法的樣品含量測定
權利要求
1.一種婦炎康丸的檢測方法，其特徵在於包括下列步驟(a)供試品溶液製備取本品50g，研成細粉，取5 15g，精密稱定，置具塞錐形瓶中， 精密加入三氯甲烷50ml，濃氨試液0. 5 3. 0ml，密塞，稱定重量，放置M小時，超聲處理30 90分鐘，功率250W，頻率40kHz，放置室溫，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液IOml蒸乾，殘渣用乙腈無水乙醇=80 20混合溶液適量分次使溶解並移至IOml量瓶中，加乙腈無水乙醇=80 20混合溶液稀釋至刻度，搖勻，即得；(b)色譜條件色譜柱為氨基鍵合矽膠柱4.6mmX 250mm ；檢測器為紫外檢測器；乙腈 無水乙醇3%磷酸溶液=70 90 15^5 15^5為流動相；檢測波長為220nm，理論塔板數按氧化苦參鹼峰計算應不低於2500 ；(c)對照品溶液製備取苦參鹼對照品、氧化苦參鹼對照品適量，精密稱定，加乙腈 無水乙醇=80 20混合溶液溶解，分別製成每Iml含苦參鹼0. 05、. 15mg,含氧化苦參鹼 0. Γ0. 3mg的溶液，即得；(d)測定方法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 15ul，注入液相色譜儀， 測定，按外標法計算，即得。
2.如權利要求1所述的婦炎康丸的檢測方法，其特徵包括如下步驟(a)供試品溶液製備取本品50g，研成細粉，取10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入三氯甲烷50ml，濃氨試液1ml，密塞，稱定重量，放置M小時，超聲處理60分鐘，功率 250W,頻率40kHz，放置室溫，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液IOml蒸乾，殘渣用乙腈無水乙醇=80 20混合溶液適量分次使溶解並移至IOml 量瓶中，加乙腈無水乙醇=80 20混合溶液稀釋至刻度，搖勻，即得；(b)色譜條件色譜柱為氨基鍵合矽膠柱4.6mmX 250mm ；檢測器為紫外檢測器；乙腈 無水乙醇3%磷酸溶液=80 10 :10為流動相；檢測波長為220nm，理論塔板數按氧化苦參鹼峰計算應不低於2500 ；(c)對照品溶液製備取苦參鹼對照品、氧化苦參鹼對照品適量，精密稱定，加乙腈 無水乙醇=80 20混合溶液溶解，分別製成每Iml含苦參鹼0. Img,含氧化苦參鹼0. 2mg的溶液，即得；(d)測定方法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，按外標法計算，即得。
全文摘要
本發明涉及一種婦炎康丸的檢測方法，屬於中藥檢測領域。包括下列步驟供試品溶液製備色譜條件色譜柱為氨基鍵合矽膠柱，檢測器為紫外檢測器，乙腈-無水乙醇-3%磷酸溶液為流動相，檢測波長為220nm，測定方法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，按外標法計算，即得。這種方法具有操作簡便、穩定、精密度高、重現性好、易掌握的特點，達到了有效控制藥物質量的發明目的。
文檔編號G01N30/02GK102359991SQ20111021648
公開日2012年2月22日 申請日期2011年7月30日 優先權日2011年7月30日
發明者於翠霞, 王旭佳, 蔡蕾 申請人:吉林省中研藥業有限公司