一種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法
2023-05-30 20:56:16 1
專利名稱：一種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法
技術領域：
本發明屬於中藥化學領域，涉及ー種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法。
背景技術：
阿枯明(Akuammine)，又名阿枯胺，呈細針晶狀，是ー種吲哚類生物鹼。分子式C22H26N2O4,分子量為382. 46。在植物中廣泛存在，主要存在於夾竹桃科植物中，如/7icrWiaaklaineana 的種子、Picralima(Stapf) Th&H. Durand 種子、鴨腳樹 Tonduziapittieri莖皮、漫長春花Vinca major C. V. Variegata葉中。藥理研究表明，阿枯明具有廣泛的生理活性。阿枯明具有局麻作用，強度可與古柯鹼相當，並且具有抗瘧作用，對惡性瘧原蟲D6 (氯喹敏感株)和W2 (耐氯喹株)的ED5tl分別為530ng/ml和1110ng/ml，另外，阿枯明還具有擬5-羥色胺活性。
目前國內外尚未見製備阿枯明的方法報導。
發明內容
本發明的目的是提供一種高效快速、從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法。為達到上述目的，本發明採用以下技術方案
一種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法，其特徵在於包括以下步驟
(1)將赤非夾竹桃木種子破碎後，用4-6倍量的酸醇回流提取2-3次，合併提取液，濃縮得到濃縮液；
(2)將濃縮液加於陽離子樹脂柱上，先以水洗脫除雜，再用40-60%こ醇溶液洗脫，檢查無生物鹼為止，收集洗脫液，濃縮得總生物鹼浸膏；
(3)將浸膏與氧化鋁粉混合均勻上氧化鋁柱，用不同配比的混合有機溶劑分段洗脫並分段收集，收集阿枯明高含量流分，合併後減壓濃縮，得阿枯明半成品；
(4)將阿枯明粗品採用製備液相色譜分離純化，得到阿枯明純品。步驟(I)中所述酸醇溶液為20%_80%的こ醇或甲醇溶液，鹽酸調節醇溶液pH至
2.2-4. 7。步驟(2)中所述陽離子樹脂可以是大孔型或凝膠型強酸性陽離子交換樹脂，樹脂柱徑高比為1:6-10。步驟(2)中陽離子樹脂柱的上柱液濃度為每ml相當於生藥O. 5_4g，上樣速度為O. 5-3BV/h，洗脫速度為 3-5BV/h。步驟(3)中所述氧化鋁柱填料為中性或鹼性氧化鋁，粒度為100-400目，混合有機溶劑為氯仿-こ酸こ酷-甲醇，體積比為6:3: f 1:3:6，或石油醚-こ酸こ酷，體積比為15:1-1:1,或石油醚-丙酮，體積比為50:1-1:1，分段收集半成品。步驟(4)中所述製備液相填料為C18，流動相為甲醇-水或こ腈-水，所述流動相中甲醇的體積百分比為60-90%，所述流動相中こ腈的體積百分比為40-65%。本發明的有益效果是本發明步驟少、得率高、操作簡便，易於エ業化生；離子交換樹脂結合高效製備液相色譜用於阿枯明的分離純化也屬首次，本發明為阿枯明的進ー步開發利用提供了藥理原料、理論和實踐支持。下面將結合具體實施方式
進ー步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。
具體實施例方式 實施例I:
取Ikg赤非夾竹桃木種子破碎，用5LpH3. 3的50%こ醇溶液加熱回流提取2次，過濾，合併提取液，濃縮至1500ml，離心，上清液以2BV/h加入陽離子交換樹脂柱(柱徑高比為1:7),先用去離子水洗至流出液無顏色，再用50%こ醇溶液洗脫，檢查無生物鹼為止，收集洗脫液，濃縮得總生物鹼浸膏。將總生物鹼浸膏與5倍量的鹼性氧化鋁混合均勻，55°C以下烘乾，加於填充好的中壓鹼性氧化鋁柱，用氯仿-こ酸こ酷-甲醇按體積比6:3:11:3:6洗 脫，分段收集，合併阿枯明流分，濃縮乾燥後甲醇溶解，經高效製備液相色譜分離，柱填料為C18，流動相為こ腈-水(47:53)，檢測波長為242nm，紫外檢測器在線監測，針對性收集阿枯明的製備流分溶液，減壓回收試劑得4. 9g阿枯明晶體，含量96. 5%。實施例2
取Ikg赤非夾竹桃木種子破碎，用6LpH4. 2的70%こ醇溶液加熱回流提取3次，過濾，合併提取液，濃縮至1000ml，離心，上清液以2. 5BV/h加入陽離子交換樹脂柱(柱徑高比為1:6)，先用去離子水洗至流出液無顏色，再用55%こ醇溶液洗脫，檢查無生物鹼為止，收集洗脫液，濃縮得總生物鹼浸膏。將總生物鹼浸膏與10倍量的鹼性氧化鋁混合均勻，55°C以下烘乾，加於填充好的中壓鹼性氧化鋁柱，用石油醚-こ酸こ酯按體積比15:1-1:1洗脫，分段收集，合併阿枯明流分，濃縮乾燥後甲醇溶解，經高效製備液相色譜分離，柱填料為C18，流動相為甲醇-水(66:34)，檢測波長為242nm，紫外檢測器在線監測，針對性收集阿枯明的製備流分溶液，減壓回收試劑得4. 2g阿枯明晶體，含量98. 2%。實施例3:
取Ikg赤非夾竹桃木種子破碎，用4LpH2. 2的60%甲醇溶液加熱回流提取3次，過濾，合併提取液，濃縮至2000ml，離心，上清液以O. 8BV/h加入陽離子交換樹脂柱(柱徑高比為1:10)，先用去離子水洗至流出液無顏色，再用60%こ醇溶液洗脫，檢查無生物鹼為止，收集洗脫液，濃縮得總生物鹼浸膏。將總生物鹼浸膏與8倍量的中性氧化鋁混合均勻，55°C以下烘乾，加於填充好的中壓中性氧化鋁柱，用石油醚-丙酮按體積比50:1-1:1洗脫，分段收集，合併阿枯明流分，濃縮乾燥後甲醇溶解，經高效製備液相色譜分離，柱填料為C18，流動相為こ腈-水(52:48 )，檢測波長為242nm，紫外檢測器在線監測，針對性收集阿枯明的製備流分溶液，減壓回收試劑得4. 5g阿枯明晶體，含量96. 8%。實施例4:
取Ikg赤非夾竹桃木種子破碎，用6LpH4. 5的80%甲醇溶液加熱回流提取2次，過濾，合併提取液，濃縮至800ml，離心，上清液以lBV/h加入陽離子交換樹脂柱(柱徑高比為1:8)，先用去離子水洗至流出液無顏色，再用45%こ醇溶液洗脫，檢查無生物鹼為止，收集洗脫液，濃縮得總生物鹼浸膏。將總生物鹼浸膏與6倍量的中性氧化鋁混合均勻，55°C以下烘乾，加於填充好的中壓中性氧化鋁柱，用氯仿-こ酸こ酷-甲醇按體積比6:3:11:3:6洗脫，分段收集，合併阿枯明流分，濃縮乾燥後甲醇溶解，經高效製備液相色譜分離，柱填料為C18，流動相為甲醇-水(73:27)，檢測波長為242nm，紫外檢測器在線監測，針對性收集阿枯 明的製備流分溶液，減壓回收試劑得4. 8g阿枯明晶體，含量97. 3%。
權利要求
1.一種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法，其特徵在於包括以下步驟 (1)將赤非夾竹桃木種子破碎後，用4-6倍量的酸醇回流提取2-3次，合併提取液，濃縮得到濃縮液； (2)將濃縮液加於陽離子樹脂柱上，先以水洗脫除雜，再用40-60%乙醇溶液洗脫，檢查無生物鹼為止，收集洗脫液，濃縮得總生物鹼浸膏； (3)將浸膏與氧化鋁粉混合均勻上氧化鋁柱，用不同配比的混合有機溶劑分段洗脫並分段收集，收集阿枯明高含量流分，合併後減壓濃縮，得阿枯明半成品； (4)將阿枯明粗品採用製備液相色譜分離純化，得到阿枯明純品。
2.如權利要求I所述的一種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法，其特徵在於步驟Cl)中所述酸醇溶液為20%-80%的乙醇或甲醇溶液，鹽酸調節醇溶液pH至2. 2-4. 7。
3.如權利要求I所述的一種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法，其特徵在於步驟(2)中所述陽離子樹脂可以是大孔型或凝膠型強酸性陽離子交換樹脂，樹脂柱徑高比為1:6-10。
4.如權利要求I所述的一種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法，其特徵在於步驟(2)中陽離子樹脂柱的上柱液濃度為每ml相當於生藥O. 5-4g，上樣速度為O. 5_3BV/h，洗脫速度為3-5BV/h。
5.如權利要求I所述的一種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法，其特徵在於步驟(3)中所述氧化鋁柱填料為中性或鹼性氧化鋁，粒度為100-400目，混合有機溶劑為氯仿-乙酸乙酯-甲醇，體積比為6:3: f 1:3: 6，或石油醚-乙酸乙酯，體積比為15:1-1: 1，或石油醚-丙酮，體積比為50:1-1: 1，分段收集半成品。
6.如權利要求I所述的一種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法，其特徵在於步驟(4)中所述製備液相填料為C18，流動相為甲醇-水或乙腈-水，所述流動相中甲醇的體積百分比為60-90%，所述流動相中乙腈的體積百分比為40-65%。
全文摘要
本發明公開了一種從赤非夾竹桃木中提取阿枯明的方法，其特徵在於工藝步驟包括將赤非夾竹桃木種子破碎，用酸醇回流提取，提取液濃縮後加於陽離子樹脂柱上，先以水洗脫除雜，再用0.5%-15%酸液洗脫，檢查無生物鹼為止，收集洗脫液，加鹼中和，經脫鹽處理，濃縮得總生物鹼浸膏，將浸膏與氧化鋁粉混合均勻上氧化鋁柱，用不同配比的混合有機溶劑分段洗脫並分段收集，收集阿枯明高含量流分，合併後減壓濃縮，最後採用製備液相色譜分離純化，得到高含量阿枯明產品。本發明提取分離阿枯明快速、高效，產品含量高，並可有效降低成本和減少環境汙染。
文檔編號C07D491/22GK102827178SQ20121035059
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月20日 優先權日2012年9月20日
發明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農業發展有限公司