乾式分析元件的製作方法

2023-07-01 02:08:36

專利名稱：：乾式分析元件的製作方法
技術領域：
：本發明涉及能夠迅速/簡便地測定痕量樣品溶液中的生化物質的乾式分析元件。
背景技術：
：作為用於測定活體內的生化物質、酶和其它物質的乾式分析元件(包括多層分析元件、乾式分析元件以及多層分析裝置所有這些)，例如，在專利文獻1和專利文獻2中描述了這些技術。這些技術涉及用於對生物樣品(例如血液、淋巴液、腦脊髓液或尿)中所含有的成分進行定量分析的乾式分析元件。然而，在活體內或活體外的極大量的生物合成反應(不僅涉及生物樣品中的常規生化物質、酶等)中，都涉及焦磷酸的釋放和焦磷酸的分解。鑑於此，當從熱力學角度研究生物合成反應時，對焦磷酸進行測定是有效的。例如，由DNA聚合酶催化脫氧核苷三磷酸聚合來合成核酸。在該步驟中，焦磷酸作為核酸合成的副產物被釋放。在核酸合成過程中，從能量角度而言，焦磷酸的釋放是很重要的。此外，通過檢測焦磷酸來確認核酸合成是否進行也是重要的。例如，對於核酸擴增反應後的反應溶液，還通常實施以下的處理。通過測定焦磷酸來確認擴增反應是否實際上發生。用於測定活體內或活體外的此類液體樣品中的焦磷酸的乾式分析元件技術在(例如)專利文獻3中有所描述。該技術如下所述。在乾式分析元件中，焦磷酸(PPi)在無機焦磷酸酶(PPase)的作用下被轉化為無機磷酸(Pi)。無機磷酸(Pi)通過嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)與黃嘌呤核苷或次黃嘌呤核苷反應。所產生的黃嘌呤或次黃嘌呤被黃嘌吟氧化酶(XOD)氧化，從而形成尿酸。利用在該氧化過程中產生的過氧化氫(H202)、通過過氧化物酶(POD)的作用使成色劑(染料前體，例如隱色染料)顯色，並通過比色法測定該色度。另外，作為用於測定焦磷酸的反應體系，以下的過程也是已知的。在生成黃嘌呤或次黃嘌呤的反應過程中和反應之後，例如，可以使用心肌黃酶(DI)和在黃嘌呤脫氫酶(XDH)作用下生成的NADH使成色劑(例如，甲臘型染料，如硝基四唑藍)顯色，並通過比色法測定該色度。本文中可用的乾式分析元件以這樣的方式構建將一層或多層功能性層設置在透明的支持體上。使檢測試劑被包含在至少一層(或多層)中。由此，在滴加既定量的液體樣品之後，通過分析元件外部的反射光或透射光對層中反應所得的染料進行比色法測定。在滴加既定量的液體樣品之後，將乾式分析元件保持在既定的溫度下(溫育)，以便使顯色反應充分進行。然後，(例如)照明光從透明支持體一側進行輻照。由此，測量特定波長區域的反射光的量或透射光的量，從而確定反射光密度或透射光密度。然後，根據先前測定的標準曲線進行定量分析。在(例如)專利文獻3所述的焦磷酸測定用的乾式分析元件或專利文獻4所述的乾式分析元件中，在相關
技術領域：
中，所述乾式分析元件除了具有包含顯色反應所需的試劑(如酶、顯色物質或基質)的層和透明支持體以外，還設置有鋪展層，從而達到容納所滴加的液體樣品、並使該液體樣品迅速鋪展的目的。在這種情況下，作為鋪展層，可以使用膜過濾器(刷狀聚合物)、三維網格顆粒狀結構物、織物等，其中，所述的三維網格顆粒狀結構物含有通過在水的作用下不會發生溶脹的聚合物粘合劑以點接觸方式彼此接觸而形成的聚合物珠子。專利文獻1:JP-A-60-82859專利文獻2:JP-A-60-222770專利文獻3:JP-A-2004-156983專利文獻4:JP-A-2003-270249
