精氨酸衍生物的製作方法

2023-06-10 22:48:56 1

專利名稱：精氨酸衍生物的製作方法
技術領域：
本發明涉及新的(S)-N5-[亞氨基(甲氨基)甲基]鳥氨酸的結晶性鹽、含這樣的鹽的藥用組合物及其在醫學方面的用途，更具體地講是治療和預防膿毒性休克(septic shock)特別是與此有關的低血壓的用途。
國際專利申請WO 91/04024(美國專利5028627)描述了NG取代的精氨酸或NG，NG-二取代的精氨酸治療低血壓的用途。具體來講，該專利申請描述了NG-甲基-L-精氨酸(也稱作(S)-N5[亞氨基(甲氨基)甲基]鳥氨酸或L-NMMA)抑制誘發低血壓和膿毒性休克的一氧化氮的產生的用途。一氧化氮是強力血管舒張和細胞毒劑，它通常作為血管緊張的內原性調節劑產生於內皮以及作為宿主防禦機制的要素產生於巨噬細胞。一氧化氮合成增加不當，會導致這些作用的擴大，結果引起持久和顯著的血管舒張，導致各種生命機體的低血壓。此外，細胞中一氧化氮的合成顯著增加會導致細胞毒性和直接的組織損害，特別是對血管內皮的損害。
Kilbourn等人(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，87，3629頁，1990年)報導了L-NMMA的黃安酸鹽與Dowexl(OH-)的反應以及用鹽酸滴定得到的L-NMMA游離鹼至PH7.2。該鹽酸鹽沒被從溶液中分離。
現在我們發現L-NMMA的鹽酸鹽，可以純鹽如結晶的形式獲得，晶體具有顯著的物理優勢如在穩定性方面。製備結晶形式的鹽酸鹽的最初嘗試得到了不結晶的無定形的玻璃狀物。當該無定形玻璃狀物在乙醇存在下放置數月時，出人意料地獲得了該鹽酸鹽的結晶。
因此，本發明提供作為基本上純的鹽如固體形式、更具體地講是結晶形式的(S)-N5[亞氨基(甲氨基)甲基]鳥氨酸的鹽酸鹽，該L-NMMA的鹽酸鹽是無水的且不吸溼。
該鹽的純度在至少70%為佳，至少90%更好，大於95%為最好。
該鹽至少存在三種可區分的同晶型形式(isomorphic form)(A，B和C)，這已由X射線衍射分析和示差掃描量熱法(DSC)鑑定。本發明將包括每個單獨的同晶型形式或兩個或兩個以上同晶型形式的混合物。
吸溼性研究表明形式A在溼度為65%時潮解，而形式B很少吸潮。DSC表明形式A熱力學上更穩定。DSC也用於測定形式A和形式B的熔點，它們分別為219℃和約205℃。
本發明也提供製備結晶性L-NMMA鹽酸鹽的方法，該方法包括L-NMMA與鹽酸反應並析出鹽酸鹽的結晶。L-NMMA與酸的摩爾比在1∶1到1∶5範圍內為佳，最好是約1∶1。該反應宜按下述方法進行於不過高也不過低的溫度例如在10-80℃之間、最好在室溫將L-NMMA溶於鹽酸溶液(優選0.5-5M，2M適當)中。得到的溶液最好蒸發(例如在升溫即在35-60℃之間及減壓條件下)。然後將殘留物用適當的溶劑結晶，例如將殘留物溶解在最少量的熱乙醇(在沸點時為宜)和水中。已發現將晶種投入含L-NMMA的鹽酸鹽的溶液中有助於其結晶，若不放入晶種，結晶過程可能需要數月。
本發明還提供製備L-NMMA鹽酸鹽的方法，該方法包括將L-NMMA的非鹽酸鹽與鹽酸反應以除去原來的成鹽離子。該反應宜通過將L-NMMA的乙酸鹽溶於鹽酸水液中來完成，所述鹽酸水液的濃度在0.5-5M之間，2M為宜。然後將溶液蒸發(例如在升溫即在30-70℃之間、60℃為宜，以及減壓的條件下)。然後將殘留物溶於適當的溶劑如含水乙醇中並冷卻。將L-NMMA的鹽酸鹽的結晶又作為晶种放到該冷卻的溶液中幫助結晶。
儘管L-NMMA的鹽酸鹽可以作為原化學品來服用，但最好將其製成藥用製劑。本發明進一步提供藥用組合物，該藥用組合物含L-NMMA的鹽酸鹽(「活性成分」)連同一種或一種以上藥學上可接受的載體並且可以含一種或一種以上其它的治療成分。載體必須是「可接受的」，其意義在於該載體與該製劑的其它組分相容且對其受者無毒害。
該製劑包括適於口服、腸道外(包括皮下、真皮內、肌內、靜脈內和關節內)、直腸和局部(包括皮膚、頰、舌下和眼內)給藥的製劑，可是大多數適當的途徑可能取決於例如受者的狀況和疾病情況。該製劑宜按單劑量形式提供並可按任何製藥領域內熟知的方法來製備。所有的方法都包括將活性成分加到由一種或一種以上輔助成分構成的載體中這一步驟。一般來講，該製劑通過將活性成分均勻和直接地加到液體載體或磨碎的固體載體或這二者中來製備，然後根據需要，將產品製成所需的製劑形式。
