對澱粉樣蛋白具有親和性的新化合物的製作方法

2023-06-27 01:35:46 3

專利名稱：對澱粉樣蛋白具有親和性的新化合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及用於診斷腦變性疾病的化合物。更具體地，本發明涉及在阿爾茨海默 病和其他與澱粉樣蛋白蓄積有關的疾病的診斷中用於在病灶部位檢測澱粉樣蛋白的化合 物。
背景技術：
由被稱作澱粉樣蛋白的纖維狀蛋白質在體內各種器官或組織中沉積而引發的疾 病統稱作澱粉樣變性病。澱粉樣變性病的共同特徵是，富含摺疊結構的被稱作澱粉樣 蛋白的纖維狀蛋白質在各種器官中系統性地或在位點局部性地沉積，以至於在器官或組織 中觸發了功能異常。阿爾茨海默病(以下稱作AD)是一種典型的澱粉樣變性病，已知它是一種引發痴 呆的疾病。隨著澱粉樣蛋白在腦內的漸進性沉積，該疾病是致命性的，因此，據稱它是一種 與其他澱粉樣變性病相比更受社會關注的疾病。近年來，隨著社會的老齡化，發達國家的AD 患者數量迅速增加，從而引發社會問題。從病理組織學的觀點來看，AD的特徵在於在腦內的三種病理檢查發現，即老年斑 的出現，神經元纖維纏結的形成和廣泛的神經元丟失。老年斑具有主要由澱粉樣蛋白組成 的結構，據稱其出現在AD發病的最初階段，因此，在臨床症狀發生前約10年或更久時間在 腦內就會出現這種病理學現象。診斷AD，包括在圖像診斷例如CT和MRI的組合幫助下，進行各種認知功能的各種 評價(例如，Hasegawa scale，ADAS-JCog和MMSE)。但是，基於這些認知功能的評價的方法 在發病早期階段中診斷靈敏度較低，此外，存在診斷結果容易受到個體的先天認知功能影 響的問題。目前，當AD患者仍然在世時，實際上不可能進行AD的確診，因為確診需要對病 變部位的活組織檢查(非專利文獻1)。同時，有報告稱，構成老年斑的澱粉樣蛋白是澱粉狀β蛋白(以下稱作Αβ)的凝 集物。同時，很多報告指出，Αβ凝集物形成了導致神經細胞毒性的摺疊結構。基於這 些發現，提出了所謂「澱粉樣蛋白聯鎖反應假說」，它提出Αβ的腦內沉積引發了下遊現象， 即，神經元纖維纏結的形成和神經元丟失(非專利文獻2)。基於這些事實，近來試圖用與澱粉樣蛋白具有高度親和性的化合物作為標記物進 行AD的體內檢測。用於腦內澱粉樣蛋白的圖像診斷的很多這樣的探針是疏水性的低分子量化合 物，其與澱粉樣蛋白具有高度的親和性，且腦轉移性很高，用各种放射性核素例如"C、 18F和123I標記。例如，有報告指出，11C或放射性滷素標記的化合物包括各種硫磺素衍 生物例如6-碘-2- [4 『 _ (N，N- 二甲氨基)苯基]苯並噻唑(以下稱作TZDM)和6-羥 基-2-[4' -(N-甲基氨基)苯基]苯並噻唑(以下稱作6-0Η-ΒΤΑ-1)(專利文獻1，非專利文 獻3)；均二苯乙烯化合物例如(Ε)-4-甲基氨基-4'-羥基均二苯乙烯(以下稱作SB-13) 和(Ε)-4-二甲氨基-4'-碘代均二苯乙烯(以下稱作m-1-SB)(專利文獻2，非專利文獻4，非專利文獻5)；苯並噁唑衍生物例如6-碘-2-[4' -(N，N-二甲氨基)苯基]苯並噁唑 (以下稱作ΙΒ0Χ)和6-[2-(氟)乙氧基]-2-[2-(2-二甲氨基噻唑-5-基)乙烯基]苯並 噁唑(非專利文獻6，非專利文獻7)，DDNP衍生物例如2-(1-{6-[(2_氟乙基)(甲基)氨 基]-2-萘基)亞乙基)丙二腈(以下稱作FDDNP)(專利文獻4，非專利文獻8)；和咪唑並 吡啶衍生物例如6-碘-2-[4『 _(N，N-二甲氨基)苯基]咪唑並[l，2-a]吡啶(以下稱作 IMPY)(專利文獻3，非專利文獻9)。此外，對用於圖像診斷的某些探針，已經進行了人體圖 像研究，並且報導了與正常人相比，在AD患者的腦內有顯著的蓄積(非專利文獻10，非專利 文獻11，非專利文獻12，非專利文獻13)。國際公開W02007/002540小冊子披露了一系列的化合物，它們具有與澱粉樣蛋白 有親和性的基團，該基團與放射性核素標記的位點通過乙二醇或聚乙二醇連接(專利文獻 5)。國際公開W02007/063946小冊子披露了一系列的化合物，它們與五元芳香雜環相 連以防止它們在腦內代謝(專利文獻6)。 [專利文獻 1] JP-T-2004-506723[專利文獻 2] JP-T-2005-504055[專利文獻 3] JP-T-2OO5-5I2M5[專利文獻 4] JP-T-2002-523383[專利文獻5]國際公開W02007/002540小冊子[專利文獻6]國際公開W02007/063946小冊子[非專利文獻 1]J.A. Hardy & G. A. Higgins,"Alzheimer 『 sDisease :The Amyloid Cascade Hypothesis.，，，Science, 1992, 256, p. 184-185[非專利文獻 2]G. McKhann 等人，"Clinical diagnosis ofAlzheimer ' s disease :Report of the NINCDS-ADRDA Work Group underthe auspices of Department of Health and Human Services TaskForce on Alzheimer' s Disease.，，，Neurology, 1984，34，p.939-944[非專利文獻 3] Ζ. -P. Zhuang 等人，"RadioiodinatedStyrylbenzenes and Thioflavins as Probes for AmyloidAggregates. J. Med. Chem. ,2001,44, p.1905-1914[非專利文獻 4]Masahiro Ono 等人，"llC-labeled stilbenederivatives as A β -aggregate-specific PET imaging agents forAlzheimer' s disease.，，，Nuclear Medicine and Biology,2003,30, p.565-571[非專利文獻 5]H. F. Kung 等人，「Novel Stilbenes as Probesfor amyloid plaques.，，，J. American Chemical Society, 2001,123, p. 12740-12741[非專利文獻 6] Zhi-Ping Zhuang 等人，「 IBOX (2-(4' -dimethylaminophenyl)-6-iodobensoxazole) -.a ligand for imaging amyloidplaques in the brain. 」，Nuclear Medicine and Biology, 2001，28，p.887—894[非專利 文獻 7] Furumoto Y 等人，「 [11C] BF-227 A New 11C-Labeled2~EthenylbenzoxazoIe Derivative for Amyloid- β Plaqueslmaging.，，， European Journal of Nuclear Medicine and Molecularlmaging, 2005, 32, Sup.1, P759[非專利文獻 8]Eric D. Agdeppa 等人，「2-Dialkylamino-6_AcylmalononitrileSubstituted Naphthalenes(DDNP Analogs) :NoveIDiagnostic and Therapeutic Tools in Alzheimer' s Disease.，，，Molecular Imaging and Biology, 2003, 5, p. 404-417[非專利文獻 9] Zhi-Ping Zhuang 等人，「Structure-ActivityRelationship of Imidazo [1,2_a]Pyridines as Ligands forDetecting β—Amyloid Plaques in the Brain. 」，J. Med. Chem, 2003，46，p. 237-243[非專利文獻 10]W. E. Klunk 等人，「Imaging brain amyloidin Alzheimer' s disease with Pittsburgh Compound-B. Ann. Neurol. ,2004,55, p.306-319[非專利文獻 11] Nicolaas P. L. G. Verhoeff 等人，「 In-Vivolmaging of Alzheimer Disease β -Amyloid With[11C]SB-13PET. 」,American Journal of Geriatric Psychiatry, 2004，12，p.584-595[非專利文獻 12]Hiroyuki Arai 等人，「 [11C]_BF_227AND PETto Visualize Amyloid in Alzheimer' s Disease Patients，，,Alzheimer' s & Dementia :The Journal of the Alzheimer' sAssociation,2006, 2, Sup.1, S312[非專利文獻 13] Christopher Μ. Clark 等人，「 Imaging Amyloidwith 1123 IMPY SPECT，，，Alzheimer' s & Dementia :The Journal ofthe Alzheimer' s Association, 2006，2，Sup. 1，S34
發明內容
