一種化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法

2023-06-01 06:19:41

專利名稱：一種化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法
技術領域：
本發明涉及分析化學、食品安全領域，具體地說，是一種化妝品中增塑劑殘留量的檢測方法。
背景技術：
增塑劑指鄰苯二甲酸酯類化合物，又稱酞酸酯，縮寫PAE，是鄰苯二甲酸形成的酯的統稱，當被用作塑料增塑劑時，一般指的是鄰苯二甲酸與4 15個碳的醇形成的酯。鄰苯二甲酸酯類化合物是一類能增加塑料製品可塑性的化學品，它被普遍應用於玩具、食品包裝、乙烯地板、壁紙、清潔劑、指甲油、噴霧劑、洗髮水和沐浴液等數百種產品中。鄰苯二甲酸酯類化合物是一類內分泌幹擾物質，具有雌激素活性，我國將這類物質歸為「環境激素類汙染物」。鄰苯二甲酸酯類化合物有生殖毒性、胚胎毒性和遺傳毒性，同時具有「三致」作用，高劑量的鄰苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)已被確認可引起肝癌[2]。研究表明，鄰苯二甲酸酯類化合物可幹擾內分泌，使男性精子數量減少、運動能力低下、形態異常，嚴重的還會導致死精症和睪丸癌，是造成男性生殖問題的「罪魁禍首」，過多使用富含鄰苯二甲酸酯的化妝品，會增加女性患乳腺癌的概率、而且容易引起孕婦流產和胎兒畸形。美國國家環保署(EPA)已將6種鄰苯二甲酸酯類化合物:包括鄰苯二甲酸丁苄酯(BBP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸雙(2-乙基己基)酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)和鄰苯二甲酸二辛酯(DOP)列為優先控制汙染物。在我國，DMP、DBP和DOP也已被列入「中國環境優先汙染物黑名單」。我國頒布的《化妝品衛生規範》2007版中，將正戊基異戊基鄰苯二甲酸酯、雙正戊基鄰苯二甲酸酯、雙異戊基鄰苯二甲酸酯、苯基丁基鄰苯二甲酸酯、鄰苯二甲酸雙(2-乙基己基)酯、鄰苯二甲酸雙(2-甲氧乙基)酯、鄰苯二甲酸二丁酯七種鄰苯二甲酸酯類化合物歸為化妝品中禁用物質。目前，化妝品中增塑劑的檢測，主要有催化動力學螢光法、氣相色譜法、氣質聯用法、高效液相色譜法、液質聯用法等，目前化妝品中增塑劑的測定方法還遠不能滿足國家衛生監督的要求。本課題擬利用氣相色譜-質譜檢測技術，建立化妝品中多種增塑劑殘留量檢測和確證方法，在確保化妝品的使用安全，保障我國消費者身體健康方面具有重要意義。

發明內容
本發明的目的是克服現有不足問題，提供一種同時檢測化妝品中多種增塑劑殘留量的氣相色譜-質譜法檢測方法，可同時檢測化妝品中鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸(2-甲氧乙基)酯、雙異戊基鄰苯二甲酸酯、正戊基異戊基鄰苯二甲酸酯、雙正戊基鄰苯二甲酸酯、苯基丁基鄰苯二甲酸酯、鄰苯二甲酸(2-乙基己基)酯等7種增塑劑殘留量。本發明為實現上述目的所採用的技術方案是:一種化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法，包括以下步驟:
(I)樣品的提取
①含水量較高的化妝品(如香水、爽膚水、護手霜等)
稱取2 g均勻試樣(精確到0.01 g)置於50 mL具塞離心管中，加入15mL超純水，超聲提取IOmin,加入20mL正己燒,潤旋混勻5min,於10000 r/min離心10 min,將上層正己烷提取液轉移至凝膠淨化色譜儀(GPC)樣品瓶中，重複一次提取過程，合併上清液待淨化。②含水量較低的化妝品(如粉餅、爽身粉、指甲油等)
稱取2 g均勻試樣(精確到0.01 g)置於50 mL具塞離心管中，加入15mL甲醇，超聲提取IOmin,加入IOg無水硫酸鈉，潤旋混勻5min,於10000 r/min離心10 min,將上層清液提取液轉移至GPC樣品瓶中，重複一次提取過程，合併上清液待淨化。(2) GPC 淨化
提取液轉移至GPC樣品瓶中，儀器自動完成提取液預濃縮過程，再用乙酸乙酯-環己烷溶液(體積比1:1)定容至5mL後進樣，開始淨化過程，GPC淨化條件如下:
