包含至少一種防消化酶消化的蛋白活性成分的藥物組合物的製作方法

2023-06-15 12:47:51

專利名稱：包含至少一種防消化酶消化的蛋白活性成分的藥物組合物的製作方法
技術領域：
本發明的主要目的是作為藥物或藥物組合物使用的組合物，所述組合物包含至少 一種防消化酶消化的蛋白活性成分。在所述組合物中，所述的至少一種活性成分是按照抵 抗胃環境和腸環境中代謝的方式配製的。所述組合物是用於通過口服途徑(通過胃腸道) 給予所述至少一種蛋白活性成分(對消化酶敏感)的組合物。
背景技術：
迄今為止，儘管已採取了大量措施來研究替代的給藥途徑(特別是那些讓患者更 舒適的方式)，對消化酶敏感的蛋白活性成分，特別是胰島素及其類似物(對蛋白酶更加敏 感，比如胃中的胃蛋白酶和腸中的胰蛋白酶)，還是主要採取非胃腸道途徑給藥。Simona Cernea 禾口 Itamar Raz 於 2006 年 在 Timely Top. Med. Cardiovasc. Dis. 2006 Nov. 1 ；Vol 10 :E29上發表的文章總結了通過注射給予胰島素的替代方式。關於 這一主題也已存在許多專利文獻，比如W085/05029、US 5，824，638和WO 2006/127361。該領域最先進的成果很可能是與鼻腔給藥有關。這種給藥途徑在技術上毫無疑問 會比非胃腸道給藥受限更少。富含血管的鼻黏膜具有吸收蛋白質並將其輸送至血液系統的 能力，這種能力使其成為潛在的良好候選對象。然而，取決於患者的情況，這種方式在控制 由吸入器輸送的劑量方面仍面臨著一定困難(特別是病人患有感冒的情況等)。在現有技術中，依照多種變體進行化學修飾以及依照多種變體配製的蛋白活性成 分已被更廣泛的公開。例如-專利US4，692，433公開了將多肽類激素通過口服途徑給藥的方式。所述激素優 選以包封在脂質體中的緩衝水溶液形式給藥。其不以游離形式進行給藥；-文獻WO 97/3353UW0 02/072075 和 WO 2003/0017203 公開了多Jft 口服給藥的抗 胃酸形式。這些形式將抗胃酸塗層和PH降低劑結合。所述塗層在活性成分通過胃的過程 中對其進行保護。一旦進入腸道，該塗層便會溶解，釋放出活性成分和PH降低劑。由於pH 降低劑的作用，腸道的PH值被局部降低，事實上便可降低所存在的腸蛋白酶的蛋白水解活 性。因此，通過兩種依次發揮作用的不同方式，確保在胃部以及進入腸道過程中進行保護。 所述多肽既不是以游離形式也不是在存在緩衝液的情況下發揮功能。此外，應該注意到，專 利申請WO 97/33531第23頁的表1顯示了降鈣素(calcitonin)的緩衝溶液的生物利用度 結果。這些測試是用於研究局部給予(直接給入大鼠腸道)的溶液PH值對於活性成分吸 收的影響。這些測試的目的是為了優化在所提出的抗胃酸形式中發揮作用的PH降低劑的 性能。這些測試既沒有說明也沒有暗示以下公開的本發明的口服組合物(藥物組合物或藥 物)；-專利申請US2002/0132757涉及降鈣素以固體顆粒的形式通過口腔黏膜或鼻黏 膜的上皮膜給藥。對於這種特定的不涉及胃腸道的給藥類型，活性成分被按照如下步驟處 理。首先，將其溶於緩衝液中(僅是加工助劑)。將補充有一種或多種表面活性劑以及一種 或多種吸收促進劑後所得的溶液凍幹。最後，將所得乾燥顆粒和適當的溶劑或載體(例如乙醇)一起封裝至加壓容器中。