牡荊子總黃酮提取物及其製備方法和醫藥用途的製作方法

2023-06-10 11:12:41 1

專利名稱：牡荊子總黃酮提取物及其製備方法和醫藥用途的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫藥領域，具體涉及一種牡荊子總黃酮提取物及其製備方法和醫藥用途，更具體是牡荊子總黃酮提取物在製備預防和治療哮喘病、慢性阻塞性肺病、慢性支氣管炎或感冒咳嗽藥物中的應用。
背景技術：
支氣管哮喘是世界範圍內最為常見的慢性呼吸道疾病。目前，全球哮喘患者約3億人，中國哮喘患者約3000萬。近年來，因其患病率和死亡率均呈上升趨勢，已成為嚴重的公共衛生問題而受到世界各國的極大關注。因此需要提供有效地治療哮喘病的藥物和方法。目前對哮喘病的治療還沒有特效藥。臨床的治療主要以應用支氣管擴張劑為主，有β2_腎上腺素能受體拮抗劑類、α-腎上腺素能受體拮抗劑類、氨茶鹼類、膽鹼能受體拮抗劑類、鈣離子拮抗劑類、鉀離子通道激動劑、糖皮質激素(ICS)、細胞膜穩定劑、抗組胺藥物、白三烯受體拮抗劑、血小板活化因子拮抗劑、特異性免疫治療劑、非特異性免疫治療劑等。1995年出臺了「全球哮喘防治創議」進一步推動和普及了糖皮質激素的應用。這些治療方法對緩解哮喘症狀，改善哮喘病人的生活質量有一定的效果，但沒有使哮喘病的發病率和死亡率有所降低，反而呈逐年增加的趨勢。治療哮喘病需要更有效的和更安全的藥物。慢性阻塞性肺病的發病機制尚未完全明了，目前普遍認為以氣道、肺實質和肺血管的慢性炎症為特徵。臨床採 用長期吸入糖皮質激素抗炎治療和吸入β2_腎上腺素能受體激動劑、膽鹼能受體拮抗劑等支氣管擴張劑進行治療。但這些藥物的治療效果並不是十分理想，尋找更有效的治療慢性阻塞性肺病的藥物是非常必要的。牡荊子為馬鞭草科多年生植物牡荊Vitex negundo L.var.cannabifolia(sieb.Et Zucc)Hand.Mazz的帶宿萼的果實，亦叫小荊實，《中藥大辭典》、《本草綱目》均記載「牡荊子味苦、溫，無毒，主除骨間寒熱、通利胃氣、止咳逆、下氣。」具有祛痰止咳、平喘理氣和止痛之功效。文獻記載，牡荊屬植物主要含有黃酮類、二萜類、環烯醚萜類、三萜類等多種化學成分。目前對牡荊子總黃酮提取物對研究較少，文獻《牡荊子乙醇提取物抗氧化活性的研究》(肖國珍等，廣東工業大學學報，2006年9月，第23卷第3期，31-35)公開了一種牡荊子乙醇提取物的製備方法，牡荊子經75°C烘乾3h，粉碎過40目篩，秤取IOOg置錐形瓶中，加入250ml乙醇，在恆溫水浴鍋中60V 65°C提取60h，並隨時攪拌，濾出浸取液減壓蒸餾濃縮，真空乾燥，得膏狀提取物，浸膏中總黃酮含量為11.52%。該提取物中黃酮含量較低，成分複雜，且對其活性研究僅停留在抗氧化活性層面，臨床藥理意義不大，尚無明確的藥理活性報導。

發明內容
本發明的目的是提供一種牡荊子總黃酮提取物及其製備方法和在製備預防和治療哮喘病、慢性阻塞性肺病、慢性支氣管炎或感冒咳嗽藥物中的應用。本發明所提供的牡荊子總黃酮提取物是從中藥牡荊子中提取的，所述牡荊子是馬鞭草科植物牡荊的果實。本發明具體技術方案如下:
一種牡荊子總黃酮提取物的製備方法，其特徵在於包括如下步驟:
(1)取牡荊子，用水或醇或者醇水溶液作為提取溶劑回流提取2次，合併提取液，真空濃縮；
(2)將步驟(I)的濃縮液用聚醯胺樹脂柱層析，先用水洗去雜質再用醇或者醇水溶液進行洗脫，收集洗脫液，得到牡荊子總黃酮提取物。上述製備方法，步驟(I)所述醇優選甲醇、乙醇或者異丙醇，所述醇水溶液優選甲醇、乙醇或者異丙醇的水溶液，進一步優選醇水溶液中醇的體積百分比為70%。上述製備方法，步驟(I)中也可用其它溶劑如丙酮等進行提取製備。上述製備方法，步驟(I)中優選將牡荊子粉碎後過10目篩再進行提取。上述製備方法，步驟(I)中優選使用70%乙醇回流提取2小時，共提取兩次，優選將提取液真空濃縮至無醇味。上述製備方法，步驟(2)中所述聚醯胺樹脂選優選60-100目。上述製備方法，步驟(2)所述醇優選甲醇、乙醇或者異丙醇，所述醇水溶液優選甲醇、乙醇或者異丙醇的水 溶液，進一步優選醇水溶液中醇的體積百分比為70%。