皮膚抗衰老複合納米乳製劑及其製備方法

2023-06-02 08:50:06

專利名稱：皮膚抗衰老複合納米乳製劑及其製備方法
技術領域：
本發明屬於皮膚外用醫藥和皮膚抗衰老及美容化妝品等技術領域，涉及到一種皮 膚或面部外用的皮膚抗衰老複合納米乳製劑及其製備方法。
背景技術：
衰老是機體器官和組織隨著時間的推移而發生的功能性和器質性衰退的漸進過 程，是一系列複雜的生物學過程。它是機體生長過程中的一個自然規律，涉及全身各組織器 官。這種退行性變化可歸因於內源性和個體反覆暴露於環境中各種有害因素的綜臺作用的 結果。皮膚是覆蓋於人體表面的一個重要器官，由表皮、真皮、皮下組織和皮膚的附屬器官 (包括汗腺、皮脂腺、毛髮和指(趾)甲等)構成。皮膚不僅是機體最大的器官之一，也是外 界環境和機體之間一道有效天然的保護屏障。然而，隨著人年齡的增長，皮膚的保護作用逐 漸減弱，當外界的影響超過一定的程度，皮膚老化就成為了一種必然。通常，皮膚衰老主要 表現為自然衰老和光老化兩種形式。皮膚自然衰老人皮膚從20-25歲起就進入自然老化狀態，一方面，隨著年齡的增 大，皮脂分泌量減少，角質細胞間質也減少，因而水分保持能力降低，表皮屏障功能逐步衰 退，經皮水分流失TEWL(Trans印idermal Water Loss)值上升，開始出現皮膚乾燥無光澤； 另一方面，表皮細胞分化能力降低，表皮恢復速率減慢，角質化功能衰退，角質層變薄，表皮 萎縮產生細皺紋。真皮中膠質細胞總量減少，一部分膠質細胞又因過氧化脂質的作用，交聯 度增加，產生不溶性膠原，導致彈性降低，真皮結締組織的基本成份透明質酸也隨增齡而減 少，致使真皮水分減少，產生較深皺紋。皮膚光老化近來關於紫外線引起肌膚光衰老的結論已被廣泛接受。紫外線按波 長可劃分為短波紫外線(UVC，100 280nm)、中波紫外線(UVB，280 320nm)和長波紫外 線(UVA，320 400nm)。經過大氣層時，由於臭氧層的存在，UVC和大部分UVB幾乎全部被 臭氧吸收，到達地面的UVB只佔3%，但是UVB波長短，能量大，對皮膚損害嚴重，可引起炎症 浸潤，誘導遲髮型超敏反應(DTH)抑制和郎氏細胞功能下降，浸潤的單核巨噬細胞及中性 粒細胞可導致組織溶解酶的釋放，使皮膚表皮細胞內的核酸或蛋白質變性，發生急性皮炎、 日光曬焦、滯後色素沉著、彈性組織變性和DNA合成異常等。而UVA佔地表UV輻射的97%， 且穿透力極強，其中35% 50%能夠到達真皮層，照射誘導人皮膚角脘細胞Colol6S期阻 滯及細胞凋亡，並且抑制Bcl2和Brn3a基因的表達，使自發永生化角質形成細胞(HaCaT細 胞)凋亡，透明質酸量下降及成纖維細胞損傷，並影響I型膠原形成，III型膠原相對增加， 最終導致成熟膠原束減少，皮膚鬆弛。UVA還會氧化表皮中的還原黑色素而直接曬黑皮膚。 近來研究發現，UVA可擴大或協同UVB的光老化作用，而且誘發DNA損傷的程度比UVB嚴 重。此外，過量照射UV也會損害人體抗氧化系統、免疫調節系統和保溼系統，激發體內其他 多種衰老機制。因此防曬是預防紫外線對人體皮膚造成損害的重要措施。防曬劑是防曬化妝品中 起防曬作用的關鍵物質，按防護作用機制可分為物理防曬劑、化學吸收劑和天然防曬劑。物理防曬劑又叫紫外線屏蔽劑，主要是指一些礦物顆粒，包括氧化鋅(ZnO)、二氧化鈦(Ti02)、 滑石粉、氧化鈷等，以納米級最好，其重要的特性是對可見光具有極高的穿透性，可以反射 或散射紫外線，防曬譜廣，耐受性好。如加入Ti02、ZnO等無機粉體減少化學防曬劑對皮膚 的刺激性。而紫外線吸收劑是一類化學合成物，可吸收某一波段的UVA和UVB，其原理是利 用化學結構中的雙鍵(特別是苯環)結構吸收紫外輻射，再把這種輻射轉化為對人體沒有 損害的熱能散發出去。可以選擇的原料有對氨基苯甲酸(PABA)及其衍生物、二苯甲醯甲烷 及其衍生物、鄰氨基苯甲酸及其衍生物、肉桂酸及其衍生物、水楊酸及其衍生物和樟腦類衍 生物。目前市場上的防曬產品80%以上是採用物理和化學防曬共同作用的結果。臨床還發 現一些天然動植物成分如蘆薈、海藻、甲殼素、沙棘、蘆丁、黃芩、銀杏、鼠李及人發水解液也 具有吸收紫外線的功能。目前研究發現不管是自然老化和光老化導致皮膚衰老的原因是體內產生過多的 自由基。而自由基過量積聚對皮膚的損傷主要表現在如下幾個方面①對核酸的損傷活 性氧加成到鹼基的雙鍵中或從戊糖部分抽提氫，可破壞鹼基生成嘧啶、嘌呤自由基，鹼自由 基相互結合或被過氧化。使鹼基缺失甚至主鏈斷裂，產生遺傳突變。②對蛋白質的損傷 活性氧與胺基酸或直接與蛋白質反應使多肽鏈斷裂，促使皮膚中膠原、彈性蛋白和表皮生 長因子受體蛋白受到自由基攻擊產生交聯變性，使皮膚變薄、起皺，彈性降低，細胞生長變 緩。③對糖的損傷皮膚中的粘多糖透明質酸極易被活性氧解聚氧化為糖醛類產物，進而與 DNA、RNA、蛋白質發生進一步交聯變性。