凝膠色譜柱:填料高度240mm，柱直徑25mm ；
流動相:乙酸乙酯:環己烷(體積比1:1)的混合溶液；
流速:5mL/min ；
進樣量:5mL。 收集10 20min時間段內的全部流出液，流出液自動收集至儀器濃縮腔內，40°C下減壓濃縮並使用流動相定容至5mL，淨化液轉移至收集瓶中，40°C下氮氣流吹乾，殘渣用5mL甲醇定容，待固相萃取淨化。(3)固相萃取柱淨化
將經GPC淨化的提取液過固相萃取柱，收集流出液，用15mL甲醇繼續洗脫，整個固相萃取過程流速不超過lmL/min，收集洗脫液，將全部收集液在40°C以下水浴減壓濃縮至近幹，加2 mL正己烷溶解殘渣並混勻，過0.22 Mm針筒濾膜，上機待測定。(4)氣相色譜-質譜儀測定
①定性測定:按照氣相色譜/質譜條件分別測定樣品溶液和標準溶液，如果樣品的GC-MS數據符合下列限定，則可定性判定為某種激素殘留:
A、樣品中待測物質與標準品具有相同的保留時間，偏差在±2.5%以內；
B、監測離子的信噪比應彡3；
C、扣除本底後該峰的質譜圖存在所有選定的監測離子；
D、樣品中待測物的全部監測離子的相對強度應與標準溶液中相應化合物的的離子相對強度比值一致，偏差在土 20%以內。②定量測定:以各激素的監測離子中信號響應最高且無幹擾的單離子對為定量離子，進行外標法定量分析。以峰面積和工作標準溶液濃度繪製標準工作曲線。為減少基質對定量測定的影響，需用空白樣提取液來配製標準工作溶液，並保證所測樣品中各激素類物質的響應值均在線性範圍內。作為優選，在步驟(2)中所述凝膠色譜柱為:Bio-Beads SX3填料(200 400目)； 作為優選，在步驟(3)中所述固相萃取柱為:C18固相萃取柱，500mg/6mL，使用前用5
mL甲醇活化。
作為優選，在步驟(4)中所述氣相色譜/質譜分析條件為:
a)色譜柱:HP-5MS石英毛細管柱，30mX0.25mmX0.25Mm ;
b)進樣口溫度:250°C;
c)升溫程序:初始柱溫60°C,保持Imin,以20°C/min升溫至220°C,保持Imin,以5°C /min 升溫至 280°C,保持 4min ；
d)載氣:氦氣(純度≥99.999%)，流速lmL/min ；
e)進樣方式:不分流進樣；
f)進樣量:WL;
g)離子源:電子轟擊源(EI);
h)監測方式:選擇離子掃描(SM)；
i)電離能量:70eV; j)溶劑延遲:5min;
k)色譜與質譜接口溫度:280°C.作為優選，在步驟(4)中所述標準溶液的配置方法為:
標準儲備液:分別稱取適量標準品，分別用正己烷溶解並定容至一定體積，I 4°C冰箱保存。混合標準儲備液:各取適量標準儲備溶液，用正己烷稀釋到一定體積，I 4°C冰箱保存。混合標準工作液:取適量混合標準儲備溶液，根據需要用空白樣品溶液稀釋成適當濃度。進一步地,所述化妝品為面霜、護手霜、爽膚水。進一步地，所述增塑劑包括鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸(2-甲氧乙基)酯、雙異戊基鄰苯二甲酸酯、正戊基異戊基鄰苯二甲酸酯、雙正戊基鄰苯二甲酸酯、苯基丁基鄰苯二甲酸酯、鄰苯二甲酸(2-乙基己基)酯等7種中的至少一種。由於採用上述技術方案，本發明的有益效果在於:
1、建立了化妝品(膏狀、乳狀、水狀)中鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸(2-甲氧乙基)酯、雙異戊基鄰苯二甲酸酯、正戊基異戊基鄰苯二甲酸酯、雙正戊基鄰苯二甲酸酯、苯基丁基鄰苯二甲酸酯、鄰苯二甲酸(2-乙基己基)酯等7種等增塑劑殘留量的氣相色譜/質譜檢測方法，實現了對7種增塑劑的同時檢測。2、建立了同時測定等7種鄰苯二甲酸酯類化合物的氣相色譜-質譜分析條件。選用HP-5MS石英毛細管柱，程序升溫，在20 min內完成7種鄰苯二甲酸酯類化合物的分離和檢測。3、建立了凝膠色譜一固相萃取(GPC — SPE)組合淨化方法，比較了不同SPE淨化柱的淨化效果，研究了 GPC和C18小柱(6 mL,500mg)淨化條件，淨化效果好。4、所建立的氣相色譜/質譜檢測方法的檢測低限為:雙異戊基鄰苯二甲酸酯、正戊基異戊基鄰苯二甲酸酯、雙正戊基鄰苯二甲酸酯、鄰苯二甲酸雙(2-乙基己基)酯、鄰苯二甲酸二丁酯均為5(^g/kg，鄰苯二甲酸雙(2-甲氧乙基)酯、苯基丁基鄰苯二甲酸酯均為lOOPg/kg。對爽膚水樣品平均回收率73.0 % 95.5%，相對標準偏差為4.8% 16.0% ;對粉餅樣品平均回收率70.6% 92.4%，相對標準偏差為2.7% 17.4%。
