肝靶向分子的製作方法

2023-05-29 17:23:06

專利名稱：：肝靶向分子的製作方法肝靶向分子本發明涉及可以靶向肝的分子。這些肝靶向分子(例如融合物和綴合物)包含蛋白質、抗體或抗體片段例如免疫球蛋白(抗體)單個可變結構域(dAbs),以及希望遞送至肝的一種或多種另外的分子，例如幹擾素。本發明進一步涉及包含此類肝靶向分子的用途、制齊U、組合物和裝置。本發明還涉及結合肝細胞的免疫球蛋白(抗體)單個可變結構域。
背景技術：
：肝疾病是描述包括(但不限於)下述的許多疾病狀態的術語1)肝炎，在許多情況下由病毒感染引起的肝的炎症；2)肝硬化，其涉及一般在病毒感染或暴露於肝毒性試劑例如酒精後在肝中的組織重塑後的纖維狀沉積；和3)肝癌，包括原發性肝細胞癌(HCC)和腫瘤在肝外部位轉移後的繼發性腫瘤形成。由C型肝炎病毒(HCV)的慢性感染是肝硬化和HCC的主因之一。HCV相關疾病的全球負荷高，在許多國家中具有地方性感染。根據WHO數字，估計170，000，000人(3%全球人口)被感染，其中每年估計3-4，000,000新病例(例如由Soriano,Peters和Zeuzem.ClinicalInfectiousDiseases.2009;48:313-20綜述的)。約70%的受感染個體發展慢性感染，其中20%的這個群體在20年時間段內進展至肝硬化。在HCV感染後的肝臟肝硬化也與發展肝癌的增加危險相關，並且估計每年3-4%具有HCV誘導的肝硬化的患者持續發展HCC(例如由Webster等人LancetInfectDis2009;9:108-17綜述的)。在HCV治療中的目前標準由聚乙二醇化的幹擾素-a(PEG-IFN-a)和核苷類似物病毒唑(RBV)的組合方案組成。抗HCV治療的主要目標是產生持續病毒應答(SVR)，其目前定義為在治療結束後24周，使用高度靈敏的PCR檢測法，在外周血中未能檢測到HCVRNA。SVR在使用目前標準治療由HCV基因型2和3感染的大比例患者中是目前可達到的，然而，達到SVR的由基因型I和4感染的患者比例一般低得多(例如在Deutsch和Hadziyannis.JournalofViralHepatitis2008;15:2-11中綜述的)，部分是由於因為與PEG-IFN-a治療相關的副作用的順應問題。關於IFN治療的替代物目前得到開發且一般涉及用小分子化合物抑制病毒革巴(蛋白酶、聚合酶和解旋酶蛋白質)。然而，關於病毒抗性和副作用的問題在許多情況下已妨礙這些化合物的開發和普遍使用。另一方面，IFN治療與病毒抗性無關，因此具有更佳功效和耐受性概況的新的基於IFN的治療學可以代表對HCV治療的目前標準的顯著改善的機會。IFN相關副作用被認為部分是由於在全身暴露於IFN-a後IFN應答性基因的誘導(例如在Myint等人MetabBrainDis2009；24:55-(68)中綜述的)。因為HCV感染的主要部位是在肝中(具體地肝細胞)，因此避免外周血細胞暴露於IFN可以是潛在有利的，從而潛在減少與IFN治療相關的副作用。特異性靶向肝的IFN-a也可以顯示出改善的抗病毒功效，作為將治療分子導向HCV感染部位的副產物(biproduct)，從而增加在肝細胞處的濃度，這又可以允許用更低總劑量的IFN的治療，使得劑量強化成為可能。在人B型肝炎病毒(HBV)感染的動物模型中，導向肝特異性抗原無唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)的IFN-P在體內展不顯著改善的抗病毒功效(Eto&TakahashiNatureMedicine1999;5:577-581)。無唾液酸糖蛋白受體結合無唾液酸糖蛋白，即從其中已去除唾液酸殘基以暴露一個或多個(一般地)半乳糖殘基的糖蛋白。ASGPR在肝臟細胞上表達，其從循環中去除靶糖蛋白。ASGPR分子是異寡聚的，包含2個不同亞基H1和H2。因此需要提供將分子包括IFN靶向肝以治療和/或預防肝疾病的新治療組合物。靶向分子包括用於HCV治療的IFN的基於抗體的治療因此可以提供開發具有改善的功效和耐受性概況的新治療學的方法，用於在一系列肝疾病的治療中使用。發明概述·本發明提供了用於將分子靶向肝中的肝細胞的組合物和方法。在一個實施方案中，本發明提供了包含單一分子(例如作為單一融合物或綴合物)的肝靶向組合物，所述單一分子包含(a)配體例如抗體或抗體片段(例如結構域抗體(dAb))，其結合肝臟細胞，例如肝臟肝細胞(例如肝細胞上的ASGPR受體)，以及(b)用於遞送至肝的一種或多種治療分子。特別地，本發明提供了包含單一分子(例如融合物或綴合物)的肝靶向組合物，所述單一分子包含結合ASGPR的Hl亞基的配體，例如抗體或抗體片段(例如結構域抗體)。這些肝靶向組合物還可以包含進一步的蛋白質或多肽，例如半衰期延長蛋白質或多肽,例如進一步的dAb，例如結合血清白蛋白或例如聚乙二醇PEG的dAb。這些可以融合或綴合至單一分子，並且可以融合或綴合至配體、或治療分子、或配體和治療分子。延長和/或測量分子的體內半衰期的方法是本領域技術人員已知的，並且在例如W02006/059110和W02008/096158中詳細描述。在一個實施方案中，肝靶向組合物包含其為單個免疫球蛋白可變結構域(結構域抗體(dAb))的抗體片段(a)，其特異性結合肝細胞，例如肝細胞上的ASGPR受體，尤其是其Hl結構域。dAb可以是人Vh或人Vk。dAb還可以結合人和/或小鼠ASGPR受體。本發明的組合物還包括配體例如單個免疫球蛋白可變結構域(dAb)，其特異性結合結合肝細胞，例如肝細胞上的ASGPR受體。例如，由本發明提供的dAb可以是人Vh或人VK。dAb還可以結合人和/或小鼠ASGPR受體和/或來自其他動物的ASGPR受體。在一個實施方案中，結合肝細胞上的ASGPR受體的dAb結合人和/或小鼠ASGPR，如通過Biacore測量的[使用HBS-P緩衝系統(0.OlMHepes,pH7.4,0.15MNaCl,0.05%表面活性劑P20)]，具有在IpM-約IOOnM範圍中的高親和力，例如約IpM-約10nM，或例如約IpM-約InM。在一個實施方案中，如上述的，dAb將以高親和力結合人和小鼠ASGPR。例如，特異性結合肝細胞上的ASGPR受體的由本發明提供的dAb可以是這樣的，其包含與由鑑定為下述的核苷酸序列編碼的胺基酸序列至少80%等同(例如85%、90%、95%或100%等同)的胺基酸序列(抗人ASGPRVHdAbs)D0M26h-l(SeqIDNo:155)；D0M26h-10(SeqIDNo:157);D0M26h_100(SeqIDNo:159);D0M26h_101(SeqIDNo:161)；D0M26h-102(SeqIDNo:163);D0M26h_103(SeqIDNo:165);D0M26h_104(SeqIDNo:167)；D0M26h-105(SeqIDNo:169);D0M26h_106(SeqIDNo:171);D0M26h_107(SeqIDNo:173)；D0M26h-108(SeqIDNo:175);D0M26h_109(SeqIDNo:177);D0M26h_ll(SeqIDNo:179);D0M26h_110(SeqIDNo:181);D0M26h_lll(SeqIDNo:183)；D0M26h-112(SeqIDNo:185);D0M26h_113(SeqIDNo:187);D0M26h_114(SeqIDNo:189)；D0M26h-115(SeqIDNo:191);D0M26h_116(SeqIDNo:193);D0M26h_117(SeqIDNo:195)；D0M26h-118(SeqIDNo:197);D0M26h_119(SeqIDNo:199);D0M26h_12;(SeqIDNo:201)D0M26h-120(SeqIDNo:203);D0M26h_121(SeqIDNo:205);D0M26h_122(SeqIDNo:207);D0M26h_123(SeqIDNo:209);D0M26h_124;(SeqIDNo:211)；D0M26h-125(SeqIDNo:213);D0M26h_126(SeqIDNo:215);D0M26h_127(SeqIDNo:217)；D0M26h-128(SeqIDNo:219);D0M26h_129(SeqIDNo:221);D0M26h_130(SeqIDNo:223)；D0M26h-131(SeqIDNo:225);D0M26h_132(SeqIDNo:227);D0M26h_133(SeqIDNo:229);D0M26h_134(SeqIDNo:231);D0M26h_135(SeqIDNo:233)；D0M26h-136(SeqIDNo:235);D0M26h_137(SeqIDNo:237);D0M26h_138(SeqIDNo:239)；D0M26h-139(SeqIDNo:241);D0M26h_140(SeqIDNo:243);D0M26h_141(SeqIDNo:245)；D0M26h-142(SeqIDNo:247);D0M26h_143(SeqIDNo:249);D0M26h_144(SeqIDNo:251);D0M26h_145(SeqIDNo:253);D0M26h_146(SeqIDNo:255)；D0M26h-147(SeqIDNo:257);D0M26h_148(SeqIDNo:259);D0M26h_149(SeqIDNo:261)；D0M26h-15(SeqIDNo:263);D0M26h_150(SeqIDNo:265);D0M26h_151(SeqIDNo:267)；D0M26h-152(SeqIDNo:269);D0M26h_153(SeqIDNo:271);D0M26h_154(SeqIDNo:273);D0M26h_155(SeqIDNo:275);D0M26h_156(SeqIDNo:277)；D0M26h-157(SeqIDNo:279);D0M26h_158(SeqIDNo:281);D0M26h_159(SeqIDNo:283)；D0M26h-159-l(SeqIDNo:285);D0M26h-159_2(SeqIDNo:287);D0M26h-159_3(SeqIDNo:289);D0M26h-159_4(SeqIDNo:291);D0M26h-159_5(SeqIDNo:293)；D0M26h-160(SeqIDNo:295);D0M26h_168(SeqIDNo:297);D0M26h_169(SeqIDNo:299)；D0M26h-17(SeqIDNo:301);D0M26h_170(SeqIDNo:303);D0M26h_171(SeqIDNo:305)；D0M26h-172(SeqIDNo:307);D0M26h_173(SeqIDNo:309);D0M26h_174(SeqIDNo:311);D0M26h_175(SeqIDNo:313);D0M26h_176(SeqIDNo:315)；D0M26h-177(SeqIDNo:317);D0M26h_178(SeqIDNo:319);D0M26h_179(SeqIDNo:321)；D0M26h-180(SeqIDNo:323);D0M26h_181(SeqIDNo:325);D0M26h_182(SeqIDNo:327)；D0M26h-183(SeqIDNo:329);D0M26h_184(SeqIDNo:331);D0M26h_185(SeqIDNo:333);D0M26h_186(SeqIDNo:335);D0M26h_187(SeqIDNo:337)；D0M26h-188(SeqIDNo:339);D0M26h_189(SeqIDNo:341);D0M26h_19(SeqIDNo:343)；D0M26h-190(SeqIDNo:345);D0M26h_191(SeqIDNo:347);D0M26h_192(SeqIDNo:349)；D0M26h-193(SeqIDNo:351);D0M26h_194(SeqIDNo:353);D0M26h_195(SeqIDNo:355);D0M26h_196(SeqIDNo:357);D0M26h_197(SeqIDNo:359)；D0M26h-198(SeqIDNo:361);D0M26h_199(SeqIDNo:363);D0M26h_2(SeqIDNo:365)；D0M26h-20(SeqIDNo:367);D0M26h_200(SeqIDNo:369);D0M26h_201(SeqIDNo:371)；D0M26h-202(SeqIDNo:373);D0M26h_203(SeqIDNo:375);D0M26h_204(SeqIDNo:377);D0M26h_205(SeqIDNo:379);D0M26h_206(SeqIDNo:381)；D0M26h-207(SeqIDNo:383);D0M26h_208(SeqIDNo:385);D0M26h_209(SeqIDNo:387)；D0M26h-21(SeqIDNo:389);D0M26h_210(SeqIDNo:391);D0M26h_211(SeqIDNo:393)；D0M26h-212(SeqIDNo:395);D0M26h_213(SeqIDNo:397);D0M26h_214(SeqIDNo:399);D0M26h_215(SeqIDNo:401);D0M26h_216(SeqIDNo:403)；D0M26h-217(SeqIDNo:405);D0M26h_218(SeqIDNo:407);D0M26h_219(SeqIDNo:409)；DOM26h-22(SeqIDNo:411);D0M26h_220(SeqIDNo:413);DOM26h_221(SeqIDNo:415)；DOM26h-222(SeqIDNo:417);DOM26h_223(SeqIDNo:419);DOM26h_23(SeqIDNo:421);DOM26h_24(SeqIDNo:423);DOM26h-29_l(SeqIDNo:425)；DOM26h-4(SeqIDNo:427);DOM26h_41(SeqIDNo:429);DOM26h_42(SeqIDNo:431)；DOM26h-43(SeqIDNo:433);DOM26h_44(SeqIDNo:435);DOM26h_45(SeqIDNo:437)；DOM26h-46(SeqIDNo:439);DOM26h_47(SeqIDNo:441);D0M26h_48(SeqIDNo:443)；DOM26h-49(SeqIDNo:445);D0M26h_50(SeqIDNo:447);DOM26h_51(SeqIDNo:449)；DOM26h-52(SeqIDNo:451);DOM26h_53(SeqIDNo:453);DOM26h_54(SeqIDNo:455)；DOM26h-