④對脂質的損傷活性氧攻擊生物膜上的不飽和脂 肪酸(PUFA)引起膜通透性和硬度增加，胞內環境改變，形成多種脂質過氧化物及其代謝產 物丙二醛(MDA)，MDA是強效交聯劑，易與蛋白質或核酸交聯形成溶酶體無法消化的脂褐質 (LPF)，累積在皮膚結締組織中形成老年斑。開發有效活性物質來清除體內積聚的有害自由 基是抵抗衰老的有力手段。目前具有抗氧化作用的活性原料有三類①生物製劑類，如超氧 化物歧化酶(SOD)、穀胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)、金屬硫蛋白(MT)、木瓜 巰基酶、輔酶Q10等。②天然中草藥製劑類，如人參、丹參、銀杏葉、絞股藍、靈芝、鹿茸等中 草藥的提取液。③化學合成、半合成製劑類，如人工合成的各種抗氧化酶、抗氧化劑及其衍 生物(VE、VA、VC、胡蘿蔔素、輔酶Q10)、尿素、2-巰基乙胺(2-MEA)、丁羥甲苯(BHT)、抗交聯 的各種絡合劑、螯合劑等。自由基衰老理論已成為衰老的代表理論，在抗衰老化妝品中的應 用極其廣泛。皮膚衰老表現為表皮更新減慢、屏障功能減弱、角質形成細胞活力下降、表皮受 傷後修復能力變弱，具體而言，表皮厚度改變不明顯，但角質層的屏障功能下降表皮使用 50%的氫氧化氨處理，則衰老皮膚產生小水皰為特徵的初始反應時間縮短。表皮持續更新 並維持機體與環境聯繫，以保持機體結構的完整。在完整的表皮，基底角質形成細胞中的角 蛋白中間絲與基底層的緻密斑相連。中間絲插入到具有大皰抗原(BP230、BP180)高密度的 半撟粒緻密斑中，半橋粒富含層粘蛋白和Nidogen，發出錨定纖維平鋪在透明層，直達緻密 層。緻密層中富含VII型膠原和硫酸乙醯皮膚素，通過VII型膠原的錨定作用與間質膠原纖 維相連。角質形成細胞經歷複雜而又是預定的程序進行分化。如果此過程出現障礙，則導 致機體各種各樣功能減弱，衰老過程中由於自由基及過氧化作用使膠原表面形成ACE (終 末糖化產物)而過度交聯， 皮膚半橋粒結構失去彈性，表皮_真皮連接變平，皮膚變得松 弛、失去彈性。
真皮衰老表現為真皮對外來化學物清除力下降，真皮厚度變薄、膠原蛋白和彈性 蛋白合成減少、分解增加，分解酶活性增強。皮膚作為重要的代謝器官，衰老時許多代謝酶 類活性下降。另外，I、III型膠原比值在衰老過程中逐漸倒置，膠原逐漸變粗、出現異常交 鏈，主要歸困於衰老有關的組氨酸、丙氨酸交鏈鍵增加，同時非酶糖化的增多也是引起膠原 異常交鏈出現的原因之一。真皮厚度變薄，膠原含量減少，特別是可溶性膠原含量下降明 顯，彈性蛋白含量上升；胞外間質中透明質酸和硫酸皮膚素含量明顯下降，糖胺多糖總含量 下降。此外，膠原纖維和彈性纖維排列也漸趨紊亂。其生理結局使老年皮膚失去增殖能力， 其抗剪切力減弱。郎格漢斯細胞和黑素細胞數目明顯下降、脂褐質明顯增加，呈現出老年斑 和其他色素沉著症狀。對於現代皮膚抗衰老化妝品研究，首要的目的還是要加強完善對皮膚衰老機制的 研究，這樣才能針對性地提供外源性的抗衰老功效成分補充體能抗衰老機制的不足。目前 市場上很多產品多是針對皮膚衰老的某個方面來給予外源性抗衰老功效成分，或是像「萬 精油」 一樣加入眾多的所謂的抗衰老功效成分，這很難達到皮膚外用抗衰老功效成分的效 果。因為皮膚是人體的天然屏障，角質層形成了透皮給藥的限速屏障，大部分體表的角質層 有15-25層扁平角質細胞，總厚度約為10gm。雖然有大分子通過被動擴散而透過角質層的 報導，但一般認為經透皮給藥的理想藥物分子量應< 400Da。另外，一個可行的透皮給藥藥 物的劑量應< 20mg/d。因此，皮膚阻礙藥物進入體內，大多數藥物，即使是劑量低、療效高的 一些藥物，透皮速率也難以滿足治療需要，如何保證足夠量的藥物透過皮膚進入體內達到 治療劑量，是透皮給藥系統研究的重點。抗衰老功效成分必須在產品中達到一定得濃度，抗衰老功效成分才能在皮膚上發 揮抗衰老的作用。而目前市場上常用的抗衰老乳液和膏霜，大部分一種劑型只能容納一種 性質的功效成分，不能同時容納水溶性和油溶性成分，且分散度不夠大，很難在皮膚表面形 成高濃度功效成分。另外，皮膚外用抗衰老產品中的功效成分，如果皮膚不能吸收，都是一 種負擔。而過量的抗衰老成分在皮膚表面而不能被吸收，也是造成皮膚氧化的重要原因之 一。有專家研究發現，大約有90%的抗衰老營養霜營養成分因吸收問題而在皮膚表面過剩， 非但不能起到抗衰老的作用，反而加速皮膚的衰老。另外，皮膚表面的細菌在生長繁殖過程 中需要大量維生素、蛋白質和一些營養成分，而這些成分也是抗衰老化妝品的主要成分。如 果抗衰老化妝品中的營養成分不能被皮膚完全吸收，那麼這些營養成分就會成為寄生細菌 生長繁殖的溫床，大量的細菌就會導致皮膚的感染。所以我們應該非常重視皮膚外用品功 效成分的透皮吸收問題，新型的功效成分、新產品，只有建立在透皮吸收的基礎上，相關產 品的開發與應用才有意義。而目前在抗衰老皮膚外用製劑上國內還沒有一種新型的製劑來 提高產品的透皮率。當前有一種新型透皮載體系統應用在美容化妝品中，那就是納米乳載體。