桃蛀螟人工飼料、製備方法及繼代飼養方法
2023-06-02 12:07:56 1
桃蛀螟人工飼料、製備方法及繼代飼養方法
【專利摘要】本發明公開了一種桃蛀螟人工飼料、製備方法及繼代飼養方法，屬於昆蟲飼料及飼養【技術領域】。本發明解決了以下三個方面的問題：(1)實現桃蛀螟完整生活史的室內人工的繼代飼養；(2)在實現室內人工飼養的前提下，通過不斷優化飼料配方和改進飼養操作，解決飼養種群的衰退問題；(3)獲得桃蛀螟室內人工繼代飼養的專用優良飼料配方，滿足敏感種群選育及其他各類試驗對桃蛀螟成蟲和各齡幼蟲標準化健康蟲源的需要。
【專利說明】桃蛀螟人工飼料、製備方法及繼代飼養方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種桃蛀螟人工飼料，以及該人工飼料的製備方法，同時還涉及一種 桃蛀螟繼代飼養方法，屬於昆蟲飼料及飼養【技術領域】。
【背景技術】
[0002] 桃駐螟（Conogethespunctiferalis)，隸屬鱗翅目（Lepidoptera)草螟科 (Crambidae)，別名豹紋斑螟、桃蠹螟、桃實螟蛾等，幼蟲俗稱蛀心蟲。寄主植物逾100餘種， 為世界性害蟲。80年代以前，國內外對桃蛀螟的研究報導較少，至90年代後期才逐漸增多。 桃蛀螟果樹上為害尤為嚴重，嚴重時造成"十果九蛀"，近年來也成為一些玉米產區主要害 蟲之一，因此對桃蛀螟開展更加深入和全方位的研究迫在眉睫。
[0003] 解決桃蛀螟的室內人工繼代飼養問題，是更好的開展其生物學、生理生化、生態 學、農藥篩選生物防治等領域研究的基礎課題之一。目前，對桃蛀螟的室內人工飼養方法可 概括為兩類，一類是在室內用養蟲籠直接用桃蛀螟的寄主植物活體或採摘的新鮮葉片、果 實實現飼養，該方法是最為傳統的飼養方法，具有簡單、成本低、易於操作的優點。但是存在 以下問題：（1)受寄主植物生長季節限制，難以實現周年飼養；（2)存活率較低，難以短時間 內獲得大量實驗蟲源；（3)幼蟲蟲態難以控制，整齊性差；(4)受環境影響較大，飼養效果難 以預料。另一類則是通過人工飼料來實現，如Honda等人報導的桃蛀螟的人工飼養方案，其 中飼料配方包括：150g飼料粉（含玉米、小麥、稻麩、維生素和微量物質）、50g大豆粉、50g 幹木屑、30g瓊脂粉和700mL水，同時採用蘸有6?8%蔗糖水的棉球作為成蟲產卵的補充 營養。該方法實現了桃蛀螟室內採用人工飼料方法的多代飼養，是一種報導較早、使用較為 普遍的方法。在此基礎上，後人對人工飼料配方又進行了一些改進，如中國專利（申請號： 201310445207. 5)公開了一種桃蛀螟人工飼料配方，以質量份計，由板慄粉40份、玉米粉90 份、桃粉10份、大豆粉30份、啤酒酵母粉30份、多維葡萄糖10份、酪蛋白10份、膽固醇0. 1 份、抗壞血酸2份、紅黴素3份、瓊脂粉10份、尼泊金甲酯1份、對羥基苯甲酸甲酯2份和水 700份組成，該飼料能夠提高桃蛀螟的存活率和繁殖力，降低飼養成本，但是未解決飼養種 群存活率低、種群衰退、繼代性差等問題，難以實現室內人工方法的長時間繼代飼養，無法 滿足一些實驗如對桃蛀螟連續多代的抗性選育實驗的需求。因此，研究和改進桃蛀螟人工 飼養技術，具有非常重要的現實意義。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一種桃蛀螟人工飼料。