55(SeqIDNo:457);DOM26h_56(SeqIDNo:459);DOM26h_57(SeqIDNo:461)；DOM26h-58(SeqIDNo:463);DOM26h_59(SeqIDNo:465);D0M26h_60(SeqIDNo:467)；DOM26h-61(SeqIDNo:469);DOM26h_62(SeqIDNo:471);DOM26h_63(SeqIDNo:473)；DOM26h-64(SeqIDNo:475);DOM26h_65(SeqIDNo:477);DOM26h_66(SeqIDNo:479)；DOM26h-67(SeqIDNo:·481);DOM26h_68(SeqIDNo:483);DOM26h_69(SeqIDNo:485)；D0M26h-70(SeqIDNo:487);DOM26h_71(SeqIDNo:489);DOM26h_72(SeqIDNo:491)；DOM26h-73(SeqIDNo:493);DOM26h_74(SeqIDNo:495);DOM26h_75(SeqIDNo:497)；DOM26h-76(SeqIDNo:499);DOM26h_77(SeqIDNo:501)；DOM26h-78(SeqIDNo:503)；D0M26h-79(SeqIDNo:505);D0M26h_80(SeqIDNo:507);D0M26h_81(SeqIDNo:509)；D0M26h-82(SeqIDNo:511);DOM26h_83(SeqIDNo:513);DOM26h_84(SeqIDNo:515)；DOM26h-85(SeqIDNo:517);DOM26h_86(SeqIDNo:519);DOM26h_87(SeqIDNo:521)；DOM26h-88(SeqIDNo:523);DOM26h_89(SeqIDNo:525);D0M26h_90(SeqIDNo:527)；DOM26h-91(SeqIDNo:529);DOM26h_92(SeqIDNo:531);DOM26h_93(SeqIDNo:533)；DOM26h-94(SeqIDNo:535);DOM26h_95(SeqIDNo:537);DOM26h_96(SeqIDNo:539)；DOM26h-97(SeqIDNo:541);DOM26h_98(SeqIDNo:543);DOM26h_99(SeqIDNo:545);DOM26h-99_l(SeqIDNo:547);DOM26h-99_2(SeqIDNo:549)；(抗人ASGPRVk克降)DOM26h_161(SeqIDNo:551);DOM26h_162(SeqIDNo:553)；DOM26h-163(SeqIDNo:555);DOM26h_164(SeqIDNo:557);DOM26h_165(SeqIDNo:559)；DOM26h-166(SeqIDNo:561);DOM26h_167(SeqIDNo:563);DOM26h_224(SeqIDNo:565)；DOM26h-25(SeqIDNo:567);DOM26h_26(SeqIDNo:569);DOM26h_27(SeqIDNo:571)；DOM26h-28(SeqIDNo:573);DOM26h_29(SeqIDNo:575);D0M26h_30(SeqIDNo:577)；DOM26h-31(SeqIDNo:579);DOM26h_32(SeqIDNo:581);DOM26h_33(SeqIDNo:583)；DOM26h-34(SeqIDNo:585);DOM26h_35(SeqIDNo:587);DOM26h_36(SeqIDNo:589)；DOM26h-37(SeqIDNo:591);DOM26h_38(SeqIDNo:593);DOM26h_39(SeqIDNo:595);D0M26h_40(SeqIDNo:597);DOM26h_6(SeqIDNo:599);DOM26h_8(SeqIDNo:601);DOM26h_9(SeqIDNo:603)。在另一個實施方案中，特異性結合肝細胞上的ASGPR受體的由本發明提供的dAb可以是這樣的，其包含與由圖32中鑑定為下述的核苷酸序列編碼的親和力成熟的dAb克隆序列至少80%等同(例如85%、90%、95%或100%等同)的胺基酸序列D0M26h-161_84(SeqIDNo:867)；D0M26h-161-86(SeqIDNo:869)；D0M26h-161-87(SeqIDNo:871)；D0M26h-196-61(SeqIDNo:873);D0M26h-210_2(SeqIDNo:875);D0M26h-220_l(SeqIDNo:877);或D0M26h-220-43(SeqIDNo:879)。在另一個例子中，結合肝細胞上的ASGPR受體的dAb可以是這樣的，其包含與由鑑定為下述的核苷酸序列編碼的胺基酸序列至少80%等同(例如85%、90%、95%或100%等同)的胺基酸序列:(抗小鼠ASGPRVHdAbs)D0M26m-10(SeqIDNo:605);D0M26m_13(SeqIDNo:607)；D0M26m-16(SeqIDNo:609);D0M26m_165(SeqIDNo:611);D0M26m_17(SeqIDNo:613)；D0M26m-27(SeqIDNo:615);D0M26m_28(SeqIDNo:617);D0M26m_29(SeqIDNo:619)；D0M26m-30(SeqIDNo:621);D0M26m_31(SeqIDNo:623);D0M26m_32(SeqIDNo:625)；D0M26m-33(SeqIDNo:627);D0M26m-33_l(SeqIDNo:629);D0M26m-33_10(SeqIDNo:631);D0M26m-33_ll(SeqIDNo:633);D0M26m-33_12(SeqIDNo:635)；D0M26m-33-2(SeqIDNo:637);D0M26m-33_3(SeqIDNo:639);D0M26m-33_4(SeqIDNo:641)；D0M26m-33-5(SeqIDNo:643);D0M26m-33_6(SeqIDNo:645);D0M26m-33_7(SeqIDNo:647);D0M26m-33_8(SeqIDNo:649);D0M26m-33_9(SeqIDNo:651)；D0M26m-34(SeqIDNo:653);D0M26m_35(SeqIDNo:655);D0M26m_36(SeqIDNo:657)；D0M26m-37(SeqIDNo:659);D0M26m_38(SeqIDNo:661);D0M26m_39(SeqIDNo:663)；D0M26m-4(SeqIDNo:665);D0M26m_40(SeqIDNo:667);D0M26m_41(SeqIDNo:669)；D0M26m-42(SeqIDNo:671);D0M26m_43(SeqIDNo:673);D0M26m_44(SeqIDNo:675)；D0M26m-45(SeqIDNo:677);D0M26m_46(SeqIDNo:679);D0M26m_47(SeqIDNo:681)；D0M26m-48(SeqIDNo:683);D0M26m_52(SeqIDNo:685);D0M26m-52_l(SeqIDNo:687);D0M26m-52_2(SeqIDNo:689);D0M26m-52_3(SeqIDNo:691)；D0M26m-52-4(SeqIDNo:693);D0M26m-52_5(SeqIDNo:695);D0M26m-52_6(SeqIDNo:697)；D0M26m-52-7(SeqIDNo:699);D0M26m_6(SeqIDNo:701);D0M26m_60(SeqIDNo:703)；D0M26m-61-l(SeqIDNo:705);D0M26m-61_2(SeqIDNo:707);D0M26m-61_3(SeqIDNo:709);D0M26m-61_4(SeqIDNo:711);D0M26m-61_5(SeqIDNo:713)；D0M26m-61-6(SeqIDNo:715);D0M26m_7(SeqIDNo:717);D0M26m_73(SeqIDNo:719)；D0M26m-74(SeqIDNo:721);D0M26m_75(SeqIDNo:723);D0M26m_76(SeqIDNo:725)；D0M26m-77(SeqIDNo:727);D0M26m_78(SeqIDNo:729);D0M26m_79(SeqIDNo:731)；D0M26m-8(SeqIDNo:733);D0M26m_80(SeqIDNo:735);D0M26m_81(SeqIDNo:737)；D0M26m-82(SeqIDNo:739);D0M26m_83(SeqIDNo:741);D0M26m_9(SeqIDNo:743);(抗小鼠ASGPRVkdAbs)D0M26m_l(SeqIDNo:745)；D0M26m-100(SeqIDNo:747)；D0M26m-101(SeqIDNo:749);D0M26m_102(SeqIDNo:751);D0M26m_103(SeqIDNo:753)；D0M26m-106(SeqIDNo:755);D0M26m_108(SeqIDNo:757);D0M26m_109(SeqIDNo:759);D0M26m-109_l(SeqIDNo:761);D0M26m-109_2(SeqIDNo:763)；D0M26m-12(SeqIDNo:765);D0M26m_18(SeqIDNo:767);D0M26m_19(SeqIDNo:769)；D0M26m-2(SeqIDNo:771);D0M26m_20(SeqIDNo:773);D0M26m-20_l(SeqIDNo:775)；D0M26m-20-2(SeqIDNo:777);D0M26m-20_3(SeqIDNo:779);D0M26m-20_4(SeqIDNo:781);D0M26m-20_5(SeqIDNo:783);D0M26m-20_6(SeqIDNo:785)；D0M26m-22(SeqIDNo:787);D0M26m_23(SeqIDNo:789);D0M26m_24(SeqIDNo:791)；D0M26m-25(SeqIDNo:793);D0M26m_26(SeqIDNo:795);D0M26m_3(SeqIDNo:797)；D0M26m-50(SeqIDNo:799)；D0M26m-50-l(SeqIDNo:801);D0M26m-50_2(SeqIDNo:803);D0M26m-50_3(SeqIDNo:805);D0M26m-50_4(SeqIDNo:807)；D0M26m-50-5(SeqIDNo:809);D0M26m-50_6(SeqIDNo:811);DOM26m_51(SeqIDNo:813)；DOM26m-53(SeqIDNo:815);DOM26m_54(SeqIDNo:817);DOM26m_55(SeqIDNo:819)；DOM26m-56(SeqIDNo:821);DOM26m_57(SeqIDNo:823);DOM26m_58(SeqIDNo:825)；DOM26m-59(SeqIDNo:827);DOM26m_61(SeqIDNo:829);DOM26m_63(SeqIDNo:831)；DOM26m-64(SeqIDNo:833);DOM26m_66(SeqIDNo:835);DOM26m_69(SeqIDNo:837)；DOM26m-85(SeqIDNo:839);DOM26m_86(SeqIDNo:841);DOM26m_87(SeqIDNo:843)；DOM26m-89(SeqIDNo:845)；D0M26m-90(SeqIDNo:847);DOM26m_91(SeqIDNo:849)；DOM26m-92(SeqIDNo:851);DOM26m_93(SeqIDNo:853);DOM26m_94(SeqIDNo:855)；DOM26m-95(SeqIDNo:857);DOM26m_96(SeqIDNo:859);DOM26m_97(SeqIDNo:861);DOM26m_98(SeqIDNo:863);DOM26m_99(SeqIDNo:865)。在一個實施方案中，配體例如dAb可以是與本文描述的DOM26dAbs(具有圖15、16、19和20中所示的胺基酸序列)中的任何一種競爭結合ASGPR受體的那種。在另外一個方面，提供了包含選自下述的至少一個⑶R的結合ASGPR的dAb⑶Rl、⑶R2和⑶R3，其中⑶Rl、⑶R2或⑶R3與如本文描述的氨基DOM26胺基酸序列中的任何一種中的CDR1、CDR2或CDR3序列至少80%等同(例如85%、90%、95%或100%等同)。CDRs可以如下在胺基酸序列中鑑定VK序列⑶Rl是殘基24-34，⑶R2是殘基50-56，⑶R3是殘基89-97;對於VH序列，CDRl是殘基31-35，CDR2是殘基50-65，CDR3是殘基95-102。在一個實施方案中，本發明的dAbs顯示在人ASGPR和來自另一個物種例如小鼠、犬或食蟹猴的ASGPR之間的交叉反應性。在一個實施方案中，本發明的dAbs顯示在人和小鼠ASGPR之間的交叉反應性。在這個實施方案中，可變結構域特異性結合人和小鼠ASGPR0在一個實施方案中，本發明提供了可變結構域，其對於人和小鼠ASGPR是交叉反應的，且是選自下述的胺基酸序列D0M26m-52、D0M26h_99、D0M26h_161、D0M26h_163、D0M26h-186、D0M26h_196、D0M26h_210和DOM26h_220，或與選自下述的胺基酸序列至少80%等同(例如85%、90%、95%或100%)的胺基酸序列D0M26m_52、DOM26h_99、DOM26h_161、DOM26h-163、D0M26h_186、D0M26h_196、D0M26h_210和DOM26h_220。如上所述，交叉反應性是特別有用的，因為藥物開發一般要求在人中測試藥物前，在動物系統例如小鼠模型中測試前導藥物候選物。可以結合人蛋白質以及物種同系物例如等價小鼠蛋白質的藥物的提供允許在這些系統中測試結果，並且使得進行使用相同藥物的數據的並肩比較。這避免發現針對例如小鼠ASGPR起作用的藥物和針對人ASGPR起作用的分開藥物的需要的複雜化，並且還避免使用非等同或替代藥物在人和小鼠中比較結果的需要。在另一個實施方案中，本發明提供了包含單一分子(例如作為單一融合物或綴合物存在)的肝靶向組合物，所述單一分子包含(a)結合在肝細胞上的ASGPR受體的dAb，例如如本文描述的ASGPRdAbs中的任何一種，以及(b)用於遞送至肝的一種或多種治療分子。在上述的一個實施方案中，希望遞送至肝的分子(b)可以是幹擾素，例如它可以是幹擾素a2、幹擾素a5、幹擾素a6、或複合幹擾素(Consensusinterferon),或它可以是保留一些幹擾素活性的這些中的任何一種的突變體或衍生物。