也稱微 乳(Microemulsion)，粒徑在10 lOOnm之間，是由油相、水相、表面活性劑和助表面活性劑 按適當比例形成的一種穩定透明、低粘度各相同性且熱力學穩定的分散體系.只要四相的 組成適當.即可形成均勻透明或略顯乳光的液體，為熱力學穩定體系。由於納米乳具有突 出的透皮率、靶向、緩釋作用以及對難溶性藥物強大的增溶作用。近年來納米乳給藥系統的 研究一直受到國內外學者的廣泛關注。納米乳粒徑小，具有良好的透皮性和穩定性。其透皮給藥系統優於普通的乳劑。Huang等以Span-20和Tween-80為混合表面活性劑。乙醇為助表面活性劑，十四酸異丙酯 (IPM)為油相，水為連續相研製了粒徑範圍在64 208nm的諾香草胺醋酸鈉(SNA)微乳。 比較了各組分在微乳體系中所佔百分含量。以及不同的助表面活性劑和聚合物對微乳的特 徵和滲透性的影響。結果表明，較之對照組微乳的透皮吸收率明顯提高.是對照組的3. 7 7.1倍此外，還表明乙醇作為助表面活性劑的微乳有明顯的促滲性能。Babette Biruss等 研製了用聚氧乙烯-10-十二烷基醚，三丁酸甘油酯製備了孕酮0/W型微乳，通過在微乳中 加入聚合物二氧化矽(Aemsil)和聚合乳化劑(Pemulen TR1)。使得微乳透皮吸收率增加 1.24 1.63倍，同時減少了微乳在皮膚表面的滯留時間。表明穩定的孕酮聚合微乳是良 好的透皮給藥系統。0/W型納米乳在基因治療領域用作DNA載體，可以防止核酸被血清中 酶降解。此外納米乳由於製備條件溫和，對生物大分子的破壞作用小，故成為蛋白類藥物載 體的重要選擇。疫苗單獨使用時，極易被內環境中體液稀釋並被各種酶所降解，而採用納米 乳包裹疫苗，可以有效提高疫苗的利用率。孫玉靜等以納米乳為載體包裹腫瘤特異性抗原 MA-GE1-HSP70融合蛋白，製備了一種新型疫苗納米乳，提高了疫苗的利用率，而且可實現靶 向接種，減少全身毒副作用。納米乳皮下注射後，可形成貯庫，而作為控釋系統，還可通過各 種細胞表面受體配基與乳滴表面結合而成為藥物靶向傳遞系統。納米乳所具備的很多特性使其非常適合做成護膚品，它粒徑小易被皮膚吸收、具 有很好的皮膚觸感及視覺效果等。歐萊雅公司2002年獲得的一項美國專利，就是將納米乳 用於美容和皮膚護理，專利涉及美容產品、治療皮膚病產品等。因此，納米乳載體系統在化 妝品領域是有極大發展前景的運載工具，納米乳的分散相可載入功效成分，能維持較高的 功效成分濃度，提高了微乳與皮膚間的功效成分濃度梯度，同時微乳中的表面活性劑能降 低角質層的屏障作用，因此可以大大增加功效成分的穩定性和透皮速率。

發明內容
1、為了克服解決上述背景技術中存在的缺點(1)目前的皮膚外用抗衰老化妝 品，都是使用非常普通的製劑類型(水劑、霜劑、膏劑)及其它傳統的製劑載體，其功效成分 很難透過皮膚屏障到達皮膚深層(基底細胞層和真皮層以下)，而皮膚的老化主要發生在 基底細胞層及真皮層以下，因而，普通皮膚抗衰老化妝品很難真正發揮抗衰老效果。(2)皮 膚抗衰老功效成分多是具有生物活性的物質，甚至本身就是蛋生物酶，多肽，生長因子等， 對熱高度敏感，容易失活或破壞，普通製劑大多數是在高溫條件下乳化，從而使這些抗衰老 生物活性成分不同程度遭到破壞而失去應有的抗衰老生物學作用和生理學功能。因此需 要保護那些不耐熱、怕高溫功效成分的活性及含量、特別是保護蛋白類、肽類、酶類、細胞生 長因子類等活性物質具有重要價值，提高蛋白多肽類藥物或功效成分的穩定性，能最大限 度保持其生物活性及生物學作用，而普通的劑型不能解決功效成分穩定性的問題；(3)很 多抗衰老功效來源於天然藥物提取物質，而這些提取物既難溶於水相、也難溶於油相，將其 配製成普通製劑時，很多功效成分並未真正溶解，而只是處於分散狀態，其生物利用度低， 抗衰老功效實際上難以最大限度發揮其作用優勢，嚴重影響其皮膚抗衰老效果；因此需要 有效地解決抗衰老功效成分促溶、增溶和速溶問題；(4)有些抗衰老功效成分對光照穩定 性不高，如抗氧化劑及輔酶Q10等原料藥遇光易分解，較不穩定，在光照條件下藥物含量下 降明顯，因此，要設法將這些成分包裹在某一載體製劑乳核之中，使之形成較為穩定的結構，發揮良好作用效果；(5)皮膚老化是一個複雜的生物學過程，由多種因素引起或共同參 與作用的結果，因此，必須由多種抗衰老成分同時或協同發揮各自優勢作用才能達到更好 效果，但目前很多皮膚外用抗衰老產品成分單一，實際很難起到共濟協同和聯合增效作用； (6)皮膚抗衰老功效成分之間的復配常常需要按照內在規律和抗衰老法則進行合理科學 組方，如需要皮膚營養調理，保溼減少皮膚水分丟失，抗氧化及清除氧自由基，預防光老化， 改善動力性皺紋和生理性皺紋，調控新生表皮細胞增殖，改善皮膚微循環等綜合作用，但目 前的皮膚抗衰老製劑中尚未發現有同時考慮上述調節機制的，因此實際皮膚抗衰老效果也 極其有限。(7)目前一些普通的抗衰老化妝品及其製劑由於添加了含量不等的營養物質和 生物製劑，大多數均添加了一些防腐劑和細菌生長抑制劑，甚至添加劑量很大，因此，常常 引起皮膚過敏和接觸性皮炎及化妝品皮炎等不同程度的副作用。