抗C型肝炎病毒化合物及其製備方法和應用的製作方法

2023-07-04 00:44:46

抗C型肝炎病毒化合物及其製備方法和應用的製作方法
【專利摘要】本發明提出了一種抗C型肝炎病毒化合物及其製備方法和應用。該化合物為式1所示化合物或式1所示化合物的立體異構體、幾何異構體、互變異構體，其中，R1和R2分別獨立地選自氫、甲醯基、苯甲醯基以及C1-C3直鏈或支鏈烷基，並且R1和R2不同時為氫。該化合物具有較好的脂溶性和理化性質，從而可以顯著提高生物利用度和體內藥效。
【專利說明】抗C型肝炎病毒化合物及其製備方法和應用

【技術領域】
[0001] 本發明屬於藥物化學和藥物治療學領域，具體而言，本發明涉及一種抗C型肝炎 病毒化合物及其製備方法和應用。

【背景技術】
[0002] C型肝炎（C肝）是由C肝病毒（HCV)引起的，以肝臟損害為主的一組全身性傳 染病。HCV對人類的威脅不僅僅是因為其高患病率，還因為持續性HCV感染的潛在嚴重並 發症。這種慢性疾病可導致肝硬化、肝癌等晚期肝病。近些年來，HCV生物學的快速進展使 人們對HCV的感染和複製有了突破性認識，對於抗HCV藥物的研究與開發產生了重要影響。 通過幹預與HCV複製有關的宿主細胞蛋白進行抗HCV的研究受到普遍關注，並取得眾多突 破。經研究發現，親環素（cyclophilin，CyP)涉及HCV生命周期的各個階段，其中親環素 A(CypA)對於HCV複製是必不可少的，主要是通過與HCV的非結構蛋白NS5A蛋白相互作用 來發揮其功能。
[0003] CyP是一個保守的蛋白質家族，從低等原核生物到哺乳動物都有這類蛋白。該組 蛋白的共同特徵是具有肽脯氨醯順反異構酶（Peptidyl proline cis/trans isomerase， PPIase)活性。依據相對分子質量以及亞細胞定位等特徵，目前已知的人親環素家族有 CypA、CypB、CypC、CypD等16種成員。人親環素 A(hCypA)是其中最重要的，也是研究最廣泛 的一種，它由165個胺基酸組成，相對分子質量18000,約佔細胞蛋白總量的0. 1% -0.4%， 主要位於胞質內。除了作為環孢菌素 A的體內結合蛋白，hCypA還能結合蛋白質並加速它們 的摺疊、裝配和轉運，起分子伴侶（chaperone)的作用。CypA包含八股反平行β片層，這些 β片層組成一個桶狀結構，在桶的上下口各有一段8螺旋將桶的兩端封閉，CypA的配體結 合口袋則位於該桶狀結構的側面，主要由兩個大的亞口袋組成：亞口袋A和亞口袋B。亞口 袋 A 主要由 Thr71、Gly74、Asnl02、Alal03、Thrl07、Glyl09、SerllO 和 Glnll 等殘基組成， 它們大部分為親水性殘基；亞口袋B為一深的疏水性凹槽，主要由Phe60、Met61、Phe113和 Leul22等殘基組成。
[0004] 多項研究已經證實，CypA疏水口袋區的PPIase活性在參與HCV RNA複製和蛋白 表達過程中起到了至關重要的作用。該酶能通過結合併催化脯氨酸肽鍵的順反異構化來加 速體內蛋白質的摺疊或改變蛋白質構象，保證HCV複製複合體的正確組裝及功能，從而發 揮分子伴侶的功能。HCV NS5A蛋白是CypA的主要配體，CypA對NS5A中脯氨酸肽鍵的異構 體化在HCV複製過程中起到重要作用，而CypA的PPIase抑制劑可通過破壞CypA-NS5A的 相互作用達到抑制病毒複製的作用。
[0005] 因此，開發能夠抑制CypA的PPIase活性的小分子，可以起到靶向抗HCV複製的作 用，發揮優良的抗C肝病毒效果。專利號為ZL200910050646. X的發明專利中公開了一種取 代苯甲醯脲類化合物及其製備方法和用途，該化合物如式21所示，其具有優良的CypA抑 制效果，代表性化合物為1_(芴-9-基）-3-(2,6_二羥基苯甲醯）脲（如式9所示），其為 CypA強效抑制劑。然而具有式21所示通式的化合物往往溶解性較差，影響其體內生物利用 度和體內藥效。