在另一個實施方案中，本發明提供了組合物，其包含如本文描述的肝靶向組合物中的任何一種，以及用於遞送至肝的進一步藥物，例如病毒唑和/或用於全身遞送的藥物。此類組合物可以是用於在治療中同時、分開或序貫使用的組合製劑，例如以治療或預防肝疾病或狀況例如炎性肝疾病例如纖維化或病毒性肝疾病例如肝炎(例如C型肝炎)、或肝硬化或肝癌。在一個實施方案中，希望遞送至肝的藥物可以包含下述中的一種或多種Nexavar(也稱為索拉非尼)_在原發性肝細胞癌的治療中使用的小分子；Erbitux(也稱為西妥昔單抗)-在原發性肝癌或肝中的腸癌轉移灶的治療中使用的單克隆抗體；Avastin(也稱為貝伐珠單抗)和Herceptin(也稱為曲妥珠單抗)，其用於治療分別在肝中的腸或乳腺癌轉移灶。Nexavar可以例如方便地化學綴合至結合ASGPR受體的抗體或dAb等。含Erbitux、Avastin或Herceptin融合物可以方便地通過使編碼Erbitux、Avastin或Herceptin抗體的核苷酸序列與編碼結合ASGPR受體的抗體、dAb等的核苷酸序列融合進行製備。當作為與肝靶向dAb的融合物(或綴合物)存在時，用於遞送至肝的一種或多種治療分子(例如幹擾素)可以連接至dAb的N末端或C末端或在dAb序列內的點上。在一個實施方案中，一種或多種幹擾素分子例如幹擾素a2作為融合物(或綴合物)存在於dAb的N末端上。還可以任選存在連接用於遞送至肝的一種或多種治療分子(例如幹擾素)與dAb的胺基酸或化學接頭。接頭可以是例如TVAAPR或TVAAPS接頭序列，螺旋接頭或它可以是gly-ser接頭。可替代地，接頭可以是例如PEG接頭。接頭還可以是肽接頭，含有功能性例如蛋白酶切割位點的接頭，或例如用於附著放射性同位素或其他顯像劑的螯合基團。在特定實施方案中，本發明的dAbs、融合物(或綴合物)可以包含進一步的分子例如進一步的肽或多肽，例如半衰期延長多肽(例如結合血清白蛋白的dAb或抗體片段)，或一個或多個PEG分子。如本文使用的，「融合物」指包含結合肝細胞(例如肝細胞上的ASGPR)的dAb作為一個部分和一種或多種進一步的分子的融合蛋白，所述進一步的分子是希望遞送至肝的治療分子(例如幹擾素)。結合肝細胞(例如肝細胞上的ASGPRM^dAb和治療分子作為單一連續多肽鏈的不連續部分(一部分)存在。dAb和治療分子可以通過肽鍵彼此直接鍵合，或通過合適的胺基酸或肽或多肽接頭連接。適當時可以存在另外的部分例如肽或多肽(例如第三個、第四個)和/或接頭序列。dAb可以在N末端位置、C末端位置中，或它可以相對於治療分子是內部的。如本文使用的，「綴合物」指包含結合肝細胞(例如肝細胞上的ASGPR)的dAb的組合物，用於遞送至肝的一種或多種治療分子與所述dAb共價或非共價鍵合。治療分子可以直接或通過合適接頭部分間接地與dAb共價鍵合。治療分子可以在任何合適的位置例如氨基末端、羧基末端或通過合適的胺基酸側鏈(例如賴氨酸的e氨基、或半胱氨酸的巰基)與dAb鍵合。可替代地，治療分子可以直接(例如靜電作用、疏水作用)或間接地(例如通過互補結合配偶體(例如生物素和抗生物素蛋白)的非共價結合)與dAb非共價鍵合，其中一個配偶體與促胰島素/腸降血糖素分子共價鍵合，並且互補結合配偶體與dAb共價鍵合)。dAb可以在N末端位置、C末端位置中，或它可以相對於治療分子是內部的。本發明還提供了包含編碼本文描述的融合物的核酸的組合物，例如包含如圖13-14和17-18中所示的編碼DOM26dAbs的核酸中的任何一種。還提供的是包含這些核酸的宿主細胞，例如非胚胎宿主細胞，例如原核或真核宿主細胞，例如細菌宿主細胞(例如大腸桿菌(疋coli))或酵母宿主細胞或哺乳動物細胞。本發明進一步提供了用於產生本發明的融合蛋白的方法，所述方法包括在適合於表達所述重組核酸的條件下維持宿主細胞例如上文描述的那些，其包含編碼本發明的融合物的重組核酸和/或構建體，由此產生融合蛋白。本發明還提供了包含本發明的組合物的藥物組合物。本發明進一步提供了用於在醫學中使用的本發明的組合物，例如用於在例如肝疾病或狀況或病症例如病毒性肝疾病(例如肝炎，例如C型肝炎)、肝硬化或肝癌治療或預防中使用，並且其包括給所述個體施用治療有效量的本發明的組合物。本發明還提供了用於治療(治療上或預防上)具有疾病或病症的患者或受試者的方法，例如本文描述的那些，例如肝疾病或狀況或病症例如病毒性肝疾病(例如肝炎，例如C型肝炎)、肝硬化或肝癌，並且所述方法包括給所述個體施用治療有效量的本發明的組合物。本發明的組合物例如藥物組合物可以單獨或與其他分子或部分組合施用，所述其他分子或部分例如多肽、治療蛋白質和/或分子(例如其他蛋白質(包括抗體)、肽或小分子藥物。本發明還提供了用於在肝疾病或狀況或病症例如病毒性肝疾病(例如肝炎，例如C型肝炎)、肝硬化或肝癌治療中使用的本發明的組合物。本發明還提供了本發明的組合物在製造用於治療肝疾病或狀況或病症例如病毒性肝疾病(例如肝炎，例如C型肝炎)、肝硬化或肝癌的藥劑中的用途。本發明還涉及本文描述的任何組合物用於在肝疾病或狀況例如病毒性肝疾病(例如肝炎，例如C型肝炎)、肝硬化或肝癌疾病或病症治療、診斷或預防中使用的用途。本發明還涉及在由肝感染血液傳播病原體感染後，本文描述的任何組合物的預防使用。例如通過附著PEG基團、血清白蛋白、轉鐵蛋白、轉鐵蛋白受體或至少其轉鐵蛋白結合部分、抗體Fe區、或通過綴合至抗體結構域，本發明的組合物，例如組合物的dAb組分，可以進一步格式化，以具有更大的流體力學大小，以進一步延長半衰期。例如，結合血清白蛋白的dAb可以格式化為抗體的更大抗原結合片段(例如格式化為Fab、Fab』、F(ab)2、F(ab，)2、IgG、scFv)。在本公開內容自始至終描述的本發明的其他實施方案中，代替在本發明的融合物中使用「dAb」，考慮技術人員可以使用包含dAb的CDRs的結構域，其特異性結合肝細胞例如肝細胞上的ASGPR受體(例如CDRs可以嫁接到合適的蛋白質支架或骨架上，例如親和體、SpA支架、LDL受體A類結構域或EGF結構域)。公開內容就整體而言應相應解釋為提供此類結構域代替dAb的公開內容。在特定實施方案中，本發明提供了包含雙重特異性配體或多特異性配體的根據本發明的組合物，其包含結合肝細胞(例如肝細胞上的ASGPR受體)的根據本發明的第一個dAb,和具有與第一個dAb相同或不同的結合特異性的第二個dAb,和在多特異性配體的情況下任選進一步的dAbs。第二個dAb(或進一步的dAbs)可以任選結合不同靶。因此，在一個方面，本發明提供了用於通過腸胃外施用遞送的本發明的組合物，例如通過皮下、肌內或靜脈內注射、吸入、鼻遞送、經黏膜遞送、口服遞送、遞送至患者的GI道、直腸遞送或眼遞送。在一個方面，本發明提供了本發明的組合物在製造用於通過下述遞送的藥劑中的用途皮下注射、吸入、靜脈內遞送、鼻遞送、經黏膜遞送、口服遞送、遞送至患者的GI道、直腸遞送、經皮或眼遞送。在一個方面，本發明提供了用於通過皮下注射、肺遞送、靜脈內遞送、鼻遞送、經黏膜遞送、口服遞送、遞送至患者的GI道、直腸遞送或眼遞送來遞送至患者的方法，其中所述方法包括給患者施用藥學有效量的本發明的融合物或綴合物。在一個方面，本發明提供了包含本發明的融合物或綴合物的口服、可注射、可吸入或可噴霧製劑。製劑可以以片劑、丸劑、膠囊、液體或糖漿劑的形式。術語「受試者」或「個體」在本文中定義為包括動物，例如哺乳動物，包括但不限於靈長類動物(例如人)、牛、綿羊、山羊、馬、犬、貓、兔、豚鼠、大鼠、小鼠或其他牛科動物、綿羊科動物、馬科動物、犬科動物、貓科動物、嚙齒類動物或鼠物種。本發明還提供了用於在將根據本發明的組合物施用於受試者(例如人患者)中使用的試劑盒，其包含本發明的組合物、藥物遞送裝置和任選的使用說明書。組合物可以作為製劑提供，例如冷凍乾燥製劑或緩慢釋放製劑。在特定實施方案中，藥物遞送裝置選自注射器、吸入器、鼻內或眼施用裝置(例如mister、滴眼劑或滴鼻劑)、和無針注射裝置。本發明的組合物(例如dAbs和肝靶向組合物)可以凍幹用於貯存且在使用前在合適載體中重構。可以採用任何合適的凍幹法(例如噴霧乾燥、餅乾燥)和/或重構技術。本領域技術人員應當理解凍幹和重構可以導致不同程度的抗體活性喪失，並且可能必須調整使用水平以補償。在一個特定實施方案中，本發明提供了包含如本文描述的凍幹(冷凍乾燥)組合物的組合物。優選地，當再水合時，凍幹(冷凍乾燥)組合物喪失僅僅約20%、或僅僅約25%、或僅僅約30%、或僅僅約35%、或僅僅約40%、或僅僅約45%、或僅僅約50%其活性(例如對於血清白蛋白的結合活性)。活性是在其凍幹前產生組合物的效應所需的組合物量。組合物的活性可以在凍幹前使用任何合適方法進行測定，並且活性可以在再水合後使用相同方法進行測定，以測定喪失活性的量。本發明還提供了包含本發明的組合物的持續或緩慢釋放製劑，此類持續釋放製劑可以包含與例如透明質酸、微球體或脂質體和其他藥學或藥理學(pharmacalogically)可接受的載體、賦形劑和/或稀釋劑組合的本發明的組合物。在一個方面，本發明提供了包含本發明的組合物和藥學或生理學可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物。附圖簡述圖I:顯示了P-GalNAc-PAA-生物素與人(His)6-ASGPRHl(___)、小鼠(His)6-ASGPRHK……)和人(His)e-GP6無關對照抗原(_)的結合。將抗原固定在biacoreCM5晶片表面上,並且將IOOnM配體以10UI分鐘20%，因此D0M26m-33和D0M26m_52結合在小鼠ASGPRHl亞基內的部分重疊的表位。小鼠ASGPRHl的抗體結合不受在這些實驗中用0.IM甘氨酸，pH2.0的再生影響。圖I:顯示了在注射後3小時在balb/c小鼠中111In標記的dAbs的定位。在經由尾靜脈注射12MBq放射性標記的dAb的靜脈內給藥後，使用nanospect照相機將小鼠成像。圖像顯示在3小時時，信號對於所有三種dAb分子在腎和膀胱中觀察到，而肝定位僅對於抗鼠ASGPRdAbD0M26m_33觀察到。圖8:顯示了經由尾靜脈在balb/c小鼠中靜脈內給藥後3小時111In標記的dAbs的生物分布。在每種情況下注射約0.5MBq放射性標記的dAb。結果顯示了在小鼠肝中放射性標記的dAb的累積在用D0M26m-33注射的小鼠中是在用Vk模擬物(dummy)注射的小鼠中的12.4倍，並且是在用Vh模擬物注射的小鼠中的4.9倍。圖9:顯示了裝載有2iig/泳道的蛋白L純化的mIFNa2_dAb融合物的4_12%Bis-Tris凝膠，所述融合物用IOmMDTT還原。泳道指名如下mIFNa2-Vk模擬物(泳道2)，具有C末端半胱氨酸點突變的mIFNa2-Vk模擬物(泳道3)mIFNa2-VH模擬物(泳道4)具有C末端半胱氨酸點突變的mIFNa2-VH模擬物(泳道5)mIFNa2-D0M26m-33(泳道6)具有C末端半胱氨酸點突變的mIFNa2-D0M26m-33(泳道7)將10uIMark12分子量標準(Invitrogen)裝載到泳道I中，並且個別標記條帶的分子量(以千道爾頓表示)在泳道I的左側給出。將凝膠用IxSureBlue染色。凝膠舉例說明小鼠IFNa2-dAb融合物遷移接近於約33KDa的預期分子量。圖10:顯示了在CHOISRE-Luc瞬時轉染測定中小鼠IFN_dAb融合物的活性。將CHO-Kl細胞與所示濃度的小鼠IFN-a標準或小鼠IFN_dAb融合蛋白一起溫育。上圖顯示了用小鼠IFNa2-D0M26m-33融合蛋白獲得的結果，中圖顯示了用小鼠IFNa2_VH模擬物2融合蛋白獲得的結果，並且下圖顯示了用小鼠IFNa2-VK模擬物融合蛋白獲得的結果。符號指示下述▲=小鼠IFNa2-dAb融合物■=具有C末端半胱氨酸突變的小鼠IFNa2-dAb融合物▼=小鼠IFN-a標準。圖Ila顯示了小鼠IFNa2-D0M26m_33融合物與包被在BIAcoreCM5晶片的表面上的(His)6小鼠ASGPRHl的結合。描記線代表在所有小圖中顯示用於比較的僅D0M26m-33(……)、小鼠IFNa2_dAb融合物(___)、和具有C末端半胱氨酸突變的小鼠IFNa2-dAb融合物(_)的結口o圖Ilb顯示了小鼠IFNa2-D0M26m_33融合物與包被在BIAcoreCM5晶片的表面上的(His)6小鼠ASGPRHl的結合。描記線代表在所有小圖中顯示用於比較的僅D0M26m-33(……)、小鼠IFNa2_dAb融合物(___)、和具有C末端半胱氨酸突變的小鼠IFNa2-dAb融合物(_)的結八口o圖Ilc顯示了小鼠IFNa2-D0M26m_33融合物與包被在BIAcoreCM5晶片的表面上的(His)6小鼠ASGPRHl的結合。描記線代表在所有小圖中顯示用於比較的僅D0M26m-33(……)、小鼠IFNa2_dAb融合物(___)、和具有C末端半胱氨酸突變的小鼠IFNa2-dAb融合物(_)的結合。圖12:顯示了根據在抗原內結合的表位分組的鼠ASGPR特異性dAb克隆。圖13:顯示了抗人VhASGPRdAbs的核苷酸序列。(SeqIDNo.s155-549;僅奇數)圖14:顯示了抗人VKASGPRdAbs的核苷酸序列。(SeqIDNo.s551-603;僅奇數)圖15:顯示了抗人VhASGPRdAbs的胺基酸序列。(SeqIDNo.s156-550;僅偶數)圖16:顯示了抗人VkASGPRdAbs的胺基酸序列。(SeqIDNo.s552-604;僅偶數)圖17:顯示了抗小鼠VhASGPRdAbs的核苷酸序列。(SeqIDNo.s605-743;僅奇數)圖18:顯示了抗小鼠VkASGPRdAbs的核苷酸序列。(SeqIDNo.s745-865;僅奇數)圖19:顯示了抗小鼠VhASGPRdAbs的胺基酸序列。(SeqIDNo.s606-744;僅偶數)圖20:顯示了抗小鼠VkASGPRdAbs的胺基酸序列。(SeqIDNo.s746-866;僅偶數)圖21顯示了ASGPR特異性dAbsD0M26h_196(___)和D0M26h-196_61(_)與人(His)6-ASGPRHl的結合。將生物素化的(His)6-ASGPRHl固定在Biacore鏈黴抗生物素蛋白晶片表面上，並且將62nMdAb以40UI.分鐘―1的流速經過。傳感圖舉例說明D0M26h-196-61以比D0M26h_196親本克隆那種更高的親和力結合人(His)6_ASGPRHl抗原。圖22顯示了裝載有gNi-NTA純化的人(His)6-ASGPRHl莖結構域(泳道2)、用PNGaseF處理的人(His)6-ASGPRHl莖結構域(泳道3)、人(His)6-ASGPRHl凝集素結構域(泳道4)、用PNGaseF處理的人(His)6-ASGPRHl凝集素結構域(泳道5)的4-12%Bis-Tris凝膠。