一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法
2023-06-20 07:33:11 1
一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法
【專利摘要】本發明提供了一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，通過HPLC高效液相色譜法分離檢測，獲得麒麟竭中各種成分的指紋圖譜，從而對麒麟竭進行檢測；所述檢測方法從色譜的整體特徵面貌上把握麒麟竭的品質及質量情況，操作簡便、穩定、精密度高、重現性好、易於掌握，可作為麒麟竭藥材質量控制的一種重要手段。
【專利說明】一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種中藥材的檢測方法，尤其是一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法。
【背景技術】
[0002]據藥典記載,血竭為棕櫚科植物麒麟竭(Daemonorps dracoblume)果實滲出的樹脂經加工製成，具有活血定痛、化瘀止血、生肌斂瘡的功能。在血液流變學和實驗性動脈血栓方面也顯示其具有活血化瘀的作用，對正常家兔血液流變學無明顯影響，對用葡聚糖造成的家兔「急性血瘀」模型可使其全血粘度和血漿濃度下降，紅細胞電泳時間加快，對大鼠實驗性血栓形成有抑制作用；有實驗研究表明:家兔體外和體內血小板聚積實驗表明，血竭(麒麟竭)可顯著抑制花生四烯酸、二磷酸腺苷和血小板聚積活化因子誘導的血小板聚集。
[0003]綜合目前的有關報導，血竭(麒麟竭)主要含有黃酮類、皂苷類、芪類、酚類、有機酸、酯類和揮髮油等成分，其中血竭(麒麟竭)中的黃酮類化合物主要有黃酮、二氫黃酮、黃烷、查耳酮、二氫查耳酮等。
[0004]目前對血竭(麒麟竭)化學有效成分的研究較多也較為成熟，從採用最初的定性分析，逐步進入到利用精密的儀器與方法進行定量的鑑別與研究，如薄層掃描法(TLCS)、高效液相色譜法(HPLC )、反相高效液相色譜法(RP-HPLC )、紅外吸收光譜法(I R )、紫外吸收光譜法(UV)、氣相色譜-質譜聯用儀(GC-MS)、核磁共振儀(NMR)、負離子FAB-MS質譜法等，目前藥典方法僅從定性及血竭素含量方面進行測定，但在客觀反映藥材的正為優劣時這些數據尚不夠全面，檢測方法仍需改進。
【發明內容】
[0005]本發明所要解決的技術問題在於提供一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，本發明所述麒麟竭即為藥典中所述血竭。
[0006]為解決上述技術問題，本發明的技術方案是:
[0007]一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，具體步驟為:
[0008]( I)供試品溶液的製備:稱取粉碎後的麒麟竭，加甲醇超聲處理，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液；
[0009](2)測定:用十八烷基矽膠鍵合矽膠為填充劑，以乙腈為流動相A，0.1%磷酸水溶液為流動相B，梯度洗脫，洗脫順序為0-3min，流動相A保持在25%，流動相B保持在75%，3-60min,流動相A從25%線性上升至60%，流動相B從75%線性下降至40% ;流速為
0.4-1.0ml/min，紫外檢測波長為250_300nm ;精密吸取步驟(I)中供試品溶液5_20ul，注入高效液相色譜儀進行HPLC分析檢測。
[0010]優選的，上述麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，步驟(I)中供試品溶液的製備的具體方法為:按照每稱取粉碎後的麒麟竭0.1-0.5g，置25ml量瓶中，加甲醇超聲處理5_30min，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液。[0011]優選的，上述麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，步驟(I)中供試品溶液的製備的具體方法為:按照每稱取粉碎後的麒麟竭0.2g，置25ml量瓶中，加甲醇超聲處理20min (40KHz,300W)，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液。