發明內容本發明待解決的問題然而，當按照專利文獻3和4的方式設置含有所述物質的鋪展層、並對其進行透射光光度測定時，入射到乾式分析元件內部的光會受到衰減/散射等的影響。這會妨礙進行精確的測定。另一方面，取出鋪展層對透射光光度測定是有利的。然而，此時被滴加到功能性層中的液體樣品的液體滲透速率降低，這不適於進行快速的定量分析。本發明的目的是提供這樣的乾式分析元件能夠迅速、簡便地分析(例如)液體樣品中的生物材料，並且不需要設置鋪展層。解決所述問題的方法為了解決以上問題，本發明人進行了密切的研究。結果，他們獲得以下發現。通過使凝膠薄膜中含有吸水性聚合物，使得液體樣品進入凝膠薄膜的滲透速度即使在不設有鋪展層的條件下也會加快。由此，可以提供能夠實施快速分析的乾式分析元件。從而完成本發明。艮卩，本發明為如下所述(1)一種乾式分析元件，該乾式分析元件在透明支持體上具有試劑層，該試劑層具有包含至少一種吸水性聚合物的凝膠薄膜。(2)以上(1)所述的乾式分析元件，其中，在所述的試劑層中，在每單位面積上，所述吸水性聚合物的量為凝膠的量的至多10質量％。(3)以上(1)或(2)所述的乾式分析元件，其中，所述試劑層中的凝膠含量為2g/r^到100g/m2。(4)以上(1)到(3)中任意一項所述的乾式分析元件，其中，所述試劑層包含至少一種表面活性劑。(5)以上(4)所述的乾式分析元件，其中，在所述的試劑層中，在每單位面積上，所述表面活性劑的量為凝膠的量的至多80質量％。(6)以上(4)或(5)所述的乾式分析元件，其中，所述表面活性劑包括含矽化合物。(7)以上(1)到(6)中任意一項所述的乾式分析元件，其中，所述吸水性聚合物為選自以下物質中的至少一種聚合物化合物聚丙烯酸鹽類、支鏈澱粉類、聚乙烯醇類、醋酸乙烯酯共聚物、馬來酐共聚物、羧甲基纖維素類和聚環氧乙烷類。(8)以上(1)到(7)中任意一項所述的乾式分析元件，其中，所述試劑層包含用於將焦磷酸轉化為無機磷酸的試劑；和試劑群，該試劑群用於進行與所轉化的無機磷酸的量相關的顯色反應。(9)以上(8)所述的乾式分析元件，其中，所述試劑層包含黃嘌呤核苷或次黃嘌呤核苷、無機焦磷酸酶、嘌呤核苷磷酸化酶、黃嘌呤氧化酶、過氧化物酶和成色劑。(10)以上(9)所述的乾式分析元件，其中，所述成色劑為隱色型染料。(11)以上(8)所述的乾式分析元件，其中，所述試劑層包含黃嘌呤核苷或次黃嘌呤核苷、無機焦磷酸酶、嘌呤核苷磷酸化酶、黃嘌呤脫氫酶、心肌黃酶和成色劑。(12)以上(11)所述的乾式分析元件，其中，所述成色劑為甲謄型染料。(13)以上(8)到(12)中任意一項所述的乾式分析元件，其中，所述的試劑層包含鎂離子。(14)以上(1)到(13)中任意一項所述的乾式分析元件，該分析元件通過利用反射光光度測定或透射光光度測定的比色法對生物物質進行測定，在該比色法中，將含有生物物質的液體樣品滴加到所述試劑層上，以使該試劑層顯色。本發明的優點根據本發明，所述試劑層具有包含至少一種吸水性聚合物的凝膠薄膜。因此，液體樣品在吸水性聚合物的作用下迅速地滲透到凝膠薄膜中。由此，可以迅速、簡便地對(例如)液體樣品中的生物物質進行定量分析。實施本發明的最佳方式對本發明的乾式分析元件的待測對象沒有特別限定，只要其是生物物質即可。