(8)為了能夠起到快速效 果，甚至有些皮膚抗衰老化妝品中非法添加一些類固醇激素和雌激素等，不僅加重皮膚老 化(皮膚明顯變薄、皮膚血管擴張等)，而且，久而久之很容易導致激素依賴性皮炎及其它 皮膚後遺症，危害人體健康。本發明所提供的皮膚抗衰老複合納米乳製劑及其製備方法，正是針對上述存在的 問題或局限設計研製和改進創新的新的皮膚抗衰老劑型，該發明可以解決皮膚抗衰老功效 成分皮膚滲透吸收，促進了抗衰老功效成分增溶、助溶和速溶，提高了抗衰老功效成分及產 品本身理化特性的穩定性，加強了皮膚抗衰老功效成分的複合及共濟協同和聯合增效，以 及不需添加防腐劑，克服了產品可能出現的毒副作用，解決了使用安全性問題等；而且，在 製備方法上採用常溫或室溫條件直接配製，不需要加熱乳化，既可保持生物活性成分的穩 定和作用，又可節省製備時間，減少環境汙染，還容易產業生產等。2.本發明的技術方案(1)本發明的皮膚抗衰老複合納米乳製劑是由下列組份製成的(用量為重量份) 肉豆蔻酸異丙酯5 8，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯28 35，聚甘油脂肪酸酯8 11，三重 蒸餾水40 45，六胜肽0. 01 0. 03，超氧化物歧化酶(S0D)0. 0005 0. 0015, L-抗壞血 酸-2-葡萄糖苷(AA2GTM) 1. 6 3. 2，羥乙基碳醯胺(BSJ15) 1. 3 3. 0，乙二胺四乙酸二 鈉(EDTA-2NA) 0. 10 0. 22，檸檬酸0. 07 0. 10，檸檬酸鈉1. 5 2. 6，N-乙醯半胱氨酸 1.0 2.3，維生素￡ 0.5 1. 5，輔酶Q100. 5 1.5，沙棘油0. 5 1.5，氮酮0.6 1. 1。(2)本發明優選重量配比是肉豆蔻酸異丙酯7. 175，辛酸癸酸聚乙二醇甘油 酯29. 625，聚甘油脂肪酸酯9. 875，三重蒸餾水41. 888，六胜肽0. 021,超氧化物歧化酶 (S0D)0. 001，L-抗壞血酸-2-葡萄糖苷(AA2GTM) 2. 125，羥乙基碳醯胺(BSJ15) 2. 5，乙二胺 四乙酸二鈉(EDTA-2NA) 0. 125，檸檬酸0. 09，檸檬酸鈉2. 0，N-乙醯半胱氨酸1. 25，維生素E 0. 875，輔酶 Q100. 875，沙棘油 0. 875，氮酮 0. 7。(3)本發明的組方原則本發明的皮膚抗衰老複合納米乳製劑組方的基本思想和 設計原則及理論依據是①加快清除面部皮膚最外層無生命和細胞結構的老化角質；增加 皮膚組織含水量並減少皮膚水分丟失，使皮膚深層得到保溼；②調控面部動力性皺紋加深； 提供皮膚組織所需基本營養成分；③預防光老化及輻射引起的皮膚組織損傷；④預防和清 除氧自由基及其誘導的過氧化損傷；⑤調控或抑制基質金屬蛋白酶活性，預防或抑制真皮 結構組織和結締組織繼續水解，降解和酶解；⑥增加膠原蛋白合成與分泌，特別是新生膠原 蛋白增多，使膠原纖維、彈性纖維，網狀纖維得以逐步修復或改善；⑦刺激酸性粘多糖合成與分泌，使真皮基質得以補充或調整；⑧促進表皮細胞，真皮細胞，特別是成纖維細胞和內 皮細胞增殖和分裂；⑨有效改善和提高皮膚組織微循環；⑩合理應用輔助製劑及載體，維 護整體產品和其中各功效成分的穩定，最大限度地發揮其生物學作用和生理學功能。(4)本發明皮膚抗衰老複合納米乳製劑的製備方法①精確稱取六胜肽原料置於經過洗淨消毒乾燥好的三角燒瓶中，加入定量的三重 蒸餾水溶解後，依次加入SOD，EDTA-Na2，檸檬酸，檸檬酸鈉，AA2G，BSJ15，N-乙醯半胱氨酸， 並需要將此溶液中每種成分或原料完全溶解後作為水相(I)。②用分析天平準確稱取重量的肉豆蔻酸異丙酯，置於另一經過洗淨消毒乾燥好的 三角燒瓶中；依次溶解加入維生素E，輔酶Q10，沙棘油，氮酮，充分混合溶解後，用記號筆清 楚標記為油相(II)。③按照事先已設計好的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯(S)聚甘油脂肪酸酯(C)= 3 1的比例，分別準確稱取辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和聚甘油脂肪酸酯，並將這兩者原料 置於第三個經過洗淨消毒乾燥好的潔淨三角燒瓶之中；並將此三角燒瓶迅速置於液體快速 混合器上，充分混合均勻，使之形成乳化劑/助乳化劑(S/C)混合物，並用記號筆清楚標記 為S/C混合物(III)。④按照油相(II) S/C(III)水相(I) = 10.5% 39.5% 50%的比例，先分 別取水相(I)、s/C混合物(III)置於第四個經過洗消過的潔淨三角燒瓶之中。