[0012]優選的，上述麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，步驟(2)中HPLC分離檢測的條件為流速為1.0ml/min，紫外檢測波長為280nm。
[0013]本發明的有益效果是:
[0014]所述麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，將麒麟竭溶於適當溶劑中，經HPLC高效液相色譜法分離檢測，獲得麒麟竭中各種成分的指紋圖譜，從而從色譜的整體特徵面貌上把握麒麟竭的品質及質量情況，該方法簡便、穩定、精密度高、重現性好、易於掌握，可作為麒麟竭藥材質量控制的一種重要手段。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0015]圖1是麒麟竭標準指紋圖譜。
【具體實施方式】
[0016]為了使本領域的技術人員更好的理解本發明的技術方案，下面結合附圖及【具體實施方式】對本發明所述技術方案作進一步的詳細說明，其中麒麟竭是指藥典中的血竭藥材。
[0017]實施例1
[0018]一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，具體步驟為:
[0019](I)供試品溶液的製備:稱取粉碎後的中藥麒麟竭藥材0.2g，置25ml量瓶中，加甲醇適量，超聲處理20min (40KHz，300W)，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液；
[0020](2)測定:用十八烷基矽膠鍵合矽膠為填充劑，以乙腈為流動相A，0.1%磷酸水溶液為流動相B，梯度洗脫，洗脫順序為0-3min，流動相A保持在25%，流動相B保持在75%，3-60min,流動相A從25%線性上升至60%，流動相B從75%線性下降至40% ;流速為1.0ml/min，紫外檢測波長為280nm ;精密吸取步驟(I)中供試品溶液IOul，注入高效液相色譜儀進行HPLC分析檢測，通過參照2010年版中國藥典一部附錄VID的高效液相色譜法，結合指紋圖譜的要求對多批次麒麟竭藥材分析，獲得麒麟竭藥材的標準指紋圖譜，見圖1。
[0021]實施例2
[0022]麒麟竭藥材的標準指紋圖譜的確定
[0023]將實施例1用於獲得麒麟竭藥材的標準指紋圖譜的多批次麒麟竭藥材通過藥典記述方法進行鑑別和檢查，均符合藥典標準，證實為麒麟竭藥材。
[0024]實施例3
[0025]一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，具體步驟為:
[0026](I)供試品溶液的製備:稱取粉碎後的麒麟竭0.2g，置25ml量瓶中，加甲醇超聲處理20min (40KHz，300W)，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液；
[0027](2)測定:用十八烷基矽膠鍵合矽膠為填充劑，以乙腈為流動相A，0.1%磷酸水溶液為流動相B，梯度洗脫，洗脫順序為0-3min，流動相A保持在25%，流動相B保持在75%，3-60min,流動相A從25%線性上升至60%，流動相B從75%線性下降至40% ;流速為1.0ml/min，紫外檢測波長為280nm ;精密吸取步驟(I)中供試品溶液IOul，注入高效液相色譜儀進行HPLC分析檢測，測定結果與圖1麒麟竭藥材的標準指紋圖譜比對，為麒麟竭藥材。
[0028]對該藥材用藥典方法測定，結果顯示為麒麟竭藥材。
[0029]實施例4
[0030]一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，具體步驟為:
[0031](I)供試品溶液的製備:稱取粉碎後的麒麟竭0.lg，置25ml量瓶中，加甲醇超聲處理5min，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液；
[0032](2)測定:用十八烷基矽膠鍵合矽膠為填充劑，以乙腈為流動相A，0.1%磷酸水溶液為流動相B，梯度洗脫，洗脫順序為0-3min，流動相A保持在25%，流動相B保持在75%，3-60min,流動相A從25%線性上升至60%，流動相B從75%線性下降至40% ;流速為0.4ml/min，紫外檢測波長為250nm ;精密吸取步驟(I)中供試品溶液20ul，注入高效液相色譜儀進行HPLC分析檢測，測定結果與圖1麒麟竭藥材的標準指紋圖譜比對，為麒麟竭藥材。
[0033]對該藥材用藥典方法測定，結果顯示為麒麟竭藥材。
[0034]實施例5