待測對象的例子包括焦磷酸、葡萄糖、GPT、GOT、尿酸、總膽固醇、中性脂肪和白蛋白。當焦磷酸為待測定對象時，可以利用(例如)以下反應式1或反應式2所示的反應原理。在下式(1)或式(2)所示的反應體系中，焦磷酸(PPi)在無機焦磷酸酶(PPase)的作用下被轉化為無機磷酸(Pi)。無機磷酸(Pi)通過嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)與黃嘌呤核苷或次黃嘌呤核苷反應。所產生的黃嘌呤或次黃嘌呤被黃嘌呤氧化酶(XOD)氧化，從而形成尿酸。利用在該氧化過程中產生的過氧化氫(H202)，通過過氧化物酶(POD)的作用使成色劑顯色，並通過比色法測定該色度。順便提及，作為成色劑，可以舉出N,N-二取代苯胺(例如4-氨基安替比林)、苯酚或萘酚和隱色染料。在這些物質中，染料前體(例如隱色染料)是優選的。或者，如式3所示，以下的方法也是可行的。在生成黃嘌呤或次黃嘌呤的反應過程中和反應之後，例如，可以使用心肌黃酶(DI)和由NAD在黃嘌呤脫氫酶(XDH)作用下還原生成的NADH使成色劑顯色，並通過比色法測定該色度。順便提及，作為成色劑，可以舉出甲臘型染料。在該甲謄型染料中，硝基四唑藍等是優選的。式lformulaseeoriginaldocumentpage8式2焦磷酸酶PPi+H20~~^2Pi核糖-1-磷酸次黃嘌呤核苷次黃嘌呤PNPXOD黃嘌呤2染料前體尿酸POD2染料式3焦磷酸酶PPi+H20-2Pi核糖-1-磷酸黃嘌呤核苷XDH黃嘌呤PNP尿酸NADMADHNAD染料前體染料DI或者，用於測定焦磷酸的其它顯色反應也是可用的。例如，在用無機焦憐酸酶使焦磷酸轉化為無機磷酸之後，可以使用用於測定無機磷酸的己知的顯色反應。對於在轉化為無機磷酸之後的反應步驟中和反應步驟之後，如專利文獻3所述，可以採用生物化學檢測領域中已知的無機磷酸的測定方法進行與無機磷酸的量相關的顯色反應。而且，對於除了焦磷酸以外的其它生物物質而言，可以通過將用於測定各種物質的已知的顯色反應與本發明的乾式分析元件相結合，來進行簡便/快速的測定。至於除了焦磷酸以外的其它生物物質，以下文獻可以作為參考。葡萄糖JP-A-1-231897GPT:JP-A-57-144996GOT:JP-A-62-195299尿酸JP-A-63-219400總膽固醇JP-A-2-181656中性脂肪JP-A-63-119695白蛋白JP-A-62-137564對於本發明的乾式分析元件，使用乾式方法。將元件保存/貯存在乾燥狀態下直到進行分析時為止。因此，不需要如所謂的溼法那樣在使用試劑之前對試劑進行製備。此外，試劑在乾燥狀態下通常更安全，因此，幹法在簡便性/快速性方面優於溼法。另外，幹法作為能夠對痕量液體樣品快速地進行高精確度的檢測的方法也是優異的。本發明的乾式分析元件可以採用與已知的多種乾式分析元件相同的層結構。乾式分析元件可以是多層結構，該多層結構除了具有含有用於測定生物物質的試劑群(包括諸如酶和基質之類的試劑)的試劑層以外，還具有透明支持體、檢測層、粘合層、吸水層、底塗層、透氣層、緩衝層和其它層。在(例如)JP-A-49-53888(對應於美國專利No.3,992,158)、JP-A-51-40191(對應於美國專利No.4,402,335)、JP-A-55-164356(對應於美國專利No.4,292,272)和JP-A-61-4959(對應於EPCNo.0166365A)的各自說明書中批露的那些作為此類乾式分析元件。