將10uINovexSharp預染色的分子量標準(Invitrogen)裝載到泳道I中，並且個別標記條帶的分子量(以千道爾頓表示)在泳道I的左側給出。將凝膠用IxSureBlue染色。凝膠顯示莖結構域是廣泛糖基化的，因為該蛋白質僅在用PNGaseF處理後以預期分子量運行，而凝集素結構域在PNGaseF消化的存在或不存在下以預期分子量運行。圖23顯示了ASGPR特異性dAbD0M26h-196_61與生物素化的(His)6-人ASGPRHl凝集素結構域殘基半胱氨酸154-亮氨酸291(_)、(His)6-小鼠ASGPRHl完全細胞外結構域殘基絲氨酸60-天冬醯胺284(___)、和(His)6-人ASGPRHl莖結構域殘基穀氨醯胺62-半胱氨酸153(......)的結合。將生物素化的抗原固定在Biacore鏈黴抗生物素蛋白晶片表面上，並且將dAb以60nM的濃度和40UI.分鐘―1的流速經過。傳感圖舉例說明D0M26h-196-61結合人ASGPRHl凝集素結構域和小鼠人ASGPRHl細胞外結構域，但不結合人ASGPRHl莖結構域。圖24顯示了在注射後3小時在balb/c小鼠中111In標記的dAbs的定位。在經由尾靜脈注射12MBq放射性標記的dAb的靜脈內給藥後，使用nanospect照相機將小鼠成像。圖像顯示在3小時時，信號對於所有dAb分子在腎和膀胱中觀察到，而肝定位僅對於抗ASGPRVhdAbD0M26h-196_61和抗ASGPRVkdAbD0M26h-161_84觀察到。圖25a和b顯示了經由尾靜脈在balb/c小鼠中靜脈內給藥後3小時111In標記的dAbs的生物分布。在每種情況下注射約0.5MBq放射性標記的dAb。結果顯示了在小鼠肝中放射性標記的ASGPRdAb的累積相當大地高於用Vk/Vh模擬物2dAbs觀察到的那種。如本文使用的，「幹擾素活性」指這樣的分子，如使用如本文所述(實施例12)執行的B16-B1U測定(Invirogen)測定的，其具有等價量的重組小鼠幹擾素a(例如來自PBLBiomedicalLaboratories)的幹擾素活性量的至少10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或甚至50%。圖26:顯示了裝載有2iig/泳道的蛋白L純化的mIFNa2_dAb融合物的4_12%Bis-Tris凝膠，所述融合物用IOmMDTT還原。泳道指名如下mIFNa2-Vk模擬物(泳道2)，mIFNa2-VH模擬物(泳道3)mIFNa2-D0M26h-161-84(泳道4)mIFNa2-D0M26h-196-61(泳道5)將10uINovexSharp預染色的分子量標準(Invitrogen)裝載到泳道I中，並且個別標記條帶的分子量(以千道爾頓表示)在泳道I的左側給出。將凝膠用IxSureBlue染色。凝膠舉例說明小鼠IFNa2-dAb融合物遷移接近於約33KDa的預期分子量。圖27:顯示了在B16小鼠IFNa報導細胞系中小鼠IFN_dAb融合物(+/_DOTA綴合物)的活性。將B16細胞與所示濃度的小鼠IFN-a標準或小鼠IFN-dAb融合蛋白一起溫育，並且通過測量報導基因表達的水平測定幹擾素活性，這與在640nm處測量的吸光度成正比。上圖顯示了用小鼠IFNa2-VH模擬物2融合蛋白獲得的結果，下圖顯示了用小鼠IFNa2-D0M26h-196-61融合蛋白獲得的結果。符號指示下述▲=小鼠IFNa2-dAb融合物■=與NHS=DOTA綴合的小鼠IFNa2-dAb融合物=小鼠IFN-a標準。圖28顯示了小鼠IFNa2_dAb融合物與包被在BIAcore鏈黴抗生物素蛋白晶片的表面上的生物素化的(His)6-人ASGPRHl凝集素結構域和(His)6-小鼠ASGPRHl的結合。將融合蛋白以I剛的濃度和40uI.分鐘―1的流速經過晶片表面。上圖顯示了小鼠IFNa2-D0M36h-196_61融合蛋白(_)和小鼠IFNa2_Vh模擬物2融合蛋白(___)與(His)6-人ASGPRHl凝集素結構域的結合。下圖顯示了小鼠IFNa2-D0M36h-196-61融合蛋白(_)和小鼠IFNa2_Vh模擬物2融合蛋白(___)與(His)6-小鼠ASGPRHl的結合。圖29顯示了在注射後3小時在balb/c小鼠中111In標記的小鼠IFNa2_dAb融合物的定位。在經由尾靜脈注射12MBq放射性標記的dAb的靜脈內給藥後，使用nanospect照相機將小鼠成像。圖像顯示在3小時時，信號對於小鼠IFNa2-VH模擬物2和小鼠IFNa2-D0M26h-196-61融合蛋白在肝、腎和膀胱中觀察到，然而，肝在右手小圖中的圖像中看起來更亮，指示與小鼠IFNa2-VH模擬物2相比較，小鼠IFNa2-D0M26h-196_61的更大水平的肝攝取。圖30顯示了經由尾靜脈在balb/c小鼠中靜脈內給藥後3小時111In標記的小鼠IFNa2-dAb融合蛋白的生物分布。在每種情況下注射約0.5MBq放射性標記的dAb。結果顯示了小鼠IFNa2-D0M26h-196-61(黑色條)和小鼠IFNa2_VH模擬物2(灰色條)在肝和腎中累積，然而，小鼠IFNa2-D0M26h-196-61的肝/腎比是小鼠IFNa2_VH模擬物2那種的約2.2倍，指示小鼠IFNa2通過與ASGPRdAbD0M26h_196_61的遺傳融合的成功肝靶向。圖31和32顯示了多種親和力成熟的D0M26h克隆分別的胺基酸(SeqIDNo.s868-880;僅偶數)和核苷酸(SeqIDNo.s867-879;僅奇數)序列。發明詳述在本說明書內，本發明已關於實施方案以使得能夠完成明確和簡要說明的方式進行描述。預期且應當理解實施方案可以進行各種組合或分離，而不背離本發明。為了避免疑問，明確陳述關於本發明的一個實施方案的在本文中公開的本發明的特點可以與關於本發明的其他實施方案公開的本發明的任何一個或多個其他特點組合，除非上下文另有說明。除非另有定義，本文使用的所有技術和科學術語具有與本領域(例如在細胞培養、分子遺傳學、核酸化學、雜交技術和生物化學中)普通技術人員通常理解相同的含義。標準技術用於分子、遺傳和生物化學方法(一般參見，Sambrook等人，MolecularCloning:ALaboratoryManual,第2版(1989)ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.和Ausubel等人，ShortProtocolsinMolecularBiology(1999)第4版，JohnWiley&Sons,Inc.，其引入本文作為參考)和化學方法。如本文提及多肽使用的術語「類似物」意指修飾的肽，其中肽的一個或多個胺基酸殘基已由其他胺基酸殘基置換，和/或其中一個或多個胺基酸殘基已從肽中缺失，和/或其中一個或多個胺基酸殘基已加入肽中。胺基酸殘基的此類添加或缺失可以在肽的N末端和/或肽的C末端發生，或它們可以是在肽內。如本文使用的術語ASGPR受體指存在於肝細胞的表面上的無唾液酸糖蛋白受體(參見Meier等人，J.Mol.Biol.，2000，300，第857-865頁)，且更具體而言指其Hl亞基。當提及多肽使用時，如本文使用的「片段」是具有胺基酸序列的多肽，所述序列與整個天然存在的多肽的部分但不是全部胺基酸序列相同。片段可以是「獨立的」或包含在更大的多肽內，它們在其中作為單個更大多肽中的單個連續區形成部分或區域。如本文使用的，「肽」指經由肽鍵連接在一起的約2-約50個胺基酸。如本文使用的，「多肽」指經由肽鍵連接在一起的至少約50個胺基酸。多肽一般包含三級結構且摺疊成功能結構域。如本文使用的，「展示系統」指其中多肽或肽的集合對於基於所需特徵的選擇是可接近的，所述所需特徵例如物理、化學或功能特徵。展示系統可以是多肽或肽的合適儲庫(例如在溶液中、固定在合適載體上)。展示系統還可以是採用細胞表達系統的系統(例如在例如轉化、感染、轉染或轉導的細胞中表達核酸文庫且在細胞的表面上展示所編碼的多肽)或無細胞表達系統(例如乳狀液區室化和展示)的系統。示例性展示系統連接核酸的編碼功能和由核酸編碼的多肽或肽的物理、化學和/或功能特徵。當採用此類展示系統時，可以選擇具有所需物理、化學和/或功能特徵的多肽或肽，並且可以容易地分離或回收編碼所選多肽或肽的核酸。連接核酸的編碼功能和多肽或肽的物理、化學和/或功能特徵的許多展示系統是本領域已知的，例如細菌噬菌體展示(噬菌體展示，例如噬菌粒展示)、核糖體展示、乳狀液區室化和展示、酵母展示、嘌呤黴素展示、細菌展示、在質粒上的展示、共價展示等。(參見例如，EP0436597(Dyax)，美國專利號6，172，197(McCafferty等人)，美國專利號6，489，103(Griffiths等人))。如本文使用的，「功能的」描述具有生物學活性例如特異性結合活性的多肽或肽。例如，術語「功能多肽」包括通過其抗原結合位點結合靶抗原的抗體或其抗原結合片段。如本文使用的，「靶配體」指由多肽或肽特異性或選擇性結合的配體。例如，當多肽是抗體或其抗原結合片段時，靶配體可以是任何所需抗原或表位。與靶抗原的結合取決於多肽或肽是功能的。如本文使用的抗體指IgG、IgM、IgA、IgD或IgE或片段(例如Fab、F(ab』)2、Fv、二硫鍵合的Fv、scFv、閉合構象多特異性抗體、二硫鍵合的scFv、雙抗體),無論是衍生自天然產生抗體的任何物種，還是通過重組DNA技術製備；無論是從血清、B細胞、雜交瘤、轉染瘤、酵母還是細菌中分離。如本文使用的，「抗體形式」指任何合適的多肽結構，其中一個或多個抗體可變結構域可以這樣摻入，以便賦予對於結構上的抗原的結合特異性。多種合適的抗體形式是本領域已知的，例如嵌合抗體、人源化抗體、人抗體、單鏈抗體、雙特異性抗體、抗體重鏈、抗體輕鏈、抗體重鏈和/或輕鏈的同二聚體和異二聚體、前述任何的抗原結合片段(例如Fv片段(例如單鏈Fv(scFv)、二硫鍵合的Fv)、Fab片段、Fab』片段、F(ab』)2片段)、單個抗體可變結構域(例如dAb、VH、VHH、')、和前述任何的修飾形式(例如通過共價附著聚乙二醇或其他合適的聚合物或人源化Vhh修飾的)。短語「免疫球蛋白單個可變結構域」指不依賴於其他V區或結構域，特異性結合抗原或表位的抗體可變結構域(Vh、Vhh、')。免疫球蛋白單個可變結構域可以以具有其他可變區或可變結構域的形式(例如同或異多聚體)存在，其中其他區域或結構域對於通過單個免疫球蛋白可變結構域的抗原結合是不需要的(即，其中免疫球蛋白單個可變結構域不依賴於另外的可變結構域而結合抗原)。「結構域抗體」或「dAb」與「免疫球蛋白單個可變結構域」相同，如該術語在本文中使用的。「單個免疫球蛋白可變結構域」與「免疫球蛋白單個可變結構域」相同，如該術語在本文中使用的。「單個抗體可變結構域」與「免疫球蛋白單個可變結構域」相同，如該術語在本文中使用的。在一個實施方案中，免疫球蛋白單個可變結構域是人抗體可變結構域，但還包括來自其他物種例如嚙齒類動物的單個抗體可變結構域(例如如WO00/29004中公開的，其內容整體引入本文作為參考)、護士鯊和駱駝科VhhdAbs。駱駝科Vhh是免疫球蛋白單個可變結構域多肽，其衍生自物種例如駱駝、美洲駝、羊駝、單峰駱駝和原駝，其產生天然缺乏輕鏈的重鏈抗體。Vhh可以是人源化的。「結構域」是具有三級結構的摺疊的蛋白質結構，不依賴於蛋白質的其餘。一般地，結構域負責蛋白質的不連續功能性質，並且在許多情況下可以加入、去除或轉移至其他蛋白質，而無蛋白質的剩餘部分和/或結構域的功能喪失。「單個抗體可變結構域」是包含抗體可變結構域特有的序列的摺疊的多肽結構域。它因此包括完全抗體可變結構域和修飾的可變結構域，例如其中一個或多個環已替換為並非抗體可變結構域特有的序列，或已截短或包含N或C末端延長的抗體可變結構域，以及保留全長結構域的至少結合活性和特異性的可變結構域的摺疊片段。術語「文庫」指異質多肽或核酸的混合物。文庫由成員組成，所述成員各自具有單個多肽或核酸序列。對於這個程度，「文庫」與「儲庫」同義。在文庫成員之間的序列差異負責文庫中存在的多樣性。文庫可以採取多肽或核酸的簡單混合物的形式，或可以以用核酸文庫轉化的生物或細胞的形式，例如細菌、病毒、動物或植物細胞等。在一個實施方案中，每個個別生物或細胞僅含有一個或有限數目的文庫成員。在一個實施方案中，將核酸摻入表達載體內，以便允許由核酸編碼的多肽的表達。在一個方面，因此，文庫可以採取宿主生物群體的形式，每個生物含有表達載體的一個或多個拷貝，所述表達載體含有以核酸形式的文庫的單個成員，其可以表達以產生其相應的多肽成員。因此，宿主生物的群體具有編碼不同多肽的大儲庫的潛力。如本文使用的，術語「劑量」指一次(單位劑量)或經過限定時間間隔在兩次或更多次施用中全部施用於受試者的融合物或綴合物的數量。例如，劑量可以指經過一天的過程(24小時)(日劑量)、兩天、一周、兩周、三周或一個或多個月(例如通過單次施用、或通過兩次或更多次施用)施用於受試者的融合物或綴合物的數量。在劑量之間的間隔可以是任何所需時間量。如本文使用的，「幹擾素活性」指這樣的分子，如使用如本文所述(實施例12)執行的B16-B1U測定(Invivogen)測定的，其具有相等量的重組小鼠幹擾素a(例如來自PBLBiomedicalLaboratories)的活性量的至少10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或甚至50%。短語「半衰期」指例如由於通過天然機制的降解和/或清除或隔離，關於融合物或綴合物的血清或血漿濃度在體內減少50%花費的時間。本發明的組合物在體內是穩定的，並且其半衰期通過結合血清白蛋白分子例如人血清白蛋白(HSA)結合得到增加，所述血清白蛋白分子抵抗降解和/或清除或隔離。這些血清白蛋白分子是天然存在的蛋白質，其自身在體內具有長半衰期。如果分子的功能活性在體內持續長於相似分子的時間段，所述相似分子對於半衰期增加分子不是特異性的，那麼它的半衰期是增加的。如本文使用的,「流體力學大小(hydrodynamicsize)」指基於分子通過水溶液的擴散，分子(例如蛋白質分子、配體)的表觀大小。蛋白質通過溶液的擴散或運動可以進行加工，以衍生蛋白質的表觀大小，其中大小通過蛋白質顆粒的「Stokes半徑」或「流體力學半徑」給出。蛋白質的「流體力學大小」取決於質量和形狀(構象)，從而使得具有相同分子量的兩種蛋白質可以具有基於蛋白質的總體構象的不同流體力學大小。在兩個序列之間的「同源性」或「同一性」或「相似性」(該術語在本文中可互換使用)的計算如下執行。序列為了最佳比較目的進行比對(例如可以將缺口引入第一個和第二個胺基酸或核酸序列的一個或兩個中用於最佳比對，並且可以將非同源序列忽視用於比較目的)。在一個實施方案中，為了比較目的比對的參考序列長度是參考序列長度的至少30%、或至少40%、或至少50%、或至少60%、或至少70%、80%、90%、100%。隨後比較在相應胺基酸位置或核苷酸位置上的胺基酸殘基或核苷酸。