[0005] 同時，本發明提供一種桃蛀螟人工飼料的製備方法。
[0006] 最後，本發明提供一種桃蛀螟繼代飼養方法。
[0007] 為了實現以上目的，本發明所採用的技術方案是：
[0008] 一種桃蛀螟人工飼料，主要由以下質量份數的組分組成：麥胚粉40?60份，大豆 粉20?40份，玉米苗乾粉15?30份，板慄乾粉15?30份，酵母提取物10?25份，山梨 酸鉀0.5?1份，對羥基苯甲酸乙酯0.5?2份，維生素C1?4份，玉米胚芽油1?3份， 海藻糖0.3?1份。
[0009] 具體的，桃蛀螟人工飼料，還包括以下質量份數的組分：瓊脂粉10?20份，水 400 ?600 份。
[0010] 優選的，桃蛀螟人工飼料，由以下質量份數的組分組成：麥胚粉50份，大豆粉30 份，玉米苗乾粉20份，板慄乾粉20份，酵母提取物15份，山梨酸鉀0. 7份，對羥基苯甲酸乙 酯1份，維生素C2份，玉米胚芽油1. 3份，海藻糖0. 5份，瓊脂粉15份，水500份。
[0011] 所述麥胚粉可以採用市售商品，也可採用如下方法製備：（1)取適量小麥，洗淨， (室溫條件下）培養至露白（胚根伸長，露出白芽）；(2)將露白籽粒（於恆溫乾燥箱中）殺 青（105°C下殺青0.5小時），再烘乾（80°C下）至恆重；（3)將烘乾的籽粒磨碎，過篩（100 目），即得麥胚粉。
[0012] 所述大豆粉可以採用市售商品，也可採用如下方法製備：取適量大豆，洗淨，粉碎， 過篩（100目）後，於滅菌鍋中高溫蒸製（121°C下蒸30分鐘），晾乾（室溫下），即得大豆 粉。
[0013] 所述玉米苗乾粉的製備方法為：（1)取適量玉米，洗淨，（室溫條件下）培養至三葉 期（植株第三片葉露出葉心2?3cm);(2)將玉米苗（於恆溫乾燥箱中）殺青（105°C下殺 青0.5小時），再烘乾（80°C下）至恆重；（3)將烘乾的玉米苗粉碎，過篩（100目），即得玉 米苗乾粉。
[0014] 所述板慄乾粉可以採用市售商品，也可採用如下方法製備：取適量板慄堅果，去 皮，粉碎，過篩（100目），即得板慄乾粉。
[0015] 所述酵母提取物可以採用市售商品，如生工生物工程（上海）股份有限公司， BBI(G0961)〇
[0016] 一種桃蛀螟人工飼料的製備方法，包括以下步驟：
[0017] (1)按照質量份數準確取各組分，將麥胚粉、大豆粉、玉米苗乾粉、板慄乾粉與酵母 提取物混合均勻，得混合物A備用；
[0018] (2)將瓊脂粉溶於水中，得溶液B備用；
[0019] (3)將混合物A和溶液B滅菌，再混合均勻，加入玉米胚芽油和海藻糖；待溫度降 至70°C以下，再加入山梨酸鉀、對羥基苯甲酸乙酯和維生素C，攪拌均勻，即得。
[0020] 所述步驟（1)、（2)中由於麥胚粉、大豆粉、玉米苗乾粉、板慄乾粉含有較多的支鏈 澱粉和直鏈澱粉，澱粉類物質與瓊脂溶液混合後，在高溫高壓時會產生較嚴重的糊化和膨 脹現象，故不易混合滅菌。
[0021] 所述步驟（3)中玉米胚芽油可以不滅菌，海藻糖滅菌後有效成分會改變。
[0022] 一種桃蛀螟繼代飼養方法，包括以下步驟：