當所述的乾式分析元件使用透光不透水的支持體時，其實際上可以採用以下結構。但是，本發明的內容不限於此。(1)在支持體上具有試劑層的結構；(2)在支持體上依次具有檢測層和試劑層的結構；(3)在支持體上依次具有第二試劑層和第一試劑層的結構；或是(4)在支持體上依次具有檢測層、第二試劑層和第一試劑層的結構。如(3)項或(4)項所述，試劑層可具有多個不同的層。例如，當以焦磷酸作為待測對象時，可以在第一試劑層上進行焦磷酸酶的反應和PNP反應，在第二試劑層上進行XOD反應和POD反應。可供選用的另外一種方式是，可以在第一試劑層上進行焦磷酸酶的反應、PNP反應和XOD反應，在第二試劑層上進行POD反應。下文中，將詳細地對各層進行描述。但是，本發明不限於此。支持體任何材料都是可用的。但是，透光不透水的支持體為優選。用於透光不透水的支持體的優選材料為聚對苯二甲酸乙二醇酯和聚苯乙烯。為了使親水層牢固地粘附在支持體上，通常在支持體的表面上設置底塗層，或者對支持體進行親水化處理。對支持體的厚度並沒有特別限定。但是，合適的厚度為約10pm到1000pm、優選為50|iim至U300(im。檢測層檢測層含有至少一種成色劑。當待測對象為焦磷酸時，顯色反應是對應於焦磷酸的量進行的。檢測層和試劑層可以互相分開。但是，檢測層和試劑層也可以是一體的。此外，除了成色劑以外，檢測層可以含有用於實現顯色反應的試劑群(例如酶)。對形成檢測層的材料沒有特別限定。但是，凝膠是優選合適的。對檢測層的厚度沒有特別限定。但是，當將檢測層設置為塗層形式時，其合適的厚度為約1pm到約500pm、優選為約10pm到約100pm。在通過塗敷以外的其它方法形成多層結構(例如通過層疊來形成多層結構)的情況下，其厚度可在幾十微米到幾百微米的範圍內發生較大的變化。檢測層中的凝膠的量為2g/m2到100g/m2、優選為5g/m2到50g/m2。試劑層試劑層具有包含至少一種吸水性聚合物的凝膠薄膜。試劑層含有(例如)上述用於將焦磷酸轉化為無機磷酸的試劑；以及試劑群，該試劑群用於進行與所轉化的無機磷酸的量相關的顯色反應。作為試劑層中所包含的凝膠，還可以使用衍生物(例如鄰苯二甲酸酯化凝膠)。對試劑層的厚度沒有特別限定。然而，當將試劑層設置為塗層形式時，其合適的厚度為約1到約500pm、優選為約10pm到約100pm。在通過塗敷以外的其它方法形成多層結構(例如通過層疊來形成多層結構)的情況下，其厚度可在幾十微米到幾百微米的範圍內發生較大的變化。試劑層中的凝膠的量為2g/n^到100g/m2、優選為5g/m2到50g/m2。將吸水性聚合物加入試劑層中，使得試劑層一旦保持有所滴加的液體樣品，接著就能使液體樣品迅速地滲透到試劑層中。鑑於此，使用本發明的乾式分析元件，即使在試劑層上不設有可以使上述含有生物樣品的液體樣品擴散/滲透的鋪展層時，也可以快速地進行測定。關於吸水性聚合物，可以使用通常可使用的聚合物，例如聚丙烯酸鹽類、支鏈澱粉類、聚乙烯醇類、醋酸乙烯酯共聚物、馬來酐共聚物、羧甲基纖維素類和聚環氧乙烷類。然而，尤其優選聚丙烯酸鹽類聚合物。另外，可以使用由聚合方法和研磨方法中的一種方法製備的任何吸水性聚合物。