該溶劑或載體具有在壓力下將所述顆粒分散至儘可能大的 黏膜區域的功能。所述顆粒未在存在緩衝液的情況下進行給藥；-專利申請US2007/0154559公開了一種配製用於口服給藥的活性成分的複雜方 法。該方法尋求胃腸道吸收的改善。所謂的吸收是指包含有所述活性成分的納米顆粒的吸 收。依照已公開的方法，活性成分首先溶解於緩衝液中(僅是加工助劑)，然後與反離子形 成複合物。在聚合物和脂質的存在下，將所得複合物在有機試劑中形成溶液。隨後，所得的 有機溶液與含有乳化劑的水溶液產生乳液。最後，通過蒸發所述有機溶劑形成上述納米顆 粒。因此，該活性成分既不是以游離形式也不是在存在緩衝液的情況下進行給藥；-專利申請WO2007/032018公開了一種配製用於口服給藥的活性成分的複雜方 法，該方法與上述美國申請公開的方法屬相同類型。活性成分同樣是以納米顆粒的形式輸 送。所述納米顆粒(基於脂肪酸和聚合物)對PH值敏感。它們在酸性pH下收縮。因此， 活性成分在通過胃部的過程中得到了更好的保護。再次指出，該活性成分既不是以游離形 式也不是在存在緩衝液的情況下進行給藥；-專利申請FR2，123，524公開了一種通過醯基化獲得的胰島素衍生物。該化學反 應在緩衝介質中進行。專利申請WO 01/36656公開了生物分子和透明質酸形成的複合物。 這兩份現有技術文獻既沒有公開也沒有暗示將游離形式的活性成分和保護性的緩衝體系 相結合而得到的藥物組合物。上面的評述總結了關於口服組合物、游離形式的蛋白活性成分和緩衝液概念的現 有技術教導，所述概念構成了本發明的基礎，說明如下。通過口服途徑將蛋白活性成分(對消化酶敏感)給藥面臨的技術問題是雙重 的，因為根據推斷(a priori)所提供的保護體系必須在胃部以及進入腸道的過程中都是 有效的。根據推斷它必須是首先能抗胃酸消化繼而能抗胰液消化的保護體系。實際上， 在胃的出口處，即幽門部位，當酸性食糜(chyme)流入十二指腸時，腸道便釋放促胰液素 (secretin)，刺激胰腺分泌碳酸氫鹽(以降低所述食糜的酸度)和膽囊收縮素(腸促胰酶 素)，膽囊收縮素可刺激富含酶(胰蛋白酶原和胰凝乳蛋白酶原，上述兩種酶原在腸激酶的 活化下可轉化為胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶)的胰液的分泌。一旦十二指腸中的酸度被碳酸 氫化的促胰液素中和，便會發生胰腺分泌的反饋和抑制。這種正常的消化機制是本領域技 術人員所熟知的。

發明內容
面對所述的通過口服途徑給予蛋白活性成分的技術問題，本發明人提出了一種全 新的解決方案，該方案並非基於雙重保護體系，而是基於在胃部進行保護並且還抑制胰腺 分泌的體系(消除了活性成分在進入腸道時會發生降解的問題)。本發明人對使用本發明 組合物得到的滿意結果歸納而提出了這一解釋。所提出的新型保護體系是一種緩衝體系。 所述的新型保護體系(即緩衝體系)以令人非常驚訝的方式，使得蛋白活性成分能夠以遊 離形式通過口服途徑給藥(通過胃腸道)。依據第一個目的，本發明涉及作為藥物或藥物組合物使用的新型組合物，該組合 物意圖用於(適合用於)對至少一種蛋白活性成分進行口服給藥；所述組合物經過緩衝。更確切的說，本發明的組合物以液體或固體形式提供。所述組合物是包含至少一