發明要解決的課題如上所述，公開了各種化合物可以作為以澱粉樣蛋白為對象的圖像診斷的探針， 並研究了其臨床用途。使用正常小鼠進行的實驗表明，用[125I]標記的TZDM、IBOX和m-I_SB都會在施 用2分鐘後轉移到腦內。但是，這些化合物從正常組織中的清除是不充分的，並且會隨著施 用後時間的推移而在腦內逐漸蓄積(JP-T-2005-512945 =Zhi-Ping Zhuang等人，Nuclear Medicineand Biology, 2001，28，P. 887-894 ;H. F. Kung 等人，J. Am. Chem. Soc.，2001，123， p. 12740-12741)。當從正常組織中的清除不充分時，就出現了一個問題在澱粉樣蛋白 蓄積位點不能獲得足夠的對比度。用[11C]標記的SB-13在使用大鼠進行的實驗中顯示 了其具有從正常組織中的清除性能，但清除速度還談不上足夠快(Masahiro Ono等人， NuclearMedicine and Biology，2003，30，ρ·565-571)。同時，據披露，如使用[125I]標記的化合物進行的實驗結果所示，具有咪唑並吡啶 骨架的化合物例如IMPY具有在施用後轉移到腦內並在澱粉樣蛋白上蓄積的性質，其也具 有與上述化合物不同的從正常組織中迅速清除的優良性質。但是，IMPY是一種在回復突變 試驗中呈陽性的化合物。為了將這種化合物用作圖像診斷的探針，必須充分考慮劑量和給 藥方式(國際公開W003/106439小冊子)。據報導，FDDNP在回復突變試驗中也是呈陽性的。(國際公開W003/106439小冊 子)。本發明正是鑑於下述情況而完成的，其中已經公開了作為靶向澱粉樣蛋白的圖像 診斷探針的各化合物，但是還沒有化合物被證實具有臨床可容許的性質。本發明的目的在 於提供一種有效作為靶向澱粉樣蛋白的圖像診斷探針的化合物和包含該化合物的用於檢測沉積在生物組織上的澱粉樣蛋白的試劑。解決課題的方法作為深入研究的結果，本發明人已經發現，通過一系列具有咪唑並吡啶-苯基骨 架且其中各取代基通過氧原子與其苯基相連的化合物，可以提供有效用作靶向澱粉樣蛋白 的圖像診斷探針的化合物，由此完成了本發明。根據本發明的一個方面，提供如下式(1)所示的化合物 及其鹽，和包含式(1)所示化合物或其鹽的用於檢測沉積在生物組織上的澱粉樣 蛋白的試劑。這裡，生物組織可以是已知在澱粉樣變性病中澱粉樣蛋白沉澱於其中的各種組 織。這些生物組織的典型例子包括腦、心、肺、胰腺、骨和關節，在最典型的生物組織中，可舉 出腦。在腦的情況下，典型的澱粉樣變性病包括阿爾茨海默病和Lewy體痴呆。在式(1)中，R1, R2和R3分別獨立地表示選自氫、羥基、具有1-4個碳原子的烷基 取代基，烷基鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團，條件是，從本發明 中排除取代基R1，R2和R3中的兩個或更多個是氫的化合物。R4是選自氫、羥基、烷基鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基 團，且m是1-4的整數。此外，由於本發明的化合物用作圖像診斷的探針，R1，R2，R3和R4中的至少一個需 要是放射性滷素。作為放射性滷素，可以使用通常用於SPECT和PET的核素。更具體地，可以使用選 自18F、76Br、123I、124I，125I和131I的放射性滷素，更優選可以使用18F或123L因此，根據優選的實施方案，本發明的化合物選自2_[4' _(3"-氟丙氧 基)-3' -[123I]碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶，2-[4 『 -(2〃-氟乙氧 基)-3'-甲氧基苯基]-6-[123I]碘咪唑並[l，2-a]吡唳，2-[4 『 -(2〃-氟乙氧 基)-3' -[123I]碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡唳，2-[4' _(2〃_羥基乙氧基)苯 基]-6-[123I]碘-7-甲基咪唑並[l，2-a]吡啶和2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)_2'-甲氧 基苯基]-6-[123I]碘咪唑並[l，2-a]吡啶，本發明的檢測試劑包含這些化合物或其鹽。根據本發明的另一個方面，提供下式(2)
下式(3)
(4)中的任一個表示的化合物或其鹽。在式(2)，(3)和(4)中，R5，R6和R7分別獨立地表示選自氫、羥基、具有1-4個碳原 子的烷基取代基、烷基鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團，條件是， 從本發明中排除在式⑵中R6和R7都是氫的化合物、在式⑶中R5和R6都是氫的化合物、 和在式⑷中取代基R5、R6和R7中的兩個或更多個是氫的化合物。R8是選自氫、羥基、烷基鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基 團。R9是選自非放射性滷素取代基、硝基、烷基鏈具有1-4個碳原子的三烷基銨基、烷 基鏈具有1-4個碳原子的三烷基甲錫烷基取代基或三苯基甲錫烷基的基團。R11是選自非放射性滷素取代基、硝基、烷基鏈具有1-4個碳原子的三烷基銨基、烷 基鏈具有1-4個碳原子的三烷基甲錫烷基取代基或三苯基甲錫烷基的基團。R12是選自非放射性滷素取代基、甲磺醯氧基取代基、三氟甲磺醯氧基取代基和芳 香族磺醯氧基取代基的基團。同時，m是1-4的整數。發明效果本發明提供了一種新化合物，其對澱粉樣蛋白具有親和性並且具有優良的使生物 體中的澱粉樣蛋白成像的能力，並提供用於檢測沉積在生物組織上的澱粉樣蛋白的試劑。


圖1是2_[4' _(2〃 -氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基]_6_碘咪唑並[1，2_a]吡啶 (非放射性碘化形式)的合成路線。圖2是6-三丁基甲錫烷基-2-[4『 - (2 〃 -氟乙氧基)_3 『-甲氧基苯基]咪唑 並[l，2_a]吡啶的合成路線。圖3 是 2-[4 『 -(3〃 -氟丙氧基)_3 (非放射性碘化形式)的合成路線。圖4是2-[3 『-三丁基甲錫烷基_4 並[l，2_a]吡啶的合成路線。圖5 是 2_[4' -(2〃 -氟乙氧基)_3 (非放射性碘化形式)的合成路線。圖6是2-[3 『-三丁基甲錫烷基_4 並[l，2_a]吡啶的合成路線。圖7是2_[4' -(2〃 -羥基乙氧基)_2'-甲氧基苯基]_6_碘咪唑並[1，2_a]吡 啶(非放射性碘化形式)的合成路線。圖8是6-三丁基甲錫烷基-2-[4『 -(2〃 -羥基乙氧基)_2'-甲氧基苯基]咪 唑並[l，2_a]吡啶的合成路線。圖9是6-三丁基甲錫烷基-2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)苯基]_7_甲基咪唑並 [1,2-a]吡啶的合成路線。圖10(a)是注射2-[4『 _(3〃 -氟丙氧基)_3『 -[123I]碘苯基]_6_甲氧基咪唑 並[l，2-a]吡啶後的腦切片的放射自顯影圖，圖10(b)是硫磺素T染色的樣品的螢光顯微 鏡圖像(注射澱粉樣蛋白混懸液的位點的放大圖)。圖11(a)是注射2_[4' -(2〃 -氟乙氧基)_3『-甲氧基苯基]_6_[1231]碘咪唑 並[l，2-a]吡啶後的腦切片的放射自顯影圖，圖11(b)是硫磺素T染色的樣品的螢光顯微 鏡圖像(注射澱粉樣蛋白混懸液的位點的放大圖)。圖12(a)是注射2-[4『 -(2〃 -羥基乙氧基)苯基]_6_[1231]碘_7_甲基咪唑並 [1,2-a]吡啶後的腦切片的放射自顯影圖，圖12(b)是硫磺素T染色的樣品的螢光顯微鏡圖 像(注射澱粉樣蛋白混懸液的位點的放大圖)。圖13(a)是注射2-[4『 -(2〃 -氟乙氧基)_3『 -[123I]碘苯基]_6_甲氧基咪唑 並[l，2-a]吡啶後的腦切片的放射自顯影圖，圖13(b)是硫磺素T染色的樣品的螢光顯微 鏡圖像(注射澱粉樣蛋白混懸液的位點的放大圖)。圖14(a)是2_[4' -(2〃 -羥基乙氧基)_2' _甲氧基苯基]_6_[1231]碘咪唑並 [1,2-a]吡啶的腦切片的體外放射自顯影圖，圖14(b)是硫磺素T染色的樣品的螢光顯微鏡 圖像(注射澱粉樣蛋白混懸液的位點的放大圖)。
具體實施例方式(放射性滷素標記化合物的前體化合物的合成)下面，以6-三丁基甲錫烷基-2-[4' _(2〃 -氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基]咪唑 並[l，2_a]吡啶的合成為例，說明本發明化合物的合成方法。
-碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2_a]吡啶 _(3"-氟丙氧基)苯基]-6-甲氧基咪唑 -碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶 -(2〃 -氟乙氧基)苯基]-6-甲氧基咪唑
為了合成6-三丁基甲錫烷基-2-[4' -(2〃 -氟乙氧基)_3'-甲氧基苯 基]咪唑並[l，2-a]吡啶，首先，使4'-羥基-3'-甲氧基苯乙酮與溴化銅反應以制 備2-溴-4'-羥基-3' _甲氧基苯乙酮(圖1，步驟1)。可以按照常規方法，例如文獻 King, L. Carroll & Ostrum, G. Kenneth, Journalof Organic Chemistry,1964,29 (12), p. 3459-3461中所述的方法進行該反應。然後使如上所述製備的2-溴-4'-羥基-3'-甲氧基苯乙酮與2-氨基-5-碘 吡啶反應以製備2-(4'-羥基-3'-甲氧基苯基)-6_碘咪唑並[l，2-a]吡啶(圖1，步驟 2)。例如，可以根據下述操作來進行該步驟。首先，將2-溴-4 『-羥基-3 『-甲氧基苯乙酮和2-氨基-5-碘吡啶溶解於惰 性溶劑例如乙腈中，然後在回流溫度下使它們彼此反應2 6小時，以產生呈白色沉澱的 2-(4'-羥基-3'-甲氧基苯基)-6_碘咪唑並[l，2-a]吡啶的氫溴酸鹽。在該情況中使用 的溶劑可以是乙腈或其它常用於類似反應的溶劑，例如甲醇和丙酮。反應溫度可以是允許 回流的溫度，例如當溶劑是乙腈時為110°C。所使用的溶劑的量可以是足以實現反應的量， 但應當注意的是，如果溶劑太多，就會難以獲得反應產物的沉澱。例如，當使用相當於2mmol 量的2-溴-4'-羥基-3' _甲氧基苯乙酮進行反應時，所使用的溶劑的量可以是約15 3 OmL ο接著，過濾反應液以回收沉澱。將該白色沉澱混懸於甲醇/水(1 3)的混合液 中。然後，將飽和碳酸氫鈉水溶液以相對於上述混懸沉澱非常大地過量的量加入其中，以釋 放作為沉澱的2-(4'-羥基-3'-甲氧基苯基)-6_碘咪唑並[l，2-a]吡啶。將新產生的 沉澱過濾，以回收作為本步驟的目標化合物的2-(4'-羥基-3'-甲氧基苯基)-6_碘咪 唑並[l，2-a]吡啶(圖1，步驟2)。甲醇/水的混合液的量沒有特別限制，只要它足以實現 反應即可。但是，應當注意的是，如果混合液的量過多，將會干擾產物的析出。例如，當使用 的是相當於2mmol量的2-溴-4'-羥基_3'-甲氧基苯乙酮時，可以使用的甲醇/水的 混合液的量是約4 10mL。碳酸氫鈉的量沒有特別限制，只要它相對於作為反應底物的上 述沉澱物為非常大地過量即可。例如，當在上述條件下進行反應時，加入到反應液中的飽和 碳酸氫鈉水溶液的量可以是約6mL。然後將上述製備的2_(4'-羥基-3'-甲氧基苯基)-6_碘咪唑並[l，2_a]吡啶 充分乾燥，溶解於N，N-二甲基甲醯胺，向其中加入碳酸鉀和1-氟-2-對甲苯磺醯氧基乙 烷。在將該混合物在室溫下攪拌約1天以進行反應後，加入飽和氯化銨水溶液，隨後用乙酸 乙酯萃取，濃縮乙酸乙酯層並進行色譜精製，得到2-[4' _(2"-氟乙氧基)_3'-甲氧基 苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶(圖1，步驟3)。碳酸鉀的量可以為可中和反應過程中生 成的對甲苯磺酸的量，並且其摩爾比典型地為另一原料1-氟-2-對甲苯磺醯氧基乙烷的約 2-3倍。此外，1-氟-2-對甲苯磺醯氧基乙烷可以以相對於反應底物過剩的量使用，且其摩 爾比典型地為反應底物2-(4'-羥基-3'-甲氧基苯基)-6_碘咪唑並[l，2-a]吡啶的約 1.5 倍。將獲得的2_[4' _(2〃 -氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基]_6_碘咪唑並[1，2_a] 吡啶溶解於二噁烷，並且向該溶液中加入三乙胺，然後添加二(三丁基錫)和催化劑量的四 (三苯膦)鈀。將該反應液在約90°C下加熱以使反應進行約1天，然後蒸餾出溶劑並進行 色譜精製，得到作為目標化合物的6-三丁基甲錫烷基-2-[4' -(2〃 -氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基]咪唑並[l，2_a]吡啶(圖2，步驟1)。此時使用的二(三丁基錫)的量可以是滿 足相對於反應底物為過量的條件的量，具體地，在摩爾比上其為反應底物2_[4' _(2"-氟 乙氧基)-3'-甲氧基苯基]-6-碘咪唑並[l，2_a]吡啶的約1.5倍。當獲得其中與苯基相連的為三丁基甲錫烷基取代基以外的三烷基甲錫烷基取代 基的化合物時，可以使用符合目的的各種二(三烷基錫)來代替圖2步驟1中的二(三丁 基錫)。例如，當合成苯基的3' _位上的取代基為三甲基甲錫烷基取代基的化合物時，可 以在圖2的步驟1中使用二(三甲基錫)進行與上述類似的反應。當獲得咪唑並吡啶環上的取代基的結合位點不同的化合物或連接有兩個取代基 的化合物時，可以根據目標化合物使用各種化合物來代替步驟2中的2-氨基-5-碘吡啶， 根據常規方法進行反應。例如，當得到其中碘取代基連接到咪唑並吡啶環的6-位且甲基取代基連接到咪 唑並吡啶環的7-位的化合物時，可以使用2-氨基-4-甲基-5-碘吡啶來代替步驟2中的 2-氨基-5-碘吡啶，並進行與上述步驟2類似的反應。(放射性滷素標記的化合物的合成方法)接下來，以放射性碘標記的化合物為實例，描述本發明另一個方面的放射性滷素 標記的化合物的製備方法。可以通過將如上述操作製備的標記前體化合物溶解於惰性有機溶劑，向其中加入 通過公知方法獲得的[1231]碘化鈉溶液等，再向其中加入酸和氧化劑進行反應，以合成放 射性碘標記的化合物。作為溶解標記前體化合物的惰性有機溶劑，可以使用與標記前體及 [1231]碘化鈉等之間不具有反應性的各種溶劑，優選可以使用甲醇。作為酸，可以使用各種酸，優選鹽酸。對氧化劑沒有特別限定，只要它可以氧化反應液中的碘即可，優選過氧化氫或過 乙酸。氧化劑的添加量可以是足以氧化反應液中的碘的量。用碘以外的放射性滷素標記的化合物，可以通過使用適合該目的的放射性滷素來 標記適合合成目的的標記前體來合成。(本發明診斷劑的製備方法和使用方法)本發明的診斷劑，可以與其它一般公知的放射性診斷劑同樣地，製備成將本發明 的放射性滷素標記的化合物混合入根據希望任選調整至適當PH的水或生理鹽水或林格液 等而成的溶液。此時，應將本發明化合物的濃度調整至不超過確保本發明化合物的穩定性 的濃度。本發明化合物的劑量沒有特別限定，只要它足以獲得所給予的藥劑的分布圖像即 可。例如，在碘_123 (1231)標記的化合物和氟-18 (18F)標記的化合物的場合，可以以靜脈或 局部給予約50 600MBq/60kg成人體重。所給予藥劑的分布可以通過公知的方法顯像。 例如，可以通過SPECT裝置將碘_123 (1231)標記的化合物顯像，另外可以通過PET裝置將 氟-18(18F)標記的化合物顯像。下面，通過實施例、比較例和參考例更詳細地描述本發明。但是，這些例子並不限 制本發明的範圍。同時，在下列實施例中，實驗中所用各化合物的名稱如表1中所定義。表 1 實施例1:2-「4' _(2"-氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基1 碘咪嗶並「1，2_a1吡 啶(非放射件碘化形式)的合成將50mL乙酸乙酯加入到8. 47g(相當於37. 9mmol)的溴化銅中而得到混懸液，向 其中加入3.00g(相當於18. lmmol)的4'-羥基_3'-甲氧基苯乙酮。然後在加熱回流 所得混合物。2小時後，將該反應混合物冷卻至室溫並且過濾。減壓濃縮所得濾液。通過 快速矽膠柱色譜精製所得粗產物(洗脫溶劑己烷/乙酸乙酯=4/1)，得到4. llg(相當於 16.3mmol)的2-溴-4'-羥基-甲氧基苯乙酮(圖1，步驟1)。將490mg(相當於2. OOmmol)的2-溴-4'-羥基-甲氧基苯乙酮和440mg(相 當於2.00mmol)的2-氨基-5-碘吡啶溶解於15mL乙腈。將所得溶液在110°C的油浴中加 熱回流2小時。在反應完成後，將反應液冷卻至室溫，過濾回收沉澱。用乙腈洗滌沉澱並且 減壓乾燥。將所得粗結晶混懸於3.0mL水和l.OmL甲醇的混合溶液中。然後向其中加入 約6. OmL飽和碳酸氫鈉溶液，使用超聲洗滌器將該混合物超聲處理5分鐘。從所得混合物 中過濾回收沉澱，用水充分洗滌，減壓乾燥，得到231mg(相當於0.628mmol)的2_(4'-羥 基-3'-甲氧基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶(圖1，步驟2)。將充分乾燥除去水分的231mg(相當於0.628mmol)的2-(4'-羥基-甲 氧基苯基)-6_碘咪唑並[l，2-a]吡啶溶解於6. OmL N, N-二甲基甲醯胺中，向其中加入260mg(相當於1.88mm0l)的碳酸鉀。然後向其中加入206mg(相當於0. 942mmol)的
1-氟-2-對甲苯磺醯氧基乙烷，在將該反應混合物在室溫下攪拌18小時。在反應完成後， 向其中加入飽和氯化銨水溶液並用乙酸乙酯萃取3次。用水和飽和氯化鈉溶液洗滌合併的 乙酸乙酯層，然後用無水硫酸鈉乾燥且減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法精製所得粗產物(洗 脫溶劑己烷/乙酸乙酯=1/1)，得到235mg(相當於0.642mmol)的2-[4' _(2"-氟乙 氧基)-3'-甲氧基苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶(圖1，步驟3)。所得2_[4' _(2〃 -氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基]-6-碘咪唑並[l，2_a]吡啶的 NMR測定結果(內標物四甲基矽烷)如下所示。所使用的NMR裝置JNM-ECP-500 (日本電子株式會社(JE0L)制)屯-匪R(溶劑氯仿 _dl ；共振頻率500MHz) S 8. 37 (s，1H)，7. 75 (s，1H)，7. 57 (d， J = 2. 3Hz, 1H)，7. 42-7. 40 (m，2H)，7. 34 (dd, J = 1. 8,9. 6Hz, 1H)，6. 97 (d, J = 8. 7Hz, 1H)， 4. 80(dt，2JHF = 47. 7Hz, J = 4. lHz，2H)，4. 31(dt，3JHF = 27. 5Hz, J = 4. lHz，2H)，3. 99 (s, 3H)。實施例2 :6_三丁基甲錫烷基-2-「4' ~(2"-氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基1咪 唑並「1,2-al吡啶的合成將實施例1中獲得的167mg(相當於0. 427mmol)的2_[4 『 -(2 〃 -氟乙氧 基)-3'-甲氧基苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶溶解於7. OmL 二噁烷中，向其中加入 3. OmL三乙胺。然後向其中加入0. 32mL(相當於0. 64mmol)的二(三丁基錫)和32. 6mg (催 化劑量)的四(三苯膦)鈀。在將該反應混合物在90°C下攪拌18小時後，減壓蒸餾出溶 劑。通過快速矽膠柱色譜精製殘餘物(洗脫溶劑己烷/乙酸乙酯=2/1)，得到142mg(相 當於0.247mmol)的6-三丁基甲錫烷基-2-[4' _(2"-氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基]咪 唑並[l，2-a]吡啶(圖2，步驟1)。所得6-三丁基甲錫烷基-2-[4『 _(2〃 -氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基]咪唑並 [1,2-a]吡啶的NMR測定結果(內標物四甲基矽烷)如下所示。所使用的NMR裝置JNM-ECP-500 (日本電子株式會社(JE0L)制)1H-NMR(溶劑氯仿-dl ；共振頻率:500MHz) 8 7. 97 (s, 1H)，7. 77 (s，1H)，
7.60-7. 58(m,2H) ,7. 43 (dd, J = 1. 4，8. 2Hz，1H)，7. 15 (d，J = 8. 7Hz，1H)，6. 97 (d，J =
8.2Hz, 1H),4. 80(dt，2JHF = 47. 2Hz, J = 4. lHz，2H)，4. 32(dt，3JHF = 27. 0Hz, J = 4. 1Hz, 2H)，3. 99 (s,3H)，1. 59-1. 52 (m, 6H)，1. 39-1. 32 (m, 6H)，1. 19-1. 05 (m, 6H)，0. 91 (t，J = 7. 3Hz，9H)。實施例3:2-「4' _(3"-氟丙氧基)_3' _碘苯基1-6-甲氧基咪嗶並「l，2_a1吡 啶(非放射件碘化形式)的合成將100.0g(相當於0. 575mol)的2-溴-3-羥基吡啶溶解於310mL 二甲亞碸中， 向其中加入575mL(相當於0.575mol)的lmol/L的甲醇鈉-甲醇溶液。然後加熱該反應 液至90°C，以蒸餾除去甲醇。在將反應液冷卻至10°C或更低溫度後，加入93.9g(相當於 0. 662mol)的碘甲烷，然後在室溫下攪拌20. 5小時。反應完成後，將反應液倒入冰水中， 用氯仿萃取2次。用lmol/L的氫氧化鈉溶液洗滌合併的氯仿層，再用飽和氯化鈉溶液洗 滌2次，用無水硫酸鈉乾燥。在減壓蒸餾除去溶劑後，得到65.4g(相當於0.348mol)的
2-溴-3-甲氧基吡啶(圖3，步驟1)。
將262mL濃硫酸冷卻至-2°C，向其中小心加入262mL的90%硝酸。隨後，向其中小 心加入65. 3g(相當於0. 347mmol)的2-溴-3-甲氧基吡啶。在將反應混合物在冰浴中攪 拌10分鐘後，將該混合物在室溫下攪拌30分鐘，然後加熱至55°C，再攪拌1. 5小時。在反 應液冷卻至室溫後，將反應液一點一點地倒入碎冰中以產生沉澱。過濾沉澱並用水洗滌，然 後在減壓下用五氧化二磷乾燥，得到55. 7g(相當於0. 239mol)的2-溴-3-甲氧基-6-硝 基吡啶(圖3，步驟2)。將55. 6g (相當於0. 239mol)的2-溴-3-甲氧基-6-硝基吡啶溶解於1700mL乙醇 中，在氬氣流下向其中加入37. 3g(50%溼度)的10%鈀碳。然後向該混合物中滴加283mL 一水合胼。在將反應混合物回流70分鐘後，將反應液冷卻至室溫。然後，在濾除鈀碳後，用 乙醇洗滌殘餘物，合併洗液和濾液。減壓濃縮合併的溶液。然後向該濃縮物中加入1300mL 水和130mL濃氨水，將所得混合物用氯仿萃取8次。用無水硫酸鈉乾燥合併的氯仿層並減 壓濃縮。減壓蒸餾出所得粗產物，得到26.2g(相當於0.211mol)的2-氨基-5-甲氧基吡 啶(圖3，步驟3)。將4.08g(相當於30.0mmol)的4'-羥基苯乙酮溶於250mL的28%氨水溶液，向 其中加入7. 61g(相當於30. Ommol)碘和24. 3g(相當於146mmol)碘化鉀的60mL水溶液。 將所得溶液在室溫下攪拌22. 5小時。在反應完成後，濃縮反應混合物，用水稀釋，然後用乙 酸乙酯萃取3次。用飽和氯化鈉溶液洗滌合併的乙酸乙酯層1次，用無水硫酸鎂乾燥，過濾 並濃縮。向所得濃縮物中加入60mL水和40mL的8mol/L氫氧化鈉溶液，充分混合，過濾除 去不溶物。然後，向濾液中加入濃鹽酸使其酸化，過濾沉澱並減壓乾燥。將所得沉澱溶於氯 仿和乙酸乙酯的混合液，然後向其中加入水，用氯仿萃取5次。用無水硫酸鈉乾燥合併的氯 仿層，然後減壓蒸餾出溶劑，將所得粗產物從氯仿中重結晶，得到4. 00g(相當於15. 3mmol) 的4'-羥基-3'-碘苯乙酮(圖3，步驟4)。將10mL乙酸乙酯加入到3. 44g(相當於15. 4mmol)的溴化銅中而得到混懸液，向 其中加入2. 00g(相當於7.64mmol)4'-羥基-碘苯乙酮在18mL乙酸乙酯和18mL氯 仿的混合溶液中的溶液，加熱回流所得混合物。3. 5小時後，將該反應混合物冷卻至室溫並 且過濾。減壓濃縮所得濾液。將殘餘物溶解於乙酸乙酯並且通過添加活性炭進行脫色操作。 然後過濾所得溶液並且濃縮。通過快速矽膠柱色譜精製所得粗產物(洗脫溶劑氯仿/甲 醇=50/1)，得到2. 20g(相當於6.45mmol)的2-溴-4'-羥基-碘苯乙酮(圖3，步 馬聚5) o將680mg(相當於1. 99mmol)的2-溴-4'-羥基-碘苯乙酮和252mg(相當 於2.03mmol)的2-氨基-5-甲氧基吡啶溶解於15mL乙腈。將所得溶液在105°C的油浴中 加熱回流4小時。在反應完成後，將反應液冷卻至室溫，過濾回收沉澱。用乙腈洗滌沉澱並 且減壓乾燥。將所得粗結晶混懸於5mL水和5mL甲醇的混合溶液中。然後向其中加入約 5mL飽和碳酸氫鈉溶液，並且使用超聲洗滌器將該混合物超聲處理5分鐘。從所得混合物 中過濾回收沉澱，用水充分洗滌，減壓乾燥，得到435mg(相當於1. 19mmol)的2_(4'-羥 基-3'-碘苯基)-6_甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶(圖3，步驟6)。將279mg(相當於0. 763mmol)的2-(4'-羥基-碘苯基)_6_甲氧基咪唑並 [1,2-a]吡啶溶解於10mL的N，N-二甲基甲醯胺中，向其中加入317mg(相當於2. 29mmol) 的碳酸鉀。向該混合物中加入105yL(相當於1. 15mmol)的1_溴_3_氟丙烷，然後將該溶液在室溫下攪拌21小時。在反應完成後，將反應液倒入水中，用氯仿萃取3次。用飽和氯化 鈉溶液洗滌合併的氯仿層，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。通過再循環製備型HPLC(HPLC 裝置LC-908(商品名；日本分析工業公司制)；色譜柱2根JAIGEL 2H(商品名；日本分 析工業公司制)串聯；流動相氯仿)精製所得粗產物，得到262mg(相當於0. 614mmol)的 2-[4' _(3"-氟丙氧基)-3'-碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶(圖1，步驟7)。所得2_[4' _(3〃 -氟丙氧基)_3'-碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2_a]吡啶的 NMR測定結果(內標物四甲基矽烷)如下所示。所使用的NMR裝置JNM-ECP-500(日本電子株式會社(JE0L)制)屯-匪R(溶劑氯仿 _dl ；共振頻率500MHz) 8 8. 33 (d, J = 2. 1Hz，1H)，7. 85 (dd, J = 8. 5，2. 1Hz，1H)，7. 72-7. 71 (m, 1H)，7. 64-7. 62 (m, 1H)，7. 51-7. 47 (m, 1H)，6. 97 (dd, J = 9. 7,2. 4Hz, 1H)，6. 87 (d, J = 8. 5Hz, 1H)，4. 75(dt，2JHF = 47. 0Hz, J = 5. 7Hz，2H)，4. 19 (t, J = 5. 7Hz，2H)，3. 83(s，3H)，2. 24(dquint,3JHF = 25. 7Hz, J = 5. 7Hz，2H)。19F-NMR(溶齊[J 氯仿_dl，共振頻率470MHz) 8 -222. 53(tt，2JHF =47. 0Hz，3Jhf = 25. 7Hz)。實施例4:2-「3'-三丁基甲錫烷基-4' _(3"-氟丙氧基)苯基1 甲氧基咪 唑並「1,2-al吡啶的合成將實施例3中獲得的107mg(相當於0. 250mmol)的2-[4' -(3〃-氟丙氧 基)-3'-碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶溶解於10mL 二噁烷中，向其中加入2mL 三乙胺。然後向其中加入190yL(相當於0.376mmol)的二(三丁基錫)和20mg(催化劑 量)的四(三苯膦)鈀。在將該反應混合物在90°C下攪拌14. 5小時後，減壓蒸餾出溶劑。 通過快速矽膠柱色譜精製殘餘物(洗脫溶劑己烷/乙酸乙酯=2/1)。此外，通過再循環制 備型HPLC(HPLC裝置LC-908(商品名；日本分析工業公司制)；色譜柱2根JAIGEL 2H(商 品名；日本分析工業公司制)串聯；流動相氯仿)精製所得粗產物，得到37. 8mg(相當於 64. lumol)2-[3'-三丁基甲錫烷基-(3〃 -氟丙氧基)苯基]-6-甲氧基咪唑並[1， 2-a]吡啶(圖4，步驟1)。所得2_[3'-三丁基甲錫烷基-4' -(3〃 -氟丙氧基)苯基]-6-甲氧基咪唑並 [1,2-a]吡啶的NMR測定結果(內標物四甲基矽烷)如下所示。所使用的NMR裝置JNM-ECP-500 (日本電子株式會社(JE0L)制)屯-匪R(溶劑氯仿-dl；共振頻率500MHz) 8 7. 88 (dd, J = 8. 5,2. 1Hz，1H)， 7. 89-7. 78 (m, 1H)，7. 73 (s, 1H)，7. 66 (d, J = 2. 3Hz, 1H)，7. 50 (d, J = 9. 7Hz, 1H)，6. 94 (dd, J = 9. 7,2. 3Hz, 1H) ,6. 91-6. 85 (m, 1H), 4. 65(dt，2JHF = 47. 0Hz, J = 6. 0Hz，2H)，4. 12 (t，J =6. 0Hz，2H)，3. 82(s，3H)，2. 20 (dquint, 3JHF = 25. 7Hz, J = 6. 0，2H)，1. 64-1. 45 (m, 6H)， 1. 33 (sextet, J = 7. 3Hz，6H)，1. 16-1. 01(m，6H)，0. 89 (t, J = 7. 3Hz，9H)。13C-NMR(溶劑氯仿-dl，共振頻率125MHz) 8 162. 88，149. 20，145. 96，142. 68， 134. 64，130. 31，127. 70，126. 84，119. 35，117. 37，109. 64，108. 28，107. 55,80. 81 (d/Jcp = 165. 1Hz)，63. 53(d，3JCF = 5. 8Hz)，56. 20，30. 63 (d，2JCF = 20. 2Hz)，29. 16，27. 35，13. 67， 9. 90.19F-NMR(溶齊[J 氯仿 _dl，共振頻率470MHz) 8 -221. 43(tt，2JHF = 47. 0Hz，3Jhf = 25. 7Hz)。
實施例5:2-「4' ~(2"-氟乙氧基)_3' _碘苯基1 甲氧基咪唑並「1, 2_a1吡 啶(非放射件碘化形式)的合成將1.46g(相當於4. 28mmol)的2-溴-4'-羥基-碘苯乙酮和584mg(相當 於4.71mmol)的2-氨基-5-甲氧基吡啶溶解於30mL乙腈。將所得溶液在110°C的油浴中 加熱回流2. 5小時。在反應完成後，將反應液冷卻至室溫，過濾回收沉澱。用乙腈洗滌沉澱， 減壓乾燥。將所得粗結晶混懸於3. OmL水和1. OmL甲醇的混合溶液中。然後向其中加入約 10mL飽和碳酸氫鈉溶液，並且使用超聲洗滌器將該混合物超聲處理5分鐘。從所得混合物 中過濾回收沉澱，用水充分洗滌，減壓乾燥，得到812mg(相當於2.22mmol)的2_(4'-羥 基-3'-碘苯基)-6_甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶(圖5，步驟1)。將充分乾燥而除去水分的366mg(相當於l.OOmmol)的2-(4'-羥基-碘 苯基)-6_甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶溶解於10. OmL的N，N-二甲基甲醯胺中，向其中加 入415mg(相當於3.00mmol)的碳酸鉀。向該混合物中加入327mg(相當於1. 50mmol)的 1-氟-2-對甲苯磺醯氧基乙烷，然後將該溶液在90°C下攪拌2小時。在反應完成後，向其中 加入飽和氯化銨水溶液，用乙酸乙酯萃取3次。用水和飽和氯化鈉溶液洗滌合併的乙酸乙 酯層，用無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法精製所得粗產物(洗脫溶劑己烷 /乙酸乙酯=1/2)，得到381mg(相當於0.924mmol)的2-[4' _(2〃 -氟乙氧基)_3'-碘 苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶(圖5，步驟2)。所得2_[4' _(2〃 -氟乙氧基)_3'-碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2_a]吡啶的 NMR測定結果(內標物四甲基矽烷)如下所示。所使用的NMR裝置JNM-ECP-500 (日本電子株式會社(JE0L)制)屯-匪R(溶劑氯仿 _dl ；共振頻率500MHz) 8 8. 34 (d, J = 1. 8Hz，lH)，7. 87 (dd, J = 1. 8,8. 7Hz, 1H) ,7. 73(s, 1H)，7. 64 (d, J = 2. 3Hz, 1H)，7. 50 (d, J = 9. 6Hz, 1H)，
6.98(dd, J = 1. 8,9. 6Hz, 1H) ,6. 89 (d, J = 8. 7Hz, 1H), 4. 82(dt，2JHF = 47. 2Hz, J = 4. 1Hz, 2H)，4. 31(dt，3JHF = 27. 0Hz, J = 4. lHz，2H)，3. 83(s，3H)。實施例6:2-「3'-三丁基甲錫烷基-4' _(2"-氟乙氧基)苯基1_6_甲氧基咪 嗶並「l，2_a1吡啶的合成將實施例5中獲得的297mg(相當於0. 721mmol)的2-[4' -(2〃-氟乙氧 基)-3'-碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶溶解於7. OmL 二噁烷中，向其中加入 3. OmL三乙胺。然後向其中加入0. 55mL(相當於1. lmmol)的二(三丁基錫)和55. Omg (催 化劑量)的四(三苯膦)鈀。在將該反應混合物在90°C下攪拌18小時後，減壓蒸餾出溶 劑。通過快速矽膠柱色譜精製殘餘物(洗脫溶劑己烷/乙酸乙酯=2/1)，得到188mg(相 當於0.327mmol)的2-[3'-三丁基甲錫烷基-(2〃 -氟乙氧基)苯基]-6-甲氧基咪 唑並[l，2-a]吡啶(圖6，步驟1)。所得2_[3'-三丁基甲錫烷基-4' -(2〃 -氟乙氧基)苯基]-6-甲氧基咪唑並 [1,2-a]吡啶的NMR測定結果(內標物四甲基矽烷)如下所示。所使用的NMR裝置JNM-ECP-500 (日本電子株式會社(JE0L)制)i-NMR(溶劑氯仿-dl ；共振頻率500MHz) 8 7. 89 (dd, J = 2. 3，8. 7Hz，1H)，
7.84 (d, J = 2. 3Hz，lH)，7. 73(s，lH)，7. 66(s，lH)，7. 51(d，J = 9. 6Hz，1H)，6. 95 (d，J = 9. 6Hz，1H)，6. 84 (d，J = 8. 7Hz，1H)，4. 73 (dt，2JHF = 46. 7Hz，J = 3. 7Hz，2H)，4. 22 (dt，3JHF =23.8Hz，J = 3. 7Hz，2H)，3.82 (s，3H)，1.58-1. 51 (m，6H)，1.37-1. 30 (m，6H)，l. 13-1. 06 (m, 6H)，0. 89 (t, J = 7. 3Hz，9H)。實施例7:2-「4' _(2"-羥基乙氧基)_2'-甲氧基苯基1 碘咪唑並「1, 2_a1 吡啶(非放射件碘化形式)的合成將2. 50g(相當於20. Ommol)的2-溴乙醇和2. 72g(相當於40. Ommol)的咪唑溶 解於10mL的N，N-二甲基甲醯胺(DMF)中並且冷卻至0°C。然後向其中加入5. 50g(相當 於20. Ommol)的叔丁基二苯基氯矽烷(TBDPSC1)。在將該反應混合物在室溫下攪拌18小時 後，加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取3次。用無水硫酸鈉乾燥合併的乙酸乙酯層， 減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法精製所得粗產物(洗脫溶劑己烷/乙酸乙酯=10/1)，得到 7.04g(相當於19.4mmol)的1_溴_2_(叔丁基二苯基甲矽烷氧基)乙烷(圖7，步驟1)。將1.00g(相當於6. 57mmol)的2'，4' - 二羥基苯乙酮溶解於30. OmL 二甲基甲 醯胺中，向其中加入908mg(相當於7. 88mmol)的碳酸鉀，然後向其中加入2. 39g(相當於 6. 57mmol)的1_溴_2_(叔丁基二苯基甲矽烷氧基)乙烷。在將該反應混合物在90°C下攪拌 2小時後，加入飽和氯化銨水溶液，用乙酸乙酯萃取3次。用無水硫酸鈉乾燥合併的乙酸乙 酯層，減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法精製所得粗產物(洗脫溶劑己烷/乙酸乙酯=10/1)， 得到2. llg(相當於4.86mmol)的4' -(2「-叔丁基二苯基甲矽烷氧基乙氧基)-2'-羥 基苯乙酮(圖7，步驟2)。將175mg(相當於7. 29mmol)的氫氧化鈉混懸於30mL四氫呋喃中，向其中加入 2. llg(相當於4.86mmol)的4' -(2"-叔丁基二苯基甲矽烷氧基乙氧基)_2『-羥基苯 乙酮。將反應混合物在室溫下攪拌10分鐘後，向其中加入0. 454mL(相當於4. 86mmol)的 碘甲烷，再在90°C下攪拌4小時。在反應完成後，加入飽和氯化銨水溶液，用乙酸乙酯萃取 3次。用無水硫酸鎂乾燥合併的乙酸乙酯層，並減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法精製所得粗產 物(洗脫溶劑己烷/乙酸乙酯=10/1)，得到1.25g(相當於4.86mmol)的4' -(2〃 -叔 丁基二苯基甲矽烷氧基乙氧基)-2'-甲氧基苯乙酮(圖7，步驟3)。將13mL乙酸乙酯加入到1. 31g(相當於5. 86mmol)的溴化銅中而得到混懸液， 向其中加入1.25g(相當於4.86mmol)的4' -(2"-叔丁基二苯基甲矽烷氧基乙氧 基)_2'-甲氧基苯乙酮。然後加熱回流所得混合物。3小時後，將該反應混合物冷卻至室 溫並且過濾。減壓濃縮所得濾液。將殘餘物溶解於乙酸乙酯並且通過添加活性炭進行脫色 操作。然後過濾所得溶液並且濃縮。通過快速矽膠柱色譜精製所得粗產物(洗脫溶劑己 烷/乙酸乙酯=10/1)，得到666mg(相當於1.26mm0l)的2-溴-4' -(2〃 -叔丁基二苯基 甲矽烷氧基乙氧基)_2' _甲氧基苯乙酮(圖7，步驟4)。將666mg(相當於1. 26mmol)的2-溴-4' -(2〃 -叔丁基二苯基甲矽烷氧基乙氧 基)-2'-甲氧基苯乙酮和360mg(相當於1.64mm0l)的2-氨基-5-碘吡啶溶解於5. OmL 乙腈。將所得溶液在110°C的油浴中加熱回流2小時。在反應完成後，將反應液冷卻至 室溫，過濾回收沉澱。用乙腈洗滌沉澱並且減壓乾燥，得到525mg(相當於0.720mmol)的 2-[4' -(2〃 -叔丁基二苯基甲矽烷氧基乙氧基)_2'-甲氧基苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a] 吡啶-氫溴酸鹽(圖7，步驟5)。將200mg(相當於0. 274mmol)的2-[4' -(2〃 -叔丁基二苯基甲矽烷氧基乙氧 基)-2'-甲氧基苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶溶解於2. OmL四氫呋喃，向其中加入0.33mL的1. Omol/L氟化四丁銨的四氫呋喃溶液。在將反應混合物在室溫下攪拌4小時後， 加入碳酸氫鈉水溶液，然後加入5. OmL水和1. OmL乙腈，過濾沉澱。依次用水和乙腈洗滌過 濾後的沉澱，得到103mg(相當於0.251mmol)的2-[4' _(2"-羥基乙氧基)_2'-甲氧基 苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶(圖7，步驟6)。所得2_[4' -(2〃 -羥基乙氧基)_2'-甲氧基苯基]-6-碘咪唑並[l，2_a]吡啶 的NMR測定結果(內標物四甲基矽烷)如下所示。所使用的NMR裝置JNM-ECP-500 (日本電子株式會社(JE0L)制)'H-NMR (溶劑二甲基甲醯胺-d6 ；共振頻率:500MHz) S 8. 92 (s，1H)，8. 24 (s， lH)，8.16(d，J = 8. 7Hz,lH),7. 38(s,2H),6. 69 (d, J = 1. 8Hz, 1H) ,6. 65 (dd, J = 8.7，
1.8Hz, 1H)，4. 89(brs, 1H)，4. 06-4. 04 (m, 2H), 4. 13(s，3H)，3. 73-3. 75 (m, 2H)。實施例8:6-三丁基甲錫烷基-2-「4' _(2"-羥基乙氧基)_2'-甲氧基苯基1 咪唑並「1,2-al吡啶的合成將實施例7中獲得的30mg(相當於0.073mmol)的2-[4' -(2〃-羥基乙氧 基)_2'-甲氧基苯基]-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶溶解於2. OmL 二噁烷中，向其中加入 1. OmL三乙胺。然後向其中加入0. 060mL(相當於0. llmmol)的二 (三丁基錫)和5. lmg(催 化劑量)的四(三苯膦)鈀。在將該反應混合物在90°C下攪拌23小時後，減壓蒸餾出溶劑。 通過快速矽膠柱色譜精製殘餘物(洗脫溶劑己烷/乙酸乙酯=1/2)，得到24. Omg (相當 於0.0419mmol)的6-三丁基甲錫烷基-2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)_2'-甲氧基苯基] 咪唑並[l，2-a]吡啶(圖8，步驟1)。所得6-三丁基甲錫烷基-2-[4『 -(2〃 -羥基乙氧基)_2'-甲氧基苯基]咪唑 並[l，2-a]吡啶的NMR測定結果(內標物四甲基矽烷)如下所示。所使用的NMR裝置JNM-ECP-500 (日本電子株式會社(JE0L)制)1H-NMR(溶劑氯仿-dl ；共振頻率500MHz) 8 8. 23 (d，J = 8. 7Hz, 1H)， 8. 06 (s, 1H), 7. 98 (s, 1H)，7. 58 (d, J = 8. 2Hz, 1H)，7. 13 (d, J = 8. 7Hz, 1H) ,6. 64-6. 60 (m, 2H)，4. 15 (t，J = 4. 6Hz，2H)，4. 00-3. 98 (m, 5H)，1. 64-1. 48 (m, 6H)，1. 38-1. 31 (m，6H)， 1. 18-1. 04 (m, 6H), 0. 90 (t, J = 7. 3Hz，9H)。13C-NMR(溶劑氯仿-dl，共振頻率:125MHz) 8 159. 4，157. 8，144. 3，140. 5， 131. 0，130. 1,129. 7，121. 3, 116. 6,116. 1, 110. 5，105. 6,99. 3,69. 4,61. 5,55. 5,29. 0, 27. 3，13. 7,9. 8。實施例9:2-「4' _(2"-羥基乙氧基)_2'-甲氧基苯基]-6-「@11碘咪嗶並「1， 2-al吡啶的合成向60iiL的6-三丁基甲錫烷基_2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)_2'-甲氧基苯 基]咪唑並[1,2-a]吡啶的甲醇溶液(濃度:lmg/mL)中加入40 y L的2mol/L鹽酸，40 y L 135.7MBq的[1231]碘化鈉和20 y L 10% (w/v)的過氧化氫。在將該混合溶液在50°C下靜 置10分鐘後，使其在下述條件下進行HPLC，得到2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)_2'-甲氧 基苯基]-6-[123I]碘咪唑並[l，2-a]吡啶的級分。HPLC 條件柱:Phenomenex Luna C18(商品名；Phenomenex 公司制；規格4. 6X 150mm)流動相含0. 三氟乙酸的水/含0. 三氟乙酸的乙腈=80/20 - 0/100(17分鐘)流速1.0mL/分鐘檢測器紫外可見吸光光度計(檢測波長282nm)和放射性活度計數器(Raytest 公司制；型號:STEFFI)將10mL水加入到該級分中。讓所得溶液通過反相柱(商品名；S印-Pak(註冊商 標)Light C8 Cartridges, Waters公司制；填充劑的填充量145mg)，以使得該柱吸附收 集2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)-2' _甲氧基苯基]_6-[1231]碘咪唑並[l，2-a]吡啶。用 lmL水衝洗該柱，然後讓lmL乙醚通過，以洗脫2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)_2'-甲氧基 苯基]-6-[123I]碘咪唑並[l，2-a]吡啶。在合成剛結束時，所獲得的化合物的放射性活度 是55. 7MBq。此外，在下述條件下進行TLC分析，結果，該化合物的放射化學純度是99%。TLC分析條件TLC板矽膠60F254 (商品名；默克公司制)流動相氯仿/甲醇/三乙胺=100/1/2檢測器Rita Star (商品名；Raytest公司制)實施例10 :6_三丁基甲錫烷基-2-「4' _(2"-羥基乙氧基)苯基1_7_甲基咪唑 並「1,2-al吡啶的合成將50mL乙酸乙酯加入到28. 17g(相當於126mmol)的溴化銅中而得到混懸液，向 其中加入8. 18g(相當於60.0mmol)4'-羥基苯乙酮在50mL乙酸乙酯和50mL氯仿的混合溶 液中的溶液。然後加熱回流所得混合物。5小時後，將該反應混合物冷卻至室溫並且過濾。 減壓濃縮所得濾液。將殘餘物溶解於乙酸乙酯，通過添加活性炭進行脫色操作。然後過濾、 濃縮所得溶液。通過快速矽膠柱色譜精製所得粗產物(洗脫溶劑氯仿/甲醇=20/1)，並 且從乙酸乙酯/石油醚中重結晶，得到7.25g(相當於33.7mmol)的2-溴-4'-羥基苯乙 酮(圖9，步驟1)將2.00g(相當於9. 28mmol)的2-溴-4'-羥基苯乙酮和1. 91g (相當於 10. 2mmol)的2-氨基-5-溴-4-甲基吡啶溶解於40mL乙腈。將所得溶液在110°C的油浴中 加熱回流3小時。在反應完成後，將反應液冷卻至室溫，過濾回收沉澱。用乙腈洗滌沉澱並 且減壓乾燥。將所得粗結晶混懸於10mL水和10mL甲醇的混合溶液中。然後向其中加入約 50mL飽和碳酸氫鈉溶液，使用超聲洗滌器將該混合物超聲處理10分鐘。從所得混合物中過 濾回收沉澱，用水充分洗滌，減壓乾燥，得到2.67g(相當於8.81mmol)的6-溴_2_[4'-羥 基苯基]-7-甲基咪唑並[l，2-a]吡啶(圖9，步驟2)。將10. 0g(相當於80. Ommol)的2-溴乙醇和10. 9g(相當於160mmol)的咪唑溶解 於lOOmL N, N-二甲基甲醯胺(DMF)中，並且冷卻至0°C。然後向其中加入12. lg(相當於 80. Ommol)的叔丁基二甲基氯矽烷(TBDMSC1)。在將該反應混合物在室溫下攪拌3小時後， 加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取3次。用無水硫酸鈉乾燥合併的乙酸乙酯層，減 壓濃縮。通過減壓蒸餾(120°C，100mmHg)精製所得粗產物，得到14. 5g(相當於60. 6mmol) 的1-溴_2-(叔丁基二甲基甲矽烷氧基)乙烷(圖9，步驟3)。將462mg(相當於1.52mm0l)的6-溴-2-(4'-羥基苯基)-7-甲基咪唑並[1， 2-a]吡啶溶解於10mL 二甲基甲醯胺中，向其中加入630mg(相當於4. 56mmol)的碳酸鉀。 然後向其中加入400mg(相當於1.67mm0l)的1_溴_2_(叔丁基二甲基甲矽烷氧基)乙烷。在將該反應混合物在室溫下攪拌4天後，加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取3次。用 無水硫酸鈉乾燥合併的乙酸乙酯層，減壓濃縮。通過矽膠柱色譜法(乙酸乙酯)精製所得 粗產物，得到571mg(相當於1.24mm0l)的6-溴-2-[4' -(2〃 -叔丁基二甲基甲矽烷氧基 乙氧基)苯基]-7-甲基咪唑並[l，2-a]吡啶(圖9，步驟4)。將571mg(相當於1.24mm0l)的6-溴-2-[4' -(2〃 -叔丁基二甲基甲矽烷氧基乙 氧基)苯基]-7-甲基咪唑並[l，2-a]吡啶溶解於3. OmL四氫呋喃中，向其中加入1.24mL的
1.Omol/L四丁基氟化銨的四氫呋喃溶液。將該反應混合物在室溫下攪拌20分鐘後，加入氯 化銨水溶液，用乙酸乙酯萃取3次。用無水硫酸鈉乾燥合併的乙酸乙酯層，並減壓濃縮。用 水和乙酸乙酯洗滌所得粗產物，得到320mg(相當於0.922mmol)的6-溴-2-[4' -(2〃 -羥 基乙氧基)苯基]-7-甲基咪唑並[l，2-a]吡啶(圖9，步驟5)。將100mg(相當於0.288mmol)的6-溴-2-[4' -(2「-羥基乙氧基)苯基]-7-甲 基咪唑並[l，2-a]吡啶溶解於4. OmL 二噁烷中，向其中加入2. OmL三乙胺。然後向其中加 入0. 22mL(相當於0.43mmol)的二(三丁基錫)和22. Omg(催化劑量)的四(三苯膦)鈀。 在將該反應混合物在90°C下攪拌17小時後，減壓蒸餾出溶劑。通過快速矽膠柱色譜精製殘 餘物(洗脫溶劑己烷/乙酸乙酯=1/2)，得到63.8mg(相當於0. 114mmol)的6-三丁基甲 錫烷基_2-[4' _(2"-羥基乙氧基)苯基]-7-甲基咪唑並[l，2-a]吡啶(圖9，步驟6).所得6-三丁基甲錫烷基-2-[4『 -(2〃 -羥基乙氧基)苯基]-7-甲基咪唑並[1， 2-a]吡啶的NMR測定結果(內標物四甲基矽烷)如下所示。所使用的NMR裝置JNM-ECP-500 (日本電子株式會社(JE0L)制)i-NMR (溶劑氯仿-dl ；共振頻率500MHz) 8 7. 87 (d，J = 8. 7Hz，2H)，7. 67 (s， 1H)，7. 38 (s, 1H)，6. 98(d, J = 8. 7Hz，2H)，4. 13(t, J = 4. 5Hz，2H)，3. 98(t, J = 4. 5Hz，2H)，
2.39 (s，3H)，1.60-1. 46 (m，6H)，1.39-1. 32 (m，6H)，1.20-1. 06 (m，6H)，0.91 (t，J = 7. 3Hz, 9H)實施例ll:2-「4' -(2〃 _羥基乙氧基)苯基1-6-PI1碘-7-甲基咪嗶並「1， 2-al吡啶的合成向60 iiL的6-三丁基甲錫烷基-2-[4『 - (2 〃 -羥基乙氧基)苯基]_7_甲基咪唑 並[1,2-a]吡啶的甲醇溶液(濃度lmg/mL)中加入60 y L的lmol/L鹽酸、20 y L的lmmol/ L碘化鈉、50 ii L的560MBq的[1231]碘化鈉和20 y L的10% (w/v)過氧化氫。將該混合液 在50°C下靜置10分鐘後，在與實施例9相同的條件下進行HPLC，以獲得2-[4' _(2"-羥 基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-7-甲基咪唑並[l，2-a]吡啶的級分。將10mL水加入到該級分中。讓所得溶液通過反相柱(商品名；S印-Pak(註冊商 標)Light C8 Cartridges,Waters公司制；填充劑的填充量145mg)，以使得該柱吸附收集 2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-7-甲基咪唑並[l，2-a]吡啶。用lmL水衝 洗該柱，然後讓lmL乙醚通過，以洗脫2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-7-甲 基咪唑並[l，2_a]吡啶。在合成剛結束時，所獲得的化合物的放射性活度是22MBq。此外， 在與實施例9相同的條件下進行TLC分析，結果，該化合物的放射化學純度是98%。參考例1 -P^II-IMPY的合成根據下述步驟來合成在用於1(^ 的測定評價的比較例中使用的[123I]_IMPY。根據在文獻(Zhi-PingZhuang 等人，J.Med. Chem，2003，46，p. 237-243)中所述的方法，合成6-三丁基甲錫烷基-2-[4『 _(N，N_ 二甲氨基)苯基]咪唑並[l，2-a]吡啶，並 溶於甲醇(濃度lmg/mL)中。向53iiL所得溶液中，加入75iiL的lmol/L鹽酸、60-70iiL 的224-253MBq的[1231]碘化鈉、10 y L的lmmol/L碘化鈉溶液和15 y L的10% (w/v)過氧化 氫。將該混合液在50°C下靜置10分鐘後，將該溶液在與實施例3相同的條件下進行HPLC， 得到[123I]_IMPY級分。將10mL水加入到該級分中。讓所得溶液通過反相柱(商品名；S印-Pak(註冊商 標)Light C8 Cartridges,Waters公司制；填充劑的填充量145mg)，以使得該柱吸附收集 [123I]-IMPY。用lmL水衝洗該柱，然後讓lmL乙醚通過，以洗脫[123I]_IMPY。在合成剛結束 時，所獲得的化合物的放射性活度是41_57MBq。此外，在與實施例9相同的條件下進行TLC 分析，結果，該化合物的放射化學純度是93%。實施例12:2-「4' _(3"-氟丙氧基)_3' -「@1]碘苯基1_6_甲氧基咪唑並「1, 2-al吡啶的合成向50iiL的2_[3'-三丁基甲錫烷基- (3 〃 -氟丙氧基)苯基]_6_甲氧基 咪唑並[l，2-a]吡啶在甲醇/ 二甲亞碸(混合比9/1)的混合溶液(濃度lmg/mL)中的 溶液中，加入50 ii L的lmol/L鹽酸、10 y L的lmmol/L碘化鈉、50 y L的356MBq的[1231]碘 化鈉和10ii L的10% (w/v)過氧化氫。將該混合液在50°C下靜置10分鐘後，在與實施例 9相同的條件下進行HPLC，以獲得2-[4' _(3"-氟丙氧基)-3' _[1231]碘苯基]_6_甲氧 基咪唑並[l，2-a]吡啶的級分。將10mL水加入到該級分中。讓所得溶液通過反相柱(商品名；S印-Pak(註冊商 標)Light C8 Cartridges, Waters公司制；填充劑的填充量130mg)，以使得該柱吸附收 集2-[4' -(3〃 -氟丙氧基)_3' _[1231]碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶。用 lmL水衝洗該柱，然後讓lmL乙醚通過，以洗脫2-[4『 _(3"-氟丙氧基)_3' _[1231]碘苯 基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶。在合成剛結束時，所獲得的化合物的放射性活度是 261. 6MBq。此外，在下述條件下進行TLC分析，結果，該化合物的放射化學純度是98%。TLC分析條件TLC板矽膠60F254 (商品名；默克公司制)流動相氯仿/甲醇/三乙胺=100/1/2檢測器Bi0-imaging分析儀(型號BAS_2500 ；富士膠片公司制)實施例13:2-「4' _(2〃 -氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基l-6-Pll碘咪嗶並「1， 2-al吡啶的合成向70 iiL的6-三丁基甲錫烷基-2-[4 『 -(2〃 -氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基] 咪唑並[l，2-a]吡啶在甲醇/ 二甲亞碸(混合比9/1)的混合溶液(濃度lmg/mL)中的 溶液中，加入50 ii L的2mol/L鹽酸、15 y L的lmmol/L碘化鈉、80 y L的309MBq的[1231]碘 化鈉和15ii L的10% (w/v)過氧化氫。將該混合液在50°C下靜置10分鐘後，在與實施例 9相同的條件下進行HPLC，以獲得2-[4' _(2"-氟乙氧基)_3'-甲氧基苯基]_6_[1231] 碘咪唑並[l，2-a]吡啶的級分。將10mL水加入到該級分中。讓所得溶液通過反相柱(商品名；S印-Pak(註冊商 標)Light C8 Cartridges, Waters公司制；填充劑的填充量145mg)，以使得該柱吸附收 集2-[4' _(2〃 -氟乙氧基)-3' _甲氧基苯基]_6-[1231]碘咪唑並[l，2-a]吡啶。用lmL水衝洗該柱，然後讓lmL乙醚通過，以洗脫2-[4' -(2〃 -氟乙氧基)_3'-甲氧基苯 基]-6_[123I]碘咪唑並[l，2_a]吡啶。在合成剛結束時，所獲得的化合物的放射性活度是 98.4MBq。此外，在與實施例12相同的條件下進行TLC分析，結果，該化合物的放射化學純 度是92%。實施例14 2~[4' ~(2"-氟乙氧基)-3' Jj]碘苯基1_6_甲氧基咪唑並「1, 2-al吡啶的合成向75iiL的2_[3'-三丁基甲錫烷基- (2 〃 -氟乙氧基)苯基]_6_甲氧基 咪唑並[l，2-a]吡啶在甲醇/ 二甲亞碸(混合比9/1)的混合溶液(濃度lmg/mL)中的溶 液中，加入 150 ii L 的 2mol/L 鹽酸、15 y L 的 lmmol/L 碘化鈉、200 y L 的 204MBq 的[1231]碘 化鈉和15ii L的10% (w/v)過氧化氫。將該混合液在50°C下靜置10分鐘後，在與實施例 9相同的條件下進行HPLC，以獲得2-[4' _(2"-氟乙氧基)_3' _[1231]碘苯基]_6_甲氧 基咪唑並[l，2-a]吡啶的級分。將10mL水加入到該級分中。讓所得溶液通過反相柱(商品名；S印-Pak(註冊商 標)Light C8 Cartridges,Waters公司制；填充劑的填充量145mg)，以使得該柱吸附收集 2-[4' _(2〃 -氟乙氧基)-3' _[1231]碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶。用lmL水衝 洗該柱，然後讓lmL乙醚通過，以洗脫2-[4' _(2"-氟乙氧基)_3' -[1231]碘苯基]-6-甲 氧基咪唑並[l，2_a]吡啶。在合成剛結束時，所獲得的化合物的放射性活度是89. OMBq。此 外，在與實施例12相同的條件下進行TLC分析，結果，該化合物的放射化學純度是99%。t施例15-17，WMm 1 某幹辛醇萃取法的分配係數的測丨定測定基於辛醇萃取法的分配係數(以下稱作logP^p)，一般已知它們是化合物通 過血腦屏障(以下稱作BBB)的滲透性的指標。^^用包含10mg/mL抗壞血酸的生理鹽水溶液分別稀釋化合物1 (實施例15)的乙醚 溶液，化合物2 (實施例16)的乙醚溶液，化合物3 (實施例17)的乙醚溶液，化合物4(實 施例18)的乙醚溶液和[123I]_IMPY(比較例1)的乙醚溶液，並且調節放射性濃度至20 30MBq/ml。分別向2mL辛醇中加入10 y L的各溶液，再加入2mL的lOmmol/L磷酸鹽緩衝液 (pH 7. 4)，然後攪拌30秒。用低速離心機(型號CTD4，日立工業株式會社制)離心分離 (2000rpmX60分鐘)各混合物後，分別取樣lmL量的辛醇層和水層，並使用Autowell Gamma 系統(型號ARC-301B，Aloka制)測定放射性活度計數。使用所測得的放射性活度計數， 根據公式(1)計算logP辛醇。 MM結果如表2所示。如該表所示，所有化合物顯示的logP^p值都在1 3之間。已 知能滲透過BBB的化合物的值都在1 3之間(Douglas D. Dischino等人，J. Nucl. Med.，(1983), 24,p. 1030-1038)。由上述結果表明，化合物1、2和3具有與IMPY同樣的BBB滲透性。表2 本發明化合物的 實施例19-22，lYMm 2 腦內轉移件和清除件的測丨定使用化合物1、2和3，測定在雄性Wistar大鼠(7周齡)的腦中放射性蓄積的經時變化。方法 製備化合物1的包含10mg/mL抗壞血酸的生理鹽水溶液(放射性濃度為24MBq/ mL)，化合物2的包含10mg/mL抗壞血酸的生理鹽水溶液(放射性濃度為30MBq/mL)，化合物 4的包含10mg/mL抗壞血酸的生理鹽水溶液(放射性濃度為32MBq/mL)和化合物3的包含 10mg/mL抗壞血酸的生理鹽水溶液(放射性濃度為30MBq/mL)，得到樣品溶液。在硫噴妥鈉 麻醉下將各樣品溶液注射到雄性Wistar大鼠(7周齡)的尾靜脈中(劑量0. 05mL，給予的 放射性活度相當於1. 2-1. 5MBq)。注射2，5，30和60分鐘後，通過從腹部大動脈放血來處 死這些大鼠，移取腦，進行腦質量的測定，再用單通道分析儀(檢測器型號SP-20，應用光 研工業株式會社制)測定腦的放射性(以下，在本實施例中稱作a)。此外，按照與上述相同 的方式測定全身剩餘部分的放射性活度水平(以下，在本實施例中稱作b)。使用這些測定 結果，根據下述式(2)計算在各解剖時間點的每單位腦重量的放射性蓄積量(％ ID/g)(實 施例 19-22)。另外，製備[123I]-IMPY的包含10mg/mL抗壞血酸的生理鹽水溶液(放射性濃度為 20 30MBq/mL)，進行與上述同樣的操作，計算在各解剖時間點的每單位腦重量的放射性 蓄積量(% ID/g)(比較例2)。此外，在各個時間點，有三隻動物用於實施例19-22和比較例2。
…⑵結果結果如表3中所示。如表3所示，在注射後2分鐘的時間點，化合物1，2，3和4顯 示了與[123I]-IMPY同等的顯著的放射性蓄積，然後顯示了在60分鐘內迅速消除的傾向。這些結果啟示，化合物1、2和3與[123I]_IMPY同樣，具有優良的腦轉移性並且可從腦內迅速清除。表3 本發明化合物在靜脈注射後的腦中放射性蓄積(大鼠) 實施率23-25 使用化合物1、2和4的腦內澱粉樣蛋白的顯像確認
進行下述實驗以檢驗通過本發明的化合物是否可以使腦內的澱粉樣蛋白顯像。方法
(1)將APuOVako制)溶解於磷酸鹽緩衝液(pH 7. 4)，並在37°C下振蕩72小時， 以獲得lmg/mL的凝集A0混懸液(以下，在本實施例中稱作澱粉樣蛋白混懸液)。(2)在硫噴妥鈉麻醉下，將2.5yL(相當於25iig)的澱粉樣蛋白混懸液注射到雄 性Wistar大鼠(7周齡)一側的杏仁核中。作為對照，將2. 5 y L的磷酸鹽緩衝生理鹽水溶 液(pH 7.4)注射到該大鼠另一側的杏仁核中。在注射澱粉樣蛋白混懸液和磷酸鹽緩衝生 理鹽水溶液(pH7. 4) 1天後檢查該大鼠。(3)分別製備化合物1的包含10mg/mL抗壞血酸的生理鹽水溶液(放射性濃度為 24MBq/mL)、化合物2的包含10mg/mL抗壞血酸的生理鹽水溶液(放射性濃度為30MBq/mL) 和化合物4的包含10mg/mL抗壞血酸的生理鹽水溶液(放射性濃度為32MBq/mL)，得到樣品 溶液。在硫噴妥鈉麻醉下將各樣品溶液通過尾靜脈注射到大鼠中(劑量0.5mL，給予的放 射性活度相當於12_15MBq)。(4)在注射60分鐘後移取腦，用切片機(型號CM3050S，LEICA公司制)製成厚 度lOym的腦切片。將該腦切片在成像板上曝光20小時，然後使用生物-圖像分析儀(型 號BAS-2500 ；富士膠片公司制)進行圖像分析。(5)在用生物_圖像分析儀完成圖像分析後，用硫磺素T進行病理學染色，使用熒 光顯微鏡(尼康公司制；型號TE2000-U型；激發波長400-440nm ；檢測波長470nm)進行 顯像。由此確認了澱粉樣蛋白沉積在該切片上(圖10b，圖lib和圖12b)。結果圖10-12顯示了所得的放射自顯影圖和硫磺素T染色的圖像。如該圖所示，在注 射了澱粉樣蛋白混懸液的那一側的杏仁核中觀測到顯著的放射性蓄積。從放射性蓄積位點 的硫磺素T染色的結果，確認了澱粉樣蛋白存在於該位點上。另一方面，與其他位點相比， 在注射生理鹽水溶液一側的杏仁核中沒有觀察到顯著的放射性蓄積。這些結果啟示，化合物1、2和4具有在腦內澱粉樣蛋白上蓄積的性能和使腦內澱 粉樣蛋白顯像的能力。
實施例26 使用化合物3的腦內澱粉樣蛋白的顯像確認以與實施例23相同的方式進行操作，除了使用化合物3的包含10mg/mL抗壞血酸 的生理鹽水溶液(放射性濃度為32MBq/mL)作為樣品溶液並在注射樣品溶液120分鐘後取 出腦。圖13顯示了所得的放射自顯影圖和硫磺素T染色的圖像。如該圖所示，在注射了 澱粉樣蛋白混懸液一側的杏仁核中觀測到明顯的放射性蓄積。從放射性蓄積位點的硫磺素 T染色的結果，確認了澱粉樣蛋白存在於該位點上。另一方面，與其他位點相比，在注射生理 鹽水溶液一側的杏仁核中沒有觀察到顯著的放射性蓄積。這些結果提示，化合物3具有在腦內澱粉樣蛋白上蓄積的性能和使腦內澱粉樣蛋 白顯像的能力。實施例27 回復突變試騎為了檢驗化合物5的基因誘變性，使用鼠傷寒沙門氏菌TA98、TA100、TA1535、 TA1537，以及大腸桿菌WP2uvrA進行回復突變試驗(以下稱作Ames試驗)。本試驗在不添加S9mix和添加S9mix的情況下進行。將二甲亞碸(DMS0)用作陰 性對照。作為被加入到試驗平板中的樣品溶液，製備50mg/mL化合物5的DMS0溶液和通過 用DMS0稀釋該溶液而得到的具有各種濃度的各溶液。對於不加入S9mix的陽性對照，當將 TA98用作試驗菌株時，製備AF-2的DMS0溶液(化合物濃度1 u g/mL)來用作樣品溶液； 當將TA100或WP2uvrA用作試驗菌株時，製備AF-2的DMS0溶液(化合物濃度0. 1 u g/mL) 來用作樣品溶液；當將TA1535用作試驗菌株時，製備NaN3的注射用水溶液(化合物濃度 5 U g/mL)來用作樣品溶液；當將TA1537用作試驗菌株時，製備9AA的DMS0溶液(化合物 濃度800 u g/mL)來用作樣品溶液。對於加入S9mix的陽性對照，當將TA98用作試驗菌株 時，製備2-AA的DMS0溶液(化合物濃度5 u g/mL)來用作樣品溶液；當將TA100用作試驗 菌株時，製備2-AA的DMS0溶液(化合物濃度10 u g/mL)來用作樣品溶液；當將WP2uvrA 用作試驗菌株時，製備2-AA的DMS0溶液(化合物濃度100 u g/mL)來用作樣品溶液；當將 TA1535或TA1537用作試驗菌株時，製備2-AA的DMS0溶液(化合物濃度20 u g/mL)來用 作樣品溶液。各待檢樣品的添加量是0. lmL/板，對於陰性對照，只添加DMS0的添加量是0. lmL/ 板。在將各待檢樣品和各試驗菌株混合在一起後，在試驗平板的培養基上使用軟瓊脂使該 混合物多層化，然後在37°C下培養48小時。另外，將各待檢的樣品溶液、S9mix和試驗菌株 混合在一起後，在試驗平板的培養基上使用軟瓊脂使該混合物多層化，然後在37°C下培養 48小時。通過對培養後平板上回復突變的菌落數進行計數來進行判斷，當回復突變的菌落 數不低於陰性對照中該數量的2倍且表現出濃度依賴性增加時，確定誘變性為陽性。結果如表4所示。不管是否添加了 S9mix和待檢樣品的添加量是多少，在用化合 物5處理的組中回復突變的菌落數均小於用陰性對照物處理的組的2倍。另一方面，在用 陽性對照物處理的組中，顯示了回復突變的菌落數明顯增加。從上述結果可以判定，化合物 5在Ames試驗中呈陰性，沒有基因誘變性。表4 :Ames試驗的結果 實施例28:腦內澱粉樣蛋白與2_「4' _(2"-羥基乙氧,基)_2'-甲氧,基苯 基1-6-「mI1碘咪唑並「1,2-al吡啶結合的確認進行下述實驗，以檢驗本發明的化合物是否與腦內澱粉樣蛋白結合。^^(1)將A 3 h2 (ffako制)溶於磷酸鹽緩衝液(pH 7. 4)並在37°C下振蕩72小時，以 獲得lmg/mL的凝集A0混懸液(以下，在本實施例中稱作澱粉樣蛋白混懸液)。(2)在硫噴妥鈉麻醉下，將2.5yL(相當於25iig)的上述澱粉樣蛋白混懸液注射 到雄性Wistar大鼠(7周齡)一側的杏仁核中。作為對照，將2. 5 y L的磷酸鹽緩衝生理鹽 水溶液(PH 7.4)注射到該大鼠另一側的杏仁核中。在注射澱粉樣蛋白混懸液和磷酸鹽緩 衝生理鹽水溶液(pH7. 4)1天後，從大鼠中移取腦，用切片機(型號CM3050S，LEICA公司 制)製成厚度10 ym的腦切片。(3)用牛血清白蛋白/磷酸鹽緩衝液(以下，在本實施例中稱作PB/BSA) 稀釋化合物6的乙醚溶液，得到樣品溶液(放射性濃度為0. IMBq/mL)(4)將上述的腦切片在磷酸鹽緩衝液(pH7. 4)中浸泡30分鐘，然後在1 %牛血清 白蛋白/磷酸鹽緩衝液(以下，在本實施例中稱作PB/BSA)中浸泡30分鐘。然後將腦 切片浸入樣品溶液中。(5)將上述(4)獲得的腦切片浸入1 % PB/BSA中5分鐘，再浸入磷酸鹽緩衝液中 10分鐘(5分鐘X2次)，然後風乾。接著，將該腦切片在成像板上曝光16小時，然後通過 使用生物_圖像分析儀(型號BAS-2500 ；富士膠片株式會社制)進行圖像分析。(5)在用生物_圖像分析儀完成圖像分析後，用硫磺素T進行病理學染色，通過使 用螢光顯微鏡(尼康公司制；型號TE2000-U型；激發波長400-440nm ；檢測波長470nm) 進行顯像。由此確認了澱粉樣蛋白沉積在該切片上(圖14b)。MM圖14顯示了大腦內注射澱粉樣蛋白的大鼠的腦切片的體外放射自顯影圖和硫磺 素T染色的圖像。如該圖所示，在注射了澱粉樣蛋白混懸液一側的杏仁核中觀測到明顯的 放射性蓄積。從放射性蓄積位點的硫磺素T染色的結果，確認了澱粉樣蛋白存在於該位點 上。另一方面，與其他位點相比，在注射生理鹽水溶液一側的杏仁核中沒有觀察到顯著的放 射性蓄積。這些結果啟示，2_[4' -(2〃 -羥基乙氧基)_2'-甲氧基苯基]_6_[1231]碘咪唑 並[l，2_a]吡啶具有與腦內澱粉樣蛋白結合的性能。產業實用性本發明的化合物可以在診斷劑領域中應用。
2權利要求
如下式(1)所示的化合物及其鹽其中R1，R2和R3分別獨立地表示選自氫、羥基、具有1 4個碳原子的烷基取代基、烷基鏈具有1 4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團，排除其中取代基R1，R2和R3中的兩個或更多個是氫的情況，R4是選自氫、羥基、烷基鏈具有1 4個碳原子的烷氧基和滷素取代基的基團，且m是1 4的整數，條件是，R1，R2，R3和R4中的至少一個表示放射性滷素取代基。FPA00001160934900011.tif
2.根據權利要求1的化合物及其鹽，其中R1，R2，R3和R4中的至少一個表示選自18F、 76Br、123I、124I、125I 或 131I 的放射性滷素。
3.根據權利要求2的化合物及其鹽，該化合物選自2-■[4'_(3"-氟丙氧基)-3' -[123I]碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶，2-■[4'_(2"-氟乙氧基)-3'-甲氧基苯基]-6-[123I]碘咪唑並[l，2_a]吡啶，2-■[4'_(2"-氟乙氧基)_3' -[123I]碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2_a]吡啶，2-■[4'_(2"_羥基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-7-甲基咪唑並[l，2_a]吡啶，和2-■[4'-(2〃-羥基乙氧基)-2'-甲氧基苯基]-6-[1231]碘咪唑並[l，2-a]吡啶
4.下式(2)所示的化合物及其鹽 其中R6和R7分別獨立地表示選自氫、羥基、具有1-4個碳原子的烷基取代基、烷基鏈具 有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團，排除其中R6和R7都是氫的情況， R8是選自氫、羥基、烷基鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團， R9是選自非放射性滷素取代基、硝基、烷基鏈具有1-4個碳原子的三烷基銨基、烷基鏈 具有1-4個碳原子的三烷基甲錫烷基取代基或三苯基甲錫烷基的基團，且 m是1-4的整數。
5.下式(3)所示的化合物及其鹽 其中R5和R6分別獨立地表示選自氫、羥基、具有1-4個碳原子的烷基取代基、烷基鏈具 有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團，排除其中R5和R6都是氫的情況， R8是選自氫、羥基、烷基鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團， R11是選自非放射性滷素取代基、硝基、烷基鏈具有1-4個碳原子的三烷基銨基、烷基鏈 具有1-4個碳原子的三烷基甲錫烷基取代基或三苯基甲錫烷基的基團，且 m是1-4的整數。
6.下式(4)所示的化合物及其鹽 其中R5，R6和R7分別獨立地表示選自氫、羥基、具有1-4個碳原子的烷基取代基、烷基 鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團，排除其中取代基R5，R6和R7中 的兩個或更多個是氫的情況，R12是選自非放射性商素取代基、甲磺醯氧基取代基、三氟甲磺醯氧基取代基和芳香族 磺醯氧基取代基的基團，且 m是1-4的整數.
7.用於檢測沉積在生物組織上的澱粉樣蛋白的試劑，包含如下式(1)所示的化合物 其中R1，R2和R3分別獨立地表示選自氫、羥基、具有1-4個碳原子的烷基取代基、烷基 鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團，排除其中取代基R1，R2和R3中 的兩個或更多個是氫的情況，R4是選自氫、羥基、烷基鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團，且 m是1-4的整數，條件是，R1，R2，R3和R4中的至少一個表示放射性滷素取代基。
8.根據權利要求7的用於檢測沉積在生物組織上的澱粉樣蛋白的試劑，其中R1，R2,R3 和R4中的至少一個表示選自18F、76Br、123I、124I、125I或131I的放射性滷素。
9.根據權利要求8的用於檢測沉積在生物組織上的澱粉樣蛋白的試劑，包含選自下列 的化合物2-[4' _(3〃 -氟丙氧基)-3' -[123I]碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶， 2-[4' _(2〃 -氟乙氧基)-3'-甲氧基苯基]-6-[123I]碘咪唑並[l，2-a]吡啶， 2-[4' _(2〃 -氟乙氧基)-3' -[123I]碘苯基]-6-甲氧基咪唑並[l，2-a]吡啶， 2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-7-甲基咪唑並[l，2-a]吡啶，和 2-[4' -(2〃 -羥基乙氧基)-2'-甲氧基苯基]-6-[123I]碘咪唑並[l，2-a]吡啶。
全文摘要
本發明提供一種用作以澱粉樣蛋白為靶向的圖像診斷探針的化合物，和用於檢測沉積在生物組織上的澱粉樣蛋白的包含該化合物的試劑。本發明提供如下式(1)所示的化合物以及包含該化合物的試劑其中R1，R2和R3獨立地表示選自氫、羥基、具有1-4個碳原子的烷基取代基、烷基鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團，排除其中取代基R1，R2和R3中的兩個或更多個是氫的情況，R4是選自氫、羥基、烷基鏈具有1-4個碳原子的烷氧基取代基和滷素取代基的基團，m是1-4的整數，條件是，R1，R2，R3和R4中的至少一個表示放射性滷素取代基。
文檔編號A61K49/04GK101903383SQ200880121679
公開日2010年12月1日 申請日期2008年10月24日 優先權日2007年10月26日
發明者中村大作, 奧村侑紀, 谷藤樹之, 高崎新也 申請人:日本醫事物理股份有限公司