5、所建立的化妝品中增塑劑的測定方法，具有簡便、快速、靈敏等特點，方法的檢測低限、回收率、精密度等技術指標滿足國內外對妝品中增塑劑檢測的有關要求，適合於化妝品中增塑劑的檢測、監測和確證。


:
圖1 7種增塑劑混合標準溶液的選擇離子流圖
圖2空白爽膚水樣品添加7種PAEs混合標準溶液(500 μ g/kg)選擇離子譜圖 圖3空白粉餅樣品添加7種PAEs混合標準溶液(500 μ g/kg)選擇離子譜圖 圖中:按保留時間依次為:1.鄰苯二甲酸二丁酯；2.鄰苯二甲酸雙(2-甲氧乙基)酯；
3.雙異戊基鄰苯二甲酸酯；4.正戊基異戊基鄰苯二甲酸酯；5.雙正戊基鄰苯二甲酸酯；
6.苯基丁基鄰苯二甲酸酯；7.鄰苯二甲酸雙(2-乙基己基)酯。
具體實施方式
:
下面結合具體實施例對本發明作進一步詳細說明，但本發明並不局限於具體實施例。實施例1 爽膚水化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法
1、樣品提取和淨化:
稱取0.2 g樣品(精確到0.001 g)於50 mL錐形瓶中，加入10 mL四氫呋喃，超聲10min,經0.45 μ m膜過濾後,進樣。、氣相色譜-質譜儀測定
①定性測定:按照氣相色譜/質譜條件分別測定樣品溶液和標準溶液，如果樣品的GC-MS數據符合下列限定，則可定性判定為某種增塑劑殘留:
A、樣品中待測物質與標準品具有相同的保留時間，偏差在±2.5%以內；
B、監測離子的信噪比應彡3；
C、扣除本底後該峰的質譜圖存在所有選定的監測離子；
D、樣品中待測物的全部監測離子的相對強度應與標準溶液中相應化合物的的離子相對強度比值一致，偏差在土 20%以內。②定量測定:以各增塑劑的監測離子中信號響應最高且無幹擾的單離子對為定量離子，進行外標法定量分析。以峰面積和工作標準溶液濃度繪製標準工作曲線。為減少基質對定量測定的影響，需用空白樣提取液來配製標準工作溶液，並保證所測樣品中各增塑劑的響應值均在線性範圍內。氣相色譜/質譜分析條件為:
a)色譜柱:HP-5MS石英毛細管柱，30mX0.25mmX0.25Mm ;
b)進樣口溫度:250°C;
c)升溫程序:初始柱溫60°C,保持Imin,以20°C/min升溫至220°C,保持Imin,以5°C /min 升溫至 280°C,保持 4min ；
d)載氣:氦氣(純度≥99.999%)，流速lmL/min ；
e)進樣方式:不分流進樣；
f)進樣量:WL;
質譜參數:
g)離子源:電子轟擊源(EI) ;
h)監測方式:選擇離子掃描(SM)；i)電離能量:70eV; j)溶劑延遲:5min; k)色譜與質譜接口溫度:280°C 各種增塑劑的選擇離子見表1.表17種增塑劑定性定量離子表
權利要求
1.一種化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法，其特徵在於:該方法包括以下的步驟: (1)樣品的提取 ①含水量較高的化妝品 稱取2 g均勻試樣置於50 mL具塞離心管中，加入15mL超純水,超聲提取IOmin,加入20mL正己燒,潤旋混勻5min,於10000 r/min離心10 min,將上層正己燒提取液轉移至凝膠淨化色譜儀(GPC)樣品瓶中，重複一次提取過程，合併上清液待淨化； ②含水量較低的化妝品 稱取2 g均勻試樣置於50 mL具塞離心管中，加入15mL甲醇，超聲提取IOminJpAlOg無水硫酸鈉，潤旋混勻5min,於10000 r/min離心10 min,將上層清液提取液轉移至GPC樣品瓶中，重複一次提取過程，合併上清液待淨化； (2)GPC淨化 提取液轉移至GPC樣品瓶中，儀器自動完成提取液預濃縮過程，再用乙酸乙酯-環己烷溶液(體積比1:1)定容至5mL後進樣，開始淨化過程，GPC淨化條件如下: 凝膠色譜柱=Bio-Beads SX3填料(200 400目)，填料高度240mm，柱直徑25mm ； 流動相:乙酸乙酯:環己烷(體積比1:1)的混合溶液；流速:5mL/min ； 進樣量:5mL ； 收集10 