關於吸水性聚合物的粒徑，優選使用中心粒徑為約10pm到約800pm的吸水性聚合物，更優選的是中心粒徑為約10pm到約100pm的吸水性聚合物。此外，經改性等處理的高度交聯型吸水性聚合物、或耐鹽性增強型吸水性聚合物也是可用的。在試劑層中，在每單位面積上，吸水性聚合物的用量為凝膠的量的至多10質量％。然而待加入的吸水性聚合物的量優選為0.1質量％或更多。在每單位面積上，待使用的吸水性聚合物的更優選的量為凝膠的量的1質量％到5質量％。為了增強吸水性聚合物在本發明中的效果(即，為了進一步增強一旦保持有液體樣品、接著就能使液體樣品迅速地滲透到試劑層中的效果)，可以將表面活性劑加入到試劑層中。具體而言，優選含矽的表面活性劑。此外，優選非反應性的聚醚改性的矽油作為表面活性劑。可以使用H丄.B.值為4到16的表面活性劑。然而，尤其優選H丄.B.值為7到12的表面改性劑。在試劑層中，在每單位面積上，表面活性劑的用量為凝膠的量的至多80質量％。然而待加入的表面活性劑的量優選為1質量％或更多。在每單位面積上，待使用的表面活性劑的更優選的量為凝膠的量的5質量％到50質量％。順便提及，還可以將含矽表面活性劑和其它表面活性劑組合使用。然而，在本發明中，試劑層中含有鎂離子是優選的，這是因為鎂離子會產生這樣的效果在滴加樣品後的第一階段中，使焦磷酸酶的反應平穩地進行。為了將鎂離子引入試劑層中，通常，只需將鎂鹽(例如MgCl2)和水包含在試劑層中即可。在試劑層中，在每單位面積上，鎂離子的含量優選為凝膠的量的1質量％到75質量％、更優選為凝膠的量的5質量％到55質量％。為了達到改善諸如塗敷性能、擴散性化合物的擴散性、以及反應性和耐貯性之類的各種性能的目的，除了所述的各種成分外，可以向試劑層中加入酶的活化劑和穩定劑、輔酶、表面活性劑、pH緩衝劑組合物、細粉末、抗氧化劑以及各種添加劑(包括有機物質或無機物質)。可以包含在試劑層中的緩衝劑的實例包括以下文獻所述的pH緩衝劑體系，所述文獻為由日本化學會編輯的《化學便覧基礎》(由丸善株式會社於1966年出版)，1312到1320頁；由R.M.C.Dawson等人編輯的DataforBiochemicalResearch,第二版(由牛津大學的Clarendon出版社在1969年出版)，476到508頁；Biochemistry,5，467到477頁(1966);禾口AnalyticalBiochemistry，104，300到310頁(1980)。pH緩衝劑體系的具體實例包括含有硼酸鹽的緩衝劑、含有檸檬酸或檸檬酸鹽的緩衝劑、含有甘氨酸的緩衝劑、含有N-二(羥乙基)甘氨酸的緩衝劑、含有HEPES的緩衝劑和Good's緩衝劑(如含有MES的緩衝劑)。順便提及，不能將含有磷酸鹽的緩衝劑用於檢測焦磷酸的乾式分析元件。可以按照以下方式設置試劑層根據在JP-B-53-21677(對應於美國專利No.3,992,158)、JP-A-55-164356(對應於美國專利No.4,292,272)'和JP-A-54-101398(對應於美國專利No.4,132,528)的各自說明書中所述的方法，將含有本發明中各種試劑的水溶液或水分散液塗敷在支持體或其它層上(例如檢測層)，並使其乾燥。順便提及，如上所述，試劑層可以包含多個不同的層。順便提及，根據本發明的乾式分析元件可以設有鋪展層或不設有鋪展層。