適宜於口服給藥的本發明製劑可製成各含預定量活性成分的獨立單位如膠囊、扁囊劑或片劑;粉劑或顆粒劑;水性液體或非水性液體的溶液或懸浮液;或者水包油型液體乳劑或油包水型液體乳劑。活性成分也可以是丸劑、糖劑或糊劑。
通過壓制或模壓可以製得片劑，可使用一種或一種以上輔助成分。壓製片可以通過下述方法製備將處於自由流動形態如粉末或顆粒的活性成分，可與粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑或分散劑混合，在適當的機器中壓制。模壓片可以通過將用惰性液體稀釋劑潤溼的粉末狀化合物置適當的機器中模壓製得。片劑也可以被包衣或修整(scored)而且可以製成使其中的活性成分緩釋或控釋的片劑。
腸道外給藥的製劑包括水性和非水性滅菌注射溶液，該溶液可以含抗氧劑、緩衝劑、制菌劑和使該製劑成為與受者血液等滲的溶質;包括水性和非水性滅菌懸浮液，該懸浮液可以包含助懸劑和增稠劑。該製劑可以製成單位劑量或多劑包裝，例如密封的安瓿和小瓶，而且可以凍幹(冷凍乾燥的)狀態貯存，僅需要在使用前立即加入滅菌液體載體如鹽水、注射用水，或可以注射液形式貯存。臨時的注射液和懸浮液可由前述的這類滅菌粉劑、顆粒劑和片劑製得。
用於直腸給藥的製劑可以是具通常的載體如可可脂或聚乙二醇的栓劑。
經口腔局部給藥如頰或舌下給藥的製劑包括活性成分含在矯味的基質如蔗糖和阿拉伯膠或西黃著膠中的錠劑，和活性成分含在如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠的基質中的軟錠劑。
該鹽最好以水溶液的形式服用，該水溶液被緩衝至其固有的pKa。
優選的單位劑量的製劑是含有效劑量活性成分的製劑，如下文中所列的製劑;或者是含適當份額活性成分的製劑。
應當明白，除以上具體所述的組分外，考慮到所述的製劑類型，本發明製劑可以包括其它的本領域常規試劑，例如適宜於口服給藥的製劑可以包含矯味劑。
本發明化合物可經口服或注射使用，劑量為每天1-100mg/kg，最好是每天3-50mg/kg。上述每天3mg/kg的劑量最好可以按在長時間內給予一連串的較小劑量即通過用數小時輸液給藥。成人的劑量範圍一般在70mg-7g/日，最好是在200mg-3.5g/日。按獨立的單位提供的片劑或其它形式製劑中的本發明化合物的含量可以是能產生效果的劑量或者是倍量為宜，例如每單位含70-500mg，通常大約在100-300mg之間。
本發明化合物最適宜於口服或注射(靜脈內或皮下)給藥且注射給藥最好。給病人服用的化合物的準確劑量將由護理醫師來決定。但所用的劑量將取決於多種因素，包括病人的年令和性別，待治療的確切的疾病及其嚴重程度。經藥途徑也可以隨疾病情況及其嚴重程度而改變。
上文所述的NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽可用來治療和/或預防膿毒性休克。因此，本發明進一步提供NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽在製造治療和/或預防膿毒性休克的藥物方面的用途。本發明還提供治療或預防膿毒性休克的方法，它包括給病人服用治療有效量的NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽。
現僅用實施例的方式來說明本發明。
實施例1(S)-N5-[亞氨基(甲氨基)甲基]鳥氨酸鹽酸鹽(L-NMMA鹽酸鹽)的製備將鳥氨酸鹽酸鹽(16.86g，100mmol)、碘化N，S-二甲基硫脲(N，S-dimethylthiouronium iodide)(34.8g，150mmol)和2M氫氧化鈉水溶液(100ml)的混合物於100℃攪拌5小時。然後將該溶液冷卻，用2M鹽酸水溶液調至PH3，並加到Dowex 50W-X8(H+)樹脂柱(溼柱床體積為200ml)中。該柱用水洗滌至洗脫液呈中性，然後用0.5M氫氧化銨水溶液洗脫，約15ml為一流份，矽膠薄層層析監測，用水合茚三酮顯色。將第26-45流份合併，於45℃減壓蒸發，得無色樹脂狀物(9.5g)。將其溶於2M鹽酸水溶液中並將得到的溶液於50℃減壓蒸發。用熱乙醇(108ml)處理該無定形的殘留物並將該混合物於沸點劇烈攪拌，同時滴加水(4ml)。殘留物逐漸溶解並當投入少許該鹽酸鹽的晶體時開始結晶，將該混合物冷卻，然後將其於4℃靜置2小時以使結晶完全。濾出產物，用乙醇洗滌並置真空乾燥器中乾燥，得純的L-NMMA鹽酸鹽(9.6g)，為無水無色結晶性固體，薄層層析檢查為單一物質，高壓液相層析和1Hnmr以及質譜分析結果與擬定的結構一致。