上述製備方法，步驟(2)的優選方法:以2倍柱體積每小時的上樣流速加樣品液進行動態吸附。先用4倍柱體積的蒸餾水洗脫除去雜質，棄去水洗脫液。再以5倍柱體積的70%乙醇溶液進行洗脫，收集乙醇洗脫液，真空濃縮至幹，得到牡荊子總黃酮提取物中總黃酮含量為83.72%。本發明還提供了一種牡荊子總黃酮提取物，採用上述製備方法製備得到，其中總黃酮含量為83.72%。本發明還提供了上述牡荊子總黃酮提取物在製備預防和治療哮喘病、慢性阻塞性肺病、慢性支氣管炎或感冒咳嗽藥物中的應用。本發明通過實驗證實，本發明的牡荊子總黃酮提取物具有治療哮喘、治療慢性阻塞性肺病(C0PD)、治療慢性支氣管炎、抗過敏藥理活性，具有毒性小，長期使用療效較佳等特點。本發明提供的牡荊子總黃酮，可以與一種或多種藥學上可接受的載體成分混合，含牡荊子總黃酮的藥物組合物中進一步含有β2_腎上腺素能受體激動劑。本發明所述的應用，牡荊子總黃酮提取物可以以單一藥物的形式被給藥或可以與其它藥物聯合給藥。本發明的牡荊子總黃酮提取物可以單獨使用或以藥物組合物的形式使用。藥物組合物包括作為活性成分的本發明的化合物或其可藥用鹽及可藥用載體。較佳的，本發明的藥物組合物有0.1-99.9%重量百分比的作為活性成分的本發明的牡荊子總黃酮提取物。「可藥用載體」不會破壞本發明的化合物或其可藥用鹽的藥學活性，同時其有效用量，即能夠起藥物載體作用時的用量對人體無毒。「可藥用載體」包括但不限於:離子交換材料、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、自乳化藥物傳遞系統(SEDDS^n d-維生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯、吐溫或其他類似聚合介質等藥物製劑用的表面活性劑、血清蛋白如人血清白蛋白、緩衝物質如磷酸鹽、氨基乙酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸部分甘油酯混合、水、鹽、電解質如硫酸鹽精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、矽膠、矽酸鎂等。聚乙烯吡咯酮、纖維素物質、聚乙烯醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、乙烯-聚氧乙烯-嵌段聚合物和羊毛脂、環糊精如α-、β_、Y-環糊精或其經化學修飾的衍生物如2-和3-羥丙基-β -環糊精等羥烷基環糊精或其他可溶性衍生物等均可用於促進本發明的化合物、其藥用鹽或前藥的藥物傳遞。其他可藥用輔料如填充劑(如無水乳糖、澱粉、乳糖珠粒和葡萄糖)、粘合劑(如微晶纖維素)、崩解劑(如交聯羧甲基澱粉鈉、交聯羧甲基纖維素鈉、低取代羥丙基纖維素和交聯PVP)、潤滑劑(如硬脂酸鎂)、吸收促進劑、香味劑、甜味劑、稀釋劑、賦形劑、潤溼劑、溶劑、增溶劑和著色劑等也可加入本發明的藥物組合物中。上述本發明的牡荊子總黃酮提取物以及藥物組合物可通過腸道或者非腸道途徑給藥。非腸道給藥製劑包括注射劑、霜劑、軟膏劑、貼劑、噴霧劑等。給藥途徑包括皮下、皮內、動脈內、靜脈內、肌內、關節內、滑液內、胸骨內、鞘內、病灶內、顱內注射或輸注，或者，口月艮、局部、直腸、經鼻、經頰、陰道、舌下、皮內、黏膜、氣管、尿道給藥，或者通過吸入氣霧或植入蓄積或者針刺方式給藥。上述本發明的牡荊子總黃酮提取物以及藥物組合物的治療有效量為0.5mg/kg -100mg/kg之間，可用於相關疾病的單一用藥或聯合用藥治療，為本領域技術人員能夠理解的範圍。


圖1為本發明所述牡荊子總黃酮提取物對離體豚鼠迴腸試驗的結果圖
具體實施例方式
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以下通過實施例說明本發明的具體步驟，但不受實施例限制。在本發明中所使用的術語，除非另有說明，一般具有本領域普通技術人員通常理解的含義。下面結合具體實施例並參照數據進一步詳細描述本發明。應理解，這些實施例只是為了舉例說明本發明，而非以任何方式限制本發明的範圍。在以下實施例中，未詳細描述的各種過程和方法是本領域中公知的常規方法。實施例1牡荊子總黃酮提取物的製備