當第一個序列中的位置由與第二個序列中相應位置相同的胺基酸殘基或核苷酸佔據時，那麼該分子在那個位置上是等同的(如本文使用的胺基酸或核酸「同源性」等價於胺基酸或核酸「同一性」)。在兩個序列之間的同一性百分比是由序列共享的等同位置數目的函數，其考慮到缺口數目和每個缺口的長度，所述缺口需要引入用於兩個序列的最佳比對。使用算法BLAST2Sequences，使用預設參數(Tatusova,T.A.等k,FEMSMicrobiolLett,174八扣-化私(1999)，可以製備且測定如本文定義的胺基酸和核苷酸序列比對和同源性、相似性或同一性。核酸、宿主細胞本發明涉及編碼本文描述的本發明組合物的分離和/或重組核酸。本文稱為「分離的」核酸是已與在其原始環境中(例如在細胞中或核酸的混合物例如文庫中)的其他材料(例如其他核酸,例如基因組DNA、cDNA和/或RNA)分離的核酸。分離的核酸可以是作為載體(例如質粒)的部分分離的。本文稱為「重組的」核酸是已通過重組DNA方法產生的核酸，包括依賴於人工重組的方法，例如使用例如限制性酶、同源重組、病毒等克隆到載體或染色體內，和使用聚合酶鏈反應(PCR)製備的核酸。本發明還涉及重組宿主細胞例如哺乳動物或微生物的，其包含(一種或多種)重組核酸或表達構建體，其包含編碼如本文描述的本發明組合物例如融合物的一種或多種核酸。還提供了製備如本文描述的本發明組合物例如融合物的方法，其包括在適合於融合多肽表達的條件下維持重組宿主細胞，例如哺乳動物或微生物的。如果需要的話，該方法可以進一步包括分離或回收融合物的步驟。例如，使用對於所選宿主細胞合適的任何方法(例如轉化、轉染、電穿孔、感染)，可以將編碼本發明的組合物例如本發明的肝靶向組合物的核酸分子(即，一個或多個核酸分子)，或包含一個或多個此類核酸分子的表達構建體(即，一個或多個構建體)引入合適宿主細胞內，以製備重組宿主細胞，從而使得一個或多個核酸分子與一種或多種表達控制元件可操作地連接(例如在載體中，在通過在細胞中的過程製備的構建體中，整合到宿主細胞基因組內)。所得到的重組宿主細胞可以在適合於表達的條件下(例如在誘導物的存在下，在合適的非人動物中，在補充有合適的鹽、生長因子、抗生素、營養補充物等合適的培養基中)維持，由此產生所編碼的肽或多肽。如果需要的話，所編碼的肽或多肽可以進行分離或回收(例如從動物、宿主細胞、培養基、乳中)。這個過程包含轉基因動物(參見例如，WO92/03918,GenPharmInternational),尤其是轉基因非人動物的宿主細胞中的表達。本文描述的本發明的組合物例如融合多肽還可以在合適的體外表達系統中產生，例如通過化學合成或通過任何其他合適的方法。如本文描述且例示的，本發明的組合物例如融合物和綴合物一般以高親和力結合ASGPR。例如，融合物或綴合物可以以約5微摩爾-約IpM，例如約10nM-約IpM例如約InM-約IpM的親和力(KD；KD=Koff(kd)/Kon(ka)[如通過表面等離振子共振測定的]結合人ASGPR。本發明的組合物例如dAbs和/或肝靶向組合物可以在大腸桿菌或畢赤酵母屬(Z7ZcAia)物種(例如巴斯德畢赤酵母(A衝表達。在一個實施方案中，肝祀向融合物在大腸桿菌或畢赤酵母屬物種(例如巴斯德畢赤酵母)中；或在哺乳動物細胞培養(例如CHO或HEK293細胞中)分泌。儘管當在大腸桿菌或畢赤酵母屬物種或哺乳動物細胞中表達時，本文描述的融合物或綴合物可以是可分泌的(secretable)，但它們可以使用任何合適的方法產生，例如合成化學方法或生物學生產方法，其不採用大腸桿菌或畢赤酵母屬物種。一般地，本發明的組合物將以純化形式連同藥理學或生理學可接受的載體一起利用。一般地，這些載體可以包括水或醇/水溶液、乳狀液或懸液，包括鹽水和/或緩衝介質的任何。腸胃外載體可以包括氯化鈉溶液、Ringer’s右旋糖、右旋糖和氯化鈉和乳酸Ringer'S。如果需要使多肽複合物保持在懸浮中，那麼合適的生理學可接受的佐劑可以從增稠劑中選擇，例如羧甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、明膠和海藻酸鹽。靜脈內載體包括液體和營養補充劑和電解質補充劑,例如基於Ringer’s右旋糖的那些。還可以存在防腐劑和其他添加劑，例如抗微生物劑、抗氧化劑、螯合劑和惰性氣體(Mack(1982^Remington'sPharmaceuticalSciences，寬16版)。可以使用多種合適的製劑，包括延長釋放製劑。根據本發明的藥物組合物的施用途徑可以是本領域普通技術人員通常已知的那些中的任何。對於治療，本發明的組合物可以依照標準技術施用於任何患者。施用可以是通過任何合適的模式，包括通過皮下注射、腸胃外、靜脈內、肌內、腹膜內、口服、經皮、經由肺途徑、以及適當地通過用導管直接輸注。施用的劑量和頻率將取決於患者的年齡、性別和狀況，其他藥物的同時施用，禁忌症及待由臨床醫生考慮的其他參數。如所示的，施用可以是局部或全身的。本發明的組合物可以凍幹用於貯存且在使用前在合適載體中重構。這種技術已顯示對於常規免疫球蛋白是有效的，並且可以採用領域已知的凍幹和重構技術。本領域技術人員應當理解凍幹和重構可以導致不同程度的抗體活性喪失(例如對於常規免疫球蛋白，IgM抗體趨於比IgG抗體具有更大的活性喪失)，並且可能必須調整使用水平以補償。如果相對於在治療前存在的此類症狀，或相對於在未用此類組合物或其他合適對照處理的個體(人或模型動物)中的此類症狀，一種或多種症狀或體徵是減少或減輕的(例如至少10%或在臨床評估量表上的至少一個點)，那麼使用本文描述的組合物執行的治療或療法視為「有效的」。症狀將取決於靶向疾病或病症的精確性質明顯改變，但可以通過普通技術臨床醫生或技術員進行測量。類似地，如果相對於在未用組合物處理的相似個體(人或動物模型)中的此類症狀，一種或多種症狀或體徵的發作或嚴重性是延遲、減少或取消的，那麼使用如本文描述的組合物執行的預防是「有效的」。本發明的組合物可以與其他治療或活性劑例如其他多肽或肽或小分子結合施用。這些進一步的試劑可以包括多種藥物，例如病毒唑。本發明的組合物可以連同一種或多種另外的治療或活性劑一起施用和/或配製。當本發明的組合物與另外的治療劑一起施用時，例如肝靶向組合物(例如融合物或綴合物)可以在另外的試劑例如病毒唑施用前、同時、一起或之後施用。一般地，本發明的組合物和另外的試劑以提供療效重疊的方式施用。包含dAbs的本發明組合物提供幾個進一步優點。結構域抗體組分是非常穩定的，相對於抗體和抗體的其他抗原結合片段小，可以通過在大腸桿菌或酵母(例如巴斯德畢赤酵母)中表達以高收率產生。相應地，包含結合肝細胞(例如肝細胞上的ASGPR受體)的dAb的本發明組合物可以比一般在哺乳動物細胞中產生的治療學(例如人、人源化或嵌合抗體)更容易產生，並且可以使用並非免疫原性的dAbs(例如人dAb可以用於治療或診斷人中的疾病)。另外，由於特異性靶向肝，本文描述的組合物可以具有比一種或多種治療分子例如單獨的幹擾素增強的安全概況和更少的副作用。類似地，本發明的組合物的施用可以比一種或多種治療分子單獨的施用具有對於在肝外的特定器官和/或身體組織減少的毒性，並且還可以具有改善的功效，例如當此類分子的施用對於其他器官和組織可能是另外有毒的時由於將治療分子以用於全身遞送的有效劑量特異性導向肝。實施例實施例I:人和小鼠無唾液酸糖蛋白Hl受體亞基的克隆和表達全長人和小鼠無唾液酸糖蛋白Hl受體亞基(ASGPRHDcDNA通過DNA2.(KMealoParkCA，USA)定製合成。使用引物DLT007和DLT008(人)或DLT009和DLTOlO(小鼠)，通過PCR擴增編碼具有N末端(His)6標籤的細胞外結構域(關於人的Q62-L291，和關於小鼠的S60-N284)的DNA。序列顯不於下表I中。表I:一麗函.......福顧福面福漏福福5.............A.......(Ife)......IasgpI.........·AACTCCXrAAClXTAGCAA(SmIBNo.11._5，碰IOrii.......VAACClWlATrACAGCACTGCAGCCT^—A.(_>I.................................................fSeqIDNo.I)ASCPRh1'IILTOCWCGAlTT'ACXXiGCCATCA'FCATCATCATCACAGT小鼠(His)x.CAAAATTCCCAATTGCCC(SecjIDNo.J)ASCPRHt5*Itt'PLflHfl"AACCTTTTAWAATTGCH~fTTCf^AGCWf€t...不+M.(His)二....................(SeqID!No.4)ASCPBHI'IItt通過拓撲異構酶克隆將PCR片段插入容納載體pCR-ZeroBlunt(Invitrogen)R,並且測序以獲得無錯克隆，其使用M13正向和M13反向引物。在含有插入片段的pCR-ZeroBlunt的BamHI/Hindlll消化後，通過凝膠純化獲得(His)6_ASGPRHl編碼DNA，並且將插入片段連接到PD0M50中的相應位點內，所述pD0M50是其為具有N末端V-J2-C小鼠IgG分泌前導序列的PTT5衍生物的哺乳動物表達載體，以促進表達到細胞培養基內。前導序列(胺基酸)METDTLLLffVLLLffVPGSTG(SeqIDNo.5)前導序列(核苷酸)ATGGAGACCGACACCCTGCTGCTGTGGGTGCTGCTGCTGTGGGTGCCCGGATCCACCGGGC(SeqIDNo.6)。使用QIAfiltermegaprep(Qiagen)製備質粒DNA。將IUgDNA/ml用293-Fectin轉染到HEK293E細胞內，並且在無血清培養基中生長。將蛋白質在培養中表達5天，並且使用Ni-NTA樹脂從培養上清液中純化，並且用PBS+0.5M咪唑洗脫。將蛋白質緩衝液交換到PBS內。通過Edman測序來測定受體亞基的N末端。人(His)6-ASGPRHl亞基的N末端鑑定為HHHHHHQNSQLQEEL(SeqIDNo.7)，具有鑑定為下述的另外序列LRGLREFTS(SeqIDNo.8)對應於切割產物。然而，與切割產物的那種相比較，對應於完整受體的序列以約5倍摩爾過量存在。小鼠(His)6-ASGPRHl的N末端鑑定為HHHHHHSQNXQLRED(SeqIDNo.9)，未鑑定另外的序列。為了測定潛在的配體結合活性，將受體亞基固定在biacoreCM5晶片表面上，並且分析與合成配體0-GalNAc-PAA-生物素(Glycotech)的結合(圖I)。從Ni-NTA中洗脫的HEK293E受體的純度還通過非還原SDS-PAGE進行分析(圖2)。SDS-PAGE分析顯示人和小鼠(His)6-ASGPRHl亞基遷移接近於基於胺基酸序列的預期分子量(關於人的27.2KDa，和關於小鼠的26.5KDa)。在人和小鼠(His)6_ASGPRHl樣品，一般為糖基化蛋白樣品中，觀察到遷移接近於預期分子量的超過一個種類。序列(His)r人ASGPRHlHHHHHHQNSQLQEELRGLRETFSNFTASTEAQVKGLSTQGGNVGRKMKSLESQLEKQQKDLSEDHSSLLLHVKQFVSDLRSLSCQMAALQGNGSERTCCPVNffVEHERSCYffFSRSGKAffADADNYCRLEDAHLVVVTSffEEQKFVQHHIGPVNTWMGLHDQNGPffKffVDGTDYETGFKNffRPEQPDDffYGHGLGGGEDCAHFTDDGRffNDDVCQRPYRffVCETELDKASQEPPLL(SeqIDNo.10)CATCATCATCATCATCACCAGAACTCCCAACTCCAGGAAGAACTTCGAGGACTGAGGGAGACTTTCTCCAATTTCACCGCAAGCACGGAGGCTCAAGTGAAGGGCCTCAGCACCCAGGGCGGGAATGTGGGCAGGAAAATGAAATCCCTGGAGAGCCAGCTCGAAAAGCAGCAGAAAGATCTGTCCGAGGACCACTCTAGCCTGTTGTTGCACGTGAAACAGTTTGTTTCCGACCTTAGGAGTCTTTCTTGCCAAATGGCCGCCCTCCAGGGAAACGGGTCCGAGAGAACTTGCTGCCCCGTCAATTGGGTGGAGCACGAGCGGTCTTGTTATTGGTTTAGCCGAAGCGGAAAAGCCTGGGCCGATGCAGATAACTACTGCCGGCTTGAGGACGCCCATCTGGTCGTGGTGACCAGTTGGGAGGAACAGAAATTCGTACAGCATCATATCGGGCCTGTTAACACATGGATGGGCCTTCATGACCAGAATGGTCCTTGGAAGTGGGTTGACGGAACCGATTACGAAACCGGATTCAAGAACTGGCGGCCTGAACAGCCAGACGACTGGTATGGACACGGCCTCGGAGGCGGGGAGGACTGCGCGCATTTCACAGACGATGGCCGGTGGAATGATGATGTGTGCCAAAGGCCTTACAGATGGGTCTGCGAGACAGAGCTGGATAAGGCTTCACAAGAGCCTCCACTCCTG(SeqIDNo.11)(His)r小鼠ASGPRHlHHHHHHSQNSQLREDLLALRQNFSNLTVSTEDQVKALSTQGSSVGRKMKLVESKLEKQQKDLTEDHSSLLLHVKQLVSDVRSLSCQMAAFRGNGSERTCCPINffVEYEGSCYffFSSSVRPffTEADKYCQLENAHLVVVTSRDEQNFLQRHMGPLNTfflGLTDQNGPffKffVDGTDYETGFQNffRPEQPDNVYGHGLGGGEDCAHFTTDGRffNDDVCRRPYRffYCETKLDKAN(SeqIDNo.12)CATCATCATCATCATCACAGTCAAAATTCCCAATTGCGCGAGGATCTGCTCGCACTGCGACAGAACTTTAGCAACCTTACCGTGTCTACGGAAGACCAGGTGAAGGCATTGTCAACTCAGGGGTCATCTGTGGGAAGAAAAATGAAGCTCGTGGAGTCAAAGCTGGAGAAGCAGCAAAAGGACCTCACCGAAGACCATTCCTCTCTCCTGCTGCACGTGAAGCAGCTGGTTTCTGACGTAAGGAGCCTGAGCTGCCAGATGGCTGCTTTTCGAGGTAACGGCTCTGAGCGCACATGCTGTCCTATTAATTGGGTGGAGTATGAGGGAAGTTGTTACTGGTTCTCAAGCTCCGTGAGGCCATGGACCGAAGCTGACAAATATTGCCAGCTCGAAAATGCTCACCTCGTGGTAGTGACCTCTAGGGATGAGCAAAATTTCCTGCAGCGACACATGGGGCCGCTTAATACCTGGATCGGGCTGACGGACCAGAACGGACCCTGGAAGTGGGTTGACGGTACCGATTATGAAACTGGATTCCAAAACTGGCGGCCAGAGCAGCCGGACAACTGGTATGGCCACGGCCTCGGAGGGGGCGAGGACTGTGCTCATTTTACAACGGATGGCCGGTGGAACGACGATGTGTGCAGAAGGCCATATCGGTGGGTCTGCGAGACAAAGCTGGACAAAGCCAAT(SeqIDNo.13)。