[0006]

【權利要求】
1. 一種化合物，其特徵在於，所述化合物為式1所示化合物或式1所示化合物的立體異 構體、幾何異構體、互變異構體 ：
其中， 札和R2分別獨立地選自氫、甲醯基、苯甲醯基以及Ci-Q直鏈或支鏈烷基，並且札和R2 不同時為氫。
2. 根據權利要求1所述的化合物，其特徵在於，所述甲醯基和苯甲醯基被Ci-k直鏈烷 基、支鏈烷基或環狀烷基取代，所述CfC 3直鏈或支鏈烷基被羥基或苄氧基取 代。
3. 根據權利要求1所述的化合物，其特徵在於，所述&和R2分別獨立地選自氫、乙醯 基、丙醯基、正丁醯基、異丁醯基、環丙基甲醯基、正戊醯基、異戊醯基、特戊醯基、正己醯基、 環己基甲醯基、正辛醯基、苯甲醯基、羥乙基、2-苄氧基乙基。
4. 根據權利要求3所述的化合物，其特徵在於，所述式1所示化合物具有如下結構式之

5. -種藥物組合物，其特徵在於，包含治療有效量的一種或多種權利要求1?4任一項 所述的化合物以及藥學上可接受的賦形劑、載體或稀釋劑。
6. 根據權利要求5所述的藥物組合物，其特徵在於，進一步包括：不同於權利要求1-4 任一項所述的化合物的C型肝炎治療劑。
7. 根據權利要求6所述的藥物組合物，其特徵在於，所述C型肝炎治療劑為選自α-幹 擾素、聚乙二醇幹擾素、利巴韋林、特拉匹韋、博賽匹韋、司美匹韋和索非布韋的至少之一。
8. 根據權利要求5所述的藥物組合物，其特徵在於，所述藥物組合物用於下列至少之 預防或者治療C型肝炎； 抑制CypA肽基脯氨醯順反異構酶；以及 抑制HCV病毒的增殖和活性。
9. 一種藥物聯合，其特徵在於，包括權利要求1-4任一項所述的化合物以及α-幹擾 素、聚乙二醇幹擾素、利巴韋林、特拉匹韋、博賽匹韋、司美匹韋和索非布韋中的至少之一。
10. -種製備權利要求1-4任一項所述的化合物的方法，其特徵在於，包括： 1) 將式2所示化合物與式3所示化合物接觸，以便生成式4所示化合物； 2) 將所述式4所示化合物進行水解，以便生成式5所示化合物； 3) 將三光氣與式6所示化合物接觸，以便生成式7所示化合物； 4) 將所述式5所示化合物與所述式7所示化合物接觸，以便生成式8所示化合物； 5) 將所述式8所示化合物進行脫苄基反應，以便生成式9所示化合物；以及 6) 將所述式9所示化合物與甲醯氯或甲酸酐或苯甲醯氯接觸，以便得到式1所示化合 物，其中，所述甲醯氯、甲酸酐和苯甲醯氯被直鏈烷基、支鏈烷基或環狀 燒基取代，
1 根據權利要求10所述的方法，其特徵在於，步驟1)進一步包括： 1-1)將所述式2所示化合物和所述式3所示化合物溶解於二甲基亞碸中； 1-2)將1-1)得到的混合物在110?130攝氏度攪拌5?10小時； 1-3)將1-2)得到的反應液中加入冰水並攪拌30分鐘，然後依次抽濾、水洗和乾燥，以 便得到白色固體；以及 1- 4)利用乙醇對1-3)得到的所述白色固體進行重結晶，以便獲得所述式4所示化合 物。
12. 根據權利要求10所述的方法，其特徵在於，步驟2)進一步包括： 2- 1)將步驟1)得到的所述式4所示化合物溶於苄醇中，然後加入正四丁基溴化銨、氫 氧化鉀和水； 2-2)將2-1)得到的混合溶液在130?150攝氏度下攪拌12?36小時；以及 2- 3)將2-2)得到的反應液進行減壓蒸餾，並採用矽膠柱層析分離純化剩餘固體，以便 獲得所述式5所示化合物。
13. 根據權利要求10所述的方法，其特徵在於，步驟3)進一步包括： 3- 1)將三光氣溶於1，2-二氯乙烷中，並冷卻至0?5攝氏度； 3-2)將所述式6所示化合物溶於1，2_二氯乙烷中，並將得到的混合物與3-1)得到的 反應液進行混合； 3-3)對3-2)得到的反應液進行加熱回流，當反應液呈無色透明狀時，加入三乙胺，並 繼續回流45分鐘；以及 3- 4)將3-3)得到的回流液進行減壓蒸餾，以便獲得所述式7所示化合物。