⑤將上述水相(I)、S/C混合物(III)兩液相充分混合後，再在室溫25°C條件下 或者自然室溫中，將其放入超聲振蕩器中震蕩並超聲，或者在室溫25°C條件下或者自然室 溫中，啟動定時恆溫磁力攪拌器攪拌，此時會產生放熱反應，需待冷卻後再在此容器中直接 加入油相(II)，並將整個體系在超聲振蕩器中超聲，或者在室溫25°C條件下或者自然室溫 中，啟動定時恆溫磁力攪拌器，以200rpm mirT1的轉速磁力攪拌。⑥關閉超聲振蕩器或者定時恆溫磁力攪拌器，取下三角燒瓶，觀察其外觀是橙色、 流體性和分散性好、有明顯可見乳光，即為皮膚抗衰老複合納米乳製劑。本發明提供的皮膚抗衰老複合納米乳製劑的製備方法重複性好，製備工藝簡單， 易於產業化生產，產品質量穩定，安全有效，且節省原材料及利於環保。3.本發明的有益效果本發明皮膚抗衰老複合納米乳製劑與現有的技術相比，具有以下優點(1)皮膚外用抗衰老納米乳製劑複合物為兩種互不相溶的液體按一定的比例，在 表面活性劑和助表面活性劑的共同作用下自然形成熱力學穩定的、各向同性的、流動性好、 清澈透明、晶瑩剔透的、有細微黃色的、略帶乳光的分散體系，具有良好的感官性，實際使用 舒適性極佳。(2)本發明運用納米乳載體技術將各種抗衰老功效成分包裹在各相中，且能增溶 和速溶，提高難溶性藥物溶解度和單位體積功效成分濃度，使藥物作用強度加大。同時本發 明的皮膚抗衰老複合納米乳製劑粒徑小，被包容的功效成分分散度提高，促進功效成分透 皮吸收，提高了功效成分生物利用度。另外，功效成分根據其水溶性或油溶性而被包裹在不 同的相中，使得不同相中的功效成分不會彼此影響，提高了配方的穩定性，使得不相容的功 效成分也可在同一配方中應用。(3)本發明製備方法可在室溫下製備，對於保護不耐熱、高溫功效成分的活性及含量、特別是保護蛋白類、肽類、酶類、細胞生長因子類等活性物質具有重要價值，提高蛋白多 肽類藥物或功效成分的穩定性，能最大限度保持其生物活性及生物學作用，對於這些功效 成分在其它領域的應用也提供了一種很好的方法。(4)本發明皮膚抗衰老複合納米乳製劑採用各種功效成分合理配伍，使之具有更 加優良的共濟協同和聯合增效作用。(5)本發明皮膚抗衰老複合納米乳製劑是清亮透明液體，可以濾過，易於消毒滅菌處理，且本身能抑制微生物的生長和繁殖，減少或不添加防腐劑，使皮膚刺激性減少，安全 性提高。(6)本發明皮膚抗衰老複合納米乳製劑成本減低，工藝簡單，利於環保。傳統抗衰 老產品工藝無論生產何種類型抗衰老產品，由於需要使用多種原料，其油相和水相成分復 雜，工藝流程繁瑣，生產周期較長，特別是油相和水相必須在高溫條件下才能完成乳化等， 而本發明皮膚抗衰老複合納米乳製劑配製成分精簡，成本低廉，製備工藝簡單，實際操作容 易，製備高效快速，不需要特殊儀器設備，不需要外界提供能量，不需要加熱。通過本發明制 備的產品功效成分用量的減少，且納米乳配製可在常溫條件下自發形成納米乳體系，不需 要電力和其它能源，既可節約能源和成本，又不汙染環境，降低資源消耗和浪費，使產品成 本大大降低。(7)本發明的皮膚抗衰老複合納米乳製劑的安全性和穩定性好，粒徑小且均勻，透 皮效果好，且因其可增加皮膚所需基本營養成分，增加皮膚含水量和減少皮膚水分的丟失， 增加膠原蛋白合成與分泌等等，達到皮膚抗衰老的效果比其它劑型的產品效果好。(8) 一種好的產品需要面對不同消費人群，也要根據實際情況對配方進行變動，如 油性皮膚就不適用油性的化妝品。通過使用本發明製備的皮膚抗衰老複合納米乳製劑，主 要包括油相、水相、表面活性劑和助表面活性劑四個相。通過這四個相液及親水親油平衡值 不同，可得到水包油型納米乳液(0/W)、油包水型納米乳液(W/0)以及雙連續型納米乳液。 因其劑型調整和轉換方便，因此可在實際應用中根據季節、皮膚類型及功效成分的理化特 性，配製不同的皮膚抗衰老複合納米乳製劑的劑型。(9)本發明可應用於皮膚外用抗衰老化妝品領域應用。本發明皮膚抗衰老複合納 米乳製劑將空白納米乳載體作為新型透皮傳遞給藥系統(TDDS)，屬熱力學穩定系統，在皮 膚抗衰老方面應用尚屬首創。通過本發明在化妝品方面的應用，可帶動納米乳載體系統在 其它的學科方面的應用。4.本發明的分析鑑定(1)肉眼外觀觀察空白納米乳液外觀無色或微微淡藍色、澄清透明、可見乳光、 具有一定的流動性。皮膚抗衰老複合納米乳製劑外觀為微微淡黃色或橙黃色、澄清透明、可 見乳光、具有良好的流動性和分散性。(2)電鏡形態觀察將2-3%的磷鎢酸鈉溶液滴加到蠟板上，將皮膚抗衰老複合納 米乳製劑滴加到銅網正面，用濾紙吸去過多的樣品液，將銅網正面朝下蓋到染液滴上，負染 30min,取出銅網，用濾紙吸取過多染液，將銅網正面朝上置於玻璃皿中自然晾乾2小時後， 在透射電子顯微鏡下進行形態觀測並照相。電鏡普通形態通常黑色物質為納米乳小滴，而 納米乳負染形態白色物質則為納米乳小滴，背景為黑色，液滴直徑分布在10 100之間。(3)粒徑大小、分布及電位測定採用馬爾文測定方法，取納米乳2ml注入測試杯中，通過粒徑分析儀測定納米乳粒子的粒徑大小和分布及zeta電位。通常，納米乳粒子的 平均粒徑為lOOnm以下，皮膚抗衰老複合納米乳製劑粒徑分布集中在lO-lOOnm區間，符合 納米乳標準和特點。