5種蛋白活性成分的口服組合物。其適合通過口服途徑給予所述活性成分。從特徵上講，所述組合物是-液體，包含能將其pH值緩衝至大於4而小於等於8的體系(緩衝體系)；-固體，包含發揮將pH值緩衝至大於4而小於等於8的緩衝作用的體系(緩衝體 系)，所述緩衝作用在將固體置於液體介質(通常是水性的)中後得以發揮。因而，根據第一個目的，本發明涉及-組合物，液體或固體形式的，其包含至少一種游離形式的蛋白活性成分和緩衝體 系；若組合物為液體形式，該體系(緩衝體系)能夠將PH值緩衝至大於4而小於等於8 ；若 組合物為固體形式，該體系(緩衝體系)能夠在固體形式被置於液體介質中後發揮將PH值 緩衝至大於4而小於等於8的緩衝作用；該組合物作為藥物使用，用於通過口服途徑(通過 胃腸道)給予所述的至少一種蛋白活性成分。-藥物組合物，液體或固體形式的，用於通過口服途徑(通過胃腸道)給藥；其包 含至少一種蛋白活性成分，其中所述藥物組合物包含游離形式的所述蛋白活性成分和緩衝 體系；若組合物為液體形式，該體系(緩衝體系)能夠將PH值緩衝至大於4而小於等於8 ； 若組合物為固體形式，該體系(緩衝體系)能夠在固體形式被置於液體介質中後發揮將PH 值緩衝至大於4而小於等於8的緩衝作用。本發明所述的組合物是通過(簡單)配製所述的至少一種游離形式的蛋白活性成 分和能夠對其進行緩衝的體系(緩衝體系)而得到的；若組合物為液體形式，該體系(緩衝 體系)能夠將PH值緩衝至大於4而小於等於8 ；若組合物為固體形式，該體系(緩衝體系) 能夠在所述固體形式被置於液體介質中後發揮將PH值緩衝至大於4而小於等於8的緩衝 作用。從特徵上講，本發明中的液體或固體(在任何情況下均為單相(單一的相))組合 物是由至少一種游離形式的蛋白活性成分和緩衝體系組成的口服組合物。正如上文所指出 的，所述緩衝體系能夠使游離形式的蛋白活性成分通過口服途徑進行給藥。該體系在胃腸 道中對所述游離形式具有有效的保護作用。因而，在本發明的組合物中，蛋白活性成分是以「原有的形式」存在，本身並未被保 護，尤其是並未被物理屏障所保護。該活性成分是以原有的形式存在，或者是以與配製過程 中所需的賦形劑的簡單混合物形式存在。「所述活性成分的游離形式」主要是指該活性成分 並未受到複雜程度不同的物理系統的保護，比如塗層、基質或者膠囊壁(所述活性成分並 未被塗上塗層、加入基質或裝入膠囊(特別是封裝到脂質體中)等)。考慮到所設定的pH值，該緩衝體系能夠在胃環境和腸環境中對本發明中的組合 物進行緩衝。該體系無疑能夠在消化過程中發揮其緩衝作用至少2小時，優選可持續3小 時(在胃的酸性條件和腸的鹼性條件下)。該緩衝體系是本領域技術人員所熟知的。作為 非限制性例子，以下對該體系的性質進行說明。本發明的組合物結合了以下成分_至少一種游離形式的蛋白活性成分(如上所述)，通常是一種該活性成分(然 而，多種該類型活性成分的聯合作用(或至少一種該類型的活性成分和至少一種其他活 性成分的聯合作用)，無論是以混合物的形式還是獨立的形式，不排除於本發明的範圍之 外)；以及
6