取牡荊子10kg，粉碎後過10目篩，用70%乙醇60L回流提取2小時，濾取提取液，藥渣再加70%乙醇45L回流提取2小時，濾取提取液，合併提取液，真空濃縮至無醇味，加水2L攪拌溶解製得樣品溶液。採用常規方法處理聚醯胺樹脂60-100目(購於台州路橋四甲生化塑料廠)，取處理好的聚醯胺樹脂2.5Kg裝柱(200mmX 1000mm)，以2倍柱體積每小時的上樣流速加樣品液進行動態吸附，共加樣品溶液1L。先用4倍柱體積的蒸餾水洗脫除去雜質，棄去水洗脫液。再以5倍柱體積的70%乙醇進行洗脫，收集乙醇洗脫液，真空濃縮至幹，得到牡荊子總黃酮提取物0.24kg。經分光光度法測定總黃酮含量為83.72%。
實施例2氨水引咳試驗
小鼠40隻，隨機分為對照組、牡荊子總黃酮提取物高劑量組(400mg/kg)、牡荊子總黃酮提取物中劑量組(200mg/kg )、牡荊子總黃酮提取物低劑量組(100mg/kg )，每組IO只。灌胃給藥後Ih開始實驗。每次取I只小鼠，放入容積為IL的玻璃罩內，內放一濾紙片(2X 2cm2)，將0.3ml的氨水滴到濾紙片上，使小鼠在玻璃罩內刺激30s，取出後立即觀察並記錄小鼠2min內咳嗽次數和咳嗽的潛伏期，小鼠咳嗽的表現為腹肌收縮張口。灌胃3h後，重複實驗I次，觀察並記錄。表I牡荊子總黃酮提取物對氨水引起的小鼠咳嗽抑制作用
權利要求
1.一種牡荊子總黃酮提取物的製備方法，其特徵在於包括如下步驟: (1)取牡荊子，用水或醇或者醇水溶液作為提取溶劑回流提取2次，合併提取液，真空濃縮； (2)將步驟(I)的濃縮液用聚醯胺樹脂柱層析，先用水洗去雜質再用醇或者醇水溶液進行洗脫，收集洗脫液，得到牡荊子總黃酮提取物。
2.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於步驟(I)所述醇為甲醇、乙醇或者異丙醇。
3.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於步驟(I)所述醇水溶液為甲醇、乙醇或異丙醇的水溶液。
4.如權利要求3所述的製備方法，其特徵在於步驟(I)所述醇水溶液中醇的體積百分比為70%ο
5.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於步驟(2)所述聚醯胺樹脂為60-100目。
6.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於步驟(2)所述醇為甲醇、乙醇或者異丙醇。
7.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於步驟(2)所述醇水溶液為甲醇、乙醇或異丙醇的水溶液。
8.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於步驟(2)所述醇水溶液中醇的體積百分比為70%ο
9.一種牡荊子總黃酮提取物，其特徵在於採用如權利要求1-8所述製備方法製備得到。
10.如權利要求7所述的牡荊子總黃酮提取物在製備預防和治療哮喘病、慢性阻塞性肺病、慢性支氣管炎或感冒咳嗽藥物中的應用。
全文摘要
本發明提供了一種牡荊子總黃酮提取物及其製備方法和醫藥用途，通過步驟(1)取牡荊子，用水或醇或者醇水溶液作為提取溶劑回流提取2次，合併提取液，真空濃縮；(2)將步驟(1)的濃縮液用聚醯胺樹脂柱層析，先用水洗去雜質再用醇或者醇水溶液進行洗脫，收集洗脫液，得到牡荊子總黃酮提取物。本發明還提供了上述牡荊子總黃酮提取物在製備預防和治療哮喘病、慢性阻塞性肺病、慢性支氣管炎或感冒咳嗽藥物中的應用。
文檔編號A61K36/85GK103223058SQ20131016929
公開日2013年7月31日 申請日期2013年5月8日 優先權日2013年5月8日
發明者陳廣通, 宋妍, 楊雪, 葛紅娟, 汪冬庚, 黃金華 申請人:南通大學