微生物發酵方法和組合物的製作方法
2023-06-28 20:30:56 1
微生物發酵方法和組合物的製作方法
【專利摘要】本發明提供了用於培養甲基桿菌屬細菌的方法。具體地，所述方法提供了有效地且廉價地培養這些細菌的方法。另外，本發明提供了利用這些細菌培養物改善植物農業的方法。
【專利說明】微生物發酵方法和組合物
[0001] 相關申請的交叉引用
[0002] 本國際專利申請要求以下申請的權益：2013年3月14日提交且通過引用整體並 入本文的美國專利申請號61/784, 375 ;2012年6月1日提交且通過引用整體併入本文的美 國專利申請號61/654,504;和2012年6月1日提交且通過引用整體併入本文的美國專利 申請號 61/654, 394。
【背景技術】
[0003]-碳有機化合物（one-carbonorganiccompounds)諸如甲焼和甲醇廣泛地 存在於自然界中，且被歸類為甲烷氧化菌和甲基營養菌的細菌用作碳源。甲烷氧化細 菌包括在甲基細菌屬（Methylobacter)、甲基單胞菌屬（Methylomonas)、甲基微菌屬 (Methylomicrobium)、甲基球菌屬（Methylococcus)、甲基彎曲菌屬（Methylosinus)、 甲基孢囊菌屬（Methylocystis)、甲基球狀菌屬（Methylosphaera)、甲基暖菌屬 (Methylocaldum)和甲基細胞菌屬（Methylocella)中的種（Lidstrom，2006)。甲焼氧 化菌具有酶甲烷單加氧酶，該酶將來自02的氧原子摻入甲烷中，從而形成甲醇。所有甲 烷氧化菌都是專性一碳利用者，不能利用含有碳-碳鍵的化合物。另一方面，甲基營養 菌還可以利用更複雜的有機化合物，諸如有機酸、高級醇、糖等。因而，甲基營養細菌是 兼性的甲基營養菌。甲基營養細菌包括在甲基桿菌屬（Methylobacterium)、生絲微菌屬 (Hyphomicrobium)、嗜甲基菌屬（Methylophilus)、甲基芽抱桿菌屬（Methylobacillus)、口麓 甲基菌屬（Methylophaga)、氨基桿菌屬（Aminobacter)、耗甲基桿菌屬（Methylorhabdus)、 甲基球形菌屬（Methylopila)、Methylosulfonomonas、Marinosulfonomonas、副球菌屬 (Paracoccus)、黃色桿菌屬（Xanthobacter)、彎桿菌屬（Ancylobacter)(也被稱作微環菌 屬（Microcyclus))、硫桿菌屬（Thiobacillus)、紅假單胞菌屬（Rhodopseudomonas)、紅 細菌屬（Rhodobacter)、醋桿菌屬（Acetobacter)、芽孢桿菌屬（Bacillus)、分枝桿菌屬 (Mycobacterium)、Arthobacter和諾卡氏菌屬（Nocardia)中的種（Lidstrom，2006) 〇
[0004] 甲基桿菌屬的大多數甲基營養細菌是粉紅色的。它們常規地被稱作PPFM細菌， 是粉紅色的兼性甲基營養菌。Green(2005, 2006)在甲基桿菌屬中鑑定了 12個經驗證的 種，具體地是胺甲基桿菌（M.aminovorans)、氯甲焼甲基桿菌（M.chloromethanicum)、 二氯甲焼甲基桿菌（M.dichloromethanicum)、扭脫甲基桿菌（M.extorquens)、藤 澤氏甲基桿菌（M.fujisawaense)、嗜中溫甲基桿菌（M.mesophilicum)、嗜有機甲基 桿菌（M.organophilum)、耐福射甲基桿菌（M.radiotolerans)、羅得西亞甲基桿菌 (M.rhodesianum)、玫瑰紅甲基桿菌（M.rhodinum)、硫氛酸鹽甲基桿菌（M.thiocyanatum) 和扎氏甲基桿菌（M.zatmanii)D但是，巢狀甲基桿菌（M.nidulans)是一種非PPFM的固氮 甲基桿菌（Sy等人，2001)。甲基桿菌屬普遍存在於自然界中，在土壤、灰塵、淡水、沉澱物和 葉表面中以及在工業和臨床環境中發現（Green，2006)。
[0005] PPFM細菌作為大多數（如果不是全部的話）植物物種（範圍從藻類、蘚類和 苔類至被子植物和裸子植物）的葉表面的定殖者的存在，提示PPFM細菌可能在植物生 理學中起重要作用（Corpe和Rheem, 1989;Holland和Polacco, 1994 ;Holland, 1997 ;Kutschera, 2007)。植物產生和分泌甲醇（可能是作為生長中的植物細胞壁內的果膠代謝 的廢產物）的事實，提示這些研宄人員存在共生關聯：PPFM細菌以植物產生的甲醇為食， 並且反過來給所述植物提供積極益處。提示的PPFM細菌對植物生理學的益處包括通過 提供PPFM產生的細胞分裂素植物激素對氮代謝、種子發芽和植物生長刺激產生的積極效 果。PPFM細菌用於改善植物生長、植物產率、種子發芽、雄性能育性和植物營養特性的用 途，已經公開在美國專利5, 512, 069、美國專利5, 961，687、美國專利6, 174, 837、美國專利 6, 329, 320、美國專利7, 435, 878和美國專利申請
【發明者】格雷格·博戈西安 申請人:新葉共生有限公司