-能夠在如上所述的pH值範圍內發揮緩衝作用的體系(緩衝體系)。在所述pH值範圍內(4<pH彡8)發揮所述緩衝作用無疑與所述的至少一種蛋白 活性成分的穩定性相兼容(在任何情況下都與存在的活性成分的穩定性相兼容)。本發明中組合物的pH值被緩衝至4 < pH彡8。優選pH值被緩衝至4. 5到7. 5 之間(4. 5彡pH彡7. 5)，更優選被緩衝至5到7之間(5彡pH彡7)，實際上是pH值被緩衝 至大於5而小於等於7(5 4時，胃蛋白酶沒有(或幾乎沒有)活性)以及在酸性食糜不再流入十二指腸時對胰腺 分泌的抑制(差不多是隨之發生的)_適合於保護所有蛋白活性成分免於消化酶的消化。因此，本發明的組合物優選包含至少一種蛋白活性成分(游離形式)，所述活性成 分選自胰島素及其類似物和衍生物(通常優選包含胰島素或其類似物或其衍生物作為單 一的該類型的活性成分，或者作為單一的活性成分)。本領域技術人員熟知這樣的胰島素類 似物，如賴脯胰島素、門冬胰島素、甘精胰島素和地特胰島素。本領域技術人員同樣熟知如 專利申請FR 2，123，524中描述的胰島素衍生物。因此，本發明中的組合物優選包含如下的活性成分(游離形式)-胰島素或其類似物或其衍生物；-促生長素(人生長激素)或其衍生物；-降鈣素；或-LHRH(黃體生成素釋放激素)類似物，比如曲普瑞林。此處再次指出，本發明的組合物可以包含多種該類活性成分，上述遠未窮盡的列 表也絕非限制性的方式。適合本發明目的的緩衝體系是傳統的緩衝體系，優選為具有高能力的緩衝體系。 本領域技術人員熟知此類體系並且能夠在本發明範疇內優化得出一種組合至少一種蛋白 活性成分(游離形式)/緩衝體系(例如胰島素/緩衝體系)。以一種完全非限制性的方式來說，本發明組合物中發揮緩衝作用的體系優選 為選自下述物質的緩衝液磷酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸 鹽、咪唑、四丁基銨、2-氨基-2-羥甲基-1，3-丙二醇(或三羥甲基氨基甲烷或氨丁三醇 (Trometamol)或Tham或Tris)、tris_甘氨酸、巴比妥、tris-EDTA BSA、硫酸銅和兩性離子 緩衝液。更一般的說，本發明組合物中的緩衝體系可選自歐洲藥典最新版(專論4. 1. 3)中 所給出的緩衝體系列表。所述緩衝體系優選為磷酸鹽或Tris緩衝液。推薦的磷酸鹽緩衝液包含2 3wt %的磷酸二氫鈉；禾口
97 98wt %的磷酸氫二鈉；優選包含約2. 8wt %的磷酸二氫鈉；和約97. 2wt %的磷酸氫二鈉。本發明的口服組合物(將至少一種游離形式的蛋白活性成分和選定的緩衝體系 4 < pH ^ 8以新型方式結合)可依照兩種變型的方式存在。依照第一種較為傳統的變型，所述組合物以單位形式進行配製。將包括緩衝體系 在內的所有組成成分共同配製。在第一種變型的範疇內存在許多可能性。本發明的組合物 可以特別地以液體形式(直接緩衝至合適的PH)提供，比如溶液、懸浮液和糖漿；該組合物 也可以固體形式提供(當其被消耗時，在液體(通常是水)中發揮其緩衝作用，或是在其被 消耗後在胃中發揮其緩衝作用)，比如片劑(傳統式(吞咽式)、吸入式、舌下含片式、分散 片式、口腔分散片式、泡騰片式)、膠囊、粉末、泡騰粉、顆粒、泡騰顆粒和凍乾粉。這些列表並 未窮盡。本領域技術人員了解如何在以上列舉的一種或其他種單位形式中將所述活性成分 和發揮所需緩衝作用的合適體系進行配製。在泡騰藥物形式的製備過程中，加入提供所預期的泡騰性質的成分是可行的。這 些類型的成分(通過釋放氣體發生反應的試劑(通常是兩種試劑))是本領域技術人員所 熟知的。在第一種變型的範疇內，本發明的組合物優選以固體藥物製劑的形式提供，特別 是以分散片或泡騰片的形式。