14. 根據權利要求10所述的方法，其特徵在於，步驟4)進一步包括： 4- 1)將所述式5所示化合物與所述式7所示化合物進行混合，並加熱回流10?20小 時；以及 4- 2)將4-1)所得到的回流液進行減壓蒸餾，並採用矽膠柱層析純化殘留物，以便獲得 所述式8所示化合物。
15. 根據權利要求10所述的方法，其特徵在於，步驟5)進一步包括： 5- 1)將所述式8所示化合物與甲醇和四氫呋喃混合溶液進行混合； 5-2)向5-1)所得反應液中加入Pd/C，並在30?50攝氏度下通入氫氣反應4?6小 時，以便析出固體混合物；以及 5- 3)將5-2)得到的所述固體混合物與四氫呋喃混合，並進行過濾和減壓蒸餾，以便獲 得所述式9所示化合物。
16. 根據權利要求10所述的方法，其特徵在於，步驟6)進一步包括： 6- 1)將所述式9所示化合物與無水N，N-二甲基甲醯胺和三乙胺進行混合； 6-2)在0攝氏度或20攝氏度條件下向6-1)得到的混合溶液中加入甲醯氯或甲酸酐或 苯甲醯氯，繼續攪拌15分鐘，然後將所得到混合液在40攝氏度下繼續反應12?36小時， 其中，所述甲醯氯、甲酸酐和苯甲醯氯被直鏈烷基、支鏈烷基或環狀烷基 取代；以及 6-3)利用二氯甲烷對6-2)得到的反應液進行萃取、水洗、乾燥、濃縮，並採用矽膠柱層 析純化殘留物，以便獲得所述式1所示化合物。
17. -種製備權利要求1-4任一項所述的化合物的方法，其特徵在於，包括： a)將乙二醇單苄醚與式3所示化合物接觸，以便生成式10所示化合物； b) 將所述式10所示化合物進行水解，以便生成式11所示化合物； c) 將三光氣與式6所示化合物接觸，以便生成式7所示化合物； d) 將所述式11所示化合物與所述式7所示化合物接觸，以便生成式12所示化合物； 以及 e) 將所述式12所示化合物進行脫苄基反應，以便生成式13所示化合物和式14所示化 合物，
18. 根據權利要求17所述的方法，其特徵在於，步驟a)進一步包括： a-Ι)將所述式3所示化合物、乙二醇單苄醚與二甲基亞碸和氫化鈉混合； a-2)將a-Ι)得到的混合物在110?130攝氏度攪拌5?10小時；以及 a_3)採用二氯甲烷對a-2)得到的反應液進行萃取，然後依次乾燥、濃縮，並利用矽膠 柱層析純化殘留物，以便獲得式10所示化合物。
19. 根據權利要求17所述的方法，其特徵在於，步驟b)進一步包括： b-Ι)將步驟a)得到的所述式10所示化合物溶於苄醇中，然後加入正四丁基溴化銨、氫 氧化鉀和水； b-2)將b-Ι)得到的混合溶液在130?150攝氏度下攪拌12?36小時；以及 b-3)將b-2)得到的反應液進行減壓蒸餾，並採用矽膠柱層析分離純化剩餘固體，以便 獲得所述式11所示化合物。
20. 根據權利要求17所述的方法，其特徵在於，步驟c)進一步包括： c-Ι)將三光氣溶於1，2-二氯乙烷中，並冷卻至0?5攝氏度； c-2)將所述式6所示化合物溶於1，2_二氯乙烷中，並將得到的混合物與c-Ι)得到的 反應液進行混合； c-3)對c-2)得到的反應液進行加熱回流，當反應液呈無色透明狀時，加入三乙胺，並 繼續回流45分鐘；以及 c-4)將c-3)得到的回流液進行減壓蒸餾，以便獲得所述式7所示化合物。
21. 根據權利要求17所述的方法，其特徵在於，步驟d)進一步包括： d-1)將所述式5所示化合物與所述式7所示化合物進行混合，並加熱回流10?20小 時；以及 d-2)將d-Ι)所得到的回流液進行減壓蒸餾，並採用矽膠柱層析純化殘留物，以便獲得 所述式12所示化合物。
