用於治療肺病的二核苷酸的製作方法
2023-06-13 21:14:46
專利名稱：用於治療肺病的二核苷酸的製作方法
技術領域：
本發明涉及某種二核苷酸，含有其的藥物製劑，以及通過給患者服用二核苷酸而從該患者的肺中去除殘留粘液分泌物的方法。
背景技術：
本發明是以由國家健康學會授予的Grant No.MHLBIHL34322的政府資助形式完成的。政府對本發明擁有一定權利。
在囊纖維變性中，氣道上皮的幾項機能是異常的，CL-轉運和Na+吸收方面的缺陷已在文獻中詳細記載。參見，例如Knowles等人，科學221，1067(1983)；Knowles等人，臨床研究雜誌71，1410(1983)。調整離子轉運對以上皮離子轉運異常為特徵的肺病如囊纖維變性可能會有潛在的治療效果。
在囊纖維變性和其他肺病中的一個治療目的是，改變粘液的水含量使肺粘液分泌物水化，以便該分泌物隨後可以更容易地通過mucociliaryaction或簡單的咳嗽而從肺中除去。美國專利No.4,501,729中公開了利用煙霧化的阿米洛利來水化粘液分泌物。阿米洛利似乎可阻斷Na+通過氣道上皮細胞重吸收，並由此抑制水從粘液中的吸收。
涉及ATP或UTP給藥的技術例舉了水化肺粘液分泌物的不同治療方法，它們似乎刺激了呼吸上皮細胞的氯化物分泌。參見，例如Boucher的美國專利No.5,292,498.
考慮到大量受囊纖維變性困擾的病人，非常需要一種新的方法，以提供水化肺粘液分泌物的方法並由此促進肺粘液的清除。
發明概述本發明的第一個方面是式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽 在式I化合物中n為1-6。n優選為2-4，最優選為4。
X為-OH或-SH，優選-OH。
A和B各自獨立地選自下列成員 其中R為H或Br。
本發明的第二個方面是藥物製劑，其包含處於藥學上可接受的載體(例如固體或液體載體)中的、有效量的可水化肺粘液分泌物的上述式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽。任意地，該藥物製劑可以進一步包含選自下列成員的化合物有效量的阿米洛利、苯沙明和非那明，以抑制水從肺粘液分泌物中的重吸收。
本發明的第三個方面是水化需要治療的患者的肺中的粘液分泌物的方法，包括給予該患者的肺有效量的可水化肺粘液分泌物的上述式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
本發明的第四個方面是上述式I化合物或其藥學上可接受的鹽在製備用於水化需要治療的患者的肺中的粘液分泌物的藥劑中的用途。
在下面的說明書中詳細解釋了本發明的上述及其他目的和方面。
圖1顯示二核苷酸A2P4對預先用弗司扣林治療的氣道上皮的腔表面上CL-分泌物的作用。
圖2顯示A2P4給藥對預先用UTP刺激的氣道上皮中CL-分泌物的作用。
發明詳述本發明方法可用於促進(即增強、加速、幫助)粘液分泌物從因為各種原因而需要治療的患者的肺中的清除，包括(但不限於)由於氣管疾病如囊纖維變性、慢性支氣管炎、哮喘、支氣管擴張、手術後肺膨脹不全(手術後氣道被殘留的分泌物堵塞)和卡塔格內症候群等而產生的殘留分泌物。
本發明主要與人的治療有關，但也可為了獸醫的目的而用於其他哺乳動物如狗和貓的治療。
式I化合物及其藥學上可接受的鹽(即活性化合物)可以按照本文中描述的技術和對本領域技術人員來說對其做了顯然的改變後的方法來製備。例如，UppppU(U2P4)的合成可以通過利用水溶性碳化亞胺EDC(1-乙基-3-〔3-二甲基-氨-丙基〕-碳化亞胺鹽酸化物)來縮合UDP而完成。參見K.E.Ng和L.E.Orgel，核酸研究15(8)，3572-80(1987)。
阿米洛利及其在水化肺粘液分泌物中的用途是已知的，並公開於Boucher和Knowles的美國專利NO.4,501,729中(本文中引用的所有專利文獻都是以其全部內容結合於本文中作為參考的)。苯沙明(也稱作3，5-二氨基-6-氯-N-〔苄氨基氨基亞甲基〕吡嗪羰醯胺)和非那明(也稱作3，5-二氨基-6-氯-N-〔苯氨基氨基亞甲基〕吡嗪羰醯胺)是已知化合物並公開於E.Cragoe的美國專利No.3,313,813中。本文中所用的術語「苯沙明」、「非那明」和「阿米洛利」包括其藥學上可接受的鹽(即上述鹽)，例如(但不限於)鹽酸阿米洛利、鹽酸苯沙明或鹽酸非那明。