依照第二種變型，本發明的組合物是包含至少兩種獨立成分的組合物，特別是獨 立包含以下成分的組合物-包含至少一種游離形式的蛋白活性成分的一種成分；以及-包含能產生所需緩衝作用的至少一種體系的另一種成分。這兩種獨立的成分用於聯合給藥或部分聯合給藥，該給藥方式自然使得在活性成 分通過消化道的過程中發揮緩衝作用(首先在胃部發揮作用)。本發明的組合物(依照上述第一種或第二種變型)包含所述至少一種游離形式 的蛋白活性成分(或所述至少一種游離形式的蛋白活性成分和至少一種其他的活性成分) 以及與之聯合的緩衝體系，該組合物通常是置於一種藥學上可接受的賦形劑中(如必要的 話，可加入能使其泡騰的成分)，該組合物自然可包含傳統藥物組合物中存在的其他成分， 比如甜味劑、香料和/或加工助劑(潤滑劑等)。液體組合物可以只包含所述的至少一種蛋 白活性成分(或所述至少一種游離形式的蛋白活性成分和至少一種其他活性成分)和合適 的緩衝體系。除這兩種組分以外，液體組合物通常還含有藥物製劑中常規使用的製劑成分 (如上述所列的成分)。除所述至少一種蛋白活性成分(或除所述至少一種游離形式的蛋 白活性成分和至少一種其他活性成分以外)和緩衝體系外，固體組合物通常還包括固態賦 形劑(基料，任選加入能使其泡騰的成分)以及多種添加劑(如上述所列的成分)。如上所述，以單位形式或非單位形式製備本發明的組合物構成了本發明的第二個 目的。所述製備是一種藥物組合物的製備，該藥物組合物已進行緩衝或與一種緩衝液結 合。從特徵上講，它包括將至少一種游離形式的蛋白活性成分與能夠緩衝所述組合物的體 系(緩衝體系)進行(簡單)配製；若所述組合物為液體形式(特別是在胃環境和腸環境
8中)，該體系(緩衝體系)能夠將PH值緩衝至大於4而小於等於8 ；若所述組合物為固體形 式，該體系(緩衝體系)能夠在所述固體形式被置於液體介質中後發揮將PH值緩衝至大於 4而小於等於8的緩衝作用，特別是在水性介質中(特別是在胃環境和腸環境中)。在傳統 意義(蓋倫派醫學)上，術語「配製」應被認為是單位組合物的製備；而在更廣泛的意義上 (配製=包裝)，應被認為是含有多種獨立組分的組合物的製備。通常情況下，本發明組合物的製備過程中還可包含其他成分。本領域技術人員了解本發明的重要性，該重要性已被下文所示的實施例和測試結 果證明。緩衝體系的「雙陽性效應」-胃部的防護以及胰腺分泌的抑制-十分有效。這種雙 重效應及其有效性確實令人震驚。根據本發明的另一方面，它提供了緩衝體系的一種新應用，從而也涉及上述緩衝 體系的利用，特別是從上述體系中所選取的體系，即對以游離形式存在的至少一種蛋白活 性成分在通過胃腸道的過程中提供保護作用。換句話說，本發明提供了針對消化酶(在通 過胃腸道的過程中)對蛋白活性成分進行保護的新方法。所述方法本質上包括將所述游離 形式的活性成分和上述緩衝體系(特別是從上述體系中所選取的體系)以單位形式或非單 位形式進行配製。最後，本發明可以看作包括將至少一種蛋白活性成分通過口服進行給藥的治療方 法，和/或看作將至少一種蛋白活性成分口服給藥的方法。從特徵上講，在所述方法的範疇 內，將所述至少一種活性成分在上述緩衝體系存在的情況下以游離形式進行給藥(配製成 固體或液體組合物，單位形式或非單位形式)，該緩衝體系能夠將PH值緩衝至上述範圍內， 4 < pH彡8 (液體形式的情況下)，或能夠在組合物被置於液體介質中時將pH值緩衝至上述 範圍內(固體形式的情況下)。目前已知的相關治療是針對以下疾病或紊亂糖尿病(關於 胰島素的給藥)、生長抑制症(關於促生長素的給藥)、骨質疏鬆症(關於降鈣素的給藥)、 前列腺癌(關於LHRH的給藥)等等。