(4)功效成分的測定精密稱取皮膚抗衰老複合納米乳製劑適量，分別置25mL量 瓶中，加入丁二醇或丙二醇稀釋至刻度搖勻，作為供試品溶液。皮膚抗衰老複合納米乳製劑 中抗衰老功效成分的含量測定及有關物質檢查含量測定參照其質量標準及含量測定方法 進行含量測定。(5)納米乳類型的鑑定採用染色法鑑定納米乳的類型的主要原理是通過蘇丹紅 (油性染料)和亞甲藍(水溶性染料)在納米乳中紅色或藍色的擴散快慢來判斷納米乳的 類型水溶性染料在0/W納米乳擴散快，因為0/W納米乳連續相為水相，水溶性染料在水相 比在油相擴散快，同樣道理，油溶性染料在W/0納米乳擴散快。通過鑑定皮膚抗衰老複合納 米乳製劑為水包油型納米乳。6.本發明的製備注意事項(1)產品配製時所用的容器必須按照規定嚴格清洗和消毒，最好採用強酸浸泡後 水衝，再清水洗滌乾淨，後用蒸餾水浸泡晾乾，再置於烘箱高溫消毒乾燥後備用。另外，在進 行產品配製時，所用容器均要特別注意防止含有雜質或金屬離子及微生物等汙染，以免影 響產品質量和穩定性。(2)因目前同種抗衰老功效成分和原料的質量標準不完全相同，特別是含量和純 度存在一定差異，因此，在進行產品配製時，務必高度注意原料的質量和來源。在最後確定 配方原料和製備方法後，原則上不要再更換原料來源和品質，以免影響產品質量、穩定性和 使用效果。(3)嚴格按照上述劑量和方法進行配製。在進行該產品配製時，應根據上述流程順 序添加，其添加劑量務必要求準確無誤，而且，在其它原料的添加上，一定要等上一種加入 的原料充分溶解後才能再加入下一種原料，以免出現渾濁，影響整個納米乳體系的配製。(4)在配製皮膚抗衰老複合納米乳製劑時需要選擇和確定S/C質量比(km值)，而 確定S/C質量比(km值)1、2、3、4，是需要進行滴定水油兩相的二元液試驗並通過偽三元相 圖分析後才能最後確定，只有在確定並計算出得到最大的納米乳區域的km值，才是較為理 想的km值。上述製備方法已通過試驗確定Km值為3，但在實際進行產品配製時，表面活性 劑(S)和助表面活性劑按此比例仍須在進行混合後還要再充分混勻，以免影響配製效果和 質量。(5)由於液態溶液的比重或密度不同的關係，在進行產品配製時，所選配製容器的 容量一定要稍大於實際配製的產品量，如配製100g產品，需要選擇150-200mL的配製容器， 這樣既便於各成分充分混合和溶解，也便於超聲震蕩或者攪拌混勻，而不至於往外溢出。(6)空白納米乳本身雖具有一定的抑制細菌生長的特點，本產品配方中未有另外 添加防腐劑，故在進行產品配製時，除配製容器必須進行嚴格清洗和消毒外，具體配製時也 應嚴格按照操作規程，儘可能在無菌條件下並按照無菌操作要求進行操作，避免該納米乳 樣品受到汙染，影響產品質量。(7)配製完成的樣品務必用避光包裝，並儘可能置於陰涼乾燥通風避光處保存，要 遠離火源或熱源。另外，產品平時使用後，無須置於低溫或冰箱保存，但務必加蓋密封嚴實，放置於自然室溫避光保存即可。(8)本品可能對皮膚有刺激性，如使用部位出現明顯反應請立即暫停使用；在實際使用過程中，切勿將本品弄入眼內；皮膚受傷、有傷口或紅腫不得使用、使用後如有持續 紅腫，應停止使用；嬰兒和兒童不得使用；皮膚敏感者，使用前應做皮膚敏感性測試，測試 完全無刺激性反應方可使用。(9)六胜肽為肽類物質，因此該原料需要2_8°C左右冷藏較為適宜，配製六胜肽水 溶液後，儘量現配現用，如用不完，應置於2-8 °C冰箱保存。(10) 500PPM六胜肽在產品中的使用比例一般為10_30 %，但是，功效與濃度之間 的關係為倍比關係，含量越大，效果應更為理想，因此，500PPM濃度六胜肽的添加量可視產 品的價格定位而作一定的調整。(11)由於本製劑含有諸如SOD和六胜肽等生物活性成分及營養成分，因此配製完 成的產品或使用完後應置於2-8°C保存。
具體實施例方式皮膚抗衰老複合納米乳製劑的配方及其製備方法。皮膚抗衰老複合納米乳製劑各原料優選重量配比是肉豆蔻酸異丙酯7. 175，辛 酸癸酸聚乙二醇甘油酯29. 625，聚甘油脂肪酸酯9. 875，三重蒸餾水41. 888，六胜肽0. 021， 超氧化物歧化酶(SOD)O. 001, L-抗壞血酸-2-葡萄糖苷(AA2GTM)2. 125，羥乙基碳醯胺 (BSJ15)2. 5，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-2NA)0. 125，檸檬酸0. 09，檸檬酸鈉2，N-乙醯半胱氨 酸1. 25，維生素E 0. 875，輔酶Q100. 875，沙棘油0. 875，氮酮0. 7。皮膚抗衰老複合納米乳製劑的製備方法(以配製IOOg為例):①先配製500PPM的六胜肽複合溶液將0. 02Ig六胜肽溶於41. 888g三重蒸餾水， 依次溶解加入 0. OOlg S0D，0.125g EDTA_Na2，0. 09g 檸檬酸，2g 檸檬酸鈉，2. 125g AA2G， 2. 