[0023] (1)幼蟲飼養及蛹的收集：將桃蛀螟幼蟲接入盛裝有人工飼料的容器中，置於溫 度25?30°C，相對溼度65?75%，光周期L:D= (12?14) : (10?12)，光照強度4000? 5000LUX條件下飼養，收集蟲蛹；
[0024] (2)成蟲羽化：將雌、雄蟲蛹混合，加入補充營養液，待成蟲產卵後收集蟲卵；
[0025](3)卵的孵化：將蟲卵置於溫度25?30°C，相對溼度65?75 %，光周期L:D= (12?14) : (10?12)，光照強度4000?5000Lux條件下孵化，收集幼蟲，繼代飼養。
[0026] 所述步驟（2)中補充營養液由以下質量百分含量的組分組成：蜂蜜4?6%，海藻 糖1?3%，維生素C0. 1?1%，餘量為水。
[0027] 優選的，補充營養液由以下質量百分含量的組分組成：蜂蜜5 %，海藻糖2 %，維生 素C0. 5%，餘量為水。
[0028]本發明的有益效果：
[0029] 本發明在桃蛀螟人工飼料中添加酵母提取物，除提供營養外，還有利於保持桃蛀 螟連續室內繼代飼養過程中腸道益生菌的活性，對獲得健康幼蟲和防止種群衰退起著積極 作用。由於天然飼料和人工配方飼料在營養成分上不可能達到完全一致，為此在飼料中加 入海藻糖，能有效降低幼蟲死亡率（尤其是低齡幼蟲），提高桃蛀螟在室內人工繼代飼養過 程中的抗逆性和耐受性，為獲得健康蟲源和實現室內連續多代飼養提供保障。同時，飼料配 方中玉米胚芽油能防止飼料過快乾燥，板慄乾粉則兼顧了桃蛀螟在食性上的偏好。
[0030] 本發明在桃蛀螟成蟲產卵過程中添加的補充營養液除含有蜂蜜外，還添加有一定 比例的海藻糖（國際權威的《自然》雜誌曾發表對海藻糖的評價："對許多生命體而言，海藻 糖的有與無，意味著生存或者死亡"。），海藻糖能夠提高桃蛀螟的耐受性和新陳代謝活力， 有效降低桃蛀螟產卵期的死亡率，延長壽命，提高成蟲產卵率。
[0031] 本發明解決了以下三個方面的問題：（1)實現桃蛀螟完整生活史的室內人工的繼 代飼養；（2)在實現室內人工飼養的前提下，通過不斷優化飼料配方和改進飼養操作，解決 飼養種群的衰退問題；(3)獲得桃蛀螟室內人工繼代飼養的專用優良飼料配方，滿足敏感 種群選育及其他各類試驗對桃蛀螟成蟲和各齡幼蟲標準化健康蟲源的需要。
【具體實施方式】
[0032] 下述實施例僅對本發明作進一步詳細說明，但不構成對本發明的任何限制。
[0033] 實施例1
[0034] 本實施例中桃蛀螟人工飼料，由以下組分組成：麥胚粉50g，大豆粉30g，玉米苗幹 粉20g，板慄乾粉20g，酵母提取物15g，山梨酸鉀0. 7g，對羥基苯甲酸乙酯lg，維生素C2g， 玉米胚芽油1. 3g，海藻糖0. 5g，瓊脂粉15g，蒸餾水500mL。
[0035] 所述麥胚粉的製備方法為：（1)取適量小麥，洗淨，室溫條件下培養至露白（胚根 伸長，露出白芽）；（2)將露白籽粒於恆溫乾燥箱中105°C下殺青0.5小時，再在80°C條件下 烘乾至恆重；（3)將烘乾的籽粒磨碎，過100目篩，即得麥胚粉。
[0036] 所述大豆粉的製備方法為：取適量大豆，洗淨，粉碎，過100目篩後，於滅菌鍋中 121°C條件下蒸30分鐘，室溫晾乾，即得大豆粉。
[0037] 所述玉米苗乾粉的製備方法為：（1)取適量玉米，洗淨，室溫條件下培養至三葉期 (植株第三片葉露出葉心2. 5cm) ; (2)將玉米苗於恆溫乾燥箱中105°C下殺青0. 5小時，再 在80°C條件下烘乾至恆重；（3)將烘乾的玉米苗粉碎，過100目篩，即得玉米苗乾粉。