具體實施例方式下面，將僅出於示例性目的，通過對本發明的兩種經過緩衝的胰島素藥片的配方 進行說明，從而闡明本發明，本發明的巨大優勢將通過以下使用胰島素體外進行的理化測 試和體內進行的藥理測試的比較結果來展示。I 配方本發明的兩種藥片是根據一種本身已知的方法(傳統配製方法)從以下成分製備 的，所用量已標註
_分散片A;和 -泡騰片B。 藥片A:
人胰島素 氨丁三醇(TRIS) 磷酸鈣(二鈣) 微晶纖維素 甘露醇
3. 5mg (100U) IOOmg 250mg 250mg 250mg
硬脂酸鎂 10mg
矽膠 lmg
交聚維酮 50mg
苯甲酸鈉 30mg 葒左旦
人胰島素 3．5mg(100U)
無水檸檬酸一鈉 l 142．7mg
無水碳酸氫鈉 2076mg
苯甲酸鈉 152．60mg II堡壘[塑0這
進行體外實驗以證實胃蛋白酶在酸性介質中的代謝作用、胰蛋白酶在鹼性介質中的代謝作用以及一種和其他該類消化酶在依照本發明的緩沖介質中的失活。
在以下不同測試中，採用液相色譜法來分析胰島素水平。
測試l』
人胰島素溶液(100U)
+o．1 N Hel(50m1)pH l
+37℃下攪拌lh、2h、3h
在pH為l的酸性介質中，在沒有胃蛋白酶的情況下，胰島素可在37~C下穩定存在多於3小時。
塑0這2
人胰島素溶液(100U)
+o．1 N Hel(50m1)pH l
+胃蛋白酶(160mg)
+37℃下攪拌lh[Oloo]時間胰島素含量時間0 IhOU OU在PH為1的條件下，在胃中的酶(胃蛋白酶)存在的情況下，胰島素立即降解。測試1(本發明)人胰島素溶液(100U)+0. 1 N HCl (50ml) pH 1+ 胃蛋白酶(160mg)+磷酸鹽緩衝液pH 6. 8 (50ml)+37°C 下攪拌 lh、2h、3h 在pH值緩衝至6. 8的介質中，胃蛋白酶不再有活性，胰島素可在37°C下穩定存在 多於3小時。測試3'人胰島素溶液(100U)+0. 1 N HCl+磷酸鹽緩衝液pH 8.5+37°C下攪拌 lh、2h、3h 該測試驗證了該緩衝液的有效性，並確認了在沒有酶的情況下，胰島素在鹼性介 質中是穩定的。 人胰島素溶液(100U)+磷酸鹽緩衝液pH 6 (測試2a)、pH 6. 5 (測試2b)、pH 6. 8 (測試2c)+胰蛋白酶750U
+37°C 下攪拌 lh、2h 在緩衝至所示pH值的介質中，胰蛋白酶的代謝作用很大程度上被削弱。泖丨試4'人胰島素溶液(100U)+磷酸鹽緩衝液pH 8. 5+胰蛋白酶750U+37°C 下攪拌 lh、2h 在pH為8. 5的條件下，在腸中的酶(胰蛋白酶)存在的情況下，胰島素強烈降解。對這些結果(鹼性pH條件下)的分析表明，pH越偏鹼性，胰蛋白酶的代謝作用越強。2小時後，即便在胰蛋白酶存在的情況下，胰島素含量仍高達72%，因此，最佳的 PH值似乎是6. 5 (接近中性pH值)。III體內測試在通過給予鏈脲黴素誘導的糖尿病(高血糖)的大鼠體內，研究了兩類泡騰片 (含有本發明的緩衝體系的藥片B(如上所述)以及不含本發明的緩衝體系的對照泡騰片 (沒有緩衝液的藥片B))的降血糖活性。