如上所述，本發明的活性化合物可以製備成其藥學上可接受的鹽。藥學上可接受的鹽是能保留該化合物預期的生物活性且不會產生不希望的毒性作用的鹽。這樣的鹽的實例是(a)與無機酸例如鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸等形成的酸加成鹽；與有機酸諸如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、葡糖酸、檸檬酸、蘋果酸、抗壞血酸、苯甲酸、單寧酸、棕櫚酸、藻酸、聚穀氨酸、萘磺酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、萘二磺酸、聚半乳糖醛酸等形成的鹽；和(b)從元素陰離子如氯、溴和碘形成的鹽。
本文中公開的活性化合物可以通過任何適宜的方式給予患者的肺，但優選通過由該活性化合物組成的可呼吸的顆粒的氣溶膠懸液形式給藥，患者將其吸入。該可呼吸的顆粒可以是液體或固體。
包含活性化合物的液體粒子的氣溶膠可通過任何適宜的方式生產，如用壓力驅動的氣溶膠噴霧器或超聲波噴霧器。參見，例如美國專利No.4,501,728。噴霧器是商業上可獲得的設備，它通過一個窄的文氏管口加速壓縮氣體、一般空氣或氧氣，或通過超聲波攪動而將活性成分的溶液或懸液轉化為治療氣溶膠霧。用於噴霧器的合適的製劑由處於液體載體中的活性成分組成，包含的活性成分最多為該製劑40％W/W，但優選小於20％W/W。該載體通常為水(最優選無菌、無焦精水)或稀釋的醇水溶液，優選通過添加例如氯化鈉而製成與體液等滲壓的。如果該製劑不是無菌製備的話，則任意的添加劑包括防腐劑例如羥基苯甲酸甲酯，還包括抗氧化劑、調味劑、揮髮油、緩衝劑和表面活性劑。
包含活性化合物的固體顆粒的氣溶膠可用任何固體顆粒藥劑氣溶膠發生器進行同樣的製備。用於患者固體顆粒藥劑給藥的氣溶膠發生器生成如上所解釋的可呼吸的顆粒，並以適於人給藥的速度產生含有預定劑量藥劑的氣溶膠體積。固體顆粒氣溶膠發生器的一個直觀類型是吹入器。適於通過吹入給藥的製劑包括精細粉碎的粉末，它可利用吹入器傳送或以嗅的方式進入鼻腔。在吹入器中，粉末(例如定量的、可有效進行本文所述治療的粉末)被包含在一般由明膠或塑料製成的膠囊或盒中，它們可就地貫穿或打開並通過吸氣設備或以人工操作的抽氣機方式通過抽氣而傳送該粉末。應用於吸入器中的粉末可以僅由活性成分組成，或由包含活性成分、合適的粉末稀釋劑如乳糖以及任意的表面活性劑的粉末攙和物組成。包含的活性成分一般為該製劑的0.1-100W/W。氣溶膠發生器的第二種直觀類型包括定量吸入器。定量吸入器是壓縮氣溶膠分配器，一般含有處於液體推進劑中的活性成分的懸液或溶液製劑。在使用這些設備過程中，通過適於傳送預定體積，一般是10-150μL的閥門排出該製劑以產生含有活性成分的細顆粒霧。合適的推進劑包括某些含氯氟烴化合物，例如二氯二氟甲烷，三氯氟甲烷，二氯四氟乙烷及其混合物。該製劑還可含有一種或多種共溶劑例如乙醇，表面活性劑如油酸或脫水山梨醇三油酸，抗氧化劑和合適的調味劑。
氣溶膠，無論固體還是液體粒子形成，都可由氣溶膠發生器生產，速率為每分鐘大約10-150升，更優選每分鐘約30-150升，最優選每分鐘約60升。含較大量藥劑的氣溶膠可更快進行。
式I化合物或其藥學上可接受的鹽的劑量將根據所治療的病情和患者的狀態而變化，但一般該量應足以使活性化合物在患者的氣道表面上達到的溶解濃度為約10-7-約10-3摩爾/升，更優選約10-6-約3×10-4摩爾/升。根據所給藥活性化合物的顆粒製劑的溶解度，日劑量可以分為一個或幾個單位劑量給藥。根據患者的年齡和病情，以用於人的可呼吸顆粒計，日劑量可以是約1-20mg(重量)。與式I化合物或其鹽同時給藥的阿米洛利、苯沙明或非那明的劑量可以與式I化合物或其鹽的劑量相同。
含有本發明活性劑的固體或液體粒子藥物製劑應包括可呼吸的顆粒，也就是說，顆粒的尺寸應足夠小以隨著吸氣而通過嘴和喉並進入支氣管和肺泡。一般說來，大小為1-5微米(更特別是小於約4.7微米)的顆粒是可呼吸的。包括於氣溶膠中的不可呼吸大小的顆粒容易沉積在咽和喉中，不可呼吸大小的顆粒在氣溶膠中的數量優選減至最小值。對於鼻腔給藥來說，顆粒大小優選為10-500μm以確保其保留在鼻腔中。
在本發明製劑的製造中，活性劑或其生理上可接受的鹽或游離鹼，除了別的物質以外，一般是與可接受的載體混合在一起的。當然，該載體必須是在與製劑中的任何其他成分相容的意義上可接受的，且必須是對病人無害的。該載體可以是固體或液體或兩者都有，並優選與化合物配製成單位劑量製劑，例如膠囊，它可含有0.5％-99％(重量)的活性化合物。在本發明的製劑中可以摻合一種或多種活性化合物，製劑可以利用任何一種已知的主要由將各成分混合而組成的製藥技術來製備。