實施例2由乙酸鹽-水合物製備L-NMMA鹽酸鹽。
將L-NMMA乙酸鹽-水合物(186g)溶於2M鹽酸水溶液(350ml)中並將該溶液於60℃減壓蒸發。然後將殘留物溶於水(約150ml)中並減壓蒸發;然後將再溶解和蒸發過程重複2次。然後將殘留物溶於溫熱的水(25ml)中並加入乙醇(25ml)以助流動性。將該仍溫熱的溶液攪拌，用乙醇(1200ml)處理，投入少許結晶作晶種，並於室溫繼續攪拌5小時。將該混合物於4℃放置過夜，濾出結晶性固體，用乙醇洗滌並置真空乾燥器中乾燥，得純的L-NMMA鹽酸鹽(108g)，其在所有方面均與上述物質一致。
實施例3將按實施例1但沒投入晶種製得的非晶形鹽酸鹽的樣品經在乙醇存在下於4℃靜置5個月，製得結晶，該物質被用作實施例1和實施例2的製備中的「晶種」。
L-NMMA鹽酸鹽的晶種樣品可索自伯明罕大學化學院，伯明罕B152TT。
權利要求
1.基本純的NG-一甲基-L-精氨酸鹽酸鹽。
2.固體形式的NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽。
3.結晶形式的NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽。
4.按照權利要求3的同晶型形式的NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽，它在約219℃熔化。
5.按照權利要求3的同晶型形式的NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽，它在約205℃熔化。
6.結晶性NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽的製備方法，它包括NG-甲基-L-精氨酸與鹽酸反應並結晶出該鹽酸鹽。
7.按照權利要求6的方法，其中NG-甲基-L-精氨酸與鹽酸的比率為1∶1到1∶5。
8.NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽的製備方法，它包括NG-甲基-L-精氨酸的非鹽酸鹽與鹽酸反應除去原來的成鹽離子，然後結晶出該鹽酸鹽。
9.按照權利要求6、7或8的方法，其中結晶過程助以放入一個或一個以上NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽的結晶晶種。
10.藥用組合物，它含有NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽連同一種或一種以上藥學上可接受的載體並且可以含一種或一種以上其它的治療成分。
11.按照權利要求10的含有按照權利要求1-5的NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽的藥用製劑，該鹽溶於水中並被緩衝至其固有的pKa。
12.NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽在生產治療或預防膿毒性休克的藥物方面的用途。
13.治療或預防膿毒性休克的方法，它包括投以治療有效量的NG-甲基-L-精氨酸鹽酸鹽藥物。
全文摘要
本文描述了(S)-N5-[亞氨基(甲氨基)甲基]鳥氨酸鹽酸鹽、含該鹽的藥用組合物、其在醫學方面的用途以及其製備。
文檔編號A61P9/00GK1087624SQ9310937
公開日1994年6月8日 申請日期1993年7月23日 優先權日1992年7月24日
發明者H·F·霍德森 申請人:惠爾康基金會集團公司