但是，不設置鋪展層是所需要的，這是因為這樣有利於透射光光度測定。當設置鋪展層時，鋪展層可以由膜過濾器(刷狀聚合物)、三維網格顆粒狀結構物、織物等形式，其中，所述的三維網格顆粒狀結構物含有通過在水的作用下不會發生溶脹的聚合物粘合劑以點接觸方式彼此接觸而形成的聚合物珠子。可以通過在上述各專利說明書中所述的已知方法來製備本發明的乾式分析元件。將該乾式分析元件切成各邊長為約5mm到約30mm的正方形或具有大致相同尺寸的圓形等的既定的小片。將得到的小片存放於在JP-B-57-283331(對應於美國專利No.4,169,751)、JP-UM-A-56-142454(對應於美國專利No.4,387,990)、JP-A-57-63452、JP-UM-A-58-32350、JP-T-58-501144(本文所用的術語"JP-T"是指公開的PCT專利申請的日文翻譯)(對應於WO83/00391)等中所述的分析片(7，,K)框等內，並用作化學分析用分析片。可供選用的另外一種方式是，可採用以下的方式使用乾式分析元件將其容納在市售可得的96孔板(或孔數更多的板)的各孔的底部。此外，作為本發明的乾式分析元件，上述分析片形式的乾式分析元件是優選的。然而，根據預期目的，所述的乾式分析元件可以為小片形式或長的帶狀形式。另外，對於本發明的乾式分析元件，其切片可以以原樣形式使用。但是，它們也可以以這樣的形式被使用將其存放在盒子、存放箱或具有開口的容器中，或將它們貼附在或附著在外露的卡片上。本發明的乾式分析元件可以按照與所述的各個專利說明書中所述的操作方法相同的操作方法來檢測和測定液體樣品中的測試對象。例如，將約2到約30(優選為4nL到15pL)的液體樣品水溶液滴加(點滴施加)到試劑層上。將經點滴施加的分析元件在約15。C到45。C(優選為約20'C到40°C)的恆溫下溫育1分鐘到30分鐘。從透明支持體一側對分析元件中的顯色程度或變色程度進行反射光光度測定或透射光光度測定。由此，採用先前製作的標準曲線、根據比色法的原理可以測定測試對象的量。通過使待點滴施加的液體樣品的量、以及溫育時間和溫育溫度保持恆定，就可以高精確度地進行定量分析。對於測定操作方法，可以藉助於在JP-A-60-125543、JP-A-60-220862、JP-A-61-294367、JP-A-58-161867(對應於美國專利No.4,424,191)等中所述的化學分析裝置和市售可得的平板讀取器，以很簡單的操作方式實施高精確度的定量分析。順便提及，根據目的或所需的精確度，通過目視判斷顯色程度來進行半定量的測定也是可以接受的。實施例通過以下實施例來更具體地描述本發明。但是，本發明不限於以下的實施例。(1)用於測定焦磷酸的乾式分析元件將具有表i所示的組成(a)的水溶液塗敷到180pm厚的無色透明聚對苯二甲酸乙二醇酯(PET)的光滑膜片(支持體)(其上設有凝膠底塗層)上，從而得到以下所示的覆蓋率，然後使該塗層乾燥，進而形成試劑層。為了進行對比，將含有表2所示組成(b)的水溶液以相同的方式進行塗敷，並使其乾燥，進而形成試劑層。