20min時間段內的全部流出液，流出液自動收集至儀器濃縮腔內，40°C下減壓濃縮並使用流動相定容至5mL，淨化液轉移至收集瓶中，40°C下氮氣流吹乾，殘渣用5 mL甲醇定容，待固相萃取淨化； (3)固相萃取柱淨化 將經GPC淨化的提取液過固相萃取柱，收集流出液，用15mL甲醇繼續洗脫，整個固相萃取過程流速不超過lmL/min，收集洗脫液，將全部收集液在40°C以下水浴減壓濃縮至近幹，加2 mL正己烷溶解殘渣並混勻，過0.22 Mm針筒濾膜，上機待測定； (4)氣相色譜-質譜儀測定 ①定性測定:按照氣相色譜/質譜條件分別測定樣品溶液和標準溶液，如果樣品的GC-MS數據符合下列限定，則可定性判定為某種激素殘留: A、樣品中待測物質與標準品具有相同的保留時間，偏差在±2.5%以內； B、監測離子的信噪比應≥3； C、扣除本底後該峰的質譜圖存在所有選定的監測離子； D、樣品中待測物的全部監測離子的相對強度應與標準溶液中相應化合物的的離子相對強度比值一致，偏差在±20%以內； ②定量測定:以各激素的監測離子中信號響應最高且無幹擾的單離子對為定量離子，進行外標法定量分析，以峰面積和工作標準溶液濃度繪製標準工作曲線，為減少基質對定量測定的影響，需用空白樣提取液來配製標準工作溶液，並保證所測樣品中各激素類物質的響應值均在線性範圍內。
2.根據權利要求1所述的化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法，其特徵在於:步驟(3)中所述固相萃取柱為:C18固相萃取柱，500mg/6mL，使用前用5 mL甲醇活化。
3.根據權利要求1所述的化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法，其特徵在於:步驟(4)中所述氣相色譜/質譜分析條件為: a)色譜柱:HP-5MS石英毛細管柱，30mX0.25mmX0.25Mm ; b)進樣口溫度:250°C； c)升溫程序:初始柱溫60°C,保持Imin,以20°C/min升溫至220°C,保持Imin,以5°C /min 升溫至 280°C,保持 4min ； d)載氣:氦氣(純度≥99.999%)，流速lmL/min ； e)進樣方式:不分流進樣； f)進樣量:WL; g)離子源:電子轟擊源(EI); h)監測方式:選擇離子掃描(SM)； i)電離能量:70eV; j)溶劑延遲:5min; k)色譜與質譜接口溫度:280°C。
4.根據權利要求1所述的化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法，其特徵在於:步驟(4)中所述標準溶液的配置方法為: 標準儲備液:分別稱取適量標準品，分別用正己烷溶解並定容至一定體積，I 4°C冰箱保存； 混合標準儲備液:各取適量標準儲備溶液，用正己烷稀釋到一定體積，I 4°C冰箱保存； 混合標準工作液:取適量混合標準儲備溶液，根據需要用空白樣品溶液稀釋成適當濃度。
5.根據權利要求1至4中任一項所述的化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法，其特徵在於:所述化妝品選自面霜、護手霜或爽膚水。
6.根據權利要求1至5中任一項所述的化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法，其特徵在於:所述增塑劑包括下述7種中的至少一種:鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸(2-甲氧乙基)酯、雙異戊基鄰苯二甲酸酯、正戊基異戊基鄰苯二甲酸酯、雙正戊基鄰苯二甲酸酯、苯基丁基鄰苯二甲酸酯、鄰苯二甲酸(2-乙基己基)酯。
全文摘要
本發明涉及分析化學、食品安全領域。一種化妝品中多種增塑劑殘留量的檢測方法，按化妝品性狀進行樣品的提取，再進行GPC淨化，第三再進行固相萃取柱淨化，最後採用氣相色譜-質譜儀進行定量和定性測定。具有簡便、快速、靈敏等特點，方法的檢測低限、回收率、精密度等技術指標滿足國內外對妝品中增塑劑檢測的有關要求，適合於化妝品中增塑劑的檢測、監測和確證。
文檔編號G01N30/02GK103091413SQ20121056100
公開日2013年5月8日 申請日期2012年12月21日 優先權日2012年12月21日
發明者林維宣, 於傑, 李獻剛, 馬慧蕊 申請人:林維宣