22. 根據權利要求17所述的方法，其特徵在於，步驟e)進一步包括： e-Ι)將所述式8所示化合物與甲醇和四氫呋喃混合溶液進行混合； e-2)向e-Ι)所得反應液中加入Pd/C，並在30?50攝氏度下通入氫氣反應48小時； 以及 e-3)將e-2)得到的反應液進行減壓蒸餾，並利用矽膠柱層析純化所得到的殘留物，以 便獲得所述13所示化合物和式14所示化合物。
23. -種製備權利要求1-4任一項所述的化合物的方法，其特徵在於，包括： A) 將乙二醇單苄醚與式3所示化合物接觸，以便生成式15所示化合物； B) 將所述式15所示化合物與苄醇鈉接觸，以便生成式16所示化合物； C) 將所述式16所示化合物進行水解，以便生成式17所示化合物； D) 將三光氣與式6所示化合物接觸，以便生成式7所示化合物； E) 將所述式17所示化合物與所述式7所示化合物接觸，以便生成式18所示化合物； 以及 F) 將所述式18所示化合物進行脫苄基反應，以便生成式19所示化合物和式20所示化 合物，
24. 根據權利要求23所述的方法，其特徵在於，步驟A)進一步包括： A-1)將所述式3所示化合物、乙二醇單苄醚與二甲基亞碸和氫化鈉混合； A-2)將A-1)得到的混合物在110?130攝氏度攪拌5?10小時；以及 A-3)採用二氯甲烷對A-2)得到的反應液進行萃取，然後依次乾燥、濃縮，並利用矽膠 柱層析純化殘留物，以便獲得式15所示化合物。
25. 根據權利要求23所述的方法，其特徵在於，步驟B)進一步包括： B-1)將步驟A)得到的所述式15所示化合物和苄醇鈉溶於二甲基亞碸中； B-2)將B-1)得到的混合溶液在110?130攝氏度下攪拌5?10小時；以及 B-3)利用二氯甲烷對B-2)得到的反應液進行萃取，並進行乾燥和濃縮，然後採用矽膠 柱層析分離純化剩餘固體，以便獲得所述式16所示化合物。
26. 根據權利要求23所述的方法，其特徵在於，步驟C)進一步包括： C-1)將步驟B)得到的所述式16所示化合物溶於苄醇中，然後加入正四丁基溴化銨、氫 氧化鉀和水； C-2)將C-1)得到的混合溶液在130?150攝氏度下攪拌12?36小時；以及 C-3)將C-2)得到的反應液進行減壓蒸餾，並採用矽膠柱層析分離純化剩餘固體，以便 獲得所述式17所示化合物。
27. 根據權利要求23所述的方法，其特徵在於，步驟D)進一步包括： D-1)將三光氣溶於1，2-二氯乙烷中，並冷卻至0?5攝氏度； D-2)將所述式6所示化合物溶於1，2_二氯乙烷中，並將得到的混合物與c-Ι)得到的 反應液進行混合； D-3)對D-2)得到的反應液進行加熱回流，當反應液呈無色透明狀時，加入三乙胺，並 繼續回流45分鐘；以及 D-4)將D-3)得到的回流液進行減壓蒸餾，以便獲得所述式7所示化合物。
28. 根據權利要求23所述的方法，其特徵在於，步驟E)進一步包括： E-1)將所述式17所示化合物與所述式7所示化合物進行混合，並加熱回流10?20小 時；以及 E-2)將E-1)所得到的回流液進行減壓蒸餾，並採用矽膠柱層析純化殘留物，以便獲得 所述式18所示化合物。
29. 根據權利要求23所述的方法，其特徵在於，步驟F)進一步包括： F-1)將所述式18所示化合物與甲醇和四氫呋喃混合溶液進行混合； F-2)向F-1)所得反應液中加入Pd/C，並在30?50攝氏度下通入氫氣反應48小時； 以及 F-3)將F-2)得到的反應液進行減壓蒸餾，並利用矽膠柱層析純化所得到的殘留物，以 便獲得所述19所示化合物和式20所示化合物。
【文檔編號】C07C273/18GK104058996SQ201410284733
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年6月23日 優先權日:2014年6月23日
【發明者】劉磊, 張林琦, 蔣華良, 李劍, 閆文仲, 卿傑 申請人:清華大學