實施例2-用於選擇dAbs的方法將Domantis』4G和6G首次用於實驗的噬菌體文庫分成4個庫，所述噬菌體文庫對於4G展示由GASl前導序列表達的抗體單個可變結構域(參見W02005/093074)且對於6G另外具有熱/冷預選擇(參見W004/101790);庫I含有文庫4VH11-13和6VH2，庫2含有文庫4VH14-16和6VH3,庫3含有文庫4VH17-19和6VH4,並且庫4含有文庫4K和6K。文庫等分試樣具有足夠大小，以允許每個文庫的10倍過度表示。選擇使用被動包被的和生物素化的人和小鼠(His)6-ASGPRHl抗原執行。使用被動包被的抗原的選擇如下執行。在免疫管(immunotubes)(Nunc)上在補充有5mMCa2+(TBS/Ca2+)的TBS中包被抗原後，將管用2%Marvel的TBS/Ca2+(MTBS/Ca2+)溶液封閉。在將管用TBS/Ca2+洗滌前，將文庫等分試樣與抗原包被的免疫管一起在MTBS/Ca2+中溫育。隨後用lmg/ml胰蛋白酶洗脫結合的噬菌體。當循環進展時，在包被過程中抗原的濃度從lmg/ml下降到40iig/ml,並且當循環進展時,滴度增加。使用生物素化的抗原的選擇如下執行。在鏈黴抗生物素蛋白Dynabeads(Invitrogen)或由中性抗生物素蛋白(neutravidin)(Perbio)包被的甲苯磺醯基活化的珠(Invitrogen)上捕獲前，將文庫等分試樣與抗原一起在MTBS/Ca2+中溫育一小時，用0.1%Tween-TBS/Ca2+和TBS/Ca2+洗漆,且隨後用lmg/ml胰蛋白酶洗脫。當循環進展時,抗原的濃度從IOOnM下降到InM，並且當循環進展時，滴度增加。在兩類選擇後，將洗脫的噬菌體用於感染對數期TGl細胞(Gibson，1984)，隨後將受感染的細胞鋪平板在四環素板(15yg/ml四環素)上。隨後在使用PEG-NaCl從培養上清液中沉澱噬菌體前，將由噬菌體感染的細胞在具有四環素的2xTY中在37°C生長過夜，且用於後續選擇循環。實施例3-篩選用於肝臟細胞特異性dAbs的選擇輸出在3輪選擇後，將來自每個文庫庫的dAb基因從pD0M4噬菌體載體亞克隆到pDOMIO可溶性表達載體內。PD0M4是fd噬菌體載體的衍生物，其中將基因III信號肽序列替換為酵母糖脂鋪定的表面蛋白質(GASM目號妝。它還含有在如導序列和基因III之間的c_Myc標籤。在每種情況下，在選擇後，使用QIAfiltermidiprep試劑盒(Qiagen)製備來自合適選擇循環的噬菌體DNA庫，使用限制性酶Sall和Notl消化DNA，並且將富集的dAb基因連接到pDOMIO中的相應位點內。pDOMIO載體是基於pUC119的載體。蛋白質的表達通過LacZ啟動子驅動。GASl前導序列(參見WO2005/093074)確保分離的可溶性dAbs分泌到大腸桿菌的周質和培養上清液內。將dAbs克隆到這種載體中的Sall/Notl，這在dAb的C末端附加FLAG附加表位。將連接的DNA用於轉化大腸桿菌T0P10細胞，其隨後在含有抗生素羧苄青黴素的瓊脂平板上生長過夜。就抗原結合個別評估所得到的集落。個別dAb克隆的抗原結合通過ELISA或在BIAcore上進行評估。ELISA測定採取下述形式。將人或小鼠(His)6-ASGPRHl以Iiig/ml包被到Maxisorp(NUNC)板上在4°C過夜。隨後將板用2%Tween-TBS/Ca2+封閉，隨後與用0.1%Tween-TBS/Ca2+I:I稀釋的dAb上清液一起溫育，隨後用1:5000抗flag(M2)-HRP(SIGMA)檢測。在封閉後的所有步驟在室溫執行。還同時分析dAb上清液與對照抗原(人c-kit-(His)6)的結合。在某些情況下，還使用中等規模發現(mesoscalediscovery)(MSD)測定,在來自使用人抗原的選擇的dAb上清液中篩選與H印G2和HeLa細胞的結合。使用MULTI-ARRAY96孔、SECTORImagerHighBindPlates(中等規模)以IxlO5細胞/孔的密度將細胞鋪平板，並且靜置以在37°C，5%CO2溫育過夜。第二天，通過在MSD測定緩衝液(具有ImMMgCl2UmMCaCl2、10%胎牛血清和1%BSA的IxPBS)中稀釋dAb和生物素化的抗FLAGM2單克隆抗體(Sigma)，將dAb抗FLAGM2複合物以2x終濃度製備。將dAb抗FLAG複合物以I:I摩爾比在室溫溫育一小時。隨後在加入25uI/孔dAb-抗FLAG複合物前，將細胞用200uIPBS洗滌3x，並且伴隨輕輕攪動在室溫溫育一小時，共一小時。隨後將細胞如上洗滌，並且隨後加入在測定緩衝液中稀釋至Iug/ml的25uI/孔鏈黴抗生物素蛋白-Sulfotag(中等規模)。隨後將細胞在室溫、在黑暗中伴隨輕輕攪動溫育一小時。隨後在重懸浮於150uI/孔不含表面活性劑的IxMSD閱讀緩衝液(中等規模)前，將細胞如上洗滌，並且在SECTORImager6000(中等規模)上在620nm發射處讀數。在這個測定中篩選克隆D0M26h-25、D0M26h_34、D0M26h_161、D0M26h_162、D0M26h-163、D0M26h_164、D0M26h_165、D0M26h_166和D0M26h_167和D0M26h_168—直至IjD0M26h-224。將通過ELISA或MSD測定顯示特異性結合(His)6ASGPRHl的那些dAbs通過BIAcore進行篩選。通過BIAcore的篩選使用由HBS-PBIAcore運行緩衝液1:2稀釋的如上表示的dAb上清液發生。隨後將每種dAb注射經過在CM5晶片上的空白流動池和由人或小鼠(His)6-ASGPRHl包被的流動池。將顯示特異性結合(His)6-ASGPRHl的任何dAb克隆劃線培養且測序。將所有獨特的dAb克隆在50ml培養基(OnEX加上羧苄青黴素)中在37°C表達過夜，並且在蛋白A(VHdAbs)或蛋白L(VkdAbs)上純化。將純化的dAbs經過由人或小鼠(His)6-ASGPRHl以20iig/ml包被的CM5BIAcore晶片上(圖3)。特異性結合(His)6-ASGPRHl的那些dAbs隨後在流式細胞術細胞結合測定中進行分析(圖4)。兩種細胞系用作人ASGPR陽性系(IfepG2和H印3b)，並且一種用作陰性對照人系(HeLa)。兩種細胞系用作小鼠ASGPR陽性系(H印alcIc7和NMuLi)，並且一種用作陰性對照小鼠系(L929)。流式細胞術細胞結合測定如下執行。將細胞收穫，在補充有5%FCS和0.5%BSA的PBS(FACS緩衝液)中洗滌。將細胞以IxIO5細胞/孔的濃度在合適數目的孔之間分開，並且在4°C溫育一小時。隨後將細胞與合適濃度的dAb—起溫育一小時，所述dAb先前已通過與5ug/ml抗FLAGM2(Sigma)一起在4°C溫育30分鐘進行交聯。隨後將細胞用FACS緩衝液洗滌，且在4°C與在FACS緩衝液中1:100稀釋的山羊抗小鼠FITC(Sigma)一起溫育一小時。隨後將細胞用FACS緩衝液洗滌，且在通過流式細胞術(FACSCantoII，使用FACSDiva軟體)分析前，重懸浮於200uIFACS緩衝液中。對於人肝臟細胞系H印G2特異性的克隆的CDR序列(使用Kabat的方法測定的)在下表2中描述表2:權利要求1.一種肝靶向組合物，其包含(a)結合肝臟肝細胞的蛋白質配體，和(b)用於遞送至肝的至少一種治療分子。2.根據權利要求I的組合物，其中所述蛋白質配體(a)和所述至少一種治療分子(b)作為單個融合物或綴合物一起存在。3.根據權利要求I或2的組合物，其中所述蛋白質配體(a)結合在肝細胞上的ASGPR受體。4.根據權利要求I-3的組合物，其中所述蛋白質配體(a)是抗體或抗體片段。5.根據權利要求4的組合物，其中所述抗體片段是單個免疫球蛋白可變結構域(dAb)。6.根據權利要求5的組合物，其中所述dAb選自人Vh序列和人Vk序列。7.根據任何前述權利要求的組合物，其中所述dAb可以結合選自下述的至少一種ASGPR受體人和/或小鼠ASGPR受體。8.根據任何前述權利要求的組合物，其中(b)所述用於遞送至肝的至少一種治療分子包含蛋白質或肽分子。9.根據權利要求8的組合物，其中(b)所述用於遞送至肝的至少一種治療分子包含幹擾素分子或其突變體、類似物或衍生物，其保留幹擾素活性。10.根據權利要求9的組合物，其中所述幹擾素分子選自幹擾素a2、幹擾素a5、幹擾素a6和複合幹擾素。11.根據任何前述權利要求的組合物，其中所述dAb以通過Biacore測量為IpM-約IOnM的親和力結合人和/或小鼠ASGPR受體。12.根據權利要求11的組合物,其中所述dAb的親和力為IpM-約InM。13.根據任何前述權利要求的組合物，其中所述蛋白質配體(a)包含結合人ASGPR的dAb胺基酸序列，並且所述dAb胺基酸序列選自與鑑定為下述的胺基酸序列中的任何一種100%、95%、90%、85%或80%等同的序列D0M26h-l(SeqIDNo:155);D0M26h_10(SeqIDNo:157);D0M26h_100(SeqIDNo:159)；D0M26h-101(SeqIDNo:161);D0M26h_102(SeqIDNo:163);D0M26h_103(SeqIDNo:165)；D0M26h-104(SeqIDNo:167);D0M26h_105(SeqIDNo:169);D0M26h_106(SeqIDNo:171);D0M26h_107(SeqIDNo:173);D0M26h_108(SeqIDNo:175)；D0M26h-109(SeqIDNo:177);D0M26h_ll(SeqIDNo:179);D0M26h_110(SeqIDNo:181)；D0M26h-lll(SeqIDNo:183);D0M26h_112(SeqIDNo:185);D0M26h_113(SeqIDNo:187)；D0M26h-114(SeqIDNo:189);D0M26h_115(SeqIDNo:191);D0M26h_116(SeqIDNo:193);D0M26h_117(SeqIDNo:195);D0M26h_118(SeqIDNo:197)；D0M26h-119(SeqIDNo:199);D0M26h_12;(SeqIDNo:201)D0M26h_120(SeqIDNo:203)；D0M26h-121(SeqIDNo:205);D0M26h_122(SeqIDNo:207);D0M26h_123(SeqIDNo:209)；D0M26h-124；(SeqIDNo:211);D0M26h_125(SeqIDNo:213);D0M26h_126(SeqIDNo:215);D0M26h_127(SeqIDNo:217);D0M26h_128(SeqIDNo:219)；D0M26h-129(SeqIDNo:221);D0M26h_130(SeqIDNo:223);D0M26h_131(SeqIDNo:225)；D0M26h-132(SeqIDNo:227);D0M26h_133(SeqIDNo:229);D0M26h_134(SeqIDNo:231)；D0M26h-135(SeqIDNo:233);D0M26h_136(SeqIDNo:235);D0M26h_137(SeqIDNo:237)；D0M26h-138(SeqIDNo:239);D0M26h_139(SeqIDNo:241);D0M26h_140(SeqIDNo:243);D0M26h_141(SeqIDNo:245);D0M26h_142(SeqIDNo:247)；D0M26h-143(SeqIDNo:249);D0M26h_144(SeqIDNo:251);D0M26h_145(SeqIDNo:253)；D0M26h-146(SeqIDNo:255);D0M26h_147(SeqIDNo:257);D0M26h_148(SeqIDNo:259)；D0M26h-149(SeqIDNo:261);D0M26h_15(SeqIDNo:263);D0M26h_150(SeqIDNo:265);D0M26h_151(SeqIDNo:267);D0M26h_152(SeqIDNo:269)；D0M26h-153(SeqIDNo:271);D0M26h_154(SeqIDNo:273);D0M26h_155(SeqIDNo:275)；D0M26h-156(SeqIDNo:277);D0M26h_157(SeqIDNo:279);D0M26h_158(SeqIDNo:281)；D0M26h-159(SeqIDNo:283);D0M26h-159_l(SeqIDNo:285);D0M26h-159_2(SeqIDNo:287);D0M26h-159_3(SeqIDNo:289);D0M26h-159_4(SeqIDNo:291)；D0M26h-159-5(SeqIDNo:293);D0M26h_160(SeqIDNo:295);D0M26h_168(SeqIDNo:297)；D0M26h-169(SeqIDNo:299);D0M26h_17(SeqIDNo:301);D0M26h_170(SeqIDNo:303)；D0M26h-171(SeqIDNo:305);D0M26h_172(SeqIDNo:307);D0M26h_173(SeqIDNo:309)；D0M26h-174(SeqIDNo:311);D0M26h_175(SeqIDNo:313);D0M26h_176(SeqIDNo:315);D0M26h_177(SeqIDNo:317);D0M26h_178(SeqIDNo:319)；D0M26h-179(SeqIDNo:321);D0M26h_180(SeqIDNo:323);D0M26h_181(SeqIDNo:325)；D0M26h-182(SeqIDNo:327);D0M26h_183(SeqIDNo:329);D0M26h_184(SeqIDNo:331)；D0M26h-185(SeqIDNo:333);D0M26h_186(SeqIDNo:335);D0M26h_187(SeqIDNo:337)；D0M26h-188(SeqIDNo:339);D0M26h_189(SeqIDNo:341);D0M26h_19(SeqIDNo