[0038] 所述板慄乾粉的製備方法為：取適量板慄堅果，去皮，粉碎，過100目篩，即得板慄 乾粉。
[0039] 所述酵母提取物購自生工生物工程（上海）股份有限公司，BBI(G0961)。
[0040] 本實施例中桃蛀螟人工飼料的製備方法，包括以下步驟：
[0041] (1)按照質量準確取各組分，將麥胚粉、大豆粉、玉米苗乾粉、板慄乾粉、酵母提取 物裝入500mL燒杯中，混合均勻得混合物A;
[0042] (2)將瓊脂粉加入三角瓶中，再加入蒸餾水，混合均勻得溶液B;
[0043] (3)將混合物A和溶液B置於滅菌鍋中，在121°C條件下高壓蒸汽滅菌20分鐘；
[0044] (4)滅菌後，迅速將混合物A和溶液B攪拌混勻，加入玉米胚芽油和海藻糖；
[0045] (5)待溫度降至65°C時，依次加入山梨酸鉀、對羥基苯甲酸乙酯和維生素C，攪拌 混勻；
[0046] (6)將配製好的飼料倒入直徑150mm的培養皿中（或保鮮盒），室溫冷卻凝固後， 用保鮮膜密封，儲存於4°C冰箱中備用。
[0047] 本實施例中桃蛀螟繼代飼養方法，包括以下步驟：
[0048] (1)飼養蟲源
[0049] 從洛陽市郊區桃園採集被桃柱螟為害的爛果，在室內將桃柱螟挑出並接入上述配 制好的人工飼料中直至化蛹，成蟲羽化後產的卵作為蟲源；
[0050] (2)卵的孵化
[0051] 將附著有桃蛀螟蟲卵的紗布放入保鮮袋中，置於溫度27°C、相對溼度70%、光周 期L:D= 14:10、光照強度4800LUX條件下的人工智慧氣候培養箱中，待其孵化成幼蟲，統計 孵化率；
[0052] (3)幼蟲的飼養
[0053] 將桃蛀螟幼蟲轉接入裝有人工飼料的指形管（規格：7. 5cmX1. 5cm)中，每管接 2頭幼蟲（1?2頭均可），消毒棉塞封口，置於溫度27°C、相對溼度70%、光周期L:D= 14:10、光照強度4800LUX條件下飼養，直至化蛹（幼蟲陸續在指形管中結繭化蛹），統計幼 蟲存活率；
[0054] (4)蛹的收集
[0055] 待蛹呈現深紅色時，將蛹剝出，收集在保鮮盒內（由於大量的老熟幼蟲化蛹的時 間不可能完全同步，為了獲得標準化蟲源，可將較早成熟的蛹剝出後放入4°C冰箱中暫存， 最多不超過一星期，待全部幼蟲化蛹後，再將收集的蛹同時從冰箱中取出，進入下一環節進 行羽化）；
[0056] (5)成蟲羽化
[0057] 將收集的蟲蛹按照雌雄比1:1混合，每30頭（25?35頭均可）一組放入2000mL 大燒杯中，燒杯口用紗布封嚴（可作為成蟲產卵的附著介質），同時燒杯內每天放入蘸有補 充營養液的棉球（作為成蟲的補充營養），待成蟲產卵後收集蟲卵；
[0058] 補充營養液由以下質量百分含量的組分組成：蜂蜜5%，海藻糖2%，維生素C 0. 5%，餘量為水；
[0059] (6)連續飼養21代，抽取第1代、第4代、第8代、第12代、第16代、第20代對比 測定主要生命參數指標，結果見下表1。
[0060] 表1桃蛀螟不同代別主要生命參數指標對比（採用新復極差法多重比較）
[0061]
【權利要求】