表1試劑層水溶液的組成(a)_凝膠對壬基苯氧基聚縮水甘油(縮水甘油單元平均含有10個單元)(C9H19-Ph-O-(CH2CH(OH)-CH2-O)10H)吸水性聚合物(AQUALICCAML-10,由日本觸媒株式會社製造)次黃嘌呤核苷過氧化物酶黃嘌呤氧化酶嘌呤核苷磷酸化酶無機焦磷酸酶雙甲酮(5，5-二甲基環己垸-1，3-二酮)隱色染料(2-(3，5-二甲氧基-4-羥基苯基)-4，5-二(4-二甲基氨基苯基)咪唑)18.90.5g/m20.44g/m21.6g/cm215200U/m:4600U/m22300U/m2500U/m20.07g/m20.28g/m2MgCl26H206.8g/m:聚醚改性的矽油8.0g/m2(KF-618,由信越化學株式會社製造)水97.3g/m用NaOH/HCl稀溶液調節pH為6.5注)作為吸水性聚合物的AQUALICCAML-10是聚丙烯酸鹽類吸水性聚合物，並且其平均粒徑為lOpm。表2試劑層水溶液的成(b)_凝膠對壬基苯氧基聚縮水甘油(縮水甘油單元平均含有IO個單元)(C9H19-Ph-O-(CH2CH(OH)-CH2-O)10H)次黃嘌呤核苷過氧化物酶黃嘌呤氧化酶嘌呤核苷磷酸化酶焦磷酸酶雙甲酮隱色染料(2-(3，5-二甲氧基-4-羥基苯基)-4，5-二(4-二甲基氨基苯基)咪唑)MgCl26H20水用NaOH/HCl稀溶液調節pH為6.5將這些分析元件切成直徑為約6mm的圓形，並將其粘結在市售可得的96孔板的底部。測定例1:液體樣品中焦磷酸的濃度與用於測定焦磷酸的乾式分18.9g/m"0.5g/m21.6g/cm215200U/m:4600U/m22300U/mz500U/m20.07g/m20.28g/m26.8g/m297.3g/m2析元件的顯色之間的關係採用具有確定純度的焦磷酸鉀(由和光純藥株式會社製造)製備成各自濃度分別為0、0.05、0.10和0.15(mM)的焦磷酸鹽水溶液，並以每點滴5pL的量施加到實施例中所製備的乾式分析元件中。將該乾式分析元件在25'C下溫育10分鐘。然後，藉助於平板讀取器(GENiosPro，由TECAN公司製造)從支持體那一側測定650nm波長處的透射光密度(ODt)。結果示於表3和圖1中。結果表明使用本發明的乾式分析元件可以定量地測定液體樣品中焦磷酸的量。表3液體樣品中焦磷酸的濃度與IO分鐘後的透射光密度之間的關係焦磷酸濃度(mM)_IO分鐘後的透射光密度(ODt)tableseeoriginaldocumentpage17測定例2:加入吸水性聚合物和含矽表面活性劑的效果就本發明的例子而言，使用具有組成(a)的乾式分析元件和作為對照而製備的具有組成(b)的乾式分析元件實施以下的過程。採用具有確定純度的焦磷酸鉀(由和光純藥株式會社製造)製備各自濃度分別為0、0.05、0.10(mM)的焦磷酸鹽水溶液，並以每點滴5pL的量施加到實施例中所製備的乾式分析元件中。將該乾式分析元件在25°。下溫育10分鐘。然後，藉助於平板讀取器(GENiosPro，由TECAN公司製造)從支持體那一側測定650nm波長處的透射光密度(ODt)。將顯色反應時間進程的結果以ODt的方式示於表4中。組成(b)是通過從組成(a)中除去吸水性聚合物和含矽表面活性劑而得到的。組成(a)和組成(b)的比較如下所示。對於組成(b)而言，在0分鐘時的噪聲較高，此外，在點滴施加5pL的測試溶液(焦磷酸鹽水溶液)以後，即使過去5分鐘或更長時間，測試溶液也沒有完全滲透。與其形成對比的是，對於具有組成(a)的乾式分析元件，在點滴施加5pL的測試溶液以後，在15秒內測試溶液就完全滲透。