:343);D0M26h_190(SeqIDNo:345);D0M26h_191(SeqIDNo:347)；D0M26h-192(SeqIDNo:349);D0M26h_193(SeqIDNo:351);D0M26h_194(SeqIDNo:353)；D0M26h-195(SeqIDNo:355);D0M26h_196(SeqIDNo:357);D0M26h_197(SeqIDNo:359)；D0M26h-198(SeqIDNo:361);D0M26h_199(SeqIDNo:363);D0M26h_2(SeqIDNo:365)；D0M26h-20(SeqIDNo:367)；D0M26h-200(SeqIDNo:369);D0M26h_201(SeqIDNo:371);D0M26h_202(SeqIDNo:373);D0M26h_203(SeqIDNo:375)；D0M26h-204(SeqIDNo:377);D0M26h_205(SeqIDNo:379);D0M26h_206(SeqIDNo:381)；D0M26h-207(SeqIDNo:383);D0M26h_208(SeqIDNo:385);D0M26h_209(SeqIDNo:387)；D0M26h-21(SeqIDNo:389);D0M26h_210(SeqIDNo:391);D0M26h_211(SeqIDNo:393);D0M26h_212(SeqIDNo:395);D0M26h_213(SeqIDNo:397)；D0M26h-214(SeqIDNo:399);D0M26h_215(SeqIDNo:401);D0M26h_216(SeqIDNo:403)；D0M26h-217(SeqIDNo:405);D0M26h_218(SeqIDNo:407);D0M26h_219(SeqIDNo:409)；D0M26h-22(SeqIDNo:411);D0M26h_220(SeqIDNo:413);D0M26h_221(SeqIDNo:415);D0M26h_222(SeqIDNo:417);D0M26h_223(SeqIDNo:419)；D0M26h-23(SeqIDNo:421);D0M26h_24(SeqIDNo:423);D0M26h-29_l(SeqIDNo:425)；D0M26h-4(SeqIDNo:427);D0M26h_41(SeqIDNo:429);D0M26h_42(SeqIDNo:431)；D0M26h-43(SeqIDNo:433);D0M26h_44(SeqIDNo:435);D0M26h_45(SeqIDNo:437)；D0M26h-46(SeqIDNo:439);D0M26h_47(SeqIDNo:441);D0M26h_48(SeqIDNo:443)；D0M26h-49(SeqIDNo:445);D0M26h_50(SeqIDNo:447);D0M26h_51(SeqIDNo:449)；D0M26h-52(SeqIDNo:451);D0M26h_53(SeqIDNo:453);D0M26h_54(SeqIDNo:455)；D0M26h-55(SeqIDNo:457);D0M26h_56(SeqIDNo:459);D0M26h_57(SeqIDNo:461)；D0M26h-58(SeqIDNo:463);D0M26h_59(SeqIDNo:465);D0M26h_60(SeqIDNo:467)；D0M26h-61(SeqIDNo:469);D0M26h_62(SeqIDNo:471);D0M26h_63(SeqIDNo:473)；D0M26h-64(SeqIDNo:475);D0M26h_65(SeqIDNo:477);D0M26h_66(SeqIDNo:479)；D0M26h-67(SeqIDNo:481);D0M26h_68(SeqIDNo:483);D0M26h_69(SeqIDNo:485)；D0M26h-70(SeqIDNo:487);D0M26h_71(SeqIDNo:489);D0M26h_72(SeqIDNo:491)；D0M26h-73(SeqIDNo:493);D0M26h_74(SeqIDNo:495);D0M26h_75(SeqIDNo:497)；D0M26h-76(SeqIDNo:499);D0M26h_77(SeqIDNo:501)；D0M26h-78(SeqIDNo:503)；D0M26h-79(SeqIDNo:505);D0M26h_80(SeqIDNo:507);D0M26h_81(SeqIDNo:509)；D0M26h-82(SeqIDNo:511);DOM26h_83(SeqIDNo:513);DOM26h_84(SeqIDNo:515)；DOM26h-85(SeqIDNo:517);DOM26h_86(SeqIDNo:519);DOM26h_87(SeqIDNo:521)；DOM26h-88(SeqIDNo:523);DOM26h_89(SeqIDNo:525);D0M26h_90(SeqIDNo:527)；DOM26h-91(SeqIDNo:529);DOM26h_92(SeqIDNo:531);DOM26h_93(SeqIDNo:533)；DOM26h-94(SeqIDNo:535);DOM26h_95(SeqIDNo:537);DOM26h_96(SeqIDNo:539)；DOM26h-97(SeqIDNo:541);DOM26h_98(SeqIDNo:543);DOM26h_99(SeqIDNo:545);DOM26h-99_l(SeqIDNo:547);DOM26h-99_2(SeqIDNo:549)；DOM26h-161(SeqIDNo:551);DOM26h_162(SeqIDNo:553);DOM26h_163(SeqIDNo:555)；DOM26h-164(SeqIDNo:557);DOM26h_165(SeqIDNo:559);DOM26h_166(SeqIDNo:561)；DOM26h-167(SeqIDNo:563);DOM26h_224(SeqIDNo:565);DOM26h_25(SeqIDNo:567);DOM26h_26(SeqIDNo:569);DOM26h_27(SeqIDNo:571);DOM26h_28(SeqIDNo:573);DOM26h_29(SeqIDNo:575);D0M26h_30(SeqIDNo:577);DOM26h_31(SeqIDNo:579);DOM26h_32(SeqIDNo:581);DOM26h_33(SeqIDNo:583);DOM26h_34(SeqIDNo:585);DOM26h_35(SeqIDNo:587);DOM26h_36(SeqIDNo:589);DOM26h_37(SeqIDNo:591);DOM26h_38(SeqIDNo:593);DOM26h_39(SeqIDNo:595);D0M26h_40(SeqIDNo:597);DOM26h_6(SeqIDNo:599);DOM26h_8(SeqIDNo:601);DOM26h_9(SeqIDNo:603)。14.根據權利要求1-12中任一項的組合物，其中所述蛋白質配體(a)包含結合人ASGPR的dAb胺基酸序列，並且所述dAb胺基酸序列選自與由鑑定為下述的核苷酸序列編碼的胺基酸100%、95%、90%、85%或80%等同的序列DOM26h-161-84(SeqIDNo:867)；DOM26h-161-86(SeqIDNo:869);DOM26H-161_87(SeqIDNo:871);DOM26h-196_61(SeqIDNo:873);D0M26h-210_2(SeqIDNo:875);D0M26h-220_l(SeqIDNo:877)；或D0M26h-220_43(SeqIDNo:879)。15.根據任何前述權利要求的組合物，其中所述蛋白質配體(a)包含與權利要求13或14的胺基酸序列中的任何一種競爭結合人ASGPR的dAb胺基酸序列。16.根據任何前述權利要求的組合物，其中所述蛋白質配體(a)包含dAb胺基酸序列，其結合小鼠ASGPR，並且選自與由鑑定為下述的核苷酸序列編碼的胺基酸100%、95%、90%、85%或80%等同的序列D0M26m-10(SeqIDNo:605);D0M26m_13(SeqIDNo:607);D0M26m_16(SeqIDNo:609)；DOM26m-165(SeqIDNo:611);DOM26m_17(SeqIDNo:613);DOM26m_27(SeqIDNo:615)；DOM26m-28(SeqIDNo:617);DOM26m_29(SeqIDNo:619);D0M26m_30(SeqIDNo:621)；D0M26m-31(SeqIDNo:623);D0M26m_32(SeqIDNo:625);D0M26m_33(SeqIDNo:627);D0M26m-33_l(SeqIDNo:629);D0M26m-33_10(SeqIDNo:631)；D0M26m-33-ll(SeqIDNo:633);D0M26m-33_12(SeqIDNo:635);D0M26m-33_2(SeqIDNo:637)；D0M26m-33-3(SeqIDNo:639);D0M26m-33_4(SeqIDNo:641);D0M26m-33_5(SeqIDNo:643);D0M26m-33_6(SeqIDNo:645);D0M26m-33_7(SeqIDNo:647)；D0M26m-33-8(SeqIDNo:649);D0M26m-33_9(SeqIDNo:651);D0M26m_34(SeqIDNo:653)；D0M26m-35(SeqIDNo:655);D0M26m_36(SeqIDNo:657);D0M26m_37(SeqIDNo:659)；D0M26m-38(SeqIDNo:661);D0M26m_39(SeqIDNo:663);D0M26m_4(SeqIDNo:665)；D0M26m-40(SeqIDNo:667);D0M26m_41(SeqIDNo:669);D0M26m_42(SeqIDNo:671)；D0M26m-43(SeqIDNo:673);D0M26m_44(SeqIDNo:675);D0M26m_45(SeqIDNo:677)；D0M26m-46(SeqIDNo:679);D0M26m_47(SeqIDNo:681);D0M26m_48(SeqIDNo:683)；D0M26m-52(SeqIDNo:685);D0M26m-52_l(SeqIDNo:687);D0M26m-52_2(SeqIDNo:689);D0M26m-52_3(SeqIDNo:691);D0M26m-52_4(SeqIDNo:693)；D0M26m-52-5(SeqIDNo:695);D0M26m-52_6(SeqIDNo:697);D0M26m-52_7(SeqIDNo:699)；D0M26m-6(SeqIDNo:701);D0M26m_60(SeqIDNo:703);DOM26m-61_l(SeqIDNo:705)；D0M26m-61-2(SeqIDNo:707);D0M26m-61_3(SeqIDNo:709);D0M26m-61_4(SeqIDNo:711);DOM26m-61_5(SeqIDNo:713);DOM26m-61_6(SeqIDNo:715)；DOM26m-7(SeqIDNo:717);DOM26m_73(SeqIDNo:719);DOM26m_74(SeqIDNo:721)；DOM26m-75(SeqIDNo:723);DOM26m_76(SeqIDNo:725);DOM26m_77(SeqIDNo:727)；DOM26m-78(SeqIDNo:729);DOM26m_79(SeqIDNo:731);DOM26m_8(SeqIDNo:733)；D0M26m-80(SeqIDNo:735);DOM26m_81(SeqIDNo:737);DOM26m_82(SeqIDNo:739)；DOM26m-83(SeqIDNo:741);DOM26m_9(SeqIDNo:743);DOM26m_l(SeqIDNo:745)；D0M26m-100(SeqIDNo:747);D0M26m_101(SeqIDNo:749);D0M26m_102(SeqIDNo:751)；D0M26m-103(SeqIDNo:753);D0M26m_106(SeqIDNo:755);D0M26m_108(SeqIDNo:757);D0M26m_109(SeqIDNo:759);D0M26m-109_l(SeqIDNo:761)；D0M26m-109-2(SeqIDNo:763);DOM26m_12(SeqIDNo:765);DOM26m_18(SeqIDNo:767)；DOM26m-19(SeqIDNo:769)；DOM26m_2(SeqIDNo:771);D0M26m_20(SeqIDNo:773)；D0M26m-20-l(SeqIDNo:775);D0M26m-20_2(SeqIDNo:777);D0M26m-20_3(SeqIDNo:779);D0M26m-20_4(SeqIDNo:781);D0M26m-20_5(SeqIDNo:783)；D0M26m-20-6(SeqIDNo:785);DOM26m_22(SeqIDNo:787);DOM26m_23(SeqIDNo:789)；DOM26m-24(SeqIDNo:791);DOM26m_25(SeqIDNo:793);DOM26m_26(SeqIDNo:795)；DOM26m-3(SeqIDNo:797);D0M26m_50(SeqIDNo:799);D0M26m-50_l(SeqIDNo:801)；D0M26m-50-2(SeqIDNo:803);D0M26m-50_3(SeqIDNo:805);D0M26m-50_4(SeqIDNo:807);D0M26m-50_5(SeqIDNo:809);D0M26m-50_6(SeqIDNo:811)；DOM26m-51(SeqIDNo:813);DOM26m_53(SeqIDNo:815);DOM26m_54(SeqIDNo:817)；DOM26m-55(SeqIDNo:819);DOM26m_56(SeqIDNo:821);DOM26m_57(SeqIDNo:823)；DOM26m-58(SeqIDNo:825);DOM26m_59(SeqIDNo:827);DOM26m_61(SeqIDNo:829)；DOM26m-63(SeqIDNo:831);DOM26m_64(SeqIDNo:833);DOM26m_66(SeqIDNo:835)；DOM26m-69(SeqIDNo:837);DOM26m_85(SeqIDNo:839);DOM26m_86(SeqIDNo:841)；D0M26m-87(SeqIDNo:843);D0M26m_89(SeqIDNo:845);D0M26m_90(SeqIDNo:847)；D0M26m-91(SeqIDNo:849);D0M26m_92(SeqIDNo:851);D0M26m_93(SeqIDNo:853)；D0M26m-94(SeqIDNo:855);D0M26m_95(SeqIDNo:857);D0M26m_96(SeqIDNo:859)；D0M26m-97(SeqIDNo:861);D0M26m_98(SeqIDNo:863);D0M26m_99(SeqIDNo:865)。