通過用研缽和研杵來研磨活性化合物可以製得含有活性化合物的可呼吸的乾燥顆粒的組合物，然後將該微粉化的組合物通過400目篩以分散或分離出大的燒結物。
用於製備本發明組合物的阿米洛利、苯沙明和非那明可以選擇以苯沙明或非那明的藥學上可接受的游離鹼形式存在。因為該化合物的游離鹼的溶解性小於鹽，應用游離鹼組合物可使苯沙明或非那明更持久地釋放進肺部。以還未進入溶液的微粒形式存在於肺中的阿米洛利、苯沙明或非那明是不可能產生生理應答的，但可作為逐漸進入溶液中的生物可利用藥物的保管處。
藥物組合物可任意含有用來促進氣溶膠形成的分散劑。合適的分散劑是乳糖，它可以任何適宜的比例(例如重量比1∶1)與苯沙明或非那明混合。
在下面非限制性實施例中將更加詳細地解釋本發明。
此外，A2P4給藥對於事先用已知可活化非CFTR CL-通道的UTP刺激的氣道上皮中的CL-分泌物沒有影響。顯示於圖2中的這些結果表明，可通過A2P4調節受purigenic受體控制的非CFTR CL-通道，並進一步表明A2P4刺激了與通過P2U受體起作用的UTP相同的氣道上皮CL-通道。這一受體的激發是某些肺病包括囊纖維變性的治療策略。
上述實施例是對本發明的舉例說明，而對本發明沒有限制作用。通過下述權利要求定義了本發明，相當於該權利要求包括在本文中。
權利要求
1.式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽 其中n為1-6；X為-OH或-SH；A和B各自獨立地選自下列成員 其中R為H或Br。
2.按照權利要求1的化合物，其中n為4。
3.按照權利要求1或2的化合物，其中A和B選自尿苷和5-溴尿苷。
4.按照權利要求1或2的化合物，其中A和B為腺苷。
5.按照權利要求1、2、3或4的化合物，其中X為-OH。
6.一種藥物製劑，包含處於藥學上可接受的載體中的、有效量的可水化肺粘液分泌物的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽 其中n為1-6；X為-OH或-SH；A和B各自獨立地選自下列成員 其中R為H或Br。
7.按照權利要求6的藥物製劑，進一步包含以有效量給予所述患者的可抑制水從肺粘液分泌物中重吸收的化合物，其選自下列成員阿米洛利、苯沙明和非那明。
8.按照權利要求6或7的藥物製劑，其中所述載體為液體載體。
9.按照權利要求6或7的藥物製劑，其中所述載體為固體微粒載體。
10.式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽在用於水化需要治療的患者肺中的粘液分泌物的藥劑的製備中的用途 其中n為1-6；X為-OH或-SH；A和B各自獨立地選自下列成員 其中R為H或Br。
11.式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽在用於治療囊纖維變性病人的藥劑的製備中的用途 其中n為1-6；X為-OH或-SH；A和B各自獨立地選自下列成員 其中R為H或Br；其用量為可水化所述患者肺中殘留肺粘液分泌物的有效量，並由此使該殘留粘液分泌物更容易地經粘睫作用而從肺部除去。
12.按照權利要求10或11的用途，其中所述藥劑為所述化合物組成的可吸入粒子的氣溶膠懸液。
13.按照權利要求12的用途，其中包含於所述氣溶膠中的粒子選自固體粒子和液體粒子。
14.按照權利要求12的用途，其中所述氣溶膠由粒子大小為1-5微米的粒子組成。
15.按照權利要求12的用途，其中所述氣溶膠進一步包含以有效量給予所述患者的可抑制水從肺粘液分泌物中重吸收的化合物，其選自下列成員阿米洛利、苯沙明和非那明。
全文摘要
本發明公開了式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽。在式(I)化合物中，n為1－6；n優選為2－4，最優選為4。X為－OH或－SH，優選－OH。A和B各自獨立地選自(a)和(b)，其中R為H或Br。該化合物可用於治療氣道疾病如囊纖維變性。另外公開了包含藥學上可接受的載體(例如固體或液體載體)和上述式(I)化合物的藥物製劑。還公開了水化需要治療的患者肺中的粘液分泌物的方法，包含給予該患者的肺部上述式(I)化合物。給藥步驟可以通過吸入來完成。
文檔編號A61K9/00GK1398873SQ02119108
公開日2003年2月26日 申請日期1996年6月6日 優先權日1995年6月7日
發明者M·J·斯圖茲三世, R·C·小保徹爾, E·R·拉薩羅斯基, C·A·格裡 申請人:查珀爾希爾北卡羅來納大學