將滲透速率的提高會改善顯色反應的時間進程這一實際情況用第3分鐘和第10分鐘之間的AODt差值來表示。表4:點滴施加焦磷酸鹽水溶液之後的顯色反應的時間進程(在各測定時間的ODt)組成(a)o分鐘3分鐘10分鐘AODt(10分鐘-3分鐘)0.00mM0.0690.1220.1510.0290.05mM0,0880.2790.3110.032O.lOmM0.0940.3790.3980.019組成(b)o分鐘3分鐘10分鐘AODt(10分鐘-3分鐘)O.OOmM0.1440.1750.1980.0230.05mM0.1600.2520.3100.058O.lOmM0.1970.3390.3960.05圖1示出液體樣品中焦磷酸濃度和IO分鐘後透射光密度(ODt)之間的關係的圖。權利要求1.一種乾式分析元件，該乾式分析元件在透明的支持體上具有試劑層，該試劑層具有包含至少一種吸水性聚合物的凝膠薄膜。2.根據權利要求1所述的乾式分析元件，其中，在所述的試劑層中，在每單位面積上，所述的吸水性聚合物的量為凝膠的量的至多10質量％。3.根據權利要求1或2所述的乾式分析元件，其中，所述的試劑層中的凝膠含量為2g/n^到100g/m2。4.根據權利要求1到3中任意一項所述的乾式分析元件，其中，所述試劑層包含至少一種表面活性劑。5.根據權利要求4所述的乾式分析元件，其中，在所述的試劑層中，在每單位面積上，所述表面活性劑的量為凝膠的量的至多80質量％。6.根據權利要求4或5所述的乾式分析元件，其中，所述表面活性劑包括含矽化合物。7.根據權利要求1到6中任意一項所述的乾式分析元件，其中，所述吸水性聚合物為選自以下物質中的至少一種聚合物化合物聚丙烯酸鹽類、支鏈澱粉類、聚乙烯醇類、醋酸乙烯酯共聚物、馬來酐共聚物、羧甲基纖維素類和聚環氧乙垸類。8.根據權利要求1到7中任意一項所述的乾式分析元件，其中，所述試劑層包含用於將焦磷酸轉化為無機磷酸的試劑；和試劑群，該試劑群用於進行與所轉化的無機磷酸的量相關的顯色反應。9.根據權利要求8所述的乾式分析元件，其中，所述試劑層包含黃嘌呤核苷或次黃嘌呤核苷、無機焦磷酸酶、嘌呤核苷磷酸化酶、黃嘌呤氧化酶、過氧化物酶和成色劑。10.根據權利要求9所述的乾式分析元件，其中，所述成色劑為隱色型染料。11.根據權利要求8所述的乾式分析元件，其中，所述試劑層包含黃嘌呤核苷或次黃嘌呤核苷、無機焦磷酸酶、嘌呤核苷磷酸化酶、黃嘌呤脫氫酶、心肌黃酶和成色劑。12.根據權利要求11所述的乾式分析元件，其中，所述成色劑為甲臘型染料。13.根據權利要求8到12中任意一項所述的乾式分析元件，其中，所述的試劑層包含鎂離子。14.根據權利要求1到13中任意一項所述的乾式分析元件，該分析元件通過利用反射光光度測定或透射光光度測定的比色法對生物物質進行測定，在該比色法中，將含有生物物質的液體樣品滴加到所述試劑層上，以使該試劑層顯色。全文摘要本發明提供一種乾式分析元件，其在透明的支持體上具有試劑層，該試劑層具有包含至少一種吸水性聚合物的凝膠薄膜。所述乾式分析元件能夠迅速、簡便地分析(例如)液體樣品中的生物物質，並且不需要在所述乾式分析元件中設置鋪展層。文檔編號C12Q1/48GK101107521SQ200680002670公開日2008年1月16日申請日期2006年2月21日優先權日2005年2月28日發明者村谷浩二申請人:富士膠片株式會社