5g BSJ15,1. 25g N-乙醯半胱氨酸，將此溶液作為水相(I)50g。②準確稱取7. 175g重量的肉豆蔻酸異丙酯，置於另一個經過洗淨消毒乾燥好的 50mL三角燒瓶中；依次溶解加入0. 875g維生素E，0. 875g輔酶Q10，0. 875g沙棘油，0. 7g氮 酮，立即超聲5min進行充分混合溶解後，用記號筆清楚標記為油相(II) 10. 5g。③按設計好的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯(S)聚甘油脂肪酸酯(C)=3:l的比 例，分別準確稱取29. 625g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和9. 875g聚甘油脂肪酸酯，並將這兩 者原料置於第三個經過洗淨消毒乾燥好的IOOmL潔淨三角燒瓶之中；加蓋，並將此三角燒 瓶迅速置於液體快速混合器上，打開液體快速混合器開關，並將其調至II檔，充分混合均 勻，使之形成乳化劑/助乳化劑(S/C)混合物，3-5min後，關閉液體快速混合器，取下三角燒 瓶，並用記號筆清楚標記為S/C混合物(III) 39. 5g。④按照油相(II) S/C(III)水相(I) = 10.5% 39.5% 50%的比例，先分 別取水相(I)50g、S/C混合物(111)39. 5g置於第四個經過洗消過的200mL潔淨三角燒瓶之中。⑤將上述水相(I)、S/C混合物(III)兩液相充分混合後，再在室溫25°C條件下或 者自然室溫中，將其放入超聲振蕩器中震蕩並超聲2min左右，或者在室溫25°C條件下或者 自然室溫中，啟動定時恆溫磁力攪拌器，以200rpm · mirT1的轉速磁力攪拌5min，此時會產生放熱反應，需待冷卻後再在此容器中直接加入油相(II) 10. 5g，並將整個體系在超聲振蕩 器中超聲5min左右，或者在室溫25°C條件下或者自然室溫中，啟動定時恆溫磁力攪拌器， 以200rpm mirT1的轉速磁力攪拌20min。⑥關閉超聲振蕩器或者定時恆溫磁力攪拌器，取下200mL三角燒瓶，觀察其外觀 如是橙黃色、流體性和分散性好、有明顯可見乳光者，即為I00g皮膚抗衰老複合納米乳制 劑。⑦將此100g皮膚抗衰老複合納米乳迅速分裝於不同規格的避光玻璃容器中，迅 速加蓋，包裝，並置於2-8°C密閉保存即可。⑧按照國際或國內或企業相關標準和要求，從上述分裝產品中隨機抽樣，首先採 用馬爾文儀器檢測該納米乳樣品的顆粒分布及粒徑大小，在符合納米乳的質量標準後，再 按照國家有關部門的具體要求，進行相關指標的系統檢測；待判斷或評價其完全符合國家 相關規定和標準及批准文號後，即可作為產品上市銷售或在美容院內專用。本發明所製備的皮膚抗衰老複合納米乳製劑經穩定性檢測結果如下(1)強光照射實驗將皮膚抗衰老複合納米乳製劑及按傳統工藝製備的抗衰老乳 液在2000-40001X的光照下放置，於5天和10天測定，皮膚外用抗衰老納米乳製劑複合物 結果同放置前比較仍保持澄清透明，未見油水分層。且經過測定相關指標，發現採用本發明 技術製備出的皮膚抗衰老複合納米乳製劑較傳統工藝配製的抗衰老乳液光穩定性更高。(2)高溼度實驗將皮膚抗衰老複合納米乳製劑在密閉器皿中於25°C、相對溼度 75 %及92. 5 %條件下放置，於5天和10天測定，結果同放置前比較仍保持澄清透明，未見油 水分層。(3)高溫試驗將皮膚抗衰老複合納米乳製劑放在密閉器皿中於40°C、60°C、8(rC 分別放置，於5天和10天測定，結果同放置前比較仍保持澄清透明，未見油水分層。(4)加速實驗將皮膚抗衰老複合納米乳製劑置於高速離心機中於5000r/min離 心lOmin，觀察發現，該納米乳製劑仍保持澄清透明，未見油水分層。(5)常溫留樣考察將皮膚抗衰老複合納米乳製劑及按傳統工藝製備的抗衰老乳 液分別在常溫25°C /RH75%條件下放置0，1，2，3個月，觀察發現，皮膚抗衰老複合納米乳制 劑仍保持澄清透明，未見油水分層。經過測定相關指標，發現採用本發明技術製備出的皮膚 抗衰老複合納米乳製劑較傳統工藝配製的抗衰老乳液產品穩定性更高。(6)透皮實驗用Franz擴散池進行皮膚透皮吸收試驗。本發明抗衰老組方配製 的凝膠劑、本發明抗衰老組方配製的乳劑與本發明的皮膚抗衰老複合納米乳製劑進行透皮 實驗比較，其透皮量結果如下表。 *備註所有實施步驟和操作過程均在潔淨而無菌的環境中進行，且操作人員應 嚴格按照無菌操作規程進行。本發明所述的實施舉例僅僅是對本發明的優選實施方式進行的描述，並非對本發明構思和範圍進行限定，在不脫離本發明設計思想的前提下，本領域中工程技術人員對本 發明的技術方案做出的各種變型和改進，均應落入本發明的保護範圍，本發明請求保護的 技術內容，已經全部記載在權利要求書中。
權利要求