鏈脲黴素是一種化學上和亞硝基脲相關的抗生素，具有通過破壞胰腺的胰島而引 發糖尿病的性質。本領域技術人員熟知該測試。其操作方法總結如下。在雄性Wistar大鼠(平均重量200g)中通過腹腔途徑以70mg/kg的劑量給予鏈 脲黴素，72小時後可引發動物嚴重的高血糖，並發多食症、多飲症和多尿症。動物被分為三批，每批八隻。第1批正常動物，非高血糖，用食管探針通過口服途徑接受包含於藥片中的30單 位胰島素，該藥片的PH值被緩衝至6. 8 (泡騰片B (如上所述))，給藥量10ml/kg。第2批糖尿病動物，用食管探針通過口服途徑接受包含於藥片中的30單位胰島 素，該藥片沒有進行緩衝(沒有緩衝液的泡騰片B)，給藥量10ml/kg。第3批糖尿病動物，用食管探針通過口服途徑接受包含於藥片中的30單位胰島素，該藥片的PH值被緩衝至6. 8 (泡騰片B (如上所述))，給藥量10ml/kg。每15分鐘從動物尾部取血樣，持續3小時，用Abbott血糖儀對血糖進行評價。結果如下表所示。該結果以克葡萄糖/升和毫克當量(表1)以及血糖降低的百 分比表示(表2)。
數)
澤低的百分比作為時間
- - -曲線表示第2批的結果，- -A-曲線表示第3批的結果。結果分析表明-在正常(非高血糖)動物(第1批)中，給予經過緩衝的胰島素使得45分鐘後 血糖輕微下降，在第75分鐘時下降達到最大，在第150分鐘後血糖水平恢復到正常值。這 些胰腺完整的動物通過分泌增血糖的胰高血糖素進行補償。_在糖尿病動物(第2批)中，給予未經緩衝的胰島素使得血糖非常輕微且不顯著 地下降。在整個實驗過程中，本組動物保持非常高的血糖水平。-在糖尿病動物(第3批)中，給予經過緩衝的胰島素使得45分鐘後血糖極顯著 地下降，在第105分鐘時下降達到最大，之後可觀察到血糖遞增。由於糖尿病的嚴重程度， 儘管本組動物血糖並未恢復到正常水平，但依然得到很大的改善。上述結果表明，所採用的緩衝體系使得維持口服給予的胰島素的降血糖活性成為 可能(該結果與體外獲得的結果完全一致)，並且證實了胰島素優良的生物利用度。體外和體內實驗的結果都證明了該緩衝體系在維持胰島素活性方面的有效性-體外-在未進行緩衝的酸性介質中，胰島素被胃蛋白酶代謝(測試2')。在PH值被緩 衝至6. 8的介質中，胃蛋白酶不再具有活性，因而3小時後可檢測到100%的胰島素(測試 1)，-在鹼性介質中，胰島素被胰蛋白酶代謝(測試4')。在pH值被緩衝至6、6.5和 6. 8的介質中，所述胰蛋白酶的活性被抑制，或多或少降低了活性。-體內_未經緩衝的製劑幾乎沒有任何活性。相反，經過緩衝的製劑表現出強的降血糖活 性。所有體內和體外測試中採用的均是人胰島素。所得結果顯然適用於所有胰島素類 似物。鑑於以上結果，本發明的重要性十分明顯。這種重要性已通過對人進行的初步測 試得到驗證。
權利要求
一種液體或固體形式的組合物，其包含至少一種游離形式的蛋白活性成分和緩衝體系；若所述組合物為液體形式，所述緩衝體系能夠將pH值緩衝至大於4而小於等於8；若所述組合物為固體形式，所述緩衝體系能夠在所述固體形式被置於液體介質中後發揮將pH值緩衝至大於4而小於等於8的緩衝作用；所述組合物作為用於通過口服途徑給予所述的至少一種蛋白活性成分的藥物使用。