[0035]一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，具體步驟為:
[0036](I)供試品溶液的製備:稱取粉碎後的麒麟竭0.5g，置25ml量瓶中，加甲醇超聲處理30min，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液；
[0037](2)測定:用十八烷基矽膠鍵合矽膠為填充劑，以乙腈為流動相A，0.1%磷酸水溶液為流動相B，梯度洗脫，洗脫順序為0-3min，流動相A保持在25%，流動相B保持在75%，3-60min,流動相A從25%線性上升至60%，流動相B從75%線性下降至40% ;流速為0.6ml/min，紫外檢測波長為300nm ;精密吸取步驟(I)中供試品溶液5ul，注入高效液相色譜儀進行HPLC分析檢測，測定結果與圖1麒麟竭藥材的標準指紋圖譜比對，為麒麟竭藥材。
[0038]對該藥材用藥典方法測定，結果顯示為麒麟竭藥材。
[0039]實施例6
[0040]一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，具體步驟為:
[0041](I)供試品溶液的製備:稱取粉碎後的麒麟竭0.3g，置25ml量瓶中，加甲醇超聲處理15min，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液；
[0042](2)測定:用十八烷基矽膠鍵合矽膠為填充劑，以乙腈為流動相A，0.1%磷酸水溶液為流動相B，梯度洗脫，洗脫順序為0-3min，流動相A保持在25%，流動相B保持在75%，
3-60min,流動相A從25%線性上升至60%，流動相B從75%線性下降至40% ;流速為0.8ml/min，紫外檢測波長為270nm ;精密吸取步驟(I)中供試品溶液15ul，注入高效液相色譜儀進行HPLC分析檢測，測定結果與圖1麒麟竭藥材的標準指紋圖譜比對，為麒麟竭藥材。
[0043]對該藥材用藥典方法測定，結果顯示為麒麟竭藥材。
[0044]上述參照【具體實施方式】對該一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法進行的詳細描述，是說明性的而不是限定性的，可按照所限定範圍列舉出若干個實施例，因此在不脫離本發明總體構思下的變化和修改，應屬本發明的保護範圍之內。
【權利要求】
1.一種麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，其特徵在於:具體步驟為: (1)供試品溶液的製備:稱取粉碎後的麒麟竭，加甲醇超聲處理，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液； (2)測定:用十八烷基矽膠鍵合矽膠為填充劑，以乙腈為流動相A，0.1%磷酸水溶液為流動相B，梯度洗脫，洗脫順序為0-3min，流動相A保持在25%，流動相B保持在75%，3-60min,流動相A從25%線性上升至60%，流動相B從75%線性下降至40% ;流速為0.4-1.0ml/min，紫外檢測波長為250_300nm ;精密吸取步驟(I)中供試品溶液5_20ul，注入高效液相色譜儀進行HPLC分析檢測。
2.根據權利要求1所述的麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，其特徵在於:步驟(I)中供試品溶液的製備的具體方法為:按照每稱取粉碎後的麒麟竭0.1-0.5g，置25ml量瓶中，加甲醇超聲處理5-30min，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液。
3.根據權利要求1或2所述的麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，其特徵在於:步驟(I)中供試品溶液的製備的具體方法為:按照每稱取粉碎後的麒麟竭0.2g，置25ml量瓶中，加甲醇超聲處理20min (40KHz，300W)，放冷，定容，濾過，續濾液作為供試品溶液。
4.根據權利要求1所述的麒麟竭的指紋圖譜檢測方法，其特徵在於:步驟(2)中HPLC分離檢測的條件為流速為1.0ml/min,紫外檢測波長為280nm。
【文檔編號】G01N30/06GK103675113SQ201210344922
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2012年9月17日 優先權日:2012年9月17日
【發明者】顏世利 申請人:天津馬克生物技術有限公司