1. 一種桃蛀螟人工飼料，其特徵在於：主要由以下質量份數的組分組成：麥胚粉40? 60份，大豆粉20?40份，玉米苗乾粉15?30份，板慄乾粉15?30份，酵母提取物10? 25份，山梨酸鉀0. 5?1份，對羥基苯甲酸乙酯0. 5?2份，維生素C 1?4份，玉米胚芽油 1?3份，海藻糖0? 3?1份。
2. 根據權利要求1所述的桃蛀螟人工飼料，其特徵在於：還包括以下質量份數的組分： 瓊脂粉10?20份，水400?600份。
3. 根據權利要求2所述的桃蛀螟人工飼料，其特徵在於：由以下質量份數的組分組成： 麥胚粉50份，大豆粉30份，玉米苗乾粉20份，板慄乾粉20份，酵母提取物15份，山梨酸鉀 0. 7份，對羥基苯甲酸乙酯1份，維生素C 2份，玉米胚芽油1. 3份，海藻糖0. 5份，瓊脂粉 15份，水500份。
4. 根據權利要求1?3任一項所述的桃蛀螟人工飼料，其特徵在於：所述麥胚粉的制 備方法為：（1)取適量小麥，洗淨，培養至露白；（2)將露白籽粒殺青，再烘乾至恆重；(3)將 烘乾的籽粒磨碎，過篩，即得麥胚粉。
5. 根據權利要求1?3任一項所述的桃蛀螟人工飼料，其特徵在於：所述大豆粉的制 備方法為：取適量大豆，洗淨，粉碎，過篩後，於滅菌鍋中高溫蒸製，晾乾，即得大豆粉。
6. 根據權利要求1?3任一項所述的桃蛀螟人工飼料，其特徵在於：所述玉米苗乾粉 的製備方法為：（1)取適量玉米，洗淨，培養至三葉期；（2)將玉米苗殺青，再烘乾至恆重； (3)將烘乾的玉米苗粉碎，過篩，即得玉米苗乾粉。
7. -種如權利要求2或3所述的桃蛀螟人工飼料的製備方法，其特徵在於：包括以下 步驟： (1) 按照質量份數準確取各組分，將麥胚粉、大豆粉、玉米苗乾粉、板慄乾粉與酵母提取 物混合均勻，得混合物A備用； (2) 將瓊脂粉溶於水中，得溶液B備用； (3) 將混合物A和溶液B滅菌，再混合均勻，加入玉米胚芽油和海藻糖；待溫度降至 70°C以下，再加入山梨酸鉀、對羥基苯甲酸乙酯和維生素C，攪拌均勻，即得。
8. -種採用如權利要求1?3任一項所述人工飼料的桃蛀螟繼代飼養方法，其特徵在 於：包括以下步驟： (1) 幼蟲飼養及蛹的收集：將桃蛀螟幼蟲接入盛裝有人工飼料的容器中，置於溫度 25?30°C，相對溼度65?75 %，光周期L:D = (12?14) : (10?12)，光照強度4000? 5000LUX條件下飼養，收集蟲蛹； (2) 成蟲羽化：將雌、雄蟲蛹混合，加入補充營養液，待成蟲產卵後收集蟲卵； (3) 卵的孵化：將蟲卵孵化，孵化條件同步驟（1)中飼養條件，收集幼蟲，繼代飼養。
9. 根據權利要求8所述的桃蛀螟繼代飼養方法，其特徵在於：所述步驟（2)中補充營 養液由以下質量百分含量的組分組成：蜂蜜4?6%，海藻糖1?3%，維生素C 0. 1?1%， 餘量為水。
10. 根據權利要求9所述的桃蛀螟繼代飼養方法，其特徵在於：所述補充營養液由以下 質量百分含量的組分組成：蜂蜜5%，海藻糖2%，維生素C 0. 5%，餘量為水。
【文檔編號】A23K1/18GK104304694SQ201410429392
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年8月27日 優先權日:2014年8月27日
【發明者】宋月芹, 董鈞鋒, 孫會忠, 糾敏 申請人:河南科技大學