2.一種液體或固體形式的、用於通過口服途徑給藥的藥物組合物，其包含至少一種蛋 白活性成分，其特徵在於，所述藥物組合物包含游離形式的所述的至少一種蛋白活性成分 和緩衝體系；若所述藥物組合物為液體形式，所述緩衝體系能夠將PH值緩衝至大於4而小 於等於8 ；若所述藥物組合物為固體形式，所述緩衝體系能夠在所述固體形式被置於液體 介質中後發揮將PH值緩衝至大於4而小於等於8的緩衝作用。
3.如權利要求1或2所述的組合物，通過配製所述的至少一種游離形式的蛋白活性成 分和能夠對其進行緩衝的體系而得到；若所述組合物為液體形式，所述緩衝體系能夠將PH 值緩衝至大於4而小於等於8 ；若所述組合物為固體形式，所述緩衝體系能夠在所述固體形 式被置於液體介質中後發揮將PH值緩衝至大於4而小於等於8的緩衝作用。
4.如權利要求1至3中任一項所述的組合物，其特徵在於，緩衝pH值在4.5到7. 5之 間，特別優選在5到7之間。
5.如權利要求1至4中任一項所述的組合物，其特徵在於，所述的至少一種蛋白活性成 分選自-胰島素及其類似物和衍生物；-促生長素及其衍生物；-降鈣素；和-黃體生成素釋放激素類似物。
6.如權利要求1至5中任一項所述的組合物，其特徵在於，所述的至少一種蛋白活性成 分選自胰島素及其類似物和衍生物。
7.如權利要求1至6中任一項所述的組合物，其特徵在於，所述的發揮緩衝作用的體系 是選自下述物質的緩衝液磷酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、 咪唑、四丁基銨、三羥甲基氨基甲烷、tris-甘氨酸、巴比妥、tris-EDTA BSA、硫酸銅和兩性 離子緩衝液。
8.如權利要求1至7中任一項所述的組合物，其特徵在於，所述組合物以單位形式進行 配製。
9.如權利要求1至8中任一項所述的組合物，其特徵在於，作為液體形式，所述組合物 為溶液、懸浮液或糖漿的形式；或者作為固體形式，所述組合物為片劑、膠囊、粉末、泡騰粉、 顆粒、泡騰顆粒或凍乾粉的形式，其中片劑特別是分散片、口腔分散片或泡騰片。
10.如權利要求1至9中任一項所述的組合物，其特徵在於，所述組合物為固體藥物制 劑的形式，特別是分散片或泡騰片的形式。
11.如權利要求1至7中任一項所述的組合物，其特徵在於，所述發揮緩衝作用的體系 是與所述至少一種蛋白活性成分獨立配製的。
12.—種製備如權利要求1至11中任一項所述的組合物的方法，其特徵在於，所述方法 包括將所述的至少一種游離形式的蛋白活性成分與能夠緩衝所述組合物的體系進行配製；若所述組合物為液體形式，所述緩衝體系能夠將PH值緩衝至大於4而小於等於8 ；若所述 組合物為固體形式，所述緩衝體系能夠在所述固體形式被置於液體介質中後發揮將PH值 緩衝至大於4而小於等於8的緩衝作用。
全文摘要
本發明涉及一種藥物組合物，其包含至少一種防消化酶消化的蛋白活性成分。所述藥物組合物包含游離形式的所述的至少一種蛋白活性成分和緩衝體系；若所述藥物組合物為液體形式，所述緩衝體系能夠將pH值緩衝至大於4而小於等於8；若所述藥物組合物為固體形式，所述緩衝體系能夠在所述固體形式被置於液體介質中後發揮將pH值緩衝至大於4而小於等於8的緩衝作用。
文檔編號A61K38/00GK101917967SQ200880125189
公開日2010年12月15日 申請日期2008年12月18日 優先權日2007年12月19日
發明者法裡德·本尼斯, 簡-雅克斯·塞拉諾 申請人:法裡德·本尼斯