17.根據權利要求1-12中任一項的組合物，其中所述蛋白質配體(a)包含與權利要求16的胺基酸序列中的任何一種競爭結合人ASGPR的dAb胺基酸序列。18.根據前述權利要求中任一項的組合物，其中所述蛋白質配體(a)包含dAb胺基酸序列，其包含選自下述的至少一個⑶R:⑶R1XDR2和⑶R3，其中所述⑶R1XDR2或⑶R3與權利要求13、14或16的序列中的任何一種中的⑶R1、⑶R2或⑶R3序列至少80%等同。19.根據前述權利要求中任一項的組合物，其中存在胺基酸或化學接頭。20.根據權利要求19的組合物，其中所述接頭選自=TVAAPS接頭、TVAAPR接頭、螺旋接頭、gly-ser接頭和PEG接頭。21.根據前述權利要求中任一項的組合物，其中所述至少一種治療分子(a)存在於所述dAb的N末端。22.藥物組合物，其包含與藥學或生理學可接受的載體、賦形劑或稀釋劑組合的根據前述權利要求中的任一項的肝靶向組合物。23.根據權利要求22的藥物組合物，其包含進一步的治療劑或活性劑。24.一種組合物，其包含(a)根據權利要求1-22中任一項的肝靶向組合物，和(b)進一步的治療劑或活性劑，用於分開、序貫或同時施用於受試者。25.—種dAb胺基酸序列，其結合人ASGPR，並且其中所述dAb胺基酸序列選自與鑑定為下述的胺基酸序列中的任何一種100%、95%、90%、85%或80%等同的序列DOM26h-l；D0M26h-10,D0M26h_100；D0M26h-101；D0M26h-102；D0M26h-103；D0M26h-104；D0M26h-105；D0M26h-106；D0M26h-107；D0M26h-108；D0M26h-109;DOM26h_ll；D0M26h-110；DOM26h-lll;DOM26h_112;DOM26h_113;DOM26h_114;DOM26h_115；DOM26h-116；DOM26h-117;DOM26h_118;DOM26h_119;DOM26h_12；D0M26h-120；DOM26h-121；DOM26h-122;DOM26h_123;DOM26h_124;DOM26h_125;DOM26h_126；DOM26h-127;DOM26h_128;DOM26h_129;D0M26h_130;DOM26h_131;DOM26h_132；DOM26h-133;DOM26h_134;DOM26h_135;DOM26h_136;DOM26h_137;DOM26h_138；DOM26h-139;D0M26h_140;DOM26h_141;DOM26h_142;DOM26h_143;DOM26h_144；DOM26h-145;DOM26h_146;DOM26h_147;DOM26h_148;DOM26h_149;DOM26h_15；D0M26h-150;DOM26h_151;DOM26h_152;DOM26h_153;DOM26h_154;DOM26h_155；DOM26h-156;DOM26h_157;DOM26h_158;DOM26h_159;DOM26h-159_l;DOM26h-159_2；DOM26h-159-3;DOM26h-159_4;DOM26h-159_5;D0M26h_160;DOM26h_168;DOM26h_169；DOM26h-17；D0M26h-170;DOM26h_171;DOM26h_172;DOM26h_173;DOM26h_174；DOM26h-175;DOM26h_176;DOM26h_177;DOM26h_178;DOM26h_179；D0M26h-180；DOM26h-181；DOM26h-182;DOM26h_183;DOM26h_184;DOM26h_185;DOM26h_186；DOM26h-187;DOM26h_188;DOM26h_189;DOM26h_19;D0M26h_190;DOM26h_191；DOM26h-192;DOM26h_193;DOM26h_194;DOM26h_195;DOM26h_196;DOM26h_197；D0M26h-198;D0M26h_199;D0M26h_2；D0M26h-20；D0M26h-200；D0M26h-201；D0M26h-202；D0M26h-203；D0M26h-204；D0M26h-205；D0M26h-206；D0M26h-207;D0M26h_208；D0M26h-209;D0M26h_21；D0M26h-210;D0M26h_211;D0M26h_212;D0M26h_213；D0M26h-214;D0M26h_215;D0M26h_216;D0M26h_217;D0M26h_218;D0M26h_219；D0M26h-22；D0M26h-220;D0M26h_221;D0M26h_222;D0M26h_223;D0M26h_23;D0M26h_24；D0M26h-29-l;D0M26h_4;D0M26h_41;D0M26h_42;D0M26h_43;D0M26h_44;D0M26h_45；D0M26h-46;D0M26h_47;D0M26h_48;D0M26h_49；D0M26h-50;D0M26h_51;D0M26h_52；D0M26h-53；D0M26h-54;D0M26h_55;D0M26h_56;D0M26h_57;D0M26h_58;D0M26h_59；D0M26h-60;D0M26h_61;D0M26h_62;D0M26h_63;D0M26h_64;D0M26h_65;D0M26h_66；D0M26h-67;D0M26h_68;D0M26h_69；D0M26h-70;D0M26h_71;D0M26h_72;D0M26h_73；D0M26h-74;D0M26h_75;D0M26h_76;D0M26h_77;D0M26h_78;D0M26h_79;D0M26h_80；D0M26h-81；D0M26h-82;D0M26h_83;D0M26h_84;D0M26h_85;D0M26h_86;D0M26h_87；D0M26h-88;D0M26h_89；D0M26h-90;D0M26h_91;D0M26h_92;D0M26h_93;D0M26h_94；D0M26h-95;D0M26h_96;D0M26h_97;D0M26h_98;D0M26h_99;D0M26h-99_l;D0M26h-99_2；D0M26h-161；D0M26h-162;D0M26h_163;D0M26h_164;D0M26h_165;D0M26h_166；D0M26h-167;D0M26h_224;D0M26h_25;D0M26h_26;D0M26h_27;D0M26h_28;D0M26h_29；D0M26h-30;D0M26h_31;D0M26h_32;D0M26h_33;D0M26h_34;D0M26h_35;D0M26h_36；D0M26h-37;D0M26h_38;D0M26h_39；D0M26h-40;D0M26h_6;D0M26h_8;D0M26h_9。26.—種dAb胺基酸序列，其結合人ASGPR，並且其中所述dAb胺基酸序列選自與鑑定為下述的胺基酸序列100%、95%、90%、85%或80%等同的序列DOM26h-161_84；DOM26h-161-86;DOM26h_16卜87;DOM26h-196_61；D0M26h-210-2;D0M26h-220_l；或D0M26h-220-43。27.—種dAb胺基酸序列，其與權利要求25或26的胺基酸序列中的任何一種競爭結合人ASGPR。28.—種dAb胺基酸序列，其結合小鼠ASGPR，並且其中所述dAb胺基酸序列選自與鑑定為下述的胺基酸序列中的任何一種100%、95%、90%、85%或80%等同的序列D0M26m-10;DOM26m_13;DOM26m_16;DOM26m_165;DOM26m_17;DOM26m_27;DOM26m_28；DOM26m-29；D0M26m-30;DOM26m_31;DOM26m_32;DOM26m_33；DOM26m-33-l；D0M26m-33-10；DOM26m-33-ll；DOM26m-33-12；DOM26m-33-2；DOM26m-33-3；DOM26m-33-4；DOM26m-33-5；DOM26m-33-6；DOM26m-33-7；DOM26m-33-8；DOM26m-33-9;DOM26m_34;DOM26m_35；DOM26m-36;DOM26m_37;DOM26m_38;DOM26m_39;DOM26m_4；D0M26m-40;DOM26m_41；DOM26m-42;DOM26m_43;DOM26m_44;DOM26m_45;DOM26m_46;DOM26m_47;DOM26m_48；DOM26m-52；DOM26m-52-l；DOM26m-52-2；DOM26m-52-3；DOM26m-52-4；DOM26m-52-5；DOM26m-52-6；DOM26m-52-7;DOM26m_6；D0M26m-60；DOM26m-61-l；DOM26m-61-2；DOM26m-61-3；DOM26m-61-4；DOM26m-61-5；DOM26m-61-6;DOM26m_7;DOM26m_73；DOM26m-74;DOM26m_75;DOM26m_76;DOM26m_77;DOM26m_78;DOM26m_79;DOM26m_8；D0M26m-80;DOM26m_81;DOM26m_82;DOM26m_83;DOM26m_9;DOM26m_l；D0M26m-100；D0M26m-101；D0M26m-102；D0M26m-103；D0M26m-106；D0M26m-108；D0M26m-109；D0M26m-109-l；D0M26m-109-2;DOM26m_12;DOM26m_18;DOM26m_19；D0M26m-20；D0M26m-20-l；D0M26m-20-2；D0M26m-20-3;D0M26m-20_4；D0M26m-20-5；D0M26m-20-6；D0M26m-22;D0M26m_23;D0M26m_24;D0M26m_25;D0M26m_26;D0M26m_3；D0M26m-50；D0M26m-50-l；D0M26m-50-2；D0M26m-50-3；D0M26m-50-4；D0M26m-50-5；D0M26m-50-6；D0M26m-51;D0M26m_53;D0M26m_54;D0M26m_55;D0M26m_56;D0M26m_57;D0M26m_58；D0M26m-59;D0M26m_61;D0M26m_63;D0M26m_64;D0M26m_66;D0M26m_69;D0M26m_85；D0M26m-86;D0M26m_87;D0M26m_89；D0M26m-90;D0M26m_91;D0M26m_92;D0M26m_93；D0M26m-94;D0M26m_95;D0M26m_96;D0M26m_97;D0M26m_98;D0M26m_99。29.—種dAb胺基酸序列，其與權利要求28的胺基酸序列中的任何一種競爭結合小鼠ASGPR。30.根據權利要求25-27中任一項且進一步依照權利要求28或29的dAb胺基酸序列，其與小鼠和人ASGPR交叉反應。31.根據權利要求25-30中任一項的dAb胺基酸序列，其中所述dAb胺基酸序列包含選自下述的至少一個⑶R:⑶R1、⑶R2和⑶R3，其中所述⑶R1、⑶R2或⑶R3與權利要求25-30的序列中的任何一種中的CDR1、CDR2或CDR3序列100%、95%、90%、85%或80%等同。32.用於在醫學中使用的根據前述權利要求中任一項的組合物。33.一種治療或預防至少一種肝疾病或病症或狀況的方法，其通過給受試者施用治療或預防有效量的根據權利要求1-31中任一項的組合物實施。34.權利要求33的方法，其中所述至少一種肝疾病或病症或狀況選自炎性肝疾病、病毒性肝疾病、肝硬化和肝癌。35.根據權利要求34的方法，其中所述至少一種肝疾病選自B型肝炎和C型肝炎，並且所述炎性肝疾病是纖維化。36.一種治療或預防至少一種肝疾病或病症或狀況的方法，其通過給受試者施用治療或預防有效量的根據權利要求1-31中任一項的組合物實施。37.根據權利要求36的方法，其中所述至少一種肝疾病或病症或狀況選自病毒性肝疾病、肝硬化和肝癌。38.根據權利要求37的方法，其中所述至少一種病毒性肝疾病選自B型肝炎和C型肝炎。39.根據權利要求33-38中任一項的方法，其中所述組合物通過皮下、靜脈內或肌內注射遞送至受試者。40.如權利要求33-39中任一項中要求的方法，其中經由腸胃外、口服、直腸、經黏膜、眼、肺或GI道遞送，將所述組合物遞送至所述受試者。41.一種可注射、口服、可吸入或可噴霧製劑，其包含根據權利要求1-31中任一項的組合物。42.一種持續釋放製劑，其包含根據權利要求1-31中任一項的組合物。43.一種冷凍乾燥製劑，其包含根據權利要求1-31中任一項的組合物。44.一種遞送裝置，其包含根據權利要求1-31中任一項的組合物。45.一種編碼結合肝細胞上的ASGPR受體的dAb的分離或重組核酸，其中所述核苷酸序列選自與圖13,14、17、18或32中所示的DOM26核酸序列中的任何一種100%、95%、90%、85%或80%等同的序列。46.—種載體,其包含權利要求45的核酸。47.一種宿主細胞，其包含權利要求45的核酸或權利要求46的載體。48.一種產生融合多肽的方法，所述融合多肽包含(a)結合肝細胞上的ASGPR受體的dAb,以及(b)用於遞送至肝的至少一種治療分子，其中所述方法包括在適合於表達所述核酸或載體的條件下維持權利要求47的宿主細胞，由此產生融合多肽。全文摘要本發明涉及可以靶向肝的分子。這些肝靶向分子(例如融合物和綴合物)包含蛋白質、抗體或抗體片段例如免疫球蛋白(抗體)單個可變結構域(dAbs)，以及希望遞送至肝的一種或多種另外的分子，例如幹擾素。本發明進一步涉及包含此類肝靶向分子的用途、製劑、組合物和裝置。本發明還涉及結合肝細胞的免疫球蛋白(抗體)單個可變結構域。文檔編號C12N15/13GK102791293SQ201180011911公開日2012年11月21日申請日期2011年1月13日優先權日2010年1月14日發明者A.塞普,A.沃克,G.鄧萊維,S.霍爾梅斯,洪志申請人:葛蘭素集團有限公司