皮膚抗衰老複合納米乳製劑及其製備方法，其特徵在於按重量配比該抗衰老複合納米乳製劑含有如下成分肉豆蔻酸異丙酯(IPM)5～8，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯28～35，聚甘油脂肪酸酯8～11，三重蒸餾水40～45，六胜肽0.01～0.03，超氧化物歧化酶(SOD)0.0005～0.0015，L-抗壞血酸-2-葡萄糖苷(AA2GTM)1.6～3.2，羥乙基碳醯胺(BSJ15)1.3～3.0，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)0.10～0.22，檸檬酸0.07～0.10，檸檬酸鈉1.5～2.6，N-乙醯半胱氨酸1.0～2.3，維生素E 0.5～1.5，輔酶Q100.5～1.5，沙棘油0.5～1.5，氮酮0.6～1.1。
2.根據權利要求1所述的皮膚抗衰老複合納米乳製劑，其各原料的優選重量配比是肉豆蔻酸異丙酯(IPM)7. 175，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯29. 625，聚甘油脂肪酸酯9. 875，三重蒸餾水41. 888，六胜肽0. 021，超氧化物歧化酶(S0D)0. 001，L-抗壞血酸-2-葡 萄糖苷(AA2G ) 2. 125，羥乙基碳醯胺(BSJ15)2. 5，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)0. 125， 檸檬酸0. 09，檸檬酸鈉2，N-乙醯半胱氨酸1. 25，維生素E 0. 875，輔酶Q100. 875，沙棘油 0. 875，氮酮 0.7。
3.根據權利要求2所述的皮膚抗衰老複合納米乳製劑的製備方法，其特徵在於包括以 下步驟①按照上述劑量，先將六胜肽溶於三重蒸餾水之中，待完全溶解後，在依次加入超氧化 物歧化酶(SOD)，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)，檸檬酸，檸檬酸鈉，L-抗壞血酸-2-葡萄糖 苷(AA2G )，羥乙基碳醯胺(BSJ15)，N-乙醯半胱氨酸，且每加入一種原料必須完全溶解後 再加入下一個原料，直至各種原料全部溶解、混合均勻後，立即用記號筆清楚地將此溶液標 記為水相(I)。②按照上述劑量，用分析天平準確稱取肉豆蔻酸異丙酯(IPM)，並置於另一個經過洗淨 消毒乾燥過的三角燒瓶中；然後依次溶解加入維生素E，輔酶Q10，沙棘油，氮酮，並充分溶 解、混合均勻後，用記號筆清楚地將此標記為油相(II)。③按照事先已設計好的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯(S)聚甘油脂肪酸酯(C)=3:l 的比例，分別準確稱取辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和聚甘油脂肪酸酯，並將這兩者原料置於 第三個經過洗淨消毒乾燥過的潔淨三角燒瓶之中；並將此三角燒瓶迅速置於液體快速混合 器上，充分混合均勻，使之形成乳化劑/助乳化劑(S/C)混合物，並用記號筆清楚地標記為 S/C混合物(III)。④按照油相(II) S/C(III)水相(I) = 10.5% 39.5% 50%的比例，先分別取 水相(I)、S/C混合物(III)置於第四個經過洗淨消毒乾燥過的潔淨三角燒瓶之中。⑤將上述水相(I)、S/C混合物(III)兩液相充分混合後，再在室溫25°C條件下或者自 然室溫中，將其放入超聲振蕩器中震蕩並超聲，或者在室溫25°C條件下或者自然室溫中，啟 動定時恆溫磁力攪拌器攪拌，此時會產生放熱反應，需待冷卻後再在此容器中直接加入油 相(II)，並將整個體系在超聲振蕩器中超聲，或者在室溫25°C條件下或者自然室溫中，啟 動定時恆溫磁力攪拌器，以200rpm mirT1的轉速磁力攪拌。⑥關閉超聲振蕩器或者定時恆溫磁力攪拌器，取下三角燒瓶，肉眼觀察其外觀如是橙 黃色、流體性和分散性好、有明顯可見的乳光者，即為皮膚抗衰老複合納米乳製劑。
全文摘要
本發明是一種皮膚抗衰老複合納米乳製劑及其製備方法。該納米乳粒徑小、分布均勻、透明度和流動性好，其中抗衰老功效成分在高效經皮傳遞系統和具有被動靶向作用的空白納米乳承載和匹配下，不僅能快速分散及增溶速溶，且複合功效成分間共濟協同、聯合增效得以加強、並可達到最佳生物利用度和作用效果；功效成分透皮吸收作用也明顯加快和增加，使皮膚抗衰老近期和遠期療效更明顯和持久。應用本發明所製備的該納米乳還有效改善了功效成分的溶解性、分散性等，提高了產品穩定性、安全性、實用性、有效性。本發明製備工藝簡單，無需特殊儀器和貴重設備，並不需加熱及其它能量，節約能源，利於環保，易於產業化，並可廣泛應用於美容保健及皮膚抗衰老。
文檔編號A61K8/06GK101874762SQ20091021367
公開日2010年11月3日 申請日期2009年12月8日 優先權日2009年12月8日
發明者丁克祥, 丁宇, 左夏林, 朱曉亮, 楊永鵬, 董萍 申請人:董萍;丁克祥