重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑及其製備方法
2023-05-28 01:24:21 2
重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑及其製備方法
【專利摘要】本發明提供了一種重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑及其製備方法。所述的重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑，其特徵在於，含有重組人角質細胞生長因子-2，霧化後粒徑小於5um的微粒大於80％。本發明的KGF-2噴霧製劑穩定好，霧化顆粒粒徑符合2010版藥典規定，霧化前後KGF-2總含量無明顯差異，對KGF-2活性無影響，通過此噴霧製劑重組人角質細胞生長因子-2(簡稱KGF-2)可直接達到肺部迅速發揮藥效，降低全身毒性，能提高生物利用度，具有高經濟效益。
【專利說明】重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑及其製備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及重組人角質細胞生長因子_2 (KGF-2)的噴霧製劑的研究，屬於藥物劑 型【技術領域】。
【背景技術】
[0002] 吸入療法歷史悠久，現代吸入療法可追溯至上世紀50年代。1956年由Riker實 驗室開發上市首個壓力定量吸入劑，Medihaler-EpiTM含腎上腺素，Medihaler-IsoTM含異 內腎上腺素。由於肺部具有巨大的肺泡表面積、豐富的毛細血管和極小的轉運距離，藥物經 肺吸收後可迅速發揮藥效，並可避免首過效應，因而吸入治療被WHO和多國政府推薦為哮 喘、慢性阻塞性肺病（COPD)等呼吸道疾病的首選療法。霧化吸入劑足將藥物的水溶液或 混懸液經霧化器分散成懸浮於氣體中的液滴或固體微粒，通過吸入的方式沉積丁呼吸道和 (或）肺部，目前，廣泛用於治療多種呼吸道疾病，特別是哮喘或COPD的兒童和老年患者，以 及不適用其他吸入製劑者。霧化吸入劑所使用的霧化器類犁較多，包括噴射霧化器、超聲霧 化器和振動篩霧化器等，此外一些新型的霧化器也在研究或處於臨床試驗中。
[0003] 人角質細胞生長因子（Keratinocyte growth factor-2，KGF-2)又叫做成纖維細 胞生長因子 _1〇 (Fibroblast Growth Factor-10, FGF-10) [9]，是 1996 年發現的一種促進上 皮細胞生長的細胞因子。研究表明，KGF-2 mRNA的表達主要是在胚胎的發育過程之中，以及 在特定的成年組織如肺、前列腺。在胚胎發育過程中KGF-2是起始肢芽形成並促進其生長 的關鍵性細胞因子。KGF-2 [10]由208個胺基酸組成，N端有39個胺基酸的疏水信號肽，成 熟蛋白有169個胺基酸（40-208aa)，理論分子量為19. 3kDa，KGF-2對酸和熱不穩定，對肝素 具有較強的親和作用。其特異性的結合於靶細胞表面的酪氨酸激酶受體FGFR2IIIb (KGFR)、 FGFRl而觸發信號傳導，從而發揮生理作用，刺激上皮細胞再生、分化和遷移（參見圖1)。體 外活性研究表明，角質細胞生長因子-2(KGF-2)在0. l-5nM(2-100ng/mL)濃度時角質上皮 細胞Bal/MK具有顯著的促分裂作用，對成纖維細胞NIH3T3無作用。
[0004] 重組人角質細胞生長因子-2用於治療和預防由任何因素造成的急性肺損傷/呼 吸窘迫症候群，包括特種醫學，如高原性肺損傷，軍事醫學，運動醫學和其他疾病致肺損傷/ 呼吸窘迫症候群。以上疾病可以是亞臨床、輕度、中度、重度和危及生命的肺損傷。研究發現 KGF-2通過保持肺泡表面活性物質動態平衡，促進細胞增生和遷移修復肺損傷，它在保護氣 血屏障完整，維持細胞骨架和細胞間連接穩態，促進肺水清除，降低或避免肺泡-毛細血管 應激衰竭中有重要作用。本專利的 申請人:已獲得了重組人角質細胞生長因子-2治療急性 肺損傷/呼吸窘迫症候群的專利授權。
[0005] 雖然噴霧製劑是一種常見的劑型，但由於KGF-2本身的特性，目前尚未見KGF-2開 發出噴霧製劑，本發明正填補了這項空白。由於KGF-2有一定的粘滯性，製成霧化劑需要考 慮溶液的理化特性，PH，穩定性，粘滯性，以及實際霧化後的顆粒直徑。只有直徑小於3-5微 米的顆粒才能到達小的氣道，直徑小於2. 5微米的才能到達肺泡。所以，只有特殊工藝的配 方才能達到這一要求。我們成功開發出專門配方的試劑，需要一定的PH，粘度，水份含量，賦 形劑等，經霧化後形成直徑2-5微米的顆粒，可以到達小氣道和肺泡。
【發明內容】
[0006] 本發明的目的在於提供一種重組人角質細胞生長因子_2噴霧製劑及其製備方 法。
[0007] 為了達到上述目的，本發明提供了一種重組人角質細胞生長因子_2噴霧製劑，其 特徵在於，含有重組人角質細胞生長因子-2,霧化後粒徑小於5um的微粒大於80%。
[0008] 優選地，所述的重組人角質細胞生長因子-2的濃度為0· 2_9mg/ml。
[0009] 本發明還提供了上述的重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑的製備方法，其特 徵在於，使用注射用水、生理鹽水、枸椽酸溶液或磷酸鹽緩衝液溶解重組人角質細胞生長因 子-2得到重組人角質細胞生長因子-2溶液，使用NB-21IC霧化器或403C型霧化器，採用 壓縮空氣或高壓氧進行霧化，得到重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑。
[0010] 優選地，所述的重組人角質細胞生長因子_2溶液中還含有穩定劑。
[0011] 更優選地，所述的穩定劑為EDTA、蔗糖和甘露醇中的至少一種。
[0012] 優選地，所述的重組人角質細胞生長因子_2溶液中還含有氯化鈉。所述的氯化鈉 用於調整滲透壓。
[0013] 所述重組人角質細胞生長因子-2(KGF-2)具有生物活性，對來源於內胚層、中胚 層和外胚層的細胞，如上皮細胞、真皮細胞、成纖維細胞、內皮細胞，幹細胞等有調節、修復 和再生作用。
[0014] 所述噴霧劑主要用於任何因素造成的肺損傷和/或肺水腫，包括發生在任何年齡 段，如成人、兒童等的亞臨床、輕度、中度、重度和危及生命的肺部損傷，急性、亞急性和慢性 的肺部損傷，特種醫學疾病致肺部損傷，如航空、航天、航海、潛水等，特殊地理氣候致肺部 損傷，如極地、冷環境、熱環境等，軍事醫學疾病致肺部損傷，如核輻射、爆炸與投射物及其 他（雷射、振動、電磁福射、聲損傷等）和宇宙保障等，運動醫學疾病致肺部損傷，如跑步、 遊泳等，化學中毒、生物危害、人獸接觸、特殊作業、災難意外等致肺部損傷，誤吸（如腐蝕 性液體或氣體）、溺水、感染、（如細菌、病毒、真菌、分支桿菌、立克次體、卡氏肺孢子蟲等）、 炎症、藥物和化學品致肺部損傷，創傷，敗血症、臟器出血、反覆輸血、心肺分流、血栓栓塞、 全身各器官病變致肺部損傷，瀰漫性血管內凝血、血栓性血小板減少性紫癜、溶血尿毒綜合 症、熱射病和其他血管炎症性綜合症致肺部損傷，代謝性疾病、酸鹼平衡紊亂、尿毒症、臟器 移植、腫瘤及併發症致肺部損傷，尤其是肺損傷/急性呼吸窘迫症候群、高原性肺水腫、高 氧致肺損傷、化療藥物引起的肺損傷和肺移植後原發性肺功能不全，以及呼吸道損傷。
[0015] 與現有技術相比，本發明的有益效果是：
[0016] 本發明的KGF-2噴霧製劑穩定好，霧化顆粒粒徑符合2010版藥典規定，霧化前後 KGF-2總含量無明顯差異，通過此噴霧製劑重組人角質細胞生長因子_2(簡稱KGF-2)可直 接達到肺部迅速發揮藥效，降低全身毒性，能提高生物利用度，具有高經濟效益。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0017] 圖1為高壓氧條件下KGF-2經西恩牌NB-211C霧化粒徑分布圖。
[0018] 圖2為高壓氧條件下KGF-2經魚躍牌403C霧化粒徑分布圖。
[0019] 圖3為KGF-2最大噴霧濃度粒徑分布圖；
【具體實施方式】
[0020] 下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明 而不用於限制本發明的範圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之後，本領域技術人 員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落於本申請所附權利要求書所限定 的範圍。
[0021] 實施例1
[0022] KGF-2通過西恩牌NB-21IC霧化器霧化：
[0023] 由上海新生源醫藥集團有限公司提供的重組人角質細胞生長因子-2樣品，Img KGF-2樣品添加氯化鈉：0. 85mg、EDTA :0. 286mg、甘露醇：15mg、蔗糖：35mg。用注射器抽取 注射用水5ml，注入KGF-2藥物瓶中，振搖使溶解，再將瓶中藥液用注射器全部抽至配件A2 的瓶中；接通霧化器，開啟霧化器開關，至霧化噴霧穩定在壓力〇. 2Mpa條件下1分鐘後開始 粒度檢測，採用WinnerfllXP噴霧雷射粒度分析儀儀器檢測果壓縮空氣及高壓氧霧化後粒 徑小於5um的分別為87. 4% (如圖1所示）、82. 6%，大於中國2010版藥典規定的80%要 求。
[0024] 霧化前後pH、蛋白含量無發生明顯變化，如下表。
[0025]
【權利要求】
1. 一種重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑，其特徵在於，含有重組人角質細胞生長 因子_2,霧化後粒徑小於5um的微粒大於80%。
2. 如權利要求1所述的重組人角質細胞生長因子_2噴霧製劑，其特徵在於，所述的重 組人角質細胞生長因子-2的濃度為0. 2-9mg/ml。
3. 權利要求1或2所述的重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑的製備方法，其特徵在 於，使用注射用水、生理鹽水、枸椽酸溶液或磷酸鹽緩衝液溶解重組人角質細胞生長因子-2 得到重組人角質細胞生長因子-2溶液，使用NB-211C霧化器或403C型霧化器，採用壓縮空 氣或高壓氧進行霧化，得到重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑。
4. 如權利要求3所述的重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑的製備方法，其特徵在 於，所述的重組人角質細胞生長因子-2溶液中還含有穩定劑。
5. 如權利要求4所述的重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑的製備方法，其特徵在 於，所述的穩定劑為EDTA、蔗糖和甘露醇中的至少一種。
6. 如權利要求3所述的重組人角質細胞生長因子-2噴霧製劑的製備方法，其特徵在 於，所述的重組人角質細胞生長因子-2溶液中還含有氯化鈉。
【文檔編號】A61K38/18GK104338120SQ201410490324
【公開日】2015年2月11日 申請日期:2014年9月23日 優先權日:2014年9月23日
【發明者】宋元林, 白春學, 於洪亮, 陳佳佳, 袁勝峰, 黃陽斌, 周建, 陳翠翠, 童琳, 佘君, 王琴, 馮娜娜, 李華茵, 